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Atlas Abbott

Atlas Abbott

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LA MORFOL061A DE LAS CELULAS DE LA SANGRE
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EN FROTIS DE SANGRE PERIFERICA y DE MEDULA aSEA N TENIDOS CON EL COLORANTE DE WR!GHT

Dr. L. 'vV. Diggs, Dorothy

Sturm y Ann Bell de Tennessee, Sección de !-Iemato!og{a

Escueia de Medicina de la Universidad

y Hospitales de la ciudad de Memphis, Memphis, Tennessee

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ABBOTT LABORATORIES
Ccp~Tight, J

© 1971-Abbott

Laboratories, North Chicago, 111., ,S,A. U

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células mesenquimatosas indiierendadas. A parJr de estas células madre, se diferencian clonas de células que acaban por aparecer en la sangre circulante como glóbulos rojos, plaquetas y varios tipos de glóbulos blancos. Las células más primitivas de cada serie presentan caracteres morfológicos análogos y no pueden distinguirse entre 'sÍ basándose solamente en su aspecto. Se les designa con términos específicos, tales como "mieloblastos", "linfoblastos" o "proeritroblastos", según el tejido en que se hallan, las células con que están asociadas y el tipo definitivo de célula que están destinadas a producir (Tablas 1 y II). A medida que las células embrionarias evolucionan desde sus formas primitivas a tipos celulares maduros, presentan modificaciones del núcleo y del citoplasma comunes a todas las células (Fig. 1). Proceso de maduración. En términos generales, las células jóvenes suelen ser grandes y se vuelven progresivamente más pequeñas al adquirir madurez (Fig. 1 A). Los núcleos de células jóvenes en la secuencia de maduración son grandes y voluminosos en relación al citoplasma. Al madurar las células el núcleo disminuye de tamaño en términos absolutos y relativos (Fig. 1 B). En las células de la serie eritrocítica, el pequeño núcleo degenerado es expulsado de las células maduras. El citoplasma de las células primitivas es esencialmente azul y contiene grandes cantidades de ácido ribonucleico (RNA) que tiene afinidad para el colorante alcalino o azul (azul de metileno). Al aparecer los elementos figurados y los productos de secreción el citoplasma tiende a tomar un tinte rojizo, menos azul. (Fig. 1 A). Los filamentos de cromatina nuclear de células jóvenes contienen ácido desoxirribonucleico (DNA) que tiene afinidad para el colorante ácido (eosinófilo) rojo. Al madurar el núcleo se·
FIGURA

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general
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~ ~ x-~orca...7ibia de: rojo pá.:ido al 3 '. El criterio más seguro de la edad de una célula no es su tamaño ni su color, sino la estructura de la cromatina nuclear. En células no diferenciadas o blastos, los filamentos de cromatina nuclear son netamente visibles. La cromatina es de tinte y consistencia uniforme'. En ciertas células, la red cromatínica es lineal; en otras los filamentos superpuestos, tortuosos y retorcidos de cromatina aparecen como granulación roja o cortos bastoncillos. Cuando en el acto de la aspiración o extensión en el portaobjeto se lesiona el delicado filamento de cromatina, este último se encoje y enrolla pero queda intacto y netamente visible. Cuando el núcleo degenera, los enlaces de la estructura helicoidal de las largas moléculas de DNA se rompen, los filamentos de cromatina se ensanchan y toman un aspecto más tosco y abultado. En' las fases· degenerativas y ::;enilesfinales el núcleo es pequeño, redondo, obscuro y amorfo (Fig. 1 C). Una de las características de inmadurez en las' células 'sanguíneas es la presencia de nucléolos en el núcleo. Estas pequeñas inclusiones de materia citoplásmica producida dentro del núcleo, revelan actividad metabólica y crecimiento. Los nucléolos suelen distinguirse particularmente bien en frotis muy delgados; suelen ser poco visibles en frotis gruesos y teñidos excesivamente. Los nucléolos varían de tamaño, número y aspecto; su diámetro suele estar comprendido entre 2 y 4 micras, su forma es redonda u ovalada y se observan de 1 a 4 nucléolos por célula. Son de estructura bastllilte homogénea y su color es igual al del citoplasma. Con los colorantes de azul de metileno y eosina, el tinte es azulado. Los nucléolos no suelen tener membrana, pero las masas intranucleares suelen comprimir los filamentos cromatínicos adyacentes simulando una zona ¿ limítrofe obscura (Fig:..1 D, Fig:-8.. ,., D, G).
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PROCESO

DE MADURACION

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A Tamaño de la célula y color del citoplasma

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B Tamaño y color del núcleo C Estructura de la cromatina nuclear

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eritroblasto ortC]¡cromático,

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Los cambios combinados de tamaño y color del citoplasma y del tamaño, color y estructura del núcleo quedan ilustrados en la Fig. 1D. La morfología del citoplasma es modificada por el traumatismo mecánico ejercido en las células por la presión de las células adyacentes y su actividad amiboide. Las células primitivas suelen 'estar fijadas por sus prolongaciones citoplásmicas en la substancia fundamental. Cuando son arrancadas, por ejemplo durante la aspiración de la medula ósea, los bordes son desgarrados y presentan un aspecto irregu-. lar, "deshilachado". Las células maduras y libres en la sangre circulante tienen bordes lisos. Las células activamente amiboides, como los granulocitos y linfocitos maduros, suelen tomar una forma esférica al ser expuestas al aire y cu~do se extienden en un portaobjeto. Células con lentos. movimientos amiboides, como los grandes mononucleares y los histiocitos, pueden presentar seudópodos (Fig. 6 H, 1) .• El tejido fiJo y células jóvenes que se mueven lentamente tienen núcleos redondos, ovalados o ligeramente hendidos. Las células maduras que se mueven activamente, como los monocitos y granulocitos, tienen núcleos hendidos, reniformes, lobulados o segmentados CFig.3, Fig.6). Los núcleos de los linfocitos maduros suelen ser redondos, pero pueden ser ligeramente hendidos. Los núcleos de los glóbulos rojos y de las células plasmáticas son esféricos en todas las fases de maduración. Las células inmaduras, metabólicamente activas, presentan en su citoplasma una zona relativamente pálida adyacente al núcleo. Esta región, conocida como zona de Golgi, contiene retículo endoplásmico uniforme y centríolos. En la zona yuxtanuclear suelen congregarse mitócondrias incoloras (acromáticas). La zona pálida cerca del núcleo puede verse partic;;:larmente bien en los plasmocitos, pero se suele distinguir también en células sanguíneas inmaduras de otros tipos.

Las células madre (blastos) no contienen gránulos. En las series de células que típicamente forman gránulos, estos últimos son inicialmente obscuros y azulados. Al madurar las células los gránulos se vuelven más pálidos, más rojizos y menos azulados, como se observa en los eosinófilos y neutrófilos (Fig. 3). Substancias producidas en el interior de la célula, como la globulina en los plasmocitos y la hemoglobina en los glóbulos rojos, son indicios de madu~ración. La fagocitosis de partículas es una manifestación de actividad funcional característica de las células diferenciadas, pero la falta de fagocitosis en una célula determinada, en un momento dado, carece de valor para apreciar el grado de madurez de la célula. Las características citoplásmicas, granulares y nucleares suelen ser bien sincronizadas en células normales, mientras que en condiciones patológicas las secuencias de maduraci6n de los diferentes elementos estructurales de las células pueden no coincidir entre sÍ, como en los glóbulos rojos nucleados de la anemia perniciosa que pueden preseJ1tar procesos avanzados de síntesis de hemoglobina y núcleos inmaduros, o en la anemia ferropénica, donde puede haber formación inadecuada de hemoglobina en células con núcleos pÍcnóticos.

Proceso de reproducción. Además de las modificaciones morfológicas de las células que reflejan los procesos de diferenciación y maduración, se observan otras alteraciones morfológicas que son manifestaciones de reproducción y multiplicación (Fig. 2). Algunas células primitivas en los tejidos hemopoyéticos quedan indiferenciadas y se dividen por mitosis, produciendo células hijas. que tampoco se diferencian. Otras células, tras una mitosis, se diferencian hasta cierto punto antes de volver a dividirse. Al dividirse por mitosis estas células algo más maduras, las células hijas conservan las características citoplásmicas de la célula madre.

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aspecto irregular. El citoplasma es azul en las células no difere!'!cia~ :. e:: los "blastos" que participan en el ciclo reproduc:ivo. ?=-c> en las células más diferenciadas, como los glóbu20s r-o;rE nucleados que contienen hemoglobina o los eos:nó::':o;; == período de mitosi,s, el color del citoplasma y la es-::.:~~ en el interior del mismo dependen del estado ae de5G..~:::: de la célula individual en el momento de entrar e::,-¡¿, ~~ en el ciclo reproductivo. La cuestión de saber si las cé:~ se diferencian más mientras participan en la fase prerci:.:o:ica, todavía no ha sido contestada definitivamente. Los núcleos celulares pueden presentar una o n:á.s ci.~siones mitóticas sin la correspondiente segmentació:: ¿=.: citoplasma, produciendo así células gigantes con ::-~cl",3:; múltiples, como por ejemplo en el caso de los megaca:-:oci, tos, o con núcleo doble como se observa en los pla.,,~O\..~:a:; y glóbulos rojos nucleados. En otras células, los cror::a>.y,mas pueden replicarse sin que la' membrana nuciear s¿ rompa y sin división nuclear (~ndomitosis). Entre o~c.." anomalías de la división nuclear pueden citarse: nú¿eo> con número insuficiente o ex<:esivo de cromosomas; ::::cleos múltiples, de tamaño, color y estructura variable dentro de una sola célula; número variable de núcleos; :í::eas de segmentación o hendiduras.

TABLA 1 NOMENCLATURA

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mielocito _citoprorrubricito _citorubriblasto metarrubricito rubricitica Serie rubricito metamielocito mieloblasto Sufijo ( promielocito I mielociticaeritrocitica)

basófilo)

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Serie linfocitica linfocito linfoblasto prolinfocito

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ISerie

TABLA

11 CELULAS

SANGUINEAS

TEJIDOS HEMATOPOYETICOS SANGRE CIRCULANTE Proeritrobiasto (rubrib/asto) __ Eritroblasto basófilo __ (prorrubricito) ' Promegacariocito Eritroblasto (rubricito) Megacariocito policromatófilo __ Eritroblasto ortocromático __ (metarrubricito) Metamegacariocito Eritrocito difusamente basófilo Eritrocito.

