Compartimentosintracelulares e Trfegodeprotenas

Ncleo RetculoEndoplasmtico AparelhodeGolgi Lisossoma Peroxissoma Mitocndria Trfegointracelulardeprotenas

Compartimentosintracelulares Organelos daclulaeucaritica

Compartimentosintracelulares e Trfegodeprotenas

Ncleo

NCLEO Ultraestrutura
Oncleo oorganelomaisvolumosodaclulaeservedeabrigoaogenoma tornandoseassimo centrodecontrolodaclula.NoncleoocorreareplicaodoDNA,atranscrioeoprocessamento doRNA,enquantoqueafasefinaldaexpressogentica(i.e.traduo)ocorrenocitoplasma.
cromatina
invlucro nuclear membrana citoplasmtica

RE nuclolo

NCLEO DNA transcrio RNA

centrossoma filamentos intermdios poro nuclear memb.externa memb.interna microtbulo

splicing

transporte doRNA ribossomas traduo protenas

Laminanuclear invlucro nuclear

CITOSOL

NCLEO Ultraestrutura Invlucronuclear

Oinvlucronuclearseparaonucleoplasma (substnciaamorfadenatureza proteicaquepreenchaamatriznuclear)docitoplasma. constitudoporduasbiomembranas (membranaexternaemembranainterna) quedelimitamumespaoperinuclear quevariacomoestadofisiolgicodaclula. membrananuclearexternaestoassociadosribossomas queoriginamuma certacontinuidade entreestamembranaeoRER,oqueservedebasepara admitirqueasmembranasdoREseoriginamapartirdamembrananuclear externa. Oinvlucronuclearno umaestruturacontnuaumavezqueh pontosde descontinuidade(porosnucleares)quecorrespondemazonasdecontacto entreasduasmembranasnucleares.

NCLEO Ultraestrutura Invlucronuclear membrana nuclearexterna invlucro nuclear membrana nuclear externa membranadoRE lmendoRE

espao perinuclear

poro nuclear

lamina nuclear

NCLEO Ultraestrutura Invlucronuclearelminanuclear Associada membrananuclearinterna,existeumaestruturafibrosadensa: lminanuclear queservedesuportemecnicoaoncleo.

LminanuclearobservadaemTEM

NCLEO Ultraestrutura Organizaointerna

Oncleotemumaestruturainternaqueorganizaomaterialgenticoelocalizaasfunes nuclearesemzonasdiscretas. Soexemplosdestaorganizao:onuclolo (localdetranscriodosgenesderRNAsedesntese deribossomas),aorganizaodoscromossomas,alocalizaoemdomniosdistintosdasfunesde replicaodoDNA edeprocessamentodoprmRNA.

invlucro nuclear poro nuclear lmina nuclear heterocromatina eucromatina

NCLEO Ultraestrutura Organizaointerna

Noncleodoseucariotas,oDNAencontraseassociadoaprotenas(histonas), constituindoacromatina. Duranteainterfase,acromatina dispersaenocondensadachamandoseeucromatina. H noentantoumapartedacromatina quesemantmcondensadachamandoseheterocromatina. Estaencontraseinactivaemtermosdetranscrio.

invlucro nuclear poro nuclear lmina nuclear heterocromatina eucromatina

NCLEO Ultraestrutura Complexoporonuclear(NPC)

Ocomplexoporo nuclear constitudoporcanaisde10 nm de dimetro quepermitemotransito depequenasmolculas,iesemacromolculas (protenaseRNAs)entreoncleoeocitoplasma. Osporosnuclearesnosoestruturasestticas,estandooseunmero easualocalizao directamenterelacionadoscomaactividadefisiolgicadaclula:elesabremefechamondeequando soounosonecessrios.

