Investeşte în oameni!

Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013

Circuitul materialului biologic tisular de la prelevare la preparat histopatologic permanent

Expert Dr. Cristina IOSIF, INCD Victor Babes
Activitatea GA.1.1.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 - 30 ianuarie 2011, Sinaia

Investeşte în oameni!

Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013

Diagnostic Histopatologic Stadializare pTNM Factori de prognostic si predictie Tinte moleculare pt terapie

Examinare lama HE, coloratii speciale, teste IHC, teste de biologie moleculara, corelare cu datele clinice, imagistice, Biologice, endoscopice, etc

Prelevare, solicitare examen HP (date de identificare, date clinice, tip de interventie, orientare, procesare (identificare, examen macroscopic si disectia piesei, Examinare, descriere), sectionare pentru histologie, fixare,+/- decalcifiere, spalare, deshidratare, clarificare, arafinare,includere, sectionare, uscare, deparafinare, colorare, montare

Activitatea GA.1.1.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 - 30 ianuarie 2011, Sinaia

Investeşte în oameni!

Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013

1. Solicitarea pentru evaluarea histopatologica BILETUL DE INSOTIRE AL MATERIALULUI BIOPSIC Date de identificare a pacientului (nume, varsta, CNP, nr FO) Medicul care solicita examinarea/alti medici implicati (nume, sectia) – pentru a sti catre cine se intoarce rezultatul HP Data la care s-a efectuat interventia (ziua, luna, anul)

Activitatea GA.1.1.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 - 30 ianuarie 2011, Sinaia

Investeşte în oameni!

Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013

Date clinice relevante:
1. dg clinic 2. antecedente patologice (ex: istoric de cancer) 3. tratamente chirurgicale anterioare sau medicale 4. tratamente oncologice anterioare 5. daca este urgenta

Activitatea GA.1.1.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 - 30 ianuarie 2011, Sinaia

Sinaia .1.Biopsii excizionale (scop diagnostic si terapeutic in cazul leziunilor de mici dimensiuni) .Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Ce reprezinta piesa trimisa spre examinare ex.Biopsiile endoscopice – totdeauna insotite de descrierea endoscopica a leziunilor Activitatea GA.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .1.30 ianuarie 2011. piese de rezectie sau biopsii .Biopsii incizionale (strict pentru diagnostic) .

30 ianuarie 2011.1.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Ce trebuie sa stie clinicianul cand preleveaza o biopsie Leziuni mari – fragmente multiple (neomogenitate tumorala) Tumori ulcerate .1.se evita zonele de necroza Biopsiile sa fie suficient de profunde pt a vedea relatia cu stroma Activitatea GA. Sinaia .: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .

calcificari.1. Sinaia .Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Leziuni profunde – pot fi insotite in periferie de fibroza.1.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 . inflamatie. etc fragmente multiple recoltate – se trimit TOATE pt ex HP – indiferent de aspectul lor macro se evita artefactele de zdrobire se fixeaza imediat dupa prelevare Activitatea GA.30 ianuarie 2011.

cu fire de sutura (lung=lateral.1.30 ianuarie 2011.piesele de rezectie se transporta in cel mai scurt timp (prelungirea timpului pana la fixare poate afecta calitatea dg HP precum si imunoreactivitatea pentru anumiti markeri) .solutii moderne: vacuum-ul Orientarea pieselor: dupa repere anatomice.1.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 . Sinaia . scurt=superior) in unghi drept Activitatea GA.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Timpul scurs de la prelevare la fixare si transportul catre laborator .biopsiile mici se fixeaza imediat .

etape. b. se cantareste .1.se masoara.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .se verifica markerii de orientare: ex. identificarea piesei – se verifica concordanta datelor (la noi! registru cu semnatura de primire) examinarea macroscopica si disectia piesei . fire de sutura . piese mari de rezectie cu margini macro infiltrate .1. repere anatomice.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 2.se identifica toate structurile anatomice .30 ianuarie 2011. Sinaia .se diseca piesa si se examineaza Activitatea GA.se vopsesc marginile – ex biopsiile cutanate pt leziuni pigmentare. principii generale ale procesarii – a. De la piesa proaspata la blocul de parafina .

