2. Centrifugación.

La centrifugación es uno de los métodos de separación de mezclas que puede usarse cuando la sedimentación es muy lenta; para acelerar esta operación la mezcla se coloca en un recipiente que se hace girar a gran velocidad; por acción de la fuerza centrifuga (fuerza-g) los componentes más pesados se sedimentan más rápidamente y los livianos quedan como sobrenadante. Luego la operación que se sigue es la decantación. La centrifuga es el elemento central de la centrifugación. 2.1 Antecedentes del equipo. La invención de la máquina centrífuga que purga masa cocidas azucareras ha sido atribuida a Schotter en 1848 y a Dubrunfaut, pero las autoridades en esta materia están de acuerdo en que fue David Weston quien obtuvo la patente de la centrífuga suspendida en 1852 y la introdujo al trabajo práctico azucarero en Hawai, en 1867. Hasta bien entrado el siglo XX, al tipo de máquina centrífuga que está en uso general en la actualidad se le llamaba centrífuga Weston. Fue para trabajo azucarero que se desarrollaron equipos de filtración de varios tipos, entre ellos el filtro Taylor de bolsas, de hace más de 100 años; el filtro prensa, fue sugerido por Howard alrededor de 1820, pero fue introducido con éxito por Needham en 1853; y los filtros modernos de láminas, tales como los Kelley, Sweetland y Vallez, fueron introducidos de 1910 a 1920. 2.2 Partes de la centrifuga. Sus componentes son:

Rotor: Dispositivo que gira y en el que se colocan los tubos. Existen varios tipos: o Rotor basculante: Los tubos se colocan en un dispositivo (cestilla) que, al girar el rotor, se coloca en disposición perpendicular al eje de giro. Así pues los tubos siempre giran situados perpendicularmente al eje de giro.

como la sedimentación.o Rotor de ángulo fijo: Los tubos se insertan en orificios en el interior de rotores macizos. pues sin su viscosidad todas las partículas caerían a la misma velocidad.   Motor: Es eléctrico y capaz de girar a docenas de miles de veces por minuto. Tiempo y Temperatura: Regula la velocidad del dispositivo al igual que el dispositivo regulador de la temperatura necesaria para la centrifugación de las muestras.  Control de Velocidad. El centrifugado es una sedimentación acelerada. según la cual las partículas sedimentan más fácilmente cuanto mayor es su diámetro. 2. velocidad angular de giro de la centrifugadora y . Es importante entender que el papel del fluido es esencial. ya que la aceleración de la gravedad se sustituye por la aceleración centrífuga. . se alcanzan aceleraciones mucho mayores que la gravedad. Puesto que la velocidad angular de giro puede ser de miles de revoluciones por minuto. Cámara de Vacío: Es una pieza cóncava que sirve para contener dentro de ella el rotor y su respectivo soporte que lo une o conecta con el motor. está gobernado por la ley de Stokes. Este tipo de rotores es típico de ultracentrífugas y se emplea en separaciones de moléculas en gradientes de densidad autogenerados (por ej. El centrifugado. y cuanto menor es la viscosidad del mismo. 2.4 Tipos de centrifugadoras. El caso extremo es el de los rotores verticales en los que el tubo se sitúa paralelo al eje de giro. Permite que la técnica sea ejecutada. donde es la es la distancia al eje de la centrifugadora.3 Principio de funcionamiento. su peso específico comparado con el del fluido. de cloruro de cesio).

Tiene como objetivo medir las propiedades físicas que sedimentan.  Centrifugación analítica.000 rpm. . y preparativas. Especialmente en la variante ultra centrifugación analítica. De pequeño tamaño y sin refrigeración. Rotor basculante.  Centrífugas de baja velocidad.000 y 25. Las centrífugas micrófugas son una variante de las anteriores que permiten llegar a velocidades de más de 10. tales como su coeficiente de sedimentación o su masa molecular. virus o macromoléculas en general. Alcanzan una velocidad máxima de 5000 rpm. virus. pero insuficientes para la separación de ribosomas. Los tubos de centrifuga deben ser de cuarzo para dejar pasar la luz visible y ultravioleta. Son útiles en el campo de la biología molecular. útiles para aislar partículas de bajo coeficiente de sedimentación (microsomas. b) Según el propósito. Las moléculas se observan mediante un sistema óptico durante la centrifugación. macromoléculas). Son refrigeradas y algunas tienen sistema de vacío para evitar el calentamiento del rotor a causa del rozamiento con el aire. Son útiles en la separación de fracciones celulares.000 rpm. Alcanzan velocidades de entre 18.  Ultracentrífugas. Son Útiles para la separación de partículas grandes como células o precipitados de sales insolubles.000 rpm. por lo que tienen sistemas auxiliares de refrigeración i de alto vacío.a) Según el rango de velocidades de giro. Hay ultracentrífugas analíticas que permiten la obtención de datos precisos de propiedades de sedimentación (coeficientes de sedimentación.  Centrífugas de alta velocidad. Superan las 50. observación en vertical. pesos moleculares). de sobremesa o clínicas. Los volúmenes de trabajo son muy pequeños.

