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MORFOLOGIA MACROSCOPICA Y MICROSCOPICA RESUMEN:

Aunque existe un enorme nmero de microorganismos implicados en procesos infecciosos todos ellos se parecen mucho entre si desde el punto de vista morfolgico; las caractersticas macroscpicas y microscpicas son de gran ayuda en la identificacin y clasificacin de estos, cada microorganismo crece de manera diferente formando colonias de distinto color, forma, tamao, textura, olor y brillo, existen colonias ms elevadas que otras, con bordes enteros, estrellados y desflecados entre otras, por otra parte las caractersticas microscpicas; nos ayuda identificar de forma individual de su agrupacin y slo en raras ocasiones generan un diagnstico definitivo. El tiempo de incubacin es necesario para que aparezcan las colonias, que son un grupo de clulas con similares caractersticas, que actan en conjunto con la excepcin de que su funcin no es formar una unidad estructural mayor a especie de tejido. Lo ms importante fue identificar la morfologa de los distintos microorganismos (Klibsella y S. aureus) en sus respectivos medios de cultivos (agar nutritivo, caldo nutritivo, MYP y hektoen), describir y enumerar las caractersticas de los microorganismos con la utilizacin de dos instrumentos muy importantes como el microscopio, que hace visible objetos de tamao minsculo y el estereoscopio, este permite hacer estudios de objetos y espcimen demasiados pequeos para ser estudiados a simple vista. Se realizo la preparacin del rea de trabajo para el estudio de los microorganismos ya mencionados, luego se examino detalladamente cada una de sus caractersticas en cada una de las bacterias. Se pudo destacar que los microorganismos crecen sobre medios de cultivos que exhiben apariencia macroscpica y microscpica de su crecimiento estas diferencias llamadas caractersticas lo cual son la base para la separacin de ellos en grupos taxonmicos.

Palabras claves: Bacterias, consistencia, estereoscopio, microscopio,


morfologa.

INTRODUCCIN:
La forma de las bacterias al microscopio est determinada por la rigidez de su pared celular. Bsicamente, se diferencian segn su forma en cocos (esfricas u ovaladas), bacilos (cilndrica o de bastones; rectos o curvos) y espirilos (espiral); dentro de estas ltimas se encuentran: Treponema, Borrelia y Leptospira (Las espirilos varan en el nmero de vueltas, desde pocas (Borrelia) a muchas

(Treponema). Las bacterias pueden mantenerse unidas unas con otras despus de la divisin celular, pero conservando siempre la independencia celular. Si el plano de divisin es nico, podemos encontrar diplococos o cocos en cadena (microorganismos del gnero Streptococcus). Si los planos de divisin son muchos, los cocos pueden agruparse en ttradas o en racimos (Staphylococcus). Los bacilos pueden ser muy cortos (cocobacilos) o muy largos. Sus extremos pueden ser redondeados o rectos; pueden estar aislados, en cadenas, en filamentos o formando letras chinas (Corynebacterium). Los bacilos curvos pueden tener forma de coma (Vibrio cholerae). La morfologa bacteriana debe ser observada con el microscopio ptico o el microscopio electrnico, dado el tamao pequeo de estos microorganismos. El ms usado en el laboratorio es el microscopio ptico de campo claro, pero existen otros como el microscopio ptico de campo oscuro en los que los organismos aparecen brillantes en fondo oscuro. Este microscopio permite la visualizacin de bacterias difciles de colorear como el Treponema pallidum, agente de la sfilis. Las bacterias pueden observarse sin tincin (examen en fresco) si se las coloca en glicerol o soluciones no acuosas que aumenten el ndice de refraccin o con tincin usando distintas coloraciones que mejoran

su visualizacin ya que son clulas incoloras. Dichas tinciones se basan en la afinidad que presentan los colorantes por las estructuras bacterianas. Los colorantes catinicos por ejemplo, son atrados por los componentes de carga negativa como los cidos Nucleicos y los polisacridos. Ejemplo de este tipo son: el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina. El examen en fresco no es el ms usado para observar la morfologa bacteriana porque las bacterias tienen citoplasma incoloro y su ndice de refraccin no difiere mucho del vidrio y del agua. Con esta tcnica se puede verificar la existencia de bacterias y evidenciar su capacidad para moverse. El examen en fresco tambin puede ser usado con tcnicas especiales como la tincin con tinta china que nos permite determinar la presencia de cpsula rodeando la bacteria. Tambin puede usarse en el microscopio de campo oscuro por ejemplo para observar Treponemas o Leptospira con su movimiento caracterstico. Las coloraciones que se usan para teir los preparados de bacterias, se pueden dividir en: simples, diferenciales y especiales. Las primeras, por ejemplo el azul de metileno, nos permiten observar la existencia de bacterias, su morfologa, su agrupacin, la presencia de esporos y la existencia de otros tipos celulares. Las diferenciales (por ejemplo la coloracin de Gram y la de Ziehl

