[BIOSENZORI ELECTROCHIMICI I IMPORTANA LOR N APLICAIILE BIOMEDICALE]

[CHIMIE ANORGANIC]
[Cercetrile referitoare la biosenzori au cunoscut o cretere exploziv n ultimele dou decenii. Un biosenzor este, n general, definit ca un dispozitiv analitic care convertete un rspuns biologic ntr-un semnal cuantificabil i procesabil.]

[16.12.2012]

Cuprins:

1. Introducere.

2. Construirea un biosenzor funcional.

3. Descrierea componentelor de baz.

4. Dispozitive Bio-FET.

5. Utilizare a biosenzorilor.

6. Perspective de cercetare n domeniul bioelectronicii.

1. Introducere. Cercetrile referitoare la biosenzori au cunoscut o cretere exploziv n ultimele dou decenii. Un biosenzor este, n general, definit ca un dispozitiv analitic care convertete un rspuns biologic ntr-un semnal cuantificabil i procesabil. Figura 1 prezint schematic prile care cuprind un biosenzor tipic:a) bioreceptori care n mod specific se leag de analit; b) arhitectura unei interfee unde are loc un eveniment biologic specific i d natere unui semnal preluat de c) elementul traductor. Semnalul traductorului este convertit ntr-un semnal electronic i amplificat de ctre un detector de circuit folosind referina adecvat i transmis pentru procesare de, exemplu, d) programe de calculator care trebuie convertite la un parametru fizic semnificativ care descrie procesul investigat. n cele din urm, cantitatea rezultat trebuie s fie prezentat prin e) o interfa pentru operatorul uman. Biosenzorii pot fi aplicai la o gam variat de probe incluznd fluide din organism, probe ale produselor alimentare, culturi de celule i sunt de asemenea utilizate pentru a analiza probe din mediul nconjurtor. TEC* - Tranzistor cu efect de cmp.

2. Construirea un biosenzor funcional. Pentru a putea construi un biosenzor funcional pentru piaa non-specializat este nevoie de respectarea unor condiii: 1) Bicatalizatorul trebuie s fie specific scopului analizei, s fie stabil in condiii normale de depozitare i s prezinte o variaie mic ntre teste. 2) Reacia trebuie s fie la fel de independent ca i gestionarea unor parametrii fizici ca agitaia, pH-ul i temperatura. Acest lucru va permite o analiz a probelor cu un minim de pretratare. n cazul n care reacia implic cofactori sau coenzime acestea ar trebui, de preferat, s fie de asemenea co-imobilizate cu enzima. 3) Rspunsul trebuie s fie clar, precis, reproductibil i linear n intervalul de interes, fr diluare sau concentrare. Ar trebui de asemenea s nu prezinte alte zgomote induse de traductor sau de elemente electronice. 4) Dac biosenzorul este utilizat pentru monitorizarea invaziv n situaii critice, sonda trebuie s fie mic i bicompatibil, care s nu aib efecte toxice sau antigenice. n plus, biosenzorul nu ar trebui s fie predispus la inactivare sau proteoliz. 5) Pentru msurtori rapide ale analiilor din probele umane este de dorit ca biosenzorul s poat analiza n timp real. 6) Biosenzorul final trebuie s fie ieftin, mic, portabil i s poat fi folosit de operatori semicalificai. 3. Descrierea componentelor de baz. a. Bio-elementul. Este un sistem chimic complex care de obicei este extras sau derivat direct din organisme biologice. Tipuri de bio-elemente: enzime, oxidaze, polizaharide, anticorpi, esut, acid nucleici. Abilitatea unui bio-element de a interaciona specific cu un compus int este baza unui biosenzor. Clasificarea biosenzorilor. 1) Biosenzori de afinitate. Analitul nu se modific chimic n timpul msurtorii. El doar se leag de receptor. La sfrit el poate fi ndeprtat chimic sau prin splare. 2) Biosenzori de metabolism. Aici substratul biologic se consum printr-o reacie chimic cu analitul. Se formeaz un nou produs. Starea iniial se poate reface dup completa consumare a analitului. Exemplu: se dorete detectarea microorganismului Helycobacter Pylor n substana purttoare - suc gastric. n metabolismul su, acest microb produce NH 3 (amoniac). Aadar, senzorul nu va detecta microbul n sine, ci concentraia de amoniac. 4