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Megacariob/asto __

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Metamielocito Promie/ocito ~Mie/ocito ,, ~Mielocito Monoblasto Linfoblasto Plasmoblasto Promonocito Prolinfocíto Proplasmocito eos. neu. Mielocito baso

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Neutrófi/o en banda (cayado)

segmentado Neutrófilo basófilo Monocito Linfocito

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Plasmocito

Neutrófilos, eosinófilos y basófilos
Los LEUCOCITO S GRANULARES (granuloCitos) se forman en la medula ósea, de células no diferenciadas llamadas mieloblastos. La maduración de las células de la serie mieloide se caracteriza por la producción de gránulos metacromáticos obscuros que aumentan en cantidad y más tarde son reemplazados por gránulos específicos, que difieren en su afinidad por varios colorantes. Las células que muestran afirridad por el colorante azul o básico se denominan basófilos; las que se tiñen de rojo anaranjado mediante la eosina, eosinófilos; las células granulares que no se tiÍíen intensamente con uno u otro de estos colorantes se denominan neutróf:lOs. Cuando las células adquieren movilidad, los nÚcleos de las células granul::>,res (neutrófilos, eosinófilos y basófilos) cambian generalmente de forma, tomando aspecto multilobular y se designan entonces respec,tivamente:mielocitos, metamielocitos, formas en banda y segmentados (Fig.'3).

en banda (neutrófilo no segmentado, en cayado, no filamentoso). A medida que van madurando los metamielocitos neutrófilos la concavidad del núcleo se hace más pronunciada, hasta que el hueco ocupa más de la mitad del diámetro del hipotético núcleo redondo. Los extremos del núcleo son aproximadamente paralelos dándole al núcleo un aspecto de herradura. Los neutrófilos en banda son algo más pequeños que los metamielocitos. El núcleo presenta alteraciones degenerativas y generalmente se observa una masa obscura, picnótica en ambos polos, donde se formará el lóbulo. Los gránulos de los neutrófilos en banda son pequeños, distribuidos uniformemente y presentan varios tintes rosados y azules (Fig. 3 1, Fig. 4 1). /

Neutrófilo

N eutrófilo segmentado

Mieloblasto.

El diámetro de los mieloblastos varía de 15 a 20 micras. Estas células contienen moderada cantidad de citoplasma no granuloso y. de color azulado, que se tiñe irregularmente y es más pálido en las proximidades del nÚcleo que en ia periferia. Con frecuencia se observan prolongaciones citoplásmicas. El nÚcleo es redondo y se tiñe predominantemente de rojo. La red de cromatina es delicada, bien definida y uniformemente teñida. Suelen observarse dos o más nucléolos (Fig. 3 A).

Promielocitos (progranulocito~). El mieloblasto se con:" vierte en promielocito cuando forma gránuló,'3 netamente visibl~s (Fig .. 3 B). Al principio, los gránulos son obscuros y se tiJi.~n predominantemente en azul o azul morado. Los grán,-c' os son visibles cuando están situados por encima o por debajo del nÚcleo que es más pálido y de tinte más rojizo. Los núcleos son redondos y relativamente grandes; suelen poder distinguirse nucléolos. El citoplasma es azul, con una zona relativamente pálida adyacente al núcleo. Los bordes del citoplasma son lisos y la célula no suele pr~sentar depresiones producidas por .células vecinas. Dado que algunos de los granulocitos jóvenes todavía son capaces de reproducirse, pueden ser de tamaño bastante variable según el período del ciclo mitótico de cada célula individual. El promielocito se convierte en mielocito cuando los gránulos se diferencian en grado tal que pueden clasificarse en elementos basófilos, eosinófilos o neutrófilos. Mielocito neutrófilo.
El primer signo de diferenciación ne'~~rofila consiste en la aparición de una pequeña isl~ relativamente pálida de vagos gránulos rojizos adyacente al núcleo (Fig. 3 G). En los mielocitos más viejos los gránulos obscuros se hacen menos visibles, predominando los gránulos neutrófilos. Los mielocitos neutrófilos suelen ser más pequeños que los promielocitos y tienen relativamente más citoplasma. Los núcleos son redondos, ovalados o achatados, por un lado. Los gruesos filamentos de cromatina se tiñen irregularmente. Los nucléolos no se distinguen claramente (Fig.:3 G, Fig. 7 A, C).

(neutrófilo. filamentos o o polimorfonuclear, granulocito neutrófilo polinuclear). Esta célula se distingue del neutrófilo en banda por el núcleo que ahora está separado en lóbulos bien definidos, unidos por un filamento muy fino. El tamaño de los neutrófilos maduros es aproximadamente doble comparado con los eritrocitos. Si se ha teñido correctamente, el citoplasmapresenta un tinte rosado claro; los pequeños y numerosos _ gránulos están regularmente distribuidos y son de color rosado claro hasta azul negruzco (Fig. 3 J, Fig. 4 C, E). En la sangre normal, la mayoría de los granulocitos neutrófilos presentan dos o tres lóbulos; de vez en cuando se observan cuatro o cinco lóbulos. En estados patológicos, tales como la anemia perniciosa, se ven células hiperlobuladas con seis o más lóbulos. La transición de una fase de desarrollo a otra en los granulocitos neutrófilos es gradual y muchas células intermediarias son difíciles de distinguir unas de otras. En caso de duda, se suele íncluir la célula en la categoría más madura, pues probablemente pertenece a ella. Por consi-

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SISTEMA

MIELOCITICO

(GRANULOCITICO)

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(juvenil). Los metainielocitas neutrófilos tienen un núcleo ligerament~ hendido y ;><:que.ñosgránulos azul-rosados. Estas células son algo más ~ueñas que los mielocitos, su núcleo también es propor:ionalmente más. pequeño y la estructura de la cromatina ;:s meno~ precisa (Fig. 3 H, Fig:7 B). Los metamielocitos !2e'.ltrófilos raramente se ven en la sangre periférica de indhiduos normales, pero son frecuentes en caso de hipérplasia mielocítica.

A Mieloblasto 8 Promielocito (progranulocito) C Mielocito !:>asófilo D Metamielocito basófilo E Basófilo en banda F Basófi:;:; segmentado G Mielocito neutrófilo H Metamielocito neutrófilo I 'Neutrófilo en banda J Neutrófilo segmentado K Mielocito eosinófilo L Metamielocito eosinófilo M Eosinófilo en banda N Eosinófilo segmentado

o
cuando no se sabe si una célula es un metamielo¿-..:; " u.. neutrófilo en banda, se la designará como neutró:: =:: Oanda; en caso de duda entre un neutrófilo en banda ! ~ ::eutrófilo segmentado, se le llamará segmentado .. :.....:.:; lóbulos de los neutrófilos segmentados suelen estar =:ig-uos o superpuestos ocultando el filamento de coneDX-.. eo.-to : ocurre especialmente en los frotis gruesos. Si se ;-~e seguir el borde de un lóbulo por una línea inintem=pida a través del istmo es de suponer que los lóbulos ~-cin superpuestos y que la célula es segmentada, aunque el 5.lamento no pueda distinguirse .. 2l tratar de diferenciar los neutrófilos en sus diferentes fases de desarrollo, tiene sentido solamente si los frotis son :cJ.uyfinos y bien teñidos, si se dispone de un buen microscopio y si el técnico conoce perfectamente los detalles morfológicos de los glóbulos sanguíneos y dispone de suficiente tiempo. Cuando el tiempo apremia en el hospital o consultorio y en caso de urgencia, se recomienda clasificar ¡os granulocitos simplemente como neutrófilos, eosinófilos y basófilos, sin tratar de determinar sus fases de maduración, reservando los recuentos diferenciales para casos que presenten problemas hematológicos especiales. Estos recuentos diferenciales deben hacerse solamente utilizando el método preciso de Schilling, que asegurará resultados :idedignos para la valoración clínica. ~-:2.
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(acidófilo). Los eosinófilos se caracterizan por gránulos esféricos relativamente grandes, que poseen '.llla afinidad especial por la eosina. Loseoswófilos jóvenes contienen unos pocos gránulos esféricos de tintes rojizos, que aparecen entre los gránulos obscuros, no específicos, de los promielocitos. A medida que los eosinófilos pasan por las diversas fases de su desarrollo, el tinte de los gránulos pasa del morado rojizo al rojo anaranjados; los gránu-

E os in ófilo

los azul 0l?scuros, característicos del promielocito y mielocito joven desaparecen (Fig. 3 K-N). Dado, que la proporción de eosinófilos suele ser baja en los' frotis de medula ósea y sangre perif~ica la separación rutinaria de los eosinófilos~en mielocitos, metamielocitos, en banda y segmentados, no ofrece utilidad clínica. Si, en cambio, la proporción de eosinófilos se halla notablemente aumentada, conviene efectuar un análisis del porcentaje de las diferentes fases de evolución. Los eosinófilos observados ,en los frotis de san:gre periférica normal, tienen aproximadamente el mismo tamaño que los neutrófilos y generalmente presentan un núcleo en banda o bilobulado. Los gránulos son esféricos, regularmente distribuidos, de tamaño uniforme y aunque llenan la célula raramente se encuentran sobre el núcleo (Fig. 3 K-N, Fig. 4 D). En las preparaciones bien teñidas los gránulos toman un color rojo anaranjado brillante, con tintes pardos. Variando el foco se puede hacer resaltar cada gránulo individualmente o revelados como pequeños círculos. Con frecuencia esta forma esférica permitirá la identificación de la célula cuando la coloración no es satifactoria (los eosinófilos se pueden identificar fácilmente sin usar colorantes, pues los gránulos son biéñ visibles, redondos, relativamente grandes y de color pardo). A veces es difícil distinguir los eosinófilos de los neutrófilos cuando los gránulos de estos últimos son muy pronunciados y de tinte obscuro; en caso de duda, la célula en cuestión se debe clasificar como un neutrófilo. Observando la parte más 'fina del campo microscópico, aumentando la iluminación y prestando atención ,al tamaño, uniformidad y aspecto de los gránulos, más bien que al color solamente, se puede llegar a distinguir las células dudosas.

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(granulocito basófilo);'Los basó'filos tienen'::Úcleos redondos, en forma de haba, banda o lobulados (:=!§:_ 3 C-F). Se los puede clasificar según la forma de los ::úcleos; en mielocitos basófilos, metamielocitos, en ba::ciG T segmentados; pero estas células son tan escasas en la periférica y la medula ósea, que no hay ventaja cl:'ruC2 clasificarlas por categorías. Los gránulos de los ba-"<5::':a:o son obscuros; suelen verse por encima, por debajo y 2 :ao lados del núcleo que es de tinte relativamente pálido (7"i;;;. distribuidos 'f 4 J). Estos gránulos están irregularmente varían en númer.o, tamaño, forma y color. Con freelE::·6 están rodeados por una zona débilmente teñida. Los mielocitos basófilos pueden confundirse con los p=mielocitos pu~s ambos tienen gránulos obscuros, a~enci:2 de gránulos' eosinófilos o n~utrófilos y un núcleo redondo: pero los mielocitos basófilos suelen ser más pequeños, tiene:: menos citoplasma y un núcleo más maduro que los promielocitos. En caso de duda, se recomienda designar tales células como promielocitos y no como mielocitos basófilos. Los gránulos neutrófilos pueden tomar un tinte obscuro o presentar los llamados "gránulos tóxicos" que superncialmente se parecen a los basófilos. En caso dé du'da, i2. célula se considerará como un neutrófilo.

