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Bioflotacin de barita, calcita y magnesita usando la bacteria Rhodococcus.

opacus como bioreactivo


Casas Botero Ana Elisa1,2, Torem Mauricio Leonardo2, Mesquita Luciana Souza de3 1 Facultad de Ingeniera Qumica Centro Investigaciones en Biotecnologa CIBIOT Universidad Pontifica Bolivariana UPB Medelln Colombia 2 Departamento de Cincia dos Matrias e Metalurgia DCMM Pontifcia Universidade Catlica de Rio de Janeiro Brasil Rua Marques de So Vicente 25 Tel (55) 21 31141234 E mail: anaelisa@dcmm.puc-rio.br
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Agncia Nacional do Petrleo lmesquita@anp.gov.br

Resumen: El empleo de microorganismos en la operacin de flotacin es llamado Bioflotacin y depende de la afinidad que presentan los grupos funcionales de la pared bacteriana con la superficie de los minerales. En esta tcnica, el microorganismo es llamado bioreactivo y debe ser capaz de modificar las propiedades superficiales del mineral para su posterior separacin. Este trabajo presenta los resultados obtenidos en los experimentos de adhesin e bioflotacin de barita, calcita y magnesita, utilizando la bacteria Rhodococcus opacus como agente modificador de las superficies minerales. Los minerales puros de barita, calcita y magnesita fueron obtenidos, y clasificados por tamao para su posterior uso. La cepa de R. opacus fue obtenida en el instituto Andr Tosselo. Las clulas de R. opacus fueron cultivadas en un medio SM por 48 horas en agitador orbital. Se determino la curva de crecimiento del microorganismo. Fueron realizadas medidas de potencial zeta de los minerales as como del R. opacus para establecer su comportamiento en funcin del pH y establecer la carga el punto isoelctrico. Ensayos de adsorcin de las clulas sobre los minerales fueron realizados contando el nmero de clulas adheridas encontrndose una fuerte interaccin en el intervalo de pH donde hay atraccin electrosttica entre el microorganismo y en mineral. Los resultados fueron ratificados con las pruebas de flotacin en tubo Hallimond modificado. Los resultados obtenidos muestran la posibilidad de utilizacin

de R. opacus como biorectivo en la flotacin y su potencial utilizacin en la separacin mineral. Palabras claves: Bioflotacin, Bioreactivo, R. opacus, barita, calcita, magnesita

1. Introduccin:

La operacin de flotacin es una tcnica empleada tradicionalmente para la separacin de minerales, ha sido usada en casi todos los minerales de tipo sulfitos y es

ampliamente usada en minerales metlicos no sulfatados as como en minerales industriales y en el procesamiento de carbn. (Kelly e Spotiswood, 1982). En los ltimos aos ha sido usada para el reciclaje de papel y plstico as como en el tratamiento de efluentes industriales (Torem e Casquiera, 2003). La tcnica de flotacin esta basada en la diferencia entre las propiedades superficiales de los minerales y emplea de diferentes tipos de reactivos que modifican la superficie mineral. Los reactivos convierten esta en una superficie hidrofbica facilitando su posterior separacin por arrastre con gas. Dentro de los reactivos empleados en la flotacin estn los de tipo colectores, los depresores, los modificadores entre otros. Estos compuestos generalmente son costosos y/o de difcil tratamiento por lo que en los ltimos aos las investigaciones en la qumica de la flotacin estn enfocados en la bsqueda de nuevos reactivos que sean baratos y amigables con el medio ambiente (Fuerstenau, 1999). Con el desarrollo de la Biotecnologa, se ha estudiado que algunos microorganismos poseen en las paredes celulares macromolculas tales como polmeros, enzimas y cidos orgnicos. Estos compuestos cumplen con las mismas funciones de los reactivos convencionales usados en la flotacin con la ventaja de que son biodegradables y de fcil produccin (Deo e Natarajan, 1997). La Bioflotacin es entonces el uso de microorganismos como reactivos (colectores, depresores, modificadores) en la tcnica de flotacin mineral. (Sharma, Hunumantha Rao, 2002)

Algunos microorganismos como Bacillus polymixa, Mycobacterium phei, Rhodococcus opacus, Bacillus subtillis, Thiobacillus ferroxidans entre otros; han sido utilizados como depresores, colectores o modificadores, para diferentes sistemas minerales (Namita Natarajam 1999; Dubel Smith Misra, 1999; Mesquita 2000; Zheng, Smith, Arps 2001; Hosseini, et al 2004). En este trabajo se presentan los resultados del estudio de adhesin de la bacteria Rhodococcus opacus sobre la barita calcita y la magnesita y su posible aplicacin para la separacin selectiva de estos minerales mediante la tcnica de flotacin.