3) Imunosenzori. Detectarea substanelor de tip antigen (Ag) se face cu ajutorul anticorpilor (Ac), pe principiul "lact-cheie". Anticorpii sunt proteine cu molecule n form de Y (numite imunoglobuline). n vrfurile Y-ului sunt doar dou locuri, unde se poate lega un singur tip de antigen. Aceti anticorpi sunt produi de organism ca rspuns la o anumit substan strin (antigen), pe care nu o poate elimina prin fagocitoz i creia, n ultim instan, i "ncurc planurile", legndu-se de ea: Ac+Ag -> AcAg. Exemplu: n referina se descrie un biosenzor cu material piezoelectric acoperit cu anticorpi pentru Candida Albicans (microorganism din familia fungilor). n timp de aproximativ o or celulele receptoare au captat ntre 106 i 108 celule de Candida A., avnd ca rezultat scderea frecvenei de rezonan a cristalului piezoelectric cu 0,5...1,4kHz. 4) Senzori biomimetici. Cu ajutorul acestor senzori se detecteaz semnale fizice (sunet, stres mecanic, lumin) pe baza interaciunii lor cu substratul biologic activ (receptorul). b. Traductorul Convertete rspunsul biologic ntr-un semnal electric. Tipuri de traductori: electrochimic, optic, piezoelectric. Tipuri de traductori 1) Traductori termici La senzorii de metabolism exist reacii chimice ntre analii i anumii receptori enzimatici cu degajare / absorbie de cldur. n acest caz nu se msoar cantitatea analitului, ci variaia de temperatur, T. Tabelul urmtor prezint entalpiile molare, H, a ctorva reacii catalizate de enzime. Entalpiile molare a ctorva reacii catalizate de enzime. Enzima receptor Catalaz Analit H2O2 -H (kJ/mol) 100.4 52.9 80 6.6

Cholesterol-oxidaz (COD) Cholesterol Glucoz-oxidaz (GOD) Ureaz Glucoz Uree

Enzima-receptor se imobilizeaz pe sticl poroas pe suprafaa unui termistor. Se imerseaz totul n soluia de msurat. Termistorul joac rolul traductorului i furnizeaz T. De aici rezult numrul de moli de analit, conform relaiei:

H = C T

unde este numrul de moli de analit, C este cldura molar a dispozitivului (ce se determin anterior prin msurtori calorimetrice). Dezavantajul principal este schimbul de cldur ce apare ntre diversele componente ale experimentului, ceea ce va induce erori mari n evaluarea lui T. Optimizrile vizeaz izolarea calorimetric a biosenzorului ntr-un reactor. 2) Traductori optoelectronici

Cu ajutorul traductorilor optici se poate indica variaia unor parametri precum: coeficient de absorbie a luminii, lungime de und, indice de refracie, grosimi ale unor straturi transparente. Ca exemplu, n figura 10.3, este prezentat principiul de detectare a albuminei serice cu un senzor optoelectronic.
Biolichid purttor de analit A

A analit A A A

LED

Rec . Rec . Rec . Rec . Rec . Rec .

Membrana de bromocresol

bromocres ol

Fotodiod a

Fig. 10.3. Principiul de detectare a albuminei serice cu un senzor optoelectronic. Receptorul a fost imobilizat pe o membran de bromocresol transparent. Curgerea biolichidului purttor de albumin a determinat captarea ei pe receptori. Creterea grosimii stratului de analit se face ntre o surs de lumin (led) i un detector de lumin (fotodiod). Curentul prin fotodiod scade pe msur ce crete grosimea stratului de albumin depus pe receptor. 3) Traductori piezoelectrici

Principiul pe care se lucreaz aici urmrete scderea frecvenei de rezonan a unui cristal piezoelectric cnd se absoarbe un material strin la suprafaa sa i-l comprim. Cristalul este acoperit cu un material receptor. Efectele zgomotului electric au putut fi nlturate prin utilizarea 6

de cristale pereche. Aceti traductori au fost utilizai pentru detectarea: NOx, COx, H +, microorganisme.

