GENETIC UMAN

Concepte i aplicaii practice

Sub redacia: EMILIA SEVERIN

te de tes n i r p u C rine i refe t Interne

EMILIA SEVERIN CRENGUA ALBU ILEANA IOACHIM

GENETIC UMAN
Concepte i aplicaii practice

Descrierea CIP a Bibliotecii Naionale a Romniei SEVERIN, EMILIA MARIA Genetic uman: concepte i aplicaii practice / Emilia Maria Severin, Crengua Albu, Ileana Ioachim. - Bucureti: Scripta, 2002 p. ; cm. ISBN 973 - 8238 - 07 - 2 I. Albu, Crengua II. Ioachim, Ileana 575

GENETIC UMAN
Concepte i aplicaii practice

EMILIA SEVERIN

Profesor universitar
CRENGUA ALBU

Asistent universitar
ILEANA IOACHIM

Preparator universitar

Catedra de Genetic Uman Facultatea de Stomatologie UMF Carol Davila Bucureti

Bucureti, 2002

Editor coordonator: Nicolae Rau Tehnoredactare: Mariana Radu

Reproducerea, transmiterea sau difuzarea, sub orice form sau prin orice mijloace cunoscute sau viitoare, a textelor cuprinse n volumul de fa sunt permise numai cu acordul scris al Editurii SCRIPTA, care are toate drepturile rezervate.

Editura SCRIPTA, 2002 Calea Victoriei nr. 39A Bucureti

ISBN 973 - 8238 - 07 - 2

CUVNT NAINTE

Genetica uman este una dintre disciplinele fundamentale ale nvmntului medical din ntreaga lume. O disciplin de studiu care furnizeaz date pentru nelegerea biologiei speciei umane, att sub aspect normal, ct i patologic. Acumularea rapid a informaiilor din domeniul geneticii aduce beneficii importante umanitii prin numeroasele aplicaii practice ale conceptelor i principiilor genetice, cu precdere n medicina preventiv. Ar fi suficient s ne gndim la ambiiosul Proiect al Genomului uman, care i-a propus s descifreze secvena complet a ADN-ului uman i a adugat, n scurt timp, noi gene pe lista celor implicate n apariia unor boli umane. Un singur exemplu: descifrarea structurii i funciilor genelor care condiioneaz sinteza hemoglobinelor umane a clarificat etiologia i a facilitat diagnosticarea, terapia i profilaxia multor hemoglobinopatii letale. Studiul geneticii este complex, iar nelegerea conceptelor, principiilor, legilor i mecanismelor sale este, uneori, dificil din cauza multor date nc neclare sau controversate. Apariia acestei cri faciliteaz nelegerea, asimilarea i nvarea rapid a conceptelor i principiilor eseniale ale geneticii umane. Cartea realizeaz o sintez ntre datele geneticii clasice i ultimele informaii din domeniu, ntr-o form accesibil cititorului. Structura general a crii i succesiunea capitolelor iniiaz, treptat, cititorul i l ajut s descopere utilitatea informaiilor transmise n practica medical. Nu s-a omis nimic important din ceea ce nseamn primul nivel de nvare a geneticii umane n nvmntul medical universitar. Volumul de cunotine este perfect adaptat pentru studierea geneticii umane timp de un semestru, dup cum este prevzul n planul de nvmnt, att n Facultatea de Stomatologie, ct i n Facultatea de Medicin. Fiecare capitol al crii are incluse ntrebri recapitulative, teste i rspunsuri, necesare fixrii informaiilor i verificrii modului cum au fost reinute. n acelai timp, testele ofer posibilitatea cititorului s se autoevalueze. Cartea se adreseaz n primul rnd studenilor de la Facultatea de Stomatologie pentru c n exemplificarea conceptelor, principiilor i legilor ereditii s-au folosit preferenial caractere umane patologice care intereseaz viitorul medic stomatolog. Cartea se adreseaz, n egal msur, celor care doresc s se iniieze n acest domeniu sau s-i rennoiasc noiunile fundamentale de genetic uman. Prof. dr. Augustin MIHAI Decanul Facultii de Stomatologie UMF Carol Davila Bucureti aprilie 2002

CUPRINS
Cuvnt nainte C APITOLUL 7

1
9

Citogenetic uman

Cromozomii i cariotipul uman normal . . . (Emilia Severin) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .9

Morfologia cromozomilor umani . . . . . . . . . . . . .9 Numrul cromozomilor umani . . . . . . . . . . . . .10 Cariotipul uman normal . . . . . . . . . . . . . . . . . . .11 Identificarea cromozomilor umani . . . . . . . . . . .13 Simboluri folosite n nomenclatura citogenetic . . .15 Cariotipul uman standardizat . . . . . . . . . . . . . . .16 Indicaii pentru analiza cariotipului . . . . . . . . . .16 Lucrare practic individual . . . . . . . . . . . . . . . .18 Bibliografie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .19

Deleia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .38 Duplicaia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .38 Inversia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .40 Translocaia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .40 Cromozomi inelari . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .41 Izocromozomul . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .41 Cromozomi dicentrici . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .41 Mecanismul producerii aberaiilor structurale ale cromozomilor . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .41 Efectele fenotipice ale aberaiilor cromozomiale . .42 Bibliografie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .50 ntrebri recapitulative . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .50 Topic Test . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .50 Rspunsuri . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .54

C APITOLUL

2
55

Meioza i cromozomii meiotici umani (Emilia Severin) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .20

Meioza primar diviziunea reducional . . . . .20 Meioza secundar diviziunea ecvaional . . . .21 Protocolul de evideniere a fazelor meiozei la mamifere . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .23 Gametogeneza la om . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .23 Semnificaia meiozei . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .26 Bibliografie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .27

Ereditatea caracterelor umane

Legile mendeliene ale ereditii (Ileana Ioachim) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 56

Relaia genotip-fenotip . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .56 Legea 1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .59 Legea 2 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .61 Bibliografie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .64

Cromozomii sexului i cromatina sexual . . la om (Crengua Albu) . . . . . . . . . . . . . . . .28

Corpusculul sexual X . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .28 Protocolul de evideniere a apendicilor perinucleari n sngele periferic . . . . . . . . . . . . .30 Protocolul de evideniere a corpusculilor Barr n celulele mucoasei bucale . . . . . . . . . . . . . . . . . .31 Corpusculul sexual Y . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .32 Protocolul de evideniere a corpusculilor F n celulele mucoasei bucale . . . . . . . . . . . . . . . .32 Importana studiului corpusculilor sexuali X i Y .33 Bibliografie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .33

Modele de transmitere a caracterelor umane (Crengua Albu) . . . . . . . . . . . . . . .65

Ereditatea monogenic . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .65 Ereditatea autozomal dominant . . . . . . . . . . . .66 Ereditatea autozomal recesiv . . . . . . . . . . . . . .68 Ereditatea monogenic legat de sex . . . . . . . . .70 Ereditatea monogenic legat de cromozumul X 71 Ereditatea monogenic legat de cromozomul Y 75 Bibliografie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .76

Metoda arborelui genealogic (Crengua Albu) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 77

Material i metod . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .77 Ancheta medico-biologic familial . . . . . . . . . .77 ntocmirea arborelui genealogic . . . . . . . . . . . . .78 Analiza arborelui genealogic . . . . . . . . . . . . . . .79 Transmiterea genetic autozomal dominant . . .79 Transmiterea genetic autozomal recesiv . . . . .81 Transmiterea genetic recesiv legat de cromozomul X . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .82 Transmiterea genetic dominant legat de cromozomul X . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .83

Studiul anomaliilor cromozomiale la om (Emilia Severin) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .34

Anomalii cromozomiale numerice . . . . . . . . . . .34 Poliploidia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .34 Aneuploidia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .36 Mozaicul cromozomial . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .38 Anomalii cromozomiale de structur . . . . . . . . .38

CUPRINS
C APITOLUL

Transmiterea genetic legat de cromozomul Y . . .83 Importana studiului . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .84 Bibliografie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .84 Fi pentru boli genetice . . . . . . . . . . . . . . . . . .84

Integrarea cunotinelor genetice n practica medical 121

Consultaia genetic (Crengua Albu) . . . .121
Circumstanele n care se solicit consultaia genetic i sfatul genetic . . . . . . . . . . . . . . . . .122 Etapele i metodele consultaiei genetice . . . . .122 Implicaiile bioetice . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .127 Bibliografie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .128 ntrebri recapitulative . . . . . . . . . . . . . . . . . . .128

Caractere umane simple (mendeliene) (Emilia Severin) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .87

Caracterul de gusttor PTC . . . . . . . . . . . . . . . .87 Testarea strii de gusttor PTC . . . . . . . . . . . . . .87 Caracterul de gusttor PTC n populaiile umane 88 Caracterul de gusttor PTC ca marker genetic . .89 Factorul secretor (Se) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .89 Metode de determinare a fenotipului secretor sau nesecretor . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .89 Factorul secretor n populaiile umane . . . . . . . .90 Grupe sangvine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .91 Sistemul ABO . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .91 Metoda de determinare a grupei sangvine . . . . . .91 Importana cunoaterii grupei sangvine n sistemul ABO . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .92 Sistemul Rh . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .92 Metoda de determinare a factorului Rh . . . . . . . .93 Importana cunoaterii sistemului Rh . . . . . . . . .93 Sistemul de grup sangvin MNS . . . . . . . . . . . . .94 Metoda de determinare a grupei sangvine n sistemul MN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .95 Importana cunoaterii sistemului MNS . . . . . . .95 Sistemul hemoglobinelor . . . . . . . . . . . . . . . . . .95 Sistemul haptoglobinelor . . . . . . . . . . . . . . . . . .96 Bibliografie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .97

C APITOLUL

Genetica i evoluia populaiilor umane

129

Genetica populaiilor (Emilia Severin) . . .129

Frecvena alelelor i a genotipurilor . . . . . . . . .130 Echilibrul Hardy-Weinberg n cazul unei gene autozomale . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .131 Echilibrul Hardy-Weinberg n cazul alelelor codominante . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .132 Echilibrul Hardy-Weinberg n cazul genelor plasate pe gonozomi . . . . . . . . . . . . . .133 Echilibrul Hardy-Weinberg n cazul aleliei multiple (polialelia) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .134 Factorii care modific echilibrul Hardy-Weinberg . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .135 Aplicaiile echilibrului Hardy-Weinberg . . . . . .136 Bibliografie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .136

Caractere cefalometrice (Emilia Severin) . .100

Investigarea biometric . . . . . . . . . . . . . . . . . .100 Tipul constituional . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .100 Cefalometrie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .101 Diametre cefalice utilizate mai frecvent n practic . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .102 Calcularea indicilor cefalometrici . . . . . . . . . . .103 Clasificarea tipurilor de cap i fa . . . . . . . . . .103 Stabilirea simetriei feei i a tipului de profil facial . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .106 Alctuirea morfogramei . . . . . . . . . . . . . . . . . .108 Bibliografie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .109

Evoluia populaiilor umane (Emilia Severin) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .137

Caracteristicile evoluiei . . . . . . . . . . . . . . . . . .137 Dovezi ale evoluiei furnizate de paleoantropologie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .137 Evoluia aparatului dento-maxilar . . . . . . . . . . .141 Dovezi ale evoluiei furnizate de genetic . . . . .144 Diversitatea genetic uman . . . . . . . . . . . . . . .145 Bibliografie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .146 ntrebri recapitulative . . . . . . . . . . . . . . . . . . .147 Topic Test . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .147 Rspunsuri . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .148 Glosar . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .149 Index alfabetic . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .154 Anexe . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .157

Studiul dermatoglifelor (Crengua Albu) . . .110

Ereditatea dermatoglifelor . . . . . . . . . . . . . . . .110 Tehnica analizei dermatoglifelor . . . . . . . . . . .110 Analiza i interpretarea dermatoglifelor digito-palmare . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .111 Anomalii ale dermatoglifelor digito-palmare . .113 Importana studiului dermatoglifelor . . . . . . . . .114 Bibliografie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .114 ntrebri recapitulative . . . . . . . . . . . . . . . . . . .115 Topic Test . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .115 Rspunsuri . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .120

CITOGENETIC UMAN

Citogenetica este o ramur a geneticii care studiaz cromozomii, combinnd metode citologice i genetice. Prin studiul cromozomilor se nelege analiza numrului, structurii i comportamentului cromozomilor n timpul mitozei i meiozei, precum i a anomaliilor cromozomiale i a efectelor lor fenotipice.

TEME-CHEIE: Cromozomii i cariotipul uman normal; Meioza i cromozomii meiotici umani; Cromozomii sexului i cromatina sexual la om; Anomalii cromozomiale i efectele lor fenotipice; ntrebri recapitulative; Topic Test. LUCRAREA PRACTIC 1: Cromozomii i cariotipul uman normal
Obiectivele lucrrii:
nsuirea metodei de evideniere a cromozomilor umani; Recunoaterea cromozomilor dup morfologie i model de bandare; Alctuirea cariotipului uman.

Morfologia cromozomilor umani

O

Cromozomii sau corpusculii colorai (din gr. chroma=culoare; soma=corp): sunt prezeni n toate celulele nucleate; sunt purttori de informaie genetic (conin ADN); asigur continuitatea genetic ntre generaii (se transmit ca o unitate n timpul meiozei i transport informaia genetic);

10

CITOGENETIC UMAN

pot fi vizualizai microscopic, prin tehnici speciale de colorare, numai n perioada n care nucleul se divide, pentru c n acest moment cromozomii sunt contractai, ngroai i mult mai evideni dect n interfaza nuclear; de regul, cromozomii sunt analizai n metafaza mitotic, moment n care ating gradul maxim de condensare i colorare. O Cromozomul metafazic este format din dou cromatide ataate una de cealalt la nivelul centromerului. Centromerul este vizibil ca o constricie primar care mparte fiecare cromatid n dou brae: p braul scurt, deasupra centromerului, i q braul lung, sub centromer. Centromerul are o poziie constant pe cromozom i n funcie de aceasta cromozomii pot fi descrii ca: metacentrici centromerul este situat median; submetacentrici centromerul este situat mai aproape de unul dintre capetele cromozomului; acrocentrici centromerul este situat foarte aproape de unul dintre capetele cromozomului i telocentrici centromerul este situat chiar la captul cromozomului. Centromerul are un rol important n micarea cromozomilor n timpul diviziunii celulare. La extremitile cromatidelor se gsesc structuri terminale care le menin integritatea, numite telomere (din gr. telos=capt; meros=parte). Cromozomii difer ntre ei nu numai prin poziia centromerului, ci i prin prezena sau absena sateliilor. Satelitul cromozomial reprezint un segment cromozomial distal separat de braul cromozomului (de regul, braul p al cromozomilor acrocentrici) printr-un filament de cromatin numit constricie secundar (Fig. nr. 1.1.). METACENTRIC
bra scurt p

SUBMETACENTRIC

ACROCENTRIC
satelit constricie secundar centromer

bra lung q 18 21 17 3 Fig. nr. 1.1. Forma cromozomilor umani n funcie de poziia centromerului 22

Numrul cromozomilor umani

Numrul de cromozomi variaz de la o specie la alta, dar este constant n toate celulele unui organism i n toate celulele organismelor care aparin aceleiai specii. Pn n urm cu aproape o jumtate de veac se credea c omul are 48 de cromozomi n nucleul celulelor somatice. Perfecionarea tehnicilor de laborator de ctre Tjio i Levan a permis stabilirea cu exactitate a numrului de cromozomi abia n 1956: n nucleul celulei somatice se gsesc 46 de cromozomi; n nucleul celulei gametice exist doar 23 de cromozomi. Astfel, fiecare nucleu al unei celule somatice conine dou seturi de cromozomi: unul de origine matern i unul de origine patern, motiv pentru care celula somatic este numit celul diploid. Nucleul celulei gametice are un singur set de cromozomi, celula gametic fiind numit celul haploid.

GENETICA UMAN

11

22 de perechi de cromozomi sunt prezente la ambele sexe, fiind formate din cromozomi autozomi sau somatici, n timp ce o pereche se prezint n combinaie diferit la brbai i la femei, fiind numii gonozomi, heterozomi sau cromozomii sexului.

Cariotipul uman normal

Cariotipul (din gr. karyon=nucleu; typos=model) este complementul cromozomial sau numrul normal de cromozomi ai unei celule, ai unui individ sau ai unei specii. De regul, se refer la aranjarea cromozomilor dup criterii precise: mrime, poziia centromerului, constricii secundare, satelii, model de bandare. Fiecare specie are un cariotip caracteristic. Pentru studiul cromozomilor umani s-a folosit o diversitate de esuturi, dar mai frecvent se utilizeaz limfocitele din sngele periferic, celule din mduva osoas, fibroblaste din piele sau celule din lichidul amniotic. Sunt dificil de descris n detaliu fiecare material i metod folosite n laboratoarele de citogenetic, din cauza numrului limitat de pagini al unui manual de lucrri practice destinat studenilor. De aceea, vom descrie doar modul de efectuare a preparatelor cromozomiale cu care vor lucra studenii.
O

Protocolul de obinere a cromozomilor din limfocite umane: Materiale: 5-10 ml snge venos uman heparinizat; mediu de cultur, antibiotice, ser de viel; fitohemaglutinin (PHA); colcemid (derivat al colchicinei); soluie hipoton (KCl 0,075M); colorani: Giemsa (cel mai folosit colorant pentru analiza cromozomilor); fixator: 3 pri alcool metilic: 1 parte acid acetic glacial; flacoane de plastic pentru cultura celular, eprubete, lame; termostat, centrifug, frigider. Mod de lucru:
1. se recolteaz 5-10 ml de snge venos pe heparin (previne coagularea, care ar putea ngreuna separarea ulterioar a limfocitelor); 2. efectuarea culturii pe un mediu de cultur complet mbogit cu ser de viel i antibiotice n care se adaug fitohemaglutinin (substan mitogen care stimuleaz limfocitele T s se transforme blastic i s se divid); 3. incubare la 37C, n condiii sterile, timp de 72 de ore; 4. tratamentul cu colcemid dup 3 zile de proliferare celular activ se adaug n mediu de cultur colchicina (mpiedic formarea fusului de diviziune i oprete mitozele n metafaz); durata tratamentului este de 2 ore; 5. tratamentul hipotonic dup tratamentul cu colcemid, celulele centrifugate sunt transferate ntr-o soluie hipoton timp de 10 min.; n acest mod se provoac ocul hipotonic care servete la umflarea celulei, ruperea nucleilor i dispersarea cromozomilor metafazici (se evit suprapunerea cromozomilor); 6. fixarea se face cu scopul de a omor celulele i de a conserva componentele celulare; 7. efectuarea preparatelor cromozomiale pe lame degresate prin picurarea unei cantiti mici de suspensie celular cu ajutorul unei pipete Pasteur. Frotiurile se usuc la aer;

12

CITOGENETIC UMAN
8. Colorarea se poate face o colorare convenional (preparatele cromozomiale se in 7 min. ntr-un vas cu colorant Giemsa 5% ) sau o colorare difereniat n funcie de scopul propus; 9. Examinarea la microscop cu obiectivul cu imersie (100x); 10. Fotografierea metafazelor selectate; 11. Decuparea cromozomilor; 12. Aranjarea cromozomilor n cariotip se poate face manual, dar, recent, un computer ataat microscopului ordoneaz automat, n funcie de mrime i model de bandare, perechile de cromozomi (Fig. nr. 1.2.).

examinare la microscop i fotografierea metafazelor recoltare snge venos

colorare

efectuarea preparatelor prin picurarea de la distan pe lame

fixare

centrifugare (separare limfocite) cultur celular adugare de colchicin

oc hipotonic

centrifugare

Fig. nr. 1. 2. Tehnica de alctuire a cariotipului

ntr-o analiz citogenetic de rutin se examineaz 15-20 de plci metafazice. n practic, se fotografiaz cele mai bune metafaze (cromozomii nu sunt suprapui) i se decupeaz fiecare cromozom n parte. Cromozomii decupai se ordoneaz n perechi n funcie de anumite criterii i se aranjeaz apoi n cariotip, de la cei mai mari ctre cei mai mici. Pn n 1971, anul Conferinei de citogenetic de la Paris, cnd s-a stabilit un sistem standardizat de identificare a fiecrui cromozom, era dificil de recunoscut un anume cromozom numai dup lungime, poziia centromerului sau raportul braelor. Se utilizeaz: Indicele centromeric = p x 100 /p + q; Raportul braelor = q / p.

GENETICA UMAN

13

Identificarea cromozomilor umani bandarea cromozomilor

Tehnicile iniiale de colorare a cromozomilor au folosit colorantul Giemsa, care produce o colorare uniform a ntregului cromozom uman. n consecin, erau deseori, greu de identificat cromozomii cu forme i dimensiuni similare. Din 1970 s-au introdus noi metode de colorare difereniat a cromozomilor. S-a observat c regiunile cromozomiale fixeaz selectiv coloranii i c apare un model de benzi transversale, alternante, + colorate, unic pentru fiecare cromozom. Benzile intens colorate reprezint zone cromozomiale puternic condensate numite heterocromatin, iar benzile palid colorate reprezint zone cromozomiale mai slab condensate numite eucromatin. Numrul, mrimea, succesiunea i tipul de band sunt particulare pentru un cromozom i sunt identice pentru cromozomii omologi. Astfel, fiecare cromozom uman poate fi identificat i individualizat ntr-un mod sigur, nearbitrar. Benzile Q prima metod de bandare a cromozomilor a utilizat quinacrina , un colorant cu proprieti fluorescente. Preparatele cromozomiale colorate cu quinacrin sunt examinate la microscopul prevzut cu un dispozitiv special pentru fluorescen i vizualizare n lumin ultraviolet. Cromozomii apar difereniai longitudinal, avnd un model constant i caracteristic de benzi alternante mai mult sau mai puin fluorescente. n analizele citogenetice de rutin nu se folosete aceast metod pentru c preparatele nu pot fi conservate, fluorescena pierzndu-se dup scurt timp. Benzile G se obin prin deshidratare, tratarea preparatelor cromozomiale cu enzime proteolitice (tripsin) i colorare cu Giemsa. Apar benzi alternante, colorate i necolorate, ordonate ntr-un model similar bandrii Q: regiunile cromozomiale care apar fluorescente n bandarea Q sunt puternic colorate n bandarea G, iar regiunile ntunecate din bandarea Q apar necolorate n bandarea G. Folosirea acestei metode de bandare faciliteaz identificarea anomaliilor structurale ale cromozomilor. Un cariotip uman tipic pentru bandarea G este reprezentat n Fig. nr. 1.8. Acest sistem de bandare este cel mai utilizat n laboratoarele de citogenetic pentru c este uor de realizat, iar preparatele cromozomiale obinute astfel se pot pstra stabile mai mult timp. Benzile R se obin prin denaturarea termic a cromozomilor i colorarea cu Giemsa. Apare un model de benzi invers (Reverse Banding) modelelor Q i G. Bandarea permite evaluarea benzilor terminale care apar necolorate n bandarea G. Metodele de bandare care vor fi descrise n continuare au aplicaii mai limitate pentru c faciliteaz studierea n detaliu numai a anumitor regiuni cromozomiale, cum ar fi: centromere, telomere, satelii. Se numesc metode de bandare regional. Benzile C sunt utilizate pentru localizarea centromerilor i nu pentru identificarea cromozomilor. Benzile C se evideniaz prin tratarea preparatelor cromozomiale cu acizi i baze, incubare n soluie salin i colorare cu Giemsa. Cromozomii apar slab colorai, cu excepia regiunilor centromerice, care sunt intens colorate. Se mai observ benzi C n regiunile paracentromerice ale cromozomilor 1, 9 i 16, pe braele p ale acrocentricilor i n poriunea distal a braului q al cromozomului Y. Benzile T sunt utilizate pentru observarea extremitilor cromozomilor (telomerele). Se produc n condiii similare celor care determin benzile R. Benzile NOR (Nucleolar Organizer Regions) evideniaz organizatorii nucleolari, adic regiunile satelitice ale cromozomilor acrocentrici (perechile 13, 14, 15, 21 i 22). Se evideniaz prin tratarea preparatelor cromozomiale cu soluie de nitrat de argint.

14

CITOGENETIC UMAN

Tehnicile de bandare sunt utile nu numai pentru recunoaterea cromozomilor, ci i pentru identificarea unor regiuni cromozomiale care difer prin mrimea i intensitatea coloraiei de la un individ la altul. Acest polimorfism structural, cunoscut sub numele de heteromorfism cromozomial, este ereditar i respect un model simplu de transmitere, motiv pentru care este folosit ca marker genetic n studierea motenirii unui cromozom particular de la printe la copil. Aceste variante citogenetice sunt normale i implic secvene de ADN noncodificatoare asociate heterocromatinei. Tip de bandare Plac metafazic sau cariotip

Bandare G

Bandare G

Bandare R

Bandare Q

Bandare C

Bandare NOR

Fig. nr. 1.3. Modele de bandare a cromozomilor umani

GENETICA UMAN

15

Mai recent, cunotinele din domeniul geneticii moleculare au facilitat introducerea n citogenetic a unor tehnici mult mai performante prin care este posibil s localizm secvene specifice de ADN pe cromozomi dispersai. De exemplu, FISH (Fluorescence In Situ Hybridization) este o tehnic utilizat pentru a analiza o regiune cromozomial de interes. Sonde ADN marcate hibridizeaz cu cromozomi metafazici, prometafazici sau interfazici. Sonda ADN este specific unei regiuni cromozomiale datorit secvenei sale de nucleotide. n mod normal, analiza microscopic i vizualizarea n ultraviolete arat dou semnale fluorescente, cte unul pentru fiecare cromozom omolog al unei perechi din nucleul unei celule somatice. Dac pacientul prezint doar un singur semnal fluorescent nseamn c-i lipsete un cromozom din pereche sau dac apare un al treilea semnal nseamn c prezint un cromozom supranumerar n pereche (Fig. nr. 1.4.). Aceast tehnic este folosit mai mult pentru identificarea anomaliilor structurale care nu pot fi vzute prin bandarea G.

Fig. nr. 1. 4. Analiza citogenetic utiliznd FISH; diagnostic citogenetic: trisomie 21

Simboluri folosite n nomenclatura citogenetic

Apariia i dezvoltarea citogeneticii au impus introducerea unei nomenclaturi standardizate pentru caracterizarea cariotipului uman normal i patologic. Informaiile acumulate la numeroasele conferine internaionale dedicate cromozomilor umani au fost sintetizate de un Comitet permanent, care a stabilit i a publicat un sistem internaional de notare a termenilor citogenetici (International System of Human Chromosome Nomenclature), care ofer cercettorilor termeni i simboluri standardizate de descriere a cariotipului. Diagnosticul citogenetic stabilit ntr-un laborator din Romnia pentru un pacient poate fi citit i interpretat oriunde n lume pentru c se folosete un sistem comun de descriere a cariotipului. n Tabelul nr.1.1. sunt selectate cteva simboluri utilizate n citogenetica uman.

16

CITOGENETIC UMAN
Tabelul nr.1.1. Simboluri utilizate n nomenclatura citogenetic

Simboluri p q pter qter ter cen mat pat h s A-G 1-22 X,Y

Semnificaie braul scurt al cromozomului braul lung al cromozomului sfritul braului scurt sfritul braului lung terminal sau sfrit centromer origine matern origine patern constricie secundar satelit grupe cromozomiale numrul perechilor de autozomi umani cromozomii sexului la om (heterozomi)

Cariotipul uman standardizat

Fig nr. 1.6. prezint diagrama celor 22 de autozomi umani i a cromozomilor sexului X i Y bandai G, diagram utilizat ca model pentru alctuirea cariotipului. Fiecare cromozom este format din dou cromatide, iar fiecare cromatid are un bra p i unul q. Fiecare bra este divizat n regiuni i benzi. Regiunile i benzile fiecrui bra cromozomial sunt numerotate de la centromer ctre telomer. Regiunea adiacent centromerului este numerotat cu 1 pentru fiecare dintre brae i avansnd ctre telomer urmeaz regiunea 2, 3 etc. (Fig. nr. 1.5.). Prin acest sistem de numerotare se poate indica o anumit localizare pe cromozom. De exemplu: 2p16 semnific o anume localizare pe cromozomul 2, braul scurt, regiunea 1, banda 6. Cromozomii autozomi sunt aranjai n ordinea descresctoare a mrimii, iar cromozomii sexului sunt aezai separat, la sfritul diagramei. Autozomii numerotai de la 1 la 22 n ordinea descresctoare a mrimii sunt ordonai n 7 grupe: grupa A perechile de cromozomi 1, 2 i 3; grupa B perechile 4 i 5; grupa C perechile 6, 7, 8, 9, 10, 11 i 12; grupa D perechile 13, 14 i 15; grupa E 16, 17 i 18; grupa F perechile 19 i 20; grupa G perechile 21 i 22; iar gonozomii sunt aezai separat, la sfritul cariotipului.

Bra Regiune

Studiul cromozomilor umani poate fi util n mai multe situaii: Prenatal Banda 14q32 sarcin n cazul unei femei cu o vrst care Subbanda q32.3 depete 40 de ani; sexul ftului n cazul unor boli genetice legate de Fig. nr. 1.5. Cromozom metafazic uman. cromozomul X. Fiecare bra este subdivizat n regiuni i benzi.

Band

Indicaii pentru analiza cariotipului

GENETICA UMAN

17

benzi Q i G negative benzi variabile benzi Q i G pozitive

Fig. nr. 1.6. Distribuia benzilor cromozomiale Q i G

18

CITOGENETIC UMAN Neonatal moarte neonatal; malformaii congenitale; organe genitale ambigue; suspiciune de sindrom cromozomial. Adolescen amenoree primar, pubertate ntrziat; retard al creterii, statur mic. Adult infertilitate, avorturi spontane recurente; handicap mintal; anumite tulburri maligne (leucemie); screening n cazul persoanelor care au rude cu tulburri cromozomiale cunoscute.

Lucrare practic individual

Fiecare student primete o plac metafazic cu cromozomi bandai n tehnica G. Dup decuparea cromozomilor se vor recunoate perechile de cromozomi ca omologi dup dimensiune, poziia centromerului, constricii secundare, satelii i modelul de benzi. Apoi se vor aranja n ordinea descresctoare a mrimii, pe grupe, conform modelului standardizat. Cromozomii sexului se vor aranja separat pentru c difer la cele dou sexe i se vor lipi pe o foaie de hrtie notat ca n Fig. nr. 1.8. n final, rezultatul analizei cariotipului va indica n cifre numrul total de cromozomi i, dup o virgul, cei doi cromozomi ai sexului. Diagnosticul citogenetic poate fi: 46,xx - cariotip normal la femeie; 46,xy - cariotip normal la brbat.

Fig. nr. 1. 7. Clasic i modern n alctuirea cariotipului

GENETICA UMAN

19

Fi citogenetic
Nume: Alexandru Dobre Data naterii: 13 mai 1988 Adresa: Bucureti, strada Ceahlu, nr. 15, Bloc 74, Ap. 17 Diagnostic: Examinare preventiv Material: snge periferic Lama nr. B 32 / a

Cariotip: 46, xy Diagnostic citogenetic: normal Data: 16.03.2001

Fig. nr. 1.8. Cariotip uman tipic pentru bandarea G

Bibliografie 1. (2001) Human Cytogenetics: A Practical Approach 3rd. ed., vol. I, pg. 9-30. 2. Bickmore W. (1999) Chromosome Structural Analysis A practical Approach, Oxford, University Press, pg. 37-51. 3. Maroni G. (2001) Molecular and Genetic Analysis of Human Traits, Blackwell, pg. 125-131. 4. Mader S.S. (1991) Human Biology Laboratory Manual, 3 rd. ed., WCB, pg. 180-183.
O

Web site: http: //www.selu.com/bio/cyto/human/

20

CITOGENETIC UMAN

LUCRAREA PRACTIC 2: Meioza i cromozomii meiotici umani

Obiectivele lucrrii:
identificarea i descrierea fazelor meiozei umane; caracterizarea gametogenezei la brbat i la femeie; explicarea rolului meiozei n meninerea constant a numrului de cromozomi n succesiunea generaiilor i n crearea diversitii genetice la organismele care se reproduc sexuat. cromozom Meioza este un tip particular de diviziune omolog matern celule n celular, care are drept rezultat formarea de cromozom interfaza celule haploide din celule diploide (Fig. nr. 1.9.). omolog patern premeiotic Meioza intereseaz exclusiv organismele care se reproduc sexuat i care produc celule sexuale sau gamei. Gameii au un numr cromozomi haploid de cromozomi (n), astfel c, prin fecromatide omologi replicai cundare, se restabilete numrul diploid de cromozomi (2n) caracteristic speciei. Dac meioza nu ar avea loc, prin fecundaie, s-ar dubla numrul de cromozomi la fiecare generaie. sinapsis Meioza se realizeaz prin dou diviziuni nucleare succesive care preced formarea gameilor: prima diviziune meiotic (diviziunea reducional) i cea de-a doua diviziune meiotic (diviziunea ecvaional, similar mitozei). Meioza primar este precedat de interfaz, cnd n faza S ADN-ul se replic doar o dat, formndu-se cromatida sor a fiecrui cromozom i rezultnd cromozomi diviziune bicromatidici. La sfritul interfazei celula reducional este pregtit s intre n diviziune celular. O Meioza primar diviziunea reducional Prima diviziune meiotic, numit i diviziunea reducional, reduce numrul de cromozomi ai unei celule diploide (2n) la jumtate, rezultnd dou celule fiice haploide (n). Reducerea numrului de cromozomi se realizeaz prin separarea cromozomilor omologi i se desfoar n faze succesive (Fig. nr. 1.10.). profaza I este complex, de lung durat i este subdivizat n 5 stadii consecutive: 1. leptoten (gr. leptos=subire; tainia=panglic) stadiul n care cromatina nuclear ncepe s se condenseze, devine vizibil sub forma cromozomilor cu filamente subiri i lungi, cu aspect de reea.

GENETICA UMAN

21

2. zigoten (gr. zygotos=mpreunat) stadiul n care cromozomii omologi se asociaz ca bivaleni. Asocierea se realizeaz pe toat lungimea lor, de la telomer ctre centromer, ntr-o aliniere perfect, prin complexul sinaptonemal. 3. pahiten (gr. pachys=gros) stadiul n care cromozomii devin mai scuri i mai groi; fiecare cromozom este vizibil format din dou cromatide surori; fiecare bivalent fiind format din doi cromozomi bicromatidici omologi, apare o structur alctuit din patru cromatide, numit tetrad. ntre cromatidele non-surori ale bivalentului apar schimburi fizice reciproce de segmente cromatidice prin care se formeaz noi combinaii de gene n gamei. Procesul a fost numit crossing-over i reprezint una dintre sursele variabilitii umane. 4. diploten (gr. diploos=dublu) stadiul n care cromozomii continu s se contracte; ntre omologi apar fore de respingere; complexul sinaptonemal dispare, iar cromozomii unui bivalent ncep s se separe unul de altul, rmnnd nc unii la nivelul unor puncte de contact numite chiasmata (pluralul de la chiasma). Citologic, se observ c fiecare bivalent are patru cromatide. 5. diakinesis (gr. dia= divergent; kinesis=micare) stadiul n care cromozomii omologi continu s se separe, iar punctele de contact (chiasmata) sunt mpinse ctre extremitile bivalenilor (Fig. nr. 1.11.). prometafaza este o scurt faz, caracterizat prin dispariia membranei nucleare i a nucleolului i definitivarea formrii fusului de diviziune. metafaza I este faza urmtoare; n care bivalenii migreaz n zona ecuatorial a fusului de diviziune; cei doi centromeri ai unui bivalent sunt orientai spre polii opui ai fusului de diviziune. anafaza I se caracterizeaz prin dispariia chiasmatei i migrarea cromozomilor omologi spre polii opui ai celulei. Atenie! centromerii nu se divid, deci spre polii opui ai fusului migreaz doar jumtate din numrul iniial de cromozomi. Cromozomii omologi segreg independent, adic, se separ i se repartizeaz ntmpltor la polii opui ai celulei, indiferent de originea lor matern sau patern; n final, la fiecare pol al celulei exist cte un set haploid de cromozomi bicromatidici ntr-o combinaie variat de cromozomi materni i paterni. telofaza I ncepe n momentul n care cromozomii au ajuns la polii celulei. Cromozomii ncep s se despiralizeze i o nou membran nuclear se formeaz. Celulele fiice au un set haploid de cromozomi bicromatidici (cromatidele-surori difer una de cealalt ca rezultat al crossing-over-ului). Dup diviziunea nuclear urmeaz citokineza, care are ca rezultat divizarea citoplasmei.
O

Meioza secundar diviziunea ecvaional

Meioza secundar ncepe dup finalizarea meiozei primare i este similar unei mitoze obinuite: centromerii se divid, iar cromatidele-surori migreaz spre polii opui ai celulei. n mitoza obinuit, dintr-o celul-mam diploid rezult celulele-fiice diploide. n meioza secundar, regula se respect, celulele fiice au acelai numr de cromozomi ca i celulamam (diviziune ecvaional), dar n acest caz celula-mam este haploid (Fig. nr.1.10.). Meioza secundar se desfoar n faze succesive: interfaza II este foarte scurt i se deosebete de interfaza I prin faptul c nu are loc replicarea ADN-ului. profaza II ncepe prin condensarea filamentelor de cromatin i se ncheie cu dispariia membranei nucleare i formarea fusului de diviziune.

22

CITOGENETIC UMAN

MEIOZA PRIMAR PROFAZA I

Leptoten

Zigoten

Pahiten

Diploten

Diakinesis

Metafaza I

Anafaza I

Telofaza I

MEIOZA SECUNDAR
Profaza II Metafaza II Anafaza II Telofaza II

Fig. nr. 1.10. Meioza aspect celular

metafaza II se caracterizeaz prin dispunerea n planul ecuatorial al fusului de diviziune a cromozomilor. - anafaza II se caracterizeaz prin divizarea centromerilor, ceea ce permite separarea cromatidelor surori, care migreaz spre polii opui ai celulei. - telofaza II este iniiat n momentul n care cromozomii au ajuns la polii opui ai celulei. ncepe decondensarea cromozomilor i formarea noii membrane nucleare, care va separa fiecare set haploid de cromozomi. Urmeaz citokineza. n final, apar patru celule-fiice, haploide, cu cromozomi monoFig. nr. 1.11. Diakineza la brbat cromatidici recombinai.

