Cromatografia Gasosa Princpios Bsicos

Dr. Marcelo Del Grande Qumico de Aplicao SINC do Brasil

CROMATOGRAFIA Princpio Bsico

Separao de misturas por interao diferencial dos seus componentes entre uma FASE ESTACIONRIA (lquido ou slido) e uma FASE MVEL (lquido ou gs).

Separao em GC
Separao ocorre na coluna Duas fases so envolvidas: Fase estacionria Fase mvel (gs de arraste) Fase estacionria reside dentro da coluna Fase mvel move sobre a fase estacionria

Por que migram a uma taxa diferente?

Interaes intermoleculares atraem molculas para a fase estacionria Ex.: ligao de hidrognio

Interao mais fraca

Interao mais forte

Fase Estacionria

Fatores que Afetam a Separao

Estrutura qumica do composto (1) Fase estacionria (2) Temperatura da coluna (3)

M S

(1)

(2)

T mais alta

M S

M S

M S (3)
T mais baixa

CROMATOGRAFIA Modalidades e Classificao Cromatografia Lquida Cromatografia Gasosa (CG)

FM = Lquido FM = Gs

Slida Em CG a FE pode ser: Lquida

Cromatografia Gs-Slido (CGS)

Cromatografia Gs-Lquido (CGL)

CROMATOGRAFIA GASOSA Aplicabilidade

Quais misturas podem ser separadas por CG ?

(para uma substncia qualquer poder ser arrastada por um fluxo de um gs ela deve se dissolver - pelo menos parcialmente nesse gs) Misturas cujos constituintes sejam VOLTEIS/SEMI-VOLTEIS DE FORMA GERAL: CG aplicvel para separao e anlise de misturas cujos constituintes tenham PONTOS DE EBULIO de at 300oC e que termicamente estveis.

O Cromatgrafo a Gs
1 2 6

5
1 - Reservatrio de Gs e Controles de Vazo / Presso. 2 - Injetor (Vaporizador) de Amostra. 3 - Coluna Cromatogrfica e Forno da Coluna. 4 - Detector. 5 - Eletrnica de Tratamento (Amplificao) de Sinal. 6 - Registro de Sinal (Registrador ou Computador).

Observao: em vermelho: temperatura controlada

Injetores
Parte do cromatgrafo a gs onde a amostra introduzida no cromatgrafo a gs Vaporiza amostra (solvente + compostos alvo) Mistura vapor com fase mvel (gs de arraste) Transfere vapor para dentro da coluna Forma mais simples: Cmara de aquecimento Injector liner/glass insert Glass liner/ Linhas de fluxo de gs injector liner/
glass insert Entrada da amostra

Entrada de gs de arraste

Fluxo da coluna

Qualidades desejveis para injetor GC

Injeo de amostra para dentro da fase mvel sem disperso da amostra ou tailing (efeito cauda) Vaporizar todos solutos instantaneamente sem decomposio trmica Evitar difuso de componentes da amostra na fase mvel No tenha contaminao da amostra No tenha perda da amostra

Injetores GC Capilar da Shimadzu

Injetor Injetor Split/Splitless Injetor Wide Bore On-Column Injector (OCI) Tipo / Uso Vaporizao / Injeo a quente Vaporizao / Injeo a quente Injeo a frio, bom para compostos termicamente instveis Injeo a frio, bom para compostos termicamente instveis, de alto ponto de ebulio ou para volume grande de amostra

Programmed Temperature Vaporizing (PTV) Injector

INSTRUMENTAO
Parmetros de Injeo
TEMPERATURA DO INJETOR Deve ser suficientemente elevada para que a amostra vaporize imediatamente, mas sem decomposio Regra Geral: Tinj = 50oC acima da temperatura de ebulio do componente menos voltil VOLUME INJETADO Depende do tipo de coluna e do estado fsico da amostra
COLUNA empacotada = 3,2 mm capilar = 0,25 mm Amostras Lquidas
0,2 L ... 20 L 0,01 L ... 3 L

Amostras Gasosas
0,1 ml ... 50 mL 0,001 ml ... 0,5 mL

Slidos: convencionalmente se dissolve em um solvente adequado e injeta-se a soluo

Injetor Split/Splitless
Vantagem: Previne introduo de compostos no volteis da amostra Desvantagem: Discriminao dos compostos com alto ponto de ebulio e termicamente instveis Dois modos de injeo em um nico injetor
Fluxo de purga do septo Fluxo de gas de arraste Fluxo Split