Tcnicadecrifractura

NCLEO Transporteatravsdosporosnucleares

Consoanteoseutamanho,asmolculas penetramocomplexoporoatravsde2 mecanismos: 1 difusopassiva: parapequenasmolculas (menos20kDa)enas2direces. 2 transporteactivo: paramacromolculas (RNAs, protenas,ribonucleoprotenas).Nestecaso,os canaisdocomplexodoporoabremseeoseu dimetroatingeos40nm.Tratasedeum transporteselectivoeregulado:asprotenasso importadasdocitoplasmaparaoncleo,enquanto queosRNAs soselectivamenteexportadosdo ncleoparaocitoplasma.

Difusopassiva

Transporte activo

NCLEO

Nuclolo aestruturamaisproeminentedoncleo olocaldetranscrioeprocessamentodosrRNAsedemontagemdosribossomas mudadetamanhoconsoanteaactividadedesnteseproteicadaclula Oribossoma formadoporrRNAsassociadosaprotenasribossomais Osribossomasdoseucariotascontm4tiposdeRNAs:rRNAs5S,5.8S,18Se28S. Osribossomascatalisamasnteseproteicanosprocariotaseeucariotas.

NCLEO

Nuclolo Osribossomasdosprocariotas(70S)edoseucariotas(80S)consistemnumasubunidade maiorenumasubunidademenor,ambasformadasporrRNAseprotenasribossomais. 70S 80S

50S

30S

60S

40S

Compartimentosintracelulares e Trfegodeprotenas
RetculoEndoplasmtico

REL

RER

ribossomas

mitocndria

RETCULOENDOPLASMTICO Ultraestrutura efunes

Oretculoendoplasmtico(RE) umcomplexomembranar decisternas,canais,vesculas, vacolos,geralmenteanastomosados. OREnoseuconjunto rodeadoporumaextensssimamembranacontnuaquedelimitaum interiorcomum:olmen. AmembranadoREest emcontinuidadecomamembranaexternadoncleo. Ultraestruturalmente,distinguesedoistiposfuncionaisdeRE: RetculoEndoplasmtico Rugoso(RER)apresentaribossomasaderentes suaface citoslica e implicadonasnteseeprocessamentodasprotenas. RetculoEndoplasmtico Liso(REL)noapresentaribossomas suasuperfciee implicadonasntesedoslpidos. Noentanto,existeumacontinuidadefsicaefuncionalentreoREReREL.

RETCULOENDOPLASMTICO Ultraestrutura efunes Otipoderetculoeasuaquantidadeporclulavariamentreosdiferentestipos celularesedeacordocomaactividadedesntesedaclula. RErugoso REliso

lmen Aspectoultraestrutural doRER

RETCULOENDOPLASMTICO REesecreodeprotenas As protenas sintetizadas no RE so destinadas ao Golgi, lisossomas, membrana celulare secreo.
SECREO

RER

GOLGI

VESCULAS

MEMBRANACELULAR LISOSSOMAS

Protena marcada

Vesculasde secreo Golgi

RER

RETCULOENDOPLASMTICO ModificaesdasprotenasnoRE
Muitasprotenassofremalteraesestruturais antesdeadquirirasuafuno. Estasmodificaesdependemdalocalizaofinaldaprotenaactiva. AsprotenasdestinadasaoRE,lisossomas ou secreo sofremmodificaes especficas: aquisiodaestruturatridimensional(Folding) formaodecomplexosmultimricos formaodepontesdissulfureto glicosilao

RETCULOENDOPLASMTICO Glicosilao deprotenasnoRE

DepoisdeincorporadasnolmendoRE, asprotenassofremaadiodeum oligossacardeo. Osoligossacardeos maiscomunsso constitudospor: 2resduosdeNacetilglucosamina (GlcNAc), 9demanose 3deglucose Estesoligossacardeos ligamse,atravsde GlcNAc,aogrupoNH2 deumresduode asparagina daprotena. (asparagina)

Nacetilgluco samina

Manose

Glucose

RETCULOENDOPLASMTICO RetculoEndoplasmtico lisoesntesedelpidos

Amaioriadoslpidos demembrana(fosfolpidos ecolesterol)sosintetizadosnoREL. Ofosfolpido maisabundante afosfatidilcolina. Asntesedefosfolpidos derivadosdoglicerol fazseem3etapaspartindosede 2molculasdecidosgordos,1deglicerofosfato eoutradecabeapolar (exemplo:colina): Asenzimasdestasreacesencontramsenafacecitoslica doREeutilizamprecursores dadospelocitoplasma.