GENETICA UMAN

23

Diviziunea meiotic la mamifere are loc numai n gonade. De regul, studiul diferitelor faze ale meiozei se face pe preparate din esut gonadal matur obinut prin biopsie testicular. Testiculele sunt mai accesibile pentru biopsie comparativ cu ovarele, iar profaza primei diviziuni meiotice la sexul feminin ncepe n perioada embrionar. O Protocolul de evideniere a fazelor meiozei la mamifere Materiale: masculi de oareci sau obolani albi; foarfeci, pense, ace, vase Petri, eprubete, lame de sticl, centrifug; eter etilic, alcool metilic, acid acetic glacial, soluie hipoton de citrat de Na 2,2%, soluie Giemsa 10%. Mod de lucru (se folosete o variant rapid a metodei Evans i colab., 1964):
1. animalele se injecteaz intraperitoneal cu o soluie de colchicin 0,05%; 2. dup 90 de min., animalele se anesteziaz cu eter etilic, se sacrific i se recolteaz testiculele; 3. testiculele recoltate se introduc 10 min. n ap distilat ntr-un vas Petri i se fragmenteaz n buci mici; 4. se nltur apa distilat, se adaug soluia hipoton de citrat de sodiu i se las n contact 20-30 de min.; 5. coninutul vasului Petri este transferat ntr-o eprubet de centrifug i se centrifugheaz 5 min. la 500 rotaii/min.; 6. se ndeprteaz supernatantul, iar sedimentul se resuspend n 5 ml de citrat de Na; 7. se centrifugheaz 12 min. la 800 rotaii/min.; 8. se arunc supernatantul i peste sedimentul celular se adaug ncet, picurnd uor pe marginea eprubetei, fixatorul (alcool metilic i acid acetic glacial, 3:1); 9. se las la fixat 5 min.; 10. se centrifugheaz 10 min. la 1 000 rotaii/min.; 11. se arunc supernatantul i se resuspend sedimentul n 5 ml fixator proaspt, lsndu-se la temperatura camerei 30 de min.; 12. se centrifugheaz din nou 10 min. la 1 000 rotaii/min., iar sedimentul se resuspend n 1 ml de fixator; 13. din suspensia celular se efectueaz preparate punnd cteva picturi cu pipeta Pasteur pe o lam curat i degresat; 14. preparatele se usuc la aer i se coloreaz cu soluie Giemsa 10% timp de 20 de min.; 15. se examineaz la microscop cu ob.100X cu imersie.

Gametogeneza la om
Celulele epiteliului germinal al gonadelor masculine i feminine sufer o succesiune de diviziuni mitotice i meiotice n scopul producerii de gamei maturi. Gametogeneza se produce n urmtoarele stadii: 1.stadiul de multiplicare celular celulele germinale primitive (2n) sufer mitoze succesive care produc la brbat, spermatogoniile (2n) i la femeie, ovogoniile (2n); 2.stadiul de cretere care pregtete goniile pentru meioz formnd spermatocitele (2n) i ovocitele (2n) primare; 3.stadiul de maturaie, n care spermatocitele i ovocitele primare sufer dou diviziuni succesive una reducional i una ecvaional urmate de diferenierea celulei haploide i formarea gameilor maturi.

24

CITOGENETIC UMAN
SPERMATOGENEZA celul germinal primordial 2n faza de multiplicare 2n (mitoze) OVOGENEZA celul germinal primordial 2n

2n 2n 2n 2n
ovogonie

2n 2n 2n 2n

2n 2n

2n

spermatogonia 2n 2n 2n 2n 2n 2n 2n 2n faza de cretere spermatocit primar cretere

2n 2n 2n 2n 2n 2n 2n 2n
cretere

2n

ovocit primar

2n
prima diviziune meiotic

faza de maturaie (meioz) prima diviziune meiotic spermatocit secundar

n
a doua diviziune meiotic

ovocit secundar

n
a doua diviziune meiotic

primul n globul polar

spermatide n

n
difereniere

n
ovul

n
al doilea globul polar

n
globuli polari

spermatozoizi

Fig. nr. 1.12. Gametogeneza uman

O

Spermatogeneza

spermatogeneza este procesul de formare a gameilor masculini; la pubertate, testiculele ncep s secrete cantiti mari de testosteron. Testosteronul stimuleaz dezvoltarea unor caractere sexuale secundare, maturarea tubilor seminiferi i iniierea spermatogenezei. n tubii seminiferi, celulele germinale primordiale se divid mitotic i apoi se difereniaz n spermatogonii. Dup mai multe mitoze , spermatogonia produce spermatocitul primar. Spermatocitul primar (46,XY) sufer prima diviziune de maturaie (meioza primar) i produce dou celule haploide numite spermatocite secundare (una 23,X i cealalt 23,Y), care sufer cea de-a doua diviziune de maturaie (meioza secundar) i formeaz patru celule haploide numite spermatide. Spermatidele sufer o serie de transformri complexe, devenind spermatozoizi. Procesul se numete spermiogenez. n Fig. nr. 1.12. este prezentat gametogeneza la brbat.

GENETICA UMAN

25

spermatogeneza se desfoar continuu, de la pubertate pn la moarte, dar rata produciei de gamei scade o dat cu naintarea n vrst; fiecare ciclu al spermatogenezei dureaz aproximativ 64 de zile: 16 zile mitozele spermatogoniilor, 8 zile meioza primar a spermatocitului primar, 16 zile meioza secundar a spermatocitului secundar i circa 24 de zile spermiogeneza; numrul mare de replicri care preced mitozele succesive ale celulei germinale primordiale crete riscul de apariie a mutaiilor n gamei.
O

Ovogeneza

ovogeneza este procesul de formare i dezvoltare a ovulului, care include meioza ovocitelor, vitelogeneza i formarea membranelor ovulului; ncepe n perioada intrauterin, cnd ovarul nu este nc difereniat; celulele germinale primitive se divid mitotic de mai multe ori, formnd ovogoniile; dup a 12-a sptmn de via intrauterin, ovogoniile se divid mitotic i formeaz ovocitele primare; o parte dintre acestea ncep diviziunea de maturaie, dar se opresc n profaza primei diviziuni meiotice pentru o lung perioad, care dureaz pn la ovulaie (poate avea loc oricnd, de la pubertate i pn la menopauz); stadiul n care rmn se numete dictioten (ntre diploten i diakinesis), fiind caracterizat prin prezena bivalenilor ai cror cromozomi sunt parial condensai; ovocitul primar este acoperit de un strat de celule foliculare, constituind foliculul primordial; majoritatea foliculilor primordiali degenereaz i numai puini se vor matura; la pubertate, lunar, o parte din ovocitele primare iniiaz procesul de difereniere , dar, de regul, numai una va deveni ovul matur; puin nainte de ovulaie este definitivat prima diviziune meiotic, rezultnd celule-fiice, diferite prin cantitatea citoplasmatic pe care o conin ovocitul secundar (23,X) i primul globul polar (23,X); n momentul expulziei, ovocitul secundar se gsete n metafaza II; a doua diviziune meiotic este finalizat n trompa lui Fallopio numai dac are loc fecundaia; rezult ovulul matur i cel de al doilea globul polar (Fig. nr. 1.12.); ovogeneza este discontinu, ncepe n viaa fetal, urmeaz un stadiu de laten pn la ovulaiile din perioada fertil a femeii; durata mare a stadiului de laten poate crete riscul de nondisjuncie a cromozomilor omologi la femeile cu o vrst mai naintat.
O

Comportamentul cromozomilor sexuali n timpul meiozei

la femeie, cei doi cromozomi X fiind omologi, formeaz un bivalent, care se comport similar oricrui bivalent alctuit din autozomi; la brbat, cromozomii sexului, X i Y, se comport diferit fa de autozomi. n spermatocitul primar aflat n profaza I cromozomul X i cromozomul Y, formeaz vezicula sexual. Ei nu sunt omologi, exceptnd regiuni scurte de la capetele braelor p, numite regiuni pseudoautozomale. Vezicula sexual este reprezentat de un corpuscul dens, vizibil de la sfritul leptotenului pn n diakinesis. Este format prin condensarea precoce a celor doi cromozomi, uneori, nvelii de o pelicul de ARN. Studiile citologice arat c cromozomii X i Y sunt asociai prin capetele lor, formndu-se o sinaps terminal. La nceputul diakinezei vezicula sexual dispare, dar cromozomii sexului pot fi observai ca un bivalent, asociai cap la cap (Fig. nr. 1.11.), pstrnd aceast configuraie i n metafaza I. n anafaza I cromozomii X i Y se separ i migreaz fiecare la unul dintre polii opui ai fusului de diviziune.

26

CITOGENETIC UMAN

Semnificaia meiozei
1. meioza menine constant numrul de cromozomi de la o generaie la alta prin formarea gameilor haploizi, care, prin fecundaie, refac numrul diploid de cromozomi caracteristic speciei (Fig. nr. 1.13.);

Organismul matur (2n) testicule (2n) ovare (2n)

MEIOZA spermatozoid (n)

ovul (n)

embrion uman (2n)

zigot (2n)

FECUNDAIE
Fig. nr. 1.13. Schema reproducerii sexuate la om

2. meioza produce gamei cu combinaii variate de gene datorit crossing-over-ului din profaza I i asortrii independente a cromozomilor n anafaza I (Fig. nr. 1.14.). Astfel, descendenii care rezult din reproducerea sexuat sunt diferii genetic de prinii lor; 3. multe aberaii cromozomiale sunt rezultatul erorilor care apar n meioz (nondisjunciile cromozomilor i procesele de crossing-over inegal).

Plana I Fig. nr. 1.14. Recombinarea genetic din timpul meiozei (plana I): crossing-over

GENETICA UMAN

27

Metafaza I

sau

Anafaza I

sau

Anafaza II

sau

Combinaia genelor n gamei Plana II Fig. nr. 1.14. Recombinarea genetic din timpul meiozei (plana II): asortarea independent

Bibliografie 1. Ford E.H.R (1973) Human Chromosomes, Academic Press, pg. 54-77. 2. Jorde L.B. (2000) Medical Genetics, 2nd ed., Mosby, pg. 25-28. 3. Therman E. (1992) Human Chromosomes: Structure, Behavior and Effects, 3rd ed., Springer.
O

Web site http://www.accessexcellence.org/AB/GG/meiosis.html

28

CITOGENETIC UMAN

LUCRAREA PRACTIC 3: Cromozomii sexului i cromatina sexual la om

Obiectivele lucrrii:
evidenierea corpusculului Barr n nucleii somatici, la persoanele de sex feminin; evidenierea apendicilor perinucleari, la nivelul nucleilor celulelor polimorfonucleare neutrofile din sngele periferic, la persoanele de sex feminin; evidenierea corpusculului F, la nivelul nucleilor celulelor somatice provenite de la persoane de sex masculin. Analiza cromozomilor sexuali se poate efectua pe: frotiuri din mucoasa bucal, frotiuri din sngele periferic, biopsii de piele, celule recoltate din lichidul amniotic. In interfaza ciclului celular, pe aceste categorii de preparate, se evideniaz: la persoanele normale de sex feminin (cariotip: 46,XX) corpusculul sexual X; la persoanele normale de sex masculin (cariotip: 46,XY) corpusculul sexual Y.

Corpusculul sexual X
Definiie: Corpusculul sexual X reprezint unul dintre cei doi cromozomi X la femeie, care este mult condensat i inactiv genetic, n interfaza ciclului celular. Procesul de inactivare a unuia dintre cei doi cromozomi X la femeie, n nucleii interfazici ai celuleor somatice, poart denumirea de lyonizare.
O

Particularitile lyonizrii: debuteaz precoce (stadiul de blastocist tardiv, aproximativ ziua a 16-a de via intrauterin): este aleatorie (n egal msur se poate inactiva att cromozomul X de origine matern, ct i cromozomul X de origine patern); are rol adaptativ, de meninere a echilibrului genetic funcional ntre sexe, pentru genele poziionate pe cromozomul X, care codific i caractere somatice (compensaie de doz).
O

Nomenclatur: Corpusculul sexual X, evideniat la nivelul nucleului celulelor epiteliale, poart denumirea de cromatin sexual sau corpusculul Barr; Corpusculul sexual X, evideniat la nivelul nucleului celulelor polimorfonucleare neutrofile (PMN), din sngele periferic, mbrac aspectul apendicilor perinucleari.
O

Poziie: Corpusculul Barr este ataat de faa intern a membranei nucleare. Apendici perinucleari sunt ataai de faa extern a membranei nucleare.
O

Form: Corpusculul Barr are forma hemisferic sau triunghiular, cu baza orientat ctre periferie i cu vrful la centru.
O

GENETICA UMAN

29

Apendici perinucleari mbrac forme variate: Tipul A (b de tob sau corpuscul pediculat) se prezint ca o formaiune rotund-ovalar, intens i uniform colorat, ataat de faa extern a membranei nucleare printr-un pedicul fin de cromatin (Fig. nr.1.15.).
Fig. nr. 1.15. Apendice perinuclear de tip A

Tipul B (corpuscul sesil) se prezint ca o formaiune rotund-ovalar, intens i uniform colorat, ataat direct de faa extern a membranei nucleare (Fig. Fig. nr. 1.16. Apendice perinuclear de tip B nr. 1.16.). Tipul C are forme variate: b de tob (dar cu corpuscul mai mic i pedicul mai lung), baston sau crlig (Fig. nr. 1.17.). Tipul D ( rachet de tenis) se prezint ca o formaiune rotund-ovalar, intens colorat n periferie i decolorat n centru, ataat de faa extern a membranei nucleare printr-un pedicul fin de cromatin.

Fig. nr. 1.17. Apendici perinucleari de tip C i A

O

Dimensiune: Corpusculul Barr: 1-2 microni Apendicii perinucleari: tipul A: 1,4-1,6 microni; tipul B: 1,2-1,4 microni; tipul C: 1,2-1,4 microni; tipul D: 2 microni. O Numr: Numrul de corpusculi sexuali X din celul se calculeaz dup formula: B = (X-1) x P/2 unde: B = numrul de corpusculi sexuali X din celul; X = numrul de cromozomi X din celul; P = gradul de ploidie al celulei. Pentru celulele somatice, diploide, P = 2. Drept urmare, relaia de mai sus devine: B = (X-1) n cazul apendicilor perinucleari, se consider c doar tipurile A i B reprezint corpusculul sexual X. Tipurile C i D au origine i semnificaie necunoscute. n aceast situaie, indicele corpusculilor sexuali se calculeaz dup relaia Kosenow: I.C. = A + B sau I.C. = A + B/C, dac lum n calcul i apendicii perinucleari de tip C.

30
O

CITOGENETIC UMAN

Frecvena: Frecvena celulelor purttoare de corpuscul sexual X vizibil la examenul microscopic este influenat de o serie de factori: activitatea mitotic a celulei; activitatea metabolic a celulei; vrsta celulei; vrsta individului; tipul de esut examinat; tehnica folosit; aciunea diferitelor substane medicamentoase. Protocolul de evideniere a apendicilor perinucleari n leucocitele polimorfonucleare neutrofile din sngele periferic: Metoda Davidson - Smith Materiale necesare: Instrumentar: ace de sering sterile; Sticlrie de laborator: lame de sticl sterile cu margini lefuite; pipete Pasteur; Materiale moi: vat, tifon; Soluii, reactivi, colorani: alcool medicinal; soluie May-Grnwald; soluie Giemsa 10%; ap neutr; trus de colorat; Aparatur de laborator: microscop optic (dotat cu obiectiv cu imersie de 90x sau 100x).
O

Mod de lucru: Metoda Davidson - Smith

1. Recoltarea i realizarea frotiului de snge se dezinfecteaz pulpa degetului cu alcool etilic; se neap pulpa degetului cu un ac steril de sering; prima pictur de snge se ndeprteaz cu un tampon de vat uscat; urmtoarea pictur de snge se ia cu ajutorul unei lame de sticl cu marginile lefuite; se aaz lama cu pictura de snge pe o alt lam de sticl, ctre extremitatea acesteia, n unghi de 45, i se mpinge uor ctre cealalt extremitate, obinndu-se frotiul de snge. 2. Colorarea frotiului procedeul May-Grnvald Giemsa: se las frotiurile la uscat cteva minute; se acoper cu 2 ml. de soluie May-Grnwald, timp de 2-4 minute; se adaug 2 ml. de ap fr a vrsa colorantul i se las 2 min.; se vars amestecul fr a spla; se acoper cu soluie Giemsa 10%, preparat extemporaneu, timp de 20-30 de min.; se spal frotiul cu jet de ap; se usuc la aer; se examineaz la microscopul optic cu obiectivul de imersie 90x. 3. Aprecierea i interpretarea rezultatelor.

Prin aceast metod, la examenul microscopic al polimorfonuclearelor neutrofile se evideniaz apendicii perinucleari de tip: A, B, C, D. Pentru determinarea sexului genetic celular, la persoana analizat se examineaz cel puin 500 de neutrofile cu nuclei polilobai. Cu ajutorul relaiei Kosenow se calculeaz indicele corpusculilor sexuali.

GENETICA UMAN

31

La o persoan normal de sex feminin, valoarea indicelui corpusculilor perinucleari din celulele polimorfonucleare neutrofile se calculeaz dup formula: I.C. = A+B, este > de 6 sau I.C. = A+B/C, este > de 0,4.
O

Protocolul de evideniere a corpusculilor Barr n celulele mucoasei bucale: Metoda Sanderson - Stewart

Materiale necesare: Instrumentar: spatul steril; Sticlrie de laborator: lame de sticl sterile cu margini lefuite; lamele de sticl sterile; pipete Pasteur; Materiale moi: vat, tifon, hrtie de filtru; Soluii, reactivi, colorani: alcool medicinal; soluie de alcool etilic absolut; soluie de eter etilic; soluie orcein acetic 1%; ap neutr; trus de colorat; Aparatur de laborator: microscop optic (dotat cu obiectiv cu imersie de 90x sau 100x). Mod de lucru: Metoda Sanderson - Stewart
1. Recoltarea celulelor din mucoasa bucal i realizarea frotiului: se racleaz regiunea posterioar a mucoasei cavitii bucale, cu ajutorul unei spatule sterile; primul raclat de mucoas bucal extras se ndeprteaz; urmtorul raclat se trece pe o lam de sticl i se prepar frotiul. 2. Fixarea celulelor: se realizeaz cu o soluie de alcool etilic absolut i eter etilic (1 :1), timp de 30 de minute. 3. Colorarea frotiului procedeul cu orceina acetic: se acoper frotiul cu soluie de orcein acetic 1%; se acoper frotiul cu o lamel de sticl; se ndeprteaz excesul de colorant cu ajutorul hrtiei de filtru; se spal frotiul cu jet de ap; se usuc; se examineaz la microscopul optic cu obiectivul de imersie 90x. 4. Aprecierea i interpretarea rezultatelor.

n celulele mucoasei bucale, corpusculul Barr apare intranuclear, aderent de faa intern a membranei nucleare, avnd form triunghiular i dimensiune de aproximativ 1 micron (Fig. nr. 1.18.). La o persoan normal de sex feminin, frecvena corpusculilor Barr din nucleii celulelor epiteliale poate oscila ntre 20 i 80% din totalul celulelor examinate.
Fig. nr. 1. 18. Corpusculul Barr n celulele mucoasei bucale la brbat (46,xy), la femeie (46,xx) i la femeia cu tetrasomie x (48,xxxx)

32

CITOGENETIC UMAN

Corpusculul sexual Y
Definiie: Corpusculul sexual Y reprezint cromozomul Y la brbat, evideniat n interfaza ciclului celular. Analiza corpusculului sexual Y se poate efectua pe: frotiuri din mucoasa bucal, frotiuri din sngele periferic, biopsii de piele, celule recoltate din lichidul amniotic, spermatozoizi.
O

Nomenclatur: Corpusculul sexual Y mai este denumit i corpuscul F (fluorescent), datorit coloranilor specifici utilizai (quinacrin sau atebrin), care confer cromozomului Y un aspect fluorescent.
O O O O O

Poziie: se evideniaz la nivelul periferiei nucleului celular sau pericentral. Form: corpuscular, rotund-ovalar. Dimensiune: 0,25 1 microni Numr: egal cu numrul cromozomilor Y din celul.

Protocolul de evideniere a corpusculilor F n celulele mucoasei bucale: Metoda fluorescent Materiale necesare: Instrumentar: spatul steril; Sticlrie de laborator: lame de sticl sterile cu margini lefuite; lamele de sticl sterile; pipete Pasteur; Materiale moi: vat, tifon, hrtie de filtru; Soluii, reactivi, colorani: alcool medicinal; soluie de alcool etilic absolut; soluie de eter etilic; soluie de atebrin 1%; ap neutr; trus de colorat; Aparatur de laborator: microscop de fluorescen (dotat cu obiectiv cu imersie de 90x sau 100x).
O

Mod de lucru: Metoda fluorescent

1. Recoltarea celulelor din mucoasa bucal i realizarea frotiului: se racleaz regiunea posterioar a mucoasei cavitii bucale, cu ajutorul unei spatule sterile; primul raclat de mucoas bucal extras se ndeprteaz; urmtorul raclat se trece pe o lam de sticl i se prepar frotiul. 2. Fixarea celulelor: se realizeaz cu soluie de alcool etilic absolut i eter etilic (1:1), timp de 30 de minute; se usuc. 3. Colorarea frotiului : se acoper frotiul cu soluie de atebrin 1%, timp de 30 de minute; se acoper frotiul cu o lamel de sticl; se ndeprteaz excesul de colorant cu ajutorul hrtiei de filtru; se spal frotiul cu jet de ap; se usuc; se examineaz la microscopul de fluorescen cu imersie 90x. 4. Aprecierea i interpretarea rezultatelor.

La persoanele normale de sex masculin frecvena corpusculului sexual Y poate oscila ntre 25 i 30% din totalul celulelor examinate.

GENETICA UMAN b

33

Fig. nr. 1.19. Corpusculul F n spermatozoid (a) i cromozomul Y marcat fluorescent n placa metafazic la brbat (b)

Importana studiului corpusculilor sexuali X i Y

1. Biologic: permite stabilirea sexului genetic al individului analizat. 2. Medical: permite diagnosticarea sindroamelor genetice determinate de existena unor anomalii de numr ale cromozomilor sexuali (sindrom Turner, Klinefelter, Triplo X, supermascul); permite diagnosticarea strilor de intersexualitate (hermafroditism adevrat, pseudohermafroditism); permite diagnosticarea prenatal a sexului produsului de concepie; permite stabilirea etiologiei unor disfuncii gonadice; permite determinarea sexului genetic la sportivii de performan, n medicina sportiv; permite stabilirea sexului genetic al victimei, n medicina legal; se utilizeaz ca marker, n transplantologie i oncologie.

Bibliografie:
1. Isvoranu M. (1989) Biologie i genetic lucrri practice, Bucureti, pg. 29-36. 2. Dacie Ju., Lewis Sm (1991) Practical Haematology, Churchill Livingstone, pg. 421-422.
O O O

Web site: http://www.mcmaster.ca/inabis 98/medicine/chavez 0626/two.html Web site: http://www.grad.ttuhsc.edu/courses/histo/blood Web site: http://www3.interscience.wiley.com/cgi-bin/jtoc?ID=33129.

34

CITOGENETIC UMAN

LUCRAREA PRACTIC 4: Studiul anomaliilor cromozomiale la om

Obiectivele lucrrii:
identificarea anomaliilor cromozomiale din analiza cariotipului; asocierea anomaliei cromozomiale cu un anume fenotip caracteristic. n patologia cromozomial uman analiza cariotipului este o investigaie citogenetic util pentru c permite evidenierea eventualelor modificri cromozomiale numite anomalii sau aberaii cromozomiale care pot avea efecte fenotipice severe.

Anomaliile cromozomiale
reprezint modificri ale numrului i structurii normale ale cromozomilor, clasificndu-se n anomalii numerice i anomalii structurale; pot fi evideniate prenatal (celule fetale) sau postnatal (limfocite); afecteaz 7,5% din totalul produilor de concepie umani; au o frecven de 1/150 printre nou-nscuii vii; sunt o cauz important a morbiditii i mortalitii (50% dintre avorturile spontane n primul trimestru de sarcin); afecteaz att autozomii (perechile 1 22), ct i gonozomii (X i Y); pot fi constituionale sau dobndite.

Anomalii cromozomiale numerice

Numrul caracteristic de cromozomi al speciei umane este: 2n = 46 de cromozomi n nucleul celulei somatice (celul diploid); n = 23 de cromozomi n gamei ovule sau spermatozoizi (celule haploide). De regul, orice abatere de la numrul corect de cromozomi ai unei celule se numete anomalie cromozomial de numr. O Tipuri de anomalii numerice: poliploidia; aneuploidia; mozaicuri cromozomiale.
O

Poliploidia
Prezena supranumerar a unor seturi complete de cromozomi ntr-o celul se numete poliploidie. Exemple de poliploidie sunt: O Triploidia Un set haploid de cromozomi (n) n plus ntr-o celul somatic uman (2n) determin apariia triploidiei, adic 3n = 69 de cromozomi. Celulele triploide pot fi 69,XXX , 69,XXY sau 69,XYY, n funcie de originea matern sau patern a setului extracromozomial. Triploidia are o frecven de 1/10 000 printre nou-nscuii vii i 15% printre produii de concepie avortai spontan. Surplusul de material genetic produce multiple anomalii, cum ar fi defecte ale cordului i sistemului nervos central. Din acest motiv, feii triploizi sunt avortai (Fig. nr.1.20.) i n mod excepional ajung s supravieuiasc pn la termen, avnd o viabilitate redus.

GENETICA UMAN

35

Fig. nr. 1. 20. Ft triploid avortat. Disproporia dintre extremitatea cefalic i trunchi; mn malformat, sindactilia degetelor III i IV; cariotip 69,xxy

Cauzele triploidiei sunt: dispermia fertilizarea ovulului de ctre doi spermatozoizi, fuziunea ovulului cu un globul polar i fertilizarea de ctre un spermatozoid sau defecte ale meiozei formarea unui gamet diploid (patern sau matern), care mpreun cu gametul normal va genera un zigot triploid.

36
O

CITOGENETIC UMAN

Tetraploidia Prezena a 4 seturi haploide de cromozomi ntr-o celul somatic se numete tetraploidie i se caracterizeaz prin 4n = 92 de cromozomi. Celulele tetraploide pot fi 92,XXXX , 92,XXYY, 92,XXXY sau 92,XYYY. La om este mult mai rar observat dect triploidia. De regul, este incompatibil cu viaa postnatal, doar indivizii cu mozaicuri 2n/4n sunt viabili. Cauzele tetraploidiei sunt: defectele primei diviziuni mitotice a zigotului sau fuziunea a doi zigoi diploizi.

Aneuploidia
Un cromozom dintr-o pereche poate fi absent sau prezent n exces, ceea ce nseamn c numrul de cromozomi ai celulei se modific. Multiplicarea inexact a numrului de cromozomi din nucleul unei celule se numete aneuploidie. ntr-o celul somatic normal exist 23 de perechi de cromozomi, fiecare pereche avnd un cromozom de origine matern i unul de origine patern, condiie numit disomie biparental (2n). O Nulisomia Absena ambilor cromozomi dintr-o pereche se numete nulisomie (2n-2), iar la om este o condiie incompatibil cu dezvoltarea normal. O Monosomia Absena unui singur cromozom din pereche se numete monosomie (2n-1). Aproape toate monosomiile umane, cu excepia celor care implic cromozomii sexului, sunt letale. O Trisomia Prezena unui cromozom n plus ntr-o pereche se numete trisomie (2n+1). Trisomia este una dintre cauzele avortului spontan, totui, exist trisomii care sunt compatibile cu supravieuirea postnatal. S-au observat i trisomii multiple de tipul 2n+1+1+1. Cele mai frecvente trisomii autozomale i gonozomale sunt prezentate n planele de la pag. 42. Efectele fenotipice ale anomaliilor numerice autozomale sunt mai severe comparativ cu cele ale gonozomilor. O Tetrasomia (2n+2) i pentasomia (2n+3) sunt extrem de rare i implic , de obicei, cromozomii sexului. Aneuploidia poate fi: complet, caz n care un ntreg cromozom lipsete sau este supranumerar n cariotip; parial, caz n care numai anumite segmente cromozomiale variabile ca mrime lipsesc sau sunt n exces ntr-o pereche; omogen, caz n care toate celulele organismului au acelai tip de aneuploidie; n mozaic, caz n care coexist la acelai organism linii celulare normale i linii celulare aneuploide.
ISCN n cazul anomaliilor numerice Simbolul 69,XXX 92,XXYY 45,X 47,XX,+21 47,XY,+18 48,XXXX 49,XXXXY 46,XY,5p46,XX,2q+ 47,XX,+21/46,XX Semnificaia triploidie tetraploidie monosomie X (sindrom Turner) trisomie 21 (sindrom Down) trisomie 18 (sindrom Edward) tetrasomie X pentasomia XXXXY monosomia parial 5ptrisomia parial 2q+ mozaic celular pentru cromozomul 21 (sindrom Down n mozaic)

GENETICA UMAN

37

Cea mai frecvent cauz a aneuploidiei o reprezint nondisjuncia meiotic sau mitotic, adic nesepararea cromozomilor omologi sau nesepararea cromatidelor surori n timpul anafazei. Fig. nr. 1.21. prezint nondisjuncia meiotic i mitotic.
Nondisjuncie meiotic Meioza Ovul Fecundaie Zigot

Meioz normal

Normal

Normal

Trisomie Nondisjuncie meiotic

Monosomie letal Nondisjuncie mitotic Mitoz Mitoz

Mitoz normal Normal Mitoz normal Sindrom Down n mozaic Trisomie 21 Nondisjuncie mitotic Monosomie 21

Fig. nr. 1. 21. Consecinele nondisjunciei meiotice i mitotice

38

CITOGENETIC UMAN

Mozaicul cromozomial
Prezena a dou sau mai multor linii celulare diferite cromozomial la un individ se numete mozaic cromozomial. Liniile celulare sunt complementare i deriv din acelai zigot. De exemplu: 47,XX,+21/46,XX sindrom Down n mozaic (Fig. nr. 1.21.). Cauza mozaicului cromozomial este nondisjuncia cromatidelor surori n diviziunile mitotice postzigotice, astfel c, n funcie de momentul n care a avut loc aberaia de diviziune, un procent variabil de celule pot fi anormale citogenetic, iar consecinele clinice variate.

Anomalii cromozomiale de structur

apar cu o frecven de 1/500 de nateri; cromozomii se pot rupe spontan, dar rata rupturilor poate fi mrit de aciunea agenilor clastogeni (radiaii ionizante, infecii virale, substane chimice) n interfaz sau n timpul meiozei sau mitozei; pot fi balansate succesiunea benzilor cromozomiale se schimb, dar nu se pierde i nu se ctig material genetic, sau nebalansate se pierde sau se ctig material genetic; pot interesa unul sau mai muli cromozomi; pot fi observate folosind tehnici de bandare standard sau FISH; tipuri: deleia, duplicaia, inversia, translocaia, cromozomi inelari, izocromozomi, cromozomi dicentrici. Orice schimbare a structurii fizice a cromozomului reprezint o anomalie structural. Toate anomaliile cromozomiale de structur se datoreaz uneia sau mai multor rupturi care altereaz morfologia cromozomului, iar segmentele cromozomiale rezultate se pot pierde sau rearanja ntr-o combinaie nou, anormal. Deleia (del) Pierderea unui fragment dintr-un cromozom ca urmare a ruperii braului cromozomial se numete deleie. Deleiile pot fi terminale sau intercalare (Fig. nr. 1.22.). Deleia terminal se observ n cazul n care se pierde material genetic localizat la extremitile cromozomului pter sau qter. Dac apare o dubl ruptur la nivelul aceluiai bra cromozomial, segmentul cuprins ntre rupturi se pierde, iar poriunile de cromozom rmase au capete lipicioase care se reunesc. Deleiile sunt vizibile microscopic cu ajutorul tehnicilor de bandare. Mrimea fragmentului deletat determin viabilitatea i fenotipul individului care prezint anomalia structural. Uneori, apar deleii mici, numite microdeleii, care sunt detectate doar prin tehnici moleculare. La om au fost observate deleii pentru toi cromozomii, fie pe braele p, fie pe braele q. Cele mai frecvente sunt 4p- (sindromul Wolf ) i 5p- (sindromul cri du chat) (vezi planele de la pag. 48 i 49). O Duplicaia (dup) Prezena n exces a unui fragment cromozomial se numete duplicaie. Fragmentul suplimentar se poate ataa cromozomului omolog sau unui cromozom neomolog pstrnd ordinea originar a genelor duplicaie direct sau n tandem, sau inversnd ordinea normal a genelor duplicaie invers sau n tandem invers. Consecinele fenotipice ale duplicaiei sunt sindroamele de trisomie parial.
O

GENETICA UMAN

39

Deleie terminal

Deleie interstiial

Inversie paracentric

Inversie pericentric

Translocaie balansat

Translocaie robertsonian

Cromozom inelar

Cromozom dicentric

Izocromozom

Fig. nr. 1.22. Anomalii cromozomiale de structur

40
O

CITOGENETIC UMAN

Inversia (inv) Inversia se produce n urma apariiei unei duble rupturi pe acelai bra cromozomial sau a cte unei rupturi pe fiecare bra cromozomial, rotirea cu 180 a fragmentului cuprins ntre cele dou puncte de ruptur i alipirea lui aceluiai cromozom. Inversia poate fi: paracentric fragmentul inversat nu include centromerul i pericentric fragmentul inversat include centromerul (Fig. nr. 1.22). Detectarea acestui defect de structur se face prin folosirea tehnicii bandrii, care evideniaz aspectul inversat al ordinii benzilor cromozomiale. Segmentul cromozomial inversat determin schimbarea secvenei ADN, care nu este obligatoriu s aib consecine fenotipice evidente la purttorul de inversie. Dar inversarea secvenei ADN pe unul dintre omologi poate afecta mperecherea cromozomilor omologi n profaza I a meiozei. Unirea defectuoas a cromozomilor omologi poate avea ca rezultat deleii sau duplicaii ale materialului genetic, care, ulterior, vor fi exprimate la descendentul purttorului de inversie. O Translocaia (t) Translocaia este un rearanjament structural care apare n urma transferului de segmente cromozomiale ntre cromozomi neomologi. Ambii cromozomi implicai trebuie s sufere cel puin o ruptur pe unul dintre brae pentru ca schimbul de material genetic s aib loc. De obicei, prin schimbul de segmente cromozomiale nu se pierde material genetic, deci purttorul este clinic normal, iar translocaia este echilibrat sau balansat. Purttorii unei astfel de translocaii echilibrate pot produce gamei neechilibrai genetic, iar prin fecundarea acestora cu gamei normali rezult zigoi aberani citogenetic.Aadar, pot aprea consecine severe pentru descendenii lor. Translocaia poate fi: reciproc balansat sau nebalansat; robertsonian; inserional. Translocaia reciproc balansat implic doi cromozomi neomologi care sufer cte o ruptur pe unul dintre brae, iar segmentele cromozomiale se schimb ntre ele (Fig. nr. 1.22.). Dac punctul de ruptur nu afecteaz o gen specific, ci o regiune intergenic, atunci nu apar efecte fenotipice pentru purttor. Translocaia reciproc nebalansat prin schimbul de segmente cromozomiale se poate pierde sau ctiga material genetic, existnd consecine fenotipice pentru individ. Translocaia robertsonian sau fuziunea centric implic numai cromozomii acrocentrici din grupele D i G ale cariotipului uman. Rupturile cromozomiale apar n regiunea centromerului la ambii cromozomi acrocentrici. Fragmentele cromozomiale care corespund braelor scurte sunt lipsite de centromer (acentrice) i se vor pierde n diviziunea celular urmtoare fr s apar efecte fenotipice. Braele lungi ale celor doi cromozomi acrocentrici fuzioneaz n regiunea centromeric (fuziune centric), rezultnd un singur cromozom, numit cromozom derivat. Fuziunea centric a cromozomilor 13 i 14 este cel mai frecvent ntlnit la om, fiind urmat ca frecven de fuziunea centric a cromozomilor 14 i 21 (Fig. nr. 1.22.). Individul purttor de translocaie robertsonian este clinic sntos, dar n gametogenez apar probleme cu consecine pentru descendeni. Translocaia inserional implic doi cromozomi pe braele crora apar trei rupturi: dou rupturi pe braul unui cromozom i una pe braul celuilalt. Un cromozom pierde un segment intercalar (deleie interstiial), segment care este transferat i inserat pe cellalt cromozom la locul de ruptur. Purttorul de translocaie este fenotipic normal, dar poate produce gamei care prezint fie o duplicaie, fie o deleie.

GENETICA UMAN
O

41

Cromozomi inelari (r) Cromozomul inelar (ring chromosome) apare prin ruperea segmentelor terminale ale ambelor brae ale unui cromozom care se pierd, iar poriunile cromozomiale rmase se unesc, formnd un inel (Fig. nr 1.22). Dac inelarul prezint centromer, atunci se va putea menine n celul, dac este lipsit de centromer se va pierde pe parcursul diviziunii celulare, neputndu-se orienta pe filamentele fusului de diviziune. Cromozomul inelar este instabil i creeaz probleme disjunciei mitotice a cromatidelor, caz n care apar o linie celular monosomic i o linie celular cu cromozom inelar. La om, cromozomi inelari au fost observai pentru aproape toate perechile de cromozomi. Manifestrile fenotipice depind de mrimea segmentelor terminale deletate; cu ct acestea sunt mai mari cu att i fenotipul clinic este mai sever. O Izocromozomul (i) n timpul diviziunii celulare clivarea centromerului se poate face greit, dup o ax transversal, rezultnd un cromozom anormal, care prezint unul dintre brae duplicat, iar cellalt lips (Fig. nr.1.22.).De regul, embrionii care au un izocromozom n cariotip sunt avortai spontan n primele stadii ale dezvoltrii. Fac excepie: izocromozomul pentru braele q ale cromozomului X, izocromozomul pentru braele q ale cromozomului 21 i izocromozomul pentru braele q ale cromozomului Y. O Cromozomii dicentrici (dic) Orice cromozom care prezint doi centromeri este un cromozom dicentric. De regul, unul dintre cei doi centromeri se inactiveaz, devenind nefuncional, iar dicentricul migreaz normal n timpul diviziunii. Dac ambii centromeri sunt activi, atunci, n timpul diviziunii, acetia pot migra la polii opui ai celulei, fiind legai ntre ei printr-o punte de cromatin.
ISCN n cazul anomaliilor de structur Simbolul 46,XY,del(5)(p15) 46,XX,del(2)(q31q33) 46,XY,dup(2)(q14-q21) 46,XY,inv(7)(p15q22) 46,XX,inv(8)(q22q24) 46,XY,t(3;7)(q21;q11) 45,XY, -14,-21,+t(14q21q) 46,XX,-5,+der(5)t(5;14)(p13q32) 46,XY,ins(12;1)(q22;q21q32) 46,XX,r(7)(p21q34) 46,X,i(Xq) 46,X,dic(Y)(q13) Semnificaie deleie terminal a braului p al cr.5 deleie intercalar duplicaie inversie pericentric inversie paracentric translocaie reciproc balansat translocaie robertsonian translocaie nebalansat translocaie inserional cromozom inelar izocromozom cromozom dicentric

Mecanismul producerii aberaiilor structurale ale cromozomilor

Producerea aberaiilor de structur ale cromozomilor se datoreaz rupturilor cromozomiale. Cnd braul cromozomial se rupe, capetele libere ale rupturii devin lipicioase. Rupturile apar spontan, iar frecvena lor poate s creasc n prezena agenilor clastogeni (radiaii ionizante, substane chimice, unele virusuri). De regul, ntr-o astfel de situaie mecanismele de reparare a rupturii refac rapid defectul i se restabilete integritatea iniial a cromozomului. Totui, mecanismele de reparare nu disting ntotdeauna ruptura i exist

42

CITOGENETIC UMAN

posibilitatea ca fragmentele cromozomiale rupte s se reuneasc ntr-o variant eronat, alternd structura cromozomului. Dac rearanjamentul cromozomial nu altereaz expresia materialului genetic, atunci nu vor fi observate consecine fenotipice; indivizii purttori de rearanjamente echilibrate produc gamei modificai genetic pentru c n timpul gametogenezei alinierea cromozomilor omologi se face incorect i apare un crossing-over inegal, crescnd riscul pentru descendeni (au dezvoltare ntrziat, retard mintal, trsturi faciale caracteristice, variate tipuri de malformaii congenitale).