Fluxo da coluna

Injeo Split
Para amostras com concentraes mais altas
Purga do septo

Razo Split = Fluxo de que sai por Split / Fluxo da Coluna Vantagem: Pico com bom formato em geral

Carrier Split

Injeo Splitless
Para compostos de nvel trao
Purga do Septo*

Bom para amostras semi-volteis (pontos de ebulio do analito so acima de ~150C)

Arraste Split*

* Fechado antes e durante injeo

Injetor On-Column (OCI)

Toda amostra introduzida diretamente na coluna Amostra pode ser introduzida a temperatura relativamente baixa Temperatura do injetor pode ser programada (rampa)
- por ex.: 50C (0.1min) 100 C/min 280 C (20min) No ocorre o splitting da amostra Sem discriminao dos compostos com alto ponto de ebulio Minimiza decomposio de compostos termicamente instveis Rpida contaminao da coluna por compostos no volteis

Gs de arraste

Entrada do Ar para esfriamento

Sada do Ar para esfriamento

OCI Insert

Injetor de Vaporizao com Temperatura Programada (PTV)

Amostra pode ser injetada a temperatura relativamente baixa Temperatura do injetor pode ser programa (rampa) - por ex.: 50C (0.1min) 100 C/min 280 C (20min) Amostra introduzia atravs do glass insert (tipo PTV) Pode ser usado modo split ou splitless Sem discriminao para compostos de alto ponto de ebulio Minimiza decomposio de compostos termicamente instveis Possibilidade de injetar grande volume de amostra
Sada da purga de septo Entrada do gs de arraste Sada do fluxo split

Entrada do Ar para esfriamento

Sada de Ar Para esfriamento

Glass Insert
Por que usar glass insert: Eliminar contato da amostra com metal (corpo do injetor) Aquecimento uniforme para melhor vaporizao da amostra

Silylated glass wool

Glass insert da Shimadzu para aplicaes com colunas capilares

INSTRUMENTAO
Gs de Arraste
Fase Mvel em CG: NO interage com a amostra - apenas a carrega atravs da coluna. Assim usualmente referida como GS DE ARRASTE

Requisitos:
INERTE No deve reagir com a amostra, fase estacionria ou superfcies do
instrumento.

PURO Deve ser isento de impurezas que possam degradar a fase estacionria. Impurezas tpicas em gases e seus efeitos:

H2O, O2 Hidrocarbonetos

oxida / hidrolisa algumas FE incompatveis com DCE rudo no sinal de DIC

INSTRUMENTAO
Gs de Arraste

Requisitos:
CUSTO Gases de altssima pureza podem ser muito caros.
CUSTO

A = 99,995 % (4.5)
C B A
PUREZA

B = 99,999 % (5.0) C = 99,9999 % (6.0)

COMPATVEL COM DETECTOR Cada detector demanda um gs de arraste especfico para melhor funcionamento. Seleo de Gases de Arraste em Funo do Detector:

DCT DIC DCE

He , H2 N2 , H2 N2 , Ar + 5% CH4

INSTRUMENTAO
Alimentao de Gs de Arraste
Componentes necessrios linha de gs:
controladores de vazo / presso de gs dispositivos para purificao de gs (traps) 3 4 2 1 5
1 - Cilindro de Gs 2 - Regulador de Presso Primrio 3 - Traps para eliminar impurezas do gs 4 - Regulador de Presso Secundrio 5 - Regulador de Vazo (Controlador Diferencial de Fluxo) 6 - Medidor de Vazo (Rotmetro)

Nota: Tubos e Conexes: Ao Inox ou Cobre

Tipos de Coluna
Coluna Empacotada
Material de enchimento 1. Comprimento 0.5-5m (Max 2m) 2. Dimetro externo 2-4mm 3. Enchimento de 0.5 a 25% de fase lquida 4. H vrios tipos de fase lquida. O tipo apropriado Deve ser selecionado porque o nmero de pratos Tericos no to alto. 1. Comprimento 12-60m 2. Dimetro externo 0.1, 0.22, 0.32, 0.53mm 3. Material : slica fundida, metal inerte 4. Os tipos de fase lquida so em nmero menor. Fase estacionria (revestimento lquido)

Tubo

Coluna capilar
Capilar (i.d. 0.25mm, 0.5mm)

Colunas: Definies Bsicas

EMPACOTADA = 3 a 6 mm L = 0,5 m a 5 m Recheada com slido pulverizado (FE slida ou FE lquida depositada sobre as partculas do recheio)

CAPILAR = 0,1 a 0,5 mm L = 5 m a 100 m Paredes internas recobertas com um filme fino (frao de m) de FE lquida ou slida

Colunas
Empacotada

Capilar

Colunas: Definies Bsicas

VANTAGENS
Mais economica

DESVANTAGENS
Se o material de enchimento no for colocado na coluna de forma compacta e uniforme, os espaos vazios resultantes funcionaro como cmaras de diluio da amostra. Menor eficincia Anlise mais lenta

Empacotadas Capilares

Maior capacidade de carga Maior quantidade de amostra

Maior comprimento eficincia Separao complexas de

=>

maior Capacidade de processamento da amostra inferior. Satura rapidamente. misturas Menor quantidade de amostra

Anlise mais rpida Maior separao

Fase estacionria
Cromatografia gs lquido (~90%) Polisiloxano
R R
R=
CH3 CH2CH2CH2CN CH2CH2CF3
methyl cyanopropyl trifluoropropyl phenyl

-O-Si-O-Si-OR R

Polietilenoglicol
HO CH2 CH2 O H
n

Cromatografia gs slido (~10%) Material slido adsorvente, por ex.: molecular sieves, alumina, etc. Uso: hidrocarbonetos muito volteis (e.g. CH4), gases inorgnicos (por. ex.: N2, CO2)

Seleo da fase estacionria

100% dimetil polisiloxano Apolar Exemplos de analitos: solventes, produtos de petrleos, sabores, hidrocarbonetos saturados 5% difenil 95% dimetil polisiloxano Apolar Exemplos de analitos: aromas, pesticidas, hidrocarbonetos aromticos 35% difenil 65% dimetil polisiloxano Polaridade mdia Exemplos de analitos: pesticidas contendo nitrognio Polietileno glicol Polar Exemplos de analitos: FAMEs, cidos graxos, aromas e lcoois
Referncia: http://www.restekcorp.com/colsel/colsel2.htm

FASES ESTACIONRIAS Conceitos Gerais

LQUIDOS Depositados sobre a superfcie de: slidos porosos inertes (colunas empacotadas) ou de tubos finos de materiais inertes (colunas capilares) FE
lquida SUPORTE Slido inerte poroso Tubo capilar de material inerte

Para minimizar a perda de FE lquida por volatilizao, normalmente ela :

Entrecruzada: as cadeias polimricas so quimicamente ligadas entre si

Quimicamente ligadas: as cadeias polimricas so presas ao suporte por ligaes qumicas

SLIDOS Colunas recheadas com material finamente granulado (empacotadas) ou depositado sobre a superfcie interna do tubo (capilar)

FASES ESTACIONRIAS Caractersticas de uma FE ideal

SELETIVA Deve interagir diferencialmente com os componentes da amostra.
FE Seletiva: separao adequada dos constituintes da amostra

FE pouco Seletiva: m resoluo mesmo com coluna de boa eficincia

Regra geral: a FE deve ter caractersticas tanto quanto possvel prximas das dos solutos a serem separados (polar, apolar, aromtico ...)

COLUNAS CAPILARES Fast GC: Colunas Capilares Finas

Alm de colunas finas: necessrio controle acurado de vazo (controle eletrnico de presso) e altas velocidades de aquecimento da coluna.

Destilao simulada de leo diesel:

Coluna: HP-1 (10 m x 0.10 mm x 0.40 m) TCOL: 35C / 40C min-1 / 0,75 min A 310C Gs de Arraste: He @ 90 ml.min-1 Detector: FID

O que Fast GC ?