1.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Se identifica procesul patologic daca nu se gaseste leziunea expectata sau aceasta are aspect neobisnuit se consulta chirurgul este important sa se specifice daca o leziune pe care chirurgul pretinde ca a excizat-o.1. lipseste (ex lipsa traseului de punctie intr-un sector mamar sau a unui polip intr-un segment colonic rezecat) Activitatea GA.30 ianuarie 2011.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 . Sinaia .

1. Sinaia . etc) Activitatea GA.30 ianuarie 2011.1.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Se fac sectiuni histologice care demonstreaza cel mai bine caracterele macro (ex: pt a demonstra penetrarea tumorii in peretele intestinal se sectioneaza toata tumora si se alege sectiunea cu adancimea max a acesteia.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 . marginile cu tumora!.

Sinaia .1.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Activitatea GA.30 ianuarie 2011.1.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .

30 ianuarie 2011. Sinaia .1.1.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Activitatea GA.

1.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 . Sinaia .Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Activitatea GA.30 ianuarie 2011.1.

30 ianuarie 2011.1. Sinaia .1.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .Investeşte în oameni! Orientarea piesei (workstation – ansamblu) Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Nisa chimica cu exhaustare totala si post de lucru Activitatea GA.

Investeşte în oameni! Workstation . Sinaia .30 ianuarie 2011.1.1.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .detaliu cu masa de lucru si banc de unelte pentru orientare Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Activitatea GA.

30 ianuarie 2011.1.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Activitatea GA.1.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 . Sinaia .

1.1.30 ianuarie 2011.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Activitatea GA. Sinaia .

1.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Activitatea GA.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .30 ianuarie 2011.1. Sinaia .

1.1.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Aparat automat de includere la parafina cu placa de racire Termostat Activitatea GA. Sinaia .30 ianuarie 2011.

1.1.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Activitatea GA.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 . Sinaia .30 ianuarie 2011.

Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Sectionarea – microtom manual rotativ cu baie de flotare Activitatea GA.1. Sinaia .1.30 ianuarie 2011.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .

30 ianuarie 2011.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .1.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Colorarea – autostainer liniar (“robot stainer”) Activitatea GA.1. Sinaia .

Sinaia .1.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Activitatea GA.30 ianuarie 2011.1.

1.30 ianuarie 2011.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Montarea – automat de montat lame / 400 lame pe zi Activitatea GA.1.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 . Sinaia .

1.1.30 ianuarie 2011.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Activitatea GA.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 . Sinaia .

1.1.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Activitatea GA. Sinaia .: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .30 ianuarie 2011.

paralele sau perpendiculare pe planul de rezectie .demonstreaza prezenta/absenta tumorii si viabilitatea lor .disectia limfoganglionilor .30 ianuarie 2011. nr mic de ggl disecati) .: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Aspecte particulare ale procesului de orientare a piesei . tesutul adipos fixat in solutie Bouin – evidentiaza mai bine ggl. Sinaia .1.1.ex.marginile de rezectie .marcate cu tus China sau culori diferite !poate difuza in tesut si poate creea erori de interpretare! Activitatea GA.

T. gastrica cu meta sub pilorica sau in colon transvres.gastric cu meta cecala) 2 tumori diferte (ex ADK si GIST) piese lipsa – erori din diverse cauze ajunge in alt laborator (ex.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 leziuni multiple reprezinta aceeasi leziune – exista o conexiune microscopica intre ele (ex. etc) o tumora primara si o metastaza (ex t. gastrinoame.se schimba pT!.1.1. limfom gastric.30 ianuarie 2011.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 . Lichide de punctie) piesa “pierduta pe drum” recipientul ajunge gol – acesta trebuie atent examinat! piesa “dizolvata” la prelucrare Activitatea GA. Sinaia . san . c.