Efectele fenotipice ale aberaiilor cromozomiale

Anomaliile cromozomiale pot determina apariia avorturilor spontane, a defectelor din natere, a tulburrilor sexuale i a bolii canceroase. n citogenetica uman clinic, defectele cromozomiale majore sunt asociate deseori cu modificri fenotipice caracteristice cunoscute ca sindroame cromozomiale. n funcie de tipul i dimensiunea cromozomului afectat sau de tipul de aberaie produs, modificrile fenotipice pot fi severe sau mai puin severe. Anomaliile autozomale produc efecte fenotipice mai grave dect cele gonozomale, monosomiile sunt mai severe dect trisomiile, deleiile mai severe dect duplicaiile. De regul, anomaliile autozomale sunt asociate cu napoiere mintal, multiple malformaii congenitale, trsturi dismorfice i retard al creterii pre i postnatal, n timp ce anomaliile gonozomale sunt asociate cu tulburri ale diferenierii sexuale.

SINDROM PATAU - trisomie 13

Cariotip:47,XY,+13

Incidena: 1/4000-10 000 de nou-nscui vii Sex ratio: M=F (alte statistici arat c sexul F ar fi uor favorizat)

Fenotip clinic: microcefalie, frunte teit, leziuni ale scalpului; microftalmie/anoftalmie, coloboma iridian; nas scurt i lat; urechi malformate, jos inserate; despictur labial i/sau palatin, micrognaie, limb despicat; gt scurt i gros, cu hemangioame pe ceaf;

malformaii viscerale severe, defecte de sept atrial sau ventricular, rinichi polichistic; criptorhidism la biei i uter bicorn la fete; hiperlaxitatea policelui, hexadactilie, degete flectate n palm; calcaneu proeminent, hexadactilie plantar; dermatoglife modificate; retard psihomotor, hipotonie sau hipertonie muscular; durat de via redus.

GENETICA UMAN

43

SINDROM EDWARD - trisomie 18

Cariotip: 47,XX,+18 sau 47,XY,+18 Incidena: 1/5 000-8 000 de nou-nscui vii Sex ratio: F>M

Fenotip clinic: craniu lung i ngust, cu occiput proeminent; hipertelorism, epicantus; nas scurt, cu rdcina larg; urechi malformate, jos inserate; micrognaie, hipoplazie mandibular; microstomie; gt scurt, cu piele lax; malformaii scheletice;

44

CITOGENETIC UMAN

SINDROM DOWN - trisomie 21

Fenotip clinic facies caracteristic mongoloid; brahicefalie; occiput aplatizat; microcefalie; fa mic i rotund; profil aplatizat; fante palpebrale oblice, orientate n sus i n afar; epicantus; strabism; nas mic, avnd rdcina aplatizat; urechi mici, jos situate; gur mic, buza superioar eversat, limba protuberant,

cu aspect scrotal, microdonie i hipodonie, erupie ntrziat, palat ogival i ngust, hipoplazie maxilar; gt scurt cu cute n exces; torace n plnie; mini late, cu degete scurte, picioare scurte i plate, spaiul interdigital dintre haluce i degetul II este mult mrit; dermatoglife modificate (pliu palmar transvers unic); malformaii cardiace, gastroenterale, osteoarticulare; retard mental (IQ deseori sub 50).

GENETICA UMAN

45

SINDROM DOWN - trisomie 21

Cariotip: 47,XX,+21 sau 47,XY,+21 Incidena: 1/700 de nou-nscui vii Sex ratio: 1M:1F

46

CITOGENETIC UMAN

SINDROM TURNER - monosomie X

Cariotip: 45,X Incidena: 1/2 500-5 000 de nateri de sex F

Fenotip clinic: talie mic;

fa triunghiular; fante palpebrale antimongoloide, epicantus, ptoz palpebral, hipertelorism; urechi jos inserate; maxilar ngust, palat ogival,erupie ntrziat, dini supranumerari i dini geminai; gt palmat (pterigium coli), implantarea joas a firelor de pr pe ceaf;

torace n scut; limfedeme congenitale la mini i picioare, unghii hipoplazice i convexe; nevi pigmentari; infantilismul organelor genitale externe i interne (disgenezie ovarian, uterul i vaginul au dimensiuni reduse), amenoree primar, sterilitate; IQ n limite normale; durata de via depinde de severitatea malformaiilor organelor interne.

GENETICA UMAN

47

SINDROM KLINEFELTER- trisomie XXY

Cariotip: 47,XXY Incidena: 1/1 000 de nateri de sex masculin

Fenotip clinic: semnele clinice se observ la pubertate i sunt evidente la adult; atrofie testicular; ginecomastie; pilozitate redus; talie nalt i uneori aspect ginoid; sterilitate; dezvoltare intelectual normal; anomalii dentare: taurodontism; durat de via normal.

48

CITOGENETIC UMAN

SINDROM WOLF - monosomie parial 4p

Defect genetic: monosomie parial 4p (deleie 4p16) Cariotip: 46,XX,4p- sau 46,XY,4pIncidena: sindrom rar, 1/250 000 de nou-nscui vii Sex ratio: F>M

Fenotip clinic: microcefalie; glabel proeminent; coloboma, epicantus; nas diform; urechi jos inserate; palat ogival, micrognaie, despictura buzei i/sau a palatului, aspect de gur de crap; malformaii cardiace; anomalii genitale; retard mintal; ntrziere psihomotorie i hipotonie muscular; greutate mic la natere (n medie 2,015 kg); durat de via redus.

GENETICA UMAN

49

SINDROM CRI DU CHAT monosomie parial 5p

Defect citogenetic: monosomia parial 5p Cariotip: 46,XX,5p- sau 46,XY,5pIncidena: 1/50 000 de nou-nscui Sex ratio: F>M Fenotip clinic: plnsul caracteristic, asemntor mieunatului de pisic (cri du chat) datorat hipoplaziei laringiene; microcefalie; fa rotund sau lunar; hipertelorism marcat; palat nalt i luet bifid; mandibul mic, menton retras; malocluzii dentare; hipotonie muscular ; retard mintal; durata de via destul de lung pentru c malformaiile cardiace i renale nu sunt foarte grave.

50
Bibliografie

CITOGENETIC UMAN

1. Human Cytogenetics (2001) A Practical Approach, 3 rd. ed., vol.I. 2. Connor & Ferguson - Smith (1997) Essential Medical Genetics, Blackwell Science, pg. 116129. 3. Hoffe A.P. (1999) Genetics, Fence Creek Publishing, pg. 117-126. O Web site: http://www.kumc.edu/gec/geneinfo.html Intrebri recapitulative

1. Un embrion uman testat citogenetic prezint dou treimi celule normale 46,XY i o treime celule tetraploide 92,XXYY. Cum explicai? 2. Cum se comport n timpul meiozei un izocromozom 21 (21q21q) aprut prin fuziune centric i cum vor fi descendenii unui purttor i(21q)? 3. Ce diferene exist ntre meioza masculin i meioza feminin? 4. De ce o persoan care are aceeai inversie pe cromozomii omologi nu produce gamei neechilibrai genetic? 5. Ce anomalie cromozomial v ateptai s gsii mai frecvent printre juctorii de baschet dect n populaia general? 6. Enumerai trei metode de bandare a cromozomilor i precizai ce avantaje confer fiecare analizei citogenetice. 7. Cum putei afla sexul genetic al unei persoane?

TOPIC TEST
T

ntrebri la care litera de rspuns corect desemneaz propoziii: A adevrate; B false. 1. Telomerele sunt situate totdeauna n zona pericentromeric a cromozomului. 2. Meioza produce celule fiice identice genetic cu celula-mam. 3. Monosomia este o form de poliploidie. 4.Centromerii sunt necesari pentru segregarea cromozomilor n timpul diviziunii nucleare. 5. Inversia schimb ordinea genelor pe harta genetic. 6. Cariotipul uman are 44 de autozomi i 2 gonozomi. 7. Translocaia crete numrul de cromozomi n celule. 8. Mrimea segmentului cromozomial deletat nu are nici o legtur cu fenotipul. 9. Trisomia i triploidia au mecanisme identice de apariie. 10. Aneuploidia cromozomilor de sex cauzeaz fenotipuri anormale, dar viabile. ntrebri cu un singur rspuns corect: A, B, C sau D. 11. Diakinesis este: A. O tulburare a musculaturii scheletice B. O faz a profazei mitotice C. O faz a meiozei primare D. Una dintre catenele ADN-ului mitocondrial

GENETICA UMAN

51

12. O femeie de 19 ani, cu statur mic, gt scurt, mameloane hipoplazice, ndeprtate, amenoree primar, este diagnosticat citogenetic: A. 47,XX,+18 B. 46,XY C. 47,XXY D. 45,X 13. Care dintre urmtoarele sindroame este caracterizat citogenetic 47,xxy? A. Mola hidatiform B. Sindromul Prader Willi C. Sindromul Klinefelter D. Sindromul Angelman 14. Cromozomii 1,3,19 i 20 sunt: A. Metacentrici B. Submetacentrici C. Acrocentrici D. Telocentrici 15. O persoan cu dou sau mai multe linii celulare rezultate dintr-un singur zigot este numit citogenetic: A. Sindrom B. Heterozigot C. Secven D. Mozaic celular 16. Dac o non-disjuncie afecteaz perechea de cromozomi 21 i are loc n prima diviziune meiotic a celulelor gonadale brbteti, se ateapt ca: A. Numrul de gamei normali i aneuploizi s fie egal B. Numrul de gamei nulisomici i disomici s fie egal C. Numrul de gamei disomici s fie mai mare dect gameii nulisomici D. Raportul dintre gameii normali, disomici i nulisomici s fie 1:2:1 17. Care dintre urmtoarele afirmaii nu este corect pentru meioz? A. ADN-ul se replic dup fiecare diviziune celular B. Fiecare cromozom se asociaz ca bivalent cu perechea sa n meioza primar C. Citokineza are loc dup migrarea cromozomilor la polii opui ai celulei D. Cromozomii omologi pot face schimburi de segmente cromatidice ntre ei 18. Ce evideniaz benzile C ale cromozomilor? A. Regiuni cromozomiale formate din heterocromatin constitutiv B. Regiuni ale cromozomilor active genetic C. Cariokineza D. Regiunile cromozomiale cuprinse ntre centromer i telomere 19. Benzile G sunt benzi cromozomiale: A. Obinute prin FISH B. Obinute prin colorare cu Giemsa C. Caracteristice cromozomilor din grupa G a cariotipului uman D. Obinute prin colorare cu quinacrin 20. Cum se poate vizualiza un defect citogenetic structural? A. Prin analiza direct a genomului B. Prin tehnici de bandare a cromozomilor C. Prin inactivarea genomului D. Prin replicarea ARN-ului ribozomal

52

CITOGENETIC UMAN 21. Ipoteza Lyon se refer la: A. Inactivarea cromozomului 21 B. Inactivarea unui cromozom X C. Inactivarea centromerilor D. Nondisjuncia cromozomilor omologi 22. Fuziunea centric afecteaz numai cromozomii: A. Acrocentrici B. X i Y C. Metacentrici D. X de la femeie 23. Pseudohermafroditismul feminin este caracterizat prin: A. 46,XX i fenotip masculin B. 46,XY i fenotip feminin C. 47,XXX D. 46,X,i(Xq) 24. Care dintre urmtoarele defecte nu cauzeaz triploidia? A. Dispermia B. Non-disjunciile meiotice care produc gamei diploizi C. Fuziunea ovulului cu un globul polar i apoi fecundarea cu un spermatozoid D. Translocaia cromozomial 25. Riscul de recuren pentru trisomia 13 crete dac: A. Unul dintre genitori are translocaie 13/15 B. Se inactiveaz unul dintre cromozomii 13 C. Unul dintre genitori are monosomie 13 D. Unul dintre genitori este triploid

ntrebri la care litera de rspuns corect grupeaz cifrele dup cum urmeaz: A-1,2,3; B-1,3; C-2,4; D-4; i E-1,2,3,4. 26. Aneuploidia determin fenotipuri anormale pentru c: 1. indivizii sunt sterili 2. afecteaz numai cromozomii sexului 3. individul are trei seturi de cromozomi n celul 4. dozajul genic este neechilibrat 27. Care dintre urmtoarele afirmaii privitoare la aberaiile cromozomiale este corect? 1. aberaiile structurale sunt influenate de vrsta patern naintat 2. aberaiile structurale nu apar la brbat 3. aberaiile numerice sunt influenate de vrsta matern naintat 4. nici una dintre afirmaii nu este corect 28. Care dintre urmtoarele aberaii cromozomiale structurale ar putea produce o modificare nebalansat a materialului genetic al purttorului? 1. translocaia robertsonian 2. inversia paracentric 3. inversia pericentric 4. izocromozomul 29. Care dintre urmtoarele trsturi fenotipice nu se regsesc n tabloul clinic al sindromului Down? 1. brahicefalia 2. furca simian

GENETICA UMAN

53

3. risc crescut pentru leucemie 4. despictur labio-palatin 30. Un brbat care are trei gonozomi, XXY, este fertil. Ce combinaii ale gonozomilor vom gsi n gameii acestui brbat? 1. X 2. YY 3. XY 4. Y 31. Citogenetica studiaz: 1. variante cromozomiale 2. aberaii cromozomiale numerice 3. rearanjamente cromozomiale 4. efectele fenotipice ale variantelor cromozomiale 32. ntr-o familie s-au nscut doi biei cu sindrom Klinefelter. Ce aberaii cromozomiale ar putea avea prinii? 1. tatl ar putea avea XYY 2. mama ar putea fi 45,X 3. mama ar putea fi 47,XXX 4. nici una dintre aceste variante 33. Ci corpusculi Barr ne ateptm s gsim n celulele : 1. unei femei normale 1 2. unei femei cu sindrom Turner 0 3. unei pseudohermafrodite feminine 1 4. unui pseudohermafrodit masculin 1 34. Cromozomii umani ai sexului, X i Y, se deosebesc citogenetic prin: 1. form 2. mrime 3. model de bandare 4. numr de cromatide n timpul meiozei 35. Care dintre urmtoarele evenimente au loc n timpul meioz? 1. numrul diploid de cromozomi se reduce la un numr haploid 2. ntre cromozomii omologi are loc un crossing-over 3. cromozomii omologi sunt asociai ca bivaleni 4. celulele-fiice sunt identice genetic cu celula-mam 36. Cte cromatide exist ntr-o celul diploid cu 46 de cromozomi aflat n meioza primar n momentul n care dispare membrana nuclear? 1. 46 2. 23 3. 69 4. 92 37. Variabilitatea genetic asociat meiozei normale se datoreaz evenimentelor de recombinare genetic: 1. ntre cromatidele surori 2. ntre cromozomii omologi (crossing-over) 3. de tipul translocaiei robertsoniene 4. de tipul asortrii independente a perechilor de cromozomi

54

CITOGENETIC UMAN 38. Ce sunt autozomii? 1. cele dou seturi haploide ale unei celule gametice 2. toi cromozomii unei celule diploide sau haploide, exceptnd gonozomii 3. cromozomii mitocondriali 4. cromozomii care se asociaz pe toat lungimea lor n meioza masculin 39. n ce condiii este indicat analiza cromozomilor? 1. suspiciune de sindrom Down 2. avorturi spontane repetate 3. amenoree primar 4. ambiguitate genital 40.Translocaia are ca rezultat: 1. scurtarea unui cromozom 2. pierderea unui cromozom 3. alungirea altui cromozom 4. apariia unui cromozom excedentar ntr-o pereche de cromozomi

TOPIC TEST RSPUNSURI

Adevrat / Fals 2.B 3.B 4.A Alegere unic 12.D 13.C 14.A 22.A 23.A 24.D Alegere multipl 27.B 28.D 29.D 37.C 38.C 39.E

1.B 11.C 21.B 26.D 36.D

5.A 15.D 25.A 30.E 40.B

6.A 16.B

7.B 17.A

8.B 18.A

9.B 19.B

10.A 20.B

31.E

32.B

33.A

34.A

35.A

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

Ereditatea este transmiterea caracterelor biologice n succesiunea generaiilor. Prinii transmit copiilor lor, prin gamei, genele responsabile de apariia caracterelor fenotipice. Genele interacioneaz ntre ele, dar i cu factorii ambientali, i exprim un anumit caracter fenotipic. Aadar, copiii tind s aib n comun cu prinii i rudele apropiate mai multe gene dect cu indivizii nenrudii din populaie. Caracterul biologic reprezint orice trstur fenotipic detectabil a unui organism. Modul de transmitere a unui caracter biologic depinde de condiionarea sa genetic. Caracterele biologice normale sau patologice pot fi: simple (condiionate monogenic); cantitative (condiionate poligenic, influenate de mediu i au o distribuie continu); complexe (condiionate de una sau mai multe gene, dar i de factori ambientali).

TEME-CHEIE: Ereditatea caracterelor simple (mendeliene) legile mendeliene ale ereditii modele de transmitere a caracterelor simple arborele genealogic caractere umane simple (mendeliene) modificri ale raportului fenotipic mendelian (caractere multiple: linkajul i asortarea independent) Ereditatea caracterelor non-mendeliene caractere cantitative (caractere metrice) caractere complexe ntrebri recapitulative Topic Test

56

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

LUCRAREA PRACTIC 1: Legile mendeliene ale ereditii

Obiectivele lucrrii:
demonstrarea legilor mendeliene; caracterizarea legilor mendeliene; valabilitatea legilor mendeliene la om.

Relaia genotip-fenotip
n cadrul unei populaii umane se pot observa diferene evidente ntre indivizi, dei toi aparin aceleiai specii. Ele pot fi date de culoarea ochilor, forma i culoarea prului, forma nasului, profilul facial, forma, structura i numrul dinilor, aspectul i mrimea urechilor, talia,etc. Toate aceste caractere se transmit de la o generaie la alta (spunem de la ascenden la descenden n succesiunea generaiilor ) i se numesc caractere ereditare. Caracterul observat este denumit caracter fenotipic. Formele alternative ale unui caracter (ochi albatri, verzi, cprui) sunt condiionate de alelele unei gene. Unitatea de informaie genetic ce determin caracterul fenotipic este gena. Ea reprezint un fragment din molecula de ADN i controleaz, deci, apariia unui caracter ereditar. Constituia genetic a unui individ se numete genotip, iar exprimarea ei fizic, fenotip. Fenotipul reprezint, aadar, totalitatea caracterelor morfologice, fiziologice, biochimice, psihice si comportamentale, normale sau patologice, ale unui individ determinate de constituia sa genetic i/sau modulate de factori ambientali (Fig. nr. 2.1.).

GENOTIP
(constituia genetic) INTERACIUNEA CU ALTE GENE I PRODUII LOR INFLUENA FACTORILOR DE MEDIU

FENOTIP
(exprimarea caracterelor fizice)
Fig. nr. 2.1. Relaia genotip-fenotip

n nucleii celulelor somatice umane celule diploide (2n) se afl cromozomii (46). Ei sunt dispui n 23 de perechi. Fiecare pereche are 2 cromozomi, unul de origine matern, cellalt patern (vezi meioza pag. 20). Genele sunt situate pe cromozomi, fiecare gen ocupnd o poziie precis, numit locus. Vor exista, astfel, loci omologi (in aceeai poziie pe cromozomi omologi). Genele care ocup loci omologi vor influena acelai caracter i se numesc gene alele. Un cromozom are numai o alel pentru un locus dat. ntruct cromozomii sunt perechi, alelele vor fi dublu reprezentate : una de origine matern, cealalt, patern i vor alctui un cuplu alelic. Acesta va controla astfel din punct de vedere genetic acelai caracter. Caracterul condiionat de o pereche de gene sau, altfel spus, de un cuplu alelic se numete caracter monogenic.

GENETICA UMAN

57

Cele dou alele pot fi: O identice (poart aceeai informaie genetic) i, n acest caz, genotipul este denumit homozigot. Individul care prezint un cuplu alelic identic (CC sau cc) este homogametic, formnd prin meioz un singur tip de gamei (C,C respectiv c,c). El va exprima fenotipic caracterul C (n cazul genotipului CC), respectiv c (in cazul cc); O diferite (Cc), persoana este heterozigot i heterogametic (formeaz n urma meiozei dou tipuri de gamei diferii: C i c), iar exprimarea fenotipic a caracterului este dat de relaia dintre gene. Aceast relaie poate fi de dominan-recesivitate sau de codominan. Gena dominant se noteaz convenional cu majuscul C, n cazul dat i se exprim ntotdeauna fenotipic (att n caz de homozigoie CC, ct i de heterozigoie Cc). Gena recesiv se noteaz convenional cu liter mic (c) i se va exprima numai n stare de homozigoie (cc) (Fig. nr. 2.2.).

Fenotip: caracterul c

Caracterul C

Caracterul C

Genotip: homozigot (cc)

Heterozigot Cc

Homozigot CC

Fig. nr. 2.2. Gene alele C,c care controleaz caracterele C i c aflate n relaie de dominan-recesivitate

Pentru a nelege relaiile dintre alele, precum i posibilitatea acestora de a se exprima fenotipic, vom exemplifica, n continuare, printr-un caracter monogenic foarte complex, grupul sangvin n sistemul genetic ABO. El este controlat de trei alele situate pe braul lung al cromozomului 9 uman (9q34). Existena mai multor tipuri de alele cu potenial de ocupare a aceluiai locus este un fenomen numit polialelie (alelie multipl). n cazul dat, alelele sunt A, B, O. Relaia dintre ele este de: dominan-recesivitate, ntre genele A sau B, i O; codominan (dominan reciproc), ntre genele A i B. Alelele A i B sunt dominante n raport cu alela O, recesiv. Reamintim c, fiind monogenic, la un individ, acest caracter este condiionat de un cuplu alelic dou alele identice sau diferite, plasate pe cromozomi omologi n loci omologi : (AA, BB, OO), respectiv (AB, OA, OB).

58

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

Caracterul de grup sangvin A este dat fie de genotipul homozigot AA, fie de cel heterozigot AO. n cazul prezenei simultane a alelelor dominante A i B, ambele se vor exprima fenotipic, iar individul va fi din punct de vedere genotipic, heterozigot, iar fenotipic va avea caracterul de grup sangvin AB (Fig. nr. 2.3).

Poziia genei pe cromozom (locus)

cromozomi omologi

Fenotip A homozigot AA

Fenotip A dominanrecesivitate

Fenotip AB (codominan)

Fig . nr. 2.3. Relaiile de dominan-recesivitate i codominan ntre gene alele i exprimarea lor fenotipic

Orice individ poate fi homozigot pentru un numr de gene i heterozigot pentru altele. Acesta este un concept fundamental n genetic, prin care se explic legile mendeliene la nivel individual i populaional. Populaia mendelian se caracterizeaz prin reproducere sexuat. Indivizii care o alctuiesc provin din cte 2 genitori diferii genetic, unirea partenerilor din cuplu fcndu-se ntmpltor. Pentru aceast populaie importana biologic i genetic este dat de panmixie (genitori ndeprtai din punct de vedere genetic, ntre care, prin ncruciare liber, se realizeaz un amestec nestingherit de gene). Astfel, se asigur descendenilor o rat crescut de genotipuri individuale, caracteristic populaiilor mari. Pentru a nelege cum se transmit genele de la printe la copil de-a lungul generaiilor, vom studia legile lui Mendel*. Mendel a realizat o serie de experiene de hibridare (ncruciare ntre indivizi care se deosebesc prin unul sau mai multe caractere) pe mazrea de grdin (Pisum sativum), cu scopul de a observa mecanismele ereditii. Rezultatele ncrucirii ntre plante cu caracteristici fenotipice diferite, ca nlime, form, culoarea bobului i a florii, i-au permis s explice transmiterea caracterelor de la o generaie la alta. Rezultatele studiilor sale au fost publicate n Buletinul Societii de Istorie Natural din Brnn i au fost intitulate Experienele hibridrii la vegetale. * Gregor Johann Mendel (1822-1884) clugr austriac, considerat printele geneticii, cel care a
descoperit principiile de baz ale ereditii caracterelor.

GENETICA UMAN

59

Legilor lui Mendel li s-a acordat puin atenie la vremea respectiv. Dup redescoperirea lor la animale i n urma cercetrilor asupra mitozei i meiozei, geneticienii au artat c la toate eucariotele care se reproduc sexuat, transmiterea caracterelor normale sau patologice de la o generaie la alta se supune acelorai legi. n limbaj genetic actual, premisele lui Mendel sunt urmtoarele: 1. Fiecare caracter al unui organism este controlat de o pereche de gene, numite alele. 2. Pentru un caracter dat, organismul are dou alele, una de origine matern i cealalt de origine patern; 3. Cnd alelele pentru un anumit caracter al organismului nu sunt identice, una se poate exprima fenotipic (alela dominant), iar cealalt rmne n stare ascuns (alela recesiv); 4. n timpul meiozei, perechea de gene alele segreg (se separ) i fiecare gamet primete cte o gen din perechea iniial (principiul segregrii sau legea puritii gameilor); 5. n timpul meiozei, fiecare gamet poate primi cte o gen din fiecare pereche de gene alele, formndu-se n gamei combinaii aleatorii de gene (principiul segregrii i asortrii independente); 6. Fiecare alel se transmite de la o generaie la alta ca o unitate discret. Concluziile experimentelor lui Mendel au fost traduse de-a lungul timpului de ctre specialitii geneticieni n mai multe legi mendeliene. Azi, n lume, dou sunt unanim recunoscute ca fiind legile mendeliene ale ereditii, toate celelalte principii i ipoteze fiind ns pe deplin acceptate. LEGEA 1 Legea segregrii unui cuplu de caractere, dominant i recesiv, la hibrizii celei de-a doua generaii, n raport fenotipic de 3:1. Legea se refer la indivizii ce se deosebesc printr-un singur caracter, monogenic, controlat de o pereche de alele ntre care exist o relaie de dominan - recesivitate. Pentru exemplificare vom alege caracterul de grup sangvin n sistem ABO, descris anterior. Reamintim c genele A i O se afl ntr-o relaie de dominan-recesivitate. Considerm doi genitori homozigoi, unul de grup sangvin A (genotipic: AA), i cellalt de grup O (genotipic: OO). Ei aparin generaiei parentale (P). Descendenii lor vor aparine primei generaii F1. Ei vor fi uniformi att fenotipic grup sangvin A, ct i genotipic heterozigoi, AO. Astfel este demonstrat principiul mendelian al uniformiii hibrizilor n generaia F1, cnd prinii sunt homozigoi (AA, respectiv OO) pentru acel caracter unul avnd caracterul dominant, cellalt, recesiv. Prin ncruciarea indivizilor din generaia F1, va reaprea n generaia F2, fenotipul recesiv O n proporie de 1:4, gena O neexprimndu-se dect n stare homozigot OO. n generaia F1 gena O nu s-a exprimat fenotipic, fiind n stare heterozigot AO. n generaia F2 apar, astfel, indivizi similari generaiei parentale: AA i OO, dar i generaiei F1: AO. Se poate afirma, deci, c n generaia F2 caracterele segreg prima lege mendelian. Raportul de segregare fenotipic este specific 3:1, caracteristic relaiei dominan-recesivitate ntre genele alele (Fig. nr. 2.4.).

60

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

P AA 00

Gamei

F1 A0

A 0 F2 A0 00 AA

Gameii sunt haploizi, au o alel din perechea iniial, deci puri din punct de vedere genetic. Genotipic:100% heterozigoi Fenotipic: 100%A Principiul uniformitii hibrizilor n F1. Descendenii au acelai fenotip i genotip. 0

A0

Genotipic: 50% heterozigoi, 50% homozigoi; Fenotipic: 75% A i 25% 0. n F2 caracterele segreg n raport fenotipic 3D: 1r.

Fig. nr. 2.4. Relaia de dominan-recesivitate ntre alele i segregarea caracterelor n F2

n cazul n care alelele ce controleaz caracterul monogenic se afl in relaie de codominan, raportul de segregare se schimb. Pentru exemplificare, vom folosi caracterul ales mai sus. Considerm doi indivizi homozigoi, unul de grup sangvin A, iar cellalt de grup B, care aparin generaiei parentale. Descendenii acestora, aparinnd generaiei F1, vor fi uniformi att fenotipic grup sangvin AB, ct i genotipic heterozigoi, AB. Descendenii generaiei F1 generaia F2 vor prezenta trei fenotipuri diferite: grup sangvin A, AB i B, cu un raport de segregare 1:2:1, caracteristic relaiei de codominan a genelor alele (Fig. nr. 2. 5.).

GENETICA UMAN

61

P AA BB

Gamei

F1 AB

Genotipic: heterozigoi 100% Fenotipic: 100%AB

A B F2 AB BB AA

A B Genotipic: heterozigoi 50%, homozigoi 50% Fenotipic: 1A:2AB:1B

AB

Fig. nr. 2.5. Relaia de codominan i segregarea caracterelor n F2

LEGEA 2 Legea asortrii independente a caracterelor (pentru dou caractere mendeliene genele se motenesc independent). Aceast lege poate fi demonstrat prin ncruciarea indivizilor care se deosebesc ntre ei prin dou caractere fenotipice, ncruciare denumit dihibridare. Caracterele se transmit independent unul de altul, ereditatea primului caracter nu influeneaz ereditatea celui de-al doilea. Condiia necesar i suficient pentru verificarea segregrii i asortrii independente a cromozomilor este ca perechile de caractere s fie controlate de cupluri alelice situate pe cromozomi diferii. Mendel a observat c, n a doua generaie F2, fiecare cuplu de caractere este prezent n aceeai proporie de 3:1, dat de Legea 1 mendelian.

62

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

Pentru exemplificare, vom alege dou caractere monogenice: grup sangvin n sistem ABO, controlat de un cuplu alelic situat pe cromozomul 9 uman, i caracterul de gusttor, dat de abilitatea de a simi gustul amar la PTC (fenil-tio-carbamida) i controlat de un cuplu alelic (G, g) situat pe cromozomul 5 uman. Genele G i g se afl n relaie de dominanrecesivitate. Indivizii care posed n genotip alela G sunt considerai gusttori (simt gustul amar al PTC-ului), n timp ce homozigotii gg sunt negusttori. Considerm doi genitori dublu homozigoi, unul de grup sangvin A i gusttor (AA; GG), i cellalt de grup O i negusttor, (OO, gg). Ei aparin generaiei parentale (P). Descendenii lor vor aparine primei generaii F1. Ei vor fi uniformi att fenotipic grup sangvin A i gusttori, ct i genotipic-dublu heterozigoi (AO; Gg). Astfel este demonstrat principiul mendelian al uniformitii hibrizilor n generaia F1, cnd prinii sunt homozigoi pentru un caracter unul avnd caracterul dominant, cellalt, recesiv. (Tabelul nr. 2.1.) n urma anafazei meiozei primare, cromozomii omologi segreg i se asorteaz independent (vezi meioza pag. 20). Astfel, putem distinge 4 tipuri de gamei: AG, OG, Ag, Og, produse de indivizii generaiei F1. Prin combinarea aleatorie a gameilor vor rezulta n generaia urmtoare, F2, patru fenotipuri diferite: grup sangvin A i gusttor; grup sanguin A i negusttor; grup sangvin O i gusttor; grup sangvin O i negusttor. Celor patru fenotipuri amintite le vor corespunde din punct de vedere genotipic mai multe combinaii ntre perechile de alele (Fig. nr. 2.6.). Fenotip Grup sangvin A, gusttor Genotip AO Gg AA Gg AO GG AA GG AO gg AA gg OO GG OO Gg OO gg

Grup sangvin A, negusttor Grup sangvin O, gusttor Grup sangvin O, negusttor

Fig. nr. 2.6. Fenotipuri i genotipuri posibile la descendenii unui cuplu AAGG X OOgg

Din Fig. nr. 2.7. se poate observa cum cromozomii purttori ai genelor studiate au segregat i s-au asortat independent n generaia F2. Se poate calcula i matematic ansa de apariie a unui fenotip, tiind deja c cele dou caractere segreg independent (Legea 2), cunoscnd raportul dintre alelele care controleaz caracterele (dominan-recesivitate, codominan) i, de asemenea raportul de segregare (Legea 1).

GENETICA UMAN

63

Fig. nr. 2.7. Dihibridarea: segregarea i asortarea independent a caracterelor n F2

Exemplu: calculul matematic al ansei de apariie a fenotipului: grup A i negusttor n generaia F2. Dac se iau n considerare ambele caractere (grup sangvin A i negusttor), rezultatele vor fi conforme modelului matematic prin care dou fenomene independente acioneaz mpreun. Pe baza calculului probabilitilor, ansa apariiei simultane a dou fenomene independente care acioneaz mpreun este egal cu produsul probabilitilor lor separate. Dup cum am vzut, caracterele segreg independent, deci ne putem ocupa pe rnd de fiecare: 3/4 ansa de apariie a fenotipului A; 1/4 ansa de apariie a fenotipului negusttor. Per total, ansa de apariie a unui individ de grup sangvin A i negusttor va fi 3/4Ax1/4 negusttor.

64

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

Aplicaii practice : excluderea paternitaii n medicina legal determinarea ansei de apariie a unui descendent cu un anumit caracter, cunoscndu-i ascendena riscul de apariie a unei boli cu ereditate monogenic n descendena unui cuplu afectat n probleme legate de adopie, n medicina legal
Bibliografie 1. Corcos, A.F. & Monaghan, F.V. (1993) Gregor Mendels experiments on plant hybrids. Rutgers Univ. Press, New Brunswick. 2. Severin Emilia (1996) Ereditatea caracterelor. Elemente de curs, Editura Scripta, pg. 15-25. O Web site: http://www.purrchon.com/biology/mendel.htm

GENETICA UMAN

65

LUCRAREA PRACTIC 2: Modele de transmitere a caracterelor mendeliene

Obiectivele lucrrii
identificarea diferitelor tipuri de transmitere a caracterelor mendeliene; caracterizarea modelelor de transmitere; particularitile riscului de recuren.

Ereditatea monogenic
Un caracter uman normal sau patologic, condiionat monogenic, poate fi determinat fie de o singur gen mutant (anormal), fie de o pereche de gene mutante (alele). Caracterele conditionate monogenic sunt ereditare i se transmit n succesiunea generaiilor, n conformitate cu legile lui Mendel (ereditate monogenic).

Ereditatea monogenic autozomal

Caracterele genetice cu determinism monogenic autozomal sunt controlate de o gen mutant (anormal) poziionat pe un cromozom autozom ( perechile de cromozomi 1-22). Caracterele ereditare autozomale pot fi dominante sau recesive. Dominana i recesivitatea sunt un concept arbitrar, care se refecopii r numai la manifestarea bolnavi An fenotipic a genei, nu i la activitatea ei primar. O Ereditatea autozomal dominant Caracterele genetice, normale sau patologice, cu determinism monogenic autozomal dominant sunt controlate de o copil singur gen mutant normal (anormal) dominant, mam nn poziionat pe un cromonormal zom autozom (perechile nn de cromozomi 1-22). Aceste caractere se Fig. nr. 2.8. Segregarea unei gene autozomal dominante n cazul cstomanifest n mod egal la riei dintre o persoan sntoas (homozigot normal: nn) i o persoan ambele sexe (Fig. nr. 2. 8.). bolnav (heterozigot bolnav: An) tat bolnav An copil normal nn

66

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

Ereditatea autozomal dominant este expresia unei singure gene autozomale n form heterozigot sau homozigot. Dac este vorba de o gen mutant, aceasta se va exprima doar n forma heterozigot, deoarece genele mutante dominante sunt foarte rare. n plus, expresia lor fenotipic n stare homozigot este foarte sever, chiar uneori letal, ceea ce explic frecvena extrem de rar a indivizilor homozigoi. n concluzie, pentru caracterele autozomal dominante rare, persoanele afectate, indiferent de sex, sunt totdeauna heterozigote .