Fast = E

fficient fficient

xcellent xcellent

asy asy

Princpios de Fast GC
Fast GC colunas tpicas Dimetro do liner comprimento filme: 0.1 mm 10 m 0.1-0.4 m

Princpios de Fast GC

Efficient
Fast GC requer no somente um fator mas um pacote completo 1. pequeno ID columns 2. pequeno ID 3. Alta final Temp 4. Picos Rpidos Alta Res. Alta Presso Grandes Rampas Rap Resfriamento Detector Rpido

(sampling frequency, filter time constant)

Requisitos para Fast GC

Efficient
Fast GC requer um sistema completo

GC-2010
1. Alta Presso 2. Grandes Rampas 3. Rpido Resfriamento 4. Rpido Detector 970 Kpa 70C/min lin 6min (450C a 50C) 250Hz sampling frequency 4 ms filter time constant

Requisitos para Fast GC

Const. Linear Velocity Mode

Fast Aplicao BETX Liquido normal GC

BTEX 5ppm SPLIT 10:1

fast GC
SPLIT 30:1 SPLIT 30:1

He 35 cm/sec (26.5 kPa) RTX-5 30m, 0.53 mm, 3m H2 200 cm/sec (732.7 kPa) 10 m, 0.1mm, 0.4m

Requisitos para Fast GC

Rpida resposta do detector crucial para Peak base width 2 sec Fast GC

60 Hz 10 Hz 5 Hz 2 Hz 1 Hz

Inj:340o, Det:360o, Column 1, H2 124cm/sec @35o, Split 20:1 Oven:35o to 100o @40o/min,Press:416kPa to 970kPa400kPa/min

Requisitos para Fast GC

Liner 1 mm ID, column: SPB5 1m, 0.1 mm, 0.1 m, Injection Volume 0.2 l Sample: Chlorodecane, Injection Volume 0.2 l

Peak width 0.1s

FWHM 40 msec

Requisitos para Fast GC

Ajuste do parmetro Filter Time para melhor resoluo Filter: 10 ms
Sampling 250 Hz

Kerosene

Filter: 100 ms, Sampling 250 Hz

Requisitos para Fast GC

GC analysis (Hz) Peak width (FWHM) (s) Fiter time const (ms) Sampling

Conventional Fast convent 20 Fast 100 Ultrafast

> 1.0 0.5-1

> 200 50-100

< 10 10-

0.1-0.5

10-50

20-

<0.1

<10

>100

GC-2010

min 4 ms

250 Hz

Applicao:
Butter FAMEs Conventional Analysis
uV 350e3 300e3 250e3 200e3 150e3 100e3 50e3

by Prof. Mondello, Messina

C4:0 2) C5:0 3) C6:0 4) C7:0 5) C8:0 6) C9:0 7) C10: 8) C10:1 9) C11:0 10) C12:0 11) C12:1 12) C12:1 isomer 13) C13:0 14) C14:0 iso 15) C14:0 16) C14:1 17) C15:0 anteiso 318) C15:0 iso 5

19) C15:0 20) C15:1 21) C16:0 iso 22) C16:0 23) C16:1 24) C17:0 anteiso 25) C17:0 iso 26) C17:0 27) C17:1 28) C18:0 iso 29) C18:0 30) C18:1 9 31) C18:1 7 32) C18:2 ? 33) C18:2 6 7 34) C18:2 ? 35) C18:3 3 36) C18:2 con.

1 5

2 2

2 9

3 0

10 2 3 2 25 2 6 8
27.5

2
0e3

4
5.0 7.5

6
10.0 12.5

8 9
15.0

0.0

2.5

17.5

111 1 1 2 3 4
20.0

1 1 61 9 2 8 1
22.5 25.0

3 3

33 56

30.0

33.0 min

Column: Rtx Wax 30 m x 0.25 mm i.d. 0.25 m film Inj. Vol.: 1 l (1:10 in hexane); Split Ratio: 1:50 (250 C) T. Progr.: 50 C to 250 C at 3.0 C/min P. Progr.: 53 kPa at linear velocity constant Carrier: H2;u: 36.2 cm/s; Detector: FID (250 C) H2: 50 mL/min, Air: 400 mL/min, Make-up: 50 mL/min kPa (N2) Sampling Rate: 40 msec; Filter Time Constant: 200 msec

Aplicao:
Butter FAMEs Fastest Analysis
uV 110e3 100e3 90e3 80e3 70e3 60e3 50e3 40e3 30e3

by Prof. Mondello, Messina

Run time: 2

1 5 min

2 2

2 9

3 0

Speed gain: 16.5

1 7 5 10 2 1 1 3 2 111 1 2 1 6 1 9 2 5 62 23 8 1 4 8 1.25 1.50 1.75 3 3 3 3 5 6
min