Nielseen) adems de lo anterior, permiten la diferenciacin de las bacterias porque usan diferentes colorantes que se comportan distinto segn el microorganismo en cuestin. Las tinciones especiales se usan para objetivar distintas estructuras como la cpsula, el ncleo, los flagelos, los esporos, etc. Antes de la coloracin hay que realizar la preparacin y la fijacin del frotis. La preparacin del frotis consiste en extender homogneamente la muestra (por ejemplo un cultivo bacteriano) o una suspensin de la misma sobre una lmina. Una vez preparado el frotis debe secarse y fijarse (por ejemplo con calor). Con la fijacin del frotis se pretende obtener la muerte de los microorganismos, la adhesin a la lmina y la conservacin de su morfologa. Despus de preparar y fijar el frotis, se puede realizar cualquier tipo de coloracin (simple o diferencial). La coloracin de Gram es la ms usada en bacteriologa; debe su nombre a quin la describi en 1884. Es una coloracin diferencial, dado que las bacterias pueden clasificarse segn su respuesta en grampositivas o gramnegativas. Las primeras se tien de color azul violeta y las segundas adquieren un color rosado o rojo. La diferente reaccin de las bacterias a la coloracin de Gram se relaciona con diferencias fundamentales de la

envoltura celular clases de clulas.

de

estas

dos

Entre las principales caractersticas de las bacterias se encuentran su tamao, forma, estructura y tipo o modo de agrupacin. Todas estas caractersticas van a constituir la morfologa propia de las clulas bacterianas. El tamao es una caracterstica para cada tipo microbiano; se puede medir con gran exactitud y fiabilidad a pesar de que slo puede observarse la bacteria al microscopio, precisamente por sus dimensiones microscpicas. La forma es igualmente una caracterstica para cada tipo bacteriano, que puede visualizarse con facilidad a travs de microscopia; en este sentido aparecen formas enteras o cocoides, formas cilndricas o bacilares, formas espirales o helicoidales, formas cocobacilares, forma de coma, etc. Su agrupacin sigue siendo otra caracterstica de cada tipo de bacterias, distinguindose aqu agrupaciones macroscpicas y agrupaciones microscpicas. Las primeras son visualizadas a simple vista y corresponden a su crecimiento en un punto en un medio de cultivo solido

para formar colonias que sern distintas y caractersticas para cada tipo bacteriano. Las segundas son visualizadas por microscopia y corresponde a lo que realmente se entiende por agrupacin bacteriana, es decir la tendencia que presentan los distintos tipos bacterianos para asociarse entre s formando pequeos grupos de 2 o ms bacterias, por ejemplo en ttradas, en diplococos, en racismos, en cadenas, etc. Que con frecuencia es caracterstico de un grupo taxonmico, por ejemplo un gnero.[1] Una colonia es una agrupacin de bacterias formada a partir de la reproduccin de una Unidad Formadora de Colonia (UFC) sobre un medio slido; aunque vara de tamao generalmente es visible a simple vista. Una UFC puede ser un solo microorganismo o bien un grupo de microorganismos de una misma especie como en el caso de bacterias que tienen tendencia a permanecer unidas como los estafilococos o los estreptococos. Las colonias bacterianas tienen una medida, forma, textura y en algunos casos color caractersticos, que aunque puede variar de acuerdo al medio en que se encuentren, es constante bajo condiciones controladas y depende de la

especie bacteriana que la forme. Debido a que las caractersticas de las colonias ocurren en varios grados y combinaciones dependiendo de las bacterias y son a menudo muy uniformes, sirven para identificar bacterias en cultivos mezclados. Sin embargo, adems de stas caractersticas se requiere tambin estudiar la fisiologa y propiedades inmunolgicas de las bacterias para poder realizar una identificacin completa. La morfologa colonial es comparable a una estadstica ya que se deriva de una clula individual pero es la caracterstica de la masa celular. As pues, por ejemplo, la pigmentacin es aparente en la colonia, pero no en la clula individual, en el caso de la consistencia mucosa de algunas colonias esta se deriva de la sustancia capsular en aquellas bacterias con cpsula muy grande. Medida de las colonias. sta caracterstica es bastante constante dentro de las especies y puede ir desde colonias muy diminutas hasta un dimetro de varios milmetros. Forma: Est determinada por su borde y su espesor. En la figura 2 se pueden observar varias formas, elevaciones y bordes de colonias bacterianas. Consistencia y textura. La consistencia de las colonias puede variar desde una colonia seca que puede moverse sobre el agar con el asa, hasta una colonia viscosa que se pega al asa y forma filamentos o