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Linfocitos
BIEN LAS CELULAS morfológicamente'identificadas como linfocitos poseen' diversas funciones importantes, como la de dar origen a otras células, transportar substancÍ.a-' nutritivas (función trofocítica), producir. cuerpos in¡p.unes y transmitir la memoria inmunológica, sus característica.:; morfológicas distintivas son escasas. El citoplasma no se desarrolla más allá de la fase azul, los n(LCleos no sé segmentan, no siempre hay gránulos y no hay indicios. de fagocitosis. ' .

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4/ TIPOS DE CELULAS EN FROTIS DE SANGRE PERIFERICA DE INDIVIDUOS NORMALES

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La representación es arbitraria, siendo mayor el número de leucocitos con relación a los eritrocitos y trombocitos, de lo que suele observarse en un campo microscópico real.

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A Eritrocitos .,.. B Linfocito grande, con gránulos ázurófilos y profundas depresiones producidas por eritrocitos adyacentes. C Neutrófilo segmentado D Eosinófllo E Neutrófllo segmentado F Monocito con citoplasma azui- grisáceo, filamento grueso de cromatina y seudópodos obtusos . G Trombocitos H Linfocito I Neutrófilo en banda J Basófllo

. Los linfocitos raduros son de tamaño muy variable (Fig . 5); los pequeños son un poco más grandes que los glóbulos rojos, mientras que los grandes son del tamaño de grandes mononucleares. Entre estos extremos hay linfocito s de tamaños intermedios. Las formas relativamente voluminOSGS suelen representar células menos maduras, pero el t:L-1af.o no constituye un criterio seguro de la edad de un linfoci:c porque dichas células son fácilmente acha.tadas; además, :"-0 células grandes e intermediarias son mucho más abu:-.dantes en las partes finas que en las gruesas de un mismo frotis de sangre. '. Los linfocitos son blandos, frágiles, se lesionan fácilmente y 'pueden acusar forma\; irregulares .. La mayoría son redondos ti ovalados, con bordes lisos, pero ciertos linfocitos relativamente grandes presentan profundas depresiones producidas por eritrocitos adyacentes y tienen"bordes e~zados (Fig. 5 J,K, L; Fig. 7 G). La membrana citoplásmiez puede romperse por acción mecánica dejando escapar p~oductos de secreción que producen múltiples prolongaciones filiformes (Fig. 5 E). Entre los aspectos característicos figuran células fusiformes alargadas, con extremos agudo:; que se prolongan en.finos filamentos (Fig. 5 F). Las lin&..:; de fuerza creadas por el portaobjeto con que ss> hizo E: frotis, pueden producir múltiples célulasfusiformes cuyo:; ejes longitudinales son paralelos.

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,-. Pequeño linfocito maduro Linfocito de tamaño mediano Linfocito con núcleo hendido Q Linfocito de tamaño mediano Linfocito con prolongaciones agudas (citoplasma deshilachado); núcleo tipico. Linfocito fusiforme con núcleo hendido ' G Linfocito grande con núcleo hendido y prolongaciones agudas H Linfocito grande Linfocito grande con gránulos azurófilos J Linfocito grande con citoplasma de bordes irregulares K Linfocito con gránulos azurófilos y depresiones periféricas producidas por eritrocitos adyacentes Linfocito grande con gránulos azurófilos

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El citoplasma de los linfocitos es azul; la inten;idad varía ¿el azul celeste al azul obscuro. 'En frotisfinos y con un buen microscopio pueden observarse el! algunos linfocitos diminutos glóbulos incoloros. En ciertos estados patológicos. como la mononucleosis infecciosa, dichos glóbulos.pue¿en ser grandes, dándole a la célula url-aspecto vacuolado o esponjoso (Fig. 36 E). La mayoría de los linfocitos no contienen ve,daderos ,,,".mulos,pero en la sangre normal (sobre.todo en las célu~ relativamente grandes), pueden hallarse algunos gránu~. bien definidos (lisosomas), distribuidos irregularmente ~~_ .; B; Fig. 5 I-L; Fig. 7 1). Dichos gránulos son casi' ~¿0cos. de tamaño variable y a menudo están rodeados :.c =é. zona pálida (halo). Se les lla.ma "gránulos azuró~porque se teñían de azul celeste con los colorantes ~:¿Zd05 en años pasados. Con el colorante de Wright y ~ é. base de azul de metileno-eosina empleados en la '"~~¿2d. los gránulos en los linfocitos toman un tinte :;:.",ecio:Trtnantemente rojo. Los gránulos en linfocitos ma:='.!-'"'OS pueden ser evidentes en caso de estados infecciosos y ~!'Ó:Jicos enfermedades por virus, pero suelen observarse :-¿-='TIente en la leucemia linfocítica. Los núcleos de los ''i-:ocitos generalmente son redondos, pero pueden presen~ :.1:1 ligero surco (Fig. 5 C, F, G, K). No se observan :oc-,laSfilamentosas. La cromatina nuclear de los linfocitos "'"conglomerada y tiende a teñirse intensamente en la peri-

feria (condensaciónperiférica de la cromatina). El haz luminoso que desde abajo se proyecta sobre el núcleo teñido en obscuro, es reflejado e ilumina el homogéneo citoplasma adyacente, produciendo un halo perinuclear. En presencia de antígeno, los linfocitos se diferencian en células "blastoides" que a continuación se convierten en plasmocitos caracterizados por la proliferación de RNA y retículo endoplásmico, así como la síntesis de globulinas inmunes. Las fases transitorias entre linfocitos y plasmocitos se distinguen por un aspecto' ovalado, G'itoplasma azul obscuro, glóbulos secretorios y núcleos excéntricos. Estos proplasmocitos solían ll~marse "leucocitos' de Turk" o "de irritación". Su presencia en la sangre periférica señala una inmunorreacción celular.

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Prolinfocito y linfoblas'to. La distinCión enb~ linfocitos maduros y prQlinfócitos\se basa en pequeñas diferencias en la estructura de la cr&natina·nuclear' (Fig. 8 B, C). Los linfoblastos tienen caracte;ísticas parecidas a otros "blastos", a saber, un núcleo rojizo o morado, relativamente grande, fina cromatina nuclear, uno o v'arios nucléolos y un citoplasma azul sin gránulos (Fig. 8 A). Afecciones malignas involucrando al sistema Iinfocítico se conoce? con los nombres de ·leucemia linfocítica, linfosarcoma o leucosarcoma de tipo lirtfocítico. \.

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Monocitos / gra.ndes mononuclea.res
Los MONOCITOS suelen ser más grandes que los neutrófilos en las regiones finas del frotis, donde las células están aplastadas; pero en las regiones más· gruesas de la preparación, donde las células son más esféricas, hay menos diferencia de tamaño. Los monocitas maduros contienen una proporción relativamente abundante de citoplasma con relación al núcleo (Fig. 6). Los monocitos son de forma variable. Muchos son redondos u ovalados; otros presentan seudópodos romos que re": velan un lento movimiento (Fig. 6 E, H, 1). Esa~élulas amiboides y agresivas co'ntinúan moviéndose cuando se seca el frotis de la sangre y quedan fijadas antes de poder retraer sus extensiones citoplásmicas. Los seudópodos varían en tamaño y número. La parte exterior del citoplasma extendido (ectoplasma) tiene a menudo un aspecto transparente o hialino, contrastando con el citoplasma interior granuloso (endoplasma) (Fig. 6 1). El citoplasma de monocitos en el frotis teñido con colorante de Wright es de color gris azulado opaco, a diferencia del citoplasma de los neutrófilos en campos adyacentes que es de color menos intenso, rosado. Los gránulos de los monocitos suelen ser numerosos, finos, levemente teñidos y regularmente distribuidos, dan~ do a las células un aspecto de vidrio esmerilado (Fig. 6 A). . En otras células, además de finas granulaciones, pueden hallarse en número variable gránulos azulados bien visibles (Fig:.6 C). Las vacuolas digestivas suelen contener eritrocitos, leucocitos, núcleos, fragmentos celulares, pigmentos, bacterias y hongos fagocitados. Los riúcleos de los monocitos generalmente son redondos o reniformes, pero pueden presentar hendiduras profundas o dos o más lóbulos separados por delgados filamentos (Fig. 6 G). Una de las características más distintivas y de valor diagnóstico de los monocitos es la presencia de lóbulos superpuestos, dando al núcleo un aspecto de circunvoluciones cerebrales (Fig, 6 B, C, F). Otra peculiaridad son las gruesas líneas que marcan los contornos de los lóbulos. También es de valor diagnóstico la tendencia de la cromatina nuclear de separarse, dejando espacios claros entre las hebras de cromatina, contrastando con la cromatina conglomerada de los linfocitos.

Promonocitos y monoblastos. No pueden identificarse como tales en frotis de medula ósea ni de sangre periférica, salvo en estados con marcada proliferación de células de tipo monocítico, como en la leucemia monocítica. La identificación de células mononucleares jóvenes se basa en los núcleos hendidos y plegados y la asociación con

FIGURA A

6/ MONOCITOS
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MO¡lOCitoon aspecto de "vidrio c esmerilado", 9 ranulaciones finas distribuidas uniformemente, algunos .gránulos azurófilos y vacuolas en el citoplasma B Monocito con citoplasma azul grisáceo, granulaciones y núcleo lobulado con cromatina filiforme C Monocito con granulación bien visible y núcleo profundamente hendido D Monocito sin surcos nucleares E Monocito de color azul grisáceo, núcleo en banda, cromatina filiforme, seudópodos obtusos y gránulos F Monocito de color azul grisáceo, bordes irregulares y núcleo multilobulado G Monocito con núcleo segmentado . H Monocito con múltiples seudópodos obtusos no granulares, hendiduras y pliegues en el núcleo I Monocito con vacuolas, ectoplasma no granular y endoplasma granular

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:::D:;ocitosmás maduros con seudópodos romos, vacuolas y ?é'~~cu:as fagocitadas en el citoplasma. En la leucemia :::o:-.ociticase llaman monoblastos,' si la cromatina nucle,!r es ¿:la y bien visible, si se pueden distinguir nucléolos y si no hay gránulos en el citoplasma (Fig. 38 A, B).