Ereditatea autozomal dominant prezint urmtoarele particulariti:

este determinat de o alel dominant, situat pe una dintre perechile de cromozomi autozomi; caracterul respectiv, normal sau patologic, se manifest n mod egal la ambele sexe; caracterul se evideniaz n mod constant, fiind prezent n toate generaiile; indivizii care prezint caracterul respectiv, normal sau patologic, au cel puin un printe cu acelai caracter; individul heterozigot va transmite gena la jumtate dintre descendenii si, indiferent de sex; individul sntos nu transmite afeciunea la descendeni; mutaiile autozomal dominante n stare heterozigot, au consecine mai putin severe dect cele autozomal recesive sau cele recesive legate de sex; riscul de recuren este mare: 50% cnd unul dintre prini este heterozigot i 75% cnd ambii prini sunt heterozigoi; riscul de recuren depinde de: homozigoia sau heterozigoia printelui afectat i de numrul prinilor afectai (Tabelul nr. 2.1.); caracterele respective se pot manifesta oricnd n timpul vieii (dar cele mai multe sunt decelabile la natere); n aceeai familie severitatea manifestrilor clinice poate varia de la individ la individ; prevalena este de 1% din nou-nscui. Anomaliile dentare i oro-maxilo-faciale cu transmitere autozomal dominant Dentinogenesis imperfecta tipurile I-III Amelogenesis imperfecta tipul hipocalcificat Dinii supranumerari Diastema vera Hipoplazia rdcinilor dentare Displazia dentinar tipurile I-III Despictura labial palatin Despictura palatului moale Despictura palatin Anchiloglosia Lueta bifid Nasul bifid

GENETICA UMAN
Tabelul nr. 2.1. Combinaiile gametice, teoretic posibile, pentru o alel dominant

67

68

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

Ereditatea autozomal recesiv

Caracterele genetice, normale sau patologice, cu determinism monogenic autozomal recesiv sunt controlate de o singur gen mutant (anormal) recesiv, poziionat pe un cromozom autozom (perechile de cromozomi 1-22). Aceste caractere se manifest n mod egal la ambele sexe. Ereditatea autozomal recesiv este expresia unei singure gene autozomale numai n form homozigot. Subiecii heterozigoi pentru gena mutant recesiv sunt clinic sntoi, iar genetic sunt purttori. Pentru ca gena mutant autozomal recesiv s se exprime fenotipic este necesar ca individul s moteneasc aceeai gen mutant de la fiecare dintre prinii si , obligatoriu heterozigoi. Caractere umane, normale sau patologice, cu determinism monogenic autozomal recesiv apar destul de frecvent. Genele mutante (anormale) recesive sunt asociate cu anomalii grave, deoarece ele se exprim fenotipic numai n stare homozigot (Fig. nr. 2 .9.). Ereditatea autozomal recetat copil siv prezint urmtoarele purttor sntos particulariti: este determinat de o alel Na NN anormal, recesiv, situat pe una dintre perechile de cromozomi autozomi; caracterul respectiv, normal sau patologic, se manifest n mod egal la ambele sexe; de obicei, apare ntro singur generaie, n care sunt copii afectai mai muli frai; purttori n general, prinii sunt Na indemni; pentru ca un individ s fie afectat, trebuie ca, din punct de vedere genotipic, s fie obligatoriu homozimam got pentru alela respectiv; copil purttoare indivizii heterozigoi sunt bolnav Na denumii purttori sntoi; aa purttorii sntoi nu preFig. nr. 2 9. Segregarea unei gene autozomal recesive n cazul zint caracterul respectiv, cstoriei dintre dou persoane dar transmit alela anormal purttoare sntoase (heterozigote: aN) la descendeni; cu ct mutaia este mai rar, cu att este mai important consangvinitatea prinilor (fenomenul este denumit consangvinitate prin descenden); ansa ca doi indivizi consangvini s aib aceeai gen este direct proporional cu gradul de rudenie. Aceast probabilitate se numete coeficient de consangvinitate; pentru ca un individ s fie afectat trebuie ca cel puin ambii prini s fie purttori sntoi; n acest caz, riscul de recuren pentru fiecare produs de concepie este de 25%; expresivitatea intrafamilial este mult mai puin important dect n tulburrile autozomal dominante; penetrana este, de obicei, complet; prevalena este de 23,5; riscul de recuren depinde de structura genetic a prinilor (Tabelul nr. 2.2.).

GENETICA UMAN
Tabelul nr. 2.2. Combinaiile gametice, teoretic posibile, pentru o alel recesiv

69

70

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE Anomaliile dentare i oro-maxilo-faciale cu transmitere autozomal recesiv Anodonia dinilor permaneni; Amelogenesis imperfecta tipul local hipoplazic i tipul hipomatur; hipopigmentat; Dini digeminai; Taurodonia.

Ereditatea monogenic legat de sex

Caracterele genetice, normale sau patologice, cu determinism monogenic legat de sex sunt controlate de o gen mutant (anormal) poziionat pe un cromozom sexual (X sau Y). Aceste boli se clasific n dou categorii: boli cu transmitere monogenic legat de cromozomul X (dominante i recesive) i boli cu transmitere monogenic legat de cromozomul Y (ereditate holandric). Genele de pe cromozomii sexuali sunt distribuite inegal la brbai i la femei n cadrul unei familii: brbaii au un cromozom X i un cromozom Y, iar femeile au doi cromozomi X. Pe cromozomul Y singurele gene cunoscute ca fiind active sunt cele implicate n sexualizare. Aceast inegalitate produce modele de transmitere caracteristice, cu diferene mari n ceea ce privete fenotipul anormal la brbai i la femei. Modelul de transmitere depinde de cromozomul sexual care poart gena mutant (X sauY) i de modul de exprimare a genei, dominant sau recesiv.

Ereditatea monogenic legat de cromozomul X

Pe cromozomul X se gsesc att gene normale, ct i gene mutante. Transmiterea genelor situate pe cromozomul X n descenden se numete ereditate legat de cromozomul X. Genele plasate pe X controleaz caractere dominante sau recesive. Din totalul caracterelor umane mendeliene, 6,5 % sunt legate de cromozomul X.

Ereditatea recesiv legat de cromozomul X

Un caracter, normal sau patologic, cu transmitere recesiv legat de cromozomul X este determinat de o gen localizat pe cromozomul X, care se exprim fenotipic la sexul feminin numai in form homozigot, deci n doz dubl. La sexul masculin, simpla prezen a genei respective pe unicul cromozom X face ca aceasta s se exprime fenotipic, deoarece pe cromozomul Y nu exist alela ei care si contracareze aciunea. Dac unicul cromozom X poart gena normal pentru un caracter, atunci fenotipul individului de sex masculin este normal; dac pe unicul cromozom X se gsete gena pentru un caracter anormal, atunci fenotipul individului este anormal, iar din punct de vedere genotipic este hemizigot (Fig. nr. 2.10.)

GENETICA UMAN
Tatl prezint gena anormal pe cromozomul X Mama prezint gena normal pe ambii cromozomi X

71

Genitori:

Xa Y

XN XN

Descendeni:

Xa XN purttoare

Xa XN purttoare

XN Y

XN Y

Fig. nr. 2 .10. Segregarea unei gene recesive Xlinkate n cazul cstoriei dintre un brbat afectat (Xa Y) i o femeie sntoas (XN XN)

Ereditatea recesiv legat de cromozomul X prezint urmtoarele particulariti: este determinat de o alel anormal, recesiv, situat pe cromozomul X; afecteaz, cu predilecie, indivizii de sex masculin; brbaii care prezint alela mutant anormal pe unicul lor cromozom X sunt bolnavi; pentru ca o persoan de sex feminin s fie bolnav, ea trebuie s fie obligatoriu homozigot pentru alela mutant anormal; femeile heterozigote sunt purttoare sntoase, clinic normale; prezint alela anormal, dar nu o exprim fenotipic; niciodat afeciunea nu se transmite de la tat la fiu; pentru ca un biat s fie bolnav, trebuie ca cel puin mama s fie purttoare sntoas; dac mama este purttoare sntoas, fetele vor fi fenotipic sntoase, iar bieii vor fi 50% bolnavi i 50% sntoi; dac tatl este bolnav, toi copiii lui vor fi fenotipic sntoi, dar fetele vor fi heterozigote, purttoare sntoase; consecinele clinice sunt extrem de polimorfe; n cteva tulburri, femeile sunt constant purttoare sntoase (este cazul hemofiliei); expresivitatea intrafamilial a brbailor afectai este redus; expresivitatea la femeile purttoare sntoase este relativ mare; prevalena este de 0,52% (cu excepia daltonismului); riscul de recuren depinde de structura genetic a prinilor (Tabelul nr. 2.3.).

72

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

Tabelul nr. 2.3. Combinaiile gametice, teoretic posibile, pentru o alel recesiv Xlinkat

Anomaliile dentomaxilare cu transmitere recesiv legat de cromozomul X izolate: Amelogenesis imperfecta tipul hipomatur cu dini acoperii de zpad Despictura palatin asociate unor sindroame ereditare: Displazia ectodermal hipohidrotic Sindromul EhlerDanlos tipul V Sindromul Lujan Sindromul Prieto

GENETICA UMAN

73

Ereditatea dominant legat de cromozomul X Un caracter, normal sau patologic, cu transmitere dominant legat de cromozomul X este determinat de o gen localizat pe cromozomul X, care se exprim fenotipic la sexul feminin att n forma homozigot, ct i n forma heterozigot. La sexul masculin, prezena genei respective pe unicul cromozom X face ca aceasta s se exprime fenotipic (Fig. nr. 2.11.). La nivelul cromozomului X sau identificat puine gene mutante dominante.
Tatl prezint gena anormal pe cromozomul X Mama prezint gena normal pe ambii cromozomi X

Genitori:

XA Y

Xn Xn

Descendeni:

XA Xn bolnav

XA Xn bolnav

Xn Y sntos

Xn Y sntos

Fig. nr. 2.11. Segregarea unei gene dominante X linkate in cazul cstoriei dintre un brbat afectat (XA Y) i o femeie sntoas (Xn Xn)

Ereditatea dominant legat de cromozomul X prezint urmtoarele particulariti: este determinat de o alel anormal, dominant, situat pe cromozomul X; afecteaz cu predilecie, persoanele de sex feminin; dac mama este bolnav, ea va avea att biei, ct i fete afectate; raportul dintre copiii afectai i cei normali este de 1:1, la fel ca n ereditatea autozomal dominant; femeile homozigote pentru un caracter dominant sunt rar ntlnite, de aceea femeile afectate sunt considerate heterozigote; brbaii bolnavi (hemizigoi) prezint un fenotip clinic mult mai sever dect al femeilor afectate, heterozigote; dac tatl este bolnav, va transmite afeciunea tuturor fiicelor lui, care vor fi bolnave; niciodat afeciunea nu se transmite de la tat la fiu; n fratrie apar numeroase avorturi spontane; riscul de recuren depinde de structura genetic a prinilor (Tabelul nr. 2.4.).

74

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

Tabelul nr. 2.4. Combinaiile gametice, teoretic posibile, pentru o alel dominant Xlinkat

GENETICA UMAN Anomaliile dentomaxilare cu transmitere dominant legat de cromozomul X izolate: Amelogenesis imperfecta X linkat dominant asociate unor sindroame ereditare: Incontinentia pigmenti Sindromul orofaciodigital tip I

75

Ereditatea monogenic legat de cromozomul Y (ereditatea holandric)

Un caracter, normal sau patologic, cu transmitere legat de cromozomul Y este determinat de o gen localizat pe acest cromozom. Aceast gen se exprim fenotipic doar la persoanele de sex masculin, deoarece ea se afl n doz unic n genotip, pe cromozomul X neexistnd un alt locus omolog (Fig. nr. 2.12.). Un caracterul condiionat de o gen localizat pe cromozomul Y este numit caracter legat de cromozomul Y sau caracter holandric (strict brbtesc).
Tatl prezint gena anormal pe cromozomul Y Mama prezint gena normal pe ambii cromozomi X

Genitori:

XYa

XX

Descendeni:

XX sntoas

XX sntoas

X Ya bolnav

X Ya bolnav

Fig. nr. 2.12. Segregarea unei gene Y linkate n cazul cstoriei dintre un brbat afectat (X Ya) i o femeie sntoas (X X)

Ereditatea legat de cromozomul Y prezint urmtoarele particulariti: este determinat de o alel anormal, situat pe cromozomul Y; afecteaz numai brbaii; brbaii bolnavi transmit alela anormal numai fiilor lor, care vor fi i ei bolnavi (transmitere din tat n fiu) (Tabelul nr. 2.5.).

76

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

Tabelul nr. 2.5. Combinaiile gametice, teoretic posibile, pentru o alel Ylinkat

Anomalii dentomaxilare condiionate monogenic, legat de cromozomul Y, nu au fost nc precizate, dei pe cromozomul Y se gsete gena implicat n sinteza factorului de cretere dentar.

Importana studiului:
n cazul unei boli genetice cu transmitere mendelian, se stabilete modelul de transmitere genetic a respectivei boli n familia studiat: autozomal dominant, autozomal recesiv, sau legat de sex.
Bibliografie: 1. Severin Emilia (1996) Genetic uman , Editura Scripta, Bucureti, pg.6079. 2. Connors JM., FergusonSmith MA (1997) Essential Medical Genetics, Blackwell Science Publications, Oxford, pg.6982. O Web site: http://www.medlab1.unm.edu:10000/block/genetics/case%20exhibits/Lecture%20Support%

GENETICA UMAN

77

LUCRAREA PRACTIC 3: Metoda arborelui genealogic

Obiectivele lucrrii:
culegerea de date despre istoria individual i familial a probandului; construirea de arbori genealogici; utilizarea metodei arborelui genealogic cu scopul de a prevedea fenotipurile i genotipurile posibile ale descendenilor unei cstorii.

Definiie:
Metoda arborelui genealogic presupune realizarea unei diagrame familiale care cuprinde date legate de istoria i nsuirile ascendenilor, descendenilor i colateralilor familiei studiate.

Material i metod:
Metoda arborelui genealogic presupune parcurgerea a trei etape: 1. ancheta medico-biologic familial; 2. ntocmirea arborelui genealogic; 3. analiza arborelui genealogic. Ancheta medico-biologic familial const n completarea unei fie tip pentru malformaii congenitale sau boli ereditare (Plan pag. 84). Totdeauna ancheta familial pornete de la un caz iniial, denumit proband sau caz primar. Acesta, de regul, prezint un caracter particular, normal sau patologic, pentru care dorim s stabilim incidena familial i, eventual, caracterul su ereditar. Completarea fiei tip pentru malformaii congenitale sau boli ereditare pentru proband se face pe baza datelor anamnestice, a examenului clinic general pe aparate i sisteme, precum i pe baza investigaiilor de laborator, paraclinice i genetice specifice, adaptate fiecrui caz n parte (analiza cariotipului, examenul cromatinei sexuale, analiza dermatoglifelor, determinri cefalometrice). Dup completarea datelor referitoare la proband, se trece la investigarea celorlali membri ai familiei, care constituie: filiaia direct ascendena (prinii probandului, bunicii probandului pe linie matern i pe linie patern, strbunicii etc.) filiaia direct descendena (copiii probandului); filiaia colateral (fraii si surorile probandului, fraii i surorile prinilor probandului, bunicilor pe linie matern i pe linie patern, strbunicilor etc.). Pentru toi aceti membri ai familiei, direci i colaterali, se fac aceleai investigaii complete, ca i pentru proband, urmnd ca rezultatele lor s fie consemnate n fia pentru malformaii congenitale sau boli ereditare. Datele anamnestice furnizate de proband sau de ceilali membri ai familiei referitoare la antecedentele heredo-colaterale uneori pot comporta o serie de incertitudini sau neconcordane. n scopul realizrii unei anchete familiale corecte, se aplic metoda echilibrului de informaie, care difereniaz indivizii cunoscui de persoana interogat, de cei mai puin sau deloc cunoscui. Aceti indivizi au fost mprii n 3 clase, fiecare clas fiind nsoit de un anumit indice de informaie, care exprim valoarea informaiilor anamnestice obinute:

78

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

clasa 0 indivizi necunoscui de subiectul interogat indice 0 = absena afeciunii clasa 1 indivizi foarte puin cunoscui de subiectul interogat indice 1 = afeciune ndoielnic clasa 2 indivizi bine cunoscui de subiectul interogat indice 2 = afeciune afirmat de subiectul interogat clasa 3 subiect examinat de genetician indice 3 = afeciune constatat Este esenial ca informaiile culese s fie ct mai exacte i complete. De asemenea, nu trebuie omise indiciile importante, precum: avorturile spontane, nscuii mori, nscuii nelegitimi, cazurile de consangvinitate, informaii care nu totdeauna se dau de bunvoie. Toate aceste date se consemneaz n fia pentru malformaii congenitale sau boli ereditare. ntocmirea arborelui genealogic const n reprezentarea grafic a datelor consemnate n fia pentru malformaii congenitale sau boli ereditare, pe baza semnelor convenionale internaionale (Fig. nr. 2.13.).

brbat normal brbat bolnav nscut mort

femeie normal femeie bolnav trei femei sntoase decedat

avort spontan cstorie sex necunoscut

copil nelegitim cstorie consangvin fr urmai

femeie nsrcinat

gemeni dizigoi

gemeni monozigoi 3 copii rezultai dintr-o cstorie gemeni cu zigoie incert femeie purttoare (nu exprim defectul) purttor asimptomatic adoptat

proband

examinat personal divorat diagnostic prenatal cu avort selectat

Fig. nr. 2.13. Semne convenionale utilizate n construirea arborilor genealogici

GENETICA UMAN Reprezentarea grafic a arborelui genealogic parcurge urmtoarele etape: se ncepe totdeauna cu poziionarea probandului; se reprezint membrii filiaiei directe ascendente; se reprezint membrii filiaiei directe descendente; se reprezint membrii filiaiei colaterale.

79

Analiza arborelui genealogic presupune:

1. diagnosticarea tulburrilor genetice neereditare (a malformaiilor congenitale); 2. diagnosticarea bolilor genetice ereditare i stabilirea modului lor de transmitere genetic, n familia studiat. 1. n cazul bolilor genetice neereditare (malformaii congenitale), pe arborele genealogic se observ c, singurul individ afectat este probandul (caz sporadic) (Fig. nr. 2.14.).

Fig. nr. 2.14. Coloraia intrinsec secundar tratamentului cu tetraciclin

2. n aceste cazuri, pe arborele genealogic se observ c exist mai muli indivizi care prezint aceeai afeciune cu cea a probandului. n raport cu modul de distribuie a indivizilor afectai, n succesiunea generaiilor se descriu urmtoarele modele de transmitere genetic a bolilor ereditare: Transmiterea genetic autozomal dominant; Transmiterea genetic autozomal recesiv; Transmiterea genetic recesiv legat de cromozomul X; Transmiterea genetic dominant legat de cromozomul X; Transmiterea genetic legat de cromozomul Y (ereditatea holandric).
O

Transmiterea genetic autozomal dominant

Bolile cu transmitere genetic autozomal dominant prezint urmtoarele particulariti: sunt determinate de o alel anormal, dominant, situat pe una dintre perechile de cromozomi autozomi; afecteaz n mod egal ambele sexe;

80

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

pe arborele genealogic se transmit pe vertical sau n cascad (n generaii succesive); pentru ca un individ s fie afectat, trebuie ca unul dintre prini s prezinte aceeai afeciune; individul sntos nu transmite afeciunea la descendeni; riscul de recuren este mare: 50% cnd unul dintre prini este heterozigot i 75% cnd ambii prini sunt heterozigoi; expresivitatea este variabil n cadrul aceleiai familii; nu sunt consemnate cstorii consangvine. Dintre anomaliile dento-maxilare cu transmitere autozomal dominant, prezentm cteva cazuri ilustrative ale unor familii cu: Dentinogenesis imperfecta, tip II (Fig. nr. 2.15.); Dini supranumerari (Fig. nr. 2.16.); Diastema vera (Fig. nr. 2.17.). I II III IV

Fig. nr. 2.15. Arborele genealogic al unei familii cu Dentinogenesis imperfecta, tipul II, dinii apar opolesceni, de culoare albstruie sau maronie (transmitere autozomal dominant)

Inaintea tratamentului ortodontic

Dup tratamentul ortodontic

10 zile de la extracia supranumerarului

Fig. nr. 2.16. Arborele genealogic al unei familii cu dini supranumerari (transmitere autozomal dominant)

GENETICA UMAN I

81

II

III

IV
Fig. nr. 2.17. Arborele genealogic al unei familii cu diastema vera (transmitere autozomal dominant)
O

Transmiterea genetic autozomal recesiv

Bolile cu transmitere genetic autozomal recesiv prezint urmtoarele particulariti: sunt determinate de o alel anormal, recesiv, situat pe una dintre perechile de cromozomi autozomi; afecteaz n mod egal ambele sexe; nu afecteaz generaiile n succesiunea lor (transmitere saltatorie), ci mai mult n fratrie (transmitere orizontal); pentru ca un individ s fie fenotipic bolnav, trebuie ca, din punct de vedere genotipic, s fie obligatoriu homozigot pentru alela anormal (recesiv); indivizii heterozigoi pentru alela anormal sunt denumii purttori sntoi; purttorii sntoi nu manifest clinic boala, dar transmit alela anormal la descendeni; pentru ca un individ s fie bolnav, trebuie ca ambii prini s fie purttori sntoi; n acest caz, riscul de recuren pentru fiecare produs de concepie este de 25%; sunt consemnate cstorii consangvine; expresivitatea este constant n cadrul aceleiai familii. Dintre anomaliile dento-maxilare cu transmitere autozomal recesiv, prezentm cazul unei familii cu: Anodonia dinilor permaneni (Fig. nr. 2.18.). I
Anodonie

II III
Fig. nr. 2.18. Arborele genealogic al unei familii cu anodonie (transmitere autozomal recesiv)

82
O

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

Transmiterea genetic recesiv legat de cromozomul X Bolile cu transmitere recesiv legat de cromozomul X prezint urmtoarele particulariti: sunt determinate de o alel anormal, recesiv, situat pe cromozomul X; afecteaz cu predilecie indivizii de sex masculin; brbaii care prezint alela mutant anormal pe unicul lor cromozom X sunt bolnavi; pentru ca o persoan de sex feminin s fie bolnav, ea trebuie s fie obligatoriu homozigot pentru alela mutant anormal; femeile heterozigote sunt purttoare sntoase, clinic normale; prezint alela anormal, dar nu o exprim fenotipic; niciodat afeciunea nu se transmite de la tat la fiu; pentru ca un biat s fie bolnav, trebuie ca mama sa s fie purttoare sntoas; dac mama este purttoare sntoas, fetele vor fi fenotipic sntoase, iar bieii vor fi 50% bolnavi i 50% sntoi; dac tatl este bolnav, toi copiii lui vor fi fenotipic sntoi, dar fetele vor fi heterozigote, purttoare sntoase. Dintre anomaliile dento-maxilare cu transmitere recesiv legat de cromozomul X, prezentm cteva cazuri ilustrative ale unor familii cu: - Amelogenesis imperfecta tipul hipomatur cu dini acoperii de zpad (Fig. nr. 2.19.);

Fig. nr. 2.19. Arborele genealogic al unei familii cu Amelogenesis imperfecta tipul III C, smalul este alb i opac cu aspect de dini acoperii cu zpad (transmitere recesiv legat de cromozomul X)

Fig. nr. 2.20. Arborele genealogic al unei familii cu displazie ectodermal hipohidrotic (transmitere recesiv legat de cromozomul X)

GENETICA UMAN

83

Displazia ectodermal hipohidrotic se caracterizeaz printr-o multitudine de anomalii, care intereseaz: tegumentul, prul, glandele sebacee i sudoripare, globii oculari, masivul osos facial, dezvoltarea neuro-psiho-motorie i nu n ultimul rnd dinii. Anomaliile dentare multiple sunt reprezentate, n principal, de hipodonia pn la anodonia dinilor temporari i a celor permaneni, anomalii de form ale dinilor existeni, malpoziie i malocluzie, diasteme, microdonie, taurodonie, protruzia incisivilor, atrofie gingival (Fig.nr. 2.20.). Transmiterea genetic dominant legat de cromozomul X Bolile cu transmitere dominant legat de cromozomul X prezint urmtoarele particulariti: sunt determinate de o alel anormal, dominant, situat pe cromozomul X; afecteaz, cu predilecie, persoanele de sex feminin; dac mama este bolnav, ea va avea att biei, ct i fete afectate; raportul dintre copiii afectai i cei normali este de 1:1, la fel ca n ereditatea autozomal dominant; femeile homozigote pentru un caracter dominant sunt rar ntlnite, de aceea femeile afectate sunt considerate heterozigote; brbaii bolnavi prezint un fenotip clinic mult mai sever dect al femeilor afectate, heterozigote; dac tatl este bolnav, va transmite afeciunea tuturor fiicelor lui, care vor fi bolnave; niciodat afeciunea nu se transmite de la tat la fiu. Dintre anomaliile dento-maxilare cu transmitere dominant legat de cromozomul X, prezentm cazul unei familii cu: Amelogenesis imperfecta tipul IF. Brbaii afectai au un strat subire de smal, neted, aproape omogen ca aspect, dar care se fractureaz uor. Femeile afectate prezint un smal n benzi verticale, benzi de smal sntos care alterneaz cu benzi de smal afectat de distrofie. Ambele dentiii sunt afectate. (Fig. nr. 2.21.)
O

Fig. nr. 2.21. Arborele genealogic al unei familii cu Amelogenesis imperfecta tipul IF (transmitere dominant legat de cromozomul X)

Transmiterea genetic legat de cromozomul Y (ereditatea holandric)

Bolile cu transmitere legat de cromozomul Y prezint urmtoarele particulariti: sunt determinate de o alel anormal, situat pe cromozomul Y; afecteaz numai brbaii; brbaii bolnavi transmit alela anormal numai fiilor lor, care vor fi i ei bolnavi (transmitere din tat n fiu) (Fig. nr. 2.22.).

84

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

Importana studiului:

difereniaz o boal genetic neereditar (malformaie congenital) de o boal genetic cu transmitere ereditar; II n cazul unei boli genetice cu transmitere ereditar, se stabilete modul de transmitere genetic a respectivei III boli n familia studiat: autozomal dominant, autozomal recesiv, sau legat de sex. Bibliografie:

Fig. nr. 2. 22. Ereditatea holandric

1. Severin Emilia (1998) Genetica anomaliilor dentomaxilare la om , Editura Scripta, pg. 57-76. 2. Albu Cristina Crenguta, Albu Dinu Florin (2001) Displazia congenital ectodermal, Revista Medica, nr.8, pg. 34-35

Facultatea de Stomatologie Bucureti

Judeul ................................. Localitatea ............................ Unitatea sanitar .................. Tipul malformaiei .................

FI PENTRU BOLI GENETICE (anchet genealogic)

1. PROBANDUL Numele ................................................. prenumele ............................ sexul ........... Naionalitatea........................................ cetenia ............................... Data i locul naterii: anul ........... luna ........ ziua ........, localitatea ....................... Adresa actual ......................................................................................................... Profesia actual ....................................................................................................... Grup sangvin ...................... Rh ............. Date asupra primelor consultaii sau spitalizri ....................................................... ................................................................................................................................... ................................................................................................................................... ................................................................................................................................... Diagnosticul (descrierea bolii):

Existena n familia probandului: cstorii consangvine da/nu gemeni da/nu 2. PRINII PROBANDULUI MAMA Numele ...................................................... prenumele ............................................ Data i locul naterii ................................................................................................ Naionalitatea .......................................................... cetenia ................................

GENETICA UMAN

85

Domiciliul stabil ........................................................................................................ Profesia ..................................... Grup sangvin ...................... Rh ................ Vrsta la naterea probandului ..................... Tar identic cu a probandului ................................., alte afeciuni ........................ Sarcina: (embriopatii i fetopatii) Luna de sarcin rubeol . . . . . . . . . . . . . . . . radiaii alte boli . . . . . . . . . . . . . . . . carene alimentare intoxicaii . . . . . . . . . . . . . . sifilis nefropatii . . . . . . . . . . . . . . ncercri de avort tratamente . . . . . . . . . . . . . manevre avortive traumatisme . . . . . . . . . . . . intervenii chirugicale, alte accidente medicamente: antibiotice, tranchilizante, hipnotice, hormoni, antiparazitare, sulfamide, diverse. radioscopie pulmonar . . . . radiografie abdomino-pelvin ..................... radioterapie lombar sau pelvian ....................................................................... Naterea propriu-zis locul ......................................................... la termen: da/nu prematur postmatur spontan ......................... provocat .......................... forceps ......................... cezarian ........................ manevre de reanimare a nou-nscutului ................... oxigen ............................... greutatea i nlimea la natere ................................ Tatl mamei i fratria sa (bunicul pe linie matern)
Rang Sex Prenume Anul Anul Numele de familie Verii primari naterii decesului i adresa ai mamei Boli

Mama mamei i fratria sa (bunica pe linie matern)

Rang Sex Prenume Anul Anul Numele de familie Verii primari naterii decesului i adresa ai mamei Boli

Fraii i surorile mamei (unchii i mtuile probandului)

Rang Sex Prenume Anul Anul Numele de familie Verii primari Boli naterii decesului i adresa ai probandului

N.B. a se pune n eviden malformaiile, afeciunile familiale, nscuii mori, moartea prematur.

86

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

TATL Numele ............................................................... prenumele ................................... Data i locul naterii ................................................................................................. Naionalitatea .................................. cetenia ............................................ Domiciliul stabil ......................................................................................................... Profesia .................................................. Grup sangvin ........................ Rh ........................... Vrsta la naterea probandului Tar identic cu a probandului ................................ alte afeciuni ......................... Tatl tatlui i fratria sa (bunicul pe linie patern)
Rang Sex Prenume Anul Anul Numele de familie Verii primari naterii decesului i adresa ai tatlui Boli

Mama tatlui i fratria sa (bunica pe linie patern)

Rang Sex Prenume Anul Anul Numele de familie Verii primari naterii decesului i adresa ai tatlui Boli

Fraii i surorile tatlui (unchii i mtuile probandului)

Rang Sex Numele i Anul prenumele dului Anul naterii Numele de familie Verii primari decesului i adresa Boli ai proban-

3. FRATRIA PROBANDULUI: (a se indica avorturile, prematuritatea, nscuii mori, cazurile cu tare identice cu ale probandului)
Rang Sex Prenume Anul i locul naterii Anul i locul decesului Adresa Boli sau malformaii spitalizri

GENETICA UMAN

87

LUCRAREA PRACTIC 4: Caractere umane simple (mendeliene)

Obiectivele lucrrii:
examinarea fenotipului i sugerarea genotipului posibil n cazul unui caracter condiionat monogenic; observarea variaiei unui caracter monogenic prin compararea fenotipului i genotipului individual cu ale colegilor de grup. Multe caractere umane normale sau patologice par a fi condiionate genetic pentru c n cadrul unor familii se transmit constant n succesiunea generaiilor. Doar o parte dintre caracterele condiionate genetic se supun legilor ereditii mendeliene i au fost numite caractere simple. Un caracter simplu, condiionat de un singur locus genetic, este rezultatul aciunii unei singure gene. Se crede c expresia genei respective nu este afectat de mediul extern. Caracterul de gusttor PTC Variaia abilitii de a sesiza gustul amar al feniltiocarbamidei (PTC) a fost descoperit de chimistul A.L. Fox, n 1931. El a observat c anumii indivizi sesizeaz gustul amar al PTC, alii nu. A testat i ali compui nrudii ai PTC i observaiile sale au fost similare: indivizii umani sunt gusttori PTC sau negusttori. PTC i compuii chimici nrudii (6-n-propiltiouracil, izotiocianaii, pheniltioureea) prezint gruparea N - C = S, responsabil de gustul lor amar. S-a artat c abilitatea de a sesiza gustul amar al PTC indic un caracter biochimic polimorfic, caracterul fiind prezent n populaie n mai multe variante (gusttor negusttor). Caracterul este controlat de un singur locus situat pe cromozomul 5p15, ocupat de alela G sau alela g. Alela G se exprim dominant controlnd caracterul de gusttor, alela g se exprim recesiv controlnd caracterul de negusttor. ______________________________________________ Genotipuri Fenotipuri ______________________________________________ GG (homozigot dominant) gusttor PTC Gg (heterozigot) gusttor PTC gg (homozigot recesiv) negusttor ______________________________________________ Caracterul de gusttor PTC este catalogat n OMIM (Online Mendelian Inheritance in Man) la poziia*171200.

Testarea strii de gusttor PTC

Metodele de identificare a persoanelor sensibile la gustul amar al PTC sunt: metoda soluiilor cu concentraii cunoscute (Harris&Kalmus, 1949); metoda eantioanelor de hrtie mbibate cu PTC. Ambele metode au n vedere faptul c PTC este o substan cu prag gustativ.

Metoda soluiilor cu concentraii cunoscute

Principiu: identificarea pragului sensibilitii gustative a unui subiect. Materiale: eprubete, pipete Pasteur, pahare, cilindru gradat, ap distilat, cristale PTC, bec Bunsen.

88

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

Mod de lucru:
1. se prepar o soluie saturat, stoc, de PTC n ap distilat; 2. din soluia saturat se prepar alte 14 soluii cu concentraii progresiv descresctoare; 3. se iau 50 ml din soluia stoc i se amestec cu 50 ml ap distilat (de la 1,3 g PTC / litru, la 0,650 g PTC / l i, succesiv, se ajunge la 0,00016 g PTC/ litru de ap distilat). Toate soluiile trebuie s aib temperatura camerei n momentul testrii; 4. testarea subiectului ncepe cu soluia cea mai slab, picurnd cu pipeta 1-2 picturi la baza limbii subiectului; 5. subiectului i sunt prezentate, progresiv, variatele diluii, pn cnd acesta acuz gustul amrui; 6. dou pahare cu diluia critic i dou cu ap distilat sunt prezentate subiectului pentru a fi degustate, cerndu-i se s le recunoasc corect i s le aeze separat; 7. interpretare:  dac rspunsul subiectului este corect, atunci diluia respectiv reprezint pragul sensibilitii gustative a subiectului testat;  dac rspunsul este incorect, procedeul este repetat, continund cu soluia imediat urmtoare;  subiecii care percep gustul amar al unei soluii foarte diluate sunt gusttori, cei care percep gustul amar al unei soluii foarte concentrate sau nu-l percep deloc sunt considerai negusttori.

Metoda eantioanelor de hrtie mbibate n soluie PTC

Materiale necesare: eprubete, hrtie de filtru, PTC, ap distilat.

Mod de lucru:
1. se prepar o soluie saturat PTC n ap distilat; 2. fragmente de hrtie de filtru sunt mbibate cu aceast soluie i lsate apoi s se usuce; 3. un fragment de hrtie de filtru se aplic la baza limbii subiectului testat; 4. subiectul umezete hrtia de filtru cu saliv, o nltur i apoi nghite; 5. interpretare:  dac subiectul simte gustul amrui de la prima ncercare, atunci este considerat gusttor;  dac pentru subiectul testat PTC nu are nici un gust la o a doua ncercare, nseamn c este negusttor.

Ambele metode descrise sunt uor de realizat n practic i nu pun probleme subiecilor testai. n condiii de laborator, este preferat metoda soluiilor cu concentraii cunoscute, iar n depistarea fenotipurilor pe teren, metoda eantioanelor de hrtie. Testul se realizeaz pe un lot suficient de mare de persoane (100), de vrste (ntre 20 i 40 de ani) i sexe diferite. Separarea pe vrste i sexe a rezultatelor are la baz faptul c la femei pragul sensibilitii este ceva mai ridicat, iar o dat cu naintarea n vrst pragul sensibilitii scade. Rezultatele ntregului lot sunt aranjate sub forma unei histograme, observndu-se distribuia bimodal a caracterului n acel grup. Se determin concentraia prag, care mparte grupul n gusttori i negusttori.
O

Caracterul de gusttor PTC n populaiile umane

Studiile statistice populaionale arat c exist o distribuie geografic diferit a frecvenelor gusttorilor i negusttorilor. n Europa i Asia, frecvena gusttorilor este de circa 70%, restul fiind negusttori. n Africa, doar 3% dintre negri au inabilitatea de a simi gustul amar al PTC, restul fiind gusttori. Situaia este asemntoare i printre amerindieni.

GENETICA UMAN
O

89

Caracterul de gusttor PTC ca marker genetic

Markerul genetic reprezint o particularitate morfologic, biochimic, fiziologic a crei condiionare genetic este cunoscut i care permite identificarea naturii genetice a altor caractere comune. Compui naturali similari chimic cu PTC, cu gust amrui, se gsesc n varz, varz de Bruxelles, napi sau brocoli i au o aciune antitiroidian. Cnd aceste legume se consum n cantiti excesive, apare o tulburare a metabolismului iodului, care produce o mrire a tiroidei i simptome asemntoare guii adenomatoase. S-au observat incidena sczut a disfunciilor tiroidiene printre gusttori i predispoziia negusttorilor de a dezvolta gua toxic difuz i cretinismul atireotic. O alt asociere a fost observat ntre incidena sczut a cariilor n dentiia decidual i gusttorii PTC. Se crede c gusttorii PTC au n saliva lor o substan care inhib distrugerea bacterian a dinilor.

Factorul secretor (Se)

S-a observat c unele persoane elimin n saliv, mucus, sudoare, plasm i sperm, antigeni care corespund antigenilor lor de grup sangvin ABO. O persoan poate fi fenotipic secretor sau nesecretor n funcie de prezena sau absena antigenilor ABH n saliv, n secreii sau alte umori. Caracterul de secretor este un caracter fiziologic, mendelian, care se comport dominant fa de nesecretor. Gena secretor a fost notat cu Se i prezint o singur alel, notat cu se. Locusul ocupat de Se i se este pe cromozomul 19q13. _____________________________________________ Genotipuri Fenotipuri _____________________________________________ SeSe (homozigot dominant) secretor Sese (heterozigot) secretor sese (homozigot recesiv) nesecretor ______________________________________________ Factorul secretor este catalogat n OMIM la poziia*182100. Antigenii din umori sunt identici imunologic cu antigenii eritrocitari, dar din punct de vedere fizico-chimic se deosebesc. Antigenii din saliv i umori sunt hidrosolubili, iar antigenii eritrocitari sunt alcoolsolubili. Gena Se este o gen structural, care determin sinteza fucoziltransferazei 2, enzim implicat n formarea antigenilor ABH prezeni n saliva i umorile secretorilor (vezi pg. 157). Metodele de determinare a fenotipului secretor sau nesecretor sunt: metoda epuizrii serului; metoda fitoaglutinrii. Metoda epuizrii serului Materiale: eprubete, baie de ap, ser fiziologic, ser anti-A, ser anti-B Mod de lucru:
1. se recolteaz ntr-o eprubet de centrifug saliva subiectului care va fi testat; 2. saliva se pune rapid la fiert (cel mult o or de la recoltare) n baie de abur timp de 10 min. pentru a inactiva enzimele salivare care distrug antigenii eritrocitari; 3. se centrifugheaz i se reine supernatantul, din care se vor face diluii 1: 10 n ser fiziologic se introduc cte 0,1 ml din diluia respectiv n trei eprubete;

90

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

4. n primele dou eprubete se introduce ser anti-A i, respectiv, ser anti-B, eprubeta a treia fiind martorul; 5. se las 15 min. la temperatura camerei pentru a se produce absorbia serului; 6. se introduce cte o pictur suspensie hematii 2% n ser fiziologic, hematii de grup omolog, se las 1 or la temperatura camerei i se urmrete aglutinarea 7. interpretare:  dac saliva subiectului testat conine antigenul A sau B, nseamn c aglutinarea nu se produce pentru c antigenul prezent n saliv a epuizat serul, iar subiectul este secretor;  dac se produce aglutinarea, nseamn c saliva subiectului testat nu conine antigeni, deci subiectul este nesecretor.

Metoda fitoaglutinrii Materiale: eprubete de centrifug, lame cu godeu, ser fiziologic, fitoaglutinin, baie de abur Mod de lucru:
1. recoltarea i prelucrarea salivei au fost descrise n metoda precedent; 2. pe o lam cu godeu se pune o pictur de saliv i o pictur de fitoaglutinin*; 3. se las la temperatura camerei 10-15 min., timp necesar inhibrii fitoaglutininei; 4. se adaug hematii de grup O, se las 5 min. i se face citirea lamei; 5. interpretare:

 dac nu se produce aglutinarea, nseamn c substana anti-H a fost epuizat de antigenul H prezent n saliva subiectului testat, deci acesta este secretor;  dac se produce aglutinarea, nseamn c antigenul H lipsete din saliv, substana H rmne liber i aglutineaz cu hematiile de grup O, deci subiectul este nesecretor.