RETCULOENDOPLASMTICO RetculoEndoplasmtico lisoesntesedelpidos

1 aacil transferase associaos2cidosgordosaoglicerofosfato originandoocido fosfatdico.2 esteservedesubstrato fosfatase,formandose1molculade diacilglicerol.3 estaassociasefinalmentea1molculadefosfocolina,soba acodecolinafosfotransferase,formandose1molculadefosfatidilcolina.

(cidofosfatdico)

(diacilglicerol)

(fosfatidilcolina)

RETCULOENDOPLASMTICO RetculoEndoplasmtico lisoesntesedelpidos

Translocadores de fosfolpidos (flipases) transportamlpidos de umacamadalipdica paraoutra.

Flipase

Flipase

RETCULOENDOPLASMTICO RetculoEndoplasmtico lisoesntesedelpidos Trfegointracelulardefosfolpidos

Protena marcada Vesculasde secreo

Golgi

RER

RETCULOENDOPLASMTICO RetculoEndoplasmtico lisoesntesedelpidos Protenasdetrocadefosfolpidos ajudamatransportarfosfolpidos doREparaas membranasdamitocndrias eperoxissomas.

Compartimentosintracelulares e Trfegodeprotenas

ComplexodeGolgi

COMPLEXODEGOLGI Ultraestrutura efunes

OcomplexodeGolgi(oudictiossoma) constitudoporumconjuntodesculos achatados dispostosparalelamenteunsaosoutrosformandoumaespciedepilhadepratos.Nointerior delimitamumacavidade:olmen. OGolgiest intimamenteassociadoaoretculoendoplasmtico. invlucro nuclear RER vesculas doGolgi facecis deGolgi vacolos doGolgi Aspectoultraestrutural deGolgi

COMPLEXODEGOLGI Ultraestrutura efunes

Naperiferiadascisternasexistemvesculasouvacolosgolgianos,quesedifundempelo citoplasmatransportandosubstnciassintetizadas/modificadasno Golgiparaoslisossomas, membranacelular ouparaasecreo.

invlucro nuclear RER

vesculas doGolgi facecis deGolgi vacolos doGolgi Aspectoultraestrutural deGolgi

COMPLEXODEGOLGI Compartimentaomorfolgicaefuncional OGolgi umaestruturapolarizada.AsprotenasdoREentramnoGolgipelafacecis, transitamnocompartimentomediano esaempelafacetrans. facecis Vescula golgiana

Golgicis

Golgi mediano Golgi trans Vescula desecreo facetrans

COMPLEXODEGOLGI Compartimentaomorfolgicaefuncional
medidaqueatravessamestescompartimentos,asprotenasvosendomodificadaspara depoisseremtransportadasparaosseusdestinosnaclula. Assim,afacecis afacedeformaodenovascisternasporfusodasvesculasdoRE. Afacetrans afacedematuraoondeascisternassedesintegramemvesculas.

facecis Golgicis Vescula golgiana

Golgi mediano Golgi trans Vescula desecreo facetrans

COMPLEXODEGOLGI FunesdocomplexodeGolgi Glicosilao deprotenasedelpidos (formaode glicoprotenas eglicolpidos) Secreocelular Formaodoslisossomas Sntesedaporoglucdica dosproteoglicanos Participaonometabolismodoslpidos Sulfatao devriasbiomolculas Biognese erecuperaodemembranas Regulaodoteorhdricodaclula(porformaodevesculasqueacumulam guaeaexpelemparaoexteriordaclula). Nasclulasvegetais:sntesedoscomponentesdamatrizdaparedecelular

