Professional Documents
Culture Documents
1. 2. 3.
4.
5.
Cahya Hanifa Faizah Fitria Erni Yunita Gia Widiantara Taufiq F Muti Ramadiani Miftahul Uyun
SITOHISTOTEKNOLOGI
Pekerjaan membuat sel, jaringan hingga siap untuk diamati pembuatan sediaan/preparat Pemrosesan (processing) meliputi:mengawetkan, mencegah pembusukan,pewarnaan.
FIKSASI
Tujuan : 1. Mengawetkan jaringan mempertahankan susunan jaringan agar mendekati kondisi seperti sewaktu hidup. 2. Mengeraskan jaringan, terutama jaringan lunak untuk memudahkan membuat irisan tipis
Manfaat Fiksasi
1.
2. 3. 4. 5. 6. 7.
Sel & jaringan keadaannya seperti hidup Membunuh Bakteri Mematikan sel secara serentak Mengeraskan jaringan Melindungi sel dari prosesselanjutnya Mempermudah pengecatan Melindungi sel/jar ingan dari autolysis dan putrefaction
d)
e) f)
jaringan bersifat isotonis dengan jaringan tidak bereaksi/tidak mengadakan perubahan mencolok/sedikit mungkin mengadakan perubahan pada sel dan komponennya. cairan fiksasi harus murah karena cairan tsb digunakan secara secara besar-besaran stabil, tidak mudah berubah tidak toksik, aman
Keuntungan fiksasi
jaringan akan mengeras sehingga memudahkan pemotongan berikutnya 2. meningkatkan differensiasi optik/seperti daya pisah lensa 3. mengurangi resiko kontaminasi penyakit
1.
Supravital/intravital;
Teknik ini memungkinkan fiksatif mencapai seluruh jaringan dengan lebih cepat karena fiksatif dialirkan ke seluruh tubuh melalui perfusi dengan mesin perfusi. Alat yang digunakan adalah mesin perfusi, wing needle, selang infus. Bahan yang digunakan adalah NaCl fisiologis dan larutan pengawet.
sederhana dan sering dilakukan. Cara pengawetan : 1. Organ sediaan disiapkan 2. Di rendam pada larutan fiksatif selama 24 jam (volume min 20x besar jaringan)
kurangnya harus 15-20x volume jaringan yang akan difiksasi. Jenis cairan fiksasi
Menghambat proses pembusukan dan autolysis Pengawetan jaringan Pengerasan jaringan Pemadatan koloid Diferensiasi optic
1. Larutan formalin
Kelebihan
merupakan cairan pengawet
Kekurangan
Jaringan yang difiksasi
umum; pH mendekati netral; pigmen formalin tidak terbentuk. Potongan jaringan dapat ditinggalkan di dalam cairan sampai 1 tahun tanpa ada perubahan; Bila diperlukan, jaringan yang direndam dapat dimasukkan ke dalam cairan fiksatif lain.
memerlukan waktu sedikitnya 24 jam baru dapat diproses. Terjadi pengerutan pada jaringan, disebabkan oleh alkohol (proses dehidrasi) Formaline-saline menjadi asam . jaringan sering gagal menghasilkan pewarnaan yang baik.
2. Larutan Muller
Cairan fiksasi ini merupakan fiksatif sitologi yang dapat digunakan untuk memfiksasi nucleus dan Sitoplasma
Kelebihan
Mempunyai daya
Kekurangan
Jaringan yang difiksasi
penetrasi yang cepat dan baik. Jaringan biasanya akan terfiksasi baik dalam waktu 24 jam; Memfiksasi nukleus dan sitoplasma dengan baik.
dengan larutan Muller harus segera dilakukan proses dehidrasi setelah 24 jam. Harus dicuci dulu dengan air kran mengalir sebelum dilakukan proses dehidrasi.
3. Larutan Bouin
Cairan fiksasi ini mengandung larutan asam pikrat jenuh. Asam pikrat merupakan zat berbentuk serbuk bewarna kuning seperti kunyit.
Kelebihan
Sangat baik untuk
Kekurangan
Jaringan yang difiksasi
memperlihatkan nukleus dan kromosom seperti pada sel benih testis dan ovum, embrio, dan kulit.
dengan larutan Bouin harus segera dilakukan proses dehidrasi setelah 24 jam. Harus dicuci dulu dengan air kran mengalir sebelum dilakukan proses dehidrasi.
Daya fiksasinya
jaringan yang difiksasi dengan larutan fiksatif ini akan lebih cemerlang.
dalam larutan fiksatif ini yang melebihi waktu yang ditentukan akan mengakibatkan jaringan menjadi rapuh (keras)
dicampur dengan reagen lainnya seperti larutan Carnoy, fiksasi berlangsung cepat
Kekurangan
mempunyai daya penetrasi yang cepat dan merata serta memberikan hasil pulasan yang sangat cemerlang dengan rincian sitologi yang sangat baik
Bila jaringan difiksasi lebih dari 24 jam, jaringan akan menjadi keras dan rapuh.
8. Larutan Carnoy
larutan fiksatif ini juga akan mengawetkan substansia Nissl dan glikogen.
Kelebihan
Kekurangan
sitoplasma lainnya