You are on page 1of 71

PENGARUH ANTIMIKROBA EKSTRAK KULIT MANGGIS (Garcinia Mangostana L.

) TERHADAP PERTUMBUHAN Shigella dysenteriae SECARA IN VITRO

Karya Tulis Ilmiah untuk memenuhi sebagian persyaratan mencapai gelar Sarjana Kedokteran

Oleh : Tony Hartanto 01.209.6036

FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS ISLAM SULTAN AGUNG SEMARANG 2013

KARYA TULIS ILMIAH PENGARUH ANTIMIKROBA EKSTRAK KULIT MANGGIS (Garcinia Mangostana L.) TERHADAP PERTUMBUHAN Shigella dysenteriae SECARA IN VITRO

Yang dipersiapkan dan disusun oleh : Tony Hartanto 01.209.6036 telah dipertahankan di depan Dewan Penguji pada tanggal 28 Maret 2013 dan dinyatakan telah memenuhi syarat Susunan Tim Penguji

Pembimbing I

Anggota Tim Penguji

Dra.Edijanti Gunarwo, Apt Pembimbing II

dr. Suryani Yulianti

dr. Ulfah Dian Indrayani, M.Sc

dr. Ophi Indria Desanti, MPH

Semarang, 4 April 2013 Fakultas Kedokteran Universitas Islam Sultan Agung Dekan,

dr. H. Iwang Yusuf, M.Si

ii

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ........................................................................................ i HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................ ii SURAT PERNYATAAN .................................................................................. iii PRAKATA ........................................................................................................ iv DAFTAR ISI ................................................................................................... vi DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... x DAFTAR TABEL ........................................................................................ xi

DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................... xii INTISARI .......................................................................................................... xiii BAB I PENDAHULUAN 1.1. Latar Belakang ............................................................................ 1 1.2. Rumusan Masalah ....................................................................... 3 1.3. Tujuan Penelitian. ....................................................................... 3 1.4. Manfaat Penelitian ...................................................................... 4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1. Shigella Dysenteriae ................................................................... 5 2.1.1. Taksonomi .................................................................... 5 2.1.2. Morfologi ..................................................................... 5 2.1.3 Struktur Antigen ............................................................ 6 2.1.4 Fase Pertumbuhan Bakteri ............................................. 7 2.1.5 Toksin ........................................................................... 7

iii

2.1.6 Daya Invasi .................................................................. 8 2.1.7 Faktor-faktor yang Mempengaruhi Pertumbuhan Bakteri ......................................................................... 9 2.2. Manggis ...................................................................................... 10 2.2.1. Definisi ......................................................................... 10 2.2.2. Taksonomi .................................................................... 11 2.2.3. Morfologi ...................................................................... 11 2.2.4. Asal dan Penyebaran ..................................................... 12 2.2.5 Kandungan dan Manfaat ............................................... 13 2.2.6. Mekanisme Antibakteri Ekstrak Kulit Manggis ............. 14 2.2.6.1 Xanthone ......................................................... 14 2.2.6.2 Flavonoid ........................................................ 15 2.2.6.3 Tanin ............................................................... 13 2.2.7. Metode Uji Antimikroba................................................ 17 2.2.7.1. Difusi .............................................................. 17 2.2.7.1.1. Metode Disc Difussion..................... 17 2.2.7.1.2. E-Test ............................................. 18 2.2.7.1.3. Ditch-plate technique ....................... 18 2.2.7.1.4. Cup-plate technique ......................... 18 2.2.7.1.5. Gradient-plate technique .................. 19 2.2.7.2 Dilusi ................................................................. 19 2.2.7.2.1. Metode dilusi cair (Broth dilution test).................................................. 19

iv

2.2 Kerangka teori ........................................................................... 21 2.3 Kerangka konsep ......................................................................... 22 2.4 Hipotesis ................................................................................... 22 BAB III METODE PENELITIAN 3.1. Jenis Penelitian dan Rancangan Penelitian .................................. 23 3.2. Variabel dan Definisi Operasional ............................................... 23 3.2.1. Variabel......................................................................... 23 3.2.1.1. Variabel Bebas ................................................ 23 3.2.1.2. Variabel Tergantung ......................................... 23 3.2.2. Definisi operasional ....................................................... 23 3.2.2.1. Ekstrak Kulit Manggis ...................................... 23 3.2.2.2. Pertumbuhan Shigella dysenteriae..................... 23 3.3. Populasi dan Sampel ................................................................... 24 3.4. Instrumen dan Bahan Penelitian ................................................. .25 3.4.1. Instrumen Penelitian........................................................ 25 3.4.2. Bahan Penelitian ............................................................. 25 3.5. Cara penelitian ............................................................................ 26 3.5.1. Sterilisasi Alat ................................................................. 26 3.5.2. Ekstrak Kulit Manggis .................................................... 26 3.5.3 Pembuatan Kepekaan Bakteri Shigella dysenteriae .......... 29 3.5.4 Tes Antibakteri Metode Dilusi (Pengenceran) .................. 29 3.5.5 Pembuatan Media Kultur dan Suspensi Shigella dysenteriae ................................................................... 30

v

3.5.6 Pelaksanaan Eksperimen .................................................. 31 3.6. Tempat dan Waktu Penelitian...................................................... 34 3.7. Analisis Hasil ............................................................................. 34 3.8. Kerangka Kerja ........................................................................... 35 BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil Penelitian........................................................................... 36 4.2 Pembahasan ................................................................................ 38 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan ................................................................................ 42 5.2 Saran .......................................................................................... 42 DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 43 LAMPIRAN ...................................................................................................... 46

vi

DAFTAR GAMBAR Gambar 2.1. Perbedaan struktur dinding sel bakteri gram positif dan gram negatif ........................................................................................ 6 Gambar 2.2. Manggis ..................................................................................... 12

vii

DAFTAR TABEL

Tabel 4.1. Tabel 4.2. Tabel 4.3.

Mean koloni Shigella dysenteriae ................................................ 37 Hasil uji Kruskall-Wallis ............................................................. 37 Hasil Mann-Whitney U ................................................................ 38

viii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Ethical Clearance ........................................................................... 46 Lampiran 2. Sertifikat Bakteri Shigella dysenteriae ........................................... 47 Lampiran 3. Surat hasil penelitian ..................................................................... 48 Lampiran 4. Surat hasil penelitian ..................................................................... 50 Lampiran 5. Hasil Uji Deskriptif ...................................................................... 51 Lampiran 6. Uji Normalitas dan Homogenitas .................................................. 52 Lampiran 7. Hasil uji Kruskal Wallis ................................................................ 53 Lampiran 8. Hasil uji Mann-Whitney ................................................................ 53 Lampiran 9. Gambar Penelitian ......................................................................... 59

ix

INTISARI

Ekstrak kulit manggis (Garcinia Mangostana L.) mempunyai kandungan xanthone, flavonoid dan tannin yang berfungsi sebagai antibakteri. Penelitian terdahulu menggunakan ekstrak kulit manggis sebagai antimikroba dapat menghambat pertumbuhan gram positif (Staphylococcus aureus ATCC2592 dan S.epidermidis) dan gram negatif (Salmonella typhimurium dan Escheria coli). Penelitian ini bertujuan mengetahui pengaruh antimikroba ekstrak kulit manggis terhadap Shigella dysenteria secara In Vitro. Penelitian eksperimental dengan rancangan Post test only control group design dilakukan selama 3 hari menggunakan 5 kelompok dan masing-masing kelompok replikasi 5 kali. Kelompok kontrol negatif, kelompok perlakuan 12,5%, kelompok perlakuan 25%, kelompok perlakuan 50%, kelompok perlakuan 75%,. Data dianalisis dengan uji Kruskal Wallis dilanjutkan uji Mann Whitney U. Hasil rerata jumlah koloni pada kelompok kontrol,dan kelompok perlakuan 12,5%, 25%, 50%, 75% masing-masing adalah 550; 465; 0; 0; 0. Analisis uji Kruskal Wallis menunjukkan perbedaan yang signifikan antar kelompok penelitian (p=0,001). Uji Mann Whitney U menunjukkan perbedaan signifikan (p<0,05) antara kelompok kontrol dengan kelompok perlakuan 25%,50%, 75%. Terdapat juga perbedaan signifikan antara kelompok perlakuan 12,5% dengan 25%,50%, 75%. Kesimpulan ada pengaruh antimikroba ekstrak kulit manggis dengan Shigella dysenteriae secara in vitro Kata Kunci : Kulit Manggis, Xanthone, Flavonoid, Tanin, Shigella dysenteriae.