4) Traductori electrochimici Reaciile electrochimice se produc la interfaa electrod soluie, iar reaciile biologice cu transfer de electroni se produc la interfaa enzim soluie. Se utilizeaz poteniometria, cnd se determin variaia potenialului electric al unui electrod receptor n funcie de concentraia ionilor de analit dintr-o soluie. Metoda tradiional de detecie a unor ioni ntr-o substan purttoare folosete ISE (Ion Selective Electrodes). Din punct de vedere electronic ISE poate fi privit ca o surs de tensiune electromotoare (de sute de milivoli pentru biosenzori) i cu o impedan de ieire mare (pn la sute de M). Masa electric este soluia, iar ieirea sursei este electrodul de referin. Dac concentraia ionilor de analit din soluie se modific, atunci potenialul electrodului sensibil la aceti ioni (receptorul) se modific dup relaia lui Nerst. Spre exemplu, n cazul pH-ului (concentraia ionilor de H+), o scdere a acestuia cu o unitate, determin creterea tensiunii furnizate cu circa 55mV. Muli biosenzori electrochimici folosesc amperometria. n acest caz au loc reacii chimice de oxido-reducere cu transfer de electroni n medii electrolitice. n domeniul biosenzorilor, aceast tehnic a nsemnat detectarea unui analit prin msurarea concentraiei unui produs de metabolism, mult mai uor de determinat. Pentru aceasta se folosesc electrozi cu enzime receptor aezate n unul sau mai multe straturi. Pentru msurarea concentraiei de glucoz se folosete enzima GOD care accelereaz foarte mult procesul de oxidare al glucozei, n urma cruia rezult i H2O2. Este mult mai uor s se msoar concentraia de H 2O2, dup care se calculeaz din reacie concentraia de glucoz. Curenii care se stabilesc n aceste straturi sunt de natura unor cureni de difuzie. Curentul, Ilim este proporional cu concentraia substanei care se determin mai uor, ci, (i=H2O2, n exemplul anterior cu glucoza). 5) Traductori biologic intaci Pentru determinarea unui analit, aceste traductoare folosesc chemoreceptori direct din lumea vie. Spre exemplu, s-a realizat un receptor de acetilcolin, utiliznd organul electric al petelui Torpedo i un senzor capacitiv. Cnd biolichidul purttor coninea acetilcolin n concentraie mrit, cretea tensiunea electric furnizat de traductorul organic al petelui, ceea ce ncrca senzorul capacitiv. S-au putut face msurtori n domeniul 1....100mol/l concentraie de acetilcolin n biolichidul purttor prin tehnici de C-V-metrie. Alt direcie de lucru este cuplarea unor celule receptoare vii cu una sau mai multe fibre nervoase. Stimularea unor celule olfactive sau gustative cu un anumit analit conduce la generarea unui impuls nervos detectabil ctre neuronii din fibr. Ca exemplu, s-a realizat un senzor pentru determinarea concentraiei de aminoacizi, utiliznd drept traductor organul olfactiv din antenulele crabului Calinectes Sadipus. Antenulele, legate de o unic fibr nervoas, au fost conectate cu o sond de platin. Stimularea receptorilor olfactivi cu aminoacidul L-glutamat, n concentraia 0,01...1mmol/l, a creat impulsuri nervoase msurabile, cu valori cuprinse ntre 10-1000V. n plus, s-a obinut o linearitate bun n aceast gam de msur. 7

Observaie: Au fost amintite i exemplificate o serie de substane ca: acetilcolina, dopamina, ioni de Na+, Ca+, K+. Ele particip ca neurotransmitori la propagarea impulsului nervos. De reinut, c transmiterea unui impuls nervos se face pur electric: prin deplasare de sarcin electric. Datorit acestei comportri "electronice" a sistemului nervos uman, s-a dezvoltat o ramur nou n tiinele biologice: neuroelectrofiziologia.

4. Dispozitive Bio-FET. Prin Bio-FET vom nelege totalitatea dispozitivelor biologice ce conin ca element traductor activ un tranzistor cu efect de cmp. Ele pot fi biosenzori (precum tranzistoarele ISFET, ENFET, etc) sau dispozitive de testare i investigare a materialelor biologice, sau dispozitive create n alte scopuri. Tranzistoarele ISFET Tranzistoarele ISFET (Ion Sensitive Field Effect Transistor) au derivat direct din ISE (electrozii sensibili la ioni). Din punct de vedere constructiv, dispozitivul ISFET este un MOSFET, pentru care receptorul - un electrod ce sezizeaz doar anumii ioni (de exemplu de Ca+, K+) - este un metal special (Pt, Pd, Ir). Regiunea porii este imersat ntr-o soluie biologic cu analit. Modelarea se face analog cu cea a MOS-FET-ului, doar c tensiunea de poart VG depinde de concentraia ionilor de analit conform relaiei lui Nerst. O categorie aparte o reprezint tranzistoarele MEM-FET (MEMbrane-FET), la care electrodul receptor este o membran organic depus n dreptul porii tranzistorului, i care capteaz selectiv sarcina ionic. n figura 10.4. este prezentat structura i simbolul ales pentru tranzistorul ISFET.
G Biolichid cu ioni de analit S n+ n+ ISE

......... ...

SiO2/ Si3N4

D G D SB

Canal de electroni

p-substrat

(a) SB (Substrat) Fig. 10.4. a) Structura tranzistorului ISFET;

(b) b) Simbol.

Tensiunile aplicate: VS=VSB=0, VG>0 i VD>0 se menin constante. Cnd concentraia ionilor de analit crete, se modific diferena de potenial metal-semiconductor. Deci variaz VFB i n consecin potenialul porii. Rezult o mbogire a canalului n electroni, iar n final o cretere a curentului de dren. Fluctuaiile concentraiei de ioni de analit se traduc prin fluctuaii ale curentului ID.

Adoptnd pentru curentul de dren al tranzistorului ISFET modelul simplificat n regim cvasiliniar, plus efectul tensiunii de poart asupra mobilitii purttorilor din canal, n care neglijm termenul VDS2, la tensiuni VDS mici, avem:

ID =

( VGt VT ) VDS 1 + G ( VGt VT )

Tensiunea de poart total, VGt este suma tensiunii, VG, aplicat de la o surs extern i a potenialului de electrod ME, dat de relaia lui Nerst:
VGt = VG + 0 + RT ln c A zF

Prin nlocuirea relaiei (10.3) n relaia (10.2), rezult dependena curentului de dren, ID, de concentraia de analit, cA:
RT VG VT + 0 + ln c A VDS zF ID = RT 1 + G VG VT + 0 + ln c A zF

Observaie: Ne dorim o sensibilitate curent-concentraie de analit ct mai mare. Relaia (10.4) arat c este mai favorabil un regim de lucru la tensiuni VGt mici, astfel nct s se poat neglija efectul atenurii mobilitii sub influena cmpului electric transversal. Rezult astfel, o dependen logaritmic curent-concentraie. n plus, dac s-ar lucra sub prag, unde ID depinde exponenial de VG, prin compunere cu relaia lui Nerst ar rezulta o dependen polinomial curent-concentraie, net superioar funciei logaritmice. Observaie: ISFET-urile care determin concentraia ionilor de H + se mai noteaz prin pHFET-uri, innd cont c pH=-lg [cH+]. O soluie apoas este neutr cnd pH=7, moment n care concentraia ionilor de H+ o egaleaz pe cea a ionilor negativi de OH-. Soluia apoas este acid pentru pH<7 i bazic pentru pH>7. Pentru electrolitul complex al organismului uman neutralitatea are loc de asemenea cnd cH+=cOH-, dar aceasta se ntmpl la temperatura de 370C pentru un pH=6,75. Sngele are pH=7,36, deci se comport slab bazic.

Cu acest gen de tranzistor s-au fcut experimente pentru determinarea concentraiei ionilor de H i K+. National Company Japan a realizat un biosenzor integrat pe cip de tipul Silicon On Sapphire, coninnd un K+-FET cu membran de GOD i dou H+-FET cu membran de ureaz. Cu acest biosenzor se pot face simultan analize de glucoz i uree n snge.
+

Alt exemplu. S-a realizat un dispozitiv ISFET, ca senzor de metabolism, ce msoar concentraia de amoniac, ca n figura 10.5. Receptorul care sesizeaz NH4 - este Paladiu (Pd). El este depus peste oxidul de poart. Se constat o cretere major a sensibilitii biosenzorului dac peste Paladiu se depune un strat de Iridiu (Ir). Se obine o cretere a tensiunii V G de la 20mV n cazul electrodului de Pd, la 400mV n cazul acoperirii Pd cu Ir, cnd concentraia de NH4 - este 400ppm. De reinut aceste dou materiale: paladiu, iridiu, n construcia biosenzorilor.
VG biolichid Ir Ir Ir Ir Ir Pd NH3

Fig. 10.5. Dispozitiv MOS pentru detectarea ionului de amoniu.

n+ n+

......... ...

SiO2

p-substrat

SB

Un alt dispozitiv specific msurtorilor de poteniometrie este prezentat n figura 10.6. Scopul acestui Bio-FET este caracterizarea electric a unor biolichide.
ID(A) VG VS

Semiconductor organic
80

~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ Suport~ izolator ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ VD

60 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 40 VG(V)

(a)

(b)

Fig. 10.6. a) Dispozitiv Bio-FET microelectrochimic; 10

b) Caracteristica ID-VG msurat.

20

Primul dispozitiv microelectrochimic studiat deinea semiconductori organici (polimeri) depui ntre surs i dren. Se obineau caracteristici ca de diod. Dac n plus intervenea al treilea electrod - poart, se obineau caracteristicile din figura 10.6.b., pentru semiconductorul organic din polianilin. Ca i la tranzistoarele MOS, s-a constatat c n vecintatea "pragului", rezistena ntre surs i dren variaz cu peste 6 ordine de mrime la variaii foarte mici ale tensiunii VG (cu 0,1...0,3V). Spre deosebire de tranzistoarele pe Siliciu, la tranzistoarele BioFET de acest gen, dup atingerea unei valori maxime curentul scade. Acest dispozitiv este potrivit pentru studierea proprietilor diverselor materiale biologice. Dac se nlocuiete semiconductorul organic cu o soluie neutr, n care se crete concentraia unui neurotransmitor (adrenalin, noradrenalin, acetilcolin, dopamin, serotonin etc) se pot obine caracteristici I DVG, furnizoare de parametri de model. Modelele tranzistoarelor MOS pot fi extinse i aici, pe anumite subdomenii de msur. Acest lucru permite extragerea unor parametri echivaleni (tensiune de prag - concentraie de prag, tensiune de nivel mare - concentraie de neurotransmitor de nivel ridicat). Aceti parametri ar putea fi deosebit de utili n stabilirea unor concentraii limit ntre care se face transmiterea impulsului nervos.

5. Utilizare. Biosenzorii sunt utilizai n: - Industria alimentar, pentru monitorizarea prospeimii alimentelor. - Descoperirea noilor forme de droguri - Determinarea de pesticide i contaminaii n apa rurilor - Monitorizarea glucozei la pacienii cu diabet.

Aplicaii ale nanoparticulelor de aur n bio-detecie. Asamblarea organizat a particulelor de dimensiuni nanometrice prezint interes pentru o anumit clas de nanomateriale care ofer un potenial deosebit n realizarea structurilor unidimensionale, bidimensionale i tridimensionale pentru o varietate larg de aplicaii. Nanoparticulele metalice se folosesc ca i blocuri de construcie n designul diferitelor dispozitive. Legarea nano-materialelor cu suporturi biologice, utiliznd 11

specificitatea structural a materialelor biologice i proprietile electronice i optice ale nanomaterialelor permit realizarea structurilor biologice cu caracteristici noi, distincte de cele obinuite. Posibilitatea de a lega de particulele metalice molecule organice a generat un vast domeniu pentru designul nanoparticulelor funcionalizate. Reaciile de recunoatere molecular dintre macromolecule i suprafee create articifial (nanoparticule bio-funcionalizate) pot fi folosite n controlul proceselor celulare i extracelulare, pentru aplicaii terapeutice, oferind noi posibiliti de diagnostic i dezvoltarea unor noi sisteme de detecie. Nanoparticulele de aur bio-funcionalizate pot fi utilizate pentru detectarea diferitelor clase de macromolecule, dintre care cele mai importante sunt proteinele i acizii nucleici. Principiul care st la baza procedeelor de detecie este specificitatea mare dintre diferite bio-molecule i apariia unor modificri in spectrele optice ale nanoparticulelor de aur bio-funcionalizate n urma complexrii. O alt abordare a bio-senzorilor optici cu nanoparticule de aur o reprezint detecia SERS, cmpul electromagnetic intens din vecintatea nanoparticulei ducnd la amplificarea semnalului Raman pentru moleculele aflate n apropierea nanoparticulelor, obinndu-se astfel sensibilitate de detecie ridicat. Bio-senzori colorimetrici se obin prin realizarea unor teste de agregare. Nanoparticulele de aur pot fi utilizate pentru creterea sensibilitii unor senzori electrochimici. Sunt utilizate n construcia senzorilor fie prin ataarea nanoparticulelor pe suprafaa electrodului de lucru, fie prin funcionalizarea lor cu receptori, precum enzime, anticorpi, oligonucleotide. Ataate pe un electrod plan, nanoparticulele de aur mresc considerabil suprafaa activ a electrodului, sistemul fiind astfel sensibil la variaii foarte mici ale curenilor sau tensiunii. Nanoparticulele pot fi asamblate pe o varietate larg de substrate, unele prin mijloace foarte ingenioase, dar tehnica nanoingineriei solicit controlul pe scar nanometric, i anume controlul asupra morfologiei aranjrii nanoparticulelor la suprafa. Substratele pot fi de sticla: conductoare (de exemplu sticla ITO avand la 12

suprafata un strat de oxid de indiu si staniu) sau neconductoare (cuar, sticl cu carbonat de sodiu). Toate aceste substrate sunt caracterizate de transparen i de posibilitatea functionalizrii la suprafa a gruprii OH. Substratele de sticl permit caracterizarea filmelor subiri obtinute, utilizand metode spectroscopice i de microscopie electronic. Imbuntirea semnalului redox de ctre nanoparticule se datoreaz reducerii distanei dintre centru activ, redox, al proteinei, i suprafaa electrodului plan, astfel se mbuntete transferul de sarcin de la electrolit la electrod. Mai mult decat att, proteinele ataate pe suprafaa nanoparticulelor de aur si pstreaz funcia biologic specific. Dintre cei mai utilizai biosenzori electrochimici cu nanoparticule de aur, se numr senzorii enzimatici, imunosenzorii, aptasenzorii, n funcie de substana activ a senzorului. n cazul senzorilor enzimatici, semnalul electric provine de la o reacie enzimatic, n cazul imunosenzorilor, acest semnal apare n urma reaciei specifice anticorp-antigen, iar n cazul senzorilor cu ADN (aptasenzori), semnalul se datoreaz n principal complementaritii bazelor azotate din macromolecula de ADN. Biosenzorii electrochimici cu nanoparticule de aur pot fi utilizai pentru detecia unor clase de substane: proteine, secvene de nucleotide, substane cu potenial toxic, cu utilizri n creterea calitii vieii. O component important a biosenzorilor cu nanoparticule de aur o reprezint interaciunea specific anticorp-antigen (de exemplu: biotin-streptavidin, albumin-imunoglobulin). In acest caz, pe un substrat solid se auto-asambleaz un strat de nanoparticule de aur biofuncionalizate cu anticorpul. In prezena antigenului dintr-o soluie, se modific semnalul electrochimic primit de la substratul bio-funcionalizat, astfel realizndu-se detecia substanelor de interes. Au fost creai senzori electrochimici cu nanoparticule de aur, bio-funcionalizate cu enzime (tirozinaz) pentru detecia bisfenolului A, utiliznd voltametria ciclic. Tirozinaza este ataat pe nanoparticule prin intermediul glutaraldehidei, iar semnalul este diminuat n urma atarii pe suprafaa electrodului a bisfenolului A. Un alt senzor 13

ce utilizeaz complexul nanoparticule de aur/(clorur de poli-dialil-dimetilamoniu)/ nanotuburi de carbon este folosit pentru detecia colesterolului, prin intermediul enzimei colesterol-oxidaz, limita de detecie fiind de ordinul milimolilor. Nanoparticulele de aur mbuntesc transferul de sarcin n cazul deteciei glucozei, prin intermediul glucoz-oxidazei, detecia realizndu-se prin msurtori de voltametrie ciclic i spectroscopie de impedan. Numeroi senzori electrochimici cu nanoparticule de aur se bazeaz pe activitatea electrocatalitic a peroxidului de hidrogen (apa oxigenat). Prin depunerea nanoparticulelor de aur pe un electrod de platin, acoperit cu un strat de polivinil ferocen (PVF) se realizeaz detecia amperometric a unor xantine, rspunsul electrochimic fiind dat, n acest caz, de activitatea electrocatalitic a H2O2 ce se formeaz n urma oxidrii analitului.