JIOilOCitos: cómo se distinguen de los neutrófilos y de los grandes linfocitos
Los :>!OXOCITOS son las células de la sangre periférica más diiíciles de identificar y distinguir de otras células (Fig, 7), :\ menudo se confunden con los neutrófilos porque pueden contener gránulos bien visibles (Fig. 7 D-F) Y núcleos 10Dulados (Fig. 7 E, F). Frecuentemente se toman por grandes :Wocitos porque el citoplasma es azul, los gránulos pueden ser indistintos, el núcleo redondo o muy poco, hendido, la red filiforme de cromatina poco visible, y pueden faltar los característicos seudópodos obtusos y las vacuolas digestivas. Las tres características más típicas de los monocitos y que son de mayor. utilidad ]Jara el diagnóstico son el color gris azulado opaco del citoplasma, los seudópodos obtusos y las circunvoluciones cerebroides del núcleo. , El color del citoplasma no debe compararse con ilustraciones del libro de texto o células hipotéticas, sino con neu-

trófilos conocidos que se encuentren en el mismo campo o zonas adyacentes. El citoplasma de los neutrófilos es relativamente pálido y rojizo, en comparación con el de los monocitos, que es más obscuro, azulado y opaco. Prácticamente los neutrófilos nunca tienen seudópodos romos. Las citadas circunvoluciones no se observan en los mielocitos ni en los metamielocitos (Fig, 7 A-C). Para distinguir los monocitos de los grandes linfocitos, es muy útil basarse en la estructura nuclear, propiedades del citoplasma y forma de las células. El núcleo del linfocito presenta un aspecto compacto más bien que reticulado (Fig. , 7 1), Además, hay una mayor tendencia de la cromatina nuclear a condensarse en la periferia del linfocito; esta célula no presenta circunvoluciones en el núcleo, -Los monocitos y grandes linfocitos pueden contener gránulos azurófilos. Al mismo tiempo, el monocito presenta un fondo compuesto de gránulos finos y distribuidos uniformemente, mientras que el fondo de los linfocitos es esponjoso, sin granulaciones, Los monocitos tienen tendencia a deformar y comprimir las células adyacentes, más bíen que ser deformados por ellas. Por otra parte, los grandes linfocitos a meñudo son profundamente deformados por células vecinas y presentan puntas salientes y prolongaciones agudas (Fig. 7 G).

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FIGURA

7/

MORFOLOGIA COMPARADA: GRANULOCITOS NEUTROFILOS, MONOCITOS, LlNFOCITOS

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C D E

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Mielocitos neutrófilos con mezcla de gránulos neutrófilos y metacromáticos ' Metamielocito neutrófilo de color rosado, con gránulos neutrófilos Mielocito neutrófilo Monocito con núcleo plegado Monocito con citoplasma azul grisáceo, granulación bien visible, núcleo multilob~.~do (circunvoluciones cerebroide's) y cromatina filamentosa Monocito típico con núcleo lobulado, citoplasma azul grisáceo y seudópodos Iomos Linfocito grande, de forma irregular; núcleo no plegado Linfocito grande, con citoplasma no granuloso Linfocito grande, con gránulos azurófilos; estructura nuclear conglo'merada

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Plasmocitos / áiulas piasmáticas
Los PLASMOCITOS representan aproximadamente el 1% de las células nucleadas de la medula ósea normal, pero no se encuentran en los frotis de sangre periférica de personas sanas. En cambio, pueden hallarse en escasa proporción en el torrente sanguíneo durante infecciones crónicas, en caso de enfermedades granulomatosas y alérgicas y en el mieloma múltiple. El tamaño de las células plasmáticas maduras halladas en frotis de sangre es de 15 a 25 micras. Generalmente los plasmocitos son redondos u ovalados, con bordes lisos o ligeramente ·irregulares. El citoplasma no es granuloso, se tiñe de azul obscuro y presenta una brillante translucidez. Este tinte aterciopelado, designado como azul aciano, azul paloma, etc., es probablemente debido a numerosas mitocondrias no teñidas y productos de secreción ligeramente teñidos que transmiten la luz a través del citoplasma que contiene numerosos ribosomas azul obscuros (basófilos). El citoplasma adyacente al núcleo es relativamente pálido (zona clara perinuclear). Puede haber también formaciones fibrilares de tinte azul (Fig. 8 G, H, 1). Muchos plasmocitos contienen una o varias vacuolas; no se observan partículas fagocitadas. Los núcleos de .los plasmocitos maduros son relativamente pequeños, ovalados o redondos y excéntricos. La cromatina nuclear es gruesa y conglomerada, a menudo adyacente a la membrana nuclear. La mayoría de los plasmocitos de la medula ósea son células fijas o semifijas que son arrancadas durante la aspiración y se presentan en los frotis de medula con bordes irregulares y erizados (Fig. 12 A, B). En la medulá, los plasmocitos se observan a menudo agrupados alrededor de . grandes células tisulares sin gránulos o finamente granulares. Se piensa que cuando se encuentran plasmocitos en contacto con grandes histiocitos fagocitarios se trata de una manifestación de respuesta inmune en la cual el material antigénico, modificado por los macrófagos, es transferido a los plasmocitos que a su vez producen inmunoglobulina. Células plasmáticas proliferan tes que acompañan a procesos malignos del sistem;:¡ plasmocítico no suelen agruparse alrededor de grandes células mesenquimatosas. Las inmunoglobulinas producidas por las células plasmáticas dan lugar a muchas notables variantes morfológicas. El material proteínico generalmente forma glóbulos redondos rojos, llamados "cuerpos de Russell" o "glóbulos eosinófilós". Los glóbulos no siempre se tiñen de rojo, quedando incoloros o presentando pálidos tintes rosados, azules o verdes. Estos glóbulos pueden llenar el citoplasma dándole un aspecto de "frambuesa". Los gruesos glóbulos suelen ser perfectamente redondos (Fig. 9, Fig. 10).

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SISTEMAS LlNFOCITICO, PLASMOCITICO

MONOCITICO

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Linfoblasto Prolinfocito Linfocito con cromatina conglomerada Monoblasto Promonocito Monocito Plasmoblasto Propias mocito Plasmocito

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En ciertas células, los glóbulos son tan numerosos y compactos que toman formas hexagonales o en panal. En otras células, el brillante color rojo es difuso, llamándoselas por esta razón "células flamantes" (Fig. 40). La materia que se tiñe de rojo puede presentarse en forma de gránulos, manchas en los bordes o protuberancias' en la membrana celular (Fig. 9, Fig. 40). Después de haberse escapado los productos de secreción, el estroma citoplásmico residual aparece muy deteriorado. La materia proteínica del interior del citoplasma puede cristalizarse, produciendo largas agujas incoloras o teñidas de rojo o morado (Fig. 40). A veces se observan gruesos gránulos de secreción de diversos tamaños y número variable en los núcleos (Fig.9).

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Los plasmoblastos y proplasmocitos, igual que los
plasmocitos, tienen un citoplasma azul obscuro sin gránulos, zonas yuxtanucleares pálidas, bien visibles y núcleos redondos, excéntricos (Fig. 8 G, H). Lo que distingue a estos tipos de células es la cromatina nuclear, que es reticulada en los plasmoblastos, conglomerada en las formas adultas e intermedia en los proplasmocitos. Los núcleos de los plasmocitos primitivos son relativamente rojos y pálidos, contrastando con los tintes morado obscuro de las células definitivas.

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FIGURA

g/VARIANTES

DE PLASMOCITOS

Arriba a la izquierda: Plasmocito con cuerpos de Russell Arriba a la derecha: Plasmocito con múltiples gránulos gruesos, borde "deshilachado" y 'secreciones rojas. Abajo a la izquierda: Plasmocito con citoplasma reticulado Abajo a la derecha: Plasmocito con gruesos gránulos en el núcleo; citoplasma reticulado, bordes irregulares y secreciones rojas

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10/ PLASMOCITOS
(CELULAS

CON CUERPOS "FRAMBUESA")

DE RUSSELL

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FIGURA

11 /

SIS1EMA

ERITROCITICO

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Izquierda: Eritrocitos macrociticos (eritrocitos o megalomegalociticos blásticos) del tipo observado en la anemia perniciosa y carencias análogas de 8'2-ácido fólico Centro: Serie eritrocitica normal Derecha: Tipos de células hipocrómicas microciticas observadas en estados ferropénicos

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A Proeritroblasto (rubriblasto) B Eritroblasto basófilo (prorrubricito) C Eritroblasto policromatófi!o (rubricito) O Eritroblasto ortocromá. tico (metarrubricito) E Eritrocito difusamente basófilo (eritrocito policromatófilo) F Eritrocito (hematíe)

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(rubriblasto, pronormoblasto). Las células primitivas de la serie eritrocítica son semejantes a las demás células no diferenciadas o "blastos". En las formas' más jóvenes, el citoplasma se tiñe de azul claro, pero en las formas más avanzadas (que se observan con .mayor frecuencia), el citoplasma tiene un tinte rojizo superpuesto que le confiere un color añil obscuro, bastante parecido al de ciertos plasmocitos (Fig. 1 D; Fig. 11 A).

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Proeritroblasto

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Eritroblasto basófilo (prorrubricito, normoblasto basófilo, eritroblasto primitivo). Esta célula se distingue del eritroblasto por un aspecto más tosco de la cromatina y nucléolos po'co distintos o enteramente ausentes. El citoplasma contiene cantidades variables de hemoglobina de matiz rojizo con predom~ancia azul (Fig. 1 D; Fig. 11 B). Eritroblasto policromatófilo (rubricito,' normoblas. to policromatófilo, eritroblasto o normoblasto intermedio). Los eritroblastos policromatófilos son más pequeños que los eritroblastos basófilos, tienen relativamente más citoplasma y presentan tintes rojos y azules mixtos. La cromatina nuclear es gruesa e irregularmente condensada; ya no se distinguen nucléolos (Fig. 1 D; Fig. 11 C).
(metarrubricito, normoblasto, eritrobla~to o normoblasto tardío). El eritrobl~sto ortocromático presenta un citoplasma predominantemente rojo, con ligero matiz azul residual. El núcleo relativamente peCl.ueño tiene cromatina compacta o es azul negruzco y degenerado (Fig. 1 D; Fig. 11 D). En los frotis de medula ósea, los hematíes con núcleos fragmentados o parcialmente expulsados y núcleos aislados negros, se clasifican como eritroblastos ortocromáticos o metarrubricitos.

(normocito, hematíe). Lo:; eritrocitos normales son discos bicóncavos de 6 a 8 mic:-c.E de diámetro y 1,5 a 2,5 micras de espesor; en frotis tef~¡¿~ se presentan como corpúsculos circulares con borde ::>=;.:: y liso. El color es menos intenso en el centro dor1.¿= :: célula es más delgada, que en la región periférica 1 D; Fig. 11 F). En preparaciones muy delgadas y e:: ~ parte marginal de los frotis, las células están achatadc.s :::::. forma de tortilla y la coloración es uniforme en todas ;.=:: regiones de las células. Traumatismos, contacto con ~ vidrio o la lenta desecación de la preparación pueden producir crenación y otras alteraciones morfológicas.