x

BAB I PENDAHULUAN 1.1. Latar Belakang Penggunaan berbagai bahan alami sebagai antibakteri semakin meningkat seiring dengan perkembangannya ilmu pengetahuan dan teknologi. Salah satu tanaman obat Indonesia yang baru ini ditemukan dan dapat dikonsumsi sebagai obat disentri secara tradisional adalah kulit manggis. Penelitian di Thailand menunjukan manfaat kulit manggis untuk mengobati penyakit sariawan, disentri, cystitis, diare, gonorhe dan eksim (ICUC, 2003). Hasil penelitian ekstrak kulit manggis sebagai antimikroba dengan konsetrasi 50%, 25%, 12,5%, 6,25% dan 3,125% dengan metode difusi dapat menghambat pertumbuhan gram positif (Staphylococcus aureus ATCC2592 dan S.epidermidis) dan gram negatif (Salmonella typhimurium B 2284 dan Escheria coli B2245) (Poeloengan & Praptiwi, 2010). Ekstrak kulit manggis yang mampu menghambat pertumbuhan bakteri gram positif (seperti Staphylococcus aureus) memiliki konsentrasi di atas 3,125%. Penelitian efek ekstrak kulit manggis terhadap Shigella dysenteriae belum dilakukan padahal semua spesies dari jenis Shigella patogen menginfeksi manusia dan menimbulkan efek pada mukosa saluran cerna dengan memproduksi faktor virulensi yang banyak, termasuk enterotoksin dan protein efektor (Niebuhr, 2000; philphot, 2000). Shigellosis masih menjadi masalah kesehatan masyarakat pada sebagian besar negara berkembang karena kemiskinan, sanitasi yang 1

2

buruk, personal higienis dan suplai air yang buruk (Iwalokum, 2001). Beberapa rekam medis di beberapa rumah sakit di Kota Makassar, proporsi kasus shigellosis pada balita cenderung meningkat dalam beberapa tahun terakhir. Tahun 2008, kejadian shigellosis pada balita rawat inap di RSUP Wahidin Sudirohusodo tercatat 26 kasus (11,1%) dari 208 kasus diare, turun sedikit menjadi 24 kasus (11%) dari 218 kasus pada tahun 2009, dan naik lagi menjadi 37 kasus (7,4%) dari 175 kasus diare pada tahun 2010 (Dahlan dkk, 2012). Shigella flexneri dan Shigella dysenteriae adalah golongan yang lebih multi – drug resistance daripada jenis lain. 80 jenis Shigella resisten terhadap amoxixilin, streptomycin, tetracyclin, chloramphenicol, sulphonamides dan cotrimoxazol (Bercion, 2008). Selama periode 2004-2005, 76% dari jenis Shigella resisten terhadap amoxixilin, 52% terhadap amoxixilin-clavul-acid; 86% terhadap cotrimoxazol, 97% terhadap tetracyclin dan 71% terhadap

chloramphenicol (Bercion, 2008). Kulit manggis mengandung berbagai komponen senyawa yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri, salah satunya xanthone, alfa mangostin gamma mangostin dan garsinon B (Suksamran dkk, 2003). Menurut Sakagami et al (2005) melakukan penelitian fokus pada alfa – mangostin menunjukan aktif terhadap bakteri Enterococci dan

Staphylococcus aureus yang masing- masing resisten terhadap vancomisin dan metisilin. Kulit manggis juga mengandung flavonoid, tanin, steroid/triterpenoid dan kuinon serta unsur kalium, natrium, magnesium,

3

kalsium, zing dan besi. Menurut Okada (2004) tanin berpotensi menjadi antibakteri, dan penelitian yang dilakukan Sukadana (2009) isolat flavonoid juga dapat menghambat pertumbuhan E.coli dan S. aureus. Berdasarkan uraian diatas maka perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui apakah ekstrak kulit manggis dengan dosis 12,5%, 25%, 50%, dan 75% berpengaruh pada pertumbuhan Shigella dysenteriae secara in vitro dengan metode dilusi. Dosis yang digunakan peneliti berdasar pada penelitian yang dilakukan oleh Poeloengan & Pratiwi (2010). 1.2. Rumusan Masalah Berdasarkan hal yang telah diuraikan dapat dirumuskan suatu masalah yaitu: “Bagaimana pengaruh antibakteri ekstrak kulit manggis terhadap Shigella dysenteriae secara in vitro?”. 1.3. Tujuan Penelitian 1.3.1. Tujuan umum Mengetahui pengaruh antimikroba ekstrak kulit manggis (Garcinia Mangostana L.) berbagai konsentrasi dalam

menghambat pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae secara in vitro. 1.3.2. Tujuan khusus 1.3.2.1 Mengetahui pengaruh antibakteri ekstrak kulit manggis pada konsentrasi 12,5%, 25%, 50%, dan 75% terhadap Shigella dysenteriae secara in vitro.

4

1.3.2.2 Mengetahui perbedaan pengaruh antibakteri ekstrak kulit manggis pada konsentrasi 12,5%, 25%, 50%, dan 75% terhadap Shigella dysenteriae secara in vitro. 1.4. Manfaat 1.4.1. Manfaat Teoritis Sebagai sumber informasi untuk memperluas pengetahuan mengenai manfaat antibakteri kulit manggis dalam menghambat pertumbuhan Shigella dysenteriae. 1.4.2. Manfaat Praktis Sebagai sumber informasi mengenai kulit manggis yang diharapkan dapat dimanfaat dalam penanganan penyakit khususnya disentri basiler akibat Shigella dysenteriae dan sebagai antibakteri yang efektif dan aman bagi kesehatan.

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1.

Shigella dysenteriae 2.1.1. Taksonomi Shigella dysenteriae adalah enterobacteria. Bakteri ini mempunyai taksonomi yang akan diuraikan sebagai berikut : Divisi Kelas Ordo Famili Genus Spesies Gibson, 1974) 2.1.2. Morfologi Shigella adalah batang gram negatif, selnya berbentuk batang dan tidak bergerak. Suhu pertumbuhan optimum 37°C dalam keadaan aerobik. Koloni berbentuk konveks, bulat, transparan dengan tepi yang utuh dan mencapai diameter sekitar 2 mm dalam 24 jam (Jawetz dan Alderberg, 2008). Shigella species merupakan kuman patogen usus yang telah lama dikenal sebagai agen penyebab penyakit disentri basiler. Berada dalam tribe Eschericia karena sifat generik yang saling : Schizophyta : Schizomycetes : Eubacteriales : Enterobactericeae : Shigella : Shigella dysenteriae (Buchannan &

5

6

berhubungan, tetapi dimasukkan dalam genus tersendiri yaitu genus Shigella karena gejala klinis yang disebabkan bersifat khas. Terdapat 4 spesies Shigella yaitu Shigella dysenteriae, Shigella flexneri, Shigella Alderberg, 2008). 2.1.3. Struktur antigen Shigella mempunyai susunan antigen yang kompleks. Terdapat banyak tumpang tindih dalam sifat serologik berbagai spesies ini, dan sebagian besar kuman mempunyai antigen O yang juga dimiliki oleh kuman enterik lainnya (Jawetz dan Alderberg, 2008). Antigen somatik O Shigella adalah lipopolisakarida. Spesifitas serologiknya bergantung pada polisakarida itu. Terdapat lebih dari 40 serotipe. Klasifikasi Shigella didasarkan pada sifat biokimia dan antigennya. boydii, dan Shigella sonnei (Jawetz dan

Gambar 2.1. Perbedaan struktur dinding sel bakteri gram positif dan gram negatif (Anonim, 2012)

7

2.1.4. Fase pertumbuhan bakteri 1. Fase lag (A) adalah fase dimana bakteri beradaptasi dengan lingkungannya dan mulai merambah sedikit demi sedikit 2. Fase logaritmik (B) adalah fase dimana pembiakan bakteri berlangsung paling cepat. Jika ingin mengadakan piaraan yang cepat tumbuh, maka bakteri dalam fase ini baik sekali untuk dijadikan inokulum. 3. Fase stasioner (C) adalah fase dimana jumlah bakteri yang berkembang biak sama dengan jumlah bakteri yang mengalami kematian. 4. Fase autolisis (D) (kematian) adalah fase dimana jumlah bakteri yang mati semakin banyak, melebihi jumlah bakteri yang berkembang biak (Jawetz dan Alderberg, 2008). 2.1.5. Toksin Enterotoksin yang dihasilkan Shigella adalah termolabil dan menyebabkan pengumpulan cairan di ileum kelinci. Aktivitas enterotoksin terutama pada usus halus yang berbeda bila dibandingkan dengan disentri basiler klasik dimana yang terkena adalah usus besar. Pada waktu terjadi autolisis, semua Shigella mengeluarkan lipopolisakaridanya yang toksik. Endotoksin ini mungkin menambah iritasi dinding usus (Jawetz dan Alderberg, 2008).

