TEORIA RELACIONADA Los cuerpos cetnicos son los cidos acetoacetico, la acetona y el cido -hidrxibutirico.

En la cetosis, hallamos un aumento de estas sustancias en la sangre y en la orina. Bajo buenas condiciones de salud, los cuerpos cetnicos se forman en el hgado y son completamente metabolizados, de tal manera que solo cantidades insignificantes aparecen en la orina. Por el contrario, en casos de diabetes, inanicin, vmitos con deshidratacin y despus de ejercicio vigoroso, los cuerpos cetnicos pueden encontrarse en cantidades apreciables en la orina, lo cual permite su determinacin cualitativa. La determinacin de acetona (Mtodo de Imbert), de fundamenta en la formacin de un ferropentacianuro con el derivado isonitrato de la acetona, la determinacin del cido acetoactico (Mtodo de Gerhrdt), se basa en al aparicin de una coloracin rojo-vinosa con el cloruro frrico y en el mtodo de Hart, el cido -hidrxibutirico es transformado en acetona, la cual se identifica mediante el reactivo de Imbert.

MATERIALES Y REACTIVOS Tubos de ensayo Gradilla Pipetas Beaker de 250 mL Cpsula de porcelana Pinzas para crisol Pinzas para tubos de ensayo Agua destilada Orina de diabtico Acido actico glacial Amoniaco Cloruro frrico al 10% Perxido de hidrgeno al 10% Nitroprusiato de sodio al 5% en CH3COOH al 50% PROCEDIMIENTO DETERMINACIN DE ACETONA: A 5 mL de orina, agregue 0.5 mL de nitroprusiato de sodio disuelto al 5% en cido actico al 50%, adicione 0.5 mL de amoniaco por las paredes del tubo, la aparicin de un anillo rojo violceo en 1 contacto de los lquidos, es indicativo de la presencia de acetona. DETERMINACIN DE CIDO ACETOACTICO A 5 mL de orina se adicionan unas gotas de cloruro frrico, en presencia de cido acetoactico se produce una coloracin rojo-vinosa.

DETERMINACIN DE CIDO -HIDRXIBUTIRICO En una cpsula de porcelana se mezclan 10 mL de agua y 10 mL de orina, se acidifica con unas 5 gotas de cido actico y se calienta en una estufa hasta reducir el volumen a la mitad. Con este calentamiento se eliminan la acetona y el cido acetoactico, al contenido de la cpsula se le agregan 10 mL de agua y se transfiere en partes iguales a dos tubos de ensayo, uno de estos tubos servir como control, al otro se le adiciona 1 mL de perxido de hidrgeno al 10% y se calienta en bao de Mara por 5 minutos, se deja enfriar y finalmente se practica la prueba de Imbert a ambos tubos. PREGUNTAS DE ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA. 1. Qu otro tipo de sustancias pueden determinarse en la orina por un metabolismo anormal de lpidos?. 2. Qu es la cetosis y la cetonuria. 3. Explique cmo se forman los cuerpos cetnicos y bajo que condiciones.

CUERPOS CETONICOS EN ORINA. Mtodo de Imbert.

FASE PREANALITICA INTRODUCCION: En condiciones normales se pueden encontrar en la orina pequeas cantidades de acetona, cido acetil actico y betahidroxibutirato no revelable por las reacciones ordinarias empleadas en el laboratorio. Estos compuestos proceden del metabolismo graso y se consideran patolgicos cuando las cifras son mayores de 20 a 25 mg diarios. Objetivo: Determinar cualitativamente cuerpos cetnicos en muestras de orina. Fundamento: En presencia de nitroprusiato, la acetona da lugar a un compuesto coloreado (color violeta) llamado ferropentacianuro. Reactivo necesario: -Reactivo de Imbert. -Amoniaco. Aparatos, utensilios y medios de medicin.

Tubos plsticos de 10 ml graduados de centrfuga. Tubo para ensayo de 13 x 100 15 x 125 mm. Gradilla para los tubos de ensayos. Pipetas graduadas de 5 ml. Gotero. Centrfuga.

Muestra: Orina de miccin espontnea, ms de 5 ml. FASE ANALITICA

Procedimiento:

1- Centrifugar la orina 5 min a 1500 rpm. 2- Colocar en un tubo de ensayo 5 ml de orina centrifugada o filtrada. 3- Aadir 5 gotas de reactivo de Imbert. 4- Mezclar. 5- Aadir por las paredes del tubo evitando que se mezclen 1 a 2 ml de amoniaco. 6- La lectura se realiza en la superficie de ambos lquidos.

Positiva: Si aparece un anillo de color violeta entre ambos lquidos cuya intensidad vara aproximadamente a la cantidad de acetona que contenga la orina. Negativa: No aparece el anillo. En los casos positivos se calienta la muestra y si el anillo desaparece se trata de acetona, ya que esta es voltil, pero si persiste se trata de la presencia de alguno de alguno de los medicamentos que dan falsos positivos como: cido acetil saliclico (aspirina). FASE POSTANALITICA Informe de los resultados: Se informar el resultado: Positiva: Si aparece un anillo de color violeta. De acuerdo con la intensidad del anillo se informa en ligero positivo, positivo, o intenso positivo, algunos lo informan con cruces. Negativa: No aparece el anillo. Fuentes de Error

1. No homogenizar bien las muestras de orina. 2. Nivel de adiestramiento del tcnico. 3. Limpieza de la cristalera. 4. No centrifugar la muestra antes de proceder. 5. Uso de reactivos caducados