COMPLEXODEGOLGI Glicosilao deprotenasnolmendeGolgi

Aglicosilao deprotenasiniciadanoRERcontinuanolmendeGolgi.Aglicosilao destas protenas diferenteconsoanteoseudestinofinalnaclula: 1.Seforemparaamembranacitoplasmtica ouparaasecreo,asglicoprotenas sotransformadas emoligossacardeos complexos. 2.Seforemparaoslisossomas,asglicoprotenas adquiremapenasogrupofosfato.Oterminal manose 6fosfatoqueseformanestasprotenas extremamenteimportanteparaoseudestinopara oslisossomas.

Oligossacardeo tipocomplexo

COMPLEXODEGOLGI TransportedeprotenasapartirdocomplexodeGolgi
Asprotenassotransportadasdaregiotrans deGolgi,dentrodevesculasparaoseudesIno final: 1.Naausnciadesinaisespecficosinternos,asprotenassotransportadasparaasuperfciecelular(membrana celularoumatrizextracelular)atravsdasecreoconstitutiva. Exemplos:formaodeglicoclice,produodeanticorpospelosplasmcitos 2.Outrasprotenassodestinadasaoslisossomasou secreoregulada. Exemplos:produodehormonaspelasclulasendcrinasoudeneurotransmissores pelosneurnios Misturadeprotenas Triagem Lisossomas

Receptorde manose 6fosfato Secreo constitutiva Fluxoparao Espaoextracelular

Secreoregulada

Compartimentosintracelulares e Trfegodeprotenas

Lisossoma

LISOSSOMA Ultraestrutura efuno

Oslisossomassodefinidoscomovesculas delimitadasporumamembrana,eimplicados noprocessodedigestointracelular. Oslisossomascontmvriasenzimashidrolticas (hidrolases cidas)quesoactivasemmeiocido (pH~5)enoapHneutrodocitosol. Estasenzimassocapazesdehirolisar protenas, DNA,RNA,polissacardeos elpidos. OpHdamatrizlisossomal mantidocidopela bombadeprotesqueutilizaaenergiadoATP parabombearosH+docitosol paradentro.

LISOSSOMA Ultraestrutura efuno

Ultraestruturalmente,oslisossomassoorganelosheterogneos,podendoapresentaruma diversidademorfolgicaquereflecteasvariaesnaquan;a enaturezadomaterialingerido. possveldistinguir3tiposdelisossomas: 1.Lisossomas primrios:deaspectohomogneo,solisossomasrecemformados contendoas hidrolases masaindasemmaterialingerido 2.Lisossomas secundrios:heterogneos,comhidrolases ematerialemdegradao 3.Lisossomas secundrioscomcorposresiduais:acumulammaterialincompletamentedegradado

Lisossomas emMET

Lisossomas demacrfago

LISOSSOMA Biognese

Aformaodoslisossomasimplicaaviade secreo eaviadeendocitose: 1.Omaterialextracelular interiorizadopor vesculasendocticas queseformamapartirda membranaefundemcomosendossomas precoces. 2.Amaturaodosendossomas precocesem endossomas tardios passapeladiminuiodo pH interno(3a6),oquepermiteaaquisio dashidrolases cidaslisossomais apartirda redetrans deGolgieasubsequentematurao dosendossomas tardiosemlisossomas secundrios.