: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 . artefacte de “vopsire”.invatam sa gandim logic diagnosticul inainte de a vedea lama! Activitatea GA. Sinaia .Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Principii generale ale descrierii macroscopice O descriere corecta si completa este importanta pt: DIAGNOSTIC – ex informatii utile pt stadializare si prognostic (dimensiunea T. nr de ggl) CORELATII – cu aspectul Mi (ex. etc) DOCUMENTARE – inregistrare in registre (acte medicale si medico-legale) TRAINING. erori de includere.30 ianuarie 2011. T multiple. distanta de margini.1.1.

ms.1.cap. Of.1.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 . Sinaia .30 ianuarie 2011.org CAP Cancer Protocols and Checklists www.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Principii generale ale descrierii macroscopice Exprimare succinta si precisa Organizare Disectie corecta Standardizare (micsoreaza riscul de a omite informatii importante) www. 723/2010) Diagrame (putem folosi imagini fotocopiate ale pieselor) Descrierea sistematica Activitatea GA.ro Ordinul 1217 din 16 septembrie 2010 privind aprobarea ghidurilor de practica medicala pentru specialitatea anatomie patologica Publicat in Monitorul Oficial 723 din 29 octombrie 2010 (M.

daca a fost primit proaspat sau fixat. relatia cu struct normale si marginile.1. diverticuli.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Descrierea macroscopica I -natura preparatului.se descrie orice aspect patologic secundar (ex.descrierea principalelor aspecte patologice care au determinat rezectia (tipul leziunii.30 ianuarie 2011. Sinaia . a2a leziune.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 . III . dimesiuni. etc) Activitatea GA. etc). structurile anatomice prezente. dimensiuni si G II .1. Polipi.

daca mg au fost marcate si tipul daca piesa a fost fotografiata sau s-a efectuat Rx VI . (ex…. se noteaza daca tesutul a fost orientat in totalitate sau nu.lista sectiunilor prelevate pt microscopie: nr consecutive. daca lez este f.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Descrierea macroscopica IV .30 ianuarie 2011.) Activitatea GA.se noteaza eventuale sectiuni recoltate pt ex extemporaneu. Sinaia . mica.1.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .1.orice structura normala care nu a fost mentionata la punctul 1 V .

30 ianuarie 2011. tumora se afla la 5 cm de mg distala si 14 cm de mg proximala. tumora infiltreaza macro grasimea pericolonica pana la 0.5 cm de seroasa care este marcata cu tus. Activitatea GA. ulcerata central (4x3x2 cm) cu margini elevate si care ocupa aprox 70 % din circumferinta.1.1. cenusiu rozata.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Exemplu I – piesa primita proaspata reprezentata de segment de colon (25 cm lungime x 8 cm circumferinta proximala si 5 cm circumferinta distala) cu mezenter atasat (25 cm x 5 cm) cu o sutura indicand marginea proximala II – formatiune tumorala ferma. Sinaia .: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .

Sinaia .30 ianuarie 2011.1. bloc nr. bloc nr 108-113: ggl. s-au izolat 12 ggl din grasimea pericolica. V – piesa a fost fotografiata.8 cm. perpendiculara.restul piesei nu prezinta modificari macro notabile. s-a recoltat un fragment tumoral de 1x1x1 cm pentru biologie moleculara VI – bloc/caseta nr 101-102: tumora cu seroasa. (cate 2 per bloc) Activitatea GA.1. 106: mg distala.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 . lobulat (1x1x0. 2 fragmente (tot). bloc nr 103-104: tumora cu mucoasa normala. bloc nr.8 cm) este localizat 4 cm proximal de tumora IV . perpendicular. cel mai mare de 0. bloc nr 107: mg proximal.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Exemplu III – polip sesil cenusiu rozat. 105: polip.

boselat. chist endometriozic.1. se masoara in cm de preferat piesa nefixata Greutate – se exprima in grame. spiculate. procese patologice au culoare caracteristica (ex: RCC. tesuturi. usor lobulat.1. pediculat.sa fie precise. melanomul pigmentar.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Componentele descrierii macroscopice Dimensiuni . Sinaia . chisturile din MFK. melanosis coli. pigment antracotic.30 ianuarie 2011. stelate. sesil. se cantaresc nefixate Culoare – unele tumori. oncocitoma. SR. cloroma. exofitic. etc Miros – se noteaza deoarece indica descompunerea tesuturilor Consistenta – moale. elastica Activitatea GA. serpiginos. renitenta. endofitic. ferma. etc) Forma si textura – bine delimitate/ infiltrative. fluctuenta.