Eritrocito o glóbulo roio

Eritroblasto ortocromático

basófilo (eritrocito policromatófilo). Estas células han perdido el núcleo, pero aún presentan un matiz azulado (Fig. 1 D; Fig. 11 E). Suelen ser más grandes que las células más maduras y las seniles. Cuando se tiñen con azul de metileno u otros colorantes supravitales antes de fijarlas, estas células revelan un retículo granulofilamentoso (polisomas y retículo endoplásmico).

EritrOcito difusamente

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Variantes de eritrocitos. Las células inmaduras, como también las maduras de la serie roja, varían notablemente de tamaño, forma y contenido de hemoglobina (Fig. 22, 23, 24,27,28,29,30) . En la anemia perniciosa y afecciones análogas debidas a una carencia de B,,, ácido fólico o ambos, se observan largos períodos de crecimiento entre las divisiones celulares; las células tienden a volverse anormalmente grandes (megaloblastos, megalocitos) y contienen concentraciones aumentadas de hemoglobina. La estructura de la cromatina nuclear en estas células displásticas frecuentemente es atípica y se observa asincronismo entre el núcleo y el citoplasma (Fig. 22 A-E). Las células anormales características de la anemia perniciosa se llaman proeritroblastos, eritroblastos basófilos, eritroblastos policromatófilos y eritroblastos ortocromáticos, con el calificativo de "tipo anemia perniciosa" o con descripciones apropiadas (Fig. 11, columna izquierda). En .presencia de hemorragia o anemia ferropénica, los eritrocitos inmaduros y los maduros son más pequeños que normalmente, de forma irregular, contienen menos hemoglobina y toma¡:¡ un tinte más azulado que las células análogas de la serie normal. Los glóbulos rojos nucleados de enfermos con anemia hipocrómica microcítica se clasifican como proeritroblastos, eritroblastos basófilos, eritroblastos policromatófilos y eritroblastos ortocromáticos, con el calificativo de "tipo ferropénico", o describiendo las anomalías morfológicas observadas (Fig. 11, columna derecha) .•.

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Eritroblastos basófilos (prorrubricitos), y linfocitos
YNTO los eritroblastos basófilos como los plasmocitos y los linfocitos tienen núcleos redondos, sin lóbulos, así como un citoplasma azul no granular (Fig. 12). Los plasmocitos y las células inmaduras de la serie eritrocítica pueden presentar mezclas de tintes rojos y azulados en su citoplasma, que les dan un intenso colOTañil. En las anemias ferropéIDeas,los eritroblastos policromatófilos y los ortocromáticos contienen poca hemoglobina y el tinte azul de su citoplasma es muy parecido al de los linfocitos. Los linfocitos y los plasmocitos tienen un citoplasma de aspecto espumoso . Los eritroblastos basófilos no tienen citoplasma espumoso ni tampoco aspecto fibrilar, raramente contienen vacuolas y sus bordes suelen ser lisos. Contienen menos citoplasma que los plasmocitos, la zona perinuclear es menos marcada y los núcleos no son excéntricos (Fig. 12 E). Caracteres que permiten clasificar una célula como plasmocito son: una proporción relativamente grande de citoplasma, la forma ovalada, el núcle.o excéntrico, la zona relativamente pálida alrededor del núcleo, los glóbulos y vacuolas, la estructura fibrilar y los bordes "deshilachados" (Fig. 1..2A, B). Los linfocitos tienen un estrecho cerco de citoplasma \ azul, hay una zona pálida' perinuclear y el núcleo no es "-., excéntrico (Fig. 12 C, D). No se halla en los linf6citos el "Ente rojizo del citoplasma observado ainmaduros. los plas\"ocitos y los glóbulos rojos nucleados veces en \En muchas células, la semejanza entre plasmocitos, eritrÓblastos basófilos (prorrubricitos) y linfocitos es tan gra~de que no es posible diferenciarlas basándose únicament~"'en los caracteres morfológicos. A menudo hay que' clasificar la célula atípica por su asociación con células predominantes o incluyendo arbitrariamente la célula en la columna a la que pertenece con mayor probabilidad. En todo problema de morfología diferencial, son esenciales estos factores: frotis fino, buena coloración, microscopia adecuada, luz intensa y experiencia.

plasmocitos

FIGURA

12/ PLASMOCITOS,
ROJOS

LlNFOCITOS, GLOBULOS NUCLEADOS INMADUROS

A Plasmocito con núcleo excéntrico, citoplasma azul intenso, zona clara perinuclear, vacuolas y bordes irregulares . B Plasmocito de bordes irregulares, núcleo excéntrico, citoplasma espumoso y fibrilar, de color azul rojizo y zona clara perinuclear C Linfocito con núcleo levemente hendido y citoplasma azulado irregularmente teñido D· Linfocito con citoplasma espumoso y borde erizado E Eritroblasto basófilo (prorrubricito) de' citoplasma azul con matiz rojo F Eritroblasto policromatófilo (rubricito)

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13/ SISTEMA

MEGACARIOCITICO

A Megacarioblasto con un solo núcleo ovalado, nucléolos y citoplasma marginal esponjoso, azulado B Promegacariocito con dos núcleos, citoplasma granular azul y citoplasma marginal esponjoso C Megacariocito con citoplasma granular, sin evidencia de trombocitos (plaquetas) O Metamegacariocito con múltiples núcleos y con trombocitos (plaquetas) E Núcleo de metamegacariocito, con trombocitos adheridos ' F Trombocitos (plaquetas)

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Megacariocitos y trombocitos
del sistema megacariocítico son peculiares el núcleo pa'sa por múltiples divisiones mitóticas 52":. entación correspondiente del citoplasma; así se ;;..--:x....-'"2= células poliploides gigantes (Fig. 13). Todos los ==C~::>:.::.una determinada célula presentan mitosis si"==s::=te (Fig. 14), formando 2, 4, 8 Y raramente 16 'F i:2:,-:c. 32 núcleos. Los múltiples núcleos suelen quedar =,~---X:~ :05 UIlOS a los otros y frecuentemente están ~-=--;:~-.=, lo que les da un aspecto lobulado. Los núcleos :i.~Ó¿o:; Cú=-<e,,-ansu estructura cromatínica lineal de cáh:'!.c.sóvenes, mientras que el citoplasma presenta modij ÍiCéCÍOI1es ae maduración caracterizadas' por la aparición de gránulos y membranas, culminando en la diferenciación de plaquetas y su liberación. Masas de plaquetas bien definidas aparecen generalmente en los bordes de los megacariocitos cuando estos últimos se hallan en la fase de ,4u 8 núcleos, pero en algunas células
CELULAS

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se observan plaquetas en la fase mono o binuclear. Cuando los núcleos y el citoplasma no están sincronizados, se recomienda establecer la identidad de las células individuales basándose en el citoplasma en vez de la estructura de la cromatina o el número de núcleos presentes; esto constituye una excepción a la regla de que la estructura del núcleo constituye el criterio más seguro para la identificación. Megacariocitos intactos, fragmentos de megacariocitos y núcleos aislados se observan a veces en frotis de sangre periférica de enfermos con afecciones mieloproliferativas, como la leucemia mielocítlca y megacariocítica crónica y en la mielofibrosis leucémica. En la sangre periférica de individuos normales se hallan raramente. En los frotis de medula ósea y en cortes de tejido medular de sujetos normales, los megacariocitos representan el1 al 4 por 1000,de las células nucleadas. La mayoría de las células megacariocíticas se hallan en la tercera o cuarta fase de maduración.

M egacarioblasto. Los megacarioblastos son grandes
células irregulares con un sol6 o varios núcleos redondos u ovalados y un citoplasma azul, desprovisto de gránulos. Puede haber seudópodos obtusos con diversos tintes azulados y que contienen múltiples gránulos cromófobos (Fig. 13 A). Un ectoplasma esponjoso de este tipo se observa frecuentemente en células dé sarcoma S y de otros tumonis malignos, pero suele estar ausente o poco conspicuo en las células primitivas de las series eritrocítica o leucocítica. Los filamentos nucleares de cromatina se distinguen bien en los megacarioblastos. Se suelen observar nucléolos (Fig.13 A). Los promegacariocitos se distinguen de los megacarioblastos por la presencia de gránulos azulados en el citoplasma adyacente al núcleo. En esta segunda fase de maduración, el núcleo suele haberse dividido una o más veces y la célula ha aumentado de tamaño. A menudo se observan apéndices citoplásmicos azulados de bordes redondeados que pueden tener aspecto homogéneo o esponjoso (Fig. 13 B). Una de las variantes de los promegacariocitos es una célula con uno o varios núcleos, citoplasma granular adyacente al núcleo rodeado por un anillo de citoplasma vacuolado y por una zona marginal netamente visible, caracterizada por protuberancias redondeadas, azul obscuras, teñidas irregularmente y conteniendo a menudo pequeños glóbulos incoloros (Fig. 14).

Promegacariocito.

Estas unidades de citoplasma granular tienden a conglomerarse en la periferia de la célula (Fig. 13 D). En los estados más avanzados de maduració~ los megacariocitos presentan lentos movimientos amiboides. Extienden partes de su citoplasma a través de la membrana basal y entre las células endoteliales de los sinusoides de la medula ósea. De estas prolongaciones citoplásmicas se separan las plaquetas diferenciadas y provistas de membrana, siendo entonces arrastradas por la corriente sanguínea. Otros megacariocitos escapan hacia los canales vasculares de-la medula y son transportados por venas a los pulmones, donde se ubican en las arteriolas pulmonares terminales y los capilares alveolares. Allí continúan proliferando y liberando fragmentos de su citoplasma en forma de plaquetas (Fig. 13 E). Los núcleos desnudos se desintegran o son fagocitados.

Trombocito (plaqueta). Los trombocitos son fragmentos
del citoplasma de los megacariocitos. En los frotis de sangre proveniente de personas sanas, el diámetro de las plaquetas individuales es de'l a 4 micras, pero en diversas enferme- • dades su tamaño puede variar de partículas casi invisibles a masas más grandes que los glóbulos rojos o leucocitos (Fig. 35; Fig. 44). Generalmente los trombocitos presentan numerosos filamentos o prolongaciones en forma de tentáculos (Fig. 13 F). También se suelen hallar formas redondas, ovaladas, fusiformes y discoides, con bordes lisos. El citoplasma se tiñe de azul 'pálido y contiene un número variable de pequeños gránulos azules que tienden a conglomerarse en el centro (granulómera o cromómera), que contrasta de la zona marginal, agranular (hialómera). Las plaquetas suelen adherirse unas a otras (Fig. 4). Plaquetas individuales y conglomerados trombocíticos suelen ser más numerosos en las regiones terminales de los frotis de sangre. En las regiones delgadas, donde los eritrocitos y leucocitos están bien separados, el número de plaquetas por campo de inmersión es de 5 a 25. El número de plaquetas promedio en el campo de inmersión, multiplicado por 20.000,da el número aproximado por milímetro cúbico. El informe de un frotis de sangre no está completo, sin la indicación del número de plaquetas y la descripción de las anomalías morfológicas encontradas.