LISOSSOMA
Transportedashidrolases cidasparaolisossoma epapeldoreceptordamanose 6fosfato
Asenzimaslisossomais soglicoprotenas cujosoligossacardeos possuemresduosdemanose6fosfato quesoreconhecidospeloreceptordeM6Fnaredetrans deGolgi.EstasenzimassosintetizadasnoRERe passamparaocomplexodeGolgi,ondeosresduosdemanose sofremfosforilao,nafacecis doGolgi. Apartirdaredetrans doGolgi,ocomplexoreceptorM6F transportadodentrodevesculasrevestidaspor clatrina at aosendossomas tardios.Nestecompartimento,devidoaopHcido,ashidrolases dissociamsedo receptor. Posteriormente,osreceptoresregressamaoGolgiparareutilizao.Ashidrolases sofremdesfosforilao no lmendosendossomas tardiosque, medidaqueadquiremmaisenzimas,setransformamemlisossomas secundrios. precursorde
hidrolase lisossomal doRE adiode fosfato manose 6fosfato (M6F) transportemediado porreceptor ligaoao receptordeM6F Remoode fosfato

Franjade clatrina

vesculasde transporte

dissociao pHcido

Reciclagemdos receptores cis deGolgi aparelhodeGolgi trans deGolgi

hidrolase lisossomal activa endossoma tardio

LISOSSOMA Digestointracelular

Almdadegradaodasmolculasinteriorizadasporendocitose,oslisossomasdigeremmaterial dasviasdefagocitoseedeautofagia: 1. Fagocitose:incorporaoedigestodegrandespartculasouclulas(bactrias,clulas envelhecidas,etc.)provenientesdoexteriordaclula,originandoumheterolisossoma.As clulashumanasespecializadasnestafunosoosmacrfagoseosneutrfilos. 2. Autofagia:digestointracelulardeorganeloseestruturasdaprpriaclula.Nestecasoo organelo(p.e.mitocndria) rodeadoporumamembranaderivadadoretculo endoplasmticoeavescularesultante(autofagossoma)fundesecomolisossoma (autolisossoma).Ocontedodoautolisossoma ,ento,digeridopelasenzimaslisossomais.

LISOSSOMA Digestointracelular As3viasdedigestointracelularpeloslisossomas

bactria FAGOCITOSE

fagossoma Membrana citoplasmtica

Endosoma precoce ENDOCITOSE Endolisossoma tardio lisossoma

autofagossoma AUTOFAGIA

Compartimentosintracelulares e Trfegodeprotenas

Peroxissoma

PEROXISSOMA Ultraestrutura

Osperoxissomasso estruturasesfricasouovais (dimetro0,51,5m)rodeadas deumamembrana,queengloba umamatrizperoxissomal electronodensa,ondeporvezes seobserva(dependentedo planodocorte)onucleide com aspectocristalino(cristalide) ouamorfo. Aspectoultraestrutural de peroxissomasdofgadoderato.

PEROXISSOMA Funes Osperoxissomascontmvriasenzimas: 1.Oxidases:intervmemprocessosoxidativos utilizandoooxignio pararemoverohidrogniodedeterminadossubstratos: RH2+O2 R+H2O2 2.Catalase:desdobraoH2O2(perxidodehidrognio)emguae oxignio,oH2O2seriatxicoparaaclulaseacumulado: 2H2O2 2H2O+O2 RH2+H2O2 R +2H2O Nasclulasanimais,osperoxissomassoparticularmenteactivosnofgado erins ondeasreacesoxidativas permitemaeliminaodesubstnciastxicas. Exemplo: atravsdosperoxissomasqueolcoolqueingerimos facilmenteexcretado sobaformadeacetaldedo. CH3CH2OH+H202 CH3CHO+2H20

PEROXISSOMA Funes

Oxidaodoscidosgordos,acompanhadadeproduodeH2O2apartirdeO2, oH2O2 posteriormentedegradadopelacatalase Degradadopelacatalase Oxidaodeaminocidosedocidorico Biossntese decolesterol,cidosbiliares,plasmalognios Nasplantas:cicloglioxlico (sntesedecarbohidratos apartirdoscidosgordos) efotorespirao

PEROXISSOMA Biognese dosperoxissomas Osperoxissomassoestruturassemi autnomas.EmboranotenhamDNAnem ribossomas,derivamdeperoxissomaspr existentes,porumprocessosemelhanteaodas mitocndriaseplastdeos. Asprotenasdosperoxissomassosintetizadas nocitosol eimportadasparaosperoxissomas prexistentes.Estaimportaodeprotenas resultanocrescimentodosperoxissomaspr existentesquesedividememnovos peroxissomas. Asprotenasdestinadasaosperoxissomas possuemumpeptdeo sinal(PTS1ouPTS2)que seligaaseureceptornamembranadoorganelo, permitindoasuatranslocao paraamatriz peroxissomal.
protenasespecficas deimportaode protenas

peroxissoma

crescimentoporimportaode protenasespecficasdocitosol

fisso

novosperoxissomas

Compartimentosintracelulares e Trfegodeprotenas

Mitocndria

MITOCNDRIA Ultraestrutura efuno Emmdiatem12mdecomprimentoe 0,51mdelargura rodeadapor2membranas,umainterna eoutraexterna separadaspeloespao intermembranar. Amembranainternaprojectavriospregos oucristas paraointeriordamitocndria ou matrizmitocondrial.Namatriz,encontrase DNA,ribossomasepequenosgrnulos. Depontodevistafuncional,amembrana interna eamatriz sooscompartimentos maisimportantesdamitocndria.

MITOCNDRIA Ultraestrutura efuno

MATRIZMITOCONDRIAL,contm: enzimasdaoxidaodopiruvato ecidosgordos enzimasdociclodocidoctrico vriascpiasdeDNAmitocondrial ribossomas,tRNAs,enzimasdaexpressogentica MEMBRANAINTERNA: ricaemfosfolpido cardiolipina formavriaspregas(cristas)queaumentam areadasuperfcie contmprotenascom3tiposdefunes: 1.Protenasquerealizamasreacesdeoxidaona cadeiarespiratria; 2.ATPsintetase quesintetizaoATPnamatriz 3.Protenasdetransporteespecficodemetabolitos paradentroouparaforadamatriz impermevel maioriadospequenosies MEMBRANAEXTERNA,contm: umcanalproteico(PORINA)permevelsmolculasde pesomolecularinferiora10000daltons enzimasdemetabolismomitocondrialdelpidos

MITOCNDRIA Ultraestrutura efuno

a principalfontedeenergia sobaformadeATP dasclulaseucariticas atravsdoprocessodefosforilao oxidativa. Importaamaioriadassuasprotenasdocitosol. PossuioseuprprioDNA quecodificaparatRNAs,rRNAseprotenas mitocondriais. Asuabiognese dependedeprotenascodificadasporseugenoma ede protenascodificadaspelogenomanuclear.

MITOCNDRIA Biognese

medidaquecrescemeaumentamdetamanho,asmitocndriasdividemsepor fisso demodosemelhante divisodasbactrias. Asmitocndriasnososintetizadasdenovo;osseusconstituintesdeorigem citoslica soacrescentadosduranteoprocessodecrescimentoediviso.

ReplicaodeDNA

TRFEGOINTRACELULARDEPROTENAS
Osribossomaslivres nocitoplasma sintetizamprotenas destinadasa: ncleo, mitocndria, cloroplastos e peroxissomas. Osribossomas associados membranadoRE sintetizamprotenas destinadasa: lisossomas, membrana citoplasmtica e secreo.
Cytosol

Trfegointracelulardeprotenas Peptdeo Sinal O destino final das protenas produzidas no citosol ou pelo RER determinado porumasequnciapresentenestasprotenaschamadapeptdeo sinal. peptdeo sinal NH2 Outrasprotenassofremmodificaesquedeterminamoseudestino. Porexemplo:manose 6fosfatonasprotenasdestinadasaoslisossomas. COOH

Trfegointracelulardeprotenas

Peptdeo Sinal