8

S. dysenteriae tipe 1 (basil shiga) memproduksi eksotoksin tidak tahan panas yang dapat mempengaruhi saluran pencernaan dan susunan saraf pusat. Eksotoksin merupakan protein bersifat antigenik (merangsang produksi antitoksin) dan mematikan hewan percobaan. Pada manusia, eksotosin ini juga menghambat absorbsi gula dan asam amino pada usus kecil. Sebagai “neurotoksin” zat ini ikut berperan dalam menyebabkan keparahan penyakit dan sifat fatal infeksi S. dysenteriae, serta menimbulkan reaksi susunan saraf pusat (meningismus, koma) (Jawetz dan Alderberg, 2008). 2.1.6. Daya invasi Kuman menembus masuk ke dalam lapisan sel epitel permukaan mukosa usus di daerah ileum terminal dan kolon, pada lapisan epitel tersebut kuman memperbanyak diri. Sebagai reaksi tubuh terjadi reaksi peradangan diikuti dengan kematian sel dan mengelupasnya lapisan tersebut, terjadilah tukak Shigella

memasuki host melalui mulut. Karena secara genetik tahan terhadap pH yang rendah, mereka dapat melewati barrier asam lambung. Disentri basiler ditularkan secara oral melalui air, makan, lalat yang tercemar oleh ekskreta pasien. Secara endemik pada daerah tropis penyebaran melalui air yang tercemar oleh tinja pasien, makanan yang tercemar oleh lalat, dan pembawa hama (carrier). Untuk menemukan carrier diperlukan pemeriksaan

9

biakan tinja dengan teliti karena basil Shigella mudah mati, untuk itu diperlukan tinja yang baru (Sya’roni, 2006) 2.1.7. Faktor – faktor yang mempengaruhi pertumbuhan Menurut (Jawetz dan Alderberg, 2008) faktor-faktor yang mempengaruhi pertumbuhan bakteri, antara lain : 2.1.7.1 Suhu Pada umumya bakteri tumbuh pada suhu 37° C, untuk setiap spesies ada batasan suhu maksimum dan minimum untuk pertumbuhan. Beberapa kelompok bakteri menurut suhu optimum yaitu Psikofrofil (Bakteri dapat tumbuh pada suhu 5° - 30° C), mesofil (Bakteri tumbuh pada suhu 12,5° - 55° C) dan termofil (Bakteri dapat tumbuh pada suhu 50° – 60° C). 2.1.7.2 Kelembapan Mikroba mempunyai nilai kelembaban optimum. Pada umumnya untuk pertumbuhan ragi dan bakteri diperlukan kelembaban yang tinggi diatas 85%. 2.1.7.3 pH Setiap organisme memiliki kisaran pH masingmasing dan memiliki pH optimum yang berbeda-beda. Pertumbuhan yang paling baik adalah pH optimum yaitu antara pH 6,5-7,5.

10

2.1.7.4 Nutrisi Mikroba memerlukan suplai nutrisi sebagai sumber energi dan pertumbuhan selnya. Kekurangan sumber energi dan pertumbuhan selnya. Kekurangan sumber nutrisi dapat mempengaruhi pertumbuhan mikroba hingga akhirnya dapat menyebabkan kematian. Kondisi tidak bersih dan higienis pada lingkungan adalah kondisi yang menyediakan sumber nutrisi bagi pertumbuhan mikroba sehingga mikroba dapat tumbuh berkembang di lingkungan seperti ini. 2.1.7.5 Konsentrasi garam Medium yang paling cocok bagi kehidupan mikroba adalah medium yang isotonik terhadap isi sel mikroba. Larutan garam atau larutan gula yang agak pekat mudah menyebabkan plasmolisis. 2.2. Manggis (Garcinia Mangostana L.) 2.2.1. Definisi Manggis merupakan yang mempunyai refleksi perpaduan rasa asam dan manis yang tidak dipunyai oleh komoditas lain dan biasa di juluki dengan “Queen of the tropical fruits” (Hartanto, 2011).

11

2.2.2. Taksonomi Manggis di klasifikasikan (Iswari, 2011) Kingdom Divisi Sub divisi Kelas Ordo Family Genus Spesies Nama umum Nama latin 2.2.3. Morfologi Pohon manggis berwarna hijau dengan tinggi 6-20 m mempunyai batang tegak, kulit batang berwarna coklat dan mengeluarkan getah kuning. Daun manggis yang tunggal selalu berhadapan atau 6 silang berhadapan, bunga manggis betina manggis berada 1-3 di ujung batang, susunan menggarpu dan garis tengah 5-6 cm. Buah manggis mempunyai dua kelopak, kelopak terluar hijau kuning dan 2 yang terdalam lebih kecil, melengkung berwarna merah dan tumpul. Buah manggis yang umum di ketahui di Indonesia berbentuk bulat, tapi ada juga bentuk gepeng, lonjong, dan oblong : Plantae : Spermatophyta : Angiospermae : Dicotyledonae : Guttiferanales : Guttiferae : Garcinia : Garcinis mangostana,L : Manggis : Garcinia mangostana,L

12

yang jarang ditemui, daging buahnya bersegmen – segmen sekitar 5 sampai 8 segmen, daging buah ini berwarna putih dan bertekstur seperti buah plum yang ranum, dan setiap segmen ada biji yang besar yang berkisar 0,2 -2,2 gr, kulit buah yang muda berwarna kuning kehijauan dan yang tua berwarna ungu kemerahan. Ketebalan kulit buah manggis kisaran antara 0,5 dan 0,7 cm, yang terdiri dari daging kulit buah (endocarp) lebih lunak sekitar 0,4 hingga 0,5cm dan pericarp lebih keras antara 0,1 dan 0,2 cm. Saat buah masih muda kulitnya banyak mengandung getah dan akan hijau sesuai dengan tingkat kematangannya (Iswari, 2011).

Gambar 2.2. Manggis (Anonim, 2012) 2.2.4. Asal dan penyebaran Manggis diduga berasal dari Asia Tenggara, mungkin dari Indonesia yaitu Kalimantan. Tanaman manggis menyebar ke timur sampai ke Papua Nugini dan kepulauan Mindanau (Filipina), dan ke utara melalui Semenanjung Malaysia menyebar terus ke

13

Thailand bagian selatan, Myanmar, Vietnam, dan Kamboja (Hartanto, 2011). Tanaman manggis dikenal sejak 1631 oleh para peneliti dan tanaman ini dijumpai tumbuh liar pada kisaran jenis tanah dan lokasi yang cukup luas. Di Indonesia buah manggis merupakan salah satu komoditas ekspor, volume ekspor tahun 2006 sebesar 5.697.879 ton, dengan nilai US$ 3.611.995. jumlah tersebut kurang dari 10% total produksi manggis negeri ini, yang mencapai 72.117 ton (Iswari, 2011). Produksi buah ini mengalami fluktuasi dari tahun ke tahun tercatat tahun 2007 meningkat menjadi 112.722 ton dan tahun 2008 produksi menurun menjadi 65.133 ton dan kembali naik pada tahun berikutnya menjadi 105.558 ton. Pada tahun 2010 produksi manggis kembali turun menjadi 87.154 ton.(Hartanto, 2011). 2.2.5. Kandungan dan manfaat Kandungan kimia akar, kulit batang, batang dan kulit manggis adalah saponin, disamping itu akar dan batangnya juga mengandung flavonoid dan polifenol (fenol), serta kulit manggis juga mengandung tanin, flavonoid, steroid/triterpenoid dan kuinon serta unsur natrium, kalium, magnesium, kalsium, besi, zink dan tembaga. Kulit manggis, kulit buah dan lateks kering manggis mengandung sejumlah zat warna kuning yang berasal dari dua metabolit sekunder yaitu α-mangostin dan β-mangostin yang keduanya turunan dari xanthone. α-mangostin merupakan

14

komponen utama sedangkan β- mangostin lebih kecil (Poeloengan & Praptiwi, 2010). Daging buah manggis dapat mengobati penyakit diare, radang, amandel, keputihan,disentri, wasir, borok, peluruh dahak, dan sakit gigi. Kulit manggis sudah banyak digunakan masyarakat sebagai obat untuk sariawan, disentri, diare, asam urat, pewarna alami, dan membuat cat antikarat (Poeloengan & Praptiwi, 2010). Menurut Subroto (2008) kulit manggis mempunyai sifat sebagai anti-aging, menurunkan tekanan darah tinggi, menurunkan berat badan, antivirus juga antibakteri. Kulit batang manggis juga dimanfaatkan mengatasi nyeri perut sedangkan akarnya untuk mengatasi haid yang tidak teratur (Anonim, 2009). 2.2.6. Mekanisme anti bakteri ekstrak kulit manggis 2.2.6.1 Xanthone Xanthone merupakan senyawa aromatik sederhana dengan inti kerangka dibenzo-γ-pyron, seperti yang dimiliki oleh flavonoid dan chromomer. Oleh karena itu, aktivitas antibakteri dari xanthone tidak jauh berbeda dengan flavonoid, yaitu membentuk senyawa kompleks terhadap protein ekstraseluler yang mengganggu integritas membran sel bakteri (Iswari, 2011). Nugroho (2012) mengutip beberapa hasil (Suksamrarn et al., 2003) menyatakan bahwa senyawa xanthone yang memiliki