20e3 10e3 0e3

2
0.25

4
0.50

6
0.75

8 9
1.00

U L T R A F A S T
2.0

0.0

Column: Rtx Wax 10 m x 0.10 mm i.d. 0.10 m film Inj. Vol.: 0.2 l (1:20 in hexane); Split Ratio: 1:200 (250 C) T. Progr.: 50 C to 250 C at 90.0 C/min P. Progr.: 400 kPa at linear velocity constant Carrier: H2;u: 116.0 cm/s; Detector: FID (250 C) H2: 50 mL/min, Air: 400 mL/min, Make-up: 50 mL/min kPa (N2) Sampling Rate: 4 msec; Filter Time Constant: 50 msec

Aplicao: Aromas e Fragrncias

Anlise de leos Essenciais
uV 40000 Chromatogram

35000

30000

25000

20000

15000

10000

Column: Rtx-5MS 30 m x 0.25 mm i.d. 0.25 m film Inj. Vol.: 1l (1:5 in hexane); Split CONVENTIONAL Ratio: 1:50 (300 C) T. Progr.: 50 C to 250 C at 3.0 C/min P. 43.0 min. Progr.: 52.7 kPa at linear velocity constant Carrier: H2;u: 36.0 cm/s; Detector: FID (300 C) H2: 50 mL/min, Air: 400 mL/min, Make-up: 50 mL/min kPa (N2) Sampling Rate: 40 msec; Filter Time Constant: 200 msec

Bergamot

5000 0 5
uV 55000 50000 45000 40000 35000 30000 25000 20000 15000 10000 5000 0 0.25 0.50 0.75 1.00 1.25 1.50 1.75 2.00 2.25 2.50 2.75 3.00 min Chromatogram

10

15

20

25

30

35

40

min

FASTEST

3.2 min.

Column: Rtx-5MS 10 m x 0.1 mm i.d. 0.1 m film Inj. Vol.: 0.4 l (1:5 in hexane); Split Ratio: 1:400 (300 C) T. Progr.: 40 C to 300 C at 50.0 C/min P. Progr.: 265.3 kPa at linear velocity constant Carrier: H2;u: 81.5 cm/s; Detector: FID (350 C) H2: 50 mL/min, Air: 400 mL/min, Make-up: 50 mL/min kPa (N2) Sampling Rate: 4 msec; Filter Time Constant: 50 msec

INSTRUMENTAO Temperatura da Coluna

TEMPERATURA DA COLUNA

CONTROLE CONFIVEL DA TEMPERATURA DA COLUNA ESSENCIAL PARA OBTER BOA SEPARAO EM CG

INSTRUMENTAO
Forno da Coluna
Caractersticas Desejveis de um Forno:
AMPLA FAIXA DE TEMPERATURA DE USO Pelo menos de Tambiente at 400oC. Sistemas criognicos (T < Tambiente) podem ser necessrios em casos especiais.

TEMPERATURA INDEPENDENTE DOS DEMAIS MDULOS No deve ser afetado pela temperatura do injetor e detector.

TEMPERATURA UNIFORME EM SEU INTERIOR Sistemas de ventilao interna muito eficientes para manter a temperatura homognea em todo forno.

INSTRUMENTAO
Forno da Coluna
Caractersticas Desejveis de um Forno:
FCIL ACESSO COLUNA A operao de troca de coluna pode ser freqente. AQUECIMENTO E ESFRIAMENTO RPIDO Importante tanto em anlises de rotina e durante o desenvolvimento de metodologias analticas novas. TEMPERATURA ESTVEL E REPRODUTVEL A temperatura deve ser mantida com exatido e preciso de 0,1C.

Em cromatgrafos modernos (depois de 1980), o controle de temperatura do forno totalmente operado por microprocessadores.

INSTRUMENTAO Programao Linear de Temperatura

Misturas complexas (constituintes com volatilidades muito diferentes) separadas ISOTERMICAMENTE:

TCOL BAIXA:
- Componentes mais volteis so separados - Componentes menos volteis demoram a eluir, saindo como picos mal definidos

TCOL ALTA:
- Componentes mais volteis no so separados - Componentes menos volteis eluem mais rapidamente

INSTRUMENTAO
Detectores
Dispositivos que examinam continuamente o material eluido, gerando sinal quando da passagem de substncias que no o gs de arraste

Grfico Sinal x Tempo = CROMATOGRAMA Idealmente: cada substncia separada aparece como um PICO no cromatograma.