2 Materiales y Mtodos

2.1 Cultivo del microorganismo La cepa del microorganismo R. opacus fue obtenida en el instituto Andr Tossello. El microorganismo fue cultivado usando el medio SM consistente en extracto de levadura (4 g/L), Extracto de malta (10 g/L), CaCO3 (2 g/L) y glucosa (4 g/L). El microorganismo fue cultivado a 28C en un shaker rotatiro por 48 h. Las clulas obtenidas fueron centrifugadas y lavadas en una solucin de NaCl 0,01 M. La concentracin de las en solucin clulas fue determinada por el mtodo de peso seco.

2.2 Clasificacin de los minerales Para evitar la contaminacin de los minerales puros de barita, calcita y magnesita, estos fueron molidos separadamente en un mortero de gata, luego se clasificaron de acuerdo a las necesidades de tamao para cada uno de las medidas de potencial zeta (400 mesh), adhesin (200 mesh) y ensayos de flotacin (125 mesh).

2.3 Medidas de potencial Zeta Las medidas de potencial zeta se realizaron usando el equipamiento Zeta Metter 3.0+ System. Para las medidas tanto de los minerales como de la bacteria, se utiliz una concentracin de 100 mg/L Para mantener la fuerza inica de la solucin se emple NaCl 0.01 M. El pH de la solucin fue ajustado con HCL o Na(OH) La suspensin fue agitada en un agitador magntico hasta alcanzar el valor de pH deseado. La suspensin

fue transferida a la celda de electrofresis donde se promedi de valor de 10 medidas de potencial.

2.4 Pruebas de adhesin Se prepar una solucin de 100 g/L de cada uno de los minerales con el valor de pH deseado, se adicion la bacteria R. opacus a una concentracin de 0,1 g/L. Las pruebas de adhesin fueron realizadas en un shaker rotatorio por 30 minutos despus de los cuales la solucin fue centrifugada a 2000 rpm y con el sobrenadante se determin la concentracin de la bacteria antes y despus de la interaccin con el mineral.

2.5 Ensayos de Microflotacin Los ensayos de microflotacin se llevaron a cabo en un tubo Hallimond modificado con 170 mL de capacidad. Se pes 0,8 g de mineral en 170 mL de solucin, se ajusto el pH y se adicion la bacteria R. opacus en una concentracin entre 100 y 350 ppm, se acondicion por 20 minutos. La flotacin se realizo por 10 min con un flujo de aire de 50 mL/min. El material flotado fue secado y pesado.

3. Resultados y Discusin

3.1 Medidas de Potencial Zeta

Para determinar la posibilidad de interaccin entre los minerales y la bacteria, es importante establecer, el comportamiento de la carga para los diferentes valores de pH tanto para la superficie de los minerales como para la bacteria. De acuerdo con los valores de las curvas de potencial zeta, es posible establecer el comportamiento de la superficie como una carga elctrica y establecer el valor de pH donde la carga elctrica es nula (PIE). (Patra, Natarajan; 2003), La Figura 1 muestra los resultados de las curvas de potencial zeta en funcin del pH de los minerales de barita calcita y magnesita y del microorganismo Rhodococcus opacus.

Figura 1. Curva de Potencial Zeta para bartia calcita, magnesita y R. opacus en funcin del pH (0.01 M de NaCl) La bacteria R. opacus tiene un punto isoelctrico alrededor de 3,2, este valor depende de la presencia de los grupos funcionales presentes en la pared de la bacteria, compuesta principalmente de polisacridos, protenas y cido miclico (Van der Wal et al, 1997). Los valores de potencial zeta comienzan a ser mas negativos con el aumento del pH donde los minerales presentan caractersticas positivas El comportamiento de las curvas de potencial zeta en funcin del pH para R. opacus corresponde a lo encontrado por Mesquita el at, 2003. En el caso de los minerales, se observa que el punto isolectrico corresponde a un valor cercano a 7 para barita, 8,5 para magnesita y de 10 para calcita. Estos resultados se confirman con lo reportado por la literatura para barita por Somasudaram y Sivakumar, (1988) para magnesita por Pokrovsky y al (1999) y para calcita por Vdovic y Biscan (1998). Con los resultados de las curvas de potencial zeta para la bacteria y los minerales, se observa que en un intervalo de pH desde 3.2 hasta 7 para barita, 8.2 para magnesita y de 10 para calcita, existe una ventana en la cual se presenta una diferencia de cargas entre

las superficies de la bacteria y los. Se puede esperar que al menos en los intervalos de pH sealados, se presente adhesin de la bacteria R. opacus sobre las superficie de los minerales debido a la atraccin electrosttica entre ellos.