15

aktivitas antibakteri adalah α-mangostin, ß-mangostin, γmangostin, dan garsinon B. Sedangkan Zarena & Sankar (2008) mengemukakan bahwa xanthone dari ekstrak kulit manggis merupakan kelompok fenol, dimana aktivitas antibakterinya memiliki mekanisme koagolasi protein yang menyebabkan membrane sel menjadi lisis. 2.2.6.2 Flavonoid Senyawa flavonoid diduga mekanisme kerjanya dapat merusak membran sel tanpa dapat diperbaiki lagi. Mekanisme kerja senyawa flavonoid dalam merusak membran sitoplasma sama dengan pengrusakan pada dinding sel. Rusaknya lipid dan protein pada membran sitoplasma menyebabkan membran terjadinya sitoplasma. penurunan Selanjutnya

semipermeabilitas

transport zat-zat kedalam dan keluar sel menjadi tidak terkendali, termasuk transpor nutrisi dan enzim-enzim akan keluar dari dalam sitoplasma, sehingga metabolisme seluler akan terhambat, kemudian ATP yang dihasilkan akan menurun, selanjutnya akan terjadi hambatan dalam

pertumbuhan dan perkembangan bakteri (Hastuti, 2007). 2.2.6.3 Tanin Beberapa tanin terbukti mempunyai aktivitas

menghambat enzim seperti ‘reserve’ transcriptase dan

16

DNA topoisomerase. Sewaktu replikasi DNA berlangsung harus terjadi pemisahan kedua untai agar masing-masing dapat berfungsi sebagai cetakan dengan mengikat basabasa nukleotidanya ke denukleosida trifosfat yang datang melalui ikatan hidrogen. Pemisahan heliks ganda DNA dipermudah oleh SSB (single strain bundle), yaitu molekul protein spesifik yang menstabilkan struktur untai tunggal sewaktu garpu replikasi bergerak maju. Selain memisahkan kedua untai heliks ganda, harus terjadi penguraian molekul agar untai dapat memisah. Hal ini harus terjadi dalam segmen-segmen, sesuai dengan waktu replikasi DNA berlangsung. Pada semua

organisme, terdapat banya fungsi “putar” yang tersebar di molekul DNA semua organisme. Fungsi putar ini dilakukan oleh enzim-enzim spesifik yang memotong di satu untai heliks ganda yang sudah lurus sehingga proses unwinding dapat berlanjut. Potongan ini segera ditambal kembali karena pembentukan ikatan kovalen berenergitinggi antara tulang punggung fosfodiester yang terpotong dengan enzim – enzim penambal. Enzim penambal ini disebut DNA topoisomerase (Granner & Weil, 2009). Enzim reserve yang transcriptase bergantung (disebut RNA) juga DNA

polimerase

mempunyai

17

kegunaan utama dalam menyintesis DNA dari cetakan RNA (Granner & Weil, 2009). Tanin mempunyai sifat sebagai pengelat berefek spasmolitik. Efek spasmolitik ini juga dapat mengkerutkan dinding sel atau membran sel sehingga mengganggu permeabilitas sel itu sendiri. Akibat terganggunya permeabilitas, sel tidak dapat melakukan aktivitas hidup sehingga pertumbuhannya terhambat atau bahkan mati. Efek antibakteri tanin antara lain melalui : reaksi dengan membran sel, inaktivasi enzim, dan destruksi atau inaktivasi fungsi materi genetik. Kemudian, senyawa tanin diduga berhubungan dengan kemampuannya dalam

menginaktivasi adhesin mikroba,enzim, dan protein transport pada membran sel (Naim, 2004). 2.2.7. Metode Uji Antimikroba Beberapa metode uji antibiotik antimikroba menurut Pratiwi (2008) 2.2.7.1 Difusi 2.2.7.1.1. Metode disc diffusion Untuk menentukan aktivitas agen antimikroba. Piringan yang berisi agen antimikroba diletakkan pada media agar yang telah ditanami mikroorganisme yang akan berdifusi pada media agar tersebut.

18

2.2.7.1.2. E-Test Metode E-Test digunakan untuk mengestimasi MIC (minimum inhibitory concentration) atau KHM (Kadar Hambat Minimum) yaitu konsentrasi minimal suatu agen antimikroba untu dapat menghambat pertumbuhan

mikroorganisme. Pada metode ini digunakan strip plastik yang mengandung agen antimikroba dari kadar terendah sampai tertinggi dan diletakkan pada permukaan media agar yang telah ditanami mikroorganisme. 2.2.7.1.3. Ditch-plate technique Pada metode ini sampel uji berupa agen antimikroba yang diletakkan pada parit yang dibuat dengan cara memotong media agar dalam cawan petri pada bagian tengah secara membujur dan mikroba uji (maksimum 6 macam) digoreskan ke arah parit yang berisi agen antimikroba. 2.2.7.1.4. Cup-plate technique Metode ini serupa dengan metode disc diffusion, dimana dibuat sumur pada media agar yang telah ditanami dengan mikroorganisme dan pada sumur tersebut diberi agen antimikroba yang akan diuji.

19

2.2.7.1.5. Gradient-plate technique Pada metode ini konsentrasi agen antimikroba pada media agar secara teroritis bervariasi dari 0 hingga maksimal. Media agar dicarikan dan larutan uji

ditambahkan. Campuran kemudian dituang ke dalam cawan petri dan diletakkan dalam posisi miring. Nutrisi kedua selanjutnya dituangkan di atasnya. Plate di inkubasi selama 24 jam untuk

memungkinkan agen antimikroba berdifusi dan permukaan media mengering. Mikroba uji (maksimal 6 macam) digoreskan pada arah mulai dari konsentrasi tinggi ke rendah. Hasil diperhitungkan sebagai panjang total

pertumbuhan mikroorganisme maksimum yang mungkin dibandingkan panjang pertumbuhan hasil goresan. 2.2.7.2 Dilusi 2.2.7.2.1. Metode dilusi cair (Broth dilution test) Metode ini mengukur MIC (Minimum Inhibitory Concentration) atau KHM (Kadar Hambat Minimun) dan MBC (Minimum Bactericidal Concentration) atau KBM (Kadar Bunuh Minimum). Cara yang dilakukan adalah dengan membuat seri pengenceran agen antimikroba pada medium cair yang ditambahkan dengan mikroba uji. Larutan uji agen antimikroba pada kadar terkecil yang

20

terlihat jernih tanpa adanya pertumbuhan mikroba uji ditetapkan sebagai KHM. Larutan yang ditetapkan sebagai KHM tersebut dikultur ulang pada media cair pada penambahan mikroba uji ataupun agen antimikroba, dan diinkubasi selama 18-24 jam. Media cair yang tetap terlihat jernih setelah inkubasi ditetapkan sebagai KBM.

21

2.3.

Kerangka teori Ekstrak kulit Manggis (Garcinia Mangostana L.)

xanthone

flavonoid

tanin

α-mangostin, ß-mangostin, γ-mangostin, garsinon B

Menghambat enzim reserve transcripte & DNA topoisomerase

Spasmolitik dinding sel

Denaturasi protein

Kapsul

Membran sel

Permeabilitas terhambat

Transport nutrisi terganggu

    

Temperatur Kelembaban Ph Nutrisi Konsentrasi garam

Pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae

22

2.4.

Kerangka konsep Ekstrak kulit manggis (Garcinia Mangostana L.) Pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae.

2.5.

Hipotesis Antimikroba ekstrak kulit manggis berpengaruh terhadap

pertumbuhan Shigella dysenteriae.

BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Jenis Penelitian dan Rancangan Penelitian Penelitian ini termasuk penelitian eksperimental laboratorium dengan metode penelitian post test only control group design. 3.2 Variabel dan Definisi Operasional 3.2.1 Variabel 3.2.1.1 3.2.1.2 3.2.2 Variabel bebas Variabel tergantung : Ekstrak kulit manggis : Bakteri Shigella dysenteriae

Definisi operasional 3.2.2.1 Ekstrak kulit manggis adalah ekstrak kering yang didapat dari kulit manggis dengan menggunakan pelarut etanol 96% dan metode ekstraksinya menggunakan sohklet. Ekstrak kulit manggis yang digunakan memiliki konsentrasi 12,5%, 25%, 50%, dan 75% Skala: rasio 3.2.2.2 Pertumbuhan Shigella dysenteriae dalam penelitian ini

diketahui dengan cara menghitung secara langsung jumlah koloni Shigella dysenteriae pada media Salmonella - Shigella Agar yang berbentuk bulat transparan. Skala : rasio

23

24

3.3 Populasi dan Sampel 3.3.1 Populasi yang digunakan adalah bakteri Shigella dysenteriae yang didapat dari laboratorium mikrobiologi Balai Laboratorium

Kesehatan Semarang. 3.3.2 Sampel yang digunakan adalah bakteri Shigella dysenteriae dengan kepekaan yang telah diencerkan dengan standar Mac Farland 0,5 yang diambil sebanyak 0,1 ml secara acak kemudian dibiakan didalam medium Salmonella - Shigella Agar. Untuk menghindari kesalahan sekecil mungkin, maka

banyaknya ulangan dan perlakuan dalam eksperimen dihitung dengan menggunakan rumus Frederer sebagai berikut (Hanafiah, 2011). (t-1) (r-1) ≥15 Dimana : t = jumlah kelompok r = jumlah ulangan (5 - 1) (r – 1) ≥15 4( r – 1) ≥15 4r – 4 ≥ 15 r ≥ 19/4 r ≥ 4,75  5 sehingga pengulangan yang harus dilakukan

sebanyak 5 kali.