INSTRUMENTAO
Detectores
Mais Importantes:
DETECTOR POR CONDUTIVIDADE TRMICA (DCT OU TCD) Variao da condutividade trmica do gs de arraste. DETECTOR POR IONIZAO EM CHAMA (DIC OU FID) ons gerados durante a queima dos eluatos em uma chama de H2 + ar. DETECTOR POR CAPTURA DE ELTRONS (DCE OU ECD) Supresso de corrente causada pela absoro de eltrons por eluatos altamente eletroflicos. REGISTRO DE SINAL
ANALGICO Registradores XY DIGITAL Integradores Computadores

DETECTORES Definies Gerais

Dispositivos que geram um sinal eltrico proporcional quantidade eluida de um analito ~ 60 detectores j usados em CG ~ 15 equipam cromatgrafos comerciais 4 respondem pela maior parte das aplicaes

DCT TCD
Detector por Condutividade Trmica

DIC FID
Detector por Ionizao em Chama

DCE ECD
Detector por Captura de Eletrons

EM MS
Detector Espectromtrico de Massas

DETECTORES Parmetros Bsicos de Desempenho

QUANTIDADE MNIMA DETECTVEL Massa de um analito que gera um pico com altura igual a trs vezes o nvel de rudo

SINAL (S)

S N

=3
RUDO (N)

RUDO Qualquer componente do sinal gerado pelo detector que no se origina da amostra
Contaminantes nos gases Impurezas acumuladas no detector Aterramento eltrico deficiente

Fontes de Rudo

DETECTORES Classificao
UNIVERSAIS: Geram sinal para qualquer substncia eluida.

SELETIVOS: Detectam apenas substncias com determinada propriedade fsico-qumica.

ESPECFICOS: Detectam substncias que possuam determinado elemento ou grupo funcional em suas estruturas

DETECTORES Detector por Condutividade Trmica

PRINCPIO Variao na condutividade trmica do gs quando da eluio de um analito.
A taxa de transferncia de calor entre um corpo quente e um corpo frio depende da condutividade trmica do gs no espao que os separa

Se a condutividade trmica do gs diminui, a quantidade de calor transferido tambm diminui - o corpo quente se aquece.

i
5

Cela de Deteco do DCT:

1 Bloco metlico (ao) 2 Entrada de gs de arraste

3 4

3 Sada de gs de arraste 4 Filamento metlico (liga W-Re) aquecido

5 Alimentao de corrente eltrica para aquecimento do filamento

DETECTORES Detector por Condutividade Trmica

Configurao tradicional do DCT: bloco metlico com quatro celas interligadas em par por duas passa o efluente da coluna e por duas, gs de arraste puro:
CELAS DA AMOSTRA CELAS DA AMOSTRA CELAS DE REFERNCIA

CORTE SUPERIOR

CORTE LATERAL

CELAS DE REFERNCIA

Quando da eluio de um composto com condutividade trmica menor que a do gs de arraste puro:
Filamentos nas celas de amostra se aquecem Resistncia eltrica dos filamentos nas celas de amostra aumenta

Filamentos nas celas de referncia no se aquecem

Resistncia eltrica dos filamentos nas celas de referncia fica constante

Diferena de resistncia eltrica entre os filamentos de amostra e referncia

DETECTORES Detector por Condutividade Trmica

Os filamentos do DCT so montados numa ponte de Wheatstone que transforma a diferena de resistncia quando da eluio de amostra numa diferena de voltagem:

V Fonte de CC / Bateria (18 V a 36 V, tpico) F Ajuste da corrente nos filamentos I Medida da corrente nos filamentos (100 mA - 200 mA, tpico) B1 B2 Balanceamento / ajuste de zero R1 R2 Filamentos das celas de referncia A1 A2 Filamentos das celas de amostra

DETECTORES Caractersticas Operacionais do DCT

SELETIVIDADE Observa-se sinal para qualquer substncia eluida diferente do gs de arraste = UNIVERSAL SENSIBILIDADE / LINEARIDADE Dependendo da configurao particular e do analito: QMD = 0,4 ng a 1 ng com linearidade de 104 (ng - dezenas de g) VAZO DE GS DE ARRASTE O sinal proporcional concentrao do analito no gs de arraste que passa pela cela de amostra.

Fc = 0
VAZO DE GS DE ARRASTE CONSTANTE DURANTE A ELUIO VARIAO DA VAZO DE GS DE ARRASTE DURANTE A ELUIO

Com DCT, a rea dos picos cromatogrficos MUITO dependente da vazo do gs de arraste !!!

DETECTORES Caractersticas Operacionais do DCT

TEMPERATURAS DE OPERAO Quanto maior a diferena entre a temperatura dos filamentos e do bloco metlico maior a resposta.
Temperatura do filamento, TF: entre 300oC e 350oC. funo da corrente de alimentao dos filamentos, i.

TF
Limitaes:

Sinal

- Correntes excessivas podem fundir o filamento ( tpicos do filamento = 20 m) - Diminuio do tempo de vida til dos filamentos (oxidao por traos de O2 no gs de arraste) Temperatura do bloco, TB: mantida to baixa quanto possvel

TB

Sinal

Limitao: - Temperaturas excessivamente baixas podem provocar a condensao de analitos nas celas (erros analticos, danos aos filamentos)

DETECTORES DCT: Aplicaes

1 Separao e quantificao de compostos que no geram sinal em outros
detectores (gases nobres, gases fixos)

Separao de Gases Fixos e Hidrocarbonetos:

Coluna: CP Sil 5CB (50 m x 0.32 mm x 5 m) Gs de Arraste: He @ 3 ml.min-1 TCOL: 40C Detector: DCT 1 N2 3 CO2 5 NH3 7 i-C4 2 CH4 4 n-C2 6 n-C3 8 n-C4

2 Por ser um detector no-destrutivo, pode ser usado em CG preparativa ou

deteco seqencial com dois detectores em tandem

DETECTORES Detector por Ionizao em Chama

PRINCPIO Formao de ons quando um composto queimado em uma chama de hidrognio e oxignio

O efluente da coluna misturado com H2 e O2 e queimado. Como numa chama de H2 + O2 no existem ons, ela no conduz corrente eltrica.

Quando um composto orgnico elui, ele tambm queimado. Como na sua queima so formados ons, a chama passa a conduzir corrente eltrica

DETECTORES Detector por Ionizao em Chama

COLETOR

AR
FLAME TIP

H2
BLOCO

COLUNA
O ar e o H2 difundem para o interior do coletor, onde se misturam ao efluente da coluna e queimam: Uma diferena de potencial eltrico aplicada entre o flame tip e o coletor quando se formam ons na chama, flue uma corrente eltrica:

DETECTORES Detector por Ionizao em Chama

Qumica da Chama de Hidrognio: Incandescncia

Estrutura da chama trs regies bsicas

Reao Quebra

Regio de quebra Mistura dos gases, pr-aquecimento, incio da quebra das molculas de H2, O2 e dos analitos. Zona de reao Reaes exotrmicas com produo e/ou consumo de radicais H, O, OH, HO2 (provenientes do H2), CH e C2 (proveniente do analito) e ons CHO+ (analito). Zona de incandescncia Emisso de luz por decaimento de espcies excitadas: OH (luz UV), CH e C2 (visvel).

Queima de substncias com ligaes C-H Queima de H2

1 on formado a cada ~10 tomos de C queimados

+ + eCH + O CHO 5

Formam-se apenas radicais !!!

DETECTORES Caractersticas Operacionais do DIC

SELETIVIDADE Seletivo para substncias que contm ligaes C-H em sua estrutura qumica.
(como virtualmente todas as substncias analizveis por CG so orgnicas, na prtica o DIC UNIVERSAL)

Compostos que NO produzem resposta no DIC:

Gases nobres H2, O2, N2 CO, CO2, CS2 CCl4, peralogenados NH3, NxOy SiX4 (X = halognio) H2 O HCOOH, HCHO *

DIC

CH4 CO2 O2 N2

DCT

DETECTORES Caractersticas Operacionais do DIC

VAZES DE GASES Alm do gs de arraste, as vazes de alimentao de ar (comburente) e hidrognio (combustvel) devem ser otimizadas. Grficos Sinal x Vazo de Gases tpicos:

SINAL

AR

H2

150

300

450

600

15

30

45

60

O sinal se mantm aproximadamente constante em uma larga faixa de vazes de ar e H2

VARIAES NAS VAZES DE AR E H2 AFETAM APENAS MARGINALMENTE O SINAL = MAIORES REPRODUTIBILIDADE E REPETIBILIDADE

DETECTORES Detector por Captura de Eltrons

PRINCPIO Supresso de um fluxo de eltrons lentos (termais) causada pela sua absoro por espcies eletroflicas Um fluxo contnuo de eletrons lentos estabelecido entre um ando (fonte radioativa -emissora) e um catodo.