Factorul secretor este independent de caracterul de grup sangvin n sistemul ABO, astfel c pot exista indivizi de grup sangvin A secretori sau indivizi de grup sangvin A nesecretori, B secretori sau B nesecretori etc. Nu este obligatoriu ca un individ s prezinte antigenul A i la suprafaa eritrocitelor, i n umori. De exemplu, un individ de grup sangvin A (AA sau AO) poate fi secretor (SeSe sau Sese) sau nesecretor (sese).
O

Factorul secretor n populaiile umane

Frecvena secretorilor este de circa 80% n Europa continental i 76% n Anglia. n SUA frecvena secretorilor este de 80% printre albi i aproape 100% printre amerindieni. Eschimoii, australienii aborigeni i unele triburi din Noua Guinee au o frecven a secretorilor de aproape 100%. Studiile populaionale au artat c nesecretorii par a avea o susceptibilitate mai mare la mbolnvire comparativ cu secretorii care, avnd antigenii ABH n umori, mucus etc., sunt mai protejai mpotriva factorilor ambientali, n special microorganisme i lectine. Nesecretorii sunt mai puin rezisteni la infeciile cu Helicobater pylori (bacterie asociat cu ulcerul). Peste 48% dintre pacienii cu afeciuni orale (displazii) i carii dentare sunt nesecretori. Statistic, secretorii de grup A au cel mai mic numr de carii dentare.
* Fitoaglutinina este o substan anti-H extras din planta Ulex europeus.

GENETICA UMAN

91

Grupe sangvine
Exist numeroase sisteme de grup sangvin care au fost definite pe baza antigenilor (aglutinogenilor) localizai pe suprafaa eritrocitelor. Indivizii umani se deosebesc prin fenotipul grupelor sangvine, ceea ce implic existena unei importante variabiliti genetice. Fiecare sistem de grup sangvin este determinat de o alt gen sau de seturi diferite de gene. Antigenii diferii care pot fi exprimai n cadrul unui sistem, sunt rezultatul diverselor secvene de ADN ale genelor respective. O parte dintre sistemele de grup sangvin au o semnificaie medical special: n compatibilitatea de grup sangvin ntre donor-receptor n transfuziile de snge sau compatibilitatea mam-ft ( sistemul ABO, Rh). O alt parte sunt indispensabile transplantelor de organe (sistemul HLA).
O

Sistemul ABO

La om, transfuziile de snge au fost iniiate nc din 1818. Uneori, dup transfuzie primitorul avea o reacie hemolitic fatal. Misterul attor transfuzii de snge nereuite a fost explicat de medicul austriac Karl Landsteiner, n 1900, prin descoperirea antigenilor nativi ABO localizai pe suprafaa eritrocitelor. Sistemul de grup sangvin este condiionat de un singur locus distinct poziionat pe 9q34, locus care poate fi ocupat de una dintre cele trei alele notate IA, IB i IO. Fiecare individ uman poate avea doar dou dintre cele trei alele, cte una n fiecare locus de pe cromozomii omologi. Din acest motiv alelele sistemului ABO nu pot fi studiate dect n populaie. Tabelul nr. 2.6. indic posibilele fenotipuri i genotipuri ntr-o populaie.
Tabelul nr. 2.6. Relaia genotip-fenotip n cazul sistemului de grup sangvin ABO

____________________________________________________ Genotip Fenotip Anticorpi plasmatici ____________________________________________________ IA IA A anti-B A O A anti-B I I B B I I B anti-A B O I I B anti-A A B I I AB nici unul O O I I O anti-A i anti-B _____________________________________________________ Sistemul de grup sanguin ABO este catalogat n OMIM la poziia *110300. Alele IA i IB sunt dominante fa de IO i codominante ntre ele. Codominana modific raportul fenotipic de segregare al lui Mendel: un heterozigot are ambele alele, IA i IB, n genotip, alele care interacioneaz ntre ele, exprimnd un fenotip nou, AB. Prin examene serologice se determin grupa sangvin, adic prezena sau absena antigenilor ABO pe suprafaa eritrocitelor. Metoda de determinare a grupei sangvine Principiu: eritrocitele puse n contact cu un ser care are anticorpi corespunztori aglutineaz; aglutinarea celulelor arat prezena antigenelor i, deci, grupul sangvin cruia aparin.

92

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE Materiale necesare: sngele de analizat ser de grup A i B hematii de grup A i B lame de sticl Mod de lucru:
1. pe o lam se pune o pictur de ser de grup A (conine anticorpi anti-B) i o alt pictur de ser de grup B (conine anticorpi anti-A); 2. hematii ale sngelui de analizat se pun n picturi (de 10x sau 20x mai mici dect cele de ser) peste serul existent pe lam; 3. interpretarea rezultatelor:  lipsa aglutinrii n ambele cazuri stabilete grup O pentru c sngele analizat nu are nici un aglutinogen A, i nici B;  aglutinarea n pictura din dreapta stabilete grup A pentru sngele analizat (Fig.nr.2.23);  aglutinarea n pictura din stnga arat c sngele analizat este de grup B;  aglutinarea observat n ambele picturi arat c sngele analizat este de grup AB.

ser anti-A

ser anti-B

Fig. nr.2.23. Determinarea grupei sangvine prin metoda lamei; rezultatele indic un pacient de grup A.

Importana cunoaterii grupei sangvine n sistemul ABO compatibilitatea transfuziei de snge; incompatibilitatea grupei sangvine mam-ft (mama grup O i ftul grup A sau B); testele de determinare a zigoiei; testele de diagnosticare a paternitii; studii populaionale (vezi capitolul 4, Genetica i evoluia populaiilor umane).

Sistemul Rh

Ca i sistemul ABO, sistemul Rh este definit pe baza antigenilor prezeni pe suprafaa eritrocitelor. A fost numit Rh de ctre Landsteiner i Wiener, dup numele maimuei Rhesus, pe care au folosit-o ca animal de experien*. Persoanele care prezint acest antigen sunt Rh+, iar persoanele la care antigenul lipsete se numesc Rh-. n Europa i n America de Nord aproximativ 85% din populaie este Rh+, iar restul de 15% prezint Rh-. Sistemul Rh este condiionat de doi loci foarte apropiai aezai n tandem i plasai pe cromozomul 1p36 p34. Unul dintre loci a fost numit D i este ocupat de o gen structural RHD, care intervine n formarea antigenului Rh (antigenul D). Gena RHD nu prezint o alel recesiv RHd, dar genetic se comport ca i cnd ar exista. Cellalt locus a fost numit C i E i este ocupat de o alt gen structural RHCE**, implicat n formarea antigenilor C/c i E/e, antigeni slabi din punct de vedere imunologic.
maimuei Rhesus a fost injectat la iepuri, care au produs anticorpi fa de sngele maimuei. Eritrocite din sngele maimuei au fost amestecate cu serul iepurilor, observndu-se aglutinarea. Eritrocitele umane au fost puse n contact cu serul iepurilor, iar rezultatul a fost aglutinarea. Astfel s-a izolat un antigen prezent i pe suprafaa eritrocitelor maimuei Rhesus i la om, antigen denumit factor Rh. ** Mecanismul prin care apar polipeptide diferite codificate de o singur gen se numete prelucrare alternativ a transcriptului primar.
*Sngele

GENETICA UMAN

93

Caracterul de Rh+ este dat de prezena genei RHD n genotip i, implicit, prezena antigenului D pe suprafaa eritrocitelor. ____________________________________________ Genotip Fenotip _____________________________________________ RHD/RHD Rh+ RHD/RHd Rh+ RHd/RHd Rh______________________________________________ Sistemul Rh este catalogat n OMIM la poziia *11680. Metoda de determinare a factorului Rh Materiale necesare: ser standard (anti-D); snge de analizat; lame de sticl lefuite Mod de lucru:
1. pe o lam se pune o pictur de ser standard; 2. se adaug o pictur din sngele de analizat; 3. se las la termostat la 37C, timp de 30 de min.; 4. citirea i interpretarea rezultatelor: prezena aglutinrii indic snge Rh+; absena aglutinrii indic snge Rh .

(Uneori, se adaug i o pictur de albumin bovin 20% pentru a facilita aglutinarea) Importana cunoaterii sistemului Rh incompatibilitatea mam-ft (Fig. nr.2.24);

mama Rhft Rh+

Celule fetale Rh+ptrund n circulaia matern.

Mama este sensibilizat i produce anticorpi ().

ntr-o sarcin viitoare anticorpii mamei vor distruge celulele sangvine fetale.

Rh-

Rh+

Fig. nr. 2. 24. Dac un brbat Rh+ i o femeie Rh- concep un copil al crui Rh este pozitiv atunci organismul femeii va produce anticorpi anti Rh, care vor ataca celulele ftului ntr-o sarcin viitoare.

94

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

studii populaionale arat c frecvena genelor difer de la o populaie la alta i indic existena polimorfismului genetic (Tabelul nr. 2.7. Frecvena combinaiilor genotipice n sistemul Rh). _________________________________________________________ Genotip Frecvena (%) printre Fenotip caucazieni cde/cde 15 RhCDe/cde 32 Rh+ CDe/CDe 17 Rh+ cDE/cde 13 Rh+ Cde/cDE 14 Rh+ cDE/cDE 4 Rh+ Alte genotipuri 5 Rh+ sau Rh___________________________________________________________
O

Sistemul de grup sangvin MNS

Sistemul MN a fost descoperit n 1927 de ctre Landsteiner i Levine. Ei au detectat pe suprafaa eritrocitelor umane prezena a doi antigeni M i N, fie unul, fie cellalt, fie mpreun MN. n 1947 a fost descoperit de ctre Walsh i Montgomery un nou antigen eritrocitar de suprafa, numit S, antigen asociat sistemului MN. Studiile familiale au sugerat un linkaj genetic ntre genele sistemului MN i genele sistemului Ss. Genele MN i Ss sunt poziionate n loci foarte apropiai, dar separai, pe cromozomul 4 (4q28-q31). Genele sistemului MN se gsesc n relaie de codominan, n timp ce genele sistemului Ss sunt n relaie de dominan-recesivitate. Particularitatea acestor sisteme este c genele lor fiind linkate se transmit mpreun n descenden. Acest mod de transmitere nu se supune legilor lui Mendel i modific raportul fenotipic mendelian. De exemplu: _________________________________________________________ Soul Soia _________________________________________________________ fenotip MNS Ns __________________________________________________________ genotip MS/Ns Ns/Ns __________________________________________________________ M N N N configuraia alelelor S s s s __________________________________________________________ gamei MS; Ns Ns; Ns __________________________________________________________ genotipul descendenilor MS/Ns MS/Ns Ns/Ns Ns/Ns ___________________________________________________________ fenotipul descendenilor MNS MNS Ns Ns ___________________________________________________________ Se observ c raportul fenotipic de segregare al lui Mendel este modificat pentru c n descenden nu apar fenotipurile recombinate MNs i NS (genele nu segreg independent pentru c sunt linkate).

GENETICA UMAN

95

Aadar, ntr-o populaie genotipurile i fenotipurile sistemului de grup sangvin MNS sunt: __________________________________________ Genotip Fenotip __________________________________________ MS/NS sau MS/Ns sau Ms/NS MNS Ms/Ns MNs MS/MS sau MS/Ms MS Ms/Ms Ms NS/NS sau NS/Ns NS Ns/Ns Ns ___________________________________________ Sistemul MN este catalogat n OMIM la poziia *111300, iar sistemul Ss la poziia *111740. Metoda de determinare a grupei sangvine n sistemul MN Materiale necesare: ser anti-M, ser anti-N; snge de analizat; lame de sticl lefuite Mod de lucru:
1. pe o lam se pune o pictur de ser anti-M diluat i o pictur de ser anti-N diluat; 2. eritrocitele din sngele pacientului se picur peste serul anti-M i anti-N; 3. se ateapt 5-7 min. la temperatura camerei; 4. se citesc i se interpreteaz rezultatele:  aglutinarea n pictura de anti-M sau anti-N nseamn c sngele de cercetat este de grup M, respectiv N, iar aglutinarea n ambele picturi indic o persoan de grup MN.

Pentru determinarea grupei sangvine n sistemul Ss se procedeaz similar folosind ser anti-S i o suspensie de eritrocite (33 de picturi de ser fiziologic, la care se adaug o pictur de eritrocite din sngele pacientului). O Importana cunoaterii sistemului MNS studiul genetic al linkajului; studii populaionale; diagnosticul de paternitate.

Probe plasate ntr-o butonier Gel

Electrozi

Sistemul hemoglobinelor
Benzi colorate Hemoglobina este o protein globular cu dou perechi de indicnd poziia Hb lanuri polipeptidice i patru grupri hem, cte unul ataat Vas de fiecrui lan. Tipul de hemoglobin este determinat de secvena colorare Gel de aminoacizi a lanului polipeptidic. Diferitele tipuri de hemoglobine umane (Fig. nr.2.25. A- metoda de lucru; B - heterozigoi cu dou benzi distincte pentru HbA i HbS) difer prin mobilitate electroforetic, solubilitate i rezisten la denaturarea alcalin, HbS HbS HbA HbA proprieti cromatografice. Aceste trsturi ajut la identificarea HbA HbS fiecrui tip. Din Fig. nr.2.26 se observ c tipurile normale de hemoglobine difer n funcie de perioada ontogenetic, dar i prin Fig. nr. 2.25. Migrarea elecsecvena de aminoacizi a lanurilor polipeptidice. Sinteza troforetic a hemoglobinelor

96

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

diferitelor lanuri polipeptidice este sub controlul unor gene structurale plasate pe cromozomii 11p ( genele , G , , i ) i 16p ( , 1 i 2). n timpul ontogenezei genele globinei umane sufer un proces secvenial de represie i activare genic (Fig. nr.2.27.). Cromozom 16 5 22
Gower 1

2 22
Portland

1 22

Cromozom 11 5

22
F

A 22
F

22
A2

Gower2

22
A1

Hb:

Embrionar

Fetal

Adult

Fig. nr. 2.26. Grupurile de gene implicate n sinteza globinei umane i localizarea lor pe cromozomi

Mutaii ale genelor implicate n sinteza lanurilor globinice au ca efect apariia hemoglobinopatiilor. Hemoglobinopatiile sunt un grup de anomalii structurale sau cantitative ale sintezei catenelor globinice, deseori responsabile de apariia unor anemii grave. Hemoglobina patologic HbS este cel mai cunoscut exemplu de anomalie structural a sintezei lanurilor globinice. Plana intitulat AnePrenatal (sptmni) Natere Postnatal(sptmni) mia falciform (pg. 98) red cauza i consecinele apariiei HbS. Fig. nr. 2.27. Sinteza lanurilor globinei umane n funcie de Absena sau diminuarea canperioada ontogenetic titativ a sintezei unor lanuri Homozigot + globinice are ca efect apariia sindroamelor de Normal Trstur + talasemie. n funcie de tipul de lan globinic afectat pot fi talasemii de lan , , , sau , ultimele dou fr semnificaie clinic. n Fig. nr.2.28. (ptratul negru = gen normal, ptratul gri = gen disfuncional), sunt prezentate cauzele talasemiei de lan . Trstur 0 Hb H Hydrops fetalis Plana intitulat Talasemia major (pg. 99) prezint consecinele modificrilor cantitative ale lanurilor .
Sac vitelin Ficat Splin Mduv osoas

% din totalul globinei sintetizate

Sistemul haptoglobinelor
Haptoglobinele (HP) sunt alfa-2-globuline plasmatice sintetizate n ficat, al cror nume vine de la abilitatea lor de a se ataa pro-

Fig. nr. 2.28. Genetica -talasemiilor

GENETICA UMAN

97

teinelor. HP se combin cu hemoglobina liber rezultat n urma hemolizei fiziologice. Se formeaz complexe HP-Hb eliminate din ser i degradate n esuturi (n special n ficat). Sistemul haptoglobinelor este condiionat de un singur locus poziionat pe cromozomul 16q22, ocupat de una dintre genele Hp1 sau Hp2. Gena Hp1 are mai multe alele Hp1F i Hp1S. Exist i o mutant Hp0 care condiioneaz ahaptoglobinemia. Gena Hp2 s-a format recent, fiind observat doar la om. Genele sistemului HP controleaz sinteza lanurilor polipeptidice 1 (cu dou subtipuri, unul cu migrare rapid sub controlul alelei Hp1F i unul cu migrare lent sub controlul alelei Hp1S) i 2. ______________________________________________ Genotip Fenotip ______________________________________________ Hp1/ Hp1 Hp1-1 Hp2/Hp2 Hp2-2 Hp2/Hp1 Hp2-1 _______________________________________________ Sistemul haptoglobinelor este catalogat n OMIM la poziia *140100. Relaia dintre genele Hp1 (oricare dintre alele Hp1F sau Hp1S) i Hp2 este de codominan, modificnd raportul fenotipic mendelian. Fenotipurile haptoglobinice se evideniaz prin electroforez n gel de amidon, fiecare tip sau subtip avnd o band distinct (Fig. nr. 2.29.). Importana cunoaterii sistemului haptoglobinelor; studii populaionale (gena Hp2 tinde s nlocuiasc gena Hp1); Hp1-1 Hp2-2 Hp2-1 diagnosticul paternitii; Fig. nr. 2.29. Tipuri de haptoglobine asocierea cu diferite afeciuni (pacienii cu Hp2-2 au o evoluie mai sever a infarctului miocardic, cei cu Hp1-1 sunt mai predispui la leucemii).
+ ++

n genetica uman se cunosc peste 5 000 de caractere care se supun legilor lui Mendel. Dar caracterele simple nu sunt singurul tip de caractere ntlnit n genetica uman. Studiul caracterelor complexe care nu se supun legilor mendeliene i care sunt condiionate multifactorial (variate interaciuni ntre factorii genetici i ambientali) impune o metodologie de investigaie complex (analiza agregrii familiale a caracterului, studiul gemenilor, asocierea cu un marker genetic cunoscut, studiul indivizilor adoptai etc.). n acest grup de caractere se nscriu infarctul miocardic, diabetul insulino-dependent, schizofrenia, caria dentar, parodontita juvenil.
Bibliografie 1. Jorde L. (2000) Medical Genetics, 2nd Ed., Mosby, pg.41-42. 2. Lewis R. (1997) Human Genetics, 2nd Ed., McGrawHill, pg.278-279. 3. Stoica Alexandrina (1989) Biologie i Genetic, litografie, pg.101-105. O Web site: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/omim

98

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

ANEMIA FALCIFORM (SICKLEMIA)

Cauza: mutaia punctiform a genei prin care se nlocuiete un nucleotid al unui codon cu un altul, GAG devine GTG, iar alela mutant este S; n lanul al globinei umane n poziia a asea acidul glutamic este nlocuit cu valina, iar efectul este apariia unui lan anormal. Fig. nr.2.30. Aspect electronomicroscopic al hematiei n form de secer Epidemiologie Inciden: 1/600 de nou-nscui; n zonele Africii ecuatoriale, 45% din populaie este purttoare de gen mutant, fenomen explicat prin rezistena relativ la efectul letal al malariei falciparum n perioada copilriei (avantaj selectiv conferit n zonele endemice pentru malarie). Sex ratio: 1M : 1F Distribuie geografic: focarul principal este n zonele centrale ale Africii, Caraibe; se ntlnete n SUA i Marea Britanie n populaia de origine afro-caraibian. Fig. nr.2.31. Frotiu de snge periferic Genetic: transmitere autozomal-recesiv; heterozigoii (S) prezint trstura sickle-cell, homozigoii (SS) au HbS i anemie falciform. Investigaii Hematologice Hb: este de 6 8 g/dl; reticulocitoz crescut; frotiul de snge: evideniaz eritrocite n form de secer i n form de semn de tras la int; electroforeza hemoglobinei: absolut necesar I
1 2

pentru confirmarea diagnosticului, evideniaz o band caracteristic HbS poziionat ntre benzile HbA1 i HbA2; screening-test: detectarea prezenei HbS bazat pe relativa insolubilitate a HbS deoxigenate ntr-o soluie cu molaritate mare. Diagnostic prenatal analiza ADN din trofoblast n sptmnile 6 9 de sarcin.

II
GTG 5 GAG 5 gena 3 gena s 3 1 2 3

Fig. nr.2.32. Diagnosticarea sicklemiei

Fenotip clinic icter conjunctival discret; dureri osoase, articulare i abdominale; tromboze vasculare, ulcere ale gambelor; crize aplastice, status anemic sever; susceptibilitate la infecii; cardiomegalie; hemiplegii; insuficien renal.

GENETICA UMAN

99

TALASEMIA MAJOR (ANEMIA COOLEY)

Cauza: mutaii ale genei duc la blocarea total (0) sau parial (+) a sintezei lanurilor ale Hb. Genetic transmitere autozomal recesiv; heterogenitate genetic (fiecare grup etnic are alele mutante specifice); heterozigoii (0 ) sau (+) sunt clinic asimptomatici; frecvena purttorilor variaz ntre 2 i 30%; homozigoii (00) sau (++) prezint talasemie major.

Fig.nr.2.33. Frotiu de snge periferic: microcitoz, anizocitoz, poikilocitoz, eritrocite n form de semn de tras la int

Fig.nr.2.34. Faciesul unui copil cu anemie Cooley; radiografie cranian lateral: aspectul de craniu n perie. Diagnostic prenatal: biopsia vilozitilor coriale permite analiza direct a ADN.

Epidemiologie inciden: 1/3 600 de nou-nscui; debut: la ase luni de la natere; sex ratio 1M : 1F; distribuia geografic: frecvent n bazinul mediteranean i regiunile ecuatoriale ale Africii i Asiei. Investigaii hematologice: nivelul Hb scade la 2 3 g/dl; frotiul de snge periferic relev anemie hipocrom microcitar; electroforetice: HbA1 este absent, iar HbF i HbA2 au niveluri crescute; radiografice: bose frontale i parietale mrite, craniun perie datorit periostitei spiculare a oaselor craniului.

II

100

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

LUCRAREA PRACTIC 5: Caractere cefalometrice

Obiectivele lucrrii:
stabilirea reperelor osoase n vederea realizrii msurtorilor cefalice; calcularea i interpretarea indicilor cefalometrici; stabilirea tipului de profil folosind metoda fotostatic. Caracterele cantitative sunt caractere metrice care se cuantific. n cadrul populaiei umane se poate observa c indivizii nu sunt identici, ci se deosebesc prin anumite particulariti metrice (nlime, greutate, culoarea pielii, dermatoglife etc.). Diferenele individuale (variaii individuale) cantitative se msoar, se cntresc, se numr, deci se exprim numeric. Valorile pe care le poate lua un caracter cantitativ ntro populaie se distribuie pe o scar numeric nentrerupt, continu (Fig. nr. 2.36.). De regul, caracterele cantitative sunt condiionate de mai multe gene i Media Nr. studente 162 sunt influenate de mediu. Aciunea 600 combinat a genelor produce o expre160 sie variabil a caracterului cantitativ. 500 Biometria reprezint aplicarea metodelor statistice la valorile obi400 nute din msurtori efectuate pe un 158 organism. Prelucrarea i interpretarea 164 300 rezultatelor au drept scop precizarea caracteristicilor morfo-funcionale ale 200 acelui organism, aprecierea dezvoltrii sale somatice, determinarea 166 156 100 limitelor variabilitii umane normale sau patologice, corelarea caracterelor 168 154 variabile cu anumii factori care le 172 170 152 nlimea (cm) condiioneaz.
Fig. 2.36. Distribuia nlimii printre studentele Facultii de Medicin, promoia 1988

Investigarea biometric presupune: msurarea de diametre, circumferine, lungimi; calcularea indicilor cefalometrici i somatometrici; stabilirea, pe baza valorii indicilor, a particularitilor individuale; compararea valorilor individuale cu valorile standard (valori medii obinute prin centralizarea i prelucrarea statistic a valorilor individuale dintrun lot populaional martor) stabilite de antropologi n vederea precizrii tipului morfologic.

Tipul constituional
Totalitatea caracterelor morfologice, fiziologice i comportamentale care definesc un anumit individ uman poart numele de tip constituional. Tipul constituional se formeaz

GENETICA UMAN

101

n timpul procesului de cretere i dezvoltare ca rezultat al interaciunii dintre structura genetic a individului i factorii de mediu. Exist variate criterii de clasificare a tipurilor constituionale: morfologice, endocrine, de depunere a adipozitii, de difereniere sexual somatic etc. Msurtorile corporale pe baza crora se stabilete tipul somatic, respectiv proporiile segmentelor corporale (cap, gt, trunchi i membre) i interrelaiile dintre ele, sunt elemente de baz n definirea tipului morfologic (longilin, mediolin, brevilin).

Cefalometrie
Msurtorile extremitii cefalice se pot executa asupra capului organismului viu (cefalometrie) sau asupra craniului osos (craniometrie). Msurarea precis a diametrelor capului organismului viu i determinarea ulterioar a indicilor cefalici, faciali, nazali i auriculari fac obiectul de studiu al cefalometriei. Msurarea diametrelor presupune stabilirea unor repere osoase i tegumentare precise i folosirea unui instrumentar adecvat. Reperele osoase i tegumentare mai frecvent folosite n cefalometrie v tr g op eu t sa sba tu pa pra n sn al zy pg gn vertex, punctul cel mai nalt al calotei craniene trichion, punctul de inserie a prului pe frunte glabel, punctul anterior cel mai proeminent, situat deasupra suturii nazofrontale, ntre cele dou arcade sprncenoase opistocranion, punctul posterior cel mai ndeprtat, situat n planul sagital al capului eurion, punctul cel mai lateral al peretelui extern al capului tragion, punctul situat deasupra tragusului i tuberculului supertragic superauricular subauricular tuberculul lui Darwin, pe marginea helixului, n parte superioar a pavilionului urechii postauricular preauricular nasion, punctul de ntlnire a suturii nazofrontale cu linia medio-sagital subnazal, punctul situat n unghiul dintre marginea inferioar a septului nazal i buza superioar alaria, punctul cel mai lateral al aripii nasului zygion, punctul cel mai lateral al arcadei zigomatice pogonion, punctul anterior al simfizei mentoniere gnathion, punctul situat pe linia median a marginii interioare a mandibulei

Instrumentul cel mai des utilizat pentru msurarea dimensiunilor capului este compasul antropometric. Compasul antropometric este alctuit din dou brae metalice ndoite n partea superioar i unite ntre ele printr-o articulaie. Unul dintre brae, cel drept, este mobil i alunec pe o scal metalic divizat n centimetri. Braul mobil este prevzut cu un urub care l poate fixa pe scal, facilitnd citirea corect a dimensiunilor msurate. Instrumentul este folosit pentru msurtori la nivelul capului, din cauza distanelor liniare curbe.

102

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

ublerul (rigla) antropometric este utilizat la msurarea distanelor liniare drepte ale capului.

Fig. nr. 2.37. Repere osoase i tegumentare (simbolurile sunt prezentate n text)

Diametre cefalice utilizate mai frecvent n practic diametrul anteroposterior cefalic maxim cuprins ntre glabel i opistocranion ( g op) diametrul transvers cefalic maxim msurat ntre cele dou eurioane (eu eu) diametrul vertical auricular este distana dintre vertex i tragion (v t) nlimea morfologic a feei este distana dintre nasion i gnathion (n gn) diametrul bizigomatic este distana dintre cele dou zygioane (zy zy) nlimea nasului msurat ntre nasion i subnazal (n sn) limea nasului, distana dintre cele dou alarii (al al) lungimea urechii reprezint cea mai mare distan vertical a urechii (sa sba) limea urechii este reprezentat de cea mai mare distan transversal a urechii (pa pra)

GENETICA UMAN
O

103

Calcularea indicilor cefalometrici Valorile diametrelor msurate pe capul organismului viu pot fi utilizate pentru calcularea urmtorilor indici cefalometrici: Indicele cefalic este raportul centezimal al diametrului transvers cefalic maxim i diametrul anteroposterior cefalic maxim. Formula de calcul este: I.C.= diametrul transvers cefalic maxim x 100 / diametrul anteroposterior cefalic maxim. Indicele verticolongitudinal este raportul centezimal dintre diametrul vertical auricular i diametrul anteroposterior cefalic maxim. Formula de calcul este: I.VL.= diametrul vertical auricular x 100 / diametrul anteroposterior cefalic maxim. Indicele verticotransversal este raportul centezimal dintre diametrul verticalauricular cefalic i diametrul transvers cefalic maxim. Formula de calcul este: I.VT.= diametrul vertical auricular cefalic x 100 / diametrul transvers cefalic maxim. Indicele facial este raportul centezimal dintre nlimea morfologic a feei i diametrul bizigomatic. Formula de calcul este: I.F.= nlimea morfologic a feei x 100 / diametrul bizigomatic. Indicele nazal este raportul centezimal dintre limea nasului i nlimea nasului. Formula de calcul este: I.N.= limea nasului x 100 / nlimea nasului. Indicele auricular este raportul centezimal dintre limea urechii i lungimea urechii. Formula de calcul este: I.A.= limea urechii x 100 / lungimea urechii.
O

Fig. nr.2.38. Distanele n-gn i zy-zy

Clasificarea tipurilor de cap i fa Indicele cefalic caracterizeaz forma general a capului vzut din norma vertical (de sus). Conform indicelui cefalic, capetele pot fi: dolicocefale (alungite i nguste); mezocefale (mijlocii); brahicefale (scurte i late). Indicele cefalic ncadreaz valoric tipul de cap astfel: Dolicocefal Mezocefal Brahicefal Hiperbrahicefal Brbai x 75,9 76,0 80,9 81,0 85,4 85,5 x Femei 72,0 76,9 77,0 81,9 82,0 86,4 86,5 x

Fig. nr.2.39. Cap brahicefal

Indicele verticolongitudinal ofer relaii asupra nlimii capului vzut din norma lateral (din profil). Conform acestui indice, capetele se clasific n: chamecefale (joase); ortocefale (mijlocii); hipsicefale (nalte).

104

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

Indicele verticolongitudinal ncadreaz valoric tipul de cap astfel: Chamecefal x 57,9 Ortocefal 58,0 62,9 Hipsicefal 63,0 x Indicele verticotransversal ofer relaii asupra nlimii capului vzut din norma occipital (din spate). Conform acestui indice, capetele se clasific n: tapeinocefale (joase); metriocefale (mijlocii); acrocefale (nalte). Indicele verticotransversal ncadreaz valoric tipul de cap astfel: Tapeinocefal x 78,9 Metriocefal 79,0 84,9 Acrocefal 85,0 x Indicele facial caracterizeaz tipurile de fa astfel: euriprosope ( fee late i joase); mezoprosope (mijlocii); leptoprosope (fee alungite i nalte). Indicele facial ncadreaz valoric tipul de fa astfel: Brbat Hipereuriprosop x 78,9 Euriprosop 79,0 83,9 Mezoprosop 84,0 87,9 Leptoprosop 88,0 92,9 Hiperleptoprosop 93,0 x

Femeie x 76,9 77,0 80,9 81,0 84,9 85,0 89,9 90,0 x

Fig. nr. 2.40. Tipul morfologic facial euriprosop. De obicei, acestui tip morfologic facial i se asociaz o arcad maxilar lrgit, dizarmonie dento-maxilar cu nghesuire, i ocluzie adnc acoperit.

GENETICA UMAN

105

Fig. nr. 2.41. Tipul morfologic facial leptoprosop. De obicei, acestui tip morfologic facial i se asociaz micorarea transversal a bazelor apicale, nghesuiri dentare coronare i radiculare, ocluzie normal din punct de vedere vertical sau deschis (infraocluzie).

Indicele nazal grupeaz tipurile de nas n: leptorhine (nasuri alungite i nguste); mezorhine (mijlocii); chamerhine (nasuri scurte i late). Indicele nazal ncadreaz tipul de nas astfel: Hiperleptorhin x 54,9 Leptorhin 55,0 69,9 Mezorhin 70,0 84,9 Chamerhin 85,0 99,9 Hiperchamerhin 100,0 x Acestor indici li se pot aduga i alte observaii care rezult din examenul direct al capului. Examenul capului din norma lateral (de profil) analizeaz i nlimea, direcia i profilul frunii (Fig. nr. 2.42.), profilul nasului (convex, drept, concav) (Fig. nr.2.43.), mrimea i forma buzei dermice superioare i inferioare, conturul brbiei i direcia marginii inferioare a mandibulei.

Fig. nr. 2.42. Tipuri de profil al frunii: plat, bombat i teit

106

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

Linia de contur a nasului: dreapt i convex

Mrimea nasului: normal (IN = 50); mic (cu rdcin nalt, linie de contur scurt, vrful orientat n sus); mare (cu rdcin profund, linie de contur lung i vrf proeminent). Fig. nr. 2.43. Tipuri de profil al nasului

n mod normal, limea nasului reprezint circa 70% din nlimea nasului.

Fig. nr. 2.44. Baza nasului

Stabilirea simetriei feei i a tipului de profil facial Utiliznd examinarea din norma frontal i lateral, se pot stabili cu precizie simetria feei i tipul de profil facial. Metoda folosete examenul indirect, pe fotografii fa i profil ale individului investigat. Examinarea n norma frontal a feei stabilete simetria ntre cele trei etaje ale feei (frontal, nazal, mandibular) sau simetria dreapta-stnga (de regul, exist simetrie fa de linia median, dar forme variate de asimetrie pot fi observate dac se analizeaz detalii structurale ale feei). Analiza din norma frontal a feei pe o fotografie se realizeaz prin trasarea unor linii orizontale, paralele prin punctele: trihion, nasion, nazo-spinalis (situat pe spina nazal anterioar) i gnation. Faa apare mprit n trei etaje: superior sau frontal, mijlociu sau nazal i inferior sau mandibular (Fig. nr.2.45. ).
O

GENETICA UMAN

107

trichion glabel

subnazal gnathion Fig. nr. 2.45. Etajele feei observate din norma frontal pe fotografie

n cazul unei dezvoltri normale, simetrice a feei, cele trei etaje faciale sunt proporionale. La adult, n cazul unei mriri sau micorri a unuia dintre etaje, apare asimetria feei. Examinarea fotografiei n norma lateral evideniaz linia de nscriere a profilului facial ntre punctele nasion i gnation, fcnd abstracie de linia nasului. Prelucrarea fotografiei de profil se face folosind relaiile Simon, Dreyfus i Schwarz. Simon traseaz pe fotografia de profil dou drepte perpendiculare: 1. planul orizontal de la Frankfurt ntre porion (p punctul cel mai nalt situat pe marginea superioar a conductului auditiv extern) i orbital (or punctul inferior al orbitei); 2. perpendiculara pe planul orizontal de la Frankfurt dus din orbital (planul orbito-frontal). Interpretare: la adultul cu profil normal, perpendiculara dus din orbital pe planul orizontal de la Frankfurt trece prin craniu, comisura labial i gnathion; conturul brbiei este situat naintea acestei perpendiculare. Dreyfus introduce o vertical care trece prin nasion i este paralel cu perpendiculara dus prin orbital (planul nazo-frontal). ntre cele dou planuri apare cmpul facial de profil (KPF). Interpretare: n mod normal, n acest cmp sunt situate subnazalul i marginea anterioar a buzei superioare (n mod normal tuberculul buzei superioare se gsete cu 2-3 mm anterior celui al buzei inferioare). Schwarz introduce o nou linie, numit tangenta buzelor, care merge de la subnazal la pogonion. Aceast dreapt prelungit nainte intersecteaz planul nazo-frontal, formnd cu acesta un unghi cu valoare medie de 10. Fig. nr. 2.47. prezint profilul labial.
Fig. nr. 2.46. Analiza feei pe fotografie din norma lateral p = porion or = orbital n = nasion sn = subnazal pog = pogonion gn = gnathion H = orizontala de la Frankfurt Po = planul orbital al lui Simon Pn = planul nazal al lui Dreyfus KPF = cmp facial de profil

n H p or sn

pog gn Po Pn
KPF

108

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

Fig. nr. 2.47. Analiza profilului labial T = tangenta buzelor sto = stomion, punctul de contact bilabial Ls = punctul labial superior Li = punctul labial inferior procheilie superioar i inferioar retrocheilie superioar i inferioar

Fig. nr. 2.48. Dizarmonii de profil ereditare profil convex: sn se afl n spatele planului Pn, gn este situat n spatele planului Po. Diagnostic: retrognaie maxilar moderat i retrognaie mandibular accentuat. profil concav: sn situat anterior de Pn, gn situat anterior de Po. Diagnostic: prognaie maxilar uoar, prognaie mandibular accentuat.

De la profilul normal pot fi observate abateri care determin dizarmonia de profil. Cauzele acestor abateri sunt variate, n marea lor majoritate fiind condiionate genetic (de exemplu, prognatismul mandibular este condiionat autozomal dominant) (Fig. nr.2.48.). Alctuirea morfogramei Individul este o realitate unic pe care conceptul de tip constituional trebuie s o abordeze i s o ncadreze ct mai clar, cu precizie. n acest sens, reprezentrile grafice, morfogramele, dau imaginea imediat a msurtorilor absolute i relative ale individului n raport cu mediile corespunztoare din populaia creia i aparine. Morfograma permite aprecierea gradului de cretere i dezvoltare craniofacial i somatic a individului investigat, precum i modificrile de vrst ale formei corporale. Devierile fiecrui individ fa de normalitatea medie sunt admise pentru anumite valori, care se nscriu n limitele variabilitii umane normale. Alctuirea morfogramei necesit hrtie milimetric, pe care se traseaz pe orizontal valorile indicilor calculai, iar pe vertical valoarea + sau posibil fa de valoarea medie reprezentat pe linia 0 (Fig. nr.2.49.).

GENETICA UMAN IC
5 4 3 2 1 0 -1 -2 -3 -4 -5

109

IVL IVT

IF

IN

IA

Fig.nr. 2.49. Morfograma unui student n vrst de 20 de ani (T reprezint talia exprimat n cm).

n concluzie, morfograma poate fi definit drept o reprezentare grafic a msurtorilor i indicilor cefalometrici i somatometrici ai unui individ, avnd aspectul unei linii frnte, oscilnd de o parte sau alta a grilei standard (valorile medii din populaie). Valoriile medii de referin aparin unui lot populaional cu aceeai vrst i acelai sex cu subiectul investigat. Devierile mai mici sau mai mari fa de medie ale morfogramei descriu subiectul investigat drept armonic sau dizarmonic. Dezvoltarea anormal a extremitii cefalice este observat n multe sindroame condiionate genetic (sindromul Pierre-Robin, sindromul Treacher- Collin, sindromul Crouzon etc.).

Cefalometria este utilizat pentru: aprecierea creterii i dezvoltrii cranio-faciale n funcie de vrst i sex, util n tratamentul ortodontic; testarea paternitii n medicina legal, tiut fiind c unele caractere somatice se motenesc; reconstituirea formelor vechi n antropologie pe baza resturilor osoase descoperite; reconstituirea unor pri ale corpului distruse accidental n tratamentele chirurgicale plastico-reparatorii. Aplicaii practice se va examina fizic extremitatea cefalic a unui coleg i se vor realiza msurtori innd cont de reperele osoase i tegumentare descrise n lucrare; fiecare student i va calcula indicii cefalometrici i din tabele i va gsi particularitile tipului constituional; valorile individuale obinute vor fi reprezentate grafic n morfogram.
Bibliografie 1. Weiner JS, Lourie JA (1981) Practical Human Biology, Academic Press, pg.110-115. 2. Foster TD (1990) A Textbook of Orthodonthics, 3rd.Ed. Blackwell Science Publication, pg.4-23. 3. Hull D, Johnston DI (1993) Essential Paedriatics, 3rd.Ed., Churchil Livingstone, pg.70 -73. 4. Rakosi T. , Jonas I. (1992) Atlas de Medicine dentaire. Orthopedie dentofaciale. Diagnostic, Medicine-Sciences Flammarion. O Web site: http://www.bioanth.org/biomed/anthropometry.htm

110

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

LUCRAREA PRACTIC 6: Studiul dermatoglifelor

Obiectivul lucrrii:
evidenierea, analiza i interpretarea configuraiei dermatoglifelor digito-palmare.

Definiie:
Dermatoglifele sunt creste epidermice prezente pe suprafaa degetelor, palmelor i plantelor. Configuraia dermatoglific se constituie n viaa intrauterin i se menine aceeai n tot cursul vieii. Dermatoglifologia este tiina care se ocup cu studiul configuraiilor crestelor dermice i ale pliurilor de flexie digito-palmo-plantare. (gr.: dermatos = piele; gliphein = a grava, a spa)

Ereditatea dermatoglifelor:
Dermatoglifele sunt caractere somatice, msurabile (metrice), cu determinism poligenic, influenate de mediu. Ele se transmit pe compartimente topografice, respectndu-se legea alternanelor obligatorii (anexe pag. 159).

Tehnica analizei dermatoglifelor:

Material necesar: - lup de mn, cu o putere de mrire de 3 - 5 ori; - tu tipografic sau cerneal hidrosolubil; - rulou de cauciuc, plac de sticl, hrtie; - rigl, raportor. Metode de lucru: Metoda direct de examinare a dermatoglifelor palmare presupune observarea direct a configuraiei crestelor dermice i a pliurilor de flexie, cu ajutorul lupei de mn. Metoda indirect de examinare a dermatoglifelor palmare se realizeaz prin nregistrarea amprentelor palmare, pe hrtie.

Mod de lucru
1. Pe o plac de sticl (groas de aproximativ 5 mm, cu o suprafa de aproximativ 50 cm2), se aplic tu tipografic (cerneal hidrosolubil), care se ntinde cu ajutorul ruloului de cauciuc ntr-o pelicul fin i uniform; 2. Peste aceast pelicul de tu, se aplic palmele pacienilor, presndu-se pe toat suprafaa lor, pentru a se impregna bine i uniform cu tu; 3. Dup impregnare, palmele se aplic pe foaia de hrtie; 4. Pentru evitarea erorilor se recolteaz mai multe serii de amprente, de la acelai subiect; 5. Amprentele astfel recoltate se analizeaz din punct de vedere calitativ i cantitativ cu ajutorul lupei de mn.

GENETICA UMAN
O

111

Analiza i interpretarea dermatoglifelor digito-palmare:

1. Analiza calitativ a configuraiilor crestelor dermice i a pliurilor de flexie presupune parcurgerea urmtoarele etape:  La nivel digital se stabilesc: prezena, pozitia i numrul de triradii. Triradiul reprezint locul de intersecie a trei direcii diferite de orientare a crestelor dermice (Fig. nr. 2.50.); configuraia crestelor dermice digitale (arc, bucl, verticil). Arcul (A) (engl. arch) = nu are triradii; crestele dermice Fig. nr. 2.50. pornesc dintr-o parte a degetului i se termin la nivelul Triradiu celeilalte pri a degetului respectiv (Fig. nr. 2.51.). Bucla (L) (engl. loop) = are un singur triradiu prezent pe partea opus a deschiderii buclei; crestele dermice Fig. nr. 2.51. pornesc i se rentorc pe aceeai parte a degetului (Fig. Arc (A) nr. 2.52.). Verticilul (W) (engl. whorl) = prezint dou triradii ntre care crestele Fig. nr. 2.52. dermice descriu un traseu circular, concentric sau spiralat (Fig. nr. 2.53.) Bucl (L) formula digital individual. Formula digital individual se exprim sub forma unei fracii, la care, la numrtor, se indic, prin simboluri, configuraiile crestelor dermice digitale de la mna dreapt, iar la numitor conFig. nr. 2.53. figuraiile crestelor dermice digitale de la mna Verticil (W) concentric i spiral stng, ncepnd de la police ctre auricular; Ex. : F.D. = AALLWW / ALWWAL tipul constituional digital individual (T.C.D.): monomorf, dimorf, trimorf. Tipul constituional monomorf prezint aceeai configuraie a crestelor dermice digitale, la nivelul tuturor celor zece degete (arcuri, bucle, verticile) Ex. F.D. = LLLLL / LLLLL = T.C.D. monomorf Tipul constituional dimorf prezint, asociate, cte dou configuraii diferite ale crestelor dermice digitale (A+L; L+W; A+W) Ex. F.D. = LLALL / LLLLLA = T.C.D. dimorf Tipul constituional trimorf prezint, asociate, n proporii variabile, la nivelul celor 10 falange, toate tipurile de configuraii ale crestelor dermice (A+L+W) Ex. F.D. = LWLAL / LAWLL = T.C.D. trimorf.  La nivel palmar se stabilete: poziia celor 13 compartimente (sau sectoare) ale regiunii palmare propriu-zise. Compartimentele 1,6,8,10 si 12 sunt poziionate la nivelul bazei degetelor: police (1), auricular (6), inelar (8), medius (10) i, respectiv, index(12). Compartimentul 2 este situat la nivelul regiunii cuprinse ntre antul longitudinal i baza metacarpului 5.

112

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

La nivelul marginii ulnare a palmei, n regiunea hipotenar, dinspre proximal spre distal, se gsesc compartimentele 3,4 si 5, poziionate astfel: compartimentele 3 i 4, n regiunea hipotenar, proximal de punctul de intersecie dintre pliul palmar transvers distal i marginea ulnar a palmei, compartimentul 3 fiind poziionat n jumtatea proximal a acestei regiuni, iar compartimentul 4 n jumtatea distal a acesteia; compartimentul 5 este situat n regiunea hipotenar, distal de punctul de intersectie dintre pliul palmar transvers distal i marginea ulnar a palmei. Compartimentele 7, 9, 11 i 13 corespund spaiilor interdigitale: auricular-inelar (7), inelar-medius (9), medius-index (11) i, respectiv, index-police (13). prezena i poziia triradiilor subdigitale (a, b, c, d). Triradiile subdigitale, n numr de patru, poziionate la nivelul regiunii subdigitale, se evideniaz astfel: triradiul a la baza indexului; triradiul b - la baza mediusului; triradiul c la baza inelarului; triradiul d la baza auricularului. poziia triradiului axial palmar (t). Triradiul axial palmar este localizat, n axul longitudinal al palmei, ntre eminena tenar i hipotenar. poziia pliurilor palmare principale. Pliurile palmare principale sunt n numr de trei: pliul longitudinal (PL) care are originea ntre police i index, delimiteaz eminena tenar i se orienteaz ctre articulaia minii; pliul palmar transvers distal (PPTD) are aceeai origine cu PL, se pierde n eminena hipotenar, fr a atinge marginea ulnar a palmei; pliul palmar transvers proximal (PPTP) pornete de sub baza indexului i se termin la nivelul marginii laterale ulnare a palmei.

Tenar

Hipotenar

Fig. nr. 2.54. Arii palmare: hipotenar i tenar; triradii subdigitale a, b, c,d Pliul longitudinal PL, pliul palmar transvers proximal (PPTP), pliul palmar distal (PPTD)

GENETICA UMAN

113

2. Analiza cantitativ a dermatoglifelor digito-palmare presupune parcurgerea urmtoarele etape:  La nivel digital: se traseaz liniile centro-deltice; Linia centro-deltic (l.c.d.) = linia care unete centrul triradiului cu centrul configuraiei crestelor dermice digitale, la nivelul degetului studiat; se determin numrul de creste dermice intersectate de liniile centro-deltice, la nivelul tuturor degetelor; se calculeaz numrul total de creste dermice digitale pentru cele zece degete (prin nsumarea valorilor absolute, determinate anterior), precum i numrul mediu de creste dermice per deget (prin mprirea sumei obinute la 10); se compar valorile obinute cu valorile standard. Valorile normale ale numrului total de creste dermice digitale sunt: la femei: 127-130; la brbai: 135-150.  La nivel palmar: se traseaz segmentele ab, bc, cd i ad (corespunztoare centrelor triradiilor subdigitale abcd); se determin numrul de creste dermice intersectate de fiecare segment; se determin numrul total i numrul mediu de creste dermice din regiunea palmar superioar (prin nsumarea valorilor absolute obinute anterior, pentru cele dou palme); se calculeaz valoarea Indicelui Cummins; Indicele Cummins (I.C.), denumit i indice de transversabilitate, reprezint suma ariilor n care se termin liniile palmare principale. Valoarea indicelui Cummins se calculeaz dup formula: Ex: I.C. = A3+B5+C9+D9 = 26 Valorile normale ale I.C. sunt cuprinse ntre 27 i 29. Valorile mai mari de 29 indic orizontalitatea crestelor dermice palmare, iar cele mai mici de 27 indic verticalitatea acestora. se calculeaz valoarea unghiului Penrose. Unghiul Penrose reprezint unghiul format ntre centrele triradiilor a,t i d (< atd) Valoarea normal a unghiului atd este mai mic de 45o. Daca valoarea unghiului atd este cuprins ntre 45 i 56o, se consider poziia triradiului axial palmar n t, iar dac este mai mare de 56o, se consider poziia triradiului axial palmar n t. Rezultatele obinute n urma efecturii analizei complete a dermatoglifelor digitopalmare se compar cu valorile standard determinate pentru zona noastr geografic.

Anomalii ale dermatoglifelor digito-palmare

Deviaiile de la aspectul normal al dermatoglifelor includ: pliuri de flexie neobinuite (anul simian sau pliul palmar transvers unic) (Fig.nr. 2.55.);

114

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE figuri atipice ale crestelor dermice digitale (Fig. nr. 2.56.);

Fig. nr. 2.56. Figuri atipice ale crestelor dermice digitale

variaii ale numrului de creste dermice; figuri ale crestelor dermice n arii palmare n care puine persoane le prezint; absena sau dislocaia de triradii subdigitale (Fig. nr. 2.57.) Fig. nr. 2.55. anul simian n cazul sindromului Down triradii axiale palmare distale Trebuie precizat c nu exist o anomalie dermatoglific particular care s nu fie observat i n b populaia normal, de aceea este necesar s se comd pare frecvena anomaliei respective la pacienii a investigai cu cea din populaia general.

Importana studiului dermatoglifelor:

Fig. nr. 2.57. Absena triradiului subdigital c

examinarea dermatoglifelor constituie o metod de explorare paraclinic n practica medical (medicin legal, criminalistic, expertiz heredo-biologic pentru stabilirea filiaiei genetice) i n investigaia socio-antropologic.
Bibliografie: 1. Severin Emilia (1998) Genetica anomaliilor dento-maxilare la om, Editura Scripta, pag. 25-27. 2. urai C., Ioan L.C. (1979) Amprentele papilare, Editura Medical, pag. 30-31, 40-42. O Web site: http://users.breathemail.net/chiro/chiro/dermatoglyphics.htm.

GENETICA UMAN
Intrebri recapitulative

115

1. Cum explic meioza cele dou legi ale lui Mendel: segregarea i asortarea independent? 2. De ce rezultatele lui Mendel n cazul dihibridrii sunt diferite dac genele care determin caracterele sunt localizate pe acelai cromozom? 3. De ce caractere autozomal recesive extrem de rare sunt observate mai frecvent n familiile consangvine? 4. Ce deosebire exist ntre: a. autozomal dominant i autozomal recesiv b. homozigot i heterozigot c. genotip i fenotip 5. Ce este raportul fenotipic 1 : 2 : 1 ? Dar raportul 3 : 1 ? 6. Cum poate fi determinat genotipul unui individ ? 7. Ce sunt alelele? 8. Ce este hibridarea? 9. Cte tipuri de gamei diferite pot fi formate de indivizi cu urmtoarele genotipuri? a. AaBB b. AaBbcc c. AaBbCcDdEe 10. Ce diferene exist ntre caracterele umane simple i cele complexe?

TOPIC TEST
ntrebri la care litera de rspuns corect desemneaz propoziii: A adevrate B false 1. Genotipul este rezultatul vizibil al interaciunii ereditate-mediu. 2. Alelele sunt formele sub care poate exista o gen de pe un locus dat. 3. Caracterul dominant este caracterul pe care l exprim heterozigoii. 4. Un acelai fenotip poate fi condiionat de mai multe genotipuri. 5. n cazul unui caracter simplu, descendenii unui cuplu heterozigot pot avea doar dou fenotipuri n proporii egale. 6. Purttorul este membrul unei familii care are alela mutant n genotip, dar nu o exprim fenotipic. 7. Segregarea reprezint separarea i migrarea alelelor n gamei diferii n timpul meiozei. 8. Dermatoglifele reprezint un caracter mendelian. 9. Probandul este primul membru al unei familii pentru care se alctuiete un arbore genealogic, fiind suspectat c ar avea un defect genetic. 10. Caracterele cu distribuie continu variaz de la un fenotip extrem la altul fr ntrerupere. T ntrebri cu un singur rspuns corect: 1. La ce se refer raportul de 9 : 3 : 3 : 1 n cazul dihibridrii ? A. genotip B. fenotip C. gameii produi de un organism dihibrid D. numrul de generaii necesare pentru apariia unui heterozigot
T

116

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

2. Genetica se ocup cu studiul ereditii: A. caracterelor interesante B. tuturor caracterelor C. bolilor umane D. caracterelor biologice 3. Fiul unui cuplu crede c a fost adoptat. El compar grupa sa sangvin cu a prinilor si (mama are grup A, tatl are grup AB). Ce grup de snge ar trebui s aib biatul ca s-i confirme suspiciunea ? A. grup A B. grup AB C. grup O D. grup B 4. Dudu nu simte gustul amrui al PTC, dar mama i tatl lui sunt gusttori PTC. Ce genotipuri au prinii ? A. GG x Gg B. GG x GG C. GG x gg D. Gg x Gg 5. Un brbat i o femeie i doresc s aib mpreun un copil, dar amndoi sunt purttori ai genei s. Ce probabilitate exist ca n descendena lor s apar copii bolnavi ? A. 50% B. 100% C. 25% D. 0 6. n 1944 Charlie Chaplin a fost chemat n faa instanei de o tnr actri, Joan Berry care-l acuza c nu recunoate paternitatea copilului ei. Copilul era de grup sangvin B, mama copilului era de grup sangvin A, iar Chaplin era de grup O. Din ceea ce tii despre ereditatea grupelor sangvine, ar fi putut Chaplin s fie tatl acestui copil? (la vremea respectiv, n California nu era admis ca prob testul grupei sangvine. Chaplin a fost obligat s ntrein copilul) A. da, grupa sa sangvin nu-i exclude paternitatea copilului B. nu, grupa sa sangvin exclude paternitatea copilului C. posibil, testul grupei sangvine n sistemul ABO nu este concludent D. n acest caz sunt necesare i alte teste 7. n populaiile de albi din Europa i America s-a observat c din cstoriile ntre doi genitori, unul cu firul de pr drept i cellalt cu firul de pr cre, apar copii cu firul de pr ondulat. Dac doi indivizi cu prul ondulat se cstoresc, ce raport fenotipic s-ar putea prevedea printre descendenii lor ? A. 3 ondulat : 1 drept B. 3 cre: 1 ondulat C. 1 cre: 1 ondulat D. 1 cre: 2 ondulat : 1 drept 8. Dac o femeie cu daltonism se cstorete cu un brbat normal, ce fenotipuri ar putea avea copiii lor, tiut fiind c daltonismul este condiionat de o alel mutant recesiv plasat pe cromozomul X (Xq28) ? A. toi copiii lor vor fi daltoniti B. toate fetele vor fi daltoniste i toi bieii normali

GENETICA UMAN

117

C. toate fetele vor fi purttoare i toi bieii vor fi daltoniti D. jumtate dintre fete vor fi purttoare, jumtate homozigote normale, toi bieii vor fi normali 9. Hemofilia este o tulburare genetic observat n familiile regale din Europa nc din timpul reginei Victoria a Angliei, care era purttoare. Nepoata ei, Alexandra, s-a mritat cu Nicolae al II-lea, ultimul mprat al Rusiei. Alexandra era purttoare a genei pentru hemofilie; Nicolae era sntos. Fiul lor, areviciul Alexis, avea hemofilie. Alexis i toate cele patru surori ale sale au fost mpucai n anul 1918 (hemofilia este condiionat recesiv legat de cromozomul X, Xq28). Ce fenotip i genotip posibil avea Anastasia. sora lui Alexis, despre care se crede c a supravieuit ? A. era normal, dar purttoare B. era bolnav, homozigot C. era bolnav, heterozigot D. nu se poate preciza 10. Analizai arborele genealogic urmtor i identificai tipul de transmitere al defectului genetic n familia respectiv. A. autozomal dominant I B. X linkat recesiv C. autozomal recesiv D. X linkat dominant
II III

11. Care dintre urmtoarele sisteme genetice este cel mai important n determinarea compatibilitii mam-ft ? A. ABO B. Rh C. MNS D. sistemul haptoglobinelor 12. O femeie de grup sangvin A, MN i Rh+ are un copil cu grup sangvin O, N, i Rh-. Un tat posibil are grup sangvin A, N i Rh+. Rezultatele testelor exclud paternitatea ? A. nu, brbatul poate fi: AO, NN i RHD/RHd B. da, brbatul nu poate fi dect AA, NN i RHD/RHD C. da, un brbat cu Rh+ este exclus s aib un copil cu RhD. da, un brbat cu grup sangvin A nu poate avea copil cu grup sangvin O 13.Unul dintre urmtorii termeni nu se refer la dermatoglife: A. bucl B. arc C. triradiu D. leptoprosop 14. Anemia moderat alfa-thal minor (-- / ) este ntlnit frecvent printre asiaticii din sud-estul continentului. Care dintre descendenii posibili ai unor genitori asiatici heterozigoi vor avea cea mai grav form de anemie alfa-thal ? A. -- / -B. -- /

118

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

C. / -D. / 15. Hb Bart are afinitate mare pentru O2 dar nu-l cedeaz n esuturi, consecina fiind apariia edemului generalizat i moartea intrauterin sau curnd dup natere (Hydrops fetalis). Care dintre urmtoarele combinaii de lanuri polipeptidice formeaz aceast hemoglobin patologic? A. 22 B. 4 C. 22 D. 22 16. Eritroblastoza fetal apare n cazul: A. incompatibilitii Rh dintre mam-ft B. incompatibilitatea donor-receptor n transfuziile de snge C. transcripia PAX factor mutagen D. factor de cretere fibroblastic factor de recepie 17. O mutaie specific a genei beta a globinei umane este observat n: A. obezitate B. polipoza intestinal familial C. anemia falciform D. deficiena -1 antitripsinei 18. Unele afeciuni autozomal recesive au o prevalen mare n populaie, chiar dac uneori sunt fatale (sicklemia la africani, fibroza chistic la europeni). Care dintre urmtoarele explicaii ale acestui fenomen este cea mai plauzibil ? A. consangvinitatea B. o rat mare a mutaiei ntr-o populaie specific C. avantajul selectiv conferit de starea de heterozigoie D. avantajul selectiv al indivizilor homozigoi normali 19. Care dintre urmtoarele caracteristici nu ajut la diferenierea unui caracter autozomal dominant de unul autozomal recesiv? A. prezena consangvinitii B. proporia de descendeni afectai n fiecare generaie C. distribuia pe sexe a indivizilor afectai D. expresia fenotipului clinic n generaiile succesive ale unei familii 20. Care dintre urmtoarele caracteristici nu aparine talasemiei majore ? A. transmitere autozomal dominant B. heterogenitate genetic C. hiperdezvoltare a maxilarelor D. splenomegalie T ntrebri la care litera de rspuns corect grupeaz cifrele dup cum urmeaz: A 1,2,3; B 1,3; C 2,4; D 4; E 1,2,3,4. 1. Dintr-o cstorie se nate un copil cu o form de anemie hemolitic sever HbS-thal. Ce genitori poate avea acest copil ? 1. heterozigot cu HbSA 2. homozigot cu HbSS 3. heterozigot -thal / -A 4. homozigot -thal / -thal

GENETICA UMAN

119

2. Pe ce cromozomi se gsesc genele implicate n sinteza lanurilor globinice umane? 1. 9 2.11 3.21 4.16 3. Care dintre urmtoarele mecanisme este implicat cel mai probabil n producerea unui arbore genealogic n care exist un singur individ afectat fr vreo istorie familial a unei tulburri genetice anterioare? 1. o afeciune autozomal dominant cu penetran 80% 2. o afeciune autozomal recesiv 3. o afeciune recesiv legat de cromozomul X 4. noi mutaii pentru o afeciune autozomal dominant 4. Ereditatea multifactorial se deosebete de ereditatea mendelian prin: 1. condiionare poligenic 2. condiionare monogenic 3. influenat de mediu 4. neinfluenat de mediu 5. Un brbat cu urechi roietice a venit la un consult genetic. Geneticianul a construit un arbore genealogic pe care l-a analizat i a tras urmtoarele concluzii: n familia brbatului, urechile roietice sunt un caracter ereditar condiionat monogenic. Mama brbatului respectiv i una dintre surorile sale au urechi roietice, dar tatl, fratele i alte dou surori au urechi normale. Brbatul i soia sa (are urechi normale) au apte copii, dintre care patru biei i trei fete. Doi biei i dou fete au urechi roietice. Ce tip de caracter reprezint urechile roietice? 1. tipic autozomal recesiv 2. dominant legat de cromozomul X 3. recesiv legat de cromozomul Y 4. tipic autozomal dominant 6. Un brbat care are o alel pentru un caracter legat de cromozomul X este: 1. homozigot 2. heterozigot 3. holozigot 4. hemizigot 7. Hemofilia uman se datoreaz unei gene mutante de pe cromozomul X. Care vor fi rezultatele unei cstorii ntre o femeie normal (nepurttoare) i un brbat hemofilic? 1. 50% dintre fiice sntoase i 50% dintre fii hemofilici 2. 100% fii sntoi i 50% fiice hemofilice 3. 100% fiice sntoase i 100% fii purttori 4. 100% fiice purttoare i 100% fii sntoi 8. Femeile au ca gonozomi XX, iar brbaii au ca gonozomi XY. Care dintre bunicii unui brbat nu i-au transmis genele de pe cromozomul Y? 1. mama tatlui 2. tatl mamei 3. mama mamei 4. tatl tatlui

120

EREDITATEA CARACTERELOR UMANE

9. S considerm trei gene independente: B= brahidactilie (degete scurte) i b= alela sa recesiv, normal; P= polidactilie (degete supranumerare) i p= alela sa recesiv, normal; S= sindactilie (degete fuzionate) i s= alela sa recesiv, normal. Care este probabilitatea ca un descendent al cuplului BPS / bps x BPS / bps s aib degetele normale? 1. 3/4 2. 3/16 3. 27/64 4. 1/64 10. Prognatismul mandibular adevrat se transmite autozomal dominant. Ce fenotipuri vor avea descendenii unui cuplu n care genitorii au prognatism mandibular? 1. toate fiicele vor fi prognate i toi fiii normali 2. fiice i fii normali 3. toate fiicele normale i toi fiii prognai 4. fiice i fii prognai

TOPIC TEST RSPUNSURI

Adevrat / Fals 1.B 2.A 3.A 4.A 5.B 6.B 7.A 8.B 9.A 10.A

Alegere unic 1.B 2.D 3.C 4.D 11.B 12.A 13.D 20.A Alegere multipl 1.B 2.C 3.D

5.C 14.A

6.B 15.B

7.D 16.A

8.C 17.C

9.A 18.C

10.A 19.C

4.B

5.D

6.D

7.D

8.A

9.D

10.C

INTEGRAREA CUNOTINELOR GENETICE N PRACTICA MEDICAL

Dezvoltarea exploziv a posibilitilor diagnostice i de tratament din ultimele decenii a permis elucidarea etiologiei i mecanismelor patologice din majoritatea afeciunilor. Totodat, a determinat noi clasificri patogenice i a reconsiderat posibilitile terapeutice, dintre care unele nu erau nici mcar imaginate n urm cu dou-trei decenii. Toate aceste noi premise nu au putut ocoli patologia genetic. Dac genetica medical, n urm cu trei decenii, era mai mult un deziderat, privit ca o posibilitate a medicinii viitorului, astzi, graie noilor tehnologii, genetica i-a impus locul i rolul determinant n practica medical. S-au pus la punct metodele de diagnostic, noile tehnologii, de mare acuratee (analiza molecular ADN), a fost cartografiat genomul uman (Human Genom Project), s-au imaginat i creat metode terapeutice genetice. O serie ntreag de afeciuni s-au dovedit a fi de natur genetic i, de asemenea, s-a relevat predispoziia genetic a unor clase ntregi de afeciuni (boli vasculare, cancer etc.). Dar unul dintre obiectivele majore ale geneticii medicale l constituie i l va constitui diagnosticul precoce i modalitile de prevenie a bolilor genetice.

LUCRAREA PRACTIC 1: Consultaia genetic

Obiectivele lucrrii:
descrierea principalelor momente ale consultaiei genetice; evidenierea utilitii consultaiei genetice n profilaxia medical.

Definiie:
Consultaia genetic i sfatul genetic sunt reprezentate de totalitatea msurilor care se iau n scopul limitrii rspndirii bolilor genetice n populaiile umane.

Scopurile consultaiei genetice:

diagnosticarea genopatiilor; diagnosticarea heterozigoilor, a purttorilor sntoi de alel anormal recesiv; diagnosticarea cromozomopatiilor; diagnosticarea fenocopiilor; limitarea incidenei nou-nscuilor cu handicap genetic.

122

INTEGRAREA CUNOTINELOR GENETICE N PRACTICA MEDICAL

Circumstanele n care se solicit consultaia genetic i sfatul genetic: unul dintre membrii cuplului prezint o afeciune genetic; cei doi membri ai cuplului sunt sntoi, dar n familia lor exist unul sau mai muli membri care prezint o afeciune genetic; ambii membri ai cuplului prezint aceeai afeciune genetic sau afeciuni asemntoare (este cazul cuplurilor de surzi, surdo-mui sau nevztori); cei doi membri ai cuplului sunt consangvini; n caz de sterilitate a cuplului; n caz de avorturi spontane repetate de etiologie neprecizat.

Etapele i metodele consultaiei genetice:

1. consultaia genetic propriu-zis; 2. elaborarea prognosticului genetic; 3. sfatul genetic. 1. Consultaia genetic propriu-zis parcurge urmtoarele etape: anamneza; examenul clinic general pe aparate i sisteme; investigaii de laborator, paraclinice si genetice specifice, adaptate fiecrui caz, la care se adaug metodele de diagnostic prenatal; completarea fiei pentru malformaii congeFig. nr. 3.1. Realizarea punciei transabdominitale sau boli ereditare; nale sub ghidaj echografic cu scopul recoltrii reprezentarea grafic a arborelui genealogic prin aspiraie a 2-10 ml de lichid amniotic. al familiei investigate, cu ajutorul semnelor convenionale internaionale; analiza arborelui genealogic: stabilirea tipului de afeciune genetic (ereditar sau neereditar); stabilirea modului de transmitere genetic, n cazul unei boli ereditare. 2. Elaborarea prognosticului genetic presupune: calculul riscului genetic n familia studiat; calculul frecvenei genei patologice n populaie (prin aplicarea legii Hardy-Weinberg). 3. Sfatul genetic este reprezentat de totalitatea recomandrilor pe care geneticianul le ofer pacientului sau cuplului, n legtur cu prentmpinarea apariiei unei afeciuni genetice ereditare la descendeni. Metodele de diagnostic prenatal se clasific n dou categorii: invazive: amniocenteza, biopsia de viloziti coriale, testul -fetoproteinei, examenul sngelui fetal, fetoscopia, diagnosticul preimplantatoriu; neinvazive: ultrasonografia sau echografia. Amniocenteza: este o metod de diagnostic prenatal invaziv; se efectueaz la femeia gravid , n sptmnile 13-16 de sarcin.
O

GENETICA UMAN

123

Indicaii: vrsta matern naintat (peste 35 de ani); avorturi spontane repetate, de etiologie neprecizat; dup naterea unui copil cu diferite anomalii cromozomiale de numr (sindrom Down sau trisomie 21) sau de structur (translocaii cromozomiale), vor fi investigai citogenetic obligatoriu ambii prini; dup naterea unui copil cu malformaii congenitale deschise de tub neural (anencefalie, spina bifida); dup naterea unui copil cu diferite dismetabolii ereditare. Tehnica: Dup anestezia loco-regional abdomino-pelvin, sub ghidaj echografic, se efectueaz o puncie transabdominal, cu ajutorul unui ac de puncie, care se introduce pn n cavitatea amniotic (Fig. nr. 3.1. i 3.2.) De la acest nivel se recolteaz, prin aspiraie, 2-10 ml de lichid amniotic. O dat cu lichidul amniotic, sunt aspirate i celule descuamate de pe suprafaa embrionului. Lichidul de aspiraie (lichid amniotic+celule embrionare) se centrifugheaz.

Fig. nr. 3.2. Amniocentez

Utilitatea metodei: din supernatant (lichidul amniotic), se fac analize biochimice, n scopul decelrii unor produi anormali de metabolism; astfel se dozeaz concentraia de proteine, enzime, glucide i lipide; din sediment (celulele amniotice), se fac culturi celulare, n scopul efecturii analizelor citogenetice (cariotip, test Barr, corpuscul F) i biochimice; avnd n vedere c obinerea unei culturi celulare din celulele amniotice dureaz aproximativ 2-3 sptmni i rezultatul analizei ntrzie, azi se recomand analiza cromozomilor n nucleii interfazici prin tehnica FISH; aceast tehnic, mult mai rapid, permite diagnosticarea cu succes a anomaliilor cromozomiale; precizarea prenatal a sexului produsului de concepie este util n cazul bolilor cu transmitere recesiv legat de cromozomul X (hemofilie). Dezavantaje: este o metod invaziv, traumatizant, att pentru mam, ct i pentru produsul de concepie; riscul de avort al metodei este de 1%. Biopsia de viloziti coriale este o metod de diagnostic prenatal invaziv; se efectueaz la femeia gravid , n sptmnile 8-10 de sarcin. Tehnica: Dup anestezia loco-regional abdomino-pelvin, sub control echografic, cu ajutorul unui cateter introdus transabdominal sau transcervical, se recolteaz prin aspiraie fragmente de citotrofoblast, care din punct de vedere genetic sunt identice cu celulele embrionare (Fig. nr. 3.3.). Fig. nr. 3.3. Din fragmentele recoltate se fac culturi celulare, care se utilizeaz n Recoltare de viloziti continuare, n scopul efecturii unor analize citogenetice i biochimice.

124

INTEGRAREA CUNOTINELOR GENETICE N PRACTICA MEDICAL

Avantaje: metoda este mai puin traumatizant, att pentru mam, ct i pentru embrion; se poate efectua mai devreme. Testul - fetoproteinei este o metod de diagnostic prenatal invaziv; -fetoproteina este o glicoprotein sintetizat de ficat, n prima lun de dezvoltare embrionar, i eliminat prin urin. Tehnica: Determinarea nivelului -fetoproteinei se face la femeia gravid n sptmna a 20-a de sarcin, prin dou metode: metoda direct - presupune dozarea nivelului -fetoproteinei direct n lichidul amniotic, recoltat prin amniocentez; metoda indirect - presupune dozarea nivelului -fetoproteinei n sngele matern, recoltat prin puncie venoas. Interpretarea rezultatelor: n mod normal, nivelul -fetoproteinei este sczut; creterea nivelului -fetoproteinei indic existena unor malformaii congenitale deschise de tub neural: anencefalie, spina bifida; nivelul -fetoproteinei crete i n alte malformaii congenitale: sarcini multiple, moartea sau resorbia unuia dintre gemeni, moartea intrauterin a ftului unic, ameninare de avort, aplazii esofagiene, gastroschizis, rinichi polichistici, nefroz congenital, sindrom Turner, atrezie intestinal, omfalocel, hepatit matern; nivelul -fetoproteinei scade n: mola hidatiform, diabet zaharat decompensat, sindrom Down, sindrom Edwards. Avantaje: prin determinarea nivelului -fetoproteinei, se deceleaz peste 98% dintre cazurile de anencefalie i peste 97% dintre cazurile de spina bifida. Examenul sngelui fetal este o metod de diagnostic prenatal invaziv. Tehnica: sngele fetal se recolteaz din vena ombilical, sub control echografic, cu ajutorul unui ac de puncie (Fig. nr. 3.4.); sngele aspirat este un amestec de snge fetal i snge matern; originea fetal a sngelui poate fi confirmat rapid, prin determinarea volumului eritrocitelor, eritrocitele fetale fiind mai mari dect cele materne.
Fig. nr. 3.4. Recoltare de snge fetal sub ghidaj echografic

Utilitatea examenului: din mostra de snge fetal se fac culturi celulare care se utilizeaz pentru efectuarea de examene citogenetice; n cazul toxoplasmozei materne, n sngele fetal se pot pune n eviden anticorpii specifici IgM; se poate determina incompatibilitatea de Rh.

GENETICA UMAN

125

Fetoscopia este o metoda de diagnostic prenatal invaziv.

Indicaii: se efectueaz n cel de-al 2-lea trimestru de sarcin, n situaia n care ftul investigat ultrasonografic prezint aspect dismorfic. Tehnica: presupune vizualizarea direct a ftului cu ajutorul unui endoscop, care se introduce, sub control echografic, pn n cavitatea uterin. Utilitatea metodei: din vena ombilical, pe cale endoscopic, se pot preleva mici cantiti de snge; analiza acestora permite diagnosticarea unor afeciuni hematologice (hemoglobinopatii cantitative i calitative, hemofilii), imunologice sau infecioase ( infecia cu virus citomegalic sau rubeolic); tot pe cale endoscopic se pot preleva fragmente de piele; biopsiile de piele reprezint singura metod de diagnostic prenatal n cazul dermatozelor familiale (epidermoliza buloas). Dezavantaje: metoda este invaziv, traumatizant, att pentru mam, ct i pentru ft; riscul de avort este crescut, de aceea tehnica este puin utilizat.

Diagnosticul preimplantatoriu este o metod de diagnostic prenatal invaziv; presupune diagnosticul genetic n ziua a III-a dup inseminarea artificial; aceast metod este folosit n cazul fertilizrii in vitro.
Tehnica: presupune recoltarea a 2-3 celule embrionare, n stadiul de 8-16 celule. Utilitatea metodei: stabilete sexul produsului de concepie; permite detectarea prenatal a unor mutaii, prin analiza ADN.

Ultrasonografia sau echografia este o metod neinvaziv de diagnostic prenatal.

Utilitatea examenului: identific numrul de fei; stabilete poziia placentei; apreciaz cantitatea de lichid amniotic: polihidramniosul (prezent n spina bifida, anencefalie, atrezie esofagian, atrezie intestinal) i oligohidramniosul (prezent n disgeneziile renale); determin valorile unor parametri care reflect dezvoltarea ftului: diametrul biparietal, distanta vertex-coccis, lungimea femurului;

126

INTEGRAREA CUNOTINELOR GENETICE N PRACTICA MEDICAL

identific o serie de malformaii congenitale izolate: despicturile palatine, polidactilia, sindactilia, hipertelorismul, hipotelorismul, malformaiile cardiace, malformaiile de tub neural, hidrocefalia, microcefalia, rinichiul polichistic etc. (Fig. nr. 3. 5. i 3. 6.); identific o serie de sindroame genetice ereditare: condrodisplaziile, disostozele membrelor, sindroamele nsoite de agenezii ale membrelor etc. Marea majoritate a malformaiilor congenitale se vizualizeaz dup sptmna a 16-a de sarcin. Excepie fac despicturile labio-palatine i malformaiile cardiace, care se vizualizeaz dup sptmna a 18-a de sarcin.
profil normal

nas plat / absent

despictur

masiv maxilar

brbie mic

bose frontale

frunte teit

HOLOPROZ ENCEFALIE

DESPICTUR LABIAL

MICROGNAIE

ACONDRO PLAZIE

MICROCEFALIE

Fig. nr. 3. 5. Vizualizarea echografic a unor malformaii congenitale

buze normale

orbite/ochi normale

despictur labial: unilateral bilateral median

hipotelorism hipertelorism microftalmie Fig. nr. 3. 6. Vizualizarea echografic a despicturilor labiale i a unor anomalii oculare

GENETICA UMAN

127

Implicaiile bioetice ale consultaiei genetice i ale sfatului genetic

n condiiile unui dignostic prenatal care precizeaz cert existena unei tulburri genetice majore, se pun o serie de probleme etice, legate de strategia sfatului genetic.

ntreruperea cursului sarcinii: indicaii genetice cnd unul dintre prini este purttorul unei translocaii echilibrate , riscul ca embrionul s fie afectat este de 100%; cnd exista riscul de 100% ca viitorul copil sa fie handicapat genetic un copil rezultat din unirea a doi homozigoi pentru aceeai mutaie; cnd ftul este purttorul unei mutaii dominante autozomale (coreea Huntington); cnd ftul are un risc de 50% de a fi purttorul unei mutaii recesive legate de sex iar mutaia nu poate fi detectat prenatal; contactul cu virus rubeolic sau virus citomegalic, n primele dou luni de sarcin, n lipsa unui diagnostic prenatal concludent; cnd se diagnosticheaz prenatal echografic o malformaie congenital sever (anencefalie, spina bifida) sau un sindrom genetic grav (acondroplazie, acondrogeneza). Riscul de recuren n avorturile spontane: 25-30% dac un cuplul are deja un copil viabil; 40-45% dac nu exist nici un copil viabil; dac primul avorton a fost citogenetic anormal, riscul ca i al doilea s fie citogenetic anormal este de 80% (trisomie, mai rar monosomie sau poliploidie); n general, dup un eec reproductiv (avort spontan, nscut mort sau moarte neonatal), riscul unui nou eec reproductiv este de 47%, dac cuplul nu are nici un copil viabil. Descoperirea unei erori genetice nu implic obligatoriu ntreruperea sarcinii. n aceast situaie, medicul are rolul de a informa prinii c au un ft afectat, de a le descrie consecinele anomaliei genetice, de la evoluia fenotipic la sperana de via i posibilitile terapeutice. Ei vor crete copilul dar, nu trebuie s uite c, acesta poate constitui o povar social, fiind evident c, nici o societate nu poate ocroti prea muli copii handicapai. Un rol important n adoptarea deciziei l are geneticianul. Deosebit de complex este situaia feilor cu sindrom Down, Turner sau Klinefelter. Vor accepta prinii un astfel de copil? Raportul cost-beneficiu a fost analizat n S.U.A. ntr-una din aceste cercetri, s-a pornit de la preul amniocentezei i s-a calculat costul diagnosticarii unui copil cu sindrom Down. El era n 1986 de 400.000 de dolari. i totui mult mai puin dect ar costa tratamentul i educaia unui copil cu sindrom Down, care a fost estimat la peste un milion de dolari, depinznd de durata de via a acestuia i de tulburrile pe care le dezvolta de-a lungul vieii. Prinii se ntreab cine este vinovat de naterea unui copil malformat, tinznd s se culpabilizeze reciproc. Nu exist vinovai n patologia genetic, dovada fiind riscul general al populaiei. Orice viitoare mam, are un risc de a avea un copil cu handicap mai mare sau mai mic. n aceste condiii, etic, se pune problema: ce trebuie spus prinilor? tot adevrul? se pare c, deseori, nu, acccetundu-se asupra faptului c exist un risc de a avea un copil anormal iar mama va nate obligatoriu, numai dup un diagnostic prenatal. n ipoteza n care copilul prezint o mutaie de novo, se va accentua asupra inevitabilelor erori ale naturii i li se va preciza c riscul recurenei este practic absent. Nimeni nu poate preciza, dac mutaia a survenit n timpul spermatogenezei sau a ovogenezei. n concluzie, medicul nu trebuie s ascund niciodat amploarea real a riscului de recuren a unei boli genetice. Un risc de 25 % poate fi inacceptabil pentru unii i acceptabil pentru alii.