25

3.4 Instrumen dan Bahan Penelitian 3.4.1 Instrumen yang digunakan dalam penelitian : a. Mikropipet b. Beker glass c. Electric Bacteria Colony Counter d. Cawan petri e. Ose steril f. Inkubator g. Autoclave h. Water Bath i. Alat ekstraksi soxhlet j. Tabung reaksi k. Rak tabung reaksi l. Oven 3.4.2 Bahan yang digunakan dalam penelitian a. Ekstrak kulit manggis b. Bakteri Shigella dysenteriae c. Salmonella - Shigella Agar d. Media Brain Heart Infusion Broth (BHIB) e. Aquadest steril

26

3.5 Cara penelitian 3.5.1 Sterilisasi Alat Alat dicuci terlebih dahulu sampai bersih kemudian dibungkus dengan kertas. Alat-alat ditaruh pada autoclave selanjutnya dipanaskan pada suhu 121°C dan tekanan 1 atm selama 15 menit kemudian alat disimpan ke dalam oven pada suhu 180°C selama 1 jam. 3.5.2 Ekstrak Kulit Manggis 3.5.2.1 Pembuatan Ekstrak Kulit Manggis Kulit manggis dikeringkan dalam oven 50°C hingga kering, kemudian diserbukkan sebanyak 300 gr lalu dimaksudkan kedalam kertas saring pada labu soxhlet. Setelah itu dilakukan ekstraksi sebanyak 16x atau selama kurang lebih 4 jam floading menggunakan alat soxhlet dengan menggunakan etanol 96% sebagai pelarut sebanyak 500 cc. Setelah selesai diuapkan pelarut yang masih tertinggal sampai hilang kemudian proses ekstraksi selesai dan didapatkan hasil ekstraksi kental dengan kadar 100% lalu ditambahkan dextrin sebanyak 50% dari berat ekstrak kental yang didapatkan dari hasil ekstraksi soxhlet dan dicampur, kemudian di oven sampai kering. Kemudian untuk mendapatkan konsentrasi 12,5%, 25%, 50%, dan 75% dilakukan pengenceran.

27

Pengenceran dengan menggunakan pengenceran sebagai berikut : N1 x V1 Keterangan: N1 V1 N2 V2 : Kadar konsentrasi awal : Volume awal : Kadar konsentrasi akhir : Volume akhir = N2 x V2

a. Untuk memperoleh ekstrak kulit manggis 12,5% sebanyak 5 ml, ekstrak kulit manggis 100% harus diencerkan dengan menambahkan aquadest ad 5 ml ke dalam 0,625 g ekstrak kulit manggis 100%. sebagai

Pengenceran berikut: N 1 x V1 100 x V 1 V1

menggunakan

perhitungan

= = = =

N2 x V2 12,5 x 5
12,5 x5 100

0,625 g ekstrak kulit manggis 25%

b. Untuk

memperoleh

sebanyak 5 ml, ekstrak kulit manggis 100% harus diencerkan dengan menambahkan aquadest ad 5ml ke

28

dalam 1,25 g ekstrak kulit manggis 100%. Pengenceran menggunakan perhitungan sebagai berikut: N 1 x V1 100 x V 1 V1 = = = = c. Untuk memperoleh N2 x V2 25 x 5
25 x5 100

1,25 g ekstrak kulit manggis 50%

sebanyak 5 ml, ekstrak kulit manggis 100% harus diencerkan dengan menambahkan aquadest ad 5 ml ke dalam 2,50 g ekstrak kulit manggis 100%. Pengenceran menggunakan perhitungan sebagai berikut: N1 x V1 100 x V 1 V1 = = = = d. Untuk memperoleh N2 x V2 50 x 5
50 x5 100

2,50 g ekstrak kulit manggis 75%

sebanyak 5 ml, ekstrak kulit manggis 100% harus diencerkan dengan menambahkan aquadest ad 5 ml ke dalam 3,75 g ekstrak kulit manggis 100%. Pengenceran menggunakan perhitungan sebagai berikut:

29

N1 x V1 100 x V 1 V1

= = = =

N2 x V2 75 x 5
75 x5 100

3,75 g

3.5.3

Pembuatan kepekaan bakteri Shigella dysenteriae Ambil bakteri Shigella dysenteriae dengan ose yang telah disterilkan. Goreskan kuman pada media Salmonella - Shigella Agar. Inkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam. Ambil bakteri yang telah membentuk koloni dan berdiri jauh dari koloni yang lain. Masukan kedalam tabung reaksi yang telah berisi BHIB (Brain Hearth Infusion Borth), lalu diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam kemudian amati kekeruhan suspensi. Encerkan beberapa kali dengan larutan NaCl 0,85% sampai didapatkan kepekaan kuman sesuai dengan standar Mac Farland 0,5.

3.5.4

Tes antibakteri metode dilusi (pengenceran) Prinsip metode ini adalah sejumlah ekstrak kulit manggis diencerkan hingga diperoleh beberapa macam konsentrasi, lalu masing – masing konsentrasi diberikan pada suspensi kuman dalam media. Setelah diinkubasi, diamati ada atau tidaknya pertumbuhan bakteri yang ditandai dengan terjadinya kekeruhan. Setelah itu masing – masing konsentrasi ekstrak kulit manggis

30

tersebut ditanam pada agar padat media pertumbuhan bakteri yang bebas ekstrak kulit manggis dan diinkubasi (Raharni, 2000). 3.5.5 Pembuatan Media Kultur dan Suspensi Shigella dysenteriae 3.5.5.1 Pembuatan media kultur Media kultur yang digunakan dalam penelitian ini adalah Salmonella - Shigella Agar dan Brain Heart Infusion Broth (BHIB). Penjelasan dari keduanya sebagai berikut: 3.5.5.1.1 Salmonella - Shigella Agar Pada penelitian ini dipilih Salmonella - Shigella Agar karena media cukup selektif di mana ekstrak daging, intisari enzimatik dari kasein, dan intisari enzimatik dari jaringan hewan menyediakan sumber nitrogen, karbon, dan vitamin yang diperlukan untuk pertumbuhan organisme. Laktosa adalah karbohidrat yang terdapat dalam Salmonella - Shigella Agar. Garam empedu, sodium sitrat dan green brilliant menghambat bakteri gram-positif, bakteri coliform yang paling banyak dan dihambat oleh pertumbuhan Proteus spp, sementara itu memungkinkan Salmonella spp.. untuk tumbuh. Sodium tiosulfat dan sitrat mendeteksi ferri hidrogen sulfida yang diproduksi koloni dengan pusat hitam. Warna netral merah adalah indikator pH. (Acumedia, 2011).

31

3.5.5.1.2 Brain Heart Infusion Broth Pada penelitian ini media penyubur yang digunakan adalah BHIB karena media ini cocok untuk pertumbuhan spesimen darah. Bahan utama terdiri dari beberapa jaringan hewan ditambah pepton, buffer posfat, dan sedikit dekstrosa. Penambahan karbohidrat

memungkinkan bakteri dapat menggunakan langsung sebagai sumber energi (Acumedia, 2011). Komposisi dari BHIB (liter) adalah caft brain infusion padat 12,5 g; beef heart infusion padat 5 g; protease pepton 10 g; glukose 2 g; sodium chloride 5 g; disodium phospate 2,5 g; serta aquadest sampai 1.000 ml dan pH akhir 7,4 pada suhu 25°C (Acumedia, 2011). 3.5.6 Pelaksanaan eksperimen Langkah-langkah eksperimen sebagai berikut: 3.5.6.1 Membuat suspensi bakteri Shigella dysenteriae standar McFarland. Larutan McFarland 0,5 digunakan sebagai

pembanding kekeruhan biakan bakteri dalam medium cair dengan kepadatan antara 1 × 107 sel/ml -1 × 108 sel/ml (Quelab, 2005). Urutan kerja pembuatan McFarland 0,5 menurut Nurhayati (2007) adalah sebagai berikut: sebanyak 0,05 ml Barium Clorida (BaCl 2 ) 1% dalam aquadest

32

ditambahkan 9,95 ml Asam Sulfat (H 2 SO 4 ) 1% kemudian disimpan di tempat yang terhindar dari cahaya matahari secara langsung. Bakteri Shigella dysenteriae yang telah

diidentifikasi dibiakkan lagi pada Salmonella - Shigella Agar (SSA). Diinkubasi dengan suhu 37ºC selama 1 × 24 jam. Setelah 1 hari dibiarkan, kekeruhan antara Shigella dysenteriae yang dikultur dalam medium cair dibandingkan dengan larutan standar McFarland 0,5. Berdasarkan Quelab (2005), 0,5 McFarland sama dengan 1 × 107 – 1 × 108 sel/ml. Jika Shigella dysenteriae yang dikultur pada SSA lebih keruh, maka perlu ditambahan larutan NaCl steril sedikit demi sedikit hingga kekeruhannya sama dengan larutan standar McFarland 0,5. Masukan ekstrak kulit manggis sesuai

konsentrasinya, suspensi bakteri Shigella dysenteriae, dan BHIB ke dalam tabung reaksi, yang kemudian diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam. Keterangan: a. Perlakuan Kontrol Negatif : 0,4 µl bakteri Shigella dysenteriae + 2,5 ml BHIB b. Perlakuan I (12,5%)

33

Ekstrak kering kulit manggis 0,625 g + air ad 5 ml + 0,4 µl bakteri Shigella dysenteriae + 2,5 ml BHIB c. Perlakuan II (25%) Ekstrak kering kulit manggis 1,25 g + air ad 5 ml + 0,4 µl bakteri Shigella dysenteriae + 2,5 ml BHIB d. Perlakuan III (50%) Ekstrak kering kulit manggis 2,5 g + air ad 5 ml + 0,4 µl bakteri Shigella dysenteriae + 2,5 ml BHIB e. Perlakuan IV (75%) Ekstrak kering kulit manggis 3,75 g + air ad 5 ml + 0,4 µl bakteri Shigella dysenteriae + 2,5 ml BHIB Hasil inokulasi diambil 0,4 μl bakteri Shigella dysenteriae dan masukkan ke cawan petri yang di dalamnya terdapat Salmonella – Shigella Agar kemudian digoyangkan lalu diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam. Lihat dan hitung jumlah koloni bakteri Shigella dysenteriae yang berwarna transparan. Jumlah koloni bakteri Shigella dysenteriae pada kelompok eksperimen dibandingkan dengan kelompok kontrol. KBM dilihat dari sedikitnya jumlah bakteri yang tewas 99,9% dari jumlah awal bakteri dan dibandingkan dengan kelompok kontrol. Selanjutnya untuk menghitung jumlah koloni digunakan alat electric bacteria colony counter.