hilos mucosos cuando se trata de separarla del agar. La superficie puede ser uniformemente brillante y suave o puede ser estriada con muescas concntricas o quebradas. Al examinar la colonia con luz transmitida puede aparecer con textura granular o amorfa. Pigmentacin. Esta caracterstica es muy comn en las bacterias

saprfitas en las que las colonias aparecen rojas, anaranjadas, amarillas, etc. De los microorganismos patgenos uno de importantes es Staphylococcus aureus que tiene un color amarillo dorado. El pigmento no se aprecia en las clulas individuales a que se debe a grnulos intracelulares muy pequeos para verse con luz transmitida.[2]

MATERIALES Y METODOS:
Se efectu la limpieza en el lugar de trabajo con solucin jabonosa y posterior mente con hipoclorito. Se utilizo varios medios de cultivos en caja de petri unos con bacteria Klibsella y otros con S. aureus. Con el estereoscopio se realizo la descripcin morfolgica, de cada uno de los microorganismos dados por el profesor a cargo. Con el asa redonda se tomo inoculo de Klibsella y S. aureus y se froto en un cubre objeto respectivamente marcado al cual se le haba adicionado una gota de agua. El cubre objeto fue flameado en el mechero hasta que la muestra se fijara. Seguido se le adiciono azul de metileno dejndolo actuar por 1 minuto, al pasar este tiempo se lav el frotis con agua de la llave a baja presin para remover el exceso de colorante. Se dejo secar la muestra al aire.

RESULTADOS:

Caractersticas macroscpicas de los microorganismos estudiados: Cajas de petri: Klibsella: Tamao forma Elevacin Margen Color Superficie Aspecto consistencia S. aureus: Tamao Forma Elevacin Margen Color Superficie Aspecto Consistencia Tubos: S. aureus Klibsella AGAR INCLINADO: Crecimiento Pigmentacin Caractersticas Forma Motilidad TUBOS RECTOS: Klibsella abundante no criognico traslucidas difusa si S. aureus abundante No criognico traslucidas difuso si Caldo nutritivo sedimento Sedimento y turbidez(++) Agar nutritivo pequeo Circular plana entero blanco lisa traslucido blanda Agar nutritivo grande circular elevada entero blanco lisa traslucida blanda Myp No se pudo medir circular elevada entero blanca lisa No se pudo medir blanca Hektoen No se pudo medir circular convexa entero naranja rugosa No se pudo medir blanda

Klibsella S. aureus

motil motil

Caractersticas microscpicas de los microorganismos estudiados: Klibsella


Es un gnero de bacterias mviles, Gram-positivas, anaerobias facultativas y con una prominente cpsula de polisacridos. bacteria anaerobia facultativa, gram positiva

S. aureus

ANALISIS: Morfologa macroscpica La mayora de las bacterias se multiplican rpidamente y son visibles como colonias cuando se las siembra en medios de cultivo slidos adecuados. Requieren una incubacin de aproximadamente 24 horas en una atmsfera que favorezca su desarrollo, a temperatura ptima. Una colonia est constituida por los descendientes de una o unas pocas clulas. Las caractersticas de la colonia tambin dependen de la movilidad de la bacteria. El tamao puede variar desde 0.5 mm a ms grandes como las enterobacterias. La forma de la colonia puede ser circular (Staphylococcus), irregular o filamentosa (Bacillus). Los bordes pueden ser ondulados en sierra o dentado La superficie de la colonia tambin es orientadora y puede ser: plana, convexa, mamelonada, umbilicada En relacin al pigmento que adquieren, ste puede ser: verde (P. aeruginosa), amarillo (S.

aureus), grisceo (N. meningitidis). Tambin es diferente el comportamiento frente a la luz: brillante (Streptococcus) u opaca (Staphylococcus). Pueden presentar olores particulares como el frutal Por ltimo hay que destacar la consistencia: mucoide (M), liso (S) o rugoso (R). Las colonias M tienen aspecto acuoso, brillante, propio de las bacterias capsuladas o que forman cubiertas polisacridos como Klibsella. Morfologa microscpica La forma de las bacterias al microscopio est determinada por la rigidez de su pared celular. Bsicamente, se diferencian segn su forma en cocos (esfricas u ovaladas), bacilos (cilndrica o de bastones; rectos o curvos) y espirilos (espiral); Las bacterias pueden mantenerse unidas unas con otras despus de la divisin celular, pero conservando siempre la independencia celular. Si el plano de divisin es nico, podemos encontrar diplococos o cocos en

cadena (microorganismos del gnero Streptococcus). Si los planos de divisin son muchos, los cocos pueden agruparse en ttradas o en racimos (Staphylococcus). Los bacilos pueden ser muy cortos (cocobacilos) o muy largos. Sus extremos pueden ser redondeados o rectos; pueden estar aislados, en cadenas, en filamentos o formando letras chinas La morfologa bacteriana debe ser observada con el microscopio ptico o el microscopio electrnico, dado el tamao pequeo de esto microorganismos. El ms usado en el laboratorio es el microscopio ptico de campo claro Las bacterias pueden observarse sin tincin (examen en fresco) si se las coloca en glicerol o soluciones no acuosas que aumenten el ndice de refraccin o con tincin usando distintas coloraciones que mejoran su visualizacin ya que son clulas incoloras. Dichas tinciones se basan en la afinidad que presentan los colorantes por las estructuras bacterianas.

CONCLUSIONES: El estudio detallado de los componentes celulares requiere el uso de instrumentos que permitan ampliar muchas veces la imagen de las estructuras que lo constituyen como es el caso del microscopio El xito de la observacin d la estructura microbiana se

basa en el buen manejo que se le da al microscopio El Microscopio es: un instrumento que se utilizan para obtener una imagen aumentada de objetos minsculos o detalles muy pequeos de los mismos. El microscopio simple o lente de aumento es el ms sencillo de todos y consiste en realidad en una lupa que agranda la imagen del objeto observado. Dos lentes convexas bastan para construir un microscopio. Cada lente hace converger los rayos luminosos que la atraviesan. Una de ellas, llamada objetivo, se sita cerca del objeto que se quiere estudiar. La imagen es observada por la segunda lente, llamada ocular, que acta sencillamente como una lupa. Zacharias y Hans Janssen construyeron en los aos 1590's el primer microscopio registrado. En 1932, Bruche y Johnsson construyen el primer microscopio electrnico a base de lentes electrostticas. Los virus, y los objetos ms pequeos, como las macromolculas solamente pueden verse a travs del microscopio electrnico. El desarrollo de las colonias sobre superficies de agar, permite al microbilogo identificar las bacterias porque las especies forman a

menudo colonias con una forma y aspecto caracterstico El tamao, forma, textura y color de una colonia es propio de cada organismo La morfologa de la colonia de una bacteria puede variar segn el medio en el que crezca la bacteria ANEXOS: 1- Seale las ventajas en cuanto a observaciones de colonias en medios slidos frente a medios lquidos RTA: La ventaja es que en medios slidos se puede hacer mejor el estudio de las colonias, ya que estn mejor definidas. 2- Defina: Abertura numrica: En ptica, la apertura numrica (AN) de un sistema ptico es un nmero a dimensional que caracteriza el rango de ngulos para los cuales el sistema acepta luz. Recprocamente, tambin est relacionado con el ngulo de salida del sistema. La definicin exacta del trmino vara segn diferentes reas de la ptica. Campo microscopio: Se denomina campo

del microscopio al crculo visible que se observa a travs del microscopio. Tambin podemos definirlo como la porcin del plano visible observado a travs del microscopio. Si el aumento es mayor, el campo disminuye, lo cual quiere decir que el campo es inversamente proporcional al aumento del microscopio. Para medir el dimetro del campo del microscopio con cualquiera de los objetivos se utiliza el micrmetro, al que se har referencia en el siguiente punto.

Poder de resolucin: Se refiere a la nitidez de las imgenes obtenidas, sobre todo respecto a sus contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la correccin de las aberraciones de las lentes utilizadas.[3]

Bibliografa:
1- http://books.google.co

m.co/books?id=sUrIec df_O8C&pg=PA250&d q=macroscopia+bacter iana&hl=es&sa=X&ei= 7fP1UbfXDvLd4AOFjY

HgAQ&ved=0CCwQ6 AEwAA#v=onepage&q =macroscopia%20bact eriana&f=false


2- http://microdonto.files.wo rdpress.com/2009/03/mor fologia-de-las-coloniasbacterianas.pdf 3- http://www.slideshare.net /PRINCESSANITA/macrosco pa