128

INTEGRAREA CUNOTINELOR GENETICE N PRACTICA MEDICAL

Opiunea prinilor este condiionat de numeroi factori: nivel educaional, mediu social, principii etice, religie. Destul de puini prini neleg foarte bine ce nseamn un risc de 3% sau de 25%. De aceea, se recomand ca discuiile s fie reluate pn cnd avem certitudinea c acetia au descifrat sensul explicaiilor noastre. Foarte curnd va apare o alt medicin, o medicin care va utiliza concepiile geneticii i mai ales tehnologiile ei, o medicin cu o profund ncrctur etic. Purttorii de mutaii vor constitui o categorie social aparte, i anume aceea a bolnavilor sntoi, pentru care se poate pune problema: vor fi izolai sau se vor izola singuri? Care este preul social pe care l vor plti? Problema central actual a bioeticii este gsirea unui echilibru ntre tehnologie i medicina clasic, scopul fiind confortul interuman caracteristic actului medical. Un deziderat al bioeticii este armonizarea cercetarii medicale actuale, fundamentale sau nu, cu legislaia existent, spunndu-i cuvntul n relaia juridic - medicin prin actualizarea legislaiei. Prin activitatea sa, bioetica reprezint o garanie a prioritii interesului individului in raport cu societatea.
Bibliografie: 1. Jan M. Friedman, Fred J. Dill, Michael R. Hayden, Barbara C. McGillivray, (1992) Genetics-Harwal Publishing Company, Malvern, Pennsylvania 2. Kipros H. Nicolaides, Neil J. Sebire, Rosalinde J.M. Snijders, (1999) The 11-14-week scan The Parthenon Publishing Group, New YorK, London 3. D. Bonthorn, D. FitzPatrick, M. Porteous, A. Trainer, (1998) Clinical Genetics- WB Saunders Company Limited, London, Philadelphia, Toronto, Sydney, Tokio 4. Maximilian C., Poenaru L.,Bembea M. (1996) Genetic clinic, Ed. Pan-Publishing House, Bucureti O Web site: http://www.hslib. washington.edu/helix O Web site: http://www.fetal.com/gen_diagnostic_chronic.htm Intrebri recapitulative

1. Care dintre tehnologiile reproductive asistate poate ajuta urmtoarele cupluri? a. un brbat i o femeie sunt purttori ai genei mutante bS. Ei nu doresc s aib un copil bolnav de sicklemie, dar, n acelai timp, vor s evite un avort n cazul n care produsul de concepie se dovedete a fi afectat; b. o femeie i face un test ADN care arat c prezint n genotip gena pentru boala Huntington; ea i dorete s aib un copil, dar nu dorete s-i transmit gena mutant. 2. Artai asemnrile i deosebirile dintre diagnosticul preimplantatoriu, biopsia vilozitilor coriale i amniocentez. 3. De ce diagnosticul de sindrom Down al ftului stabilit prin amniocentez este mai precis dect un diagnostic similar stabilit prin analiza biochimic a serului matern? 4. Ce avantaje i dezavantaje ridic screening-ul pentru tulburri genetice n: a. perioada neonatal; b. perioada colar; c. clinicile de planning familial; d. perioada antenatal. 5. O femeie n vrst de 26 de ani dorete s-i fac un test genetic pentru cancerul de sn i cancerul de colon. Femeia are o istorie familial negativ pentru formele de cancer respective, iar longevitatea membrilor familiei sale este notabil. Ce o sftuii n privina screening-ului? 6. O femeie n vrst de 35 de ani este internat n clinica de obstetric. Este nsrcinat n luna a cincea i testele arat c nivelul -fetoproteinei din sngele su este de trei ori mai mare dect normalul. Ce-i recomandai?

GENETICA I EVOLUIA POPULAIILOR UMANE

Genele pot aciona independent sau n legtur cu factorii de mediu, exprimnd caractere fenotipice noi i producnd variaie genetic n cadrul populaiilor. Evoluia se realizeaz prin adaptrile progresive ale populaiilor la mediul lor de via i are la baz variabilitatea genetic a populaiei i selecia natural. Fenotipurile adaptate la condiiile de mediu sunt selectate i meninute n populaie, n timp ce fenotipurile neadaptate vor fi eliminate. Selecia acioneaz asupra fenotipului organismului i decide soarta genotipului ce-l determin, deci, care dintre gene vor fi transmise de la o generaie la alta.

TEME-CHEIE: Genetica populaiilor; Evoluia populaiilor umane; ntrebri recapitulative; Topic Test. LUCRAREA PRACTIC 1: Genetica populaiilor
Obiectivele lucrrii:
caracterizarea unei populaii umane din punct de vedere genetic; nelegerea legii Hardy-Weinberg ca o extindere a legilor mendeliene la nivel populaional; utilitatea estimrilor legii Hardy-Weinberg pentru genetica medical i evoluia biologic a speciei umane. Populaia reprezint o grupare de indivizi care aparin aceleiai specii, ocup acelai teritoriu geografic la un moment dat i se pot ncrucia liber ntre ei. ntre indivizii populaiei exist diferene fenotipice condiionate de genotipuri diferite. Structura genetic a unei populaii se refer la totalitatea genelor prezente n acea populaie, la frecvena lor i la modul cum sunt distribuite aceste gene n genotipurile indivizilor. Totalitatea genelor dintr-o populaie a fost numit genofond (gene pool). Genofondul reprezint rezervorul genetic al unei populaii. Dac factorii de mediu sunt constani, atunci genofondul nu se schimb. Dac factorii de mediu sunt instabili, atunci genofondul se va schimba apar gene noi, unele gene vor fi mai frecvente, altele vor fi eliminate. O populaie

130

GENETICA I EVOLUIA POPULAIILOR UMANE

al crei genofond difer de la o generaie la alta este o populaie dinamic, supus schimbrilor evolutive. Studiile genetice populaionale utilizeaz analize statistice pentru: a estima frecvena alelelor i a genotipurilor n cadrul unei populaii; a evalua factorii care modific aceste frecvene n timp.

Frecvena alelelor i a genotipurilor

Apariia unui caracter fenotipic este condiionat de una sau mai multe gene. Formele alternative ale aceleiai gene se numesc alele. Un individ poate avea numai dou alele diferite ale unei gene date, dar o populaie poate avea un numr mult mai mare de alele diferite. ntr-o populaie, fiecare alel are o frecven diferit. Frecvena alelic se refer la procentul pe care l reprezint o anumit alel din totalul alelelor unei gene ntr-o populaie. Frecvena alelelor unei gene poate fi calculat dac se cunoate modul de transmitere a genei i numrul de alele diferite prezent ntr-o populaie. Frecvenele particulare ale alelelor sunt importante pentru calcularea frecvenei genotipurilor. Genotipul unui individ este un factor major n determinarea fenotipului, astfel c, prin calcularea frecvenelor genotipice, se pot estima rezultatele unei ncruciri particulare. Frecvena genotipurilor ntr-o populaie se refer la procentul de indivizi care au un genotip particular. Diversitatea genotipurilor determin polimorfismul genetic ntr-o populaie. Polimorfismul genetic se refer la existena a dou sau mai multor fenotipuri condiionate genetic. Relaia matematic dintre frecvenele alelelor i frecvenele genotipurilor dintr-o populaie a fost enunat de matematicianul englez G.H.Hardy i de medicul german W.Weinberg, independent unul de cellalt, n aceeai perioad a anului 1908. Relaia este cunoscut sub numele de echilibrul Hardy-Weinberg, la baza cruia st urmtorul principiu: n anumite condiii, frecvena alelelor ntr-o populaie va rmne constant de la o generaie la alta. Condiiile impuse sunt: 1. efectivul numeric al populaiei trebuie s fie suficient de mare ca s nu apar schimbri ntmpltoare de la o generaie la alta; 2. ncrucirile sunt ntmpltoare (panmixie); 3. nu apar mutaii; 4. toate fenotipurile au aceeai viabilitate i fertilitate, astfel c nu apare selecia natural; 5. nu exist emigrri sau imigrri ale indivizilor din populaie, deci nu exist flux genic ntre populaii. O populaie sexuat care respect aceste condiii se afl n echilibru genetic (frecvena alelelor nu se schimb n succesiunea generaiilor). Echilibrul Hardy-Weinberg este un model matematic simplu, care este utilizat n genetica populaiilor pentru calcularea frecvenei alelelor. Modelul se adapteaz modului de transmitere i expresie al: genelor autozomale aflate n relaie de dominan-recesivitate; genelor codominante; genelor plasate pe cromozomii sexului; polialeliei.

GENETICA UMAN
O

131

Echilibrul Hardy-Weinberg n cazul unei gene autozomale cu dou alele aflate n relaie de dominan-recesivitate. S considerm o gen cu dou alele: A i a. ntr-o populaie genotipurile parentale posibile, conform legilor lui Mendel, sunt AA, Aa i aa. Gameii produi de indivizii acestei populaii vor fi de dou tipuri: gamei care au alela A i gamei care au alela a. Prin combinarea ntmpltoare a acestor gamei se vor forma zigoi care au genotipurile generaiei urmtoare. Dac notm: p frecvena alelei A n populaie q frecvena alelei a, atunci, relaia dintre frecvena alelelor i a genotipurilor este urmtoarea: Spermatozoizi Ovule A(p) A(p) A(q) AA(p2) Aa(pq) a(q) Aa(pq) aa(q2)

frecvena genotipurilor n generaia urmtoare va fi: AA+2Aa+aa = 100% sau 2 2 p + 2pq + q = 1 (ecuaia Hardy-Weinberg) Fenotip A a Genotip AA Aa aa Frecvena genotipurilor P2 2pq q2 Frecvena fenotipurilor p2 + 2pq q2

unde: (p + q)2 = 1 p + q = 1 sau q = 1 p. n majoritatea populaiilor este posibil s estimm frecvena celor dou alele din frecvena homozigoilor recesivi, acesta fiind singurul genotip care poate fi identificat direct din fenotipul pe care l exprim. Homozigoii dominani i heterozigoii nu se deosebesc fenotipic. De exemplu: amelogenesis imperfecta tipul hipomatur (defect de formare a smalului dentar, care se exprim prin apariia unui smal de grosime normal, dar friabil i cenuiu) este condiionat autozomal recesiv. ntr-o populaie din nordul Suediei, o persoan din 7 189 are amelogenesis imperfecta. Persoana cu defectul dentar este homozigot recesiv, ceea ce n termenii ecuaiei Hardy-Weinberg ar fi q2= 1/7189 = 0,00013.

132

GENETICA I EVOLUIA POPULAIILOR UMANE

Cunoscnd q2 = 0, 00013, frecvena alelei recesive va fi sau 1,1%, iar frecvena alelei dominante va fi: p = 1 q = 0,989 sau 98,9%. Frecvena genotipului homozigot dominant n populaie va fi: p2 = 0,9892 = 0,978 sau 97,8%. Frecvena genotipului heterozigot n populaie va fi: 2pq = 2x0,989x0,011 = 0,0217 sau 2,17%. Aceste persoane sunt purttoare ale alelei mutante, dar fenotipic au smalul normal. O populaie n care frecvena alelelor rmne constant de la o generaie la alta este o populaie aflat n echilibru genetic pentru acea gen. n concluzie, n populaia suedez investigat, frecvenele alelei dominante (p) i ale alelei recesive (q) au rmas constante n noua generaie. Frecvenele genotipice estimate prin ecuaia Hardy-Weinberg pentru noua generaie sunt identice cu cele observate n populaie. Echilibrul Hardy-Weinberg n cazul alelelor codominante S considerm o gen cu dou alele A i B. ntr-o populaie genotipurile parentale posibile, conform legilor lui Mendel, sunt AA, AB i BB. Gameii produi de membrii acelei populaii vor fi gamei cu alela A i gamei cu alela B. Prin combinarea ntmpltoare a acestor gamei vor aprea zigoi care vor forma generaia descendent. Dac notm: p frecvena alelei A, att n ovule, ct i n spermatozoizi; q frecvena alelei B, att n ovule, ct i n spermatozoizi, atunci, frecvena genotipurilor poate fi calculat utiliznd modelul matematic al lui Hardy-Weinberg.
O

Spermatozoizi

Ovule A(p) A(p) B(q) AA(p2) AB(pq) B(q) AB(pq) BB(q2)

Fenotip A AB B

Genotip AA AB BB

Frecvena genotipurilor P2 2pq q2

Frecvena fenotipurilor p2 2pq q2

frecvena genotipurilor va fi: p2 + 2pq + q2 = 1; frecvena alelelor va fi simplu de calculat pentru c alelele fiind codominante, fiecare genotip este distinct fenotipic. Se va nsuma numrul de alele al fiecrui fenotip i se va mpri la numrul total de alele.

GENETICA UMAN

133

De exemplu, ntr-o populaie format din 100 de eschimoi, 36 au grup M, 48 au grup MN i 16 au grup N. 36 de indivizi M (MM) au 72 alele M 48 de indivizi MN (MN) au 48 alele M + 48 alele N 16 indivizi N (NN) au 32 alele N Total 120 alele M+80 alele N frecvena alelei M (p) = 120 / 200 = 0,6 frecvena alelei N (q) = 80 / 200 = 0,4 Echilibrul Hardy-Weinberg n cazul genelor plasate pe gonozomi Femeile au doi cromozomi X n cariotip, deci vor avea dou alele ale unei gene aflate pe cromozomul X. Brbaii au doar un singur cromozom X n cariotip, deci o singur alel a unei gene localizate pe cromozomul X. Se observ c alelele unei gene de pe cromozomul X sunt distribuite diferit ntr-o populaie. S considerm o gen aflat pe cromozomul X cu dou alele XA i Xa. p frecvena alelei XA q frecvena alelei Xa frecvena genotipurilor pentru femei:
O

Spermatozoizi

Ovule XA(p) XA(p) Xa(q) XAXA(p2) XAXa(pq) Xa(q) XAXa(pq) XaXa(q2)

frecvena genotipurilor pentru brbai: Spermatozoizi Ovule XA(p) Y XAY(p) Xa(q) XaY(q)

La brbai, frecvena alelei unei gene localizate pe cromozomul X este egal cu frecvena genotipic i fenotipic. De exemplu, hemofilia A (deficiena factorului VIII de coagulare a sngelui) este condiionat de o gen recesiv aflat pe cromozomul Xq28. Frecvena bolii printre brbai este 1/10 000 (q = 0,0001). Frecvena femeilor bolnave va fi q2, a femeilor purttoare 2pq i a femeilor sntoase p2. Raportul brbai bolnavi / femei bolnave va fi q / q2.

134
O

GENETICA I EVOLUIA POPULAIILOR UMANE

Echilibrul Hardy-Weinberg n cazul aleliei multiple (polialelia) Uneori, o gen poate avea mai mult de dou alele diferite, formnduse o serie de alele multiple. La om, caracterul de grup sangvin n sistemul ABO este controlat de o serie alelic A, B i O. Considerm p frecvena alelei A, q frecvena alelei B i r frecvena alelei O. Frecvena genotipurilor i fenotipurilor grupelor sangvine n populaie va fi: Fenotipuri A B AB O Genotipuri AA AO BB BO AB OO Frecvena genotipurilor P2 2pr q2 2qr 2pq r2 Frecvena fenotipurilor p2 + 2pr q2 q2 + 2qr 2pq r2

N.B. Alelele A i B sunt dominante fa de O i codominante ntre ele. p2 + 2pr + q2 + 2qr + 2pq + r2 = 1 p+q+r=1
2 r = r2

prin calcul matematic se deduce:

p = 1 proporia de indivizi cu fenotip B + O p = 1 proporia de indivizi cu fenotip B A+ O q

De exemplu, ntro populaie format din 3 977 de indivizi au fost gsite urmtoarele frecvene alelice: p = 0,27 , q = 0,06 i r = 0,67. Aplicnd calculul pentru alelia multipl, se estimeaz c frecvenele genotipice care apar n urma cstoriilor ntmpltoare vor fi: p2 (AA) = 0,272 = 0,0729 2pr(AO) = 2(0,27)(0,67) = 0,3618 q2 (BB) = 0,062 = 0,0036 2qr(BO) = 2(0,06)(0,67) = 0,0804 2pq(AB )= 2(0,27)(0,67) = 0,0324 r2 (OO) = 0,672 = 0,4489. n populaia respectiv vor fi: indivizi cu grup A (0,0729+0,3618)(3977) = 1729 indivizi cu grup B (0,0036+0,0804)(3977) = 334 indivizi cu grup AB (0,0324)(3977) = 129 indivizi cu grup O (0,4489)(3977) = 1785

GENETICA UMAN

135

Factorii care modific echilibrul Hardy-Weinberg

Echilibrul Hardy-Weinberg este un model ideal pentru c este adevrat numai n anumite condiii specifice. Orice abatere de la condiiile impuse de echilibrul Hardy-Weinberg are ca rezultat alterarea frecvenei alelelor n populaie, ceea ce conduce la o cretere sau descretere a frecvenei alelelor de la o generaie la alta. Pe termen lung, estimrile legii Hardy-Weinberg nu sunt realiste (populaiile naturale sunt dinamice, evolueaz), dar pe termen scurt se pot face previziuni corecte ale frecvenelor actuale ale fenotipurilor i genotipurilor ntr-o anume populaie. Echilibrul Hardy-Weinberg este util i pentru c permite studiul acelor factori care introduc i menin diversitatea genetic n populaie.
O

Mutaia este o modificare spontan i ereditar a materialului genetic, fiind o surs continu de noi alele. Mutaia produce cele mai multe schimbri evolutive pentru c determin introducerea noilor alele n populaie, mrind variaia genetic. Mutaia nu produce o evoluie rapid a populaiei pentru c frecvena cu care apare este mic. O mutaie dominant va fi observat imediat n populaie pentru c se exprim fenotipic, dar o mutaie recesiv nu va putea fi observat dect dup mai multe generaii, cnd se va homozigota i va produce un fenotip distinct. Din acest motiv, s-au dezvoltat metode indirecte de analiz a mutaiilor recesive ntr-o populaie, programe de screening genetic pentru heterozigoi, purttori de gen mutant.
O

Migraia este deplasarea unui grup de indivizi dintro populaie n alt populaie. Amestecul noilor indivizi cu populaia autohton poate altera frecvena alelelor dac numrul migratorilor este mare i dac frecvena lor alelic este diferit de cea a populaiei n care au intrat. De regul, efectul migraiei const n creterea numrului de indivizi ai populaiei receptoare i creterea variaiei genetice a acelei populaii prin ptrunderea de alele care nu existau anterior. Prin migraie, echilibrul Hardy-Weinberg se modific pentru generaia n care au intrat noi indivizi, dar se poate reface n generaiile urmtoare dac exist condiii. Migraia poate fi definit i ca un flux genic, care asigur micarea alelelor ntre dou populaii prin deplasarea indivizilor.
O

Cstoriile nentmpltoare se refer la cstoriile ntre indivizi nrudii genetic (consangvini) i la cstoriile ntre indivizi similari fenotipic. Cstoriile consangvine sunt mai frecvente n izolatele populaionale (geografice, etnice, religioase, economice) i au ca efect homozigotarea alelelor n cadrul populaiei. Cstoriile ntre indivizi similari fenotipic apar mult mai frecvent n populaie dect se ateapt teoretic. Ele au n vedere indivizii care i aleg un partener cu aceeai culoare a pielii, cu aceeai nlime, inteligen etc. Acest tip de cstorii nu modific frecvena alelelor, dar frecvena genotipic este alterat.
O

Selecia natural este cel mai important factor perturbator al frecvenei alelice. Indivizii unei populaii se deosebesc ntre ei prin viabilitate i potenial reproductiv. Selecia natural va fixa n populaie fenotipul care asigur individului o supravieuire mai ndelungat i un numr mai mare de descendeni. n timp, alelele care condiioneaz acest fenotip se vor extinde n populaie, nlocuind alelele avantajoase cndva. Rezultatul seleciei naturale este o adaptare mai bun a populaiei la condiiile de mediu n care triete.
O

136
O

GENETICA I EVOLUIA POPULAIILOR UMANE

Deriva genetic definete fixarea sau eliminarea accidental, ntmpltoare, a unor alele n cadrul unei populaii. Deriva genetic este observat n populaiile mici, izolate, care n succesiunea generaiilor nu fac schimb de alele cu alte populaii.

Aplicaiile echilibrului Hardy-Weinberg

1. calcularea frecvenei heterozigoilor, purttori de gen mutant recesiv. Cunoscnd frecvena bolii n populaie (frecvena fenotipului recesiv), se pot afla frecvena alelei recesive (q) i frecvena heterozigoilor (2pq) asimptomatici. S-a observat c atunci cnd alela recesiv este rar (q este foarte mic), exist un numr mare de purttori n populaie. Cu ct numrul de purttori este mai mare, cu att crete riscul de a se ntlni cu un alt purttor cu care nu este nrudit. De exemplu: fibroza chistic are o frecven de 1: 2 500 n populaiile caucaziene. Purttorii sunt 1:25, ceea ce nseamn c exist 100 de purttori pentru fiecare bolnav. Probabilitatea ca doi purttori nenrudii genetic s se ntlneasc este 1/25 x 1/25. Dac amndoi genitorii sunt purttori, atunci riscul de a avea un copil bolnav este de 1/4 conform legii mendeliene a segregrii caracterelor. Aadar, riscul ca acest cuplu s aib un copil bolnav va fi: 1/4 x 1/25 x 1/25; fenilcetonuria are o frecven de 1:12 000 n populaia european. Purttorii sunt circa 1:55, ceea ce nseamn c exist 220 de purttori sntoi pentru fiecare bolnav. Aceste calcule sunt utile pentru programele de screening genetic n populaiile unde se estimeaz c frecvena purttorilor este mare (talasemia n rile mediteraneene, boala TaySachs n populaiile de evrei). 2. populaiile umane pot fi caracterizate prin frecvenele lor alelice. De exemplu, repartiia frecvenelor alelelor A,B i O ale sistemului de grup sangvin ABO: Continentul Africa America Asia Europa Oceania O 0,653 0,721 0,595 0,632 0,685 Frecvene alelice A 0,189 0,204 0,204 0,277 0,243

B 0,158 0,075 0,201 0,090 0,007

Analiza acestor frecvene poate indica gradul de nrudire genetic ntre populaii geografice diferite. 3. populaiile umane evolueaz pentru c n cadrul lor apar schimbri ale frecvenei alelelor. Dac frecvenele alelice observate n populaie difer semnificativ fa de frecvenele ateptate teoretic prin legea Hardy-Weinberg, atunci n populaia respectiv s-a produs o modificare evolutiv i trebuie identificat factorul care a produs aceast schimbare (mutaia, selecia, deriva genetic, migraia).
Bibliografie 1. Lewis Ricki (1997) Human Genetics, 2nd ed, McGrawHill, pg. 223253. 2. Pennington Sandra (2000) Introduction to Genetics, Blackwell Science, pg. 185200. O Web sites: http://www.utexas.edu/courses/gene/L33.htm http://www.//anthro.palomar.edn/synthetic/synth2.htm

GENETICA UMAN

137

LUCRAREA PRACTIC 2: Evoluia populaiilor umane

Obiectivele lucrrii:
caracterizarea general a etapelor evoluiei umane; compararea scheletului omului modern cu al formelor umane fosile i evidenierea diferenelor morfologice; evidenierea unor schimbri morfologice n populaiile umane actuale. Evoluia este procesul prin care populaiile i schimb constituia genetic dea lungul timpului. ntr-o populaie dat, evoluia este studiat la dou niveluri: microevoluia descrie micile schimbri ale frecvenelor alelelor care apar n cteva generaii succesive; macroevoluia descrie schimbrile profunde ale constituiei genetice care apar n succesiunea a mii de generaii i care duc la formarea de specii noi (grup de populaii naturale izolate reproductiv de alte asemenea grupri). Evoluia este caracteristic populaiilor i speciilor pentru c au un timp de existen nedefinit comparativ cu indivizii unei populaii care au o longevitate limitat. Evoluia este rezultatul a doi factori: apariia variaiilor ereditare ntmpltoare; selecia natural. Condiiile de mediu n care triesc indivizii unei populaii nu sunt constante. Astfel, schimbrile factorilor de mediu produc modificri ale structurii genetice a indivizilor, numite variaii individuale. Transmiterea n descenden a acestor variaii transform fenomenul individual al variabilitii n procesul evoluiei populaiilor. n cadrul populaiilor acioneaz selecia natural, care adapteaz organismele la mediul lor de via. Selecia pstreaz variaiile individuale care se dovedesc a fi utile pentru supravieuirea populaiei n noile condiii i elimin variaiile dezavantajoase. Selecia acioneaz asupra fenotipului i prin fenotip asupra genotipului. Rata cu care se schimb caracteristicile genetice ale unei populaii se numete rata evoluiei. Rata evoluiei la om este rapid, fiind influenat de factori genetici i culturali. Aadar, evoluia biologic la om s-a fcut n paralel cu evoluia cultural. Evoluia uman poate fi subdivizat n trei etape: locomoia biped; reducerea mrimii maxilarelor; encefalizarea. Datele actuale despre originea i evoluia omului sunt incomplete i controversate. Pentru a dovedi procesul de evoluie a omului s-au adus argumente din domeniul paleoantropologiei i geneticii.

Dovezi ale evoluiei furnizate de paleoantropologie

Paleoantropologii ncearc s reconstituie etapele procesului de evoluie a omului pe baza studiului fosilelor. Datarea fosilelor, distribuia lor geografic i analiza comparativ a caracterelor lor anatomice au permis clasificarea lor i alctuirea unui arbore evolutiv

138

GENETICA I EVOLUIA POPULAIILOR UMANE

(nc incomplet i provizoriu!) al omului modern (Fig. nr. 4.1.). Orice fosil nou descoperit creeaz posibilitatea unor reinterpretri ale datelor existente i modificarea poziiei formelor ancestrale n seria evolutiv. Compararea caracterelor biomil. ani chimice, anatomice, fiziologice, 0 comportamentale i genetice ale H.sapiens omului modern cu caracterele H.neanderthalensis maimuelor antropomorfe actuale H.heidelbergensis arat c specia uman nu descinde H.antecessor din nici una dintre speciile acestui H.erectus 1 grup, dei exist multe similitudini. Omul i antropomorfele actuale descind dintr-un strmo comun, care a trit n urm cu 810 milioane de ani. Identificarea moH.ergaster 2 mentului n care s-a produs P.boisei scindarea ramurii care a condus P.robustus H.rudolfensis H.habilis ctre forma uman modern de cea care a evoluat ctre maimuele antropoide actuale este nc Au.africanus Au.garhi P.aethiopicus incert. Teoriile recente susin c 3 acum 6 milioane de ani s-a produs separarea celor dou linii evoluAu.bahrelghazali tive divergente: una a condus ctre Au.afarensis omul modern i alta ctre maimuele antropomorfe actuale (cim4 Au.anamensis panzeul i gorila). Pe linia umanizrii s-au nscris Ar.ramidus urmtoarele forme: O Orrorin tugenensis fosil descoperit la sfritul anului 2000 5 n Tugen Hills, Kenya. Resturile gsite au fost femurul stng, fragFig. nr. 4.1. Arborele evolutiv al omului modern mente de maxilar, dini izolai de pe maxilar incisiv central mare i robust, canin mare, molar mic cu smalul gros i de pe mandibul premolarul 4 asemntor maimuelor antropomorfe, oase ale membrelor superioare i o falang. A fost datat ca avnd o vechime de 5,66,2 milioane ani. Primele investigaii au stabilit c este vorba de un hominid* de mrimea unui cimpanzeu, agil, arboricol, dar cu deplasare biped pe sol. O Ardipithecus ramidus descoperit n 1994, la care se adaug i alte fosile fragmentare descoperite ntre 1997 i 2001, n Etiopia. Sa stabilit c are o vechime de 5,2 5,8 milioane ani. Unii paleoantropologi l consider strmoul cimpanzeului, alii l consider strmoul omului modern. Dentiia (morfologia premolarilor i a molarilor) se aseamn mai mult cu a maimuelor, avnd i un smal mult mai subire dect al hominidelor. Caninii sunt asemntori hominidelor. Avea o talie de 122 cm (indicat indirect de un humerus fosil) i posibil un mers biped. Investigaiile continu pentru a se stabili cu exactitate dac este sau nu o form evolutiv nscris pe linia umanizrii.
*

Hominid membru al familiei care cuprinde populaiile fosile i actuale ale omului.

GENETICA UMAN
O

139

Australopitecii reprezint un grup de specii care au trit n Africa ntre 4 i 1 milion de ani n urm. Aveau mers biped, dar analiza oaselor plantei i a altor oase ale scheletului arat c unele forme aveau o via arboricol. Pe baza morfologiei craniodentare s-a dedus c aveau un regim alimentar vegetarian, cu excepia unor forme care consumau hran animal (A.grahi descoperit n 1999, cu trsturi intermediare ntre A.afarensis i H.habilis, consuma carne i folosea unelte de piatr). Capacitatea cutiei craniene era ntre 400 i 500 cm3 comparabil cu a cimpanzeului actual. Cel mai faimos australopitec este A.afarensis reprezentat de Lucy, o fosil descoperit n 1974 la Afar, n Etiopia, i datat cu o vechime de 2,93,2 milioane de ani. Este unul dintre scheletele fosile cele mai complete descoperite de antropologi. Reconstituirea detaliat realizat pe baza fragmentelor osoase i dentare a permis unele precizri: este vorba despre o femeie care a murit la 20 de ani, cu o nlime de 120 cm i o greutate de circa 30 kg, membre superioare lungi, cele inferioare scurte, mers biped, facies de maimu, frunte joas, capacitate cranian 415 cm3, maxilare prognate, lipsa mentonului, arcada dentar ngustat anterior n form de V, dentiia prezenta un amestec de trsturi umane i antropoide, molari mari adaptai la sfrmarea rdcinilor i fructelor, canini mai scuri ca ai antropoidelor actuale, dar mai mari dect cei umani, diastem prezent, primul premolar mandibular unicuspid. Dei au existat multe specii de australopiteci, dei au prosperat timp de cteva milioane de ani, encefalul lor nu reflect tendine evolutive, ceea ce nseamn c nu australopitecii au condus evoluia ctre Homo habilis (omul ndemnatic). Tranziia de la australopiteci la Homo habilis a fost fcut de forme care duceau viaa n grup, vnau animale mai puternice dect ei folosind unelte primitive, care i preparau hrana vegetal din tuberculii savanei, care aveau o psihologie sexual asemntoare omului, triau n cuplu ( fr promiscuitate sexual) i la care relaiile dintre generaii se exprim prin grija fa de urmai (descendenii unui cuplu erau ngrijii de prini i bunici). Acest mod de via a impus adaptri morfofiziologice i comportamentale, printre care i dezvoltarea encefalului. Homo habilis a trit acum 2 1,5 milioane ani, descoperit n Africa de Sud, gracil (127cm i 45 kg), biped, similar australopitecilor n multe privine, dar cu o fa mai puin prognat, cu o capacitate cranian ntre 500 i 800 cm3, posibil s fi avut o vorbire rudimentar. Sau descoperit, alturi de fosilele lui H.habilis, i unelte primitive din piatr, considernduse c H.habilis este primul productor de unelte.
O

Homo erectus denumire sub care sunt cunoscute numeroase fosile care au trit acum 1,8 milioane 300 000 de ani n urm, descoperite n Java, China i Africa, fiind contemporane cu formele trzii de australopiteci i cu H.habilis. H.erectus avea o talie similar omului modern, biped, schelet robust, craniu lung i ngust, frunte teit, torus supraorbitar dezvoltat, fa prognat, mandibul fr menton, dentiia asemntoare omului modern (dar cu unele diferene: incisivii centrali superiori n form de urubelni, arcada dentar parabolic, canini mai robuti, molarii 2 i 3 inferiori au cinci cuspide, taurodontism), capacitate cranian ntre 780 i 1 225 cm3, folosea graiul articulat. Tria n colectiviti, avea organizare social, producea i utiliza unelte de piatr i folosea focul. Prin migraii s-a rspndit geografic n Africa, Asia i Europa, evoluia sa avnd un caracter local (diferenieri locale care au condus la populaii regionale distincte). H.erectus nu este predecesorul direct al lui H.sapiens, dar formele fosile de legtur care ar trebui s prezinte schimbri evolutive, caractere vechi i noi, nu au fost identificate nc.
O

140

Plana

Prognatismul alveolar n cteva etape ale evoluiei umane

GENETICA I EVOLUIA POPULAIILOR UMANE

Australopithecus africanus Australopithecus robustus

Homo erectus

Homo sapiens neanderthalensis

Homo sapiens recens

GENETICA UMAN
O

141

Homo sapiens arhaic (Homo heidelbergensis) a aprut cu 500 000 de ani n urm. Prezenta asemnri, dar i deosebiri fa de H.erectus: schelet mai puin robust, craniu mai rotunjit, capacitate cranian de circa 1 300 cm3, mrimea dinilor diminuat. O Homo sapiens neanderthalensis a aprut n urm cu 230 000 de ani i a disprut n urm cu 30 000 de ani. Prima fosil a fost descoperit n 1856, n Europa, pe valea Neander, n Germania. A trit n zone cu climat rece i aspru. Avea o constituie robust, masiv, circa 168 cm nlime, un schelet cu oase groase i grele, care arat c musculatura ataat oaselor era puternic, craniul avea un occiput proeminent, capacitate cranian de circa 1 450 cm3, torus supraorbitar dezvoltat, frunte teit, prezenta o fa prognat n special etajul mijlociu, menton schiat, molari de tip taurodont, dinii anteriori mari. Triau n colectiviti, n peteri, produceau unelte, utilizau focul i foloseau ca mbrcminte piei de animale, i ngropau morii. Studii recente arat c ultimele forme de neandertalieni au convieuit un timp cu primele forme ale lui Homo sapiens modern, dar indivizii acestor forme nu sau ncruciat ntre ei. Sau gsit fosile n toat Europa i n Orientul Mijlociu. Poziia filogenetic este controversat. Unii l consider ram stins din evoluia spre omul modern, alii l consider candidat nscris pe linia umanizrii i predecesorul direct al lui Homo sapiens modern. O Homo sapiens sapiens (modern) a aprut n urm cu 120 000 ani. Fosilele lui Homo sapiens modern evideniaz caractere similare omului actual talia ntre 160 i 180 cm, pilozitate redus, schelet gracil, capacitate cranian n medie 1 600 cm3, frunte nalt, arcade sprncenoase slab dezvoltate, fa uor prognat, brbie proeminent, dini nc mari. Homo sapiens sapiens era larg rspndit, pe teritorii cu condiii de via diverse. Populaiile de Homo sapiens sapiens au trit timp ndelungat n condiii de izolare relativ, ceea ce explic diversitatea trsturilor lor. Reconstituirea modului lor de via arat c: produceau unelte i arme mult mai sofisticate folosind ca materie prim oase i coarne, i confecionau haine, gravau i sculptau, i decorau uneltele, produceau obiecte de podoab i chiar instrumente muzicale (cu 20 000 de ani n urm). n acelai timp cu evoluia biologic, are loc i evoluia cultural, astfel c astzi civilizaia i cultura reprezint cea mai important for pentru viitorul biologic al speciei umane.

Evoluia aparatului dento-maxilar

Mandibula i dinii sunt cele mai frecvente elemente fosile descoperite n spturile arheologice. Motivul pentru care s-au conservat n timp este simplu: sunt cele mai dure componente ale scheletului i nu au fost utilizate drept hran de alte animale. n procesul umanizrii, evoluia craniului a nsemnat reducerea dimensional a craniului visceral (reducerea prognatismului, scurtarea mandibulei) i mrirea cutiei craniene. Aparatul dentar a evoluat fr schimbri spectaculoase, meninnd modelul de baz hominoid*, n acord cu tipul de hrnire (frugivor, carnivor, omnivor). Morfologic, au aprut modificri dentare similare la specii cu caracteristici biologice diferite. Formula dentar primitiv antropoid include pe hemiarcad 2 incisivi, 1 canin, 3 premolari i 3 molari, n total fiind 36 de dini. Acest formul s-a pstrat la antropomorfele Lumii Noi ( cebidele din America), n timp ce maimuele Lumii Vechi (gibonul i urangutanul din Asia, babuinul, cimpanzeul i gorila din Africa) i omul modern pierd un premolar de pe hemiarcad, avnd formula dentar cu 32 de dini (Fig. nr. 4.2.).
*

Hominoid membru al superfamiliei care cuprinde forme fosile i actuale ale maimuelor i omului.