1.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Fixarea Formol 10% tamponat .1. volum Dezavantaje: toxic. la +4º Activitatea GA.ramane cel mai utilizat fixator.bun pt coloratii speciale si IHC (daca se respecta timpii: prelevare –fixare max 30 min si fixare max 24-48 ore) Atentie!!! – la timp. Sinaia . pH si tº. . concentratie. cancerigen Rezultate bune privind conservarea acizilor nucleici se obtin cu formol 10% tamponat.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .30 ianuarie 2011.

f. bun pt ggl Metacarnoi – cloroform+metanol+acid acetic glacial Etanol 70% .: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .30 ianuarie 2011.prezerva bine acizii nucleici HOPE !! (Hepes-Glutamic acid buffer mediated Organic solvent Protection Effect) Activitatea GA. f.1. bun pt biopsiile de MO (! indepartarea precipitatelor de mercur .Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Fixarea Alti fixatori: Zenker – contine clorura de mercur.dificila) Bouin – contine acid picric Carnoi – cloroform+etanol+acid acetic glacial. Sinaia .1.

prin urmare piesa trebuie fixata apoi decalcifiata V Babes: biopsiile de MO se decalcifica in solutie EDTA maxim 4 ore. 100 ml solutie/1g tesut Decalcifierea prelungita poate afecta detaliile histologice si acuratetea testelor IHC (ex.1.30 ianuarie 2011. Bouin. Sinaia . p53) Activitatea GA.1. tumori ovariene. sol. unele teratoame. Zenker) Alti agenti nu fixeaza.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Decalcifierea Osul si fragmente de tesut ce contin os sau calcificari (ex: vase cu placi de aterom. PGR. ER. etc) Unii fixatori au si prop de decalcifiere (sol. flm. meningioame. Ki67.

2-0. nu se pot taia!!! (grosime max 0.3 cm) fragmente de os/tesut cu calcificari – trebuie fixat apoi decalcifiat clipsuri metalice sau orice material strain dur se indeparteaza anterior procesarii fragmentele f.de la bloc la lama – Procesare manuala sau automata Deshidratare – apa inlocuita de alcool Clarificare – alcoolul inlocuit de xilen.1.xilen inlocuit de parafina Probleme: tesutul adipos – sectiuni subtiri (sectiuni prea groase sau prea mari – nu se fixeaza.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Laboratorul de histopatologie .: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .30 ianuarie 2011.1. raman moi. benzen sau toluen Parafinare . Sinaia . mici Activitatea GA.

colorare.: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .) Uscare.uneori greu de orientat – sa fie la acelasi nivel Sectionarea la microtom Probleme: Calitatea lamelor de microtom Calitatea blocului de parafina!! (orice etapa anterioara poate fi cauza unei sectionari dificile – ex.30 ianuarie 2011. Sinaia . montare Activitatea GA.1.de la bloc la lama – Includerea la parafina Probleme: Trebuie pastrata orientarea Fragmente mici/biopsiile multiple .1.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Laboratorul de histopatologie .

org www.30 ianuarie 2011.ro Manuale de proceduri Activitatea GA.Investeşte în oameni! Proiect cofinanţat din Fondul Social European prin Programul Operational Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013 Take Home Message Sa obtinem date clinice relevante Standardizarea fixarii Standardizarea macroscopiei www.1.cap.1.ms. Sinaia .: “Organizarea laboratorului de anatomie patologica” 26 .

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful