GUIA 3

CULTIVO CONTINUO

3.1.- En el desarrollo de una tecnología microbiana para tratar un efluente industrial se requiere operar un
quimiostato de 120 litros de volumen de trabajo con un flujo de 20 L/h. La población presenta un µM de 0.22
h
-1
, un Ks de 1000 ppm y un rendimiento de sustrato en células de 0.28 g/g. Los ensayos preliminares hacen
recomendable trabajar a una velocidad de dilución equivalente a un 82% del valor crítico. Determinar la
concentración de sustrato en la alimentación, en la descarga y la concentración celular en estado
estacionario.
3.2.- Dos cepas microbianas coexisten en un fermentador continuo de mezcla completa y compiten por el
mismo sustrato limitante. Suponer que se cumple el modelo cinético propuesto por Monod y que los
rendimientos de sustrato en células son constantes e iguales para ambas. Plantear las ecuaciones que
describen el sistema en función de los parámetros cinéticos (µM y Ks), los rendimientos y la velocidad de
dilución.
3.3.- Una levadura es cultivada en un quimiostato simple de 110 litros de volumen de caldo. La levadura es
susceptible a inhibición por la fuente de carbono y energía de acuerdo a:
µ = µM S .
(KS + S) (S + KI)
donde µM = 0.39 h
-1
Ks= 0.098 g/L KI = 0.5 g/L
El fermentador se opera a una velocidad de dilución de 0.21 h
-1
, obteniéndose una concentración celular en
estado estacionario de 7 g/L.
a) Especifique los estados estacionarios que se pueden obtener y analice su estabilidad.
b) Diseñar un medio de cultivo adecuado bajo limitación por carbono. Especifique sólo las fuentes de C, N,
P y Mg.
c) Determine la máxima productividad volumétrica de células (QX)máx
3.4.- En una planta de tratamiento se trata un efluente industrial en un quimiostato simple de un volumen útil
de 200 litros, el flujo que ingresa al reactor es de 35 L/h. Los lodos del reactor presentan una µM de 0.34 h
1
,

un KS de 1500 ppm y un yx/s igual a 0.44 g/g. En pruebas realizadas en planta piloto se determinó que es
recomendable, para este tipo de efluentes, trabajar con una velocidad de dilución del orden de 4/5 la
velocidad de dilución crítica. Determinar la concentración del efluente a tratar en la entrada y en la salida del
reactor, la eficiencia de remoción y la concentración celular operando en estado estacionario.
3.5.- Para el comportamiento de un microorganismo se obtuvo la siguiente gráfica en cultivo continuo:







¿Cómo determinaría KS, KI y µM a partir de esta gráfica?
Considere válida la expresión cinética adjunta.
3.6.- Considere un microorganismo que sigue la cinética de Monod, donde µM= 0.5 h
-1
y KS= 2 g/L. En un
reactor continuo perfectamente agitado en estado estacionario S0= 50 g/L e yx/s= 1 g/g. ¿Cuál será la
velocidad de dilución a la que se debe operar para obtener la máxima producción de células?
3.7.- La productividad en biomasa en reactores batch y continuo puede ser comparada bajo condiciones
donde S0>>KS. Estime la magnitud de la diferencia.
µ (h
-1
)
S (g/L)
( )( )
I S
M
K S S K
S
+ +
= µ µ
Diseño de Bioreactores
Departamento de Ingeniería Química IIQ-461
Marzo, 2005 Diseño de Bioreactores

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3.8.- Usted dispone de la siguiente información experimental del crecimiento de una bacteria, obtenida en
cultivo batch:
t (h) 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00
X (g/L) 0.10 0.13 0.16 0.21 0.27 0.35 0.45 0.57 0.74 0.94 1.21 1.56 2.00
S (g/L) 100.0 99.93 99.84 99.72 99.57 99.38 99.13 98.82 98.41 97.89 97.22 96.36 95.26

t (h) 6.50 7.00 7.50 8.00 8.50 9.00 9.50 10.00 10.50 11.00 11.50 12.00 12.50
X (g/L) 2.56 3.29 4.22 5.42 6.95 8.93 11.45 14.70 18.86 24.19 31.01 39.60 4.10
S (g/L) 93.84 92.02 89.69 86.70 82.86 77.94 71.62 63.51 53.11 39.78 22.71 1.25 0.00
a) Cuál es la velocidad máxima de crecimiento
b) Cuál es el valor del rendimiento global de sustrato en células(yx/s)
c) Cuál sería el rango de velocidad de flujo de alimentación que usted usaría en fermentaciones de cultivo
continuo de esta bacteria si el reactor tiene una capacidad de 20 litros.
d) Usted realiza un experimento de cultivo continuo a velocidad de dilución 0.35 h
-1
. Transcurrido un tiempo
se observa que el cultivo está contaminado. El microorganismo contaminante se identifica y se sabe que
éste tiene una velocidad máxima de crecimiento de 0.4 h
-1
. ¿Es posible eliminar el contaminante?
Justifique.
3.9.- Se desea reducir la concentración de un sustrato orgánico (5 g/L, 200 L) usando microorganismos. El
microorganismo seleccionado crece de acuerdo a la relación de Monod con parámetros µM= 0.27 h
-1
, KS= 1
mg/L, yx/s= 0.15 g/g. Este último coeficiente puede considerarse constante. El problema es determinar bajo
qué condiciones de operación se realizará el proceso (batch o continuo). Para ello dispone de un reactor de
10 litros de volumen útil.
a) Si el proceso se realiza en operación batch, determine el tiempo necesario para reducir la concentración
de sustrato a 0.5 g/L. Asuma que la concentración inicial de biomasa es de 0.1 g/L.
b) Si el proceso se realiza en operación de cultivo continuo, determine el tiempo necesario para llevar a cabo
el proceso operando en estado estacionario.
c) En este último caso cómo afectaría su resultado si KS= 2 g/L
3.10.- En un fermentador simple de una etapa se desea cultivar una bacteria en un medio compuesto de
acético y sales minerales. El fermentador tiene un volumen útil de 9 litros y se ha determinado para el ácido
acético un KS de 39 (mg/L), un valor de yx/s constante e igual al 90% del mismo.
Una experiencia de lavado arrojó los siguientes resultados a D = 0.51 h
-1

Tiempo (h) 0 1 2 3 4 6 7
X (g/L) 3.0 2.85 2.5 2.0 1.6 1.05 0.82
a) Diseñar el medio de cultivo en cuanto a las fuentes de C, N, Mg y P, si se desea tener limitación por
acético y se opera a D=0.27 h
-1

b) Determinar la velocidad de dilución a la cual se presenta la máxima productividad de células.
3.11.- Considere un quimiostato operando bajo condiciones estacionarias con producción de biomasa de
acuerdo a la cinética de Monod. Asuma que la máxima velocidad específica de crecimiento es 1 h
-1
y la
constante de saturación es 500 mg/L. La alimentación es estéril y contiene 10 g/L de sustrato carbono; el flujo
de alimentación es 300 L/h. El volumen de líquido en el fermentador es 1000 litros. El rendimiento de biomasa
es 0.5 g biomasa /g sustrato consumido.
a) Discuta el significado físico y fisiológico de la velocidad crítica de dilución y las implicancias de operar
bajo esta condición. Claramente determina un estado improductivo, entonces cuál sería el interés de
conocer y operar a esta velocidad?
b) Determine la velocidad de dilución crítica para la cinética y concentración de alimentación dadas.
c) Qué modificaciones físicas podría sugerir a este cultivo para operar a elevados flujos sin causar lavado.

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