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práctica-ÓSMOSIS

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ESCUELA NACIONAL DE ANTROPOLOGÍA E HISTORIA LABORATORIO BIOQUÍMICA PRÁCTICA 1: TRANSPORTE DE MEMBRANA

INTRODUCCIÓN La existencia de la membrana plasmática que rodea las células, funciona como una especie de "muro comunicante" que separa dos compartimentos, el extracelular y el intracelular. Esta separación trae como consecuencia que las diferentes moléculas e iones se distribuyan de manera asimétrica estableciendo diferenciales de concentración y cargas eléctricas que promueven el intercambio entre ambos compartimentos. Estas moléculas e iones, pueden atravesar las membranas biológicas mediante diferentes mecanismos, dependiendo de la naturaleza polar, el tamaño de ellas y la diferencia de concentración. Dentro del grupo de moléculas que pueden atravesar las membranas, el paso de agua es muy importante para las células, porque utiliza un mecanismo particular que puede contribuir a disminuir diferencias extremas en las concentraciones de las sustancias disueltas entre los compartimentos, permitir la adaptación celular al medio ambiente o causar la destrucción de la misma. Este flujo de agua y/o de diferentes sustancias puede traer como consecuencia cambios en la morfología de célula que pueden ser apreciables al microscopio y que el estudiante aprenderá a identificar en esta práctica. Es por esto, que antes de iniciar este laboratorio los alumnos deberán consultar con anterioridad acerca de los diferentes mecanismos de transportes de moléculas por las membranas con permeabilidad selectiva. OBJETIVO GENERAL: ♦ Comparar los procesos físicos de difusión, osmosis y diálisis con el proceso fisiológico mediante el cual las moléculas se transportan a través de las membranas celulares. OBJETIVOS ESPECÍFICOS ♦ Visualizar y diferenciar los fenómenos de ósmosis y diálisis en células y modelos celulares ♦ Demostrar la importancia que tienen las concentraciones de distintas soluciones en el mantenimiento de la integridad de las células vegetales y animales. MATERIALES: Microscopios Porta y cubre objetos Gradilla para tubos de ensayo 5 Tubos de ensayo 2 pipetas Pasteur Navaja de un solo filo SOLUCIONES Permanganato de potasio Solución de NaCl al 6 % Solución fisiológica (NaCl al 0.9%) Rojo neutro en buffer de fosfatos Agua destilada *MATERIAL proporcionado por el estudiante, la sangre la llevará la maestra. MATERIAL BIOLÓGICO Sangre de animal Hojas de lirio* Cebolla* Hojas de elodea*

Agregue en cada tubo un número de gotas de permanganato de potasio en la siguiente forma: Tubo No. elodea y epidermis de hoja de lirio. Cuidando que no se arrugue deposítela en el portaobjeto y adiciónele tres gotas de solución hipotónica (agua destilada). 1 = 1 gota Tubo No. ¿Qué cambios se presentan en el citoplasma de las células que usted observa? ¿Qué nombre recibe este fenómeno? c. d. Coloque una gotita de sangre en un porta objeto. Deposite un pedacito de la epidermis de cebolla y agréguele 3 gotas de una solución hipertónica (NaCl al 6%) póngale un cubreobjetos y observe. La diferencia entre ambos es el tiempo de difusión. a igual temperatura y numérelos. 2 = 3 gotas Tubo No. Deposite un pedacito de la epidermis de cebolla y agréguele 3 gotas de una solución hipotónica (rojo neutro en buffer de fosfato). 3 = 5 gotas Mida el tiempo de difusión en cada caso. tiempo de difusión. póngale el cubreobjeto y observe con menor y mayor aumento. ¿Observa algún movimiento en los cloroplastos? ¿Qué nombre recibe este fenómeno? ¿Según el concepto de ósmosis en qué sentido se debe difundir el agua? b. Dibuje. Dibuje b. Para ello anote el tiempo inicial cuando se agregó el colorante y el tiempo final en que se difundió totalmente. adiciónele tres gotas de solución hipotónica (agua destilada). Deposite una hojita de Elodea en un portaobjeto. Haga una gráfica en papel milimétrico de concentración (# de gotas) vs.9%. pero con una solución hipertónica (NaCl al 6%). Observe y dibuje. póngale un cubreobjetos y observe. Ósmosis: a. ¿Qué diferencias morfológicas observó entre las células sanguíneas ubicadas en las soluciones isotónicas. Haga un esquema de lo observado. trate que quede libre de clorofila. pero con soluciones hipotónicas e hipertónicas respectivamente. Ponga el cubre objeto y observe. agréguele unas gotas de suero fisiológico 0. Plasmólisis: a.PROCEDIMIENTO: Difusión: Coloque en tres tubos de ensayo 5 ml de agua destilada. Haga un nuevo montaje de epidermis de hoja de lirio. Deposite una hojita de Elodea en un porta objeto y agréguele tres gotas de una solución hipertónica de cloruro de sodio (NaC al 6 %). Observe y dibuje ¿Qué forma tienen las células? Siguiendo el procedimiento anterior observe gotas de sangre. En cuál de las dos muestras. se observa mejor el fenómeno de plasmólisis? Explique ¿Por qué? c. póngale el cubre objeto y observe con menor y mayor aumento. Extraiga con una navaja un pedacito de epidermis del envés de una hoja de lirio. hipotónicas e hipertónicas? Interprete que sucede en cada una de las tres preparaciones sanguíneas .

hipo.-¿Qué efecto tiene la temperatura sobre la velocidad de difusión? 2.-¿Qué es presión osmótica? 11. T. explique la función de estas estructuras. 2003.Investigue la ley de difusión de Graham y la primera ley de Fick.-¿Cuál es la diferencia entre ósmosis y diálisis? 18. e hipertónicas? 7. et al. Tercera edición.-¿Cuál es el efecto de la concentración sobre la velocidad de difusión? 3. 2002. TAREA PREVIA (Se entrega el día de la práctica) PRÁCTICA: TIPOS DE TRANSPORTE DE MEMBRANA 1.-¿Defina que son soluciones iso. Tercera edición. 2.-Haga esquemas de los fenómenos de turgencia. .-Realice un diagrama de flujo de la práctica. 3..-¿Qué es homeóstasis? 15. Bioquímica..-¿Cómo regula el organismo humano el mantenimiento de la concentración de sales en la sangre? BIBLIOGRAFÍA Mathews. 4.-¿A qué se le llama transporte pasivo? 16.-Haga esquemas del fenómeno de ósmosis y difusión en la célula. al.-¿En qué consiste el transporte activo y el facilitado? 17. Bioquímica.CUESTIONARIO:  Sí se varía la temperatura del agua en los tubos del apartado de difusión.-¿Qué es presión de turgencia? 12. Pearson Addison Wesley. McGraw-Hill Interamericana. C. crenación y hemolisis observados en las células animales y vegetales.-¿Cómo se podría desplasmolizar una célula? 8. plasmólisis.-Realice un dibujo de las células epiteliales de la hoja de lirio y los estomas. McKee. 4. 1. et.-¿Por qué no estalla una célula vegetal cuando se encuentra en un medio hipotónico? 9. K.-¿Qué es permeabilidad diferencial? 10.-¿Qué diferencia observó entre las células de elodea y la epidermis de lirio? 5.-¿Cómo se llaman las estructuras respiratorias que hacen parte del tejido de epidermis de lirio? 6.-¿Por qué no estallan los glóbulos rojos cuando están circulando por nuestros vasos sanguíneos? 13..-¿Qué es crenación? 14.

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