You are on page 1of 27

Pruebas Bioqumicas Para Enterobacterias

Fundamentos

Eduardo Bermudez Chavez

IMVIC
INDOL ROJO DE METILO VOGES PROSKAUER CITRATO DE SIMMONS

Eduardo Bermudez Chavez

Medio SIM
INDOL ACIDO SULFIDRICO MOVILIDAD

Eduardo Bermudez Chavez

SIM INDOL
Para identificar el Indol, el medio tiene peptonas, y el aminocido triptfano el cual si las bacterias tienen la enzima triptofanasa hace que se libere el indol (grupo funcional del triptofano). Si se libera el indol, ste reacciona con Paradimetil Benzaldeido (Kovac) Color Rojo positivo Color Amarillo Negativo (no se liber indol porque la bacteria no tiene triptofanasa)
Eduardo Bermudez Chavez 4

SIM
ACIDO SULFHIDRICO H2S
El medio tiene tiosulfato, el cual libera cido sulfhdrico que es un gas. ste reacciona con la Sal de Hierro y forma un precipitado negro que es sulfuro ferroso. Color Negro Positivo (debido al precipitado) Sin precipitado Negro Negativo.
Eduardo Bermudez Chavez 5

SIM
MOVILIDAD Movilidad Negativa: Si la cepa crece solo en la picadura es inmvil. Movilidad Positiva: Si crece en todo el medio, es mvil.

Eduardo Bermudez Chavez

MR - VP
Es un caldo glucosado

PRUEBAS QUE SE REALIZAN: ROJO DE METILO VOGES PROSKAUER

Eduardo Bermudez Chavez

MR - VP
ROJO DE METILO Algunas bacterias obtienen energa de la glucosa del medio. Se forma piruvato (cido piruvico) y toma diferentes vas: algunas bacterias fermentan (se usan en productos lcteos) otras forman alcoholes (levaduras) Otras utilizan el ciclo de krebs. En otras hay vas que producen cidos mixtos.
Eduardo Bermudez Chavez 8

MR - VP ROJO DE METILO Las que producen cidos mixtos, acidifican el medio (bajan el pH) Estas bacterias son rojo de metilo positivas. POSITIVO Color Rojo NEGATIVO Color Amarillo

Eduardo Bermudez Chavez

MR - VP
VOGES PROSKAUER
Esta prueba se utiliza para ver la produccin de Acetona (Acetil Metil Carbinol) Se le agregan 6 gotas de Alfa Naftol que es un catalizador. Al agregar 3 gotas de sosa o potasa reacciona con la Acetona y forma un precipitado: POSITIVO Color ROJO NEGATIVO Amarillo, caf, oscuro. (dependiendo la antigedad del reactivo)
Eduardo Bermudez Chavez 10

AGAR CITRATO (CIT)


Este medio no tiene carbohidratos Tiene Azul de Bromotimol como Indicador La prueba es para ver si la bacteria utiliza como fuente de carbonos al citrato, el cual se encuentra en el ciclo de krebs. El medio tiene Citrato de Sodio y Sal de Amonio. Si utiliza el citrato Ver resultados en el bisel (porque es en el ciclo de krebs, oxidativo): POSITIVO Color Azul NEGATIVO Color Verde (original)
Eduardo Bermudez Chavez 11

CIT
Tambin puede cambiar de color i utiliza la sal de amonio (NH4), porque se alcaliniza el medio: Color Azul Cit POSITOVO (pH Acalno) Color Verde Cit NEGATIVO (Neutro) Color Amarillo Cit NEGATIVO (cido) Puede no cambiar de color, pero si hay crecimiento es positivo, ver otras pruebas.
Eduardo Bermudez Chavez 12

TSI
Tiene Glucosa, lactosa, sacarosa, azufre, y sal de hierro. Se realizan las pruebas: Fermentacin de glucosa Fermentacin de lactosa cido sulfhdrico Gas de Glucosa
Eduardo Bermudez Chavez 13

TSI
Color original sin sembrar: Rojo (Naranja) Gas de Glucosa positivo Formacion de burbuja pequea o botado del medio. H2S positivo Precipitado Negro.

Eduardo Bermudez Chavez

14

TSI
FERMENTACION DE CARBOHIDRATOS Fondo Amarillo Glucosa + Bisel Rojo Lactosa - , Sacarosa Bisel Amarillo y Fondo Amarillo GLuc + Lac + y Sac+. El medio tiene 1 g de glucosa, 10 gramos de lactosa y 10 gramos de sacarosa, por litro.
Eduardo Bermudez Chavez 15

LIA
Este medio, tiene peptonas y aminocidos (lisina). Se realiza la prueba: H2S (mismo fundamento) Descarboxilacin de Lisina. (o desaminacin) La prueba consiste en buscar la enzima lisina descarboxilasa de ciertas bacterias la cual descarboxila a la Lisina (aminoacido).

Eduardo Bermudez Chavez

16

LIA (Descarboxilacin de Lisina)


Al descarboxilar queda solo la amina (putresina o cadaverina). La cual da al medio un pH alcalino. POSITIVO Color Morado (alcalino) NEGATIVO Color Amarillo (cido). Cuando hay mucho cido el bisel tambin es amarillo.
Eduardo Bermudez Chavez 17

LIA (Desaminacin de Lisina)


proteus no descarboxila, solo desamina y se forma: Un cido dbil que reacciona con la sal de hierro y forma complejo naranja. Y un amonio que alcaliniza el medio y da un color morado. En conjunto se forma un color prpura o rojo en el bisel. (solo en proteus que es lisina -)
Eduardo Bermudez Chavez 18

MIO
El Medio tiene: Color Original Morado (ligeramente Alcalino) o Blanco (muy alcalino) Glucosa (original pH >7, cuando se utiliza la glucosa el pH vuelve a 6.5) Tiene prpura de Bromocresol como indicador. PARA VER Movilidad (mismo fundamento) Indol (mismo fundamento) Descarboxilacion de Ornitina (ODC)
Eduardo Bermudez Chavez 19

MIO Descarboxilacion de Ornitina


La ornitina descarboxilasa es una enzima que acta a pH 6.5 Si la bacteria tiene sta enzima descarboxila al aminoacido ornitina y tambin se desamina al mismo tiempo. Los productos son CO2 + H2O + AMINA (putresina o cadaverina) los cuales son compuestos alcalinos.
Eduardo Bermudez Chavez 20

MIO Descarboxilacin de Ornitina


Debido a los productos alcalinos se alcaliniza el medio y los resultados son: Positivo Color Morado (Alcalino) Negativo Amarillo (cido)

Eduardo Bermudez Chavez

21

CALDO MALONATO (MAL) Malonato


El fundamento es igual al citrato. Para ver si utiliza al malonato como fuente de carbonos.

Eduardo Bermudez Chavez

22

CALDO UREA
Caldo Original Color Amarillo TIENE Rojo fenol como indicador Peptonas Carbohidratos como fuente de C. UREA

FUNDAMENTO: Ver la hidrlisis de la urea.


Eduardo Bermudez Chavez 23

UREA
Ver si la bacteria tiene la enzima Ureasa que hidroliza la urea y produce amoniaco. Si se produce Amoniaco es Positivo. Positivo Rojo o Rosa Mex (Alcalino). Negativo Color Amarillo(Acido).

Eduardo Bermudez Chavez

24

AGAR FENILALANINA FAD


Ver la desaminacin de la Fenilalanina (aminocido). Algunas bacterias tienen la enzima fenilalanina desaminasa, que actua sobre la fenilalanina. Se produce acido fenil pirvico. Este reacciona con el cloruro frrico. Y da coloracin verde. Positivo Color Verde Negativo Color Amarillo (original).
Eduardo Bermudez Chavez 25

FOTOS DE RESULTADOS

Eduardo Bermudez Chavez

26

Eduardo Bermudez Chavez

27

You might also like