Na passagem de uma substncia eletroflica alguns eltrons so absorvidos, resultando uma supresso de corrente eltrica.

DETECTORES Detector por Captura de Eletrons 2 1

3 4 5 1 Ando (fonte radioativa - emissora) 2 Sada de gases 3 Catodo 4 Cavidade 5 Coluna cromatogrfica

DETECTORES Detector por Captura de Eletrons

Mecanismo de Captura de Eletrons
1 Gerao de eletrons lentos pela interao entre a radiao molculas do gs de arraste G e molculas de bloqueador (quencher) Q

+ G G + + e + e* energia + G G* + Q G + e + Q energia
2 Eletrons lentos so capturados pela espcie eletroflica AB

AB + e AB + energia
O decrscimo na corrente eltrica fluindo pela cela de deteco proporcional concentrao a da espcie absorvente no gs de arraste
Ib corrente de repouso Ie corrente na eluio do analito K constante de captura

DETECTORES Caractersticas Operacionais do DCE

FONTE RADIOATIVA O ando deve estar dopado com um istopo radioativo - ou - emissor

Emprego universal em DCE comerciais: 3H ( -, 0,02 MeV) 63Ni ( -, 0,06 MeV)

Sob a forma de Ta3H3 Maior sensibilidade Tdet deve ser < 225oC
- Maior durabilidade
63Ni

Usado como 63Ni 0 Maior linearidade til at ~400oC

preferido em equipamentos modernos

- Maior estabilidade trmica - Menor risco de uso (radioatividade)

85Kr, 90Sr, 99Tc, 147Pm, 241Am, 226Ra

Raramente usados:

DETECTORES Caractersticas Operacionais do DCE

POLARIZAO DOS ELETRODOS Vrios modos de polarizao possveis VOLTAGEM CONSTANTE Pouco usada modernamente - picos cromatogrficos podem ser deformados. VOLTAGEM PULSADA Menos anomalias eltricas: maior sensibilidade e linearidade. TEMPERATURA DO DETECTOR Dependncia do sinal com temperatura de operao bastante significativa

Variao de 3oC na temperatura Erro de ~ 10% na rea dos picos

Magnitude e sinal do erro depende do composto analisado !
TEMPERATURA DO DCE DEVE SER RIGIDAMENTE CONTROLADA

DETECTORES Caractersticas Operacionais do DCE

GS DE ARRASTE Funcionamento do DCE muito dependente da natureza do gs de arraste

MAIS USADOS:

N2 Ar + 5% CH4

Geram eltrons lentos quando bombardeados com -

O gs deve ser o mais puro possvel !!! (traos de H2O e O2 comprometem o sinal do DCE)

Adsoro de contaminantes sobre os eletrodos causa deformao nos picos

DETECTORES DCE: Aplicaes

Contaminantes em ar atmosfrico - deteco paralela DIC + DCE

DIC

DCE

1, 2, 3 - Hidrocarbonetos aromticos

4, 5, 6 - Hidrocarbonetos clorados

Tipos de Injeo - Lquida

Maioria das amostras introduzidas no GC so lquidas Microseringa normalmente usada para injeo de amostras lquidas Capacidade da seringa: normalmente 10 microlitros Formato da agulha:

Amostragem Headspace (HS)

Extrao de compostos orgnicos volteis e semivolteis presentes na matriz lquida ou slida, por ex. VOCs na gua, solventes residuais no material de embalagem, fragrncias em alimentos, etc. Como funciona:
Equilbrio Incubao

1. Incubao da amostra

2. Equilbrio termodinmico. Concentrao dos analitos na fase vapor representativo quele presente na amostra original

3. Um volume fico de vapor amostrado e introduzido para dentro do GC

Amostragem SPME
Dessoro Adsoro

Fibra de slica fundida revestida com material adsortivo exposta a amostra num vial selado.

Analitos so adsorvidos no material de revestimento da fibra, tanto da soluo ou do headspace.

Analitos so termicamente dessorvidos da fibra e entra no GC

Injeo de Amostra Automatizada

Shimadzu Auto-injetor / Autoamostrador: AOC-20i e AOC-20s Injeo de amostras lquidas AOC-5000 Injeo Lquida Injeo/amostragem de Headspace Injeo/amostragem de SPME

 Obrigado pela ateno!!!