You are on page 1of 61

1.Conceptulactualdespreorganizareamebranelorcelulare WilhelmFriedrichHofmeister1867notiuneademembrana WilhelmFriedrichPhillipPfeffersiHugoMariedeVrienotiuneaapareinmanuale. Oricemasanecesitasafiedelimitatadeomembranasemipermeabila,translucidacuun indicederefractiealluminiimaimaredecatcelalmediuluiinconjurator CharlesErnestOverton1899Permeabilitateaunorcompusiestecuatatmaimare cucatsolubilitatealorinlipideestemaicrescuta.

IrvingLangmuirNobelinchimielipideleintinseintrunfilmpeosuprafataapoasa sevororientacucapulhidrofobcatreaersicupartilehidrofilecareapa EvertGorter(medicolandez)siasistentulsauFrankGrendel1925folosind tehnicaluiLangmuiraudescoperitcalipideleextrasedinmemebranaeritrocitaraocupao suprafatade2orimaimaredecatceadelanivelulmembraneinotiuneadeBISTRAT LIPIDIC JamesFrederichDaniellisiHughDavsonUniversitateaCollageLondraau descoperitcaincadrulmembranarsenecesitastudiulexistenteiproteinelordatorita tensiuniisuperficialescazute.Bistratullipidicareovaloaremairedusaatensiunii superficialedecataceeasicantitatedelipidedispuseindividualmodelulSandvichbistrat lipidicincadratde2straturideproteineglobulare DavidRobertson1957modelulunitmembrane2straturielectronoopacece delimiteazaunulelectronotransparent.Seconstatacaproteineledinexteriordiferadecele dininterior. SeymourJonathanSingersiGarthNicholson1972modeluldemozaic fluid(valabilsiptendomembrane)MEsiinghetarefracturare MeritamentionatisiStecksiVincentMarchesi Trasaturilefundamentalealemembranei: eterogenitate asimetrie(diversitateaproteinelorsiexistentaglucidelordoarpefataexterna) fluiditatebidimensionala(lipide) motilitatearestrictionata(capulhidrofob/hidrofil) 2.Compozitiachimicaglobalaamembraneicelulare Compozitiamembranelordiferadecompozitiacitosolicasiextracelularaprincaractere fizicochimice.Astfel,celedouacomponentesuntfoartehidratate,scufundateinapafiind hidrofilepecandmembrana,mediuldesepararedintredouaspatiihidrofile,vatrebuisa aibacaracteristicifiziochimicediferite,opusechiar hidrofobe,astfelputandfiexplicata concentratiaprocentualascazutainapaamembranei2030%sicrescutainmateriede reziduuuscat.Esteotrasaturafundamentaldiferitadesistemelebiologicececontinapa inproportiede7080%. Reziduuluscat97080%)prezintasieloheterogenitatefiindcompusdin99%substante minerale(4050%lipide,5060%proteine,10%glucide)si1%substanteminerale. Componentalipidicaestedebazainmembranelecelularedatoritastrucutruiilipidice uncapathidrofil,altulhidrofob. Membranacelularanuconstituieobarieraabsoulta,ciunarelatativaavandastfeldoua functii: (1)Debariera (2)Metabolicaarelabazacapacitateadeadesfasuraschimburibidirectionalesinotiunea

deselectivitate 3.Lipidelemembranare,definitie,clasificari Lipidelememnranarereprezintaocategorielargadesubstateorganice,relativinsolubilein apa,solubileinceimaimultisolventiorganici,cucaracteramfifil,multedintreelefiindesteri aiunoralcoolipolihidroxilicicuacizigrasi. Proportiadiferitadintreproteinesilipide,primelefiindinprocentmaimarese explicaprinmasamolecularasuperioara,nuprinnumaruldemolecule.Raportuledintre proteinesilipideestede50:1. Desiexistaomaregamadelipideinmembranacelularanusegasectoatetipurilecidoar 3categoriiimportante: (1) Fosfolipide7075% Clasificareafosfolipidelorinfunctiedepoliol a)Fosfogliceridepornescdelaglicerina b)Fosfosfingozidepornescdelasfingozina(aminoalcoolnesaturatcudoicarboni asimetrici)[GlicerolaminatlaC2,culantlungmononesaturatlaC1] DupaceseataseazalaC3alfosfogliceridelorputemfaceoclasficiaremaiprecisa: i. Fosfatidilcoline(PC)=lecitina,lekithos=galbeusdeou X=colina ii.Fosfatidiletanolamine(PE) iii.Fosfatidilserine(PS) iv.Fosfatidilinozitoli(PI) v. AcidFosfatidic(PA) Dincategoriafosfosfingozideloramintimcardiolipinele,plasmalogenelesisfingomielina. Cardiolipinelesuntalcatuitedin2moleculedeacidfosfatidiccondensatelaOHlateraliai uneia3amoleculedeglicerina. Plasmalogenelesuntinproportiede10%lanivelulencefalului,muschilor,rinichiuluisi testicululuidarlanivelulmiocarduluiajungepanala50deprocente.Suntasemanatoare dinpunctdevederestructuralcufosfatidilcolinelesifosfatidiletanolaminele,auinpozitia1 aglicerineiunalcoolgrasnesaturatcudublalegaturaintreC1siC2. PC+PM+GLICOLIPIDEEXTERIOR PE+PI+PSINTERIOR Aciziigrasi: solubilitateinapa++<C12C24hidrofobicitate++ ingroasarebistrat Suntsaturatisaunesaturaticucatenahidrocarbonataneramificata. Clasificareinfunctiedeacidulgrasesterificatlapozitia1sau2aglicerinei: 1+acidgrassaturat:miristicC14,palmiticC16,stearicC18 2+acidgrasnesaturat:oleic1,linoleic2,linolenic3C18 !!acidularahidonic,eicotetraenoic. FrecventaC16>C14<C18 (2)Colesterol2025%

(3)Glicolipide(dinclasasfingolipidelor)110% Glicolipdele(continsfingozinasicolinadarnuaufosforinmembranaexterna) Colesterolulestedistribuitinproportieegala. N.B.AparitiaPSinmembranaexternaestesemncacelulaintraintrunprocesapoptotic. Spatiulocupatdelipidepoatefiasemanatcuuncilindrualcaruibazaare60Acuinaltimea de30A. Prinmobiliatealipidelormembranare,trebuiesaluaminconsideraredinamica componentelororganiceelenusuntstaticesuntintrocontinuaagitatie.Astfelmiscarile sunt: Intramolecularederotatie(intregulcorp)injurullegaturiiCC10^9rotatii/s flexie(acozii)10^8flexii/sstergatordeparbriz Intermolecularedifuzielaterala(inplanuluneifoitelipidice)10^7schimbaride directie/s flipflop(trecereadintrofoitaabistratuluiinaltafoarterara,aproapenula) 1/luna,maifrecventainendomembraneleRE Manifestareabidimensionalaafluiditatiibistratuluilipidicdamembraneicelulalre caracteruldestructuracuproprietatimezomorfespecificecristalelorlichidedatorat capacitatiilipidelordeastructuramicrodomeniibogateinsfingolipide,colesterol,proteine membranarecepoartanumeledelipidrafts.Astfelseorganizeazastructurispecializateale membraneicumarficaveolele.Lipidraftssuntstructuriplanaresauinvaginate,ca exemplupentruceledinurmasuntcaveolele=veziculeplasmalemaleincelula endoteliala. Fluiditateasemoduleazaprinmaimultifactori: Fizici:presiune,temperatura Chimici:intrinsecisauextrinseci oDincategoriacelorintrinseci,componentachimicpropriuzisa:aciziigrasisaturatiscad fluiditatea,ceinesaturatiocresc,colesteroluloscade,rigidizeazamembrana.

4.Fosfolipide:distrubutiesimobilitate Lipidelememnranarereprezintaocategorielargadesubstateorganice,relativinsolubilein apa,solubileinceimaimultisolventiorganici,cucaracteramfifil,multedintreelefiindesteri aiunoralcoolipolihidroxilicicuacizigrasi. Proportiadiferitadintreproteinesilipide,primelefiindinprocentmaimarese explicaprinmasamolecularasuperioara,nuprinnumaruldemolecule.Raportuledintre proteinesilipideestede50:1. Desiexistaomaregamadelipideinmembranacelularanusegasectoatetipurilecidoar 3categoriiimportante: (2) Fosfolipide7075% Clasificareafosfolipidelorinfunctiedepoliol a)Fosfogliceridepornescdelaglicerina b)Fosfosfingozidepornescdelasfingozina(aminoalcoolnesaturatcudoicarboni asimetrici)[GlicerolaminatlaC2,culantlungmononesaturatlaC1]

DupaceseataseazalaC3alfosfogliceridelorputemfaceoclasficiaremaiprecisa: i. Fosfatidilcoline(PC)=lecitina,lekithos=galbeusdeou X=colina ii.Fosfatidiletanolamine(PE) iii.Fosfatidilserine(PS) iv.Fosfatidilinozitoli(PI) v. AcidFosfatidic(PA) Dincategoriafosfosfingozideloramintimcardiolipinele,plasmalogenelesisfingomielina. Cardiolipinelesuntalcatuitedin2moleculedeacidfosfatidiccondensatelaOHlateraliai uneia3amoleculedeglicerina. Plasmalogenelesuntinproportiede10%lanivelulencefalului,muschilor,rinichiuluisi testicululuidarlanivelulmiocarduluiajungepanala50deprocente.Suntasemanatoare dinpunctdevederestructuralcufosfatidilcolinelesifosfatidiletanolaminele,auinpozitia1 aglicerineiunalcoolgrasnesaturatcudublalegaturaintreC1siC2. PC+PM+GLICOLIPIDEEXTERIOR PE+PI+PSINTERIOR Aciziigrasi: solubilitateinapa++<C12C24hidrofobicitate++ ingroasarebistrat Suntsaturatisaunesaturaticucatenahidrocarbonataneramificata. Clasificareinfunctiedeacidulgrasesterificatlapozitia1sau2aglicerinei: 1+acidgrassaturat:miristicC14,palmiticC16,stearicC18 2+acidgrasnesaturat:oleic1,linoleic2,linolenic3C18 !!acidularahidonic,eicotetraenoic. FrecventaC16>C14<C18 Prinmobiliatealipidelormembranare,trebuiesaluaminconsideraredinamica componentelororganiceelenusuntstaticesuntintrocontinuaagitatie.Astfelmiscarile sunt: Intramolecularederotatie(intregulcorp)injurullegaturiiCC10^9rotatii/s flexie(acozii)10^8flexii/sstergatordeparbriz Intermolecularedifuzielaterala(inplanuluneifoitelipidice)10^7schimbaride directie/s flipflop(trecereadintrofoitaabistratuluiinaltafoarterara,aproapenula)1/luna,mai frecventainendomembraneleRE Manifestareabidimensionalaafluiditatiibistratuluilipidicdamembraneicelulalre caracteruldestructuracuproprietatimezomorfespecificecristalelorlichidedatorat capacitatiilipidelordeastructuramicrodomeniibogateinsfingolipide,colesterol,proteine membranarecepoartanumeledelipidrafts.Astfelseorganizeazastructurispecializateale membraneicumarficaveolele.Lipidraftssuntstructuriplanaresauinvaginate,ca exemplupentruceledinurmasuntcaveolele=veziculeplasmalemaleincelula endoteliala. Fluiditateasemoduleazaprinmaimultifactori: Fizici:presiune,temperatura Chimici:intrinsecisauextrinseci oDincategoriacelorintrinseci,componentachimicpropriuzisa:aciziigrasisaturatiscad

fluiditatea,ceinesaturatiocresc,colesteroluloscade,rigidizeazamembrana. 5.Rolullipidelormembranare. Referitorlarolullipidelormembranare,acesteasuntdouamajore: (1)Structuralebistratlipidic,membranaselectiva (2)Metaboliceambiantabiosocialaunestecelulacumediulpoateprezentavariatii fiziologicesipatologicedevenindtinteterapeutice. Deasemeneaprezintaroluriinsemnalizareacelularaprincomponentaglicolipide. Functiametabolicasepoatemodulaprinfosfolipazeenzimececliveazalipideleexistente cuunscopunulmetabolicincomunicareacelulara(exemplu:cascadaPLCcuIP3) Potfidemaimultefeluridupaloculundecliveaza: 1.PLA1elibereazaacidulgrasdinpozitia1aglicerinei 2.PLA2elibereazaacidulgrasdinpozitia2aglicerinei,cuformaredelizofosfatide 3.PLBcumuleazaactivitateaA1siA2,actioneazaingeneralasupralizofosfatidelor 4.PLCdesfaclegaturiledintreglicerinasifosfat,cueliberaredeDAG 5. PLDeliminarestullegatfosforicXcueliberaredePA Caexemplu,avemPLA1cepoateeliberaacidarahidonic,careesteprecursorul prostaglandinelor,prostaciclinelor,tromboxanilorsileucotrienelor.Primele3rezultape caleaciclooxigenazei,iarleucotrieneledincalealipooxigenazei. 6.Proteinelemembranare.Generalitatisiclasficari. Proteinelesuntsieleocomponentaesentialainorganizareamembranelor,reprezentand cantitativ50%dinmasamembraneicelulare.Raportrulmolecularlipide:proteineestede 50:1,deoareceproteinelesuntmacromoleculecugreutatemolecularamultmaimare. Areiesitdinsubiecteletratateanterior,calipideleaudouaroluristructuralesi metabolice,celmaiimportantinsafiindcelstructural.Teacademielinaestealcatuita80% dinlipidesi20%proteinerolizolator. Proteinelemembranare,datoritaconformatiilorcomplexepecarepotsaleadopte, contribuielarolulmetabolicalcelulei,princareseintelegebineintelessicomunicarea intrasiintercelulara,activitateaenzimaticaetc. Astfelputemformula: (1)Cucatrolulstructuralaluneimembraneestemaiimportant,cuatatvacontinemai multelipide. (2)Cucatrolulmetabolicaluneimembraneestemaiimportant,cuatatvacontinemai multeproteine. Oprimaclasificareaproteinelorsepoatefacepebazalocalizariilorinmembrane: (1) Extrinseciperiferice(25%)deopartesaudealta:endosauectoproteine seextragcusolutiisalinesiagentichelatori,nuramanasociatecu lipideleastfelredobandindusicaracterulhidrofil. (2) Intrinseciintegrale(75%)proteineceseaflainbistratullipdic,strabatandul totalsaupartial. Ectoproteinelesepotlegadeunrestetanolaminicaparinanduneiproteinedinmembrana externaprocescaresenumesteglipierecarboxiluldinstructuraproteicaseasociaza grupariiaminodinstucturaetanolamineidincapatulliberalglicofosfatidilinozitolului. Partealipidicaramanepefoitaexternaabistratuluisipoartanumeredeancora

glicofosfatidilinozitolica. Endoproteinelesepotatasamembraneiinternetranzitoriusireversibilprinreactiide acilare(seleagaladiversiacizigrasi).Siinacestcaz,ancoraestecufundatainbistrat. Aceastaancorarepoatefinecesarainexprimareafunctiilorunorproteineabiadupa legareadoptandconformatianecesaraactivitatiiei. ExempluproteineleGmicitrebuieseselegesefacetranzitiafunctionaladintre proteinacitosolicasimembranara. [Uneorioancoranuestedeajuns,fiindnecesaremaimulte.Legareaproteinelorde domeniileextrasauintracelularesefacecuajutorulenzimelorspecifice.Inhibitoriiai acestorenzimepotastfeljucaroluriindezvoltareatumorilordacaproteinelecurolin cresterenusemaipotatasamembraneiatunciprocesulproliferariiestestopat.] Atatproteinelemembranareacilate,catsiceleglipiateautendintadeasecumulain caveolesauplutelipidice. Proteineleperifericedupaextrageresedesprinddelipide,celeintegraleramanasocite, astfelfiindinsolubileinapa(dializareadetergentilorducelaprecipitareaprinflocularesi aucaracteramfifil). Majoritateaproteinelorintegrale,strabatsuntransmembranare,isiexpunpartile hidrofobeininteriorulbistratuluilipidic,pecandpartilehidrofileseaflalaextremitati. Proteineleintegralecareseaflanumaipartialinmembraneaufostconsideratemulta vremeinexistente,astazirecunoscandusedouadintreele: (1)CitocromulB5 (2)Caveolina Structurisecundaresitertiare Proteineintegrale,carestrabatstratullipidicinintregimeaumaimultedomenii,unul centraltransmembranarsidoualaextremitatiendosiectodomeniu. Referitorlaorganizareastructurilorsecundaresitertiarelaextremitatiacesteapotlua conformatiiledealfahelixsibetafoaiepliata. Alfahelixpresupuneexistentapartilorhidrofilelainteriorsiacelorhidrofobelaexterior,in concordantacuhidrofobicitateadinprofunzimeabiustratuluilipidic.Incomponenta transmembranasecredeacasinguraconfromatieposibilaesteceadeaflahelix,insasa doveditsiexistentaaunorstructuridebetafoaiepliata,orientateincondtrases,se aseamanacudoageleunuibutoias,aredeasemeneaexteriorulhidrofobsiinteriorul hidrofil. Studiulmembraneimitocondrialeexterneaaduslacunostintaformatiuninumiteporine. Oaltamodalitatedeclasificareunipas/multipasdupanumaruldetreceriprin membranasautipIcapatulaminoinectodomeniu,tipII,capatulaminoinendodomeniu. 7.Exempledeproteinemembranare:descrieresimobilitate Pentruexemplificareatipurilordeproteinesaufolositmembraneeritrocitarelastudiu. Odatarecolatate,ausuferitoseparareelectroforeticacugeldepoliacrilamidainprezenta dedodecilsulfatdesodiu,inurmacareiadiferiteleproteineaumigratincampelectric conformgradientuluilordemarime. Duparezultateleelectroforezei,proteinelesaunumitdupaformaincareapareau:benzi: banda1,banda2,banda3etc. Glicoforina(A,B,C,D,E)areomigrareatipica,desimasaeiestede30kDa,ocupalocul proteinelorcumasade90kDa,esteoproteinaunipas,detip1. esteoglicoproteinaamembraneieritrocitare,avandunectodomeniumarede

careseleaga16lanturiglucidicesiunendodomeniumic.Lanturileglucidicesunt responsabilemigrariineobisnuite.Domeniultransmembranarare23deaa.Functiilenu suntcunoscuteexactdesisestiuurmatoarele: GlicoforinaCarefunctiestructurala.IzoformaaglicoforineiApoaterestabilifunctia benzii3mutante.Absentaglicoforinelorcaracterizeazamalariaendemica,esteoreactiede adaptare.MalariaendemicacauzatadePlasmodiumfalciparumcareinvadeazaprinlegarea lastructuraglucidicaaglicoforinei.

AnionExchanger3AE1banda3careestecanalanionicdeschimbpentruHCO3si Clareendodomeniumaresiectodomeniumic.Spectrinaesteoendoproteinaimportanta cejoacaunrolfundamentalinstructurareacitoscheletuluiatasatmembranei.Esteun heterodimercuosubunitatealfasiunabeta,careserasucescusorunainjurulalteia, rezultandostructuraelicoidala,astfelsestructureazanistebastonaseflexibile.Bastonasele aucapacitateadeainteractiona2cate2,formandtetrameri.Capeteletetramerilor,adica cozilebastonaselorseasociazacate56siinteractioneazacufilamentescurtedeactina, rezultandastfelnodurileretelei.Actinaestesieaoendoproteinecejoacarolinformarea citoscheletului.

Banda4.1Esteoproteineglobularadelegaturaintrecitoscheletformatdinactinasi spectrinapedeopartesiendodomeniuprinlegarealaglicoforinaC Ankirinaoaltaendoproteinaglobularacecontribuieasemenibenzii4.1laancorarese leagalasubunitateabetaaspectrineisilabanda3,careesteoproteinatransmembranara. 8.Mobilitateaproteinelormembranaresirolulei Proteineleprezintadouatipuridemiscari: (1)Difuzierotationalamiscareaderotatieinjurulproprieiaxe,de1000deorimailenta decatceaalipidelordincauzagabaritului (2) Difuzielateralamultmailentadecatalipidelor;poatefilimitata.Celulele polarizatealeepiteliuluiunistratificataucomponentaproteicadiferitalanivelulpolului apicalfatadecelbazolaterala. Viteazaderotatiesidifuzielateraladepinddeinteractiunileproteinelorintreeleputand saseincetineascasausaseaccelereze.Miscarileproteineloraurolfunctionalastfelele potmigrainmembranasprelocuriundesuntutileastaimplicasidistributieheterogena spreexempluincelulelepolaredistributiaproteicaestediferitalapolulapicalfatadecel laterbazal,dinconsiderentefunctionale. Determinareamiscarilorsafacutcoletaralaltorcercetari: Laheterocarioni,proteinemarcateimunofluorescentaufostobservatemiscanduse Limfocitelemarcatecuproteinefluorescenteacesteasauredistributisubformadepete fenomennumitpatching/capping Experimentefacutepentrudeterminareamigrariimoleculelorderodopsinadincelulele cubastonasedinretinaacesteexperimenteaupermisdeterminareavitezisicapacitatilor dedifuzie. 9.Citoscheletulasociatmembranei:descrieresifunctii Trecereadelamembranalipidicalacitosolacestadinurmafiindfoartecomplex structuratsefaceprintrostructuraproteicadeasemeneacomplexacitoscheletulatasat membranei,formatdinendoproteinearanjatesubformadeochiurisinoduri,pecarele amamintitmaidevreme: GlicoforinaC AnionExchanger3AE1banda3 Spectrina Actina Banda4.1 Ankirina Acesteaseleagacainimaginecomponentaprincipalafiindspectrina,monomeride spectrinaserotesccatedoiincontrasensformanddimericarefixaticaplacappoli merizeazasiformeazaoretealacareseleagacelalalteelemente.Polimeriideactinase leagasieiinochiurilereteleilaspectrina,avandrolinancorareaei. GlicoforinaC,banda4.1siankirinaaudeasemenearolinancorare. 10.Rolulproteinelormembranare Proteineleprezintaaceleasiroluricasilipidele:

(1)Structuralproteineleexemplificatelacitoschelet (2)Metabolicincomunicareintersiintracelulara,potavearoluride oReceptoripentruhormoni,factoridecrestere,citokinesichemokine oTransportoriprinsaucumembranaclatrina,caveolina oEnzimekinaze,fosfataze,fosfolipaze SemnalizareproteineleG Proteinelemembranare,cumestecazulreceptorilorsiintegrineloraurolinpreluarea semnalelordinmediulextracelularprelucrareaacestuiasiangajareamaideparteaaltor componenteincontiunareasemnalizariicatrealticentriiprocescareseamplifica,avand carezultatoschimbarefieeaenzimaticasaulanivelulsintezeiproteice. Pentruaintelegemaibinerolurileestenecesarsaexemplificam: Integrinelesuntheterodimerialcatuitidinsubunitatilealfasibetareprezentatede proteineunipasdetipI,curolinaderentacelulelorlamatriceaextracelularasiin trasnmitereadeinformatiilegatedecaracteristicifizicochimicealeunorstructuri macromolecularedinmediulextracelular. Asadar,aurolstructuralsimetabolic(apoptoza,diferentieresimotilitate),celdinurmanu estepedeplincunoscut,sestieinsacaintegrineleaparinprocesecadiferentiereasimoartea celulara. Caderineledeasemeneaproteienecurolstructuralsimetabolic,suntesentialein stabilireajonctiunilor. 11.Glicocalixul:definitie,caracterizaregenerala Glicocalixulreprezintacomponentaglucidicaastasatapefataexternaamembranei celulare.Estecompusdinoligosipolizaharideatasatedelipidesauproteine,elenefiind unelementdesinestator. Categoriiledeglucidecareparticipalaformareaglicocalixuluisuntnumiteglicoconjugate sisuntdetreifeluri: oGlicolipide oGlicoproteine oProteoglicani Grosimeaglicocalixuluivariazaintre2050nm,poateajungepanala2002000nm, variinddelatesutlatesut(spreexemplu,instomac,dincauzaaciditatiistratulestemai grossiexistasiglicoproteinespecificemucine),delacelulalacelulasichiarlaosingura celuladiferitalapolulapicalfatadecelbazolateral. Sepoteformulaoregulagrosimeaglicocalixuluiestecuatatmaimarecucatproteinele suntmaiputinimplicateininteractiuneacualtecelule.Ceamaimaregrosimea glicocalixuluiesteintalnitalacelulelesangvine. Componentele Nutoatemonozaharideleexistenteintrainconstitutiamembranelor,intradoarcateva,care sunt:glucoza,galactoza,manoza,fucoza,Nacetilglucozamina,Nacetilgalactozamina, acizisialici(ofamiliecarederivadelaacidulneuraminic,adicaacidulNacetilneuraminic sauNglicolilneuraminic),xiloza(princareparteaglucidicaseleagadeoproteine)siacizi uronici(glucuronicsauiduronic),ultimiinefiindmonozaharide. Asamblareacomponentelornuesteintamplatoare,sefaceprincontrolenzimatic,iarasta excludeanumiteposibilitatideasamblare,deoarececelulanuprezintaanumiteenzime.

Glicoziltransferazeleauostereospecificitatecrescutasisuntabundentelanivelulaparatului GolgisiRE,undesesintetizeazaglicoconjugatele. Sepoatefaceodiferentiereintrediferiteletipurideglucidecontinute: (1)Glicolipidele10%continunsingurlantoligozaharidic,deobiceineramificatsica numarsuntcam1315.Nuauoconformatielinara,suntcontorsionatedatoritagruparilor hidroxilpecareleprezinta. (2)Glicoproteinelecontinoproteinedebazalaalecarorasparagine,serine,treoninese leagalanturiglucidicelaprimaprinlegaturiNglicozidice,laultimeledouaprinlegaturi Oglicozidice. Lalocuriledelegareseramificaastfelincat,ramurilevorbisautriantenare. Acestestructuricontinmaimultemonozaharidedecatglicolipidele. (3)Proteoglicanidescoperititarziu,compozitiespeciala90%glucide,10%proteine, lanturilelorglucidicesuntcelemailungisipoartadenumireadeGAG (glicozaminoglicani).Acestelanturiausieleostructuraspecialasuntformatedintro structuradizahardicarepetitivaunzaharsauaminozaharsiunaciduronic(cuexceptia keratansulfatilorcarecontinunzaharsiunaminozahar,nuauaciduronic) Existaanumiteregluiinformarealanturi: (1)Capetelelanturilorauincarcaturanegativa,astfel (2)Glucozanuseaflaniciodataterminal (3)Aciziisialiciseaflalacapatulterminal(poateapareachiarsubformadepolimer) Sestudiazaprincitochimieultrasturalaculectinesaucuajutorulrosuluide ruteniu(densitatesigrosime) 12.Functiilecomponenteiglucidiceamembranelor Glucideleaumaimulteroluriimportante: (1)Rolprotectorfiindobarieraintrespatiulextracelularsibistratullipidiccu componentelesale.Spreexemplu,instomac,stratulglucidicestemultmare.Uncaz asemantorilintalnimlaeritrocitecareprezintasieleunglicocalixgros. (2)Asiguraelectronegativitateapartiiexternaamembraneicelularelucrucefaceopreste interactiuneadintrecelule,aceastarealizanduseprincontrolcelularnumaiatuncicand estecazulsiundeestecazulex.Jonctiunicelulare. (3)Procesederecunoasterecelularacomunicareacelulelorintreele.Fenomene fiziologicecaresebazeazapeunelemodificariglucidicelasuprafatacelulelor,exemplefiind a.Eritrocitele,dupadesializaresunteliminatedinorganism.(ficatsisplina) b.Extravazarealeucocitelordiapedezareprezintatrecereaunorcelulesangvinedin sangeintesuturisedeclanseazaprintrocascadacomplexalaunstimulinflamator. c.Fertilizareacapacitatiamodificarienzimaticeglicoproteicesilipidicececresc metabolisulsimotilitateaspermatozoiduluicatsireactiaacrozomialaetc. d.GrupulsangvinAB0sebazeazatotperecunosteredetipglucidic e.Receptoricelularimajoritateglicoproteine f.Aciziisialiciaurolindiferentieresimoartecelulara 13.Conceptuldemicrodomeniidemembrana Pentruadefiniconceptulmicrdomenii,trebuieluatainconsideraredistributia

asimetricalipidelorinmembranadistributierealizatacumareconsumenergeticprin procesuldebiogeneza.Datoritadistributieiasimetricesiadinamiciilipidelordesprecare amspusmaidevremecasecomportacaunfluid(modelulmozaicfluid)sepoatespuneca prezintapropietatimezomorfe,caalecristalelorlichide: ...certainorganicmaterialsdonotshowasingletransitionfromsolidtoliquid,butrathera cascadeoftransitionsinvolvingnewphases.Themechanicalpropertiesandthesymmetry propertiesofthesephasesareintermediatebetweenthoseofaliquidandthoseofacrystal.For thisreasontheyhaveoftenbeencalledliquidcrystals.Amorepropernameismesomorphic phases Maimultdecatatat,fosfolipedele,colesterolul, glicolipidelesianumiteproteinedinmembranaprezintacapactitateadeaseuni, agrega(desinufoartestabil)spontanlaolalta,dupaconsiderentebiochimicein microdomeniidemembrana,adica,conglomeratedemaimultetipuridelipidesiproteine ceseaflalaunmomentdatunite. Incadurulmembranelorserespectamodeluldeplutelipidicelipidraftssireprezinta conglomerateceauunscopstructural(ex:caveolina)saumetabolictinanumitestructuri legatepentruaformacomplexedeactiunesupramoleculare. Cumspuneam,plutelelipidiceseagregapeconsiderentefizicochimicesiconstruiesc complexefieeleplanesauinvaginari(caveole),ceceestedeasteptat,eleprezintao fluiditatemaiscazuta,lucruexplicatprinvariatiaunorcomponente: (1)Colesterolde35orimaiabundent (2)Sfingolipidele(SMsiglicolipdele)suntcu3035%maiabundente (3)Glicerofosfolipdelemaislabreprezentate (4)Lipidelefoiteiinterne(PS,PI)suntmaislabreprezentate (5) Lipideleprezintaacizigrasisaturatimairigizi! (6) 14.Cailedesemnalizare Semnalizareacelulara=modalitateaprincarecelulelepotcomunicaintreeleindiferentde distantalacareseafla. Endocrine Paracrine Autocrine Juxtacrineintrecelulelejonctionate Mecanismularelabazainteractiuneadintremoleculasemnal(ligand)siR. Acetilcolina:determinacontractiafibreimuscularescheletice relaxareamuschiuluicardiac secretiacelulelordinmucoasagastricasiacelordinmedulosuprarenala Cele3efecteposibilealesemnalizariicelularesunt:supravietuirea,proliferarea,apoptoza. Mecanismulsemnalizariiareurmatoareleetape: 1.Initiereasemnaluluiprininteractiunealigand+R: puntideH legelectrostatice leghidrofobe 2. TransductiasemnaluluisiactivareaR 3. Activareaefectoruluisiamplificareasemnalului unRactivatpoateprovocaactivareaunuinumarmaimaredeE

15.Receptoriipthhsineurotransmitatori(definitie,criteriideclasificare)

4. Atenuareasemnaluluisidesensibilitateacelulei(inactivareaefectoruluisi desfacerealiganduluideR)

I. Receptorulptmoleculesemnallipofile(hidrofob) Rptcortizol,hh.Tiroidieni,estrogeni,progesteron,vitaminaD,acidretinoic Receptorulareunsitpthormon,unsitptmoleculadeADNsiundomeniudeactivareaa transcrierii.Incitosolesteintrostarecomplexatainactivadatoritaunuicomplexproteic inhibitor. AsociereadintreRsiligandeterminalanivelulnucleului:trancriereagenei,exprimarea geneisiunraspunsspecificlegaturiiligandR. II. Receptoriiptmoleculesemnalhidrosolubile 1. RcufunctiedecanalionicRptacetilcolina 2. RcuplaticuproteineleGheterotrimericetipIcu7treceriprinplanul membranei: 15receptoriptserotonina 9ptadrenalina 5ptacetilcolina 3. Rcuactivitateaguanilatciclazicaunipas,tipI RptfactorulnatriureticatrialeliminaNasiapadinrinichi 4. Rcuactivitatetirozinkinazica: factoridecrestere 5. Rcuactivitatefosfatazicaglicoproteinamembranaraunipas CD45dinmembranalimfocitelorBsiT 6. Rcuplaticutirozinkinazecitosolice hhdecrestere,citokine,Rspecificianitigenelor 7. RcuactivitateSerThrkinazica: factoridecresteretransformatibetaminuscedeterminaproliferarea,sintezaproteinelor matriceiextracelulareinclusivceleresponsabilecuformareamatriceiososase. 16.Explicatimodulareaactivitatiiadenilatciclazeimembranaredecatrereceptorii cuplaticuproteineleGheterotrimerice RcuplaticuproteineleGheterotrimericesuntproteinetransmembranaremultipastipcu7 trecereprinplanulmembraneii,cuectodomeniumaresitusdelagarealiganduluisi endodomeniumicsitusdelegareptproteineleG,catsilocurinecesaredesensibilizarii. Exista9Rptadrenalina,5ptacetilcolina,15pyserotonina. Mecanism: legarealigand+activareaR interactiuneaRcuproteineleGsiactivareaacestoraprineliberareadeGDP ,legarea GTPsidisociereatrimeruluiinsubunitateaalfasiheterodimeruluibetasialfa transmitereasemnaluluilaefectoruldinaval ProteineleG:

GsactiveazaadenilatciclazasicanaleledeCa GiinhibaadenilatciclazasiactiveazacanaleledeK GqactiveazafosfolipazaC Golfactoriiactiveazaadenilatciclazainneuroniiolfactorii GoinhibacanaleledeCa,activeazacanaleledeKsiactiveazafosfolipazaC GttransducinaactiveazaGMPcfosfodiesterazaincelulelefotosesnsibilecubastonase Maiaurolsiinmodulareaglicolizeidinmmstriatisimetabolizareaglicogenului(inhiba formareaacestiuaprinproteinkinazaAactivatadeAMPc)

17.Mesageriisecunzi:definitie,exemple,efectoriintracelulari Mesageriisecunzisuntcompusicarepoartainformatiatransmisadeprimulmesageravand capacitateadeamodificaactivitateaunorproteineintracelularecarepotavearol enzimatic,intervinincontractiesauinasigurareapermeabilitatiimembranare. Exemple:AMPc,GMPc,IP3,DAG,Ca2+ AMPcesteunnucleotidcicliccuroldemesagersecundreglatdefosfodiesterazasi adenilatciclaza.GMPcestemediatorulsemnalelorluminoasecuplatcuGt.IP3determina deschidereacanelelorioniceptrCa2+dinreticululendoplasmicincitosol.DAGramane ancoratdemembranalipidicasiactiveazapkC.Ca2+functioneazacamesagersecund impreunacupreviousii*sauindependentsauculegandusedecalmodulina> calmodulina+4Ca. Efectoriiintracelularisuntactivatidemesageriisecunzicaraspunslamesajulprimitdela hormoni/neurotransmitatori.Exemple:pkA(adenilatciclaza),pkC(fosfolipazaC) Sistemulefectordemesagerisecunziadenilatciclaza: ATP>AMPc activatdeglucagon,PTH,ACTH,adrenalinaprinRbetaadrenergici inhibatdereceptoriialfaadrenergicisisomatostatina

18.Transportulpasiv:clasificare,exemple Datoritalipseisaunecesitatiiconsumuluideenergie,transportulprinmembrana celularaseconsiderapasivsauactiv.Transportulpasivcaresemainumestedidipativ, entropic(diminueazagradientuldeconcentratie)sedesfasoarafaraconsumdeATP .Calea transportuluipasivprintremoleculelelipidelormembranarepoatefiurmatademolecule nepolare,decihidrofobeO2,CO2,CO,N,NO,benzendarsidemoleculepolaremici,cu masasub100Daapa,etanol,uree,glicerina.Acesttipdetransportpoartanumelede difuziesimplasaupasiva. Pentrumoleculelepolaremaricatsipttransportulprinmembranbasefaceprin proteinemembranareorganizateinstructurispecifice.Acesteapoartadenumireade transportori,ptmoleculepolaremariglucoza,aa,nucleotide,saucanaleioniceH,Na, HCO3,K,Ca,Cl,Mg.Transportoriisicanaleleioniceefectueazauntipdetransport difuziefacilitata. Transportulsingular/uniportdefinestedeplasareauneisingureentitatichimiceion/ molecula,intimpcetransportulcuplat/cotransport,sereferala2saumaimulteentitati chimicetransportate,simultan,adicaintrunsingurciclu.Candtoatecomponentelesunt

transportateinacelasisenssimport,candsensulestediferitantiport. UniportGLUT1transportordeglucoza SimportcotransportuldeNaglucozaSGLT1dinmbapicalaaenterocitelor,este transportactivsecundardeoarecedesfasurareasaarelabazaexistentaunuigradientde concentratiedeNarezultatinurmatransportulactiv. AntiportcanaludeschimbanionicHCO3/Cldinmembranaeritrocitara schimbatorulde1Ca/2Na(deciunaltransportactivsecundar)celule excitabilesausecretoare Inceeaceprivestecanaleleionice,celulapoatecontrolastarealor(deschise/inchise). 1. Canaleionicecontrolateelectric(prinvoltaj)modificareapotentialuluide membrana.Potentialulcuvaloarenormala50mV70mVmentinecanaleleinchise. 2. Canaleionicecontrolatechimic,prinliganzi.Sedeschidatunchicandleagaun compuschimic.Ligandulsepoatelegainectodomeniuligandextracelularsauin endodomeniuligandcitoslic 3. Canaleionicecontrolatemecanicsedeschidsauseinchidodatacuexercitarea uneitensiunimecanicelanivelulmembranei. Activitateacanalelorioniceareuncaracterciclic,deaceeamentionamcastareaderepaus presupuneabsentastimulului,streadeschisatrecereaionilordupaaparitiastimulului,iar stareainactivaesteocupatdeliganddarsementineinchis.Arecarezultatmentinere homeostaziei. Inconcluzie,modalitatiledereglaresunturmatoarele Caleamesagerilorsecunziformafosfo/desfo Ligandulesteostructuracapabiladeaschimbaconformatiacanaluluiionic Diferentadepotentialspeficitatipuluidecelulacucarearecontact Modificarimecaniceimpusedecitoschelet

19.CaleadesemnalizareJAKSTAT Esteocaledesemnalizareaintalnitainsemnalizareaprinmediatorilocalicitokinedarsi pentruhormonie.g.somatotropinasiprolactina. AcestireceptoricitokiniciactioneazaprinenzimetirozinkinazecitoplasmaticeJAK JanuskinasecarefosforileazasiactiveazaproteinereglatoaregeniceSTATsignal transducersandactivatorsoftrasncription. ProteineleSTATsuntlocalizateincitosolsisuntedenumiteproteinelatentedeoarece migreazainnucleusiisiexercitafunctiareglareatranscriptieigenicenumaidupaceau fostactivate. Receptoriicitokinicisuntdeobicedimerisautrimeri,asociatifunctionalcuproteineleJAK (1,2,3Tyk2). Legareamoleculeisemnaldeclanseazaotranzatieconformationalacareapropieproteinele JAKunadealtaastfelincateaceasteasasetransfosforilezeastfelactivanduse,crescandu leactivitateadomenilortirozinkinazice. Acestedomeniitirozinkinazicefosforileazaresturitirozinicedinstructurareceptorilor intracelulari,activandacesteresturitirozinice.Acesteresturiactivatepotdevenipunti pentrulegareaproteinlorSTAT.DeasemeneasepotlegaproteineadaptoareRasMAP

kinaze. OproteinaSTATprezintaundomeniuSH2careindeplinestedouafunctii.Inprimulrand, seleagadepunteadetirozinaamintitamaidevreme.Dupalegare,proteinaSTATeste fosforilatafiindpracticactivata.Dupaaceastafosforilareeadisociazalegandusedealta proteineSTATactivata. DimerulSTAT,activat,intrainnucleuunde,impreunacualteproteinereglatoareseleaga launADNresponsiveelementstimulandtranscriptiagenica. Inactivareaacestuisistemsefaceprinbucladefeedbacknegativrealizabilalamaimulte etaje,careurmaresteinprincipiudesfosforilareacomponentelor.

20.Aquaporine.Semnificatiisiimplicatiimedicale Aquaporinelesuntcanaledeapacepotfiintroduseinmembranacelularalanevoie.Aceste aquaporinesuntfoarteabundenteinceluleundetransportuldeapaestefoarteintens celuleleepitelialesirinchi. Principalacaracteristicaprincareseevidentiazaaquaporineleestecapacitatealordea actionacasicanaledeapafarainsaapermitetraficulionilorcaracteristicaimportantain mentinereagradientelordeconcentratieionica.Eleisirealizeazafunctiaprinstructuralor deosebitaprezinaunporcarearegruparicarbonildispusepeperetiicirculariinterioripe deoparte,iarpedealtaparteprezintaaminoacizihidrofobi.Porulestemultpreaingust pentruunionhidratat,iardeshidratrealuiarnecesitaunconsumenergeticnerealizabilin acelloc. Pentrumoleculeledeapa,aquaporinelemaiprezintadouaasaparaginecareseleagala atomuldeoxigen.Deoareceseleagalaoxigensinulahidrogen,aquaporinelenusunt permeabilenicipentruprotoni. Prezentaaquaporinelorinanumitetesuturiexplicacaracteristicilelorspecialerealizabilein anumitecircumstante,delacarepotplecasiimplicatiilemedicale. 1.TransportulprinceluleepitelialeAQPsuntimplicateintransportuldeapainanumite tesuturi.Transportulactivdesolvitiprinmembranegenereazagradienteosomticecare atragdupasinetransportulapeifacilitatinacestcazdeAQP .Putemspunecamembrana estemaipermeabiladacaprezintaAQP . Astfel,lipsaAQPinanumitetesuturipoatedeclansapatologialipsalorlanivelrenal poatecauzaoabsorbtieineficientadeapa.Patologiapoateapareasilanivelulglandelor salivaresauarboreluitraheobroniscundepotapareadeficientesecretorii. 2.LanivelcerebrallocalizareaAQPaparelajonciunilehematoneuronale.Implicatein acestcazsuntinspecialastrocitele.Sepotdeclansaastfeledemecerebrale. 3.InmigrareacelularaAQPintervininangiogenezaexplicabilsilaniveltumoral.Sa observatoinaintaremaiinceataatumorilorlasoarecicarenuprezentauAQP . 4.Lanivelulpieliiaquagliceroporineleregleazanivelulhidratariiprintransportul moleculelordeglicerol. 5. MetabolismullipidicAQPexistainmembranaadipocitelorinfluentandtraficul transmembranarcontribuindastfellahipertrofiaacestora. 22.ProteineleGheterotrimice. ProteineleGsuntofamiliedeproteinecurolintransmitereasemnalelor,determinand

schimbarimetaboliceininteriorulcelulei. ProteineleGheterotrimericesuntalcatuitedin3subunitati, si .Subunitatea este ceacareiiconferarolul.SuntevidentiatemaimultetipurideproteineG:Gs,Gi,Gq,Gt.Au activitateGTPazica. Suntproteineswitch.InactivesuntlegatedeGDPsidevinactivecandsuntlegatedeGTP . Odataactivata,subunitateasedetaseazadecelelalteunitatisiactiveazaoenzima (mesagerisecunzi)sauuncanalionic.CatevaexempleundesuntintalniteproteineleG: cascadaadenilatciclazei,cascadafosfolipazeiC. Inactivareasefaceprinactivitateahidrolazicaintrinsecaasubunitatiialfa,reasocianduse cusubunitatilebetasigamma. ProteineleG: GsactiveazaadenilatciclazasicanaleledeCa GiinhibaadenilatciclazasiactiveazacanaleledeK GqactiveazafosfolipazaC Golfactoriiactiveazaadenilatciclazainneuroniiolfactorii GoinhibacanaleledeCa,activeazacanaleledeKsiactiveazafosfolipazaC GttransducinaactiveazaGMPcfosfodiesterazaincelulelefotosesnsibilecubastonase Maiaurolsiinmodulareaglicolizeidinmmstriatisimetabolizareaglicogenului(inhiba formareaacestiuaprinproteinkinazaAactivatadeAMPc) 23.Modalitatigenericedereglareaactivitatiicanalelorionicemembranare Canaleleionicesuntcomplexeproteicecarepermitintrarea/iesireadiferitilorioniprin membranacelulara,faraelefiindimposibilacestlucru. Exempledecanaleionice: Na/KATPaza:pastreazaungradientelectrochimicconstant,mentinandcelulapolarizata H/KATPaza:scoateHinafaracelulei(intalnitamaideslaceluleledinstomac) CaATPaza:curolincontractiamusculara. Reglareapoatefifacutaprinmaimultemoduri: 1.Canaleleioniceurmeazcaleaproteinelordeexport,fiindsintetizatederibozomii ataaireticululuiendoplasmicrugos(RER).Ulteriorsuferoseriedeprelucr ri ndrumul sprecisterneleaparatuluiGolgi,deundesuntsecretatenveziculedeexocitoz. 2.caleamesagerilorsecunzi:reglareacanalelorprinfosfo/defosfo 3.isimodificaconformatiacandligandulsaatasatdeel 4.existaunelecanalevoltajdependentecaresedeschidnumaicanddiferentadepotential specificatipuluidecelulaeatinsa 5.deschidereadatademodificarilemecaniceindusedecitoschelet 24.Transportactivclasificaresiexemple Transportulactivmaiportanumeledetransportantientropicdatoritasensuluiopus gradientuluideconcentratieincarearelocdeplasarea,caurmare,unastfeldefenomen necesitaconsumdeenergie. PompadeNa/Kesteostructuracomplexa,formatadintruntetramercu2subunitatimari alfaunitatecataliticasitransportoare,si2subunitatimicibetaunitatereglatoare, necesaraptimpachetareaprimeisubunitatilanivelulRE,inbiosinteza. Mecanismuldepomparepresupune7etapeceaucarezultatexpulzareaa3ionide

Nasiintroducereaa2ionideK. 1. Legareaa3ionideNapeversantulcitosolicalsubunitatiialfaapompei 2. LegareaATPpeendodomeniusubunitatiialfa 3. FosforilareaunuiradicalaspartatprinscindareaATPlaADPsischimbarea conformatieiproteineicareducelaexpunereacelor3ionideNapeectodomeniu ectodomeniulsubunitatiialfa 4. DiscociereasiexpulzareainexteriorlaionilordeNasilegareala ectodomeniulsubunitatiialtfaa2ioniK 5. Hidrolizareaaspartilfosfatuluisischimbareaconformatieisubunitatiialfa 6. InternalizareasiexpunereaionilorKpeendodomeniulsubunitatiialfa 7. DisociereaionilorKsieliberareaicitosolcuinchidereaunuiciclude pompare. PompaNa/Kesteelectrogena,32,mentinepotentialuldemembrana.Consumajumatate dincantitateacelulatadeATP .Inhibareaactiuniiprinouabainaducelaincapacitatea celularadeamentinehomeostazia. Categoriidepompe TipulPdeATPaze: Na/k,H/K,CaATPaza,pompaprotonicaHATPaza TipulVdeATPaze: detipvacuolar,pompeazaprotoniinendosomisaulizosomi TipulFATPaze: sintetizeazaATPdinenergiarezultataprindisipareaunuigradientprotonic existent TipulEATPaze: suntenzimealesuprafeteicelulatecurolinhidrolizadiversilor nucleozidtrifosfatilor(inclusivATP)curolinsemnalizare TransportoriiABCsuntprezentiatatlaeucariotecatsilaprocariote,suntdeomare duiversitatesiaucapacitateadeatransportadelaioni,glucide,aa,vitamine,lipide antibiotice,medicamentepanalaoligozaharide,oligopeptide,proteinemici.Suntformati dindomeniitransmembranareprincaretrecesubstantatransportata,domeniidelegarea nucleotidelorpefatacitosilicaamembraneisiauroluldealegasihidrolizaATP ,domenii delegareasolutiilorpefataexterna,curolinpreluareasitransferareasubstantei transportate. Mecanismultransportorilor: 1. Asocierasubstanteidetransportatladomeniuldelegarealacesteia(SBD) 2. LegareaATPlaNBDnucleotidbindingdomain 25. PompeATPaze:definitie,clasificare,exemple Transportulactivmaiportanumeledetransportantientropicdatoritasensuluiopus gradientuluideconcentratieincarearelocdeplasarea,caurmare,unastfeldefenomen necesitaconsumdeenergie. PompadeNa/Kesteostructuracomplexa,formatadintruntetramercu2subunitatimari alfaunitatecataliticasitransportoare,si2subunitatimicibetaunitatereglatoare, necesaraptimpachetareaprimeisubunitatilanivelulRE,inbiosinteza. Mecanismuldepomparepresupune7etapeceaucarezultatexpulzareaa3ionide

Nasiintroducereaa2ionideK. 1. Legareaa3ionideNapeversantulcitosolicalsubunitatiialfaapompei 2. LegareaATPpeendodomeniusubunitatiialfa 3. FosforilareaunuiradicalaspartatprinscindareaATPlaADPsischimbarea conformatieiproteineicareducelaexpunereacelor3ionideNape ectodomeniuectodomeniulsubunitatiialfa 4. DiscociereasiexpulzareainexteriorlaionilordeNasilegareala ectodomeniulsubunitatiialtfaa2ioniK 5. Hidrolizareaaspartilfosfatuluisischimbareaconformatieisubunitatiialfa 6. InternalizareasiexpunereaionilorKpeendodomeniulsubunitatiialfa 7. DisociereaionilorKsieliberareaicitosolcuinchidereaunuiciclude pompare. PompaNa/Kesteelectrogena,32,mentinepotentialuldemembrana.Consumajumatate dincantitateacelulatadeATP .Inhibareaactiuniiprinouabainaducelaincapacitatea celularadeamentinehomeostazia. Categoriidepompe: TipulPdeATPaze: Na/k,H/K,CaATPaza,pompaprotonicaHATPaza TipulVdeATPaze: detipvacuolar,pompeazaprotoniinendosomisaulizosomi TipulFATPaze: sintetizeazaATPdinenergiarezultataprindisipareaunuigradientprotonicexistent TipulEATPaze: suntenzimealesuprafeteicelulatecurolinhidrolizadiversilornucleozidtrifosfatilor (inclusivATP)curolinsemnalizare TransportoriiABCsuntprezentiatatlaeucariotecatsilaprocariote,suntdeomare duiversitatesiaucapacitateadeatransportadelaioni,glucide,aa,vitamine,lipide antibiotice,medicamentepanalaoligozaharide,oligopeptide,proteinemici.Suntformati dindomeniitransmembranareprincaretrecesubstantatransportata,domeniidelegarea nucleotidelorpefatacitosilicaamembraneisiauroluldealegasihidrolizaATP ,domenii delegareasolutiilorpefataexterna,curolinpreluareasitransferareasubstantei transportate. 26. MecanismulsemnalizariitransmembranareviaRcuactivitatetirozinkinazica. SuntingeneralproteineunipasdetipIcareexistacamonomerisidupa interactiuneaculigandul,dimerizeaza.ExceptiefaceRptinsulinacaresegasestesub formadedimerilaformareacaroraparticipapuntidisulfurice. Domeniultransmembranarestestructuratsubformadealfahelixsicontine2835 aa.Endodomeniulareactivitatetirozinkinazica.Ectodomeniulprezintadomeniirepetitive bigateinleucine,cisteina,imunoglobulinesifibronectinedetipIII. Mecanismul: 1. R+liganddeterminaactivareadomeniuluicataliticalRsidimerizareaR 2. autofosforilareaincrucisatalamultipletirozinealedomeniilorcitosolicealeR 3. interactiuneacuefectoricarecontindomeniiomoloareSRCdetip2,tirozine modificateprinfosforilarecedevinzonedeinteractiune. 4. ActivareaefectorilorlegatiprinSH2(SRChemology2) Prezintacaefectori:

fosfolipazaCgamma2domeniiSH2 proteintirozinkinazefarafunctiedeRSH2 proteinecareactiveazaGTPazelemici.GTPcGDP fosfatidilinozitol3'kinaza Receptoriitirozinkinazicireprezintaaceaclasadereceptoricareauprezintaactivitate proteintirozinkinazicaintrinsecaindomeniilecitosolice.Liganziipentruacestireceptori suntsolubili(hormonipeptidici)incareincludem:NGF,FGF,EGFsiinsulina. 27.EndocitozamediatadeR(definitie,semnificatie): facepartedincapitolulpinocitozei Termenulafostintrodusin1976,decatreGoldstreinsiBrownpreocupatidemetabolizarea LDLsirolulacestuiaincontrolulsimodulareacolesterolemieisiateroscleroza.Ligandul seleagadeRspeficidepesuprafatacelulei.ComplexeleRligandsuntadunatein profunzimeaversantuluimembranarinterncuuncomplexdeendomembraneacarui componentadebazaesteclatrina. Acestemicrodomeniiadanciteinmembranainveliteinclatrinasuntdenumitestructuricu invelis.Maimultestructuricuinvelisdevinveziculecuinvelis. Rolulclatrineiestedeacontrolaadancireamicrodomeniilormembranarecaredevine structuracuinvelis,arecapacitateadeaseasamblaintrimerinumitiTRISCHELIONI. Acestiaformeazaochiuripentagonalesauhexagonaleceseasambleazainvezicule, asemanatoareuneimingidefotbal. Dupadesprindereaveziculeidinmembrana,pierzanduseinvelisuldeclatrina,vezicula devineendozom.Acestaseasociazacuunlizozompreexistentincelulesidevine lizozom. Ligandulesteintrodusincelulacuoconcentratiemaimaredecatceadinmediu. EndocitozamediatadeRafostdescrisaptlipoproteineplasmatice,tranferinasifactori decrestere.PatocitozaesteendocitozamediatadeRptmoleculelemicidescrisapt acidulfolic. AsociereamoleculelormicicuR(ectoproteinecuancoraglicofosfatidilinozitolica) determinasechestrarealocincaveolesitrecincitoplasmadirectprincanaledin membranacaveolara. Areunrolimportantinreciclare,semnalizarecelulara,trasport,biosinteza. Endosomiisorteazacomponenteleendocitatesiparticipalasemnalizare. 28. Definitiurmatoarelenotiuni:cotransport,simport,antiport Transportulsingular/uniportdefinestedeplasareauneisingureentitatichimiceion/ molecula,intimpcetransportulcuplat/cotransport,sereferala2saumaimulteentitati chimicetransportate,simultan,adicaintrunsingurciclu.Candtoatecomponentelesunt transportateinacelasisenssimport,candsensulestediferitantiport. UniportGLUT1transportordeglucoza SimportcotransportuldeNaglucozaSGLT1dinmbapicalaaenterocitelor,este transportactivsecundardeoarecedesfasurareasaarelabazaexistentaunuigradientde concentratiedeNarezultatinurmatransportulactiv. AntiportcanaludeschimbanionicHCO3/Cldinmembranaeritrocitara schimbatorulde1Ca/2Na(deciunaltransportactivsecundar)celuleexcitabilesau secretoare

27.Etapelefagocitozei Prinfagocitozacelulelespecializatemacrofagelepreiausidigeraparticulemaricumar fii:bacteriile,detritusurile,celuleimbatranite,astfelparticulemaripreluateinvacuolede fagozomisuntdigerateinurmafuzionariiculizozomii. Legareauneiparticuledereceptordeclanseazaemitereapseudopodelorcareinconjoara particula.Dupafuzionareamembranelorseformeazaoveziculamareintracelulara fagozom. Fagozomulfuzioneazaculizozomulininteriorulcaruiamaterialulingeratestedigeratde hidrolazeleacidelizozomale Prinfagozitozasuntdistruiageniipatogenidec tremacrofagiisistemuluiimunitar. Adeseeacetiagenitrebuiesafiemarcaidectreanticorpi,pentruafirecunoscu ide ctrefagocite,leucociteilimfocite.Altetipuridecelule,careopereaz prinfagocitoz suntgranulociteleneutrofile,celuleledendriticedinorganelelimfatice,celulelegliale, monocitele,macrofagele. Etape: 1.Chemotactismulfenomenuldeatragere/respingereaceluleifagocitare 2.Adeziuneamembranaceluleifagocitareaderlamembranaparticulei,ceurmeaz afi ingerat,etapdatoratlectinelordepesuprafaamicroorganismului; 3.Ingestiainvaginareaparticuleistrineiformareafagozomului; 4. Digestiarealizatdeenzimeintracelulare. 29. Clasificareajonctiunilor

Suntsistemedeancorareintrecelule,sauintreacesteasimatriceaextracelularacare aumenireadeastabilizastructuratisulara.Suntstructirdeordinulnm,motivpentrucare examinareasefacelaME. ObservatelaME,joctiunilepotaveaformadedisc,spotmacule,saudebanda zonule. Rolurilejonctiunilor: stabilizareamecanicaatesuturilor controleazatransportulmarkerilorinspatiulextracelular controleazacomunicareaintercelulara compartimenteazasuprafatacelularaindomeniicelulare:domeniulapicatsi domeniullaterobazal Clasificare: A.Jonctiunilesimplespatiileintercelulare: Jonctiunisimpledigitiforme Jonctiunisimpledenticulate B.Jonctiunispeciale: Jonctiunistranse: pentalaminata,heptalaminataZONULAOCCLUDENS Jonctiunideatasare: 1.pemicrofilamentedeactina: celulacelulaZONULAADHERENS celulamatriceJONCTIUNEAFOCALA

2.pefilamenteintermediare: celulacelulaMACULAADHERENS (DESMOZOMULINSPOT) celulamatriceHEMIDESMOZOMUL JonctiunidecomunicatieGAP(NEXUS) Complexulejonctionale C.Jonctiunicuspecificitatedetesut: Discuriintercalare Sinapsa

30.Jonctiuneadecomunicatie/Gap/Nexus Areaspectdemacula.Distantadintreceledouaceluleestede2nmspatiurelativmic, poateafectatransportuldemarkeriinspatiuleextracelular.Componenetelejonctiuniisunt: cele2membrane conexoni100/jonctiune.Areostructuraproteicacuaspectcilindricsauprisma hexagonala,avandolungimeegalacugrosimeaplasmalemei,formatadin6subunitati proteice.Conexinaesteoproteinatransmembranaramultipascugreutateade30000dal. Cele6subinitatiproteicelasauncanalhidrofilcudiametrulreglabil0,22nm,depinde deconcentratiadeCa.Conexoniisuntasezatifatainfata,inmembranelecareparticipala realizareajonctiunii,stabilinduseinacestfeluncanaldecomunicatieintercelulara. Canalulhidrofilpoatefistrabatutdemoleculecugreutatimolecularemici:ino,hh,AMPc, undededepolarizare Localizareajonctiuniiintreceluleleepitelialesubdesmozomicatrepolulbazal.Sepoate localizainportiuneaverticalaadisculuiintercalar. 31. Complexejonctionale Esteformaldinjonctiuneastransa,zonulaadherens,maculaadherens. 32.Disculintercalar Uncomplexdejonctiuniprezentintremiocardocite.Areformadescaracuportiuni verticalesiorizonatale.Inportiunileorizonatalesegasesczonulaadherens,macula adherenssifilamenteleintermediardedesmina.Inportiunileverticalesegasescjonctiuni GAP . 33. Jonciuneastransa Semainumestejonctiuneapentalaminata,heptalaminatasizonulaoccludens.Cele2 membranecelularesepotaflalaodistantade2nmheptalaminatasauisipotsuprapune straturileexternepentalaminata Senumestezonulapentracaareaspectdebandasaupanglicasiocclundesptca ocluzioneazatotalsaupartialspatiulextracelularafecteazatransportuldemarkeriin spatiulextracelular,jonctiunilefiindimpermeabilepentrumacromolecule,lasandsatreaca doarmoleculelemiciioni. Adouacomponentaestereprezentatadesiruriledeproteinegemeneoccludine;proteine integralecareseaseaza2cate2,fatainfata,realizandlegaturidetiphomofilicpefrontul extracelularostructuraasemanatoareunuifermoar.Ingrosimeamembraneicelulare

siruriledeproteinegemenerealizeazaoreteadeochiuriregulatefaguredemiere(rigida) sauneregulatejonctiuneflexibila. Laloculderealizarealjonctiuniiaulocrearanjarialefosfolipidelordinstratulextern,care seunescsiformeazaineledefuziunecareocluzioneazaspatiulextracelular,blocand trecereamacromoleculelordeopartesidealtaajonctiunii. Atreiacomponentacomponentacitoscheletuluiestereteauademicrofilamentede actina,pecaresefixeazasiruriledeproteinegemene. Joctiunilestranseaparinsaptamanaa4adeviataintrauterina,intreceluleleepiteliale. Intaisuntmacule,apoidevinzonule.Suntresponsabiledecompartimentareasuprafetei celulareindomenii:apicalsilaterobazal. Permebilitateajonctiuniiscadeexponentialodatacucrestereanumaruluidesiruride proteinegemene. 34. Jonctiuneadeatasarepemicrofilamentedeactinaclasificare,descriere Suntcelulacelulasaucelulamatrice.Distantadintremembraneestede1530nm,distanta marecenuafecteazatransportulmarkerilor.Continoproteinalinkertransmembranara carevastabililegaturidetiphomofilic/heterofilic.Acesteapotfiselectine,integrine, imunoglobulinetoate3stabilesclegdetipheterofilicsaucadherinetiphomofilic. Jonctiunilepotfidefinitivesautranzitori.Detiptranzitoriusuntjonctiuniledintreleucocite siendoteliuvascularinmiscareadediapedeza. JonctiuniledeatasarepemicrofilamenteledeactinasuntZonulaAdherenssiJonciunea focala. Zonulaadherens: membranelesuntladistantade15nm glicoproteinalinkercadherinaCadependenta(legtiphomofilic) complexulproteicdeatasarelacitoscheletestereprezentatdealfa,beta,gamma catenine.Alfacateninaseleagalavinculina,carepoateservicaproteinadelinkajla citoschelet. elementuldecitoscheletreprezentatdebandeletademicrofilamentedeactina Segasesteintreceluleleepitelialesubjonctiuneastransa,darsiinportiuneatransversalaa disculuiintercalar(intremiocardocite). Jonctiuneafocala: celulaconjuctivamatriceextracelularaconjunctiva componentamatriceiextracelulareestereprezentatadefibronectina distantadintrecomponente1520nm linker:integrina,aresubiunitatilealfasibeta complexulproteicdeatasarelacitoscheletesteformatdintalinasivinculina elementuldecitoscheletesteobandeletacontractilademicrofilamentedeactina Jonctiunilefocaleservescdreptlocdeatasareabandeletelordeactinanumitefibrede stress.Acesteareprezintabandeletedeactinacrosslinkatede ALFAACTININAce ancoreazacelulasiexercutatensiuneasuprasubstratului.Suntasezatelajonctiunilefocale alemembraneiprininteractiuneacuintegrina.Estemediatadetalina,vinculina,tensina. Talinaseleagadeasemeneadevinculinacelaranduleisepoatelegadealfaactinina sitensina. 35. Jonctiuneadeatasarepefilamenteintermediareclasificare,descriere

Suntcelulacelulasaucelulamatrice.Distantadintremembraneestede1530nm,distanta marecenuafecteazatransportulmarkerilor.Continoproteinalinkertransmembranara carevastabililegaturidetiphomofilic/heterofilic.Acesteapotfiselectine,integrine, imunoglobulinetoate3stabilesclegdetipheterofilicsaucadherinetiphomofilic. Jonctiunilepotfidefinitivesautranzitori.Detiptranzitoriusuntjonctiuniledintreleucocite siendoteliuvascularinmiscareadediapedeza. JonctiuniledeancorarepefilamenteleintermediaresuntMaculaAdherenssi hemidesmozomul. MaculaAdherens: celulacelulaladistantade30nm Glicoproteinalinker=cadherinaCadependentacerealizeazalegdetiphomofilic complexulproteicdeatasarelacitoscheletcareformeazaplacadesmozomalacu aspectdesemidiscestealcatuitdedesmoplachina,plakoglobina,desmocalmina, desmoyokina,antigenulpenfigusuluibulos.Dincele2semidiscuridepecele2 fronturicitoplasmaticerezultaaspectuldemaculaaljonctiunii elementuldecitoscheletestereprezentatdefilamenteleintermediare.Incelulele epiteliateacesteasunttonofilamentealcatuitedincitokeratine. Desmozomulestelocalizatintreceluleleepiteliale,subzonulaadherens.Semailocalizeaza siinportiunileorizontalealediscurilorintercalarealaturidezonulaadherensside filamenteleintermediarededesmina. Hemidesmozomul celulamatrice;leagapolulbazalalceluleiepitelialedemembranabazala. Membranacelularaepitelialaestela1520nmdemembranabazala linker:integrina complexulproteicdeatasareceformeazaplacadesmozomalaunsemidiscpe frontulcitoplasmaticaljonctiunii elementuldecitoscheletreprezentatdetonofilamente 36.Microfilamenteledeactina Reprezinta20%dinproteinelestructuralealecelulelormuscularesi5%incelulele nemusculare.Estede6tipuri:4alfaptcelulelemusculare,1betasi1gammaptcelulele nemusculare. StructuraactineiafostdescrisadeKennethHolmessiWolfgangKabsin1990.Exista2 forme:globularasifilamentoasa. Actinaglobularaare375aasi43000KDa.Prezintasitusuridelegarecemediaza interactiuneacapcoadacualti2monomeri.Fiecaremonomeresterotat166degradein interiorulfilamentuluirezultandformafilamentoasacudubluhelix.Monomeriiauaceeasi orientarejustificandpolaritateamoleculei:uncap+siunul.Introsolutiecunivelionic scazutactinafilamentoasadevinaglobularasilanivelioniccrescutseintamplainvers. Primatreaptaapolimerizariiestenucleatia(formareaunoragregatemicidincate3 monomerideactinaG)siadouaesteaditiareversibilademonomerilacapetele+si. MonomeriideactinaleagasiATP ,careehidrolizatsiregleazaasamblareasi comportamentuldinamicalactinei.MonomeriicareleagaATPpolimerizeazamultmai repededecatceiceleagaADP .Concentratiacriticademonomerideactinareprezintarata depolimerizareinfilamente,siesteegalacuratadedisociere.Ratadedisociereemai marelacapatuldecatla+,inversseintamplacuratadepolimerizare.Pentrucaactina leagamailentmonomeriprinhidrolizaADPdecatATP ,senastefenomenuldeTreadmilling

siilustreazadinamicafilamentelordeactina. Disociereaestefavorizatade: 1. citocalizinaseleagalacapatul+siblocheazaelongarea 2. timiozinaseparamonomerideactina 3. gelsolinaseleagadefosfatidilinozitol,esteactivatadeCa 4. profilinaseleagadePI,transformaADPinATP Polimerizareaesteajutatadefaloidina,substantafolositasiinmicroscopiacufluorescenta. Microfilamenteledeactinasepotorganizaindividualin: bandelete:pachetedefilamenteparalelecuproteinecrosslinkermicisirigide retea:structuri3Dcuproprietateadegelsemisolidcuproteinedeoriganizaremari siflexibile Acesteproteinecrosslinkermodeleazacitoscheletul. Bandeletelepotfistructuratein2tipuri: 1.filamentedeactinaparaleleladistantemici,cumsuntcelecesustinmicrovilii.Inacest caztoatebandeleteteauaceeasipolaritate,cucapul+catremembrana.Proteinaimplicata: FIMBRINA 2.filamnetedeactinaparaleleindistantemaimari,capabiledecontractie.Sunt bandeleteledeactinadinineluldecontractiecedevideceluleleintelofaza.Proteina implicata:ALFAACTINA. ReteauadeactinaestegeneratasimentinutadeFILAMINAABPactinabinding protein,gasitasubformadedimeri,fiecarecu2subunuitati.ArestructuralitereiVsi legandlafiecarecapatactina,rezultaoretea3DcesenumesteCORTEXCELULAR.

37.Dinamicamicrofilamentelordeactina Reprezinta20%dinproteinelestructuralealecelulelormuscularesi5%incelulele nemusculare.Estede6tipuri:4alfaptcelulelemusculare,1betasi1gammaptcelulele nemusculare. StructuraactineiafostdescrisadeKennethHolmessiWolfgangKabsin1990.Exista2 forme:globularasifilamentoasa. Actinaglobularaare375aasi43000KDa.Prezintasitusuridelegarecemediaza interactiuneacapcoadacualti2monomeri.Fiecaremonomeresterotat166degradein interiorulfilamentuluirezultandformafilamentoasacudubluhelix.Monomeriiauaceeasi orientarejustificandpolaritateamoleculei:uncap+siunul.Introsolutiecunivelionic scazutactinafilamentoasadevinaglobularasilanivelioniccrescutseintamplainvers. Primatreaptaapolimerizariiestenucleatia(formareaunoragregatemicidincate3 monomerideactinaG)siadouaesteaditiareversibilademonomerilacapetele+si. MonomeriideactinaleagasiATP ,careehidrolizatsiregleazaasamblareasi comportamentuldinamicalactinei.MonomeriicareleagaATPpolimerizeazamultmai repededecatceiceleagaADP .Concentratiacriticademonomerideactinareprezintarata depolimerizareinfilamente,siesteegalacuratadedisociere.Ratadedisociereemai marelacapatuldecatla+,inversseintamplacuratadepolimerizare.Pentrucaactina leagamailentmonomeriprinhidrolizaADPdecatATP ,senastefenomenuldeTreadmilling siilustreazadinamicafilamentelordeactina.

Disociereaestefavorizatade: 1. citocalizinaseleagalacapatul+siblocheazaelongarea 2. timiozinaseparamonomerideactina 3. gelsolinaseleagadefosfatidilinozitol,esteactivatadeCa 4. profilinaseleagadePI,transformaADPinATP Polimerizareaesteajutatadefaloidina,substantafolositasiinmicroscopiacufluorescenta.

38.Filamentedemiozina MiozinaesreprototipulunuimotormolecularcetransformaenergiachimicaaATPuluiin energiemecanica,deaceeagenereazafortasienergie.Contractiamuscularaarelabaza aceastainteractiunechimica.Aceastainteractiuneeresponsabiladevariatelemiscari capabilecelulelenemusculare,inclusivdiviziuneacelulara. Miozinaesteoproteinacugreutatemolecularade500KDasiestealcatuiradin2lanturi grelesi4lanturiusoare.Fiecarelantgreuarecateoportiuneglobularasioportiunealfa helicoidala.Portiuneaalfaaunuilantgreusespiralizeazainjurulportiuniialfahelicoidale avceluilaltlantgreysudaunastereunuidimer=bastonasulmoleculeidemiozina.Cele douacapeteglobularealemoleculeidemiozinaaufiecareatasatcate2lanturiusoare. Filamentulgrosdemiozinaesteformatdinsutedemoleculedemiozina.Capetele globularealemoleculeidemiozinaformeazapuntiledelegaturaintrefilamentelegroasasi celesubtiri.Infilemantulgros,miozinaseorienteazacucapetelealfahelicoidalecatre membranaMsicucapeteleglobularedealungulfilamentelordeactinaindirectia capatului+.Odataculegareafilamentelordeactina,miozinaleagasihidrolizeazaATPul, cefaciliteazaalunecareafilamentelor. Incelulelenemusculare,miozinanuesteorcanizatainfilamentesiastfelnuesteinplicaain contractie.Poatefiimplicataintransportdeveziculesiorganite.Intotalsauidentificat10 clasedemiozina.MiozinaVafostidentificataincreierulumansiareroldecarausde veziculedealungulfilamentelordeactina. 39.Rolulmicrofilamentelordeactinainprocesuldeimbatranirecelularasiapoptoza Apoptozareprezintamoarteacelularaprogramata,cejoacaunrolesentialinorganogeneza sireinnoireacelulara,ceaparainsasiincazuldetoriorarilorusoaredeordinexogen(cele greleproducnecroza). Caracteristicileapopotozeipotfirezumate: (1)SuntconsumatoaredeATP (2)Suntcontrolategenetic (3)Sepastreazaorganitele (4)Sepastreazaintegritateacelulara (5)Absentainflamatiei (6)Micsorarecelulara (7) Seformeazacorpuriapopototicedelimitatedemembranecepotfiusorfagocitate Celemaifrecventeanomaliiconstauinreducereadimensiunilor,cusporireadensitatii matricei,modificaredenumitaPICNOZAMITOCONDRIALA.

Exista3caiceinteractioneazainmecanismulapoptotic: 1.Caleaextrinsecasebazeazapeexistentaasemnalelorexracelulareceseleagala membranacelularapeasanumitiDeathreceptorDR(ApartinfamilieiTNFR Tumornecrosisfactorreceptor)cecontinundomeniuintracelularnumitDeathdomain. LegareasemnaluluiinducetransformarilanivelulDeathdomainuluiconsecutivcu recrutarealanivelulacestuiaaprocaspazei8,care,prinactiuneaproteoliticaadomeniului producecaspaza8formaactiva.Aceastaactiveazalarandulsaualtecaspaze(cascada caspazelor),care,impreuna,actioneazaproteoliticasupraproteinelorintracelulare inducandapopotoza. Deasemenea,actioneazaasupreagelsolinei,careesteinstransalegaturacuactinadin matrixsicaurmare,schimbaformacelulei. Caspazeleactivateinteractioneazacufactorulinhibitoralcaspazelor(ICAD)siilinhiba, potentandastfelcascada. 2.Caleamitocondrialaactivataprinfactoriexogenispeciireactivealeoxigenului, cresteriale[Ca2+]intramitosolicsicaspaze. Rezultatulactivariiestedeschidereaunuiporlarginmembranamitocondrialainterna MPTPMitochondrialPermeabilityTransitionPore,urmatadeumflareacelulara,ruperea membraneiexternemitocondrialesieliberareacitocromuluiCincitosol. CitocromulCeliberatincitosol,seleagadeAPAFApoptoticproteaseactivatingfactor1si ATPsiformeazaostrucutura,7dintreacestestructurilegateintreele,formeazaun oligomersubformaderoatacuspitenumitapoptosom.Aceastastructuraleaga7molecule deprocaspaza9siformeazacaspaza9formaactiva,ceinduceapoptoza. 3.Caleanuclearasebazeazapeexistentauneiproteinenuclearetumorsuppressorp53 cedetecteazanepotriviriintrebazeleazotatelanivelulADNului. Incazuluneinepotriviriusoareseactiveazatranscrierea p21ceopresteciclulcelular (probabilpentrucorectare). IncazuluneieroriseverelanivelulADNuluip53isiautostimuleazapropriatrasncrieresi actioneazaconsecutivalaactivareafactorilorproapoptoticiBAXsiinactiveazafactorii antiapoptoticiBCL2. ModificareacantitativaBAX:BCL2activeazaMPTPdeclansandapoptozapecale mitocondriala(2).Deasemenea,activeazafactoriiFasceactiveazacaleadescrisala punctul(1). Dereglarialemecanismuluiapopotozeiprovoacaimbatranirea,incapacitateaorganismului deascapadeceluleleafectatecrescandrisculdecancer.

40.Proteineasociateactineiinprocesuldepolimerizare Reprezinta20%dinproteinelestructuralealecelulelormuscularesi5%incelulele nemusculare.Estede6tipuri:4alfaptcelulelemusculare,1betasi1gammaptcelulele nemusculare.

StructuraactineiafostdescrisadeKennethHolmessiWolfgangKabsin1990.Exista2 forme:globularasifilamentoasa. Actinaglobularaare375aasi43000KDa.Prezintasitusuridelegarecemediaza interactiuneacapcoadacualti2monomeri.Fiecaremonomeresterotat166degradein interiorulfilamentuluirezultandformafilamentoasacudubluhelix.Monomeriiauaceeasi orientarejustificandpolaritateamoleculei:uncap+siunul.Introsolutiecunivelionic scazutactinafilamentoasadevinaglobularasilanivelioniccrescutseintamplainvers. Primatreaptaapolimerizariiestenucleatia(formareaunoragregatemicidincate3 monomerideactinaG)siadouaesteaditiareversibilademonomerilacapetele+si. MonomeriideactinaleagasiATP ,careehidrolizatsiregleazaasamblareasi comportamentuldinamicalactinei.MonomeriicareleagaATPpolimerizeazamultmai repededecatceiceleagaADP .Concentratiacriticademonomerideactinareprezintarata depolimerizareinfilamente,siesteegalacuratadedisociere.Ratadedisociereemai marelacapatuldecatla+,inversseintamplacuratadepolimerizare.Pentrucaactina leagamailentmonomeriprinhidrolizaADPdecatATP ,senastefenomenuldeTreadmilling siilustreazadinamicafilamentelordeactina. Disociereaestefavorizatade: 1. citocalizinaseleagalacapatul+siblocheazaelongarea 2. timiozinaseparamonomerideactina,(5kd)ceamaiabundenta,seleagala actinaGADPsiimpiedicaansamblareainfilamente 3. gelsolinaseleagadefosfatidilinozitol,esteactivatadeCa,promoveaza deplasareafilamentelordeactina.Fragmenteazafilamenteleramanandlegatade capetele(+)fiindoprotceblocheazacrestereafilamnetelor 4. profilinaseleagadePI,transformaADPinATP Polimerizareaesteajutatadefaloidina,substantafolositasiinmicroscopiacufluorescenta. 41.Proteineleasociateactineiinprocesuldeasamblareincitoschelet Reprezinta20%dinproteinelestructuralealecelulelormuscularesi5%incelulele nemusculare.Estede6tipuri:4alfaptcelulelemusculare,1betasi1gammaptcelulele nemusculare. StructuraactineiafostdescrisadeKennethHolmessiWolfgangKabsin1990.Exista2 forme:globularasifilamentoasa. Instudiulcitoscheletuluicasiincazulmembraneicelulare,saufolosithematiiledeoarece suntcelulefaranucleusiorganitecelulare.Citoscheletuleritrociteloresteformatdoardin actina,lipsindmicrotubuliisifilamenteleintermediare.Citoscheletulcorticaldeactinaeste responsabildeformadediscbiconcav. SPECTRINAeritrocitareformeazabazacitoscheletuluicortical,untetrameralcatuitdin2 lanturipolipeptidice,alfasibetacugreutatemolecularade240KDarespectiv220 KDa.Lantulbetaareundomeniudelegarealactineilacapatulaminoterminal.Lanturile alfasibetasepotasociapentruaformadimericaresepuncaplacappentruaforma tetramericu2domeniisepaeardelegareaactineisiavandlungimide200nm.Capetele microfilamentelordespectrinaseasociazacufilamentelescurtedeactinaformandreteaua despectrinasiactinarezultandcitoscheletulcorticalalhematiei.Aceastareteaseleagade membranaplasmaticaprinANKIRINA,ceseleagadespectrinasideproteinabenzii3.O legaturaadditionalaintrereteauadespectrinaactinasimembranaplasmaticasepoateface prinproteinabenzii4.1ceseprindesidedomeniulintracelularalglicoforineisiproteinei benzii3. Inaltecelule,legareacitoschelatuluicorticaldemembranacelularasefaceprinproteine

spectrinlike:FODRINE,FILAMINA,DISFORINA. Disforinaecodificatade2generesponsabilede2tipuridedistrofiimusculare:Duchenne siBecker.Adouaestemaiputinsevera,mairarasinuemereuletala.Disctrofiasemnifica pierdereatreptatadecelulemusculare. DisctrofiaDuchenne:Copiinusuntafectatipanala35ani,dupacareapareoboseala musculara,scadereamaseimusculare,la12animergeincaruciorulcurotilesila20deani moaredininsuficientarespiratorie. Disforinaesteresponsabilacuancorareacitoscheletuluimusculardematriceaextracelulara. 42.Organizareasarcomeruluiinfibramuscularastriatascheletica Filamenteledeactinaseasociazacumiozinasiaceastaasociereesteresponsabilade numeroasemiscari. MiozinaesteprototipulunuimotormolecularcetrasformaenergiachimicaaATPuluiin energiemecanica,deaceeaagenereazafortasienergie.Contractiamuscularaarela bazaaceastainteractiunechimica.Esteinsaresponsabilasidediviziuneacelulara. Exista3tipuridecelulemusculare:striate,nedete,cardiace.Miofibrilelesuntstructurate instriatiitransversale. Fibramuscularaareundiametrude50micronisilungimedecativacm.Ceamaimare parteacitoplasmeiesteaclatuitadinmiofibrilecesuntbandeletecilindricealcatuitedin filamentegroasedemiozina15microni,sifilamentesubtirideactina7microni. Unitateacontractilasenumestesarcomer.Are2micronilungimesicontinemaimulte regiunidistincteobservabilelaME.Lacapeteleunuisarcomersuntdefinite membraneleZ. Bandaintunecata=discanizotrop,esteintre2jumatatidediscuriclare=discuriizotrope. Benzileclarecorespundlipseimiozinei. BandaInumaiactina BandaAmiozina+actina BandaHdoarmiozina Capetele+aleactineiseataseazalamembranaZcarecontinesialfaactininaproteinade linkare.MiozinaseleagademembranaMdinmijloculzoneiHluminoase. Titinasinebulinastabilizeazasarcomerul.Titinaaremoleculamaresiseextindedela membranaMlaZ.Nebulinaesteasociataactineisistabilizeazalungimeafilamentuluide actina. Mecanismulcontractiei: MembraneleZseapropie,sarcomerulsescurteaza.DisculAnusuferaniciomodificarein timpcediscurileIsizonaHaproapedispar. Arelocalunecareafilamentelordeactinaprintreceledemiozina,permitandmiozineisa actionezecamotoralalunecariifilamentelor.MiozinadinmuschiestedetipII. Proteinereglatoare:Tropomiozinaesteoproteinafibroasacesedispunedealungul filamentelordeactina.Fiecaremoleculadetropomiozinaleagaomoleculadetroponina. Troponinaesteuncomplexde3polipeptide:GcheleazaCa,Iinhibitoare,Tseleagala tropimiozina. CandconcentratiadeCacitoplasmaticestescazuta,complexultropomiozinatroponina blocheazainteractiuneaactinamiozina,decimuschiulnusecontracta.Inconcentractiile crescute,CaseleagadetroponinaCcareseleagalaTsiaceastaseprindedetropomiozina cedeterminacontractiaasociindusecuactina.

43.Filamenteintermediare Auundiametrude10nm(diametruintermediarintrefilamenteledeactinacareau7nmsi microtubuliicareau25nm).Filamenteleint.nusuntimplicateinmiscareacelularasiele suntcelemaistabilestructuricejoacarolstructural. PROTEINELEFILAMENTELORINTERMEDIARE: Filamenteleintermediaresuntalc.dintrovarietatedeproteineceseexprimaindif.tipuri decelulespredeosebiredeactinasimicrotubuliicaresuntpolimeriaiaceluiastipde proteina Maimultde50detip.defilamenteint.siproteineaufostidentificatisiclasificatiin6 grupuri,bazatepesimilaritatiiintresecventeledeAA TipIsiIIsunt2tip.dekeratinefiecarecontinand15proteinediferiteceseexprimain celuleleepiteliale.Fiecaretipdecelulaepitelialasint.untipdekeratinadincat.I(acida)si untipdincat.II(neutra/bazica),ambelecopolimerizandptaform.unfilament TipIIIdeproteinealefilamentelorinclude:VIMENTINAcareseintalnestein fibroblaste,celulemuscularenetede,leucocite DESMINAcareesteintalnitain fibrelemuscularestriate,seprindedemembranaZ PROTEINEGLIALE FIBRILAREACIDEseexprimaincel.gliale PERFIRINAseexprimain neuroniisistemuluinervosperiferic TipIVcuprindeproteineledinfilamente:1.NFL;2.NFM;3.NFHprez.inneuronii motoriiaiSNC;4.alfainternexinacareseexprimainneuroniinstadiileinitialade dezvoltareembrionara TipVcuprindelamininelenucleareprez.incelemaimulteceluleeucariote,sunt componentaaanvelopeinuclearesiseansambleazaintroreteaortogonalasubmembrana nucleara TipVIcuprindenestinaprezincel.stemaleSNC Filamenteleintermediareauoorg.struct.comuna;toateprot.filamentelorintermediareau oportiunecentralaalfahelicoidaladeaprox.310AA(lamininanuclearaare350AA);partea centralaesteflancatadecapeteleaminosicarboxiterminale.Domeniulalfahelicoidaljoaca unrolcentralinansamblareintimpcecapetelesaucoziledet.fct.specifice;capulcapatul amino;coadacapatulcarboxi.

ASAMBLAREAFILAMENTELORINTERMEDIARE: Primulstadiuinform.filamenteloresteform.dimerilorincareparteacentralaesteform. din2lanturipolipeptidicerasucitehelicoidal.Dimerisepotasocia2cate2dispusi

paralel.Capatulaminoterminalindreptulcapatuluicarboxiterminalducandlaform.de tetramericesepotatasacaplacapformandprotofilamente.Infinalunfilamentcontine8 protofilamenteasezatecircularceform.ostr.cilindrica.Acestebastonasenuau polaritate.Filamenteleintermediaresuntingeneralmaistabiledecatfilamenteledeactina saumicrotubuli.Proteineledinfilamentesuntmodificatefrecventprinfosforilarecepoate reglaasamblareasideplasarealorincelula.Celmaiclarex.estefosforilarealamininei nucleareceeaceduceladezasamblarealaminineisidistrugereainvelisuluinuclearin timpulmitozei;filamenteledevimentinadeasemeneapotdezasamblateinmitoza.

ORGANIZAREAINTRACELULARAAFILAMENTELORINTERMEDIARE: Formeazaoreteaelaborataincitoplasmacelormaimultecelule,extinzandusedelaniv. nuclearlamembranaplasmatica.Atatfil.dekeratinacitsiceledevimentinaseataseazala anvelopanucleara,aparentservindlapozitionareasiancorareanucleuluiincelula.Inacelasi timpvimentinasepoateatasademembranaplasmatica,legandusedeanchirina.Reteauade filamenteestesustinutasiasociatamicrotubulilor.Existaoseriededroguricare dezasambleazamicrotubuli,elefacandcafilamenteledevimentinasasecolapsezeinjurul nucleului.Filamenteledekeratinanaleceluleiepitelialesuntstransancoratelamembrana plasmaticalazonespecializateintervenindinform.DESMOZOMILORsi HEMIDESMOZOMILOR.

44.Microvili,stereocilii,cilii,flagelii Suntprelungirialeceluleloreucariote,ceauinstructuralormicrotubuli. Multebacteriiauflagelii,darsuntdif.deceiaieucariotelor.Cilisiflageliieucariotelorsunt foartesimilariiinstr.,avanddiametrulde0.25micronisilungimeaptcil10microniiarpt flagel200demicroni. StructurafundamentaladebazaacililorsiflageliloresteAXONEMA,alcatuitadin microtubuyliisiproteinelelorasociate.Microtubuliiauunaranjamentcaratcteristic9+2(un dubletinconjuratde9dubleteperiferice)incadruldubletelorperifericeexistaun microtubulformatdin13protofilamente.Acestimicrotubuliperifericisuntlegatide perecheacentralaprinlegaturiiradiarealcatuitedinnexina.Inaditieexista2bratede dineinacaresuntatasatelafiecaremicrotubulA,iaractivitateademotoradineinei determinabataliacililorsiflagelior.Capatulalmicrotubulilordincilisdauflagelieste ancoratincorpuscululbazal,ceestesimilarcustructuracentrioluluiavandtripletede microtubuli.Corpusculiibazalioricumjoacaunrolclarinorganizareaaxonemei,el inainteazaformareasicrestereamicrotubulilorprezentiiinaxonemasiancorarealorla suprafatacelulara. Miscareacililorsiaflagelilorrepralunecarearelaticvaadubletelordemicrotubuliiunele fatadealtelesubactiuneadineinei.BazamoleculeidedineinaseleagacasubfibraAa

dubletului,intimpcecapeteleglobulareseleagadesubfibraBdindubletuladiacent. Miscareacapetelordedineinaindirectia+catredet.camicrotubululdintrun dubletsaalunececatrecapatulbazalalmicrotubululuiBadiacent,deoarecedubletele demicrotubuliiinaxonemasuntconectateprinnexina,alunecareaunuidubletin raportcualtuldet.inclinarea,indoirealor.

45.Microtubulii Atreiacomponentaprincipalaacitoscheletuluiestereprdeformatiunicilindricecu diametrulde25nmnumitemicrotubuli.Casifilamenteledeactina,microtubuliisuntstr dinamiceceseasambleazasidezasambleazacontinuulaniv.celulei.Aurolinmentinerea formeicelulare,indeterminismulunormiscaricumarfi:locomotiacelulara;transportul intracelulardeorganite;separareacromozomilorinmitoza. STRUCTURA,ASAMBLARE,DINAMICASIINSTABILITATEAMICROTUBULILOR MicrotubuliisuntalcatuitiidoardinTUBULINAcareesteundimeralc.din2 subunitatii:alfatubulinasibetatubulinade55kDfiecare,casiactinaestecodificatadeo fam.micadegene.Secunoastesigamatubulinalocalizatainspecialincentrozomunde joacaunrolimp.ininitiereaasamblariimicrotubulilor.Dimeriidetubulinavorpolimeriza forrmandmicrotubuliicareingeneralsunalcatuitiidin13protofilamenteasamblatein jurulunuispatiucentral.Protofilamentelecesuntalc.dintrunaranjamentcapcoadaal dimerilordetubulinasuntdispuseparalellanivmicrotubulilor.Lafelcafilamentelede actinasuntstr.polarecu2capetedistincte:capatul+cuocrestererapidasicapayulcuo cresterelenta.Polaritateaesteimp.indet.directieidemiscaredealungul microtubulului,exactcumpolaritateafilamentuluideactinadet.directiademiscarea miozinei.Dimeriidetubulinasepotdepolimeriza,iarmicrotubuliipotaveaciclurirapidede asamblaresidezasamblare. AtatalfacatsibetatubulinaleagaGTPcarefctanalogATPuluilegatdeactinaregland polimerizarea.InparticularGTPlegatdebetatubulinaestehidrolizatlaGDPurmaind polimerizarea.AceastahidrolizaaGTPstabilesteafinitateadelegareatubulineifatadealte moleculedeaceeafavorizeazadepolimerizareasiducelacomportamentedinamice.Se poatevorbideacelasicomportamentdetreadmillingdeasamblaresidezasamblareincare moleculelelegatedeGTPsuntpermanentpierdutedelacapetelesisuntinlocuiteprin aditiedemoleculedetubulinalegatedeGTPlacapatul+,inacelasimicrotubul.Turnoverul dereinoireesterapiddecatevaminutesiestefoarteimp.pt.remodelareacitoscheletuluiin timpulmitozei.Dincauzaroluluiprincipalalmicrotubulilorinmiztoza,drogurilece afecteazaasamblareamicrotubulilorsuntutilizateintratamentulcancerului Colchicina,calcemidulseleagadetubulinasiinhibapolimerizareaei,deciblocheaza

mitoza.Taxolulstabilizeazamicrotubulii,blocanddiviziunea.

46.Centrioliisicentrulcelular Centrioliisuntorganitecilindricestabileincitoplasmacelulelor Auundiametrude0,15nmsiolungimedepanala0,5nm Suntalcatuitidin9tripletedemicrotubuli,similarcorpusculuibazalalciluluisau flagelului(suntprecursoriicorpusculuibazal)intrandincomponentacentruluicelular Centrozomul(centrulcelular)poatefiialcatuitdin2centrioliorientatiperpendicularunul pecelalaltsiinconjuratideunmaterialamorfpericentriolar Microtubuliicareprovindincentrozomnusevorterminaincentriolciinmaterialul pericentriolarcareinitiazaansamblareamicrotubulilorsaupoatecaptaextremitatile microtubuilorpolimerizatiindependentincitosol Centrulcelularesteresponsabildeinitiereasideclansareadiviziuniicelulareformandfusul dediviziuneprinmicrotubuli..Deasemeneagenereazasimiscareacililorsaualflagelilor prinfaptulcalabazaacestorasegasesteintotdeaunaprezentuncentriolnumitcorpuscul bazal

47.Centriideorganizareamicrotubulilor. Microtubuliiseextindinceluladincentriideorganizareaimicrotubulilorincaresun ancoratiicucapetele.Inmareamajoritateacelulelorcentrudeorganizareeste CENTROZOMULcareestelocalizatinapropiereanucleului.Intimpulmitozeimicrotubulii seextinddincentrulcelularduplicatptaformafusuldediviziune,ceesteresponsabilde separareasidistributiacromozomilorincelulelefiice.Centrozomulservestecasitusinitial deasamblarealmicrotubulilorcarecrescapoicatreperiferiedelanivcentrozomului,acest lucrustabilestesipolaritateamicrotubulilorincelula.Capatulestelanivcentrozomiar capatul+estecatrecitoplasmacelulara.Centrozomiisuntformatidintroperechede centrioliperpendiculariiunulpecelalalt,inconjuratiideomasaamorfanumitamaterial pericentriolar. Centrioliisuntstrcilindricealc.din9tripletedemicrotubulii,similarcorpuscululuibazalal ciluluisiflagelului,centrioliisuntprecursoriicorpuscululuibazal.

REORGANIZAREAMICROTUBULILORINTIMPULMITOZEI: Aranjamentulmicrotubulilorprezentiininterfazasedezasambleazainunitatiiliberede tubulinacaresuntresponsabiledeformareafusuluidediviziunecarelarandulluieste responsabildeseparareacromozomilor.Inprimulmomentarelocduplicareacentrozomului ptaforma2centriideorganizareseparatiisicaresedispunlapoliiopusiiai celulei.Centrioliisicelelaltecomponentealecentrozomuluiseduplicaininterfazadar ramandeoparteanucleuluipanaincepemitoza,cei2centrozomiapoiseseparasise

mutadeopartesidealtaanucleului,formandceidoipoliaifusuluidediviziune.Cum celulaintrainmitozaasamblareasidezasamblareaareloc,maiintaicresteratade dezasamblarede10ori,numaruldemicrotubuliceemanadincentriideorganizarecreste de510ori.Arelocodezasamlareamicrotubulilorinterfazicisicresteformareade microtubuliiscurtiiemanatiidincentrozom.Microtubuliicareformfusuldediviziunesunt de3tipuri: MICROTUBULIKINETOCOROCENTRIOLARIsuntasociaticuproteinespecificeptaforma kinetocorii,atasareamicrotubulilorlakinetocoristabilizeazamicrotubuliicarejoacaunrol importantinseparareacromozomilormitotici MICROTUBULIIPOLARIsuntatasatilacromozomisiseintrepatrundcumicrotubuliidela polulopusincentrulcelulei MICROTUBULIIASTRALIemergradalinjurulcromozomilorsiaulibercapayul+ Asamblareasidezasamblareadinamicaamicrotubulilorestereglatadeovarietatede proteineasociatemicrotubulilor,CelemaibineizolateaufostMAP3izolatedincreier.Aceste proteineseleagademicrotubuliisiinhibadisociereasubunitatilordetubulina. MOTORULMICROTUBULILORSIMISCARILE: Micortubuliisuntresponsabilidediferitetipuridemiscari,incluzandtransportul celular,pozitionareamembranelorvezicularesiaorganitelor,separareacromozomilorin mitoza,bataiaciliorsiflagelilor.Miscareadealungulmicrotubulilorestebazatapeexistenta uneiproteinemotorceutilizeazaenergiaderivatadinhidrolizaATPului. Exista2familiideastfeldeproteine: KINEZINELE DINEINELE Ambelesuntproteinedistinctecesemiscadealungulmicrotubulilorindirectii opuse:KINEZINELEdelacapatullacapatul+siDINEINAdelacapatul+lacapayul KinezinaesteoproteinacuGM360Kd,avandlanturigrele(110Kd)si2lanturiiusoare(60 70Kd),lanturilegrelerealizeazaundomeniulunghelicoidal.CapeteleNterminaleglobulare reprmotorulmoleculei,seleagaatatdeATPcatsidemicrotubulii,domeniulmotorglobular alkinezineiare340deAA,estemaimicdecatalmiozinei(850AA).CristalografiacurazeX indicaca,kinezinasimiozinaaudomeniicurolmotorsimilar,ambeleutilizeazamecanisme moleculareidenticeptacuplasihidrolizaATPul.Coadamoleculeidekinezinaestealc.din lanturileusoareinasociatiecucapetelecarboxilalelanturilorgrele.Portiunearesponsabila delegareaaltorcomponentecelularecesunttransportatedealungulmicrotubuliloreste capatulmoleculeicurolmotor. Dineinaaremoleculafoartegrea2000Kd,are23lanturigrele(500Kd)complexatecuunnr

variabildepolipeptideusoaresimedii(14120Kd),lanturilegreleformdomeniiglobularece leagaATPulsisuntresponsabilededeplasareadealungulmicrotubulilor.Portiuneabazala esteformdinlanturilemediisiusoaresiseleagadeorganitelecelulare.

48.Ribozomi.Structura,organizare,biogeneza AufostdenumitidecatreEmilPalade,particuleintracitoplasmaticebogateinARN, lanivelulcaroraarelocbiosentezaproteinelor.RichardBRobertsestecelceleadat numelederibozomi.Riboacidribonucleic,somacorp. Suntorganitecitoplasmaticeprezenteatatlaprocariotecatsilaeucariote,cuexceptia hematieiadulte.Existainmatriceaunororganitecelularemitocondrii,cloroplaste, sintetizeazaenzimespecificeproteine.Ribozomiimitocondrialiaudimensiuni asematatoareribozomiiprocariotici,suntmaimicidecatribozomiicitoplasmatici. Suntliberisauatasatiinfunctiedeprezentainlantulpolipeptidicsintetizataunui secventenumitesemnaldeorientarecatreRE. libericitosol,singurisauingrupuri=polizomi,atasatideunARNm,mai bogatiinceluleleimplicateinsinteazaproteinelor. atasatiRER,existaincantitatimariincelulelecaresecretaproteinedeexport (cupuntidisulfuricesaucucisteinasinecesitasintezainlumenulRE);fac sintezadeproteinemembranaresaucarevorfiimpachetateinveziculesistocate incitoplasmasauexportateinafaracelulei. Ribozomiisuntresponsabilidebazofiliacelulei. Constantadesedimentare70Sprocariote,80SeucarioteSSvedbergmasoararatade sedimentareaunuicomponentcentrifugat,depindeatatdegreutateamolecularacatside formatridimensionalaacomponentului.Antibioticeleatacadoarribozomiicelulrlor bacteriene70Sprocariote,ribozomiimitocondrialisuntprotejatideomembranadubla. Audimensiuniintre1530nm.Contineribonucleoproteinesi3moleculedeARNr procariote,4pteucariote.PrinARNrtraducinformatiainscrisapeARNmptaformalanturi polipeptidicesideaceeasuntconsideratiastazicaparticuleenzimaticedincategoria ribozimelor.Celemaicunoscutedintreacesteasunt: peptidiltransferaza23SARNr groupIsiIIintrons branchingribosyme leadsyme Incitoplasma,ribozomiipotdisociareversibilincele2subunitati,infunctiede concentratiadeMg.DacaconcentratiadeMgdepaseste10^3M,cele2subunitatipotfi asamblate. SubunitateamicaesteaclatuitadintromoleculadeARNsi33lanturiproteice. Subunitateamareestealcatuitadin3moleculedeADNsi50lanturiproteice. Biogenezaesteprocesulincaresuntimplicateinjurde200deproteinesiareca rezoltatformarearibozomilor. Subunitateamicasiceamareintraprinporiinucleari,fomatiunicudimensiunede120nm. Ajunglanivelulnucleolului,undeseaflacele45degenecodificatoaredeARNr. Subunitateamicasisubunitateamareseasambleazasiajungdinnouinmediul

citoplastmatic,formandribozomul.

49.Functiileribozomilor RibozomiiisaugranuleleluiPaladesuntprezentiintoatecelulele,atatlapkcatsilaek,cu exceptiahematiiloradulte.Incitoplasamaekribozomiisunliberi,situatiinnodurileretelei microtrabecularedinhialoplasma,fieatasaticitomembranelor. Ribozomiisuntsediulsintezeiproteinelorspecifice,laceluleleekribozomiiaudimensiuni maimaridecatlapksinuprezintamembranelaperiferie. Instarederepausribozomiisuntconstituitidin2subunitati:60Srespective40Slaeksi50S resprectiv30Slapk. Maimultiribozomiinsiratidealungullantuluidearnmalcounitatefunctionalactiva POLIRIBOZOMsauERGOZOM. Numarulderibozomiceintrainalcatuireaunuipoliribozomdepindedemarimeamolec proteicecarevafisintetizata.Eisuntnumerosiincelaflateinfazeledecresteresiincelcu sintezacrescutadeproteine(celpancreatice,hepaticesinervoase). Ribozomiiaucapacitateadeaseuni,alcatuindstructuripolimeredeterminatedeC% mediunluiinionideMg2+.Agregateleribozomaleconstituieformeactivearibozomilor. Arnulribosomalestelocalizatinribozom,cantitativelreprezentand~80%dintotalularn uluicellular.Proteineleribozomalereprezintacirca45%inribozomi,aucharacterbasic asemanatorhistonelorsisuntbogateinlizinaarginina,acglutamicsiacaspartic.Cuacetat deuranulrbzliberiaparmaiputindensilafluxuldeelctroni,intimpcerbzatasatide membranedatoritaC%crescutedearnredauimaginidense. 51.Sintezalantuluipolipeptidiclanivelulribozomilor 20APEAMINOACILARNt+situsuri Ccomplexdeinitiere Aaug Efactorieucarioticideinitiere AsitusulAurmatorulcodon AARNtdipeptidil ESubunitateamareinainteaza3bazeinsensul3'panacandARNtinitiatorajungein situsulE Etapeletraduceriiinformatieigeneticesunt: 1. SinteazaaminoacilARNt: SerealizeazadecatreaminoacilARNtsintetaze20deenzimecerecunoscspecificcei20 deaasianticodoniasociatidelanivelulmoleculelordeARNt. AminoacilARNtfacelegaturadintresecventacodonilordinARNmsistructuraprimaraa proteinelor. SitusuriledelegareARNaleribozomuluisunt: situspentruARNm situspentruARNt A:leagaaminoacilARNt P:leagapolipeptidulincursdesintezacuplatcuARNt E:leagamoleculadeARNtfararestaminoacil/peptidil

2.Initiereasintezeilantuluipolipeptidic: Complexuldeinitiereestealcatuitdinsubunitateamare,factorideinitiere,initiator metioninARNt. ComplexulseataseazapeARNmsidetecteazacodonulstart,intotdeaunaAUG. Complexuluideinitiereisealaturasubunitateamaresiarelocpierdereafactorilorde initiere. InsitusulAseataseazaaminoacilARNtcorespunzatorurmatoruluicodondinARNm. Estecatalizatasintezalegaturiipeptidicedintremetioninasialdoileaaminoacid,cu transferuldipeptiduluipealdoileaARNt,subactiuneatranspeptidazelordinsubunitatea mare,rezultandARNtdipeptidil. Simultan,subunitateamaresedeplaseazacu3bazeindirectia3'aARNm,astfelincat ARNtinitiatorajungeinsitusulE. 3. Elongarea IncepecandARNtdipeptidilestetransferatinsitusulAinsitusulP ,procescareva continuapetoatalungimeaARNm. IntotdeaunainsitusulAsevaaliniaunaltcodoncarevafirecunoscutdeanticodonul corespunzatordinARNtsicarevalegaunnouaminoacidlacatenapolipeptidica. 4. Terminareasintezeilantuluipolipeptidic AreloccandinAajungecodonulSTOPUAA,UAG,UGA,ptcarenuexistaARNtcu anticodoncomplementar. Codoniistopsuntrecunoscutideoproteinanumitafactordeterminare,careseleagain situsulAsiproducehidrolizalegaturiidintrecatenapolipeptidicasiARNtdinsitusulP . Lantulpolipeptidicpierderadicalulmetionil. 52.Pliereaproteinelor:saperone Asisteareaproteinelorptimpachetareacorecta Asistatadeproteinenumites(h)aperone(chaperone)mecanismulnuestecomplet elucidat. Calnexinaproteinasaperoncuactivitatelectinica.LeagastructurileNglicozidice careauramascuosinguraglucozadupatunderesimentineprecursoruldeglicoproteina legat.DesprindereadecalnexinasefaceprinactiuneaglicozidazeidinlumenulRE,doar duparealizaraeaplieriicorecte.Existalaacestniveloglucoziltransferazacareisiexercita activitateaincazulincareglucozaafostdesprinsatimpuriu,enzimarealizandinaceste conditii,reglucozilarea.Glucozanecesaraestefurnizatadecatre ARIDILDIFOSFOGLUCOZAsiasigurareatasareacalnexinei. InlumenulREavemunmediuasemanatorcuceicitoplasmaticcementineconditii oxidativefavorabilepuntilordisulfurice.Enzimaimplicatasenumesteproteindisulfura izomeraza.Aceastarealizeazapuntiinstructurapriteineinascandesaudesfacepuntile gresitstructuratesilereformeaza. S(h)aperonacucelmailargspectrudeactiuniesenumesteBiP(bindingprotein). Aceastadetinecontrolulinchideriisideschideriitransloconului,complexeazaproteinele translocatesileelibereazadoardupaimpachetareacorecta.Incazcontrat,proteina impachetatanecorespunzatorestecondusadeBiPlatranslocon,carelarandulrau elibereazalantulpolipeptidicincitosul,urmandcaaceastasafieetichetatacuUbipentrua fidegradatadeproteazomi.

Desimecanismelenusuntcompletelucidate,secunoastecanecesauldeshaperone estefurnizatdatoritasemnalizariidinlumenulRE.Semnalulparcurceectodomeniul, fosforileazaendodomeniulsiactiveazaunsitenzimaticendonucleazicdelaultimulnivel. ArelocprelucrareaunuipreARNmexistentincitoplasma,caredupaeliminareaintronului devineARNmfunctional.Acestaestefolositptfurnizareaproteinelorshaperonprin mecanismulcunoscutbiosintezaproteinelor.

53.Structuraproteazomilor.Degradareaproteinelormediatedeubiquitina Proteazomiisuntcomplexemoleculareproteoliticeintracelulare,ATPdependente, implicateindegradareaproteineloretichetatecupoliubiquitina.Segasescinorganism cate2000030000deproteazomiinfiecarecelula. Complexulproteazomicestealcatuitdintroparticulamiez,debazaformatedin4inele suprapusefiecarealcatuitdin7proteineprotomerice:2inelebetacentralecusitusuri cataliticeavandactivitateadetreoninproteaze(2situsuricuactiviatedechimotripsinapt aahidrofobi,2situsuricuactivitatedetripsinaptaabazicisi2situsuricaspazicedeclivare aaaacizi)si2inelealfacuactivitateneelucidata. Maicontinesi2particulereglatoareidentice,cateunalafiecarecapatalparticuleimiez. Fiecareparticulareglatoarearecate14proteinedintrecare6suntATPaze.Uneledintre subunitatileparticuleireglatoareausitusuricarepermitrecunoastereaubiquitinei. Proteazomiidegradeazaproteineleinpeptidemicicaresuntapoihidrolizatede exopeptidazelecitoplasmatice.Digestiaproteinelorincepecandproteineiceurmeazaafi digerataiseataseazaunmicpolipeptidnumitubiquitinaproteinaglobularade76aasi uncapatCterminalaflatincitosol.UbiquitinaseataseazacapatuluiNterminalal proteinei.Exista3enzimececontroleazaactivitateaUbiquitinei: E1enzimadeactivare,modificastructuraubiquitineiastfelincatGlydinstructyra acesteiacuLysdelanivelulproteineidedegradat. E2enzimadeconjugare,faceatasareaUbiquitineilaproteina E3ligaza,areroluldearecunoasteproteinaptaiilegaUbiquitina. Proteinaesteapoidepliatalanivelulcavitatiicentraleaparticuleimiez. Sedesfacanumitelegaturipeptidicealelantuluisubactiuneasitusuriloractivedininelele centrale,rezultatulfiindunsetdepeptideavand810aa.Fragmenteledepeptide parasescparticulamiezpeocalenecunoscutaputandfidegradateincontinuarepanala aaindividualidecatrepeptidazedincitosolsaupotfiincorporateinclasaIa moleculelordehistocompatibilitatepentreafiprezentatesistemuluiimundrept potentialeantigenesistemuluiimun. Ubiquitinaesteapoieliberataptafirefolosita.

54.IncluziunilipidiceaspectMO,ME MOprezintaunaspectclarpepreparatelestandard(AlbinHE,RosuinSudanIV) MEaspectelectronoclar METaspectelectronodens(nuatatdeinchisprecummelaninele)

Incluziunilepigmentarepotapareain3circumstante: (1)Tranzitoriuincelulehepaticapostprandial,subformadepiacturilipidiceizolate, proportionalecanumarcucantitateadelipideingerate,suntrepedemetabolizatesidispar dincitoplasmalacetevaoredupaingestie (2)Temporarspreexempluincelulesecretoriidinglandamamarainlactatie (3)Permanentinadipocitealbesaubrune Adipocitelealbeauformarotunjitacandsuntizolatesaupoligonalacandsuntgrupate. Incluziunealipidicadincadruluneiceluleesteuniloculara,ocupaintreagacitplasmape careoimpingecatreperiferie.Celulacapataaspectuldeinelcupecete. Adipocitelebrune(lanounascu+copilarie)involueazalaadultgasindusedoarinloja interscapularasiinghinala.Auformarotunjitacunucleusfericeucromatic.Citoplasmaare aspectvacuolar. Inpatologiesepotobseranumeroaseincluziunilipidiceinhepatocitelealcoolicilor. Lipideleaparlamicroscopulfotonic(optic)subformaunorpicaturisfericeevidentiatecu colorantispecificidetipulSudanuluisauOsO4(tetraoxiddeosmiu)inhepatocite,celulele corticosuprarenaleisicorpuluigalbendinovar.Lamicroscopulelectronic,acumularilede grasimiauformeovalaresausferice,dediferitemarimi. 55.IncluziunipigmentareaspectMO,ME Incluziunilelipidicesuntdemaimultefeluri,potapareainconditiifiziologicesipatologice. DincategoriacelorpatologicesuntpigmentiibiliaribilirubinainceluleleKupfersau hepatocite.Celefiziologice: (1)Melaninapigmentnegruevidentinepidermulpielii,inSNCsubstantaneagra. Inpiele,estesintetizatainmelanocite,celulestelatesisedepoziteazaincheratinocite. MOfulgdenea,neagramaronieaspectgranularcudiametrugranulelormaimicde 800nm MEMelaninaseevidentiazastructurafinaagranulelor,formatiunielectronodense. (2)Lipofuscinapigmentuldeuzuraapareodatacuimbatranirea,inspecialin miocardite,celulenervoase,macrofageinmiocardocitesiinceluleleadipoase.Este produsulnedigeratalunorreactiiliticelanivelsubcelular.Dauculoareagalbena adipocitelor. MOgranulatiigalbenmaronii(chiarsiinHE) MEformatiunielectronodense (3)Hemosiderinareziduulnedigerabilrezultatinurmadistrugeriihematiilor,aparein macrofage,splina.Sepoateconfundacu(1)sau(2)incoloratiaHE,darcapataocoloratie specificaprincoloratiacualbastruPrusiadatoritaatomilordeFEpecareiicontine MOaspectgranularmarioniu MEaspectgranularelectronodens 56.IncluziuniglicogenaspectMO,ME MOseevidentiazacuajutorulcoloratieicarminamoniacalbestplajemaimultsaumai putinintinsecenuocupaniciodataintreagacitoplasma,secoloreazainROSU. SepoateevidentiasiprinPAS MEbastonase(particulealfa)saurozete(particulebeta),aspectelectronodens

57.Structurasiultrastructuralizozomilor. LizozomiisuntorganiteledigestieiintracelularedescoperitedeChristiandeDuve,cese gasescintoatecelulele,cuexceptiahematieiadulte. Aspectullorultrastructuralestedeorganitdelimitatdemembranade0,5 m,avandadesea unmiezelectronodens.Acestiasecaracterizeazasiprincriteriihistochimice: (1)Seidentificadatoritafosfatazeiacideprezinteinlumenullizozomal (2)Inimunoelectromicroscopiasegaseschidrolazespecifice,silipsescreceptoripentru M6P Seaflainnumarfmareinhepatocitesimacrofage,seintalnescinregiuneajuxtanucleara invecinatateaaparatuluiGolgi.Auomembranadenaturafosfolipidicasicontinenzime hidrolitice,innumarmaimarede50,suntimplicateindegradareatuturortipurilorde polimeribiologici;continproteaza,nucleaze,lipaze,glucozidazeptcarbohidrati.Toate acesteasuntactiveintrunmediuacid,aceastaconditieesteindeplinitadatoritapompei Na/K,pompaprotonicamembranaATPdependentacareestecapabiladeainduceunpH de5,avandinvederecapHcitoplasmaticestede7,2. Contine2proteineintegrale(membranare)unipasdetipI:IgpAsiIgpB,cuceamaimare parteadomeniuluiorientatcatrelumen,suntextensivglicozilate.Oproteinacucatcontine maimulticarbohidraticuatatestemaigreudedigerat,dinaceastacauzatoateproteinele lizozomalemembranaresuntinaltglicozilate. 58.Functiilelizozomilor Lizozomii(ChristiandeDuve)suntorganitecelularecuroldigestivcelular,prezentein toatecelulele,maiputininhematiaadulta,gasinduseincantitatemareinhepatocitesi macrofage. Eicontinenzimehidrolitice,proteaze,lipaze,glicozidaze,nucleaze,darsialtetipuride enzime,fosfataze,sulfataze,glicozilareceleasigurafunctiadigestiva,toate componenteledeorigineendosauexogena,caresuntsuperfluusuntdigeratelizozomal. Eicontinunlumenacid,cudouaunitatimaijosdecatpHulcitosolic,acestaasiguraunph deactiune.Citoplasma7,2;lumenlizozomal5 Existadouatipuridelizozomi: (1) Lizozomisecretori ocombinatieintrelizozomiconventionalisigranulesecretorii,sediferntiazaprinfaptul caincludenzimehidroliticespecificecelulelorincareseafla. UnexemplubunsuntceluleledeeliniaimunalimfociteleTcarecontininlumenullor lizozomicuenzimehidroliticespecificementinuteinactivedatoritapHului.Contin PERFORINA. Limfociteleseapropiedecelulatintasiisisecretaenzimelecaresuntinstantactivatede conditiiedemediu. (2) Lizozomiconventionali nuaufunctiasecretorie,oprezintadoarpeceadigestiva.Candcelulasedivide,fiecare celulafiicaesteprevazutacuunnumardelizozomi. Lizozomiiinteractioneazacumoleculeprovenitedinspatiulextrasiintracelularcaremai intaisuntprelucratedezasamblaresireciclare. Moleculeledinspatiulextracelular,lichidesauparticulemicisuntintroduseincelulaprin

endosaupinocitozasisuntacoperitedeunstratdeproteine(clatrina,coatomer, ceveolina)formandunendozomacestiafiindlarandulordemaimultefeluriprimarsi secundar.Particulelemaricumarfibacteriilesaudetritusuricelularesuntdigerateprin procesuldefacocitoza,cearecarezultateliberareaunuifagozom. Moleculeledinspatiulintracelularsuntdigeratesubformadeautofagozomivezicule responsabilededistrugereaunorstructurisauorganiteinutileinstructura celulara(organitedegradateinmitocondrisauribozomi) Lizozomiiinteractioneazacuendozomiisecundarisiproducendofagozomul,loculundese producedigestia. Tipuriledeinteractiunedintrelizozomisiendofagozomiisecundaripotfisistemtizatiastfel: (1)KissandRunlizozomulinteractioneazascurtcuendozomulsecundar,seproduceun schimbchimic,inendozomsepoateproducedigestia,iarlizozomulpoateplecamai departesainteractionezecualtiendozomisecundari. (2)Fusionlizozomulsiendozomulfuzioneazaproducandunorganismhibridincareare locdigestiaaminoaciziisialtimetabolitirezultatisunttrasnportatiincitosolpentruafi reutilizati.Inunelecazuriramaneunmicreziduupigmentarcareesteexocitatsiramanein celulapentrutotrestulvietiiorganismului. N.BModelulmaturariipresupuneainteractiuneaconsecutivaaunorendozomiprimari cualteveziculeintrecareaulocschimburi,panacandendozomulsematureazasidevine lizozom. N.B.2Lizozomiitertiarisuntlizozomiajunsiintrunstadiudeepuizareenzimatica, maeterialulcontinutnupoatefidegradatincontinuare.Semainumesccorpireziduali. Actiunealizozomilorsepoatesistematiza: (1)Autofagiedigestiacomponentelor,poatefidedouafeluri: i.MacrocomponentelecetrebuiefagocitatesuntacoperitedeunstratdeREN ii.Microfagocitozauneisingureproteine (2)Autolizaintervineinapoptoza (3)Heterofagiepentrumaterialecelulare (4)Crinofagiedigestiaprodusilordesecretieincelulelesecretoriiinvedereareglarii calitatiisicantitatii 59.Peroxizomul.Structurasiultrastructura. Peroxizomulesteunorganitcelularcesegasesteintoateceluleleeucariote,inconjuratdeo singuramembrana(unsingurbistratlipidic,nudeomembranadublaprecumceaa mitocondriei)cenucontineADNsauribozomi.Acestatrebuiesaisiimportetoate proteineleconstituentesiofaceprintrunmecanismdeimportselectiv. Mmembranacuunsgstrat AnuareADN Rnuareribozomi Eenzime Peroxizomiisuntunsediualultizariioxigenuluicecontinemulteenzime:DUR Daminoacidcatalaza uratoxidaza HMGCoAreductaza(tintastatinelorcurolinscadereacolesterolului)intro concentratiefoartemare.

UltrastructuraperoxizomilorexaminatlaMETrelevaomembranasimpladecca.6nm grosime,lainteriorulcareiraexistaomatricegranularaamorfasaufibrilara. Inaceastamatricesepoateobservauneori,unasaumaimultestructuricristaline inconjuratedematerialamorfmediuelectronodens.Acestestructurisuntdenumite cristaloiziconglomeratdeuratoxidazasegasesclainregnulanimal,darlipsescin peroxizomiiumani. 60.Biogenezasifunctiileperoxizomului. Functii Functiaperoxizomilorestedatadeenzimelepecarelecontin,cefaciliteazautilizarea oxigenuluicasubstratreducatoreioxideazaaltesubtraturilepreiauatomiide hidrogen,conformreactiei: RH2+O2>R+H2O2 Catalaza,enzimaperoxizomala,utilizeazaH2O2ulgeneratdealteenzimecasubstrat reducator,oxidandaltesubstraturi,jucandunrolindetoxifiere. H2O2+RH2>R+2H2O Sepoaterealizaoclasificareafunctiilor: (1)Reactiideoxidareaaltorsubstraturidetoxifiere (2)OxidareaexcesuluideacizigrasiculantlungdeatdeC,rezultandfragmentede cate2atdeC,caresuntfieconvertiteinacetilCoA,fiesuntexportatedinperoxizomisi folositelanoisintezedecompusicelulari. (3)DescompunereapurinelorAMP ,GMPcuformaredeaasiaciduric (4) Producsiexportaincitoplasmacolesterol (5) Sintezaplasmalogenicontinprimele2enzimenecesare.Plasmalogeniisunt fosfolipideconcentratelanivelulcorduluisiencefalului. Laplanteexistaglioxizomi,peroxizomispecializateceaucapacitateadeaproduceglucide dinlipidesiacizigrasi. Lainsectelicurici,intervininatragereaparteneruluiprinenzimaluciferaza. Peroxizomiisuntorganitecareseadapteazarepedemediuluiincareseafla,astaexplica heterogenitateastructuralaaperoxizomilordincadrulaceluiasiorganism. Biogeneza Ofunctieaperoxizomuluiceilincadreazalacategoriaorganismeautonomeste capacitateaacestuiadeasedivide,desinuposedmaterialgenetic.Deasemeneaposeda capacitateadeaprolifera,proliferareindusaindouafaze: (1)Prolifereazadinmuguripreexistenti (2)Crestereprinimportdeproteine Desisepoateautoreplicasiprezintafunctiadeproliferarenuesteunorganitautonom eldepindedeRENinanumitecircumstanteastfelelesteincadratincateogriaorganite semiautonome. Procesulesteputincunoscut,implicaformareabistratuluilipidicsiimportulproteinelorin bistrat.Exista3proteineimplicateinprocesuldeformarePEX3,PEX16,PEX19. 1.SeformeazaintaibistratullipidicsepresupunecaseformeazainREinaintedease importaproteinelePEXmaisusmentionate. 2.SeimportaPEX16,3,19ultimaesteabsolutnecesaragenezei.PEX11este modulatoareagenezeisipoatefiprodusasubactiuneastimulilorexterni.

3.ProteinelematriceiperoxizomalesuntsintetizatedinADNnuclearprinpoliribozomii citoplasmaticiliberi. ProteinelecontinsecventesemnalPTS1siPTS2cefolosescladirectionareaproteinelor spreperoxizom.peroxisomaltargetinsingal. 4.SecventelesemnalaleproteinelorseleagadeproteinelePEXsisunttransportatespre peroxizom. 5.Inperoxizomseelibereazaproteinelenoi,procesATPdependent.

61.Reticululendoplasmatic:definiie,forme Reprezintaunorganitdelimitatdeendomembrane,organizatsubformauneiretele decisternesi/sautubuli,cunumeroaseanastomoze,carepotprezentasaunupesuprafata citoplasmaticaribozomiatasati ZoneleorganizatesubformadecisteRneprezintaderegularibozomiatasatipe membranacitoplasmatticaaorganituluisifomeazaRER,iarzonelestructuratesubforma detubuli,cecontinuacisterneleREN RERsiRENsunt2formedeorganizarediferitaaleaceluiasiorganit PrincentrifugareseseparaimpreunacumembranacelularasicuapGolgiinfractia microzomala RER: biosintezadeproteinemembranaresiceledestinateexportului sortareasitransportullorspreapGolgi prelucrareaproteinelorsintetizateinRE REN: metabolizarealipidelor:biosinteaza,degradareasimodulareacompozitieilipidelor producerecolesteroldinacetilCoA,producereceramide; detoxifierecelulara depozitdinamicdeCa 62.Mecanismulprincarelanulpolipeptidicestetransferatdincitosolnreticulul endoplasmic PeptidulsemanlseaflalacapatulNterminal.Prezentaacestuiadesiestenecesara,nueste sisuficienta.AcestpeptidnuarereceptorlanivelulmembranarRE.Dinaceastacauza intervineparticuladerecunoastereasemnaluluiSRP .Aceastaarelauncapatunsitpt interactiuneacupeptidulsemnaldinlantulpolipeptidicsilacelalaltcapatunulptsitusula ribozomal.Acestcomplexoperational(lantpolipeptidicinsinteza+particulade recunoastereapeptiduluisemnal)transferamasinariaunuicomplexproteic transmembranardinmembranaREtranslocon.Acestcomplexareinstructurasauncanal hidrofil(porhidrofil)curoluldeatranslocapolipeptidulinlumenulRE,pemasura alungiriisale.OdatacupreluareaactiuniidecatretransloconSRPesteeliberatincitosol, iarsintezapoateastfelcontinua;acumsitusulAesteliberptapreluaARNtcorespunzator

codonuluicareurmeaza. Inconcluzieetapelesunt: 1. initiereasintezeiproteiceincitosol 2. aparitiapeptiduluisemnal 3. recunoastereapeptiduluisemnaldecatreSRP ,interactiuneadintreele,blocarea sintezeiprinocupareasitusuluiA 4. legareacomplexuluimacromolecularastfelformatlaSRPRreceptorulparticuleide recunoastereapeptiduluisemnallamembranaRE 5. interactiuneadintreSRPRsitransloconcutransferulcomplexului,legarea ribozomuluisideblocareasintezeiproteiceprineliberareaSRPincitosol 6. translocarealantuluipolipeptidic,pemasuracesealungeste,prinmembranaRE

63.Rolulreticululuiendoplasmicnbiosintezasiprelucrareaproteinelor Biosintezatuturorproteinelorincepeincitosol(exceptiecelecodificatedeADNul mitocondrial). Existaproteinedestinateexportuluisicelecaretrebuiesafunctionezecaproteinesolubile inlumenulRE,lizozomilorsaualcisternelorgolgiene. CeledinurmaauatasatpeptiduluisemnallacapatulCterminalosecventa consensrecunoscutadeohidrolazasemnalpeptidazacareeliminapeptidasemnal hidrofoba(carealtfelartineproteinainseratainbistratullipidic,caproteina transmembranaunipasdetipII),astfelareloceliberareaproteineiinlumenulRE. Inceeaceprivesteproteineletransmembranare,translocareaareunmecanism diferit.Intotdeauna,inserareaintransloconsefacecupartilepozitivedinlantul polipeptidiccatreversantulcitoplasmaticalmembraneiRE.Atuncicandaacusarcini pozitiveLys,ArgseaflaintrepeptidasemnalsicapatulNterminal,inserareaseface direct,astfelcapatulNramanandincitosolsiproteinarezultataesteunipas, tipII.CandaapozitiviseaflaintrepeptidasemnalsicapatulCterminal,translocarease faceinsensinvers,cucapatulNterminaldejaformatinlumenulRE,sicapatulCterminal incitosol.Proteineletransmembranaresuntproteinecarecontinmaimultiaahidrofobice ramanprinsiinbistratullipidic,strabatandul. UnrolimportantilausecventeleSTART/STOPTRANSFER.Starttransferesteo secventahidrofobacunumarfarasotinordineaaparitieiincursulsintezeisiinitiaza procesuldetranslocare.Stoptransfersuntsecventehidrofobecusotoprindtranslocarea. Secventelestopinchidporulhidrofilsiintrerupcomunicareadintreribozomsitranslocon, intipcesecventelestartdeschidporul. REnuareroldoarinbiosinteazalantuluipolipeptidicsieliberareasainlumen,sau inserareainmembrana,esteesentialsiinmodificareachimicaaunorresturideaasi asistareaimpachetariicorecte. Modificarilecotraducere oAuloclanivelultransloconului oInitiereaglicozilariiproteinelor InREesteinitiataformareastructurilorNglicozidice,pringrefareaderesturi

oligozaharidepeasparaginaaflatainsecventaconsens..AsnXSer(Thr)..Xoriceaauzual cuexceptiaprolinei.Oligozaharidtransferazagrefeazalaazotulamidicnoligozaharidcu structuraglobala(GlcNAc)2Man9Glc3sicuogeometrietriantenara2antenesetermina cuMan,ceadea3acu3glucozelegateunadealta.Enzimatransferaacestoligozaharidde peDOLICILDIFOSFOOLIGOZAHARID(segasesteinbistratullipidic).Enzima oligozaharidtransferazaesteindiferentalaaspcarenuseaflainaceastasecventa. oHidroxilarilanivelullantuluipolipeptidic Hidroxilarileprolineiinpozitia4silizineiinpozitia5sepetrecinproteineale matriceiextracelulare;exemple:Colagen,elastina oCarboxilareaaciduluiglutamicainpozitiagama Serealizeazadecatrecarboxilaza(proteinatransmembranara) exemple:proteinelecoagulariisilauneleproteinealematriceiosoase Modificariposttraducere oGlipiarea=ancorareaunorectoproteinelabistratullipidicprintroancora glicofosfatidilinozitolica. Seintalnestelanivelulproteineloracarorinserareintransloconsefaceinsensinvers. Ancorareasefaceprintrolegaturaamidica.Disribuireaacestorproteineseface preferentiallanivelulplutelorlipidice.Nusecunoastevaloareafunctionalaaacestui proces. oAsisteareaproteinelorptimpachetareacorecta Asistatadeproteinenumites(h)aperone(chaperone)mecanismulnuestecomplet elucidat. Calnexinaproteinasaperoncuactivitatelectinica.LeagastructurileNglicozidice careauramascuosinguraglucozadupatunderesimentineprecursoruldeglicoproteina legat.DesprindereadecalnexinasefaceprinactiuneaglicozidazeidinlumenulRE,doar duparealizaraeaplieriicorecte.Existalaacestniveloglucoziltransferazacareisiexercita activitateaincazulincareglucozaafostdesprinsatimpuriu,enzimarealizandinaceste conditii,reglucozilarea.Glucozanecesaraestefurnizatadecatre ARIDILDIFOSFOGLUCOZAsiasigurareatasareacalnexinei. InlumenulREavemunmediuasemanatorcuceicitoplasmaticcementineconditii oxidativefavorabilepuntilordisulfurice.Enzimaimplicatasenumesteproteindisulfura izomeraza.Aceastarealizeazapuntiinstructurapriteineinascandesaudesfacepuntile gresitstructuratesilereformeaza. S(h)aperonacucelmailargspectrudeactiuniesenumesteBiP(bindingprotein). Aceastadetinecontrolulinchideriisideschideriitransloconului,complexeazaproteinele translocatesileelibereazadoardupaimpachetareacorecta.Incazcontrat,proteina impachetatanecorespunzatorestecondusadeBiPlatranslocon,carelarandulrau elibereazalantulpolipeptidicincitosul,urmandcaaceastasafieetichetatacuUbipentrua fidegradatadeproteazomi. Desimecanismelenusuntcompletelucidate,secunoastecanecesauldeshaperone estefurnizatdatoritasemnalizariidinlumenulRE.Semnalulparcurceectodomeniul, fosforileazaendodomeniulsiactiveazaunsitenzimaticendonucleazicdelaultimulnivel. ArelocprelucrareaunuipreARNmexistentincitoplasma,caredupaeliminareaintronului devineARNmfunctional.Acestaestefolositptfurnizareaproteinelorshaperonprin mecanismulcunoscutbiosintezaproteinelor. 64.Rolulreticululuiendoplasmicnbiosintezalipidelormembranare REparticipalabiosintezatuturorlipidelormembranare

ColesterolulesteprodusdinacetilCoAcuajutorulenzimelor:HMG(3hidroxi3 metilglutaril)CoAreductaza,scualensintaza,sucualenoxidociclaza.Intermediar: lanosterolul Ceramidelecarevorfitransformateinsfingomielinesauglicolipidelanivelulaparatului Golgi Glicerofosfatidele.SuntsintetizateinfoitainternaaRE.ExemplificarepePC: oSeobtineacidfosfatidicdinacilCoAsiglicerol3P oSeeliminaPdinPA>DAG oSeadaugafosfocolinalanivelulDAG oPCvafitranslocatainfoitaexternacuajtorulflipazelor(marescfrecventamiscarilorflip flop) Aulocsiprocesededisproportionare(trecereaunuiglicerofosfatidinaltul): oPE>PC oExistaprocesedeconversieinambelesensuriintrePC,PEsiPS(PSseproducenumai prinacestmecanismlamamifere) 65.UltrastructuraaparatuluiGolgi. estedelimitatdeendomembranenrvariazaajungandpanala50inhepatocit. seprezintasubformauneistivede58cisternecurbatelocalizataperinuclear.Fiecare stivaare2fete: >ofatacis(convexa,deintrare,imatura)orientatespreREsinucleu,prezintaoreteade microvezicule(2080nm)cerealizeazacomunicarecuRER >ofatatrans(concava,deiesire,matura)orientatespremembranaplasmatica,prezinta unsistemDistributiaechipamentuluienzymatic:reteauasicisternelecisreducionii metalicicisternelemedieneactiunemonozidazicacisternetransprezintanucleozid difosfatazereteauatranscontinefisfatazaacidaptlizozo 66.PolarizareabiochimicaaaparatuluiGolgisisemnificatiaei. Fiecarestivadecisterna(ultrastructura)prezintaofatacis(deintrare)siunatrans(de iesire) PolaritateaaparatuluiGolgiesteatatmorfologica,catsibiochimica Fatacis: oConvexasiprezintaoreteademicrovezicule.EsteorientataspreREsisemainumestesi imatura.Aicisegasescenzimecuproprietateadeareduceionimetalici Fatatrans: oConcavasiprezintaoreteademacrovezicule.Esteorientataspremembranacelulara= fatamatura.Reteauatransareinalcatuirefosfatazaacida(enzimaspecificaptlizozomi) Modalitateaprincareaparatulgolgiisimentinepolaritateaafostexplicataprindoua modele:Modelultransportuluivezicularsimodelulmaturariicisternelor(spredeosebire deprimaincarecomplexultintaestetransportatintroveziculaindependenta,inacest modelintreagaveziculagolgianaevolueaza,sematureazadinsprefatacissprefatatrans. Procesularelocatatanterogradcatsiretrograd(delaapGolgilaRE) 67.FunciileaparatuluiGolgi 1.producereasfingolipidelor(prinmodificareaceramidelorproduseinRE)2.glicolizarea proteinelorprelucrareastructurilorNglicozidicecontinuareatunderiisiefectuarea

glicolizariiterminaleformareainintregimeastructurilorOglicozidiceinseratepeserina saustreonina3.producereaglicozaminglicanilor4.sulfatareaunorglucide(substratulde pecaresulfotransferazatransferasulfatuleste3fosfoadenozin5fosfosulfat)5.marcarea enzimelorlizozomale6.maturareaproteinelor(procescenecesitaatatmodificari enumeratela25catsiprelucrariproteolitice)7.sortareasitransportulmoleculelorcatre destinatiafinala:incelulasauinafaracelulei(prinexocitoza)8.biogenezasitraficul intracelularalmembranelor TransportulREGolgi implicaurmatoareleprocese: 1.SortarealanivelulelementelortranzitionalealeRE(cuparticipareaproteinelorde invelisCOPIIsiaproteineiGmonomericeSar1curolreglator) 2.TraficulcatreApGolgi 3.SortarelanivelulcomplexuluiGolgi(cuparticipateproteinelordeinvelisCOPIsia proteineiGmonomericeArf1curolreglator) 4.ReturullaRE(cureciclareaunorcomponente) Transportulrespectaunmechanismtipsuveicaceimplicaatatuntransportanterograd(de laRElaApGolgi)catsiuntransportretrograde(delaApGolgilaRE).Prezenta transportuluiretrogradsademonstratlaceluleletratatecubrefeldinaA,intrucatlaaceste celulesauregasitenzimegolgieneinREsianvelopanucleara.Rezultatelenupotfi explicatedecatacceptandcabrefeldinaAblocheazaspecifictransportulanterogradsica, drepturmare,aparatulGolgisevarsainREdatoritaunuitransportretrograd. Mecanismeleprincaretransportulsefacesuntdepartedeafielucidate,certestecael implica: 1.diferiteproteinedeinvelis(COPIIsiCOPI 2.reglatori(proteinelemonomericeG) 3.structuriintermediare(ERGIC/VTC) TransportulGolgimembranacelulara. 1.TrafictransApGolgiMembranaapicala Mecanismelesortarii:mecanismeceimplicastrglucidicedinglucolipidesiglicoproteine depefataluminalaaorganitului mecanismeceimplicastructuridetipplutalipidica Transportulelementelorrezultateprinsortareimplicaunrnecanismcooperativ.care foloseste initialrutarnicrotubulilor,apoirutafllamentelordeactina. Microtubuliicetrecpelangacisternelegolgisuntorientatecucapul()catremembrane apicalastrabatandpartialtesaturadefilamentedeactina. Veziculelefolosescinitialproteinemotoaredinfamilia dyneinelorptasedeplasacatre capul()almicrotubulilorapoicandajunglafilamenteledeactinafolosescproteine motor,miozinaIcuajutorulcareiasedeplaseazadealungulacestorfilamente.Ajungand lanivelulmembraneapicalemembraneveziculelorfuzioneazacumembranecelulara marinduIsuprafata. 2.TrafictransApGolgiMembranabazolaterala Sortare:prinmotivedeaminoacizi

Transport:totpecaleamicrotubulilorinsacatrecapul(+)prinfolosirea kinezinelor (proteinelemotor) Reglareamecanismelordeselectie,sortaresivezicularesefaceprinproteineleG monomerice. 68.Ciclulsecretor. Esteunprocesceimplicaurmatoareleetape: a)Biosintezemoleculelor/macromoleculelordesecretie b)Prelucrarea,maturarea,sortareasiveziculareaacestora c)Secretiapropriuzisa(detaliatainsubiectulurmator) Primeledouaetapecuprindosintezaosubiectelor5056. Dementionatestefaptulcademulteoriincazulprodusilordesecretiematurareaimplica hidrolizaunorprosaupreprocomponente.Exemplu:insulina Adeseacontinutulveziculelordesecretiesuferaunprocesdecondensare Directionareaveziculelor/vacuolelorspremembranasefaceprinfolosireaproteinelor (SNARE) PentrudomnulLeabuarmaifideprecizatfaptulcatermenuldeciclusecretornuestecel optimdefolositaici,cica,maicorectarfitermenuldecalesecretorie,deoarecetermenul decicluimplicareciclarialeunorcomponente,fenomendesprecarenuavemdovezi suficientepentrualsustine. 69.Biogenezalizozomilor Biogenezalizozomuluiimplicabiosinteazaproteinlorceapartinlizozomului,proteinelor structuraledinmembranasa,darsiproteinenzimelorpecarelecontinesicareiiasigura functiahidrolitica.AcestabiogenezapresupuneactivitateaREprimulpasinsintezasia aparatuluiGolgicontinuareamaturariisisortare,intrecareserealizeazaocomunicare precisaavandcarezultatexportulproteinlorlizozomalecatrelizozom. Proteinelemembranareptorezistentadeosebitasuferaprocesuldeglicozilareextensiva, peptidulsemnaldelacapatulNterminatesteclivatsiastfelsedesfasoaraNglicozilareain lumenulRE. LanivelulaparatuluiGolgiserealizeazamarcareaenzimelorcesuntdestinatetransportului catrelizozom,acestapresupuneadaugareaunuirestdeM6P ,indouaetape: (1)LanivlelulcisGolgi,structurileajunsedelaREpoartastructurioligozaharidiceN glicozidice.Lacelputinomanozadinstructuralantului,laC6alacesteiaseadaugaoN acetilglucozaminaimpreunacuunP ,acesteconstituindastfelstructuraM6PNacetil glucozaminaultimaportiunefiinduncapacel. (2)LanivelultransGolgiprintrunmecanimsneelucidatcompletsepierdecapacelulde Nacetilglucozamina,ramanandliberrestuldeM6P . Ulterior,totlanivelgolgian,structuraseaglomereazaintrosinguraveziculacepoartaun invelisdeclatrina.Odataceveziculaestematuraacestaesteexocitatadinaparatul Golgiincitosol,procesinurmacaruiaisipierdeinvelisuldeclatrina. Veziculaexocitatafarainvelisdeclatrinasevanumilizozomprimar.

Lizozomiiprimarifuzioneazaacumcuendozomiitarziiproducandlizozomisecundari sau,fuzioneazaculizozomisecundaridejaexsitenti. LanivelulreteleitransGolgisegasesteoenzimalizozomalafosfatazaacidafaptce dovedestebiosintezaenzimeinformaactiva,insaacestanufunctioneazabiochimicdecatla unpHmaiscazutprecumesteinlizozom. 70.Exocitoza:definiie,tipurideexocitoz. Exocitozareprezintaprocesuldeeliminareaunorprodusidesecretieinspatiulextracelular prinintermediulfuzionariiveziculelorcecontinmaterialuldeinterescumembrana celulara. Secunoscdouaastfeldecai: a)Caleadesecretieconstitutiva a.Opereazaintoatetipuriledecelule b.Arelocconcomitentcutraficulnoilorsuprafetedemembrananecesareptainlocui componentenefunctionalesauptasatisfacenevoiledecrestere.Acestlucrunecesitasi dezvoltareamatriceiextracelulare,faptptcaresesecretasicomponentealeacesteia b)Caleadesecretiesemnalizata a.Este,deregula,specificacelulelorspecializateinsecretie. b.Produsiidesecretiesuntstocatiinveziculeaflatelangamembranacelulara,ceasteaptaa fiexocitatedupaprimireaunuisemnal. c.DemulteoriacestsemnalestereprezentatdecrestereaconcentratieicitosolicedeCa,ca urmarealegariiunuimesagerprimarlaunreceporspecificdinmembranacelulei respective. Dementionatarmaififaptulca,inunelesituatii,maturareamoleculelorsecretateareloc exactinmomentulexocitarii.Exemplu:colagenultipI(dacasarmaturaininteriorul celuleisarintegrainstructurileeiintracelulare,determinandsituatiipatologice. 71.Mitocondria:aspectulMOsiultrastructura HEhematoxilinafericaRegaud VEverdesmarald Rrodamina123 FLUfluorescenta/microscopiedefluorescenta CONmicroscopieconfocala Iinalt Vvoltaj Emicroscopieelectronica Cclasica MO: preparatehistologicepermanentehematoxilinafericaRegaud:structuri granulare~scame,firedeata verdedeJanusBpatrundeinmitocondriesiesteoxidatsievidentiaza mitocondriaVERDESMARALD rodamina123devinefluorescentaprinoxidareintramitocondriala microscopiadefluorescenta+microscopiaconfocala;evidentiazamorfologia labirintica,inretelata Ultrastructura:

membranamitocondrialaexternatrilaminata membranamitocondrialainternatrilaminata,falduri=CRISTE Cristelediferadelaocelulalaaltasisuntde3tipuri: perpendicularesauparalelecuaxullungalorganitului tubulare(cusectiunecircularasautriunghiulara)Ex:CELULESECRETOAREDEHH. TIROIDIENI Estealcatuitadincompartimentulexternintermembranarsicompartimentulintern. UltimulcontineribozomimitocondrialisiADNmitocondrial,componentecurolimportant inobtinereadeATP . Microscopiadeinaltvoltajevidentiazaunaspectprelungadesearamificatsicu ajutorulsausaconstatatcanrmitocondriilorestemultmairedusdecatavemtentintasa credem. Microscopiaelectronicaclasicapermitestudiuldesectiuniinseriate. 73.Functiilemembraneimitocondrialeexternesiaspatiuluiintermembranar Inceeaceprivesteorganizarea,mbmitextrespectamodelulmozaiculuifluidcu structuriparticularecedefinescporinele,astefelsecaracterizeazapermeabilitatea deosebitadelaacestnivel.Moleculeledepanala5000Daparcurgprinintermediul membraneiexternedrumuldelacitosolcatrecompartimentulextern. Functii: realizeazapreluareaacizilorgrasidepetransportoriiproteicidincitosolsiesterificarealor laacilCoAsubactiuneaacilCoAsintazei.AcilCoAestetranslocatapeversantul intermembranarundedevineacilcarnitinasubactiuneacarnitinaciltransferazei. Compusulestepreluatdemembranamitocondrialainternasiapoidematrice.Aceste fenomeneaufoststudiatelanivelulmiocardiocitelor. producedeaminareaoxidativaaaminelorbiogene,subactiuneamonoaminoxidazei. Asfelarelocinactivareaepinefrinei,norepinefrinei,dopaminei,dupacareurmeaza eliminareametabolitilorsubformadeurina. MONOAMINOXIDAZAENZIMAMARKERptmbmitext(seafladoarlaacestnivel) Functiilecompatimentuluiextern: compartimenttamponintrecitosolsimioplast,arerolinmentinereaunuiclimatoptimpt activitateamioplastului permeabilitatecrescuta~membranaexterna ADENILATKINAZA: ATP+AMP=2ADP utilizeazaomoleculadeprodusfinitptaobtine2desubstrat;secreazapremiseleobtinerii a2moleculedeATP ,princonsumuluneiasingure NUCLEOZIDFOSFOKINZEtransformanucleozideleinnucleotide obtinereadiversitatiicompusilormacroergici 74.Organizareamolecularasifunctiilematriceimitocondriale Inmatricesegasesccomponentelenecesarereplicarii,transcrieriisitrauducerii propriuluiADN.Existalaacestenivelsirobozomiimitocondrialiceseaseamanaca dimensiunecuceiprocariotici,diferitideceicitosolici. betaoxidareaacizilorgrasidincarerezultaacetilCoA,implicataulteriorinciclu Krebs/ciclulaciduluicitric/acizilortricarboxilici.Toateenzimeleacestuiciclusunt prezentalaacestnivelcuexceptiaSUCCINATDEHIDROGENAZEIcefacepartedin

membranamitinterna. AcetilCoanecesaracicluluiKrebsprovineatatdebetaoxidareaacizilorgrasicatsi dinprelucrareaoxidativaapiruvatuluidincitosol 3NAD++FAD=NADH+FADH2donoriideelectronidinlantultrasportordeelectroni cearelocinmembranamitocondrialainterna 72.Organizareamolecularasifunctiilemembraneimitocondrialeinterne Are2030%lipide+7080%proteine,faptcedovedesterolulmetabolicimportant. Datfiindfaptulcaptobunafunctionare,barieracedelimiteazamediulmecanismuluieste sieaimportanta,seaflalaacestnivelunfosfolipidcuhidrofobicitatecrescuta CARDIOLIPINA15% Fosforilareaoxidativa: descrisaprin5complexe,dintrecareprimele4apartinlantuluitransportorde electroni/respirator arelocpreluaredeelectronidelaFADH2siNADH,etapeleoxidoreducatoare,pomparea protonilordinmatricecatrecompartimentulmitocondrialextern,cedareaelectronilorcatre O2. doarI,III,IVpompeazaprotoni(complexedeconservareaaenergiei);IIdoarintroducin sistemelectroniidelaFADH2 ComplexulINADHdehidrogenaza 1centruflavinic 78centreFeS preiaedelaNADH,iisaracestedeenergie,prinetapeleoxidoreducatoarece implicacentrele,siiipredaCoQ(Ubi) energiarezultataestefolositaptpompareap+dinmatricecatrespatiul intermembranar ComplexulalIIleaSuccinatdehidrogenaza 1centruflavinic 3centreFeS(1atipic,3Fe4S) 1centruhemiccareestelocalizatintruncitocromdetipbprincareintreg complexulseinserapemembrana nupompeazae preiaedelaFADH2sicumacestiaauoenergiepreamaresuntpredatiCoQ ComplexulalIIIleacitocromilorbc1 1centruFeS(peproteinaFeSRIESKE) 3centrehemice(2pecitocromulb,1pec1) preiaelectroniidelaCoQ,lereduceenergiasiiipredacitC cuenergiarezultatapompeazap+dinmatricesprespatiulintermembranarin raportde1e:2p+ ComplexulalIVleacitocromiloraa3 2centrehemice 2centreCuunuldincele2,preiaedinamonte preiaedelacitC,lereduceenergiasiiiinserapeO2cuformaredeapa pompeazap+dinmatricecatrespatiulintermembranar prezinta2canaletransmembranareprincarepompoeazap+(1e:1p+);celedoua canalesenumescDrespectivKDcontineaspartat,KcontineLys;inzonamediana

aluiDseaflaunrestglutamat,consideratesentialinpompareaprotonilor. Cele3(I,III,IV)complexeconservatoaredeenergie+Vsunttransmembranare ComplexulVATPsintaza ATPsintazaareoarhitecturaasemanatoareunuibatdetoba(cap,gat,trunchi). Capulesteorientatcatrematrice,trunchiulestesituattransmembranarsigatulface legaturaintreele.CuajutotulMEprincolorareanegativaaparticulelorsubmitocondriale fragmenteveziculatedemembranamitocondrialainterna,intoarsapedosseevidentiaza prezentapeversantulmatricealalmembraneiinterne,aunorstructurivoluminoasesi sferice,atasatedemembrana.AcesteareprezintaF1cap+gat.F0trunchi,adica portiuneatransmembranara. F1estealcatuitadin5subunitati:alfa,beta,gama,delta,epsilon.Alfasibetapot leganucleotide.Betaareactivitateacatalitica. F0areuncanalprotonicprincareestedisipatgradientulrealizatdelantul respirator.AcestgradientreprezintafortamotricenecesaraproduceriiATPdinADP+ fosfat. DesiconsideramcaATPsintazaactionezacaoturbina,existadoveziexperimentalecearata castructuraglobularaacapuluiserotesteinraportcutrunchiul.Astfelsedescriu3pasi,a cate120degrade. Cei3heterodimerialfabetacarealcatuiesc3situsuriactivealecomponenteicataliticetrec prin3stari: deshisa:lipseinucleotiduluisifosfatuluiinsitusuriledelegare laxa:legareaADPsifosfatului stransa:legareaATP PiruvatulsifosfatulsuntpreluatidincompartimentulexternprinSIMPORTalaturide protoni. Antiport:ADPcatrematrice,ATPcatrecitosol 75.Biogenezamitocondriei,teoriaendosimbiotica TeoriaendosimbioticaafostemisademaibinedeunsecoldecatreRichard Altmann:acummilioanedeani,candatmosferaterestraisimodificaproprietatilefizico chimice,imbogatinduseinO2,ocelulaaerobaafostendocitatadeocelulaanaeroba, rezultatulsupravietuiriifindsimbioza. Argumentelecesustinteoria: PARCCiD prezentaporinelorinmbmitexterna(porineleaufostidentificateprimaoarala bacterii) mitocondriaareADNpropriu,circular,cumauprocariotele ribozomi70Slaprocariotesilamitocondrie cardiolipinaexistainmembranabacteriilorsiinmbmitint sintezaproteicasensibilalacloramfenicolsiinsensibilala CICLOHEXIMIDA,ARN polimerazasensibilalaRIMFAMICINA sepotDivide

76.Rolulmitocondriilorinapoptoza(Mecanismeleapopotozei) Apoptozareprezintamoarteacelularaprogramata,cejoacaunrolesentialinorganogeneza sireinnoireacelulara,ceaparainsasiincazuldetoriorarilorusoaredeordinexogen(cele greleproducnecroza). Caracteristicileapopotozeipotfirezumate: (1)SuntconsumatoaredeATP (2)Suntcontrolategenetic (3)Sepastreazaorganitele (4)Sepastreazaintegritateacelulara (5)Absentainflamatiei (6)Micsorarecelulara (8) Seformeazacorpuriapopototicedelimitatedemembranecepotfiusorfagocitate Celemaifrecventeanomaliiconstauinreducereadimensiunilor,cusporireadensitatii matricei,modificaredenumitaPICNOZAMITOCONDRIALA. Exista3caiceinteractioneazainmecanismulapoptotic: 1.Caleaextrinsecasebazeazapeexistentaasemnalelorexracelulareceseleagala membranacelularapeasanumitiDeathreceptorDR(ApartinfamilieiTNFR Tumornecrosisfactorreceptor)cecontinundomeniuintracelularnumitDeathdomain. LegareasemnaluluiinducetransformarilanivelulDeathdomainuluiconsecutivcu recrutarealanivelulacestuiaaprocaspazei8,care,prinactiuneaproteoliticaadomeniului producecaspaza8formaactiva.Aceastaactiveazalarandulsaualtecaspaze(cascada caspazelor),care,impreuna,actioneazaproteoliticasupraproteinelorintracelulare inducandapopotoza. Deasemenea,actioneazaasupreagelsolinei,careesteinstransalegaturacuactinadin matrixsicaurmare,schimbaformacelulei. Caspazeleactivateinteractioneazacufactorulinhibitoralcaspazelor(ICAD)siilinhiba, potentandastfelcascada. 2.Caleamitocondrialaactivataprinfactoriexogenispeciireactivealeoxigenului, cresteriale[Ca2+]intramitosolicsicaspaze. Rezultatulactivariiestedeschidereaunuiporlarginmembranamitocondrialainterna MPTPMitochondrialPermeabilityTransitionPore,urmatadeumflareacelulara,ruperea membraneiexternemitocondrialesieliberareacitocromuluiCincitosol. CitocromulCeliberatincitosol,seleagadeAPAFApoptoticproteaseactivatingfactor1si ATPsiformeazaostrucutura,7dintreacestestructurilegateintreele,formeazaun oligomersubformaderoatacuspitenumitapoptosom.Aceastastructuraleaga7molecule deprocaspaza9siformeazacaspaza9formaactiva,ceinduceapoptoza. 3.Caleanuclearasebazeazapeexistentauneiproteinenuclearetumorsuppressorp53 cedetecteazanepotriviriintrebazeleazotatelanivelulADNului. Incazuluneinepotriviriusoareseactiveazatranscrierea p21ceopresteciclulcelular (probabilpentrucorectare). IncazuluneieroriseverelanivelulADNuluip53isiautostimuleazapropriatrasncrieresi actioneazaconsecutivalaactivareafactorilorproapoptoticiBAXsiinactiveazafactorii antiapoptoticiBCL2. ModificareacantitativaBAX:BCL2activeazaMPTPdeclansandapoptozapecale

mitocondriala(2).Deasemenea,activeazafactoriiFasceactiveazacaleadescrisala punctul(1). Dereglarialemecanismuluiapopotozeiprovoacaimbatranirea,incapacitateaorganismului deascapadeceluleleafectatecrescandrisculdecancer.

77.Nucleulcelular:definitie,aspectMO,ME Nucleulmaiestedenumitcarioniesteformaiuneaceamaireprezentativaacelulei.Este unorganitcelularcumultiplefunciidifereniatinprocesulevolu iei i ncontinu perfecionareiorganizare. Nucleulestecomponentulsubcelularprezntdoarinceluleleeksinumaiininterfaza perioadadintredouadiviziunisuccesive. Nucleulestesediu: adnului,puratatorulinformatieigenetice,adicainformatiapebazacareiasesintetizeaza proteinele autoreplicariiadnului transcriptieimaesajuluigenetic,adicaasintezeiARNm; centruldecontrolsicomandaaceluleiek; LaMO nucleulestestudiatfolosindcolorantibaziciceamaifolositacoloratiefiindhemalaun eozina=>violet nucleulesteBAZOFIL Componentecerepotaparealegatedenucleusaupelangaacesta: membrananucleara(caredecelemaimulteorinuseobserva) laperiferieedelimdeinvelisnuclear cromatinabazofilagranule filamente blocuri innucleiinchisilaculoaresepotobservanucleoli>careexistaintotiinuclei cariolimfalichidulnuclearformatinmarepartedinproteine Nucleiieucromaticiauaspectveziculos,prezintagranulatiifinesiingeneralauaspect granularsaufibrilar. Nucleiitahicromaticisuntintensbazofili. Eucromatinacontineadenulcarepoatefipusinevidentprinurmatoarelemetode: reactiaFulgen:ANDrosuviolet reactiaBracket:verdemetilpironina=>ANDverde ARNrosu LaMEremarcamremarcam: nucleoplasmacarecuprindematriceanucleara heterocromatinaelectronodensasieucromatinaelectronoclara nucleolii membrananuclearcucisternelenuclearecareapareintreruptadinlocinlocde complexelepor Lamicroscopulcufluorescenta:DAPI4,6diamino2phenylindolANDulcapata fluorescentnucleuldevenindalbastru

78.Nucleulcelular:numar,forma,localizare Raspandire.Nucleulesteprezentintoateceluleleorganismuluiumancucatevaexceptii: hematiileadulte fibrelecristalinienesautrombocitele. Numar:deregulaocelulaunnucleu.Existainsacatevaexceptii: celulebinucleate:hepatocitelesiuniiganglionidinneuroniisimpatici celulecucatevazecidenuclei:osteoclastelesicelulelegiganteLanghanscareaparin tuberculoza celulecucatevasutedenuclei:fibramuscularstriata(40denucleipecm) Forma.Deobiceiformanucleuluiurmaresteformacelulei+>nucleulprezintaomare varietatedeforme: rotundovalarinceluleleizodiametrice(sferice,cuboide,poliedrice) alingitinceluleleinaltesaufuziforme turtitincelincareexistaacumularidematerial lobatinuneleleucocite inmuguritinmegacariociteetc.. Localizare;deobiceinucleulocupaopozitiecantralainnucleu,pozitiecepoatefisocotita strategicadpdvalroluluisau.Exceptii: nucleuexcentricincellulecareacumuleazaanumitematerialincitoplasma(cellule adipoasa,secretoaredemucusetc) nucleuplasatlaunireatreimiibazalecuceamijlocieincelulelesecretoareseroasedin pancreasulexocrinsiparotide. 79.Invelisulnuclear:definitie,organizare,ultrastructura Definitie Invelisulnuclearesteuncomplexmembranarcharacteristiccelulelorek.Elseparadoarin perioadainterfazicacontinutulnucleardecitoplasmasiimplicitcontroleazaschimburile dintrenucleusicitoplasma. Importanta:prezentainvelisuluinuclearsiprinintermediulacestuiaanucleuluiinsusica entitatesubcelularaindividualizataestetrasaturaesentialamorfologicacaredeosebesteek depk. Aparitiainevolutieainvelisuluicellularareprezentatunavantajdecisivprincreareaunui compartimentsubcelularseparatincareisiaresediuladnsiincaresedesfasoara autoreplicareasitranscriptia.Prinurmareacestaasigura binecunoscutastabilitate geneticamaimareaekinraportcupk. Ultrastructura Structurainvnuclearnuestemicroscopicaciultramicroscopica,acestafiindpreasubtireptr afiobsrevatalaMO. Pesectiunicoloratecuhemalauneozinasiexaminatelamoinvelisulnuclearaparecao liniedeculoarerosuviolaaceu.Inrealitategrosimeatotatalaainvelisuluinuclearfiindde cca400Ade5orisublimitaderezolutieamo. Ultrastructuralinvnuclearare2caracteristiciesentiale; estedublu(formardindoua membraneconcentrice)siprezintapori. Elementelecomponentealainvelisuluinuclear: membranenucleareintsiext spatiulperinuclear

porii materialulanular/anulii laminadensainterna A.Membraneleinvnuclear Mbext:esteincontactdirectcucitoplasmasipeeasepotatasaribozomi. Mbinterna:delimiteazacontinutulnuclear. Grosime.Ambelembaucca7080A Organizaresupramoleculara: celputinapparentambelembauoultrastructuraasemanatoarealtorcitomembranein sesnulcaapartrilaminatelaME fiecareestealcdin3straturi:unstartosmiofob(clarlafluxuldeelectroni)cuprinsintre2 straturiosmiofile(denselafluxuldeelcrtoni) B.Spatiulperinuclear(cisternperinucleara) Def:spatiulcareseparacele2mbaleinvnuclear Diametru:grosimeaspatiuluiperinuclearestede~200300A,variabildelaocellaaltasi inoarecaremasurachiarsiincaeeasicelula. Continutul:inspatiulperinuclearprinmetodeuzualedeinvestigarenusapututconfirma existentuneisubstructurimacromoleculare,daracestfaptnuinseamnacaestegol,fara matbiologic. C.Porii Def:Discontinuitatiinspatiulperinucleardatdefuzionareacelor2membrane. Importanta:rolulloresteessentialinrealizareaschimburilordintrenucleusicitoplasma,in primulrandpermitandtrecereaARNmdinnucleuincitoplasma Dimensiuni:diametrulcuprinsintre:3001000A,infctdetipulcellularsiorganism Forma:dupaultimelecercetariseconsideracaformaporilorarvariaintrecircularsi polygonal. Numarul:proportionalcuactivitateacelulei:cucatsintezadearnestemaimarecuatat celularespectivavaaveamaimultipori.Inmedieporiiocupacca1020%dininvelisul nuclear. D.Materialulanular(anulii) Termenuldematerialanulartinesainlocuiascatermenuldeannulusfolositinanii60. Def:formatiuniultrastructuraleatasatecircumferinteisauperimetruluiporilor.Acesta formeazaimpreunacuporulcomplexulpor. Componente: Matriceaanulara:(anululpropriuzis)esteunineldematerialdenslafluxuldeelctroni ,careseproecteazaatatpeversantulcitoplasmaticcatsipecelenucleoplasmice.Dpdv biochimicestealcdinproteinedeoarecedisparedupadigestiacutripsina. Maseleanulare(subanulii):suntinnumarde8substructuriaproximativsfericedispusein matriceaanulara.Fiecareareundiamde~200Asiodispozitiesimatricaradial. Diafragmul:uneorioblitereazaorificiulanular formatdintrunmatmaidensdecatmatriceacitoplasmaticasaudecatcarioplasma nuesteomembranadpdvultrastructuralsiprinurmareUNAREVALOARE FUNCTIONALA Granulacentrala:ocupauneoricentrulporului,cudiametrude100150A formaldatoritapozitieieistrategicaafostconsideratagardianulporului aceastanuarficonsideratastructurapermanentaciuncomplexArnproteinesurprinsin tranzitprinpor.

Materialulfibrilarreprezentatdefibreleceseancoreazapedeopartedemaseleanulare iarpedealtapartedegranulacentrala. E.Laminadensainterna Definitie:stratelectronoopacaplicatpefrontulnucleoplasmicalmbnucleareinterne ApareclarpeimgdeMEdupafizareacuGLUTARALDEHIDA Ultrastructura: grosimedecca200600Ainfunctiedetipulcellularsideprocedeuldefixarefolosit prezintaozonafingranularasaufinfibrilaralocalizataintrembinternaainvnuclearsi maselecromatinieneperiferice Compozitiabiochimicanuesteincacunoscuta. ROLUL:sepresupunecaaravealocdesuportptrmbnuclearinterna 80.Porulnuclear,transport(generalitati)amtartatacestsubiectmaisusla70.(in continuarevoiscriedincurs) Porulnuclearestezonadeintrerupereainvelisuluinuclear lanivelulsausegasestecomplexulpor rolregleazaschimburiledintrenucleusicitoplasama functioneazacaobarieraselectivainambelesensuri suntstructuridinamicecareparsidisparinsunctiedeactivitateacelulei innrde~30004000peunnucleu dimensiuni:10nminrepaus 25nminstareactiva(areloctransport) ComplexulPor structuraordonatacuaspectoctagonalvazutdesus formatdinurmatoarelestructuri: *anulsaumaseanularesubunitatiproteicea20nminnrde8(sunt8citoplasmaticese inserapecitoplasmasi8nuceloplasmiceceseinserepefibrilelenucleoplasmicesipeinelul nucleoplasmicformandCOSULETULFIBROSALPORULUI TRANSPORTULPRINPOR sefaceinambelesesurisiestede2tipuriACTIVSIPASIV *TPASIVtrecelemcudiametrefoartemici:ioniceNa+siK+,moleculecugreutate molecularmaimicade60deKDa:aanucleotideoligozaharide sefaceinfctdegradientuldeconcentratie sefaceprincanaleperiferice *TACTIVprinparteacentralaaporului molecmaimaride60dekDa necesitaenzymeptrtransport:6ATPaze vitezadetransportesteinversproportionalcudimensiunilemolecdetransportat(cucat moleculaemaimarecuatatransportuldecurgemaiincet) existaunimportsiunexportinambelesensuri: #TRANSPACTIVPTRIMPORT proteinenuclearecuafinitateptnucleu enzimenecesareptrreplicareaadn complexeribonucleoproteice complexeligandreceptorhormon factoriptrtranscriptie PROTEINELETREBUIESAAIBAINSTRUCTURALORSECVENTESEMNALDEADRESARE NUCLEARA(+LIZINASIARGININA).Proteineleputandfiliberelasuptafatasau

mascate.secventasemnalrecunoscutaincitoplasmadereceptoricareseapaseazala proteinaformanduncomplexdinfibrelecitoplasmatice=>POR Complexulsevadesfacesireceptorulserecicleaza. Ptrexportproceselesuntsimilar:ARNtARNmribozomi 81.Nucleolul:rol,compozitiechimica,evidentiereMO,ultrastructura Definitie: Formatiunecorpuscularaintranucleara,prezentanumaiininterfaza,acareifunctie principalaestebiogenezaribozomilor(cuexceptiaribozomilormitocondriali). Importanta Nucleolulareimportantavitalaptrcelula=>mutantiianucleolarinusuntviabili InabsentanucleoluluinuseformeazaribozomiprinurmareARNmsiARNtnutrecdin nucleuincitoplasasiesteblocatasintezaproteica. COMPOZITIECHIMICA PrincipalelecomponentechimicealenucleoluluisuntAND,ARNsiproteine,caresegasesc, infunctiedetipulcellularsidemomentulfunctionalinproportieaproximativade 3%,7%si90%dingreutateauscata. Microscopieoptica(structura) Coloratieuzualahemalauneozina:evidentiazanucleolulcauncorpusculbazofilmaiales innucleieucromatici(tipicceluleinervoase) ColoratiaFulgen:carepuneinevidentinmodselectivandulcolorandcromatinainrosu violaceu,permiteindividualoizareaunuicorpusculcromatinianatasatnucleolului asanumitaCROMATINAASOCIATANUCLEOLULUI Impregnarileargentice:auscosinevidentdouacomponenteinstructura nucleolului:nucleolema,formatiunefilamentoasarasucitacaunghem,siparsamorfa, fondulomogen(astructuratlamicroscopuloptic)incareestedispusanucelolema. MicroscopieelecrtomicaULTRASTRUCTURA NucleolulesteuncomponentsubcelularcareNUestedelimitatsiNUcontine citomembrane.Ultrastructuralinalcnucleoluluiintra4componente: a.parsfibrosa(componentafibrilara)formatadinfilamentede50A,grupateinpachetesi oranizateinretea. b.parsgranulose(componentagranulara)alcdingranulede150Adiametru,similardar Nuidenticecuribozomiidincitoplasma,ESTECOMPONENTANUCLEARADOMINANTA c.parscromosoma(componentacromozomala)alcdinfibrecomatiniene,este repartizatalaPERIFERIANUCLEOLULUI(cromatinaperinucleara)darpatrundesiin interiorsubformadebenzi(cromatinaintranucreara) d.parsamorfa(componentaastructurata)omogena,dedensitatemedielafluxulde electroni sediscutadacareprezintainmodrealocomponentanucleoluluisauestecariolimfacare umplespatiuldintrececelaltecomponentnucleolare Toatecele4componentenucleolarepotfidistinseinacelaisnucleolclarnumaiinCAZURI RARE.Raporturilecantitativesitopograficedintreacestecomponentevariazainraportcu tipulcelualarsiinmodspecialcumomentulfunctional. 82.Matriceanucleara:ultrastructura,roluri(astaetotceamgasit) Studiileprivindorganizareainternaanucleuluiauconduslaidentifiareauneiretelede naturaproteicanumitaMATRICENUCLEARAalcdinproteinenehistonicenumiteproteine

SCAFFOLD.Filamentelematriceinuclearesuntdispuseintroretea3dceformeazainint celuleiostructuracurolanalogcitoscheletului. Matriceanucelarareprezinrasediulunorproceseimpcumarfireplicareaandsiprocesare aarnheterogennucrelar(hnARN)precursorularnuluimesager. MacromolecdeANDsefixeazapeproteineleScaffodprinintremediulunorsecvente polinucleotidicedenumiteregiunideatasarelascaffold(SARscaffodassociatedregions) sauMARmatrixattachmentregions.DesirolulsecventelorSARnuestefbineprecizatse considereacaparticipalaorganizareacrzsireglareatranscrieriisireplicariiadn. 83.Cromatina:definitie,clasificare Definitie:cromatinasispatiileintercomatinieneaclatuiescimpreuna nucleoplasma(karioplasma),reprezentandmaterialulbiologicexranuclolarcontinutin interiorulinvelisuluinuclear. LaMOinurmacoloratiiloruzuale(HE)ininteriorulnucleuluiapareosubstantacumare afinitateptrcolorantiibazicicareafostdenumitaCROMATINA. Compozitiechimica: EstealcatuitainesentadinADNsihistone(proteinbazice) CROMATINASICRZREPREZINTA2FORMEDEORGANIZAREAACELUIASIMATERIAL GENETIV(AND): CROMATINA=FORMADEEXISTENTAACOMPLAXULUIANDHISTONEININTERFAZA CRZ=(CROMATINACONDENSATA)SUNTFORMEDEINALTAORGANIZAREA COMPLECXULUIANDHISTONEINTIMPULDIVIZIUNIIINDIRECTEMITOZEI Clasificare; Cromatinaseclasificain eucromatinaprezentainnuceliieucromatinici(veziculosi)caresuntdeobiceidetaliemare caresuntslabcromatici) *palidcolorata *crzdecondensati *fibredecromatinadespiralizate *activegenetic heterocromatinaprezentainnucleiheterocromatinici(tahicromatici)caresuntintens cromaticisidetaliemica. *segmentelecromozomialeramancondensate *inactivagenetic *estededouafeluriconstitutica facultativaautozomala gonozomala #Eucromatinacromatinamaiputincondensatesicaresecoloreazamaiputinintensdareste purtatoaredegenestructurael.Esteportiuneafunctionalactivaacromatinei,fiindcromatina pecaresefacetranscriptiasintezadeARNm. Heterocromatinasedistingdouatipuridecromatina;constistutivasifacultative HConstitutiva:estecromatinaconstantcondensataininterfaza,caresecoloreazafoarte intenscucolorantibazici.Estegeneticinactiva,nucontinegenestructuralesipeeanuse faceniciodatatranscriptie.Acetstipdecromatinacontinedpdvchimicaceltipdeand repetitivcarenuaresemnificatiademolecualfunctionaal HFacultativa:esteocromatinacarenuesteobligatoriucondensataininterfaza;contine genestructural,careinsasuntinactive,adicanusemaifacetranscriptie,desifiesafacut transcriptieintroperioadaanterioara,fiesevaputeafacetranscriptiedacasetransforma

temporarineucromatina. Celmaitipicexdeheterocronatinafacultativaestecromatinadesexsaucorpuscululbar. 84.Fibradecromatina.Histonesiproteinenehistonice,caracteregenerale,roluri Indiferentdacaesteeucromatinasauheterocromatina,constitutivasaufacultativa,din punctdevedereultrastructuralcromatinaaparealcatuitasubformadefibredecromatina cudiametrulde100A. Fibradecromatinalaranduleiestealcatuitadinnucleozomi. Structurafibreidecromatinaarelabazaounitaterepetitivanumitanucleozom,careesta alcdin8moleculedehistone.ANDulfacecate2turedesuperhelixinjurulfiecarui nucleozom.Nucleozomulestecompusdintrunmiezcarecontinecate2moleculede histoneH3siH4,invelisulacestuimiezfiindalcatuitdinaltehistoneH2AsiH2B.Legatura dintrenucleozomiesterealizataptinlinkeriformatidinANDcaretrecedelaunnucelozom laaltulsihistonaH1. Proteinelehistonicesuntbazicenumailaek.Sintetizateincitoplasamajunginnucleu printransportactiva(prinpori).Sunt5tipuriinfunctiedecontinutulinargininasi lizina;H1,H2a,H2B,H3siH4.Fiindincarcatepozitivseleagadegruparilafosfataleandului incarcatenegativ. H1specificitatedespecie aurolcheieinorganizareasifnctioanareacromatinei:mentinestructcomatinei,impiedica transcriereagenelorsispiralizareacrz H2a,H2b,H3siH4nuauspecificitatedespecie aurolstructuralformeazanucleozomii Proteinelenehistonice suntsintetizateincitoplasma suntacide segasescinnucleoplasma,nucleolsicromatina Rol:reglareactivitatesidiferentieregene and,arnpolimeraze enzimeceintervininacetilarea,metilarea,fosforilareanucleoproteinelor 85.Eucromatina Eucromatinareprezintmaterialulnormal,izopicnotic,de intorulinforma ieigenetice, cucomportamenttipicncazuldiviziuniicelulare(sespiralizeaz,secondenseaz,se decondenseazisecoloreaz).Larndulei,eucromatinaestededoutipuri: eucromatinaactivieucromatinapermisiv. EucromatinaactivconinegenelecevorfitranscrisenARNm. Eucromatinapermisivestereprezentatdeaceaporiunedineucromatin care devineactivdoardupceaccept(permite)semnaledeclanatoare(dincategoria hormonilor,enzimeloretc.).ProcesulautoreplicriisemiconservativeaADNului, nfazaS dincicluldiviziuniicelulare,ncepelaniveluleucromatinei.nconsecin,replicarea eucromatineiestemultmaitimpurie,ncomparaiecuceaaheterocromatinei.. 86.Heterocromatinaconstitutiva.Heterocromatinagonozomala Heterocromatinareprezintmaterialulunorregiuni(uneorialunor ntregi cromosomi)heteropicnotice,caracterizateprinstructur dens icompact ,inclusiv n telofaz,interfaziprofazatimpurie.Dinacestecauze,heterocromatinasecoloreaz intensiestevizibilininterfazacicluluicelular(nnucleiicelulelorninterfaz).

Zoneleheterocromaticesuntrspnditepentreagalungimeacromosomului,darmaiales njurulcentromerului,undeformeazheterocromatinacentromeric .Destuldefrecvent estelocalizatinapropiereaorganizatorilornucleolariisprecapetelecromosomilor.Cu aceastocaziesepoatemenionafaptulcnacestezonecromosomiale(heterocromatice) auloccelemaifrecventeruperialecromosomilor. Heterocromatinaestecomponentapreferenialacromosomilorsexuali iacelor suplimentari(cromosomiiB).Suntunelespecii(broateleestoase,uniiviermi)lacare ntregulsetcromosomialesteheterocromatic. ReplicareaADNului,nzoneleeucromaticeiheterocromatice,sedesfoarasincron. nceeacepriveteheterocromatina,ns,apariuneleaspectedeosebitdeinteresante.De pild,nstadiiletimpuriidedezvoltareembrionar,heterocromatinalipse te.Deci,ca oconcluziefireasc,sepoateacceptaceanusetransmitedelaogenera ielaalta,cise formeazntrunanumitstadiualontogeniei.Dupultimeleobservaiiiexperimente,se parecoriceregiuneacromosomuluipoatedeveni,launmomentdat,heterocromatic . n consecin,heterocromatinaieucromatinatrebuiescprivitenucaunitidistincte i discontinuealecromosomilor,cistrialecromatinei,dinamiceat tntimpctinspaiu. Suntiautoricareconsidercexistoheterocromatinnativ,reprezentat prinsegmentecromosomialeheterocromatinizate,ncdelanatereaorganismuluiio heterocromatinfuncional,careseindividualizeaztemporar. OaltclasificareatipurilordeheterocromatinafostpropusdeBrown, n1965. nconformitatecuaceastclasificare,heterocromatinapoatefiBiologieCelulara Constitutivifacultativ HeterocromatinaconstitutivesteidentificatncromosomulYdelaDrosophila melanogastersaudelaaltespeciiiarecatrsturdefinitoriefaptulc seconstituie nc delanceputulvieiiindividuluiirmnenaceaststare(geneticinactiv)petot parcursuldezvoltriiindividuale.Heterocromatinaconstitutivpoatefiprezent i nali cromosomi,fiindlocalizat(deobicei)deambeleprialecentromerului. Heterocromatinafacultativesteconsideratceadinunuldintreceidoicr omosomiX,delafemeleledemamiferedepild,caredevinegeneticinactiv ise evideniaznnucleulinterfazicsubformaunuicorpusculintenscolorat,cunoscutsub numeledecromatinsexualsaucorpusculBar,bastonauldetob(drumstick)etc. n acestcontext,unuldintrecromosomiiXdevinenefuncional,asigurnduseastfel egalitateantreceledousexe.Fenomenulestecunoscutsubnumeledecompensaiede doz. Importantestefaptulcheterocromatinafacultativarecapacit ireversibile, astfelnct,nmomentulncarecromosomulXinactivatdelafemelajungesfieunicul cromosomXdelamascul,eldevinefuncional.Dareldevineactiv i novululncare,din ntmplare,nimerete.Apoi,dacprinfecundarearespectivuluiovulseajungedinnoula unzigotfemel,iniial,acestavaaveaambiicromosomiXfunc ionali. nstadiulde blastocist,unuldintreeidevinenefuncionalcaptstatutuldecromatinsexual pentru ntregciclulontogenetic. Iniialseconsideraczoneleheterocromaticenuconingenefunc ionale.Dar,prin studiiefectuatepetomate,n1961,sademonstratcnheterocromatinexistgene funcionalenheterocromatinacentromeric. Heterocromatinapoateapreasupercondensat,nuneleregiunicromoso miale,cumestecazullaZeamays.Aiciaparunfeldenoduli,denumi iknobi, ncare

activitateagenicestecompletblocat.Numrulitopografiaknobilorsuntconstante pentruanumiicromosomi. Deocamdatnusecunoaterolulconcretalknobilorinicidacausaunugenecantonate peei.Suntdoar,presupunericuprivirelarolullor nproceseledegametogenez

You might also like