 Centrifugación diferencial. la masa (centrifugación zonal) o la densidad (centrifugación isopícnica). Es de uso más común. Este método implica la utilización de un soporte fluido cuya densidad aumenta desde la zona superior a la inferior. Su objetivo es aislar partículas. En este método el tubo de centrifuga se llena con una mezcla uniforme. Centrifugación preparativa. también permite realizar medidas analíticas. se emplea mayor cantidad de muestra que en la analítica. celular o moléculas para su análisis o utilización posterior. Es el método más común de separación. La técnica no solo permite la separación de varios sino de todos los componentes de la muestra.  Centrifugación en Gradiente de Concentración: este método es algo más complicado que la centrifugación diferencial. Puestos que las proteínas poseen casi la . El método es bastante inespecífico y no se puede saber si la partícula buscada quedara en el sobrenadante. en el tubo o repartido entre ambos. sin embargo es una técnica muy útil para aislamiento de organeras subcelulares. Tras la centrifugación se obtienen dos fracciones: un tubo que contiene el material sedimentado y un sobrenadante con el material no sedimentado. La centrifugación zonal y la centrifugación isopícnica constituyen ejemplos de centrifugación mediante un gradiente de densidades. Las partículas se pueden separar en función de la velocidad de sedimentación (centrifugación diferencial). En general. Existen 2 variaciones dentro de la centrifugación en gradiente de densidad: o Centrifugación de equilibrio en gradiente o isopicnica: esta técnica se emplea para separar partículas similares en tamaños pero distintas en densidad. c) Según el medio en el que se centrifuga y la forma en que se aplica la muestra.

sin embargo. Por ejemplo:  Una aplicación típica consiste en acelerar el proceso de sedimentación. Bajo fuerza centrifuga las partículas comenzaran a sedimentar a través del gradiente. la separación de orgánulos subcelulares y el aislamiento de macromoléculas. en situaciones donde intervienen diferentes densidades. separando la pulpa fina del zumo exprimido. o Centrifugación zonal: la muestra a analizar se deposita en la parte superior de un gradiente de densidad preformado. moviéndose cada partícula a diferentes velocidades dependiendo de su masa. por lo general de alto rendimiento y por esta razón la centrifugación es de muy buena ayuda para avances de estos tipos. Las investigaciones y aplicaciones clínicas de hoy en día dependen del aislamiento de células. biología celular y molecular y en medicina. Son muchas las aplicaciones de la centrifugación y pueden incluir la sedimentación de células y virus. para controlar el nivel de pulpa fina de estos. de fábricas que elaboran zumos a base de cítricos.  Otra aplicación de las centrífugas es la elaboración de aceite de oliva. la centrifugación isopicnica es el método adecuado. 2. En ella las aceitunas una vez molidas y batidas se introducen en una centrífuga horizontal en la que se separa el aceite que es la fracción . proteínas o lípidos. dividiendo el plasma sanguíneo y el suero sanguíneo en un proceso de análisis de sangre.  Es muy usada en laboratorios de control de calidad. orgánulos subcelulares y macromoléculas. La centrifugación es una de las técnicas de investigación más importantes y de mayor aplicación en bioquímica.5 Aplicaciones de la centrifugación. tales como ADN.misma densidad. este método no suele utilizar para su separación. ARN.

menos pesada del resto de componentes de la aceituna. hueso. . pulpa etc.  Una aplicación importante es la separación del uranio 235 del uranio 238. agua.

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