M egacariocito (megacariocito sin trombocitos). Las células megacariocíticas en la tercera fase de maduración son células grandes con citoplasma relativamente abundante, de forma redonda, con bordes lisos y múltiples núcleos. El retículo de cromatina nuclear es filiforme y tosco, con espacios bien marcados entre los filamentos de cromatina. El citoplasma contiene numer.osos gránulos pequeños, distribuidos bastante uniformemente, que tienen un tinte azul rojizo (Fig. 13 C). Puede haber lugares poco teñidos. M etamegacariocito (megacariocito con trombocitos).
Las'células megacariocíticas en la cuarta fase de madura-' ción se caracterizan por la conglomeración del citoplasma granuloso en masas separadas entre sí por espacios relativamente pálidos (membranas de demarcación o vesículas).

...

FIGURA

14/ VARIANTES

DE MEGACARIOCITOS Centro: Promegacariocito o megacariocito intermedio, con múltiples núcleos adheridos, citoplasma granuloso rodeado por un anillo de citoplasma marcadamente vacuolado, zona marginal azul más obscuro y trombocitos relativamente indistintos Derecha: Promegacariocito atipico, con asincronismo entre el citoplasma y los núcleos;' múltiples núcleos adheridos r superpuestos, finos gránulos adyacen:.e.s a los núcleos y ectoplasma agranular

Izquierda: Promegacariocito con cuatro núcleos, formación incipiente de gránulos adyacentes a los núcleos y seudópodos agranulares obtusos

TABLA
filamento nucléolos

III CARACTERES
cromatfnico;

MORFOLOGICOS

DE LAS CELULAS
APENDICES

DE LA SERIE MEGACARIOCITICA

Ausentes CITOPLASMICOS Núcleo Ausentes másmás ausentes Cuatro Dos o núcleos Presentes onúcleo; núcleos TROMBOCITOS NUCLEARESNumerosos CARACTERISTlCAS GRANULOS Escasos CITOPLASMICOS Generalmente Ausentes Ausentes doble· Un solo fino Presentes. Conglomerados

Células mesenquimatosas ¡ndiferenciadas,
células madre, hemohistoblastos
LAS CELULAS MESENQUIMATOSAS indiferenciadas o células madre, suelen ser voluminosas con relación a los hemato'cito s diferenciados en los mismos campos microscópicos. Son de forma irregular y puede haber prolongaciones marginales (Fig. 15 A; Fig. 16 centro). Los núcleos son redondos u ovalados y sus bordes se distinguen netamente. El núcleo toma un tinte pálido, predominantemente rojo. El retículo de cromatina es de textura variable, pero los filamentos son bien definidos y uniformemente teñidos. Suelen poder distinguirse uno o más nucléolos. El citoplasma azul claro, .sin gránulos, posee una estructura homogénea o finamente .reticular. Las células priniitivas del sincitio medular, con los caracteres morfológicos que acabamos de describir, son células de múltiples potenciales capaces de diferenciarse en varios sentidos, dando lugar a leucocitos, eritrocitos, plaquetas y todas las variedades de específicas células Úsulares fijas .


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CELULAS

TISULARES

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Izquierda: Histiocito fagocitariO con vacuolas y pigmento palúdico fagocítado Centro: -Célula mesenquimatosa indiferencia da con ruptura parcial de la membrana nuclear y citoplasma azul sin gránulos Derecha: Neutrófílo tísular con gruesa cromatína nuclear, gránulos neutrófi/os y de borde di/acerado

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HISTIOCITOS FAGOCIT ARIOS

A Histiocito fagocitario, con citoplasma reticular, vacuolas y partículas fagocitadas B Histiocito fagocitario, fase amiboide (macrófago amiboide), con eritrocitos y fragmentos nucleares fagocitados C, D Histiocitos fagocitarios, tipo tejido fijo, con partículas fagocitadas en el citoplasma (Nota: Las células tísulares fijas o semífíjas iíer.·en forma irregular, ~•. jcleos redondos u 0"/a/2;~ ~~g~~eso :=tj,c-~-!~ =';

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Histiocitos fagocitarios
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Los histiocitos fagocitarios son células grandes con abundante citoplasma que contiene vacuolas digestivas y/o partículas fagocitadas bien visibles (Fig. 16; Fig. 17). El citoplasma es azul claro o gris azulado, con o sin gránulos. Algunos histiocitos fagocitarios presentan seudópodos obtusos, sin gránulos. Otros tienen bordes citoplásmicos dilacerados, característicos de células tisulares -fijas que han sido arrancadas de su sitio normal. Los histiocitos fagocitarios de los espacios de tejido fijo y los mononucleares fagocitarios (monocitos) de la sangre circulante están estrechamente relacionados, considerándoselos como variantes de un mismo tipo de célula. Estas células pueden ser agresivas, comprimir o deformar otras células, pasar por encima o debajo de ellas o englobarlas. Son más resistentes a la deformación que los linfocitos e histiocitos neutrófilos. Cuando ,después de haber presentado movimientos amiboides, estas células se encojen en forma esférica durante el proceso de desecación en el portaobjeto, suelen dejar una zona clara entre su propio borde y los eritrocitos y otras células adyacentes. Los núcleos de los histiocitos fagocitarios son relativamente pequeños con relación al citoplasma. Los núcleos son redondos, ovalados o ligeramente hendidos y la cromatina consta de filamentos bastos. Frecuentemente se observan nucléolos. Morfológicamente es imposible distinguir histiocitos potencialmente fagocitarios de las células madre cuando no contienen gránulos, no presentan movimientos amiboides o si el citoplasma no contiene partículas fagocitadaS'. Procesos malignos caracterizados por células mesenquimatosas que no se han diferenciado morfológicamente, por células fagocitarias (histiocitos fagocitarios) y por células que forman fibrillas reticulares (histiocitos, células reticulares), constituyen un amplio y complejo espectro de enfermedades a las cuales se ha dado un 'sinnúmero de nombres. La proliferación generalizada de células mesenquimatosas malignas puede limitarse a los órganos hematopoyéticos (medula, tejido linfático, hígado, bazo) o dichas células pueden penetrar en el torrente sanguíneo produciendo una leucemia o un leucosarcoma. Variantes caracterizadas por una capacidad evidente de algunas de las células de actividad fagocitaria son la leucemia monocítica, la leucemia histiocito-monocítica y la reticulosis histiocítica medular (reticuloendoteliosis maligna). Otra afección caracterizada por células que tienen largas prolongaciones citoplásmicas digitiformes, reticuladas o en forma de velo (células vellosas) y que presentan cierta actividad fagocitaria, lleva el nombre de "leucemia histiocítica".

Neutrófilos tisulares
Células de Ferrata
Una de las células halladas en reducido número (menos del 1%) en prácticamente todo frotis de medula ósea normal es una célula parecida a la célula mesenquimatosa no diferenciada, salvo que contiene un número variable de gránulos neutrófilos. Los neutrófilos tisulares son voluminosos, con abundante citoplasma. Raramente se puede observar una variante redonda u ovalada de borde liso, pero generalmente la forma es irregular, con seudópodos obtusos y apéndices citoplásmicos agudos o nebulosos. Estas células son fácilmente deformadas por células vecinas o aplastadas entre ellas. A menudo se observan prolongaciones citoplásmicas largas y delgadas que parecen envolver a otras células. Estas células no son fagocitarias y raramente tienen vacuolas en el citoplasma. El citoplasma se tiñe de azul páliqo y presenta una estructura finamente reticular (Fig. 15 D; Fig. 16; Fig. 18). Contiene gránulos en número variable. Los gránulos toman varios tintes rojizos hasta azulados, pero la mayoría suelen teñirse de rojo brillante o rojo violado. Muchos gránulos forman cadenas que se extienden por las prolongaciones citoplásmicas, donde tienden a colocarse paralelamente unas a otras y al borde del citoplasma (Fig. 15 D). El voluminoso núcleo redondo u ovalado presenta una cromatina de estructura gruesa marcadamente línear. Suelen poder distinguirse nucléolos (Fig. 15 D; Fig. 18). Las opiniones están divididas acerca de la posición de este tipo de células en la serie evolutiva y su relación con otras células. Ferrata las consideraba como una variante del hemohistoblasto. Otros las han llamado "células reticulares" o "células reticuloendoteliales". La mayoría de los hematólogos han ignorado este tipo de células como entidad, o las han considerado como un promielocito o mielocito traumatizado, Es cierto que granulocitos inmaduros aplastados se pa.recen morfológicamente a neutrófilos tisulares traumatizados, pero las células intactas de estos tipos son morfológicamente distintas. Es la opinión de los autores que la lla~ada "célula de Ferrata" no es una célula madre, ni tampoqo una célula reticular o un artefacto, sino un tipo celular bien definido, comparable a los basófilos tisulares ("Mastzellen"), a los eosinófilos tisulares y a los macrófagos tisu'lares (histiocitos fagocitarios). El hecho de que los filamentos cromatínicos son bien marcados, que existen nucléolos y que pueden 'encontrarse figuras mitóticas y núcleos dobles, es prueba de actividad metabólica y de que las células son capaces de mantener una filiación . individual. .. Se admite que los neutrófilos tisulares' son células tisu[ares inmóviles (histiocitcis) que producen gránulos neutrófilos. Se piensa, además, que cumplen con su función y mueren "in situ" sin diferenciarse en neutrófilos sanguíneos.' Los neutrófilos tisulares (células de Farrata) son más abundantes en frotis de medula ósea en estados caracterizados por una proliferación de células neutrófilas. Estas células pueden predominar en frotis de medula ósea de enfermos con leucemia mielocítica o monomielocítica (leucemia monocítica tipo Naegeli), en la mielosis leucémica, en la anemia perniciosa y en presencia de lesión de células relacionadas con la detención del proceso de maduración y unestado neutropénico por acción química o citotóxica. Los neutrófilos tisulares suelen poder demostrarse en la sangre periférica de enfermos afectos de leucemia mielocítica o monomielocítica.