34

3.6 Tempat dan waktu penelitian Tempat penelitian di laboratorium Mikrobiologi, Universitas Islam Sultan Agung (Unissula) Semarang. Waktu penelitian dilaksanakan pada bulan 28 Februari - 2 Maret 2013. 3.7 Analisis hasil Data yang diperoleh dari tiap kelompok penelitian dimasukan dalam tabel. Dilakukan uji normalitas menggunakan Saphiro- wilk test dan uji homogenitas menggunakan Levene test. Data yang didapatkan berdistribusi tidak normal dan varian data tidak homogen, maka data dihitung dengan uji nonparametrik, yaitu menggunakan uji statistik Kruskal Wallis untuk mengetahui perbedaan kelompok dan dilanjutkan dengan menggunakan uji beda Mann Whitney U untuk mengetahui kelompok mana saja yang berbeda. Pengolahan analisis data dilakukan dengan analisis data menggunakan SPSS 20 for windows. .

35

3.8 Kerangka kerja Sampel penelitian

Kelompok I - 0,4 µl S. dysenteriae - 2,5 ml BHIB

Kelompok II - 0,625 g ekstrak kulit manggis (12,5%) + air ad 5 ml - 0,4 µl S. dysenteriae - 2,5 ml BHIB

Kelompok III - 1,25 g ekstrak kulit manggis (25%) + air ad 5 ml - 0,4 µl S. dysenteriae - 2,5 ml BHIB

Kelompok IV - 2,5 g ekstrak kulit manggis (50%) + air ad 5 ml - 0,4 µl S. dysenteriae - 2,5 ml BHIB

Kelompok V - 3,75 g ekstrak kulit manggis (75%) + air ad 5 ml - 0,4 µl S. dysenteriae - 2,5 ml BHIB

Replikasi 5 kali tiap kelompok

Inkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam

0,4 μl hasil inokulasi Shigella dysenteriae dituang di cawan petri berisi Salmonella – Shigella Agar kemudian diinkubasi dalam inkubator pada suhu 37°C selama 24 jam

Hitung jumlah koloni S. dysenteriae berbentuk bulat utuh, warna transparan

BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil Penelitian Penelitian ini menggunakan lima sampel untuk masing-masing kelompok kontrol, ekstrak kulit manggis (Garcinia Mangostana L.) 12,5%, 25%, 50%, dan 75%. Penelitian ini dilakukan pada tanggal 28 Feburari – 2 Maret 2013 di Laboratorium Mikrobiologi Universitas Islam Sultan Agung, Data yang diperoleh diuji normalitas dengan Shapiro-Wilk didapatkan nilai p > 0,05 pada kelompok kontrol dan kelompok ekstrak kulit manggis 12,5% sehingga data pada kelompok tersebut berdistribusi normal. Namun pada kelompok ekstrak kulit manggis 25% ,50% dan 75% didapatkan distribusi data tidak normal ditunjukkan dengan nilai p < 0,05. Berdasarkan hasil-hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa syarat normalitas tidak terpenuhi. Selanjutnya untuk mengetahui homogenitas data dilakukan uji Levene test, dan didapatkan hasil nilai p > 0,05 sehingga syarat homogenitas terpenuhi pada kelompok kontrol dan kelompok ekstrak kulit manggis 12,5% sehingga data pada kelompok tersebut homogen. Namun pada kelompok ekstrak kulit manggis 25% ,50% dan 75% didapatkan varian data tidak homogen ditunjukkan dengan nilai p < 0,05. Berdasarkan hasil-hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa syarat homogenitas tidak terpenuhi. Adapun hasil uji normalitas dan homogenitas dapat dilihat pada Lampiran 6. Nilai mean dari data tersebut tercantum dalam tabel 4.1 sebagai berikut:

36

37

Tabel 4.1 . Mean koloni Shigella dysenteriae Kelompok Kontrol negatif Ekstrak kulit manggis 12,5% Ekstrak kulit manggis 25% Ekstrak kulit manggis 50% Ekstrak kulit manggis 75% Mean 550 465 0 0 0

Tabel 4.1 menunjukan bahwa kelompok kontrol negatif memiliki nilai mean terbesar yaitu 550, kelompok 12,5% memiliki nilai mean 465, sedangkan kelompok 25%, 50%, 75% memiliki nilai mean 0. Uji normalitas didapatkan sebaran data tidak normal, sehingga syarat normalitas tidak terpenuhi, maka hasil penelitian dianalisis dengan uji statistik nonparametrik Kruskall-Wallis. Data hasil uji Kruskall-Wallis tampak pada tabel 4.2 berikut Tabel 4.2 Hasil uji Kruskall-Wallis n 5 5 5 5 5 25 Mean Rank 20.60 18.90 8.50 8.50 8.50 p

S.dysenteriae

Kontrol 12,5% 25% 50% 75% Total

0,001 (p<0,05)

Hasil uji Kruskal-Wallis didapatkan nilai p = 0,001 (p<0,05), maka dapat diambil kesimpulan bahwa paling tidak terdapat 2 kelompok yang memiliki efek ant ibakteri pada Shigella dysenteriae yang berbeda. Selanjutnya untuk mengetahui kelompok mana saja yang memiliki perbedaan efek antibakteri terhadap Shigella dysenteriae in vitro maka dilakukan uji

38

Mann-Whitney U. Data hasil uji Mann-Whitney U tampak pada tabel 4.2 berikut : Tabel 4.3 Kelompok Kontrol dengan 12,5% Kontrol dengan 25% Kontrol dengan 50 % Kontrol dengan 75% 12,5% dengan 25% 12,5% dengan 50% 12,5% dengan 75% 25% dengan 50% 25% dengan 75% 50% dengan 75% Hasil Mann-Whitney U p 0,917 0,005 0,005 0,005 0,019 0.019 0.019 1,000 1,000 1,000 Keterangan Tidak Signifikan Signifikan Signifikan Signifikan Signifikan Signifikan Signifikan Tidak Signifikan Tidak Signifikan Tidak Signifikan

Berdasarkan hasil uji tes Mann-Whitney U seperti terlihat didalam tabel 4.3 menunjukan adanya perbedaan efek antibakteri yang signifikan antara kontrol negatif dengan kelompok perlakuan 25%, 50%, dan 75% dengan nilai p=0,005 (p<0,05). Pada kelompok perlakuan 12,5% juga terdapat adanya perbedaan efek antibakteri yang signifikan dengan kelompok perlakuan 25%,50% dan 75% dengan nilai p=0,019 (p<0,05). 4.2 Pembahasan Pada kelompok kontrol negatif didapatkan rerata koloni paling tinggi yaitu sebesar 550, hal ini menunjukkan bahwa faktor lingkungan dapat dikendalikan. Pada kelompok perlakuan 12,5% didapatkan rerata yang lebih rendah dari kelompok kontrol negatif yaitu sebesar 465. Mulai pada kelompok perlakuan 25% tidak didapatkan pertumbuhan koloni bakteri Shigella dysenteriae. Hal ini menunjukkan ekstrak kulit manggis (Garcinia Mangostana L.) berpengaruh dalam menghambat pertumbuhan bakteri

39

Shigella dysenteriae. Pada penelitian ini menggunakan metode dilusi cair dan media tumbuh menggunakan Salmonella - Shigella Agar supaya lebih selektif terhadap bakteri Salmonella dan Shigella dan untuk menghindari kontaminan dari bakteri lain, sedangkan Poeloengan & Praptiwi (2010) menggunakan metode difusi kertas cakram dan untuk media tumbuh menggunakan Mueller Hinton Agar yang mendukung terhadap metode difusi kertas cakram. Berdasarkan tabel 4.2 menunjukan perbedaan yang signifikan antara kelompok kontrol negatif dengan kelompok perlakuan 25%, 50% dan 75%. Hal ini menunjukan adanya pengaruh dalam menghambat pertumbuhan bakteri (Bakteriostatik). Sedangkan pada kelompok perlakuan 12,5% tidak terdapat perbedaan yang signifikan dengan kontrol negatif, namun demikian jumlah koloni bakteri Shigella dysenteriae pada kontrol negatif masih jauh lebih banyak daripada jumlah koloni pada kelompok perlakuan 12,5%, ini berarti menunjukan adanya penurunan pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae. Hal ini terjadi karena kulit manggis mengandung beberapa senyawa yang berfungsi sebagai antibakteri seperti xanthone, tanin, dan flavonoid. Senyawa xanthone, khususnya α-mangostin, ß-mangostin, γ-

mangostin, dan garsinon B yang berkhasiat sebagai antibakteri (Suksamrarn et al., 2003). Xanthone mampu membentuk senyawa kompleks terhadap protein ekstraseluler yang mengganggu integritas membran sel bakteri (Iswari, 2011). Selain itu, xanthone juga mampu melakukan koagolasi protein

