PRUEBAS BIOQUMICAS PARA LA IDENTIFICACIN DE Staphylococcus

Janet Salazar L

Bacteriloga
IUCMde A

1.catalasa:

Enzima catalasa, desdobla el perxido de hidrogeno en agua y oxigeno **desprendimiento de burbujas

Catalasa positivo: catalasa negativo: Staphylococcus Streptococcus Micrococcus Enterococcus Planococcus Aerococcus

Stomacoccus Planococcus

Diferencia los gneros:

Streptococcus (-) de Micrococcus (+) y/o Staphylococcus (+).

2. Coagulasa:
Enzima que estimula la conversion del fibrinogeno en fibrina, comprueba la facultad de un MO de coagular el plasma por accion de esta enzima Coagulasa tubo: coagulasa libre: detectala produccion de la enzima estafilocoagulasa Coagulasa placa: detecta la produccion de una proteina localizada en gran parte del Staphylococo

** recomendado plasma de conejo con EDTA , no se debe usar el plasma citratato por que los Mos que pueden usar citrato ej especies de Enterococcus produciran resultados positivos confundiendose con staphylococcus El plasma humano puede contener anticuerpos antiestafilococicos (material vencido de bancos de sangre)

La prueba de la coagulasa es usada especficamente para diferenciar las especies del genero staphylococccus:

S. aureus S. epidermidis

Positiva Negativa

**Diagnostico Microbiologico de Koneman 2008 pag 614

Placa: Una prueba positiva, usualmente ocurre entre 5-20 segundos. Una pruebasi positiva, usualmente ocurre entre 5-20 segundos. La prueba negativa la La prueba negativadentro si la aglutinacin aglutinacin no ocurre de 3-4 no ocurre dentro de 3-4 minutos. minutos. Tubo: interpretacin prueba positiva coagulo completo coagulo parcial, el coagulo no abarca completamente la columna del fluido. prueba negativa: no hay formacin de coagulo, la suspensin permanece homognea

3. Oxidasa
Determinar la presencia de enzimas oxidasa La reaccin de la oxidasa se debe a la presencia de un sistema citocromooxidasa que activa la oxidacin del citocromo que es reducido por el oxgeno molecular que produce agua o perxido de hidrgeno segn la especie bacteriana

Diferenciar los Staphylococcus de

Micrococcus: Staphylococcus catalasa + oxidasa-

Aerococcus
Stomacoccus Micrococcus Catalasa + oxidasa+
Nota: los Staphylococcus mediante la prueba de oxidasa y resistencia a la furazolidona

Prueba oxidasa

4. Prueba de resistencia a la Bacitracina:

Staphylococcus ( R) resistente a la bacitracina

Micrococcus y stomacoccus (S) sensibles a la bacitracina

5. Prueba de resistencia a la furazolidona: Micrococcus (r) a la FX ( halo 6-9 mm)

Staphylococcus (S) a FX halo >=15 mm

6. Prueba de la novobiocina
Staphylococcus saprophyticus: (R ) Halo 6-12 mm Otros Staphylococcus y S. aureus: ( S) Halo >=16 mm

7. manitol

La degradacion del Manitol

(carbohidrato) hace cambiar de color al indicador Rojo de Fenol a amarillo indicando la acidificacion del medio

Manitol ( +) S. aureus
Manitol ( )S. epidermidis

Crecimiento en Agar manitol sal Izquierda bacteria manitol negativo y derecha manitol positivo

8. Agar DNAsa
para determinar actividad de desoxirribonucleasa el cual es visualizado agregando HCL 0.1
los que degradan DNA se observara transparencia alrededor de la siembra y los que no degradan DNA no se observara transparencia la siembra debe ser puntos de inoculacion de aproximadamente 5mm de diametro Util para S. aureus: DNAsa : positiva

hay otros estafilococos que dan reacciones positivas

9. urea
Medio utilizado para diferenciar microorganismos en base a la actividad uresica Se utiliza para estafilococos

Negativa/ positiva

IDENTIFICACIN DE LAS ESPECIES DE STAPHYLOCOCCUS Identificacin de las COAGULASA NEGATIVO especies de

Staphylococcus coagulasa negativo

ESPECIE

PYR

Coag

Urea

Man

Saca

Bac1

Poli2

Novo3

S. capitis S. cohnii S. epidermidis S.hominis S. saccharolyticus S. saprophyticus S.warneri S. xylosus

-/+d + + NP + + +

+ +/+d -/+ +/+/+/+d

+ + +L + + +

S V S S S V S V

S S R S S S S S

S R S SS S R S R

Diferenciacion de cocos coagulasa negativo, PYR negativo, Novobiocina resistente

Diferenciacin de cocos coagulasa negativo, PYR negativo, Novobiocina resistente

ESPECIE

Ureasa

Oxidasa

Fos-Alc

Acido trealosa

S. saprophyticus S. cohnii subs cohnii S. cohnii subs.urealyticum S. sciuri subs.sciuri S. hominis subs.novobiosepticus

+ + +

+ -

+ + -

+ + + + -

S. aureus:

Coco Gram positivo que se agrupa Catalasa positivo Coagulasa positivo tanto en lamina como
Oxidasa negativo Fermenta el Manitol
en tubo en racimos

Api Staph
Sistema estandarizado de identificacion de los generos Staphylococcus Micrococcus Kocuria

incluye test bioquimicos

estandarizados y miniaturados y una base de datos especifica

identificacin
se obtiene a partir del perfil numrico
Determinacin del perfil numrico:

En la hoja de resultados, los tests estn separados en grupos de 3 y se asigna para cada uno un valor 1, 2 4. Sumando en el interior de cada grupo los nmeros
que corresponden a reacciones positivas, se obtienen 7cifras que constituyen el perfil numrico.

identificacin: Se realiza a partir de la base de datos * Con la ayuda del Catlogo Analtico: - Localizar el perfil numrico en la lista de los perfiles. * Por medio del software de identificacin apiweb TM : - Introducir manualmente por teclado el perfil numrico de 7 cifras. 6 706 113 Staphylococcus epidermidis