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Basófilos tisulares
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Los basófilos tisulares tienen un diámetro de 15 a 30 micras. El núcleo es relativamente pequeño, redondo u ovalado. El citoplasma está repleto de gránulos que se tiñen de azul violado intenso. Los gránulos son redondos y de tamaño aproximadamente igual (0,1 a 0,3 micrón). Frecuentemente los gránulos se hallan superpuestos al margen del núcleo relativamente pálido, o bien pueden ocultarlo parcial o totalmente (Fig. 18). Los basófilos tisulares se hallan extensamente distribuidos en diversos órganos, ilcluso en la medula ósea. No se los suele observar al efectuar un recuento diferencial de algunos centenares de células, pero son relativamente abundantes y evidentes en estados relacionados con pancitopenia y mielosclerosis. Cuando son fáciles de encontrar en frotis de medula ósea a menudo existe una tendencia a hemorragias. Los basófilos tisulares y los de la sangre están Íntimamente relacionados con' referencia a sus características químicas y sus funciones se distinguen principalmente por la presencia o ausencia de motilidad .

Eosinófilos tisulares
En los frotis de medula ósea se observan a veces voluminosas células con largas prolongaciones ahusadas del citoplasma y que contienen los típicos gránulos rojos de los eosinófilos de la sangre circulante. Los núcleos de tales células, en vez de presentar hendiduras o lóbulos, son redondos u ovalados como los de otras células tisulares fijas; su red de cromatina es bien definida y a menudo se distinguen nucléolos (Fig. 18). Se admite que los eosinófilos tisulares representan variantes fijas de los eosinófilos libres de la sangre circulante.

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18/ GRANULOCITOS

TISULARES

Izquierda: Basófilo tisu/ar ("Mastzelle", histiocito basófilo) Centro: Eosinófilo tisu/ar (histiocito eosinófilo) Derecha: Neutrófilo tisu/ar (histiocito neutrófi/o)

Células adiposas
Li pocitos
Las células adiposas se observan raramente en frotis delgados de medula ósea porque suelen romperse' al practicar la aspiración. Cuando se extiende el material aspirado en el portaobjeto los glóbulos de grasa escapan de la célula, dejando la trama y la membrana celular como detritus no identificable. En partes más espesas del frotis de medula, pueden verse células adiposas individuales o grupos de lipocitos rodeados de otras células medulares (Fig. 19). Las células adiposas maduras son grandes células redondas, de tamaño comparable al de los megacariocitos y osteoclastos (50 a 80 micras de diámetro). Los pequeños núcleos redondos u ovalados son excéntricos, probablemente por la presión ejercida sobre ellos por los glóbulos de grasa. En muchos núcleos, la estructura de la cromatina es marcadamente filiforme. Frecuentemente el núcleo contiene un cuerpo globular que aparentemente es materia lipoide en vías de formación. Los glóbulos de grasa en el citoplasma varían de tamaño, son cromófobos y se tiñen de azul o rosado pálido. Los glóbulos de grasa tienen bordes lisos; se comprimen mutuamente, produciendo formas irregulares. Las masas de lÍpidos están separadas por tabiques citoplásmicos que forman delicadas líneas azules (Fig. 19). La naturaleza fija de. dichas células es confirmada por las múltiples fibrillas que se extienden fuera del borde de la célula (Fig. 19) Y se entrelazan con fibras de las células reticulares, fibrocitos y células endoteliales. La grasa en las células adiposas posee una afinidad para varios colorantes sudán. Las células mesenquimatosas que producen grasa deben distinguirse de células plasmáticas secretarias con voluminosos conglomerados de materia proteínica en el citoplasma. Las gotitas secretarias en los plasmocitos tipo "frambuesa" no son de forma irregular sino perfectamente esféricas, como si hubiesen sido trazadas con un compás (Fig. 10). Las células productoras de grasa también deben diferenciarse de células que engloban la grasa por fagocitosis (las llamadas células "lipófagas"). En histiocitos fagocitarios las partículas lipídicas suelen ser pequeñas, dándole al citoplasma un aspecto espumoso.

FIGURA

19/

CELULAS

ADIPOSAS

Arriba: Célula adiposa, con pequeño núcleo redondo, cromatina filiforme y cueJpo globular en el núcleo, abundante citoplasma con -glóbulos lipoides, membrana arrugada, trama reticular y formaciones marginales fibrilares. Abajo: Célula adiposa con cuerpos /ipoides separados por formaciones reticulares. El lipocito está rodeado de eritrocitos.

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Osteoblastos
El osteoblasto es una célula grande con abundante citoplasma y núcleo relativamente pequeño; redondo y excéntrico (Fig. 20). Dichas células pueden ser traumatizadas al practicarse la aspiración y extensión; frecuentemente tienen bordes irregulares y prolongaciones citoplásmicas. Las células pueden parecerse a un cometa o un renacuajo. El núcleo puede hallarse parcialmente fuera de la célula como una pequeña cabeza esférica en un cuerpo redondo. Los filamentos de cromatina y el borde del núcleo están bien definidos. Suele haber un nucléolo bien visible que se tiñe predominantemente de azul contrastando con el color rojo violado de los cromosomas. El color fundamental del citoplasma es azul. A menudo se observan fibrillas onduladas. En todo el citoplasma hay pequeños cuerpos esféricos incoloros que dan al citoplasma un aspecto espumoso. El Citoplasma presenta una zona circular u ovalada bien visible cuya coloración es más pálida que el resto del citoplasma; esta zona puede estar contigua al núcleo pero generalmente está separada de este último (Fig. 20). Morfológicamente los osteoblastos se parecen a las células plasmáticas porque ambos son de forma irregular, presentan prolongaciones citoplásmicas agudas, un citoplasma azul, un núcleo excéntrico, cuerpos esféricos dentro del citoplasma, zonas cromófobas, fibrillas citoplásmicas' y vacuolas. Los osteoblastos suelen ser más grandes que los plasmocitos. La zona relativamente pálida del plasmo cito está en contacto con el núcleo y rodea parcialmente al núcleo coI1;1on collar, mientras que la zona pálida del osteoblasto u frecuentemente se halla netamente separada del núcleo y en caso de estar adyacente a este último no lo rodea. Las secreciones proteínicas de las células plasmáticas les dan un color de fondo rojizo que no se observa en los osteoblastos. En frotis de medula los osteoblastos a menudo se presentan por grupos o. conglomerados que pueden confundirse con células malignas. En un grupo de células malignas los bordes celulares son indistintos y es imposible decir dónde una célula termina y la otra comienza. Las células malignas están apiñadas y. deformadas. El tamaño de las células y el color y estructura de los núcleos son muy variables mientras que los osteoblastos son más ordenados y uniformes. Zonas pálidas en el citoplasma, separadas del núcleo, son características de los osteoblastos y se observan raramente en células malignas.

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FIGURA

20/ OSTEOBLASTOS

Arriba: Osteoblasto con núcleo ovalado, excéntrico, marcada cromatína filíforme y nucléolo, éitoplasma azul espumoso con zona pálida bien visible y formaciones marginales fibrílares. Abajo: Osteoblasto con evidente zona pálida en el citoplasma separada del núcleo.

Osteoclastos
El osteoclasto es una célula muy voluminosa, de forma irregular, con múltiples núcleos redondos u ovalados de tamaño bastante uniforme. El número de núcleos por célula es variable. Los núcleos están separados y distribuidos irregularmente por el citoplasma. El abundante citoplasma azul tiene aspecto finamente granular y de vidrio esmerilado (Fig. 21). No hay indicios de fagocitosis. A veces resulta difícil distinguir los osteoclastos de los megacariocitos, ya que ambos pueden ser muy grandes, de forma irregular, con citoplasma granular y múltiples núcleos. Los núcleos de los megacariocitos están reunidos por filamentos o superpuestos, mientras que los núcleos de los osteoclastos suelen estar separados y no se pueden distinguir conexiones entre ellos. Los núcleos de los megacariocitos se suelen encontrar en números pares, mientras que en los osteoclastos suelen presentarse en números impares.

Células reticulares
Las células reticulares son' elementos del tejido conjuntivo estrechamente relacionadas con los fibrocitos caracterizados por delicadas fibrillas formadas por dichas células y que se extienden desde el borde hacia los tejidos circundantes sujetando a las células en 'un retículo. Estas células tisulares fijas son difíciles de aspirar. Cuando se observan en frotis de medula presentan los caracteres de células no diferenciadas, con núcleo redondo, cromatina bien marcada y citoplasma azul. Puede haber escasos gránulos azulados. Estas células son de forma irregular y presentan largas prolongaciones citoplásmicas. Las células reticulares son abundantes en infecciones crónicas, lesiones granulomatosas y estados alérgicos. Procesos malignos caracterizados por esta clase de células se llaman "sarcomas de células reticulares". Cuando células malignas penetran en gran número en el torrente sanguíneo la enfermedad es conocida como "leucosarcoma de tipo células reticulares". El diagnóstico se confirma mediante cortes de tejido y coloraciones especiales, como la argentación, que revelan las típicas fibrillas. Entre otras afecciones caracterizadas por la proliferación de histiocitos con manifiestas fibrillas reticulares o células afines figuran la enfermedad de Hodgkin, variantes de la histiocitosis X (granuloma eosinófilo de los huesos, erúermedad de Schiiller-Christian, enfermedad de Letterer-Siwe) e histiocitosis lipoides, tales como las enfermedades de Gaucher y de Niemann-Pick (Fig. 42).

Otras células tisulares
fijas
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cémica".

De vez en cuando se obse!'"\'a::el: ::u~ i= -~~ : conglomerados celulares fragmen:os ce ~6.:s =::'-:::.:tos vasculares intactos cuyas luces E:>~ ~ _.':,,~ ;.:r CELULAS ENDOTELIALES alargadas, no g:-'=ulE...-:s. ~--::¿:'!C achatado y ovalado. La aguja de venept:.::~ ~2¿ =..:-:-¿:,car células endoteliales individuales o agrupaCzs ~"'?é.¿= :>=..~ recen entonces en el frotis de sangre en alargadas, fusiformes.

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21 /OSTEOCLASTO

Voluminosa célula multinucleada, con número impar de núcleos ovalados, separados, gránulos =.zules y borde "deshilachado"

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PATOLOGICOS
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22/ ERITROCITOS PATOLOGICOS

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A Eritoblasto policromatófilo (rubricito) macrocítico con dos núcleos B Eritroblasto policromatófilo (rubricito) macrocítico moteado con fragmentación de núcleo (cariorrexis) C Eritroblasto basófilo (prorrubricito) macrocitico con asincronismo entre la estructura nuclear y el color del citoplasma. El núcleo es inmaduro pero la formación de hemoglobina se halla avanzada . D Eritroblasto basófilo (prorrubricito) macrocítico con fragmentos nucleares y asincronismo entre núcleo y citoplasma E Eritroblasto basófilo (prorrubricito) macrocítico, con engrosamiento parcial de la cromatina nuclear (picnosis) F Glóbulo rojo nucleado atípico con núcleo degenerado y fragmentos nucleares (¿moteado?) G Eritrocito ortocromático (metarrubricito), con núcleo parcialmente expulsado H, Glóbulo rojo moteado atípico, con cuerpo de Howell-Jolly y anillos de Cabot 1 Eritrocito que contiene un anillo palúdico J Trombocito sobre eritrocito K Cuerpos de Howell-Jolly en eritrocitos !.. Anillos de Cabot en eritrocitos

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23/ ERITROCITOS

Eritrocitos normales Eritrocitos crenados (crenocitos) Leptocitos (target-cells) Drepanocitos (sickle-cells) Eritrocitos ovales (ovalocitos, elíptocitos) F Esferocitos G Poiquilocitos con prolongaciones agudas y romas H Poiquilocitos de formas extrañas

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24/ ERITROCITOS

PATOLOGICOS

A Eritrocitos normales B Eritrocitos hipocrómicos, dos de diámetro reducido (rnicrocitos) C Eritrocitos macrocíticos con mayor cantidad de hemoglobina . o Eritrocitos difusamente basófilos (policromatófilos). Estos glóbulos son de tamaño mayor que el normal E Eritrocitos con red granulofilamentosa (reticulocitos) revelada por coloración con azul cresil.brillante F Eritrocitos moteadQs G Cuerpos semilunares

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25/ GRANULOS

SIDEROTICOS

EN ERITROCITOS

Izquierda: Coloración de Wright mostrando un eritroblasto ortocromático (metarrubricito) y múltiples eritrocitos anucleados con gránulos sideróticos. Los gránulos son de número, forma, tamaño, color y distribución variable Derecha: Coloración con azul de Prusia, para hierro, mostrando un glóbulo rojo nucleado y numerosos eritrocitos anucleados que cont.'enen gránulos sideróticos teñidos de azul. El núcleo de un glóbulo rojo nucleado se tiñe de rojo con safranina. (Cuerpos de Howell-Jolly, cuerpos de Heinz y cuerpos RNA en células moteadas no se tiñen de azul con el colorante para hierro). Aumento 2500 X

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26/ ERITROCITOS
GLOBULOS

DIFUSAMENTE BASOFILOS, MOT'EADOS y RETICULOCITOS

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A Eritrocitos difusamente basófilos (eritrocitos policromatófilos) seleccionados, en frotis de sangre; coloración de Wright B Reticulocitos seleccionados, en frotis delgado hecho con la misma muestra de sangre entera que en A, teñidos con nuevo azul de metileno sin fijación previa. Las formaciones reticulares que se tiñen difusamente de azul con el colorante de Wright aparecen como partículas granulofilamentosas C Eritrocitos moteados seleccionados en frotis de sangre; coloración de Wright, mostrando moteado y conglomerados basófilos D Reticulocitos seleccionados conteniendo partículas granulofilamentosas, en frotis hecho con la misma muestra de sangre entera que en C, teñidos con nuevo azul de metileno sin fijación previa. Estos reticulocitos en el nuevo colorante de azul de metileno corresponden a las células moteadas teñidas con colorante de Wright La materia teñida de azul en eritrocitos inmaduros teñidos por el método de Wright son partículas de ácido ribonucléico (RNA). Si estas particulas son pequeñas tienen aspecto uniformemente azul. Cuando las particulas de RNA están conglomeradas las células aparecen moteadas. En las preparaciones supravitales sin fijación previa, tanto las partículas pequeñas de RNA como las conglomeradas tienen el mismo aspecto granulofilamentoso. Las células que contienen estas formaciones se /laman reticulocitos. Aumento 2500 X

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FIGURA 27. Tamaño, forma y color de eritrocitos procedentes de un enfermo con anemia ferropénica, de un sujeto normal y de un enfermo con anemia perniciosa Las células ilustradas en estas dos páginas (32 y 33) no representan campos microscópicos reales sino células seleccionadas para mostrar las variables características morfológicas. Aumento 2500 X

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FIGURA 29. Tamaño, forma y color de eritrocitos procedentes de enfermos con anemia drepanocítica (Hb S-S), enfermedad drepanocítica-hemoglobina C (Hb S-C), y enfermedad por homocigosis C (Hb-CC). Aumento 2500 X .

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FIGURA 30. Tamaño, forma y color de eritrocitos procedentes de enfermos con púrpura trombótica trombocitopénica, nefritis crónica (con hipertensión) y anemia drepanocitica con embolia pulmonar. Aumento 2500 X

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31/ PARASITOS

DEL PALUDISMO:

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Medula ósea, coloración de Wright. Dos esquizontes palúdicos y la trama de un esquizonte estallado con liberación de los merozoitos

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32/ PARASITOS

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33/ LEUCOCITOS

PATOLOGICOS

A Neutrófilo con gránulos azules obscuros (gránulos tóxicos) B Neutrófilo segmentado con vacuolas, indicio de degeneración C ,Metamielocito neutrófilo con gránulos tóxicos D Neutrófilo degenerado con núcleos picnóticos y fragmentos nucleares E Neutrófilo gigante con núcleos múltiples (neutrófilo poliploide) F NÚcleo degenerado (picnótico) en un neutrófilo con gránulos evidentes G Neutrófilo macrocitico hiperlobulado H Monocito con núcleo picnótico fagocitado (tart cell) I Neutrófilo segmentado con masa citoplásmica morada procedente de un enfermo con lupus eritematoso

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FIGURA

34/ "CELULAS

L.E." EN FROTIS DE ENFERMOS CON LUPUS ERITEMATOSO

A Neutrófilo segmentado con lóbulos hinchados y cambios degenerativos incipientes (célula pre-L.E.) B Neutrófilo segmentado con cambios líticos incipientes en el núcleo y vacuolas en el citoplasma (célula pre-L.E.) C Hinchazón y cambios degenerativos en los lóbulos de neutrófilos segmentados (célula pre-L.E.) D Dos leucocitos neutrófilos contiguos a masas nucleares lisadas (grandes grupos de neutrófilos alrededor de materia nuclear degenerada se llaman rosetas) E, F, G Neutrófilos que contienen en sus vacuolas digestivas materia nuclear morada,.o morada-rojiza fagocitada proveniente de otros leucocitos. Células con esta morfologia se suelen llamar "células L.E." La estructura de la masa fagocitada no es completamente homogénea ya que muestra lugares claros y obscuros. No hay dibujo filiforme marcado H, I Cambios degenerativos en núcleos de neutrófilos fagocitarios que han englobado masas nucleares lisadas (célula post-L.E.) El diagnóstico del lupus eritematoso no debe basarse únicamente en la morfologia sino en anomalias clinicas y pruebas combinadas de laboratorio. Para decidir si los cámbios morfológicos son compatibles con el diagnóstico de lupus eritematoso es necesario apreciar los cámbios degenerativos en las células destinadas a ser fagocitadas (células pre-L.E.), los cambios degenerativos en los núcleos de los fagocitos (células post-L.E.) y los neutrófilos con masas nucleares fagocitadas en el citoplasma (células L.E.)

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35/ TIPOS DE CELULAS HALLADAS MAY-HEGGLlN EN UN FROTIS ENFERMO CON ANOMALlA DE

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Se han seleccionado arbitrariamente las células para mostrar , anomalias características. El número de trombocitos y leucocitos mayor que en un solo campo de inmersión A Monocito con masas citoplásmicas azul pálido, de tamaño variable y formas irregulares, con cuerpos de Dohle B Neutrófilos segmentados con cuerpos de Dohle C Basófilo con cuerpo de Dohle D Eosinófilo con cuerpo de Dohle E Trombocitos anormales Nótense las variaciones morfológicas de los eritrocítos , formas filamentosas romas y esferocitos

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36/ MONONUCLEOSIS
primitiva

INFECCIOSA

A Célula seudoplasmática

B, C Células seudoplasmáticas atípicas con núcleos hendidos estructura nuclear incipiente O Linfocito atípico grande con citoplasma azulado teñido irregularmente E Linfocito grande con vacuolas F Monocito atípico G Linfocito grande con gránulos deprimido por eritrocitos H Linfocito atípico I fv1onocito atípico con' gruesos en el citoplasma azurófilos gránulos y borde . rojizos (azurófilos)

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LEUCEMIA GRANULOCITICA

FIGURA

38/ LEUCEMIA MONOÓTICA

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A Monoblasto con nucléolos evidentes, núcleo hendido y seudópodos romos B Monoblasto con nucléolos evidentes C Promonocito con nucléolos y vacuolas en el citoplasma D Promonocito con pliegues nucleares, citoplasma espumoso E Promonocito con dos lóbulos nucleares, nucléolos, gruesos gránulos y ectoplasma homogéneo F Monocito con núcleo profundamente hendido y citoplasma granular G Monocito con núcleo transparente plegado, gránulo.s en el citoplasma H Monocito con núcleo plegado, cromatina filiforme, gránulos bien marcados y forma alargada (¿histiocito?) Monocito con eritrocito fagocitado

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40/ PLASMOCITOS
(MIELOMA

PATOLOGICOS PLASMOCITICO)

A Plasmocito con tres núcleos y citoplasma reticulado '. S Plasmocito con margen citoplásmico indistinto, múltiples glóbulos y secreción homogénea teñida de rosado e Plasmocito con glóbulos rojos en el citoplasma (cuerpos de Russell). Nótese también la materia teñida de rojo en el núcleo O Plasmocito rojo vivo ("flamante") :: Plasmocito con núcleo excéntrico y con formaciones cristalinas teñidas de rojo, gruesos gránulos rojos y citoplasma reticulado

FIGURA

41 /

PARASITOS

HEMATICOS

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Izquierda: Macrófago con Histoplasma capsulatum fagocitados Derecha: Macrófago con Leishmania donovani

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42/

HISTIOCITOS

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FIGURA

43/ COLORACION
(Sato y Sekiya)

CON PEROXIDASA

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Las dos células superiores (linfocitos) . son peroxidasa-negativas (no son . granulocitos) Las dos células inferiores (neutrófilos) son peroxidasa-positivas (granulocitos) Los eritrocitos están "Iacados" y aparecen como sombras Esta coloración permite distinguir células jóvenes de los sistemas mielocitico y monocitico, de células pertenecientes al sistema linfocitico

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44/ TROMBOCITOS SELECCIONADOS TROMBOCITOPENICA IDIOPATICA.

DE UN ENFERMO CON PURPURA AUMENTO 3500 X

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45/ TROMBOCITOS SELECCIONADOS3500DE UN ENFERMO DE MAY-HEGGLlN. AUMENTO X

CON ANOMALlA

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46/ LEUCEMICA. AUMENTO 3500 X TROMBOCITOS SELECCIONADOS

DE ÚN ENFERMO

CON MIELOFIBROSIS

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47/ TROMBOCITOS X SELECCIONADOS AUMENTO 3500

DE UN ENFERMO

CON TROMBOCITOPATIA.

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