40

yang menyebabkan membrane sel menjadi lisis (Zarena & Sankar, 2008). Senyawa tanin yang terdapat pada kulit manggis juga berkhasiat sebagai antibakteri. Toksisitas senyawa ini dapat merusak membran sel bakteri, sedangkan senyawa astringent tanin dapat menginduksi pembentukan kompleks senyawa ikatan terhadap enzim atau subtrat mikroba dan pembentukan suatu kompleks ikatan tanin terhadap ion logam yang dapat menambah daya toksisitas tanin itu sendiri. Selain itu, tanin dapat mengkerutkan dinding sel atau membran sel sehingga mengganggu permeabilitas sel itu sendiri, yang akhirnya menyebabkan sel tidak dapat melakukan aktivitas hidup sehingga pertumbuhannya terhambat atau bahkan mati (Juliantina, et al., 2009). Tanin juga mampu bereaksi dengan membran sel, inaktivasi enzim, dan destruksi atau inaktivasi fungsi materi genetik (Juliantina, et al., 2009). Senyawa lainnya dari kulit manggis yang memiliki aktivitas antibakteri adalah flavonoid. Flavonoid mampu membentuk senyawa kompleks terhadap protein ekstraseluler yang mengganggu integritas membran sel bakteri, serta bersifat koagulator protein (Juliantina, et al., 2009). Hasil penelitian ini diketahui pada uji statistik pada kelompok kontrol dan kelompok perlakuan 12,5% didapatkan hasil tidak signifikan. Sedangkan pada uji statistik pada kelompok kontrol dengan kelompok perlakuan 25% didapatkan hasil yang signifikan. Hal ini menunjukkan bahwa kadar hambat minimum pada kulit manggis tidak berada pada 12,5% tetapi berada diantara

41

rentang 12,5% sampai 25%. Hasil ini berbeda dengan penelitian dari Poeloengan & Praptiwi (2010) dimana kadar hambat minimum ekstrak kulit manggis untuk bakteri gram positif (Staphylococcus aureus ATCC2592 dan S.epidermidis) adalah pada konsentrasi di atas 3,125% sedangkan dari hasil penelitian yang telah dilakukan diketahui bahwa kadar hambat minimum ekstrak kulit manggis terhadap bakteri Shigella dysenteriae adalah pada konsentrasi diatas 12,5%, karena dari hasil uji statistik diketahui bahwa kelompok kontrol dengan kelompok perlakuan 12,5% menunjukkan hasil tidak signifikan. Pada penelitian ini, peneliti mempunyai beberapa keterbatasan antara lain peneliti hanya melakukan penelitian dengan kulit manggis yang mengandung xanthone, flavonoid dan tanin tanpa meneliti tentang zat aktif dari ekstrak kulit manggis manakah yang paling efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae. Ekstrak yang dihasilkan dari masing-masing soxhletasi tidak sama dan keterbatasan dalam penghitungan koloni, dimana koloni yang menggerombol dihitung sebagai satu hitungan, kondisi ini menghasilkan data yang sangat bervariasi, sehingga

mempengaruhi hasil penelitian.

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1. Kesimpulan Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan disimpulkan bahwa: 5.1.1. Ekstrak kulit manggis mempunyai pengaruh sebagai antimikroba dalam menghambat pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae secara in vitro. 5.1.2. Terdapat pengaruh antibakteri kulit manggis konsentrasi 25%, 50% dan 75% terhadap Shigella dysenteriae secara in vitro. 5.1.3. Terdapat perbedaan efek antibakteri Shigella dysenteriae in vitro dari ekstrak kulit manggis (Garcinia mangostana L.) berbagai konsentrasi (25%, 50%, dan 75%). 5.2. Saran 5.2.1. Perlu dilakukan penelitian lanjutan dengan melakukan fraksinasi kandungan ekstrak kulit manggis untuk mengetahui kandungan mana yang paling efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae. 5.2.2. Perlu dilakukan penelitian dengan metode yang sama dengan menggunakan konsentrasi rentang antara 12,5%-25% untuk mengetahui konsentrasi awal yang dapat menghambat

pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae.

42

DAFTAR PUSTAKA Acumedia, 2011. Salmonella – Shigella Agar.( http://www.neogen.com/Acumedia/pdf/ProdInfo/7152_PI.pdf) dikutip 19 Maret 2013 Agtini, Magdarina D., 2005, The burden of diarrhea, shigellosis, and cholera in North Jakarta, Indonesia: findings from 24 month surveillance. BMC InfectDis.; 5: 89. Lincensee BioMed Central Ltd. Anonim, 2009, (http://id.wikipedia.org/wiki/Manggis) dikutip 20 Desember 2012 Anonim, 2012, (http://water.me.vccs.edu/courses/ENV108/Lesson5_print.htm) dikutip 4 Desember 2012 Anonim, 2012, (http://www.sehatnews.com/wp-content/uploads/2012/03manggis610x250.jpg) dikutip 4 Desember 2012 Bercion, Raymond et all, 2008, Distribution andantibiotic susceptibility of Shigella isolates in Bangui, Central African Republic, Tropical Medicine & Internal Health, Blackwell PublishingLtd, Central Africa. Buchanna and N.E Gibson, 1974, Bergey’s Manual of Determinature, Avi Publising Omny. Inc West Post Connection. Dahlan, Lidyawati; A. Zulkiflil A. Arsunan, 2012, Faktor Resiko Diare Shigellosis pada Anak Balita, avialable: http://repository.unhas.ac.id/bitstream/handle/123456789/3035/diare%20s higellosis.pdf?sequence=1 dikutip 20 Oktober 2012 Granner, Daryl. K., Weil, P. Anthony., 2009. Biokimia Harper. Ed. 27. Penerbit Buku Kedokteran: EGC, Jakarta. Hanafiah, K.,A., 2011, Rancangan Percobaan Teori dan Aplikasi, PT Raja Grafindo Persada, Jakarta, 6 Hartanto, Setiawa nudhi, 2011, Mengobati Kanker dengan Manggis. Second hope. Yogyakarta Hastuti, U. S., 2007, Efek Antimikroba Dari Ekstrak Biji dan Daun Mimba (Azadirachta indica A. Juss.) Terhadap Pertumbuhan Malassezia globisa , Jurnal Kedokteran Brawijaya, Vol XXIII, No. 2, Malang, 65-70 Herwana, Elly., Surjawidjaja., Julius E, Salim., Oktavianus Ch., Indriani, Novia., Bukitwetan, Paul., Lesmana, Murad., 2010, Shigella-Associated Diarrhea in Children in South Jakarta, Indonesia, Southeast Asian j Trop Med Public Health. 418-425

43

44

ICUC, 2003, Fruit to the Future Mangosteen, Factsheet, No 8, International Centre for Underutilized Crops. Iswari, Kasma., 2011, Kulit Manggis Berkhasiat Tinggi. Asosiasi pengusaha minuman kesehatan (APMK).,Madya Centradifa. Iwalokum BA, Gbenle GO, Smith SI, Ogunledun A, Akinsinde, Omonighbehin EA, 2001, Epidemiology of Shigellosis in Lagos, Nigeria: trends in antimicrobial resistance, J Health popul Nutr,;19:183-90, Jawetz, E.,Melnick, J. L, Adelberg, E. A., 2008, Mikrobiologi Kedokteran, Edisi 23, EGC, Jakarta, 66-68, 251-259 Juliantina R, Citra DA, Nirwani B, Nurmasitoh T, & Bowo ET. 2009. Manfaat sirih merah (Piper crocatum) sebagai agen antibakterial terhadap bakteri gram positif dan gram negatif. Jurnal Kedokteran Kesehatan Indonesia. Vol. 1(1):15-30 Naim, R, 2004, Senyawa antimikroba dari tanaman. www.kompas.com/kompascetak/0409/15/sorotan/1265264.htm dikutip 18 Juni 2012 Neibuhr, K., Sansonetti PJ, 2000, Invation of epithelial celss by bacterial pathogen the paradigm of Shigella, Subcell Biochem, 33:251-287 Nugroho, A.E. 2012, Manggis (Carcinia mangostana L): dari Kulit Buah yang Terbuang hingga Menjadi Kandidat Suatu Obat, Laporan Penelitian, Laboratorium Farmakologi dan Toksikologi dan Farmasi Klinik Fakultas Farmasi UGM, Yogyakarta. Okada, T, 2005, Systematic and health effect of chemically distinct tannins in medical plant, Phytochemisttry, 66: 2012-31. Philpott DJ., Edgeworth JD, Sansonetti PJ, 2000, The pathogenesis of Shigella flexneri infection: lesson from in vitro and in vivo studies, Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci, 355(1387):575-86. Poeloengan, M dan praptiwi, 2010, Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kulit Manggis (Garcinia mangostana linn.) Media Kesehatan, Vol 20(2):65-9 Terjemahan Kosasih Padmawinata, Ed.6, Penerbit ITB, Bandung. Pratiwi, Sylvia T., 2008, Mikrobiologi Farmasi, Erlangga Medical Series, Jakarta, 188-91 Raharni, 2000, Hubungan antara Waktu Kadaluwarsa Ampisilina dengan Daya Hambat Pertumbuhan E.coli Secara in vitro, Cermin Dunia Kedokteran, Jakarta

45

Sakagami, Y., M. Iinuma, K. G. Piyasena, and H. R. Dharmaratne, 2005, Antibacterial Activity of Alpha-Mangosteen Against Vancomycin Resistant Enterococci (VRE) and Synergism with Antibiotics, Phytomedicine, 12:203-208 Subroto, M.A., 2008, Real Food True Health. Agromedia Pustaka, Jakarta Sukadana, I.M., 2009, Senyawa Antibakteri Golongan Flavonoid dari Belimbing Manis, Jurnal Kimia, 109-16. Suksamran S, Suwannapoch N, Phakhodee W, Thanuhiranlert J, Ratananukul P, Chimnoi N, Suksamrarn A., 2003, Antimycobacterial activity of prenylated xanthones from the fruits of Garcinia mangostana, Chem Pharm Bull (Tokyo), 51(7):857-59. Sya’roni, A., 2006. Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Jilid III Edisi IV. Jakarta: Pusat Penerbitan, Departemen Ilmu Penyakit Dalam Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. 1839-41 Winiati, 2000, Aktivitas Antimikroba Bumbu Masakan Tradisional Hasil Olahan Industri Terhadap Bakteri Patogen dan Perusak, Institut Pertanian, Bandung. World Health Organitation, 2005, Guidelines for the control of shigellosis, including epidemic due to Shigella dysenteriae 1 ( http://whqlibdoc.who.int/publications/2005/9241592330.pdf ) dikutip 24 September 2012 Zarena, A.S. & Sankar, U.K. 2008. Screening of xanthone from mangosteen (Garcinia mangostana L.) peels and their effect on cytochrome c reductase and phosphomolybdenum activity. Journal of Natural Products, Vol. 2:23-30

46

Lampiran 1. Ethical Clearance

47

Lampiran 2. Sertifikat Bakteri Shigella dysenteriae

48

Lampiran 3. Surat hasil penelitian

49

50

Lampiran 4. Surat hasil penelitian

51

Lampiran 5. Hasil Uji Deskriptif
a,b,c

Descriptives kelompok Mean 95% Confidence Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance 1 Std. Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis jmlhkoloni Mean 95% Confidence Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance 2 Std. Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis

Statistic 549.80 Lower Bound Upper Bound 6.70 1092.90 531.00 310.00 191317.700 437.399 187 1251 1064 732 1.350 1.109 465.20 Lower Bound Upper Bound 101.15 829.25 478.50 600.00 85962.700 293.194 0 691 691 508 -1.292 .803

Std. Error 195.611

.913 2.000 131.120

.913 2.000

a. jmlhkoloni is constant when kelompok = 3. It has been omitted. b. jmlhkoloni is constant when kelompok = 4. It has been omitted. c. jmlhkoloni is constant when kelompok = 5. It has been omitted.

52

Lampiran 6. Uji Normalitas dan Homogenitas
c,d,e

Tests of Normality kelompok Kolmogorov-Smirnov Statistic 1 jmlhkoloni 2 .277 5 .308 df 5
a

Shapiro-Wilk Statistic .844 .841 df 5 5 Sig. .175 .167

Sig. .136 .200
*

*. This is a lower bound of the true significance. a. Lilliefors Significance Correction c. jmlhkoloni is constant when kelompok = 3. It has been omitted. d. jmlhkoloni is constant when kelompok = 4. It has been omitted. e. jmlhkoloni is constant when kelompok = 5. It has been omitted.

Test of Homogeneity of Variancea,b,c Levene Statistic Based on Mean Based on Median jmlhkoloni Based on Median and with adjusted df Based on trimmed mean .922 .187 .187 .836 df1 1 1 1 1 df2 8 8 6.579 8 Sig. .365 .677 .679 .387

a. jmlhkoloni is constant when kelompok = 3. It has been omitted. b. jmlhkoloni is constant when kelompok = 4. It has been omitted. c. jmlhkoloni is constant when kelompok = 5. It has been omitted.

53

Lampiran 7. Hasil uji Kruskal Wallis

Ranks kelompok 1 2 3 jmlhkoloni 4 5 Total Test Statisticsa,b jmlhkoloni Chi-Square df Asymp. Sig. a. Kruskal Wallis Test b. Grouping Variable: kelompok 19.165 4 .001 5 5 25 8.50 8.50 N 5 5 5 Mean Rank 20.60 18.90 8.50

Lampiran 8. Hasil uji Mann-Whitney
Ranks N 5 5 10
a

jmlhkoloni

kelompok 1 2 Total Test Statistics

Mean Rank 5.60 5.40

Sum of Ranks 28.00 27.00

jmlhkoloni Mann-Whitney U Wilcoxon W Z Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Grouping Variable: kelompok b. Not corrected for ties. .000 15.000 -2.785 .005 .008
b

54

Ranks

kelompok 1 jmlhkoloni 3 Total

N 5 5 10

Mean Rank 8.00 3.00

Sum of Ranks 40.00 15.00

Test Statisticsa jmlhkoloni Mann-Whitney U Wilcoxon W Z Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Grouping Variable: kelompok b. Not corrected for ties. .000 15.000 -2.785 .005 .008b

Ranks kelompok 1 jmlhkoloni 4 Total Test Statistics
a

N 5 5 10

Mean Rank 8.00 3.00

Sum of Ranks 40.00 15.00

jmlhkoloni Mann-Whitney U Wilcoxon W Z Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Grouping Variable: kelompok b. Not corrected for ties. .000 15.000 -2.785 .005 .008b

55

Ranks kelompok 1 jmlhkoloni 5 Total N 5 5 10 Mean Rank 8.00 3.00 Sum of Ranks 40.00 15.00

Test Statistics

a

jmlhkoloni Mann-Whitney U Wilcoxon W Z Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Grouping Variable: kelompok b. Not corrected for ties. Ranks kelompok 2 jmlhkoloni 3 Total N 5 5 10 Mean Rank 7.50 3.50 Sum of Ranks 37.50 17.50 .000 15.000 -2.785 .005 .008b

Test Statisticsa jmlhkoloni Mann-Whitney U Wilcoxon W Z Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Grouping Variable: kelompok b. Not corrected for ties. Ranks kelompok 2 jmlhkoloni 4 Total N 5 5 10 Mean Rank 7.50 3.50 Sum of Ranks 37.50 17.50 2.500 17.500 -2.353 .019 .032
b

56

Test Statistics

a

jmlhkoloni Mann-Whitney U Wilcoxon W Z Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Grouping Variable: kelompok b. Not corrected for ties. Ranks kelompok 2 jmlhkoloni 5 Total N 5 5 10 Mean Rank 7.50 3.50 Sum of Ranks 37.50 17.50 2.500 17.500 -2.353 .019 .032
b

Test Statistics

a

jmlhkoloni Mann-Whitney U Wilcoxon W Z Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Grouping Variable: kelompok b. Not corrected for ties. Ranks kelompok 3 jmlhkoloni 4 Total N 5 5 10 Mean Rank 5.50 5.50 Sum of Ranks 27.50 27.50 2.500 17.500 -2.353 .019 .032
b

57

Test Statisticsa jmlhkoloni Mann-Whitney U Wilcoxon W Z Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Grouping Variable: kelompok b. Not corrected for ties. 12.500 27.500 .000 1.000 1.000b

Ranks kelompok 3 jmlhkoloni 5 Total N 5 5 10 Mean Rank 5.50 5.50 Sum of Ranks 27.50 27.50

Test Statisticsa jmlhkoloni Mann-Whitney U Wilcoxon W Z Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Grouping Variable: kelompok b. Not corrected for ties. 12.500 27.500 .000 1.000 1.000b

Ranks kelompok 4 jmlhkoloni 5 Total N 5 5 10 Mean Rank 5.50 5.50 Sum of Ranks 27.50 27.50

58

Test Statistics

a

jmlhkoloni Mann-Whitney U Wilcoxon W Z Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Grouping Variable: kelompok b. Not corrected for ties. 12.500 27.500 .000 1.000 1.000
b

59

Lampiran 9. Gambar Penelitian

Buah Manggis

Pengeringan kulit manggis

Proses penghalusan kulit manggis

Proses ekstraksi metode soxhlet

Penanaman bakteri di SSA

Alat penghitung koloni

60

Ekstrak kering kulit manggis

Mengoleskan dengan spreader

Kelompok 1 (kontrol negatif)

Kelompok 2 (12,5%)

Kelompok 3 (25%)

Kelompok 4 (50%)

61

Kelompok 5 (75%)

Kelompok 1 (kontrol negatif)

Kelompok 2 (12,5%)

Kelompok 3 (25%)

Kelompok 4 (50%)

Kelompok 5 (75%)