142

GENETICA I EVOLUIA POPULAIILOR UMANE

Australopithecus africanus

Homo habilis

Homo erectus

Homo sapiens timpuriu

GENETICA UMAN

143

Una dintre diferenele care atrag atenia are n vedere caninul: Cebid antropomorfele au caninii conici, mari, proiectai n afar, depind nivelul celorlali dini i prezentnd dimorfism sexual (masculii au canini mai mari dect femelele). Cnd gura este nchis, caninul inferior Babuin ptrunde n spaiul dintre incisivul 2 i caninul superior, iar caninul superior ptrunde n spaiul dintre caninul inferior i primul premolar; omul modern are caninii redui dimensional, mai puin proemineni, avnd aceeai Om mrime la ambele sexe (Fig. nr. 4. 3.). Analiza comparativ a modelului de erupie a dinilor permaneni a evideniat deosebiri distincte ntre maimuele actuale i om. Dinii permaneni ai antropomorfelor actuale erup n Fig. nr. 4.2. Formula dentar la cebid, urmtoarea ordine: M1, I1, I2, M2, P3, P4, C i babuin i om M3. La om, ordinea este modificat : M1, I1, I2, P3, C, P4, M2 i M3. Se Lipsa observ c premolarul secund Diastem Diastem diastemei erupe diferit. Ceea ce intereseaz mai mult este momentul erupiei, care este strns corelat cu perioada prelungit a copilriei la om (grija fa de urmai) i creterea postnatal a encefalului. Astfel, la antroOm Cimpanzeu A. afarensis pomorfele actuale cei trei molari erup cu aproximaie la Fig. nr. 4.3. Arcada dentar superioar i diastema la cimpanzeu, vrstele de 3,3 ani, 6,6 i 10,5 A. afarensis, om ani, iar la om la vrstele de 6, 12 i 18 ani. Momentul erupiei dentare ajut la stabilirea vrstei pe care a avuto fosila cnd a decedat. Resturile scheletice ale unui australopitec (Australopitecus africanus, numit i Taung child) prezint pe mandibul dini deciduali, dar i primul molar erupt. Ci ani avea, puin peste 3 sau 6 ani? Paleoantropologii susin c vrsta copilului era puin peste 3 ani pentru c modelul de dezvoltare al australopitecilor i al fosilelor genului Homo este asemntor celui al antropomorfelor. Homo erectus se crede c avea un model de erupie al dinilor intermediar ntre antropomorfe i omul actual, modelul avnd tendine evolutive la formele mai recente ale genului Homo. Structura smalului dentar poate da informaii despre evoluia uman. Gorila i cimpanzeul au smalul dentar mai subire dect fosilele hominidelor i omul modern. Smalul subire reflect o adaptare la tipul de hrnire cu fructe, n timp ce smalul gros o adaptare la hrnirea cu plante cu o structur mai dur. Smalul subire indic un caracter primitiv, observat la strmoul comun al hominoidelor i la formele preumane, iar smalul gros a aprut mai trziu n procesul evolutiv.

144

GENETICA I EVOLUIA POPULAIILOR UMANE

Dovezi ale evoluiei furnizate de genetic

Fosilele reflect o imagine incomplet a trecutului pentru c sau pstrat numai anumite pri ale corpului anumitor organisme. Informaii suplimentare despre filogenia i evoluia omului sunt furnizate de genetica molecular. Evoluia molecular are la baz analiza diferenelor dintre secvenele de nucleotide ale ADN i dintre secvenele de aminoacizi ale proteinelor. Evoluia este scris n materialul genetic al speciilor actuale. Evaluarea diferenelor dintre genele sau proteinele unor specii indic gradul lor de nrudire genetic i momentul n care s-a produs separarea lor dintr-un strmo comun (cu ct secvenele ADN sunt mai asemntoare, cu att speciile s-au separat mai recent). La speciile actuale sau studiat comparativ: cromozomii, secvena ADN nuclear i mitocondrial, secvena proteic. Studiul cromozomilor a urmrit dou aspecte: modelul de bandare (benzile G, C sau NOR); ordinea genelor pe cromozom. Analiza comparativ a modelului de bandare al cromozomilor la specii diferite nu este ideal pentru aprecierea gradului de nrudire genetic, dar ofer informaii despre modificrile numerice sau structurale care au aprut pe parcursul evoluiei. De exemplu: cromozomul 2 uman a aprut prin fuziunea b) centric a doi cromozomi acrocentrici de la a) cimpanzeu (Fig. nr. 4.4.). Astfel, cimpanzeul prezint 48 de cromozomi n nucleul celulelor somatice, iar omul are un numr redus la 46; sau identificat rearanjamente cromozomiale de tipul inversiilor i translocaiilor mult mai o c g u frecvent dect deleii sau duplicaii; Cromozomul 12 modelul de bandare al cromozomului X este Cimpanzeu Om 12+13 2 identic la toate mamiferele, ceea ce dovedete originea lor comun; Fig. nr. 4.4. omul are n comun: cu cimpanzeul, gorila i a) Cromozomul 12 la om, cimpanzeu, goril i urangutanul 99% dintre benzile cromozomiurangutan ale, cu pisica domestic 35% dintre benzi i b) Fuziunea centric a cromozomilor 12 i 13 doar 7% cu oarecele. la cimpanzeu formeaz cromozomul 2 uman. Aadar, toate speciile descind dintr-un trunchi comun, din care sau desprins n momente diferite ale evoluiei, dar ntr-o ultim etap s-au separat urangutanul, gorila, cimpanzeul i omul. Analiza comparativ a ordinii genelor pe cromozom (genele sintenice) arat c acelai grup de cteva gene se poate gsi pe brae i pe cromozomi diferii la speciile investigate (11 gene linkate de pe cromozomul uman 21q se gsesc n aceeai ordine pe cromozomul 16 de la oarece i cromozomul U10 de la vac). Strmoul comun al acestor specii avea grupul de gene pe un singur cromozom, grup care s-a dispersat pe cromozomi diferii n timpul evoluiei. Compararea secvenei de nucleotide a ADN se realizeaz printr-o tehnic special numit hibridare molecular. Se pot compara secvena ADN a unei singure gene, secvena unor fragmente ADN sau chiar secvena ntregului genom. Molecule ADN provenind de la specii diferite sunt denaturate, separate i apoi monocatenele ADN de la specii diferite sunt

GENETICA UMAN

145

renaturate. Dac speciile sunt nrudite genetic vor forma hibrizi moleculari ADN/ADN rapid pentru c au secvene comune. S-a artat c secvena ADN uman difer doar cu 1,8% fa de cimpanzeu, cu 2,3% fa de goril i 3,7% fa de urangutan. Compararea secvenei de aminoacizi din proteine are la baz faptul c toate speciile actuale (exist unele excepii) utilizeaz acelai cod genetic pentru sinteza proteinelor, ceea ce susine ideea originii comune a vieii pe Terra. Studiul electroforetic i imunologic al proteinelor umane i ale cimpanzeului a artat c majoritatea proteinelor au 99% dintre aminoacizi similari. Analiza ADNului mitocondrial are ca scop identificarea mutaiilor, a secvenelor de nucleotide diferite la omul modern. ADNmt cu cele mai multe mutaii se gsete la populaiile africane, ceea ce indic o origine mai veche a acestora pentru c acumularea de mutaii ntr-o populaie cere timp. S-a alctuit un arbore filogenetic al ADNmt bazat pe compararea diferenelor dintre africani i non-africani. innd cont de modul particular de transmitere al ADNmt uman, exclusiv pe linie matern, s-a emis Ipoteza Eva. Eva (n sens figurativ) este mama ancestral, al crei ADNmt s-a transmis n descenden, acumulnd mutaii n timp i rspndindu-se n populaiile umane. Prin diverse metode s-a putut determina cnd i unde a trit aceast femeie ancestral ipotetic. S-au identificat diferenele dintre secvena ADNmt a diferitelor populaii umane i diferenele fa de cimpanzeu, calculndu-se o rat a mutaiei de 4% la un milion de ani (presupunnd c rata mutaiei a rmas constant). Se tie c cimpanzeul s-a separat acum 5 milioane de ani i sa dedus c Eva mitocondrial a trit acum 200 000 de ani, n Africa. i analiza comparativ a secvenei ADN a cromozomului Y (se transmite exclusiv pe linie patern) provenit de la brbai africani, europeni, australieni, japonezi i masculi de cimpanzeu arat diferene nesemnificative, ceea ce indic apariia cromozomului Y, cu circa 188 000 de ani n urm.

Diversitatea genetic uman

Caracterizarea genetic a diferitelor populaii umane actuale arat c exist o variabilitate genetic n interiorul fiecrei populaii, populaiile fiind polimorfe, cu un pronunat grad de heterozigoie. Variaiile genetice i au originea n fenomenul mutaional, iar prin recombinare genetic are loc redistribuirea mutaiilor ntr-un numr imens de genotipuri. Migraia, deriva genetic i selecia pot introduce, fixa sau elimina aceste noi mutaii ntr-o populaie, schimbndu-i genofondul i mrind diversitatea genetic intrapopulaional. Structura genetic a unei populaii se exprim prin apariia caracterelor fenotipice (biochimice, morfologice, fiziologice sau comportamentale). Caractere umane morfologice (culoarea pielii, talia, forma capului), vizibile, condiionate poligenic , au fost deseori utilizate de antropologie pentru clasificarea n rase a speciei actuale de Homo sapiens (Fig. nr. 4. 5.). Rasa, din punct de vedere practic, este o grupare natural de indivizi n cadrul speciei care au caractere fizice similare, dar diferite fa de alte asemenea grupri. Din perspectiv genetic, rasa este un grup de indivizi n cadrul speciei care se distinge prin frecvenele alelice de alte asemenea grupri. Rasele umane sunt rezultatul unui proces evolutiv. Studiul genetic al unor caractere umane (grupe sangvine n sistemul ABO, MNS, forma i mrimea capului, forma feei, forma nasului, forma i mrimea dinilor) arat c exist o diversitate considerabil nu numai ntre rase, ci i n interiorul fiecrei rase.

146

GENETICA I EVOLUIA POPULAIILOR UMANE

Fig. nr.4. 5. Pigmentaia pielii nu este un criteriu util n clasificarea raselor umane pentru c doi indivizi care au aceeai culoare a pielii pot fi foarte diferii genetic.

De regul, variabilitatea individual din cadrul unei rase depete cu mult diferenele morfologice dintre rase, iar limitele dintre rase sunt greu de stabilit.

Bibliografie 1. Ridley M. (1997) Evolution, Oxford University Press, pg. 327329. 2. Jones S., Martin R. (1992) Human Evolution, Cambridge University Press, pg. 1025. 3. Berkovitz B.K. (1992) A Color Atlas and Textbook of Anatomy, Histology and Embriology, pg.304317. 4. Gribbin J. (2001) The First Chimpanzee, pg. 526. O Web sites : http://www.talkorigins.org/faqs/homs/species.html. http://authoo.palomar.edu/primate/prim_3.htm

GENETICA UMAN
Intrebri recapitulative

147

1. Ce factori pot perturba polimorfismul echilibrat al unei populaii? 2. Cum sunt determinate frecvenele alelice? 3. Cum poate crete homozigoia ntr-o populaie? 4. Care este diferena dintre un hominoid i un hominid? 5. De ce compararea secvenei genelor ofer mai multe informaii despre evoluia molecular dect compararea secvenei proteinelor? 6. Forma, numrul i structura dinilor au nregistrat tendine evolutive n procesul umanizrii?

TOPIC TEST
T

ntrebri la care litera de rspuns corect desemneaz propoziii: A adevrate; B false. 1. Frecvena alelelor rmne constant n generaiile succesive ale unei populaii naturale. A adevrat; B fals. 2. Structura genetic a unei populaii este caracterizat prin frecvenele alelice i genotipice. A adevrat; B fals. 3. Evoluia molecular studiaz schimbrile secvenelor ADN sau proteice de-a lungul timpului. A adevrat; B fals. 4. Prognatismul este un caracter care s-a meninut la omul modern. A adevrat; B fals. ntrebri cu un singur rspuns corect A, B, C sau D. 5. O populaie uman se caracterizeaz prin: A. absena genofondului B. lipsa structurii genetice C. ncruciri libere ntre indivizi D. monomorfism alelic 6. Care dintre urmtoarele frecvene genotipice ale organismelor AA, Aa i aa concord cu condiiile legii Hardy-Weinberg? A.0,36; 0,55; 0,09 B. 0,29; 0,42; 0,29. C. 0,64; 0,27; 0,09 D.0,25; 0,50; 0,25. 7. La caucazieni cderea prului se datoreaz unei alele autozomale care se exprim dominant la brbai i recesiv la femei. Dac frecvena acestei alele este 0,3, cte femei cu alopecie vor fi ntr-o populaie de 2 000 de indivizi? A.180 B. 9 C.1020 D. 0

148

GENETICA I EVOLUIA POPULAIILOR UMANE

8. Ce tip de aberaii cromozomiale au avut un rol mai important n evoluia uman? A. substituia de nucleotide B. mutaia mitocondrial C. inversia i translocaia D. aneuploidia
T

ntrebri la care litera de rspuns corect grupeaz cifrele dup cum urmeaz: A 1,2,3; B 1,3; C 2,4; D 4; E 1,2,3,4. 9. Ce reprezint la om absena molarului 3? 1. o tendin evolutiv 2. o anomalie dentar de numr 3. consecina scurtrii maxilarelor 4. o fenocopie 10. Dac q are o valoare mic, atunci alela recesiv exist mai frecvent n : 1. genotipurile homozigote dominante 2. genotipurile homozigote recesive 3. populaiile izolate reproductiv 4. genotipurile heterozigote Rspunsuri 1.B; 2.A; 3.A; 4.B; 5.C; 6.D; 7.A; 8.C; 9.A; 10.D.

GLOSAR
Aberaie (anomalie) cromozomial. modificare (anomalie) a numrului de cromozomi caracteristic speciei sau a structurii cromozomilor. Acentric cromozom sau fragment cromozomial lipsit de centromer. Acrocentric cromozom cu centromerul situat subterminal; n cariotipul uman, grupa D cuprinde perechile de acrocentrici 13,14 i 15, iar grupa G, perechile 21, 22 i cromozomul Y. Agent clastogen induce rupturi cromozomiale. Poate fi fizic (radiaii UV, ocuri termice), biologic (virusuri) sau chimic (antibiotice, pesticide, compui antifolici). Agregare familial prezena n cadrul aceleiai familii a mai multor indivizi cu un acelai caracter patologic, n aceiai generaie sau n generaii succesive. Alele numite i alelomorfe; forme alternative ale unei gene care pot ocupa acelai locus pe un cromozom i influeneaz acelai caracter. Alelie multipl (polialelie) ntr-o populaie pot exista mai mult de dou gene alele diferite pentru un locus dat; apare prin mutaii succesive ale genei iniiale. Amniocentez procedur de diagnostic prenatal, efectuat n trimestrul al doilea de sarcin; de obicei, prin puncie transabdominal se extrage lichid amniotic care conine i celule fetale. Celulele fetale sunt investigate citogenetic i biochimic cu scopul de a evidenia structura genetic a produsului de concepie. Anafaz faz a diviziunii celulare care urmeaz metafazei, cnd, centromerii se dedubleaz, iar cele dou cromatide surori ale fiecrui cromozom se separ i migreaz spre polii opui ai fusului de diviziune; n anafaza primei diviziuni meiotice cei doi cromozomi omologi se separ i migreaz spre polii opui ai fusului. Aneuploidie variaie a numrului de cromozomi caracterizat prin lipsa sau prezena n exces a unuia sau mai multor cromozomi din pereche (de exemplu: monosomia, trisomia, etc.). Ans dermatoglific sau bucl, notat cu L (loop). Figur dermatoglific format dintr-un sistem de creste paralele care se rotesc mprejur cu 1800 i ies prin marginea ulnar sau radial a buricului degetului. Este delimitat de un singur triradiu (delta); figur monodeltic. Arbore genealogic reprezentare grafic a legturilor de rudenie dintre membrii unei familii sau unui grup de familii nrudite. Arc dermatoglific (A) Figur dermatoglific constituit dintr-un sistem de creste care traverseaz de la o margine la alta buricul degetului, nefiind delimitat de nici un triradiu. Asociaie termen utilizat pentru a arta c o gen marker are o frecven observat mai mare ntr-o anumit tulburare dect cea teoretic. Asociaia nu dovedete c gena care condiioneaz tulburarea i gena marker sunt localizate pe acelai cromozom. Asociaie dismorfic coexistena recurent, deci nentmpltoare, a mai multor anomalii structurale din mai multe zone, independente una de cealalt, n aparen fr o cauz comun, una neputnd explica apariia celeilalte. Asortare consecina genetic a distribuiei ntmpltoare a cromozomilor neomologi n celulele fiice, n prima anafaz meiotic sau a cromatidelor surori n cea de a doua anafaz meiotic. Autozomi cromozomii somatici sau nesexuali; la om sunt reprezentai de perechile 1-22. Bandare tehnici de colorare speciale, prin care fiecare cromozom apare cu un model caracteristic de benzi transversale, model care permite identificarea fiecrui cromozom, dar i descrierea precis a aberaiilor cromozomice de structur. Evideniaz diferenele structurale dintre specii apropiate pe scara evolutiv. Band cromozomial parte a cromozomului, distinct de segmentele adiacente, avnd culoare mai nchis sau mai deschis n funcie de tehnica folosit; fiecare tip de band reflect o condensare difereniat a cromatinei.

150

GLOSAR
Cromatid dup replicarea cromozomului, la nceputul mitozei sau meiozei, cromozomul apare format din dou subuniti identice ntre ele, numite cromatide surori. Cromatidele sunt ataate una de cealalt la nivelul centromerului, iar fiecare cromatid este subdivizat ntr-un bra scurt (p) i un bra lung(q). Cromatide surori cele dou subuniti ale cromozomului, identice ntre ele, pentru c au aprut prin replicarea cromozomului de origine n faza S a ciclului celular. Cromatin materialul genetic n nucleul interfazic; este alctuit dintr-un complex nucleo-proteic format din ADN, histone i proteine nonhistonice. Apare sub dou forme: condensat (heterocromatina) i extins (eucromatina). Cromozom corpuscul colorat, purttor de informaie genetic, vizibil n timpul diviziunii celulare. Ca numr, form, dimensiune i model de bandare este caracteristic pentru fiecare specie. Cromozomi omologi cromozomi pereche n celula somatic, cu aceiai mrime, aceiai form, acelai model de bandare, aceiai secven de loci, dar cu origini diferite: unul de origine matern i unul de origine patern. n timpul meiozei primare formeaz un bivalent facilitndu-se schimbul fizic de segmente cromatidice ntre cromozomii omologi. Crossing-over schimbul fizic reciproc de segmente cromatidice ntre cromozomii omologi n timpul profazei primei diviziuni meiotice. Reprezint unul dintre mecanismele variabilitii umane. Crossing-over inegal schimb de segmente cromatidice ntre cromozomi omologi incorect aliniai, cu consecina c se formeaz dou gene hibride, una puin mai lung i alta puin mai scurt, comparativ cu genele originale. Deleie anomalie structural a genomului constnd n pierderea unui segment de gen (deleie genic), sau a unui segment cromozomial (deleie cromozomic). Segmentul deletat poate fi terminal sau interstiial. Dermatoglife modelul desenelor formate de crestele epidermice pe degete, palme i plante. Crestele dermice sunt o succesiune a papilelor dermice. Sunt un caracter somatic cu determinism multifactorial. n unele sindroame genetice apar combinaii neobinuite a modelelor dermatoglifice. Diakinesis ultimul stadiu al profazei primei diviziuni meiotice. n timpul diakinezei cromozomii omologi

Biopsia vilozitilor coriale procedur de diagnostic prenatal efectuat n primul trimestru de sarcin; se recolteaz cu un catter esut extraembrionar, identic genetic cu celulele fetale care se examineaz n vederea depistrii defectelor citogenetice, enzimatice sau genice. Bivalent structur format din alipirea cromozomilor omologi pe toat lungimea lor, n profaza primei diviziuni meiotice; fiecare omolog are cte dou cromatide. Caracter familial caracter care apare cu o frecven mai mare printre rudele individului cu acel caracter dect printre indivizii nenrudii din aceiai populaie. Cariotip formul ce exprim constituia cromozomic a unui individ; cromozomii unei celule somatice sunt ordonai dup anumite criterii: mrime, poziia centromerului, constricii secundare, satelii, model de bandare. Centromer segmentul de cromozom de la nivelul constriciei primare vizibil ca parte morfologic distinct n metafaz; punctul de ataare al cromatidelor surori una de cealalt; are rol n deplasarea cromatidelor spre polii opui ai celulei, servind ca loc de prindere a cromozomilor la filamentele fusului de diviziune. Citogenetic ramur a geneticii care se ocup cu studiul cromozomilor. Codominant dou alele diferite care ocup acelai locus pe cromozomii omologi i care se exprim ambele n fenotip; de exemplu, grupul sangvin AB. Compensaie de doz mecanism de reglaj genetic prin care se egalizeaz expresia fenotipic (la brbai i la femeie) a genelor situate pe cromozomul X; fenomenul a fost explicat de Mary Lyon (ipoteza lionizrii). Congenital prezent la natere; nu se refer la cauz. Consangvinitate relaie genetic care exist ntre indivizi ce provin dintr-un ascendent comun. Consangvinizare uniunea dintre indivizi care sunt nrudii genetic. Corpuscul Barr (cromatin X), formaiune condensat n nucleii interfazici ai celulelor somatice provenite de la sexul feminin. Reprezint unul dintre cei doi cromozomi X, inactivat, de la sexul feminin. Femeile normale sunt cromatin-pozitive (au un corpuscul Barr), brbaii normali sunt cromatin-negativi.

GENETICA UMAN
devin scuri i contractai, continund s se resping ntre ei. Dicentric un cromozom anormal structural care prezint doi centromeri. Difereniere proces prin care abilitile de dezvoltare i funcionare ale unei celule se limiteaz la o anumit structur i funcie. Diploid celul sau organism cu dou seturi de cromozomi (2n), adic, cu o pereche de cromozomi pentru fiecare autozom i cu doi cromozomi ai sexului. La om, n celulele somatice numrul diploid de cromozomi este 46, dublu fa de gamei. Disjuncie separare a cromozomilor omologi (asociai ca bivaleni) n cursul anafazei meiozei primare sau a cromatidelor surori, fie n anafaza meiozei secundare, fie n anafaza mitozei. Disomie numrul normal de cromozomi ai unei perechi la organismele diploide. Dispermie fecundarea unui ovul normal de ctre doi spermatozoizi; are ca rezultat formarea embrionilor umani triploizi. Displazie indic o anomalie a histogenezei, adic, organizarea anormal a celulelor n esuturi. Distrofie alterarea structurii normale a unui esut, a unui organ, datorit tulburrilor de nutriie. Dominant caracter condiionat genetic care se manifest i n stare heterozigot. Se vorbete de dominan complet n cazul n care fenotipul heterozigotului nu poate fi deosebit de cel al homozigotului. Duplicaie anomalie cromozomic structural care const n apariia n doz dubl a unei gene sau a unui segment cromozomic n cadrul aceluiai cromozom. Ereditate informaia genetic transmis n succesiunea generaiilor. Eucromatin fraciune a cromatinei nucleare care n interfaz este decondensat i extins; se replic la nceputul fazei S i este activ transcripional. Euploid celul sau organism cu un numr exact de seturi cromozomice haploide. Expresivitate gradul i tipul de manifestare fenotipic al unei gene. Dac manifestrile fenotipice sunt de inten-

151

siti i/sau tipuri diferite la diveri indivizi care prezint gena, expresivitatea este variabil, dac aceste manifestri sunt identice , atunci, expresivitatea este constant. Fenocopie caracter fenotipic produs de cauze ambientale care simuleaz acelai caracter condiionat genetic Fenotip caracteristicile biochimice, morfologice, fiziologice i comportamentale, normale sau patologice ale unui individ, determinate de constituia sa genetic i/sau modulate de factorii ambientali. FISH (fluorescent in situ hybridization) tehnic utilizat pentru localizarea genelor pe cromozom; n ultimul timp este utilizat n citogenetica clinic. Fratrie toi descendenii unei perechi de genitori. Fuziune centric vezi Translocaie robertsonian. Gen un segment din molecula de ADN implicat n producerea unui lan polipeptidic Genom setul complet de gene al unui set haploid de cromozomi. Genotip constituia genetic a unui individ, cu referire fie la complementul complet de gene, fie la un locus particular. Gonozom cromozomii sexului, X i Y. Termen mai puin utilizat la ora actual. Haploid un singur set complet de cromozomi prezent ntr-o celul (n), format dintr-o singur copie a fiecrui cromozom autozom i un cromozom al sexului. Setul haploid de cromozomi este tipic pentru gamet. Hemizigot individ diploid care are doar o singur alel pentru un locus dat. Brbaii sunt hemizigoi dac ne referim la cromozomul X: au un singur cromozom X, deci prezint genele de pe acest cromozom n doz unic. Heterocromatin constitutiv fraciune a cromatinei nucleare; este permanent condensat pe parcursul ciclului celular, prezent n anumite regiuni cromozomiale: pericentromerice i adiacent constriciilor secundare. Este format din ADN cu secvene repetate care se replic tardiv; transcripional este inactiv. Heterocromatin facultativ condensare permanent a unuia din cei doi cromozomi ai unei perechi, n anumite perioade ale ontogenezei. De exemplu, unul dintre cromo-

152

GLOSAR
cromozomii X excedentari, unul singur rmnnd funcional. Marker genetic 1. gen cu efecte fenotipice detectabile, a crei localizare este cunoscut i care permite localizarea altor gene. 2. particularitate morfologic a unui cromozom care permite identificarea lui corect. Monogenic caracter condiionat de un singur locus genetic. Respect legile lui Mendel. Monosomie situaie n care din numrul diploid de cromozomi al unei celule lipsete un ntreg cromozom dintr-o pereche (2n-1). La om, monosomiile autozomale sunt letale. Mozaic celular coexistena la acelai individ a unor linii celulare diferite genotipic sau cromozomic, derivate din acelai zigot. Multifactorial caracter condiionat de factori multiplii, genetici i non-genetici, fiecare avnd o contribuie mic la apariia fenotipului. Mutagen orice agent care crete rata mutaiei. Mutaie schimbare permanent a structurii fizice i/sau chimice a genomului (gen sau cromozom care se transmite n succesiunea generaiilor). Nondisjuncie anomalie de segregare a cromozomilor n timpul diviziunii celulare. n anafaza meiozei primare cromozomii rmn unii, migrnd la acelai pol, sau, n anafaza meiozei secundare i anafaza mitozei, cromatidele surori rmn mpreun, migrnd la acelai pol. Nulisomie lipsa ambilor cromozomi ai unei perechi dintr-o celul diploid (2n-2). La om, este incompatibil cu viaa postnatal. Pahiten stadiu al profazei primei diviziuni meiotice, n timpul cruia cromozomii omologi, perfect aliniai i asociai ca bivaleni, devin mai scuri i mai groi. n acest stadiu are loc crossing-over-ul urmat de apariia chiasmatelor. Penetran este un concept statistic i reprezint procentul de heterozigoi care manifest fenotipul corespunztor unei alele dominante. Se calculeaz raportnd numrul de indivizi care exprim alela dominant la numrul total de indivizi purttori ai respectivei alele. Absena manifestrii fenotipice se numete non-penetran, manifestarea la un numr redus

zomii X din nucleii interfazici ai celulelor somatice provenite de la sexul feminin care formeaz cromatina de sex X. Heterogenitate genetic situaie n care caractere fenotipice asemntoare sau identice sunt produse de gene diverse, alele sau nealele. Heterozigot purttor de dou alele diferite ale unei gene date care ocup acelai locus pe cromozomii omologi. Hibridare ncruciare ntre indivizi din populaii naturale diferite genetic, care aparin aceleiai specii. Himer individ care prezint un amestec de celule diferite genetic, celule derivate din zigoi diferii. Hipoplazie subdezvoltare a unui esut normal structurat i format. Holandric caracter care apare numai la brbai, controlat de o gen plasat pe cromozomul Y. Homozigot organism diploid care prezint dou alele identice pentru un locus dat. Instabilitate cromozomial inabilitatea cromozomilor de a-i pstra integritatea. Apar numeroase rupturi i rearanjamente cromozomice spontane. Inversie anomalie cromozomic structural constnd din ruperea unui fragment cromozomic sau cromatidic, rotirea lui cu 180 i alinierea aceluiai cromozom. Ca urmare, se inverseaz secvena normal a genelor. Segmentul inversat poate include centromerul (inversie pericentric) sau nu (inversie paracentric). Izocromozom cromozom cu o structur anormal. alctuit din dou brae identice morfologic i genetic. Apare prin clivajul anormal al unui cromozom n anafaz. Linkaj situaie n care doi loci sintenici, adic situai pe acelai cromozom, foarte apropiai fizic, tind s se transmit mpreun n descenden. Genele care ocup aceti loci sunt rareori separate de crossingover. Locus poziia ocupat de o gen pe cromozom. Lyonizare inactivarea ntmpltoare a unui dintre cei doi cromozomi X n nucleii interfazici ai celulelor somatice de la sexul feminin, realizat dup a 16-a zi de via intrauterin. n cazurile de anomalii numerice ale cromozomului X se inactiveaz toi

GENETICA UMAN
de purttori se numete penetran redus, iar manifestarea fenotipic la toi purttorii se numete penetran complet. Poligenic caracter condiionat de factori genetici multipli. Polimorfism coexistena ntr-o populaie a variantelor discontinue ale unui caracter condiionat monogenic. Poliploidie multiplicarea exact a numrului de seturi cromozomice. La om, este incompatibil cu viaa postnatal. Polisomie anomalie de numr a cromozomilor de tipul aneuploidiei, n care un cromozom dintr-o pereche apare n copii multiple (trisomie, tetrasomie, pentasomie etc.) ntr-o celul diploid. Proband (proposit, caz index) membru afectat al unei familii care constituie punctul de plecare al unei cercetri familiale. Purttor individ heterozigot pentru o gen mutant care poate s nu se manifeste fenotipic. Recesiv caracter controlat genetic care se manifest fenotipic numai n stare homozigot. Recombinare formarea de noi combinaii de gene datorit crossing-over-ului dintre cromozomii omologi sau asortrii independente a cromozomilor n timpul meiozei, fie schimbului de material genic ntre dou fragmente ADN. Risc de recuren posibilitatea de reapariie a unui caracter patologic la descendenii unei familii deja afectat de o tulburare genetic. Screening examinarea sistematic (clinic, genetic, biochimic, etc.) a tuturor indivizilor unei populaii, cu scopul de a identifica subiecii care prezint risc genetic i de a neutraliza acest risc (de exemplu, identificarea purttorilor sntoi n cazul talasemiei). Segregare separarea cromozomilor omologi i a genelor pe care le poart i migrarea lor n gamei diferii n timpul meiozei. Sex-influenare caractere condiionate de gene autozomale, dar care au grade diferite de exprimare la femei i la brbai. Sex-limitare caractere condiionate de gene autozomale, dar care se exprim fenotipic la un singur sex. Sex-ratio raportul dintre numrul de brbai i femei ntr-o populaie.

153

Sindrom dismorfic coexistena recurent i ca atare, nentmpltoare, a unor anomalii structurale n diferite zone de dezvoltare, aparent independente una de alta, dar cu o cauz unic. Sintenie localizarea a dou sau mai multe gene pe acelai cromozom. Nu toate genele sintenice sunt linkate. Sond fragment de ADN sau ARN monocatenar marcat radioactiv sau cu fluorocromi care recunoate o secven complementar de ADN sau ARN i formeaz cu aceasta un hibrid molecular. Se utilizeaz pentru evidenierea i localizarea anumitor secvene. Susceptibilitate sensibilitate a organismului fa de aciunea negativ a factorilor de mediu, condiionat genetic sau parial genetic. Telomer segmente terminale situate la extremitile braelor cromozomilor, care au rolul de a le menine integritatea. Transcripie proces prin care se sintetizeaz ARN-ul prin copierea informaiei genetice din ADN. Translaie decodificarea informaiei genetice coninut de ARNm n secvene specifice de aminoacizi la nivelul ribozomilor. Translocaie transferul unui segment cromozomial de pe un cromozom pe altul. Translocaie robertsonian fuziunea braelor lungi n zona centromeric i pierderea braelor scurte ale celor doi cromozomi acrocentrici implicai n acest tip de translocaie ; rezult un unic cromozom. Triploid celul sau individ cu trei seturi cromozomice (3n). La om, este letal. Triradiu figur dermatoglific constituit din trei sisteme de creste divergente n trei direcii diferite, n unghiuri de circa 120. Variabilitate diferenele dintre indivizii aceleiai specii care nu pot fi atribuite nici vrstei i nici sexului. Verticil (vrtej) Indicat prin W, reprezint o figur dermatoglific n care crestele dermice formeaz un desen concentric constituit din dou anse ncruciate, rotite n jurul unei structuri centrale. Este delimitat de dou triradii, unul de fiecare parte.

INDEX ALFABETIC
A aberaii cromozomiale 34 acentric 40 acrocefal 104 acrocentric 10 ADNmt 148 agent clastogen 41 agregare familial 97 alaria 101 alele 56,130 alelie multipl 57,134 alfa-fetoproteina 124 amelogenesis imperfecta 82,131 amniocentez 122 anafaz 21, 22 anchet familial 97 aneuploidie 36 anodonie 81,83 anomalii cromozomiale 34 numerice 34 de structur 38 ans dermatoglific 111 apendice perinuclear 28 arbore genealogic 77 arc dermatoglific 111 Ardipithecus ramidus 138 arii palmare 112 asortare independent 61 Australopithecus 139 autozom 11 B bandare cromozomial 13 band 13 biometrie 100 biopsia vilozitilor coriale 123 bivalent 21 brahicefal 103 bra lung (q) 10 bra scurt (p)10 bucl (L) 111 C caracter autozomal 65 cantitativ 100 complex 97 dominant 57 mendelian 87 metric 100 recesiv 57 simplu 87 caria dentar 89,90,97 cariotip 9, 11, 16 cstorie consangvin 135 chamecefal 103 chamerhin 105 cefalometrie 101 celul diploid 20, 56 haploid 20, 56 centromer 10 citogenetic 9 codominan 57, 60, 132 complex sinaptonemal 21 colchicin 11, 23 compensaia de doz 28 consangvinitate 122, 135 constricie secundar 10 consultaie genetic 121 Cri du chat, sindrom 49 cromatid 10 cromatin sexual X 28 Y 32 cromozom 9 corpuscul Barr 28 F 32 sexual 28 crossing-over 21, 26 D deleie 38 dentinogenesis imperfecta 80 deriv genetic 136 dermatoglife 110 despictura labial 127 diagnostic preimplantatoriu 125 prenatal 122 diakinesis 21 diastema interincisiv 81 dicentric 38, 41 dictioten 25

GENETICA UMAN
dihibridare 61 dini supranumerari 80 diploten 21 discromiile dentare 79 disomie biparental 36 dispermie 35 displazia ectodermal hipohidrotic 82 distribuie continu 101 diviziune ecvaional 21 reducional 20 dolicocefal 103 dominan 57 Down, sindrom 44,45 duplicaie 38 E echilibru Hardy-Weinberg 130 echografie 125 Edward, sindrom 43 ereditate 56 ereditate autozomal 65 ereditate holandric 75 ereditate legat de sex 70 ereditate monogenic 65 eucromatin 13 eurion 101 euriprosop 104 evoluie 137 examen snge fetal 124 F factor Rh 92 factor secretor 89 fenilcetonuria 136 fenotip 56 fetoscopie 125 fibroz chistic 136 FISH 15, 38 fuziune centric 40 G gamet 23 gametogenez 23 gen - dominant 57 - recesiv 57 genofond 129 genotip 56 glabel 101 gnathion 101 gonozom 11, 133 M marker genetic 89 meioza 20 metacentric 10 metafaz 21,22 metriocefal 104 mezocefal 103 mezoprosop 101 mezorhin 105 migraie 135 monosomie 33 grup sangvin ABO 58,91 MNS 94 gusttor PTC 87 H haploid 10 haptoglobine 96 hemizigot 71 hemofilia A 133 hemoglobina S 95,96 hemoglobine 95 heterocromatin 13 heterogenitate genetic 99 heterozigot 57 hibridare 58 hipsicefal 103 Homo erectus 139 habilis 139 sapiens 141 hominid 138 hominoid 141 homozigot 57 I indici cefalometrici 103 inelar 41 inversie 40 izocromozom 41 K Klinefelter, sindrom 47 L lectine 90 legi mendeliene 59, 61 leptoprosop 104 leptorhin 105 leptoten 20 linkaj 94 lyonizare 28

155

156
morfogram 108 mozaic celular 38 mutaie135 N nasion 101 negusttor 87 nesecretor 89 non-disjuncie meiotic 37 mitotic 37 O OMIM 87, 97 opistocranion 101 Orrorin tugenensis 138 ortocefal 103 ovogenez 24, 25 P pahiten 21 panmixie 58,130 parodontita juvenil 97 Patau, sindrom 42 pliuri palmare 112 PMN 28 pogonion 101 polialelie 130 poligenie 55 polimorfism genetic 130 structural 14 poliploidie 34 populaie 129 prag gustativ 87 proband 77 profaz 20, 21 prognostic genetic 122 prometafaz 21 PTC 62, 87 purttor 81, 121 R recesivitate 57 recombinare genetic 145 Rh 92 S satelit 10 snge fetal 124 screening genetic 135 secretor salivar 89 selecie natural 135

INDEX ALFABETIC
sfat genetic 122 sicklemie 98 system ABO 91, 134 MNS 94 Rh 92 smal dentar 143 spermatogenez 24 spermiogenez 24 spina bifida 124, 126 submetacentric 10 subnazal 101 T talasemie 96, 99 tapeinocefal 104 telocentric 10 telofaz 21, 22 telomere 10 tetraploidie 36 tip constituional 100 tragion 101 translocaie nereciproc 40 reciproc 40 robertsonian 39 trichion 101 triploidie 34 triradiu 111 trisomie 36 Turner, sindrom 33, 46 U ultrasonografie 115 V variaii individuale 137 vertex 101 verticil 111 viloziti coriale 123 W Wolf, sindrom 48 Z zigoten 21 zygion

ANEXE

157

GENE IMPLICATE N SINTEZA ANTIGENILOR ERITROCITARI I SALIVARI ABO

sistem ABO
IA

sistem H/h
HH Hh IB

substan H
IO

dizaharid

hh

fenotip Bombay galactoz N-acetil glucozamin fucoz N-acetil galactozamin

se se

nesecretor

dizaharid

IA

substan H
Se Se Se se IB

galactoz N-acetil glucozamin

fucoz N-acetil galactozamin

IO

secretor salivar

158

DISTRIBUIA GEOGRAFIC A UNOR HEMOGLOBINE UMANE ANORMALE

Hb C Hb D Hb E

Talasemie Sicklemie

ANEXE

ANEXE

159

Cele 54 de compartimente ale constituiei dermatoglifice globale

Transmiterea pe compartimente a structurilor dermatoglifice de la mam (M) i tat (T) la copil (C).

Tiprit la:

Deleie

Formarea cromozomului inelar

A: terminal

B B: intercalar

Formarea izocromozomului
A: divizarea normal a centromerului

Inversie

B
B: divizarea transversal a centromerului

paracentric

pericentric

Tipuri de anomalii cromozomiale de structur

ISBN 973 - 8238 - 07 - 2