6. Perspective de cercetare n domeniul bioelectronicii.

O direcie vizeaz continuarea combinaiei de succes dintre biotehnologie i microelectronic. Se urmrete integrarea pe acelai cip a biosenzorului i a sistemului digital de prelucrare a semnalului. Scopul ar fi obinerea unor actuatoare integrate complet i controlate de nivelul analitului n snge. S-ar putea realiza actuatoare, care s furnizeze automat anumite medicamente n snge, sau micropompe de declanare a dializei, . O alt direcie de cercetare se bazeaz pe observaia fcut de Scheller n legtur cu procesarea de semnal fcut la nivel enzimatic. Exist dou tipuri distincte de enzime ce pot realiza suma matematic a semnalelor generate de doi senzori distinci. De asemenea, s-a realizat diferena i produsul de convoluie a dou semnale cu ajutorul a dou enzime distincte. Dac acest lucru va fi fcut n viitor la o scal mic de integrare i cu o vitez de rspuns superioar circuitelor digitale, vom asista n viitor la dezvoltarea biocalculatoarelor. Modelarea rspunsurilor biosenzorilor prezentat aici este doar o provocare. Dac un biosenzor are un comportament neliniar, cu att mai mult un organism viu are. Modelarea rspunsurilor n lumea biologic i n special n medicin este un teren neatins nc. Utilitatea lor ar fi imens. Un exemplu: medicul analizeaz rspunsul unui electrocardiograf doar calitativ. Acest rspuns s-ar putea modela cu parametri ce ar indica elasticitatea vaselor de snge, timpi de comutaie, amplitudini - parametri ce ar putea duce la un diagnostic optimizat.

14

Aplicaii ale TCEN sunt interesante mai ales n analiza rspunsurilor lumii vii. Spre exemplu, dozarea medicamentelor ar putea fi fcut pe baza stabilirii concentraiei de prag. Organismul uman prezint o anumit reactivitate biologic la un medicament. Dac se administreaz n concentraii prea mici, organismul nu "simte" nimic. Peste o doz "prag" reactivitatea ncepe s se fac simit. n viitor s-ar putea dovedi o reactivitate chiar i sub prag. Parial s-a demonstrat acest lucru. Scznd concentraia medicamentului foarte mult, s-a ajuns la stabilirea unor diluii foarte nalte (homeopatice), la care reactivitatea organismului crete din nou. Aceste concentraii, sau n cellalt caz, diluii prag, ale unor medicamente, ar putea fi extrase cu TCEN. Dezvoltri n direcia electrofiziologiei. Proprietile fundamentale ale neuronilor constau n generarea i conducerea impulsurilor electrice nervoase. Un stimul cu intensitatea sub prag nu se propag. Asemnarea conduciei electrice intraneuronale cu dispozitivele MOS este frapant. ntre doi neuroni conducia se face prin intermediul mediatorilor chimici i a neurotransmitorilor (substane ca acetilcolina, dopamina etc). Iat de ce aceste substane sunt att de intens cercetate cu ajutorul biosenzorilor. Dar nu numai neuronii, ci toate celulele au comportamente electrice: conducia prin canalele ionofore, ncrctura electric a mediului micelar, electroforeza proteinelor sunt doar cteva exemple. De asemenea, deosebit de interesant ar fi modelarea n domeniul electronicii celulare i a transmiterii semnalelor biologice. Exist o transmisie la nivel intracelular (prin mesagerii secunzi spre receptorii nucleari), o transmisie intercelular (prin circulaia sangvin a analiilor) i apoi o transmisie global ntre organe. Electrofiziologii au avansat mult n ultimele decenii, reuind prin observaii directe s explice unele fenomene electrice ce apar n funcionarea celulelor. i instrumentele puse la dispoziie de nanotehnologii i-au ajutat. ns ceea ce lipsete n acest domeniu este modelarea. O stpnire cantitativ a fenomenului la nivel celular i apoi global, ar fi cheia unei medicini moderne. Este de ateptat ca aceast modelare s fie extrem de dificil, ntruct organismul are diverse metode de adaptare printr-un numr extrem de mare de feedback-uri. De aceea ele trebuie s debuteze treptat: mai nti la nivel celular i n cele din urm la nivelul ansamblului organismului viu. Prerea personal a autorului acestei cri este c n viitor vom asista la o convergen a tiinelor ntr-un mod surprinztor. Dac n trecut, materia acestei lumi a fost studiat din unghiul chimistului, al fizicianului, al biologului, al electronistului, astzi asistm la o superspecializare pe domenii extrem de nguste: electroniti specializai doar pe tranzistoare SET, sau doar pe nanotuburi de carbon, ori biologi care studiaz doar un anumit organit celular. Ironia soartei este c electronistul care aprofundeaz mult nanotuburile le redescoper printre proteinele din canalele ionofore celulare, iar biologii sunt forai s dea explicaii despre fenomene electrice celulare. Probabil c doar conlucrarea acestor cercettori va asigura succesul n viitor.

15