3.2 Experimentos de Adhesin bacteriana

Las pruebas de adhesin de los microorganismos sobre la superficie de los minerales, permite establecer la afinidad que tiene el microorganismo sobre la superficie mineral estudiada. Este tipo de afinidad puede ser de tipo electrosttico por la diferencia de cargas entre la bacteria o el mineral, o puede ser de tipo especfico donde la adhesin puede presentarse por la interaccin entre los grupos funcionales presentes en la pared del microorganismo con el mineral. (Subramiania et al, 2003) La Figura 2 muestra los resultados de las pruebas de adhesin de la bacteria

Rhodococcus opacus sobre los minerales de barita, calcita y magnesita en funcin del pH.

Figura 2. Estudio comparativo de las pruebas de adhesin de R. opacus para calcita, magnesita y en funcin del pH

Los resultados muestran que la bacteria R. opacus tiene mayor capacidad de adsorcin sobre la superficie de magnesita que sobre la barita y calcita para todos los valores de pH probados. Se observa que para la magnesita, existe una mayor a adhesin para valores de pH cercanos al punto isoelctrico de la bacteria (3,2) y la adhesin decrece para valores donde existe una interaccin electrosttica entre las partculas (3,5 8,2) . Esto podra sugerir que la adsorcin de la bacteria sobre el mineral es de tipo especfico. (Mesquita et al, 2003) En el caso de la calcita, para valores de pH cidos (menores que 5) el mineral se solubiliza por lo que no existe superficie sobre la cual se adhiera la bacteria. Los resultados muestran que auque existe menor capacidad de adhesin de la bacteria sobre la calcita, se observa una pequea interaccin en los valores cercanos al PIE del mineral, como lo reportado para la bacteria B. polymixa (Patra e Natarajan, 2003). Para la barita, se observa poca capacidad de adhesin, comparada con lo presentado para la magnesita. Se observa un pequeo aumento en la interaccin para valores de pH mayores a 7, donde no existira atraccin electrosttica entre las cargas, sugiriendo una interaccin de tipo especfico. (Mesquita 2003)

3.3 Ensayos de Microflotacin

Los ensayos de flotacin en tubo Hallimond permiten evaluar la capacidad que tiene la bacteria para modificar las propiedades del mineral y convertir la superficie inicialmente hidroflica, en una hidrofbica. Esta modificacin, permite la separacin del mineral por arrastre con gas. (Misra et al, 1996) De acuerdo con los resultados obtenidos previamente en los ensayos de adhesin y las curvas de potencial, se eligieron los valores de pH donde la bacteria R. opacus podra presentar una mayor interaccin sobre los minerales. La Figura 3 muestra los resultados de las pruebas de adhesin de la bacteria

Rhodococcus opacus para la barita.

Figura 3. Resultados de Flotacin barita en tubo Hallimond Modificado de en ausencia y presencia de la bacteria R. opacus (100 y 350 ppm) Para la barita se observa que solamente para valores de pH cercanos a 7 existe un pequeo aumento en la flotabilidad del mineral, y que al incrementar la concentracin de R. opacus mejora el porcentaje de flotacin. Para estos valores de pH, tanto la carga de la bacteria como la barita son negativas, lo que sugerir que el tipo de interaccin que existe entre el mineral y la bacteria sera de tipo especfico. La Figura 4 muestra los resultados de las pruebas de adhesin de la bacteria

Rhodococcus opacus para la calcita.

Figura 4. Resultados de Flotacin Calcita en tubo Hallimond Modificado de en ausencia y presencia de la bacteria R. opacus (100 y 350 ppm) La calcita es un mineral de tipo hidroflico, el cual presenta una muy baja capacidad de flotabilidad en la ausencia de algn tipo de colector. Los resultados encontrados muestran como la bacteria modifica la superficie del mineral y mejoran la flotabilidad de la calcita, especialmente para valores de pH alrededor de 7, donde existe interaccin electrosttica entra la bacteria y el mineral, de acuerdo a lo encontrado en la curvas de potencia zeta en funcin del pH. La Figura 5 muestra los resultados de las pruebas de adhesin de la bacteria

Rhodococcus opacus para la magnesita.

Figura 5. Resultados de Flotacin Magnesita en tubo Hallimond Modificado de en ausencia y presencia de la bacteria R. opacus (100 y 350 ppm) De acuerdo con los resultados de flotacin para la magnesita, se observa que usando una concentracin de R. opacus de 100 ppm, la magnesita presenta la mayor flotabilidad en presencia de la bacteria, especialmente para los valores de pH de la solucin entre 3 y 7. Es interesante observar tambin que a diferencia de los minerales de barita y calcita, la magnesita presenta una disminucin el la flotabilidad al aumentar la concentracin de R. opacus. Esto puede explicarse por la formacin de micelias con los grupos hidrofobicos de la pared del microorganismo que afectaran la capacidad de la bacteria de modificar la superficie del mineral Este resultado podra sugerir que existe una concentracin critica en la cual al aumentar la concentracin del bioreactivo, disminuye la flotabilidad de la magnesita La Figura 6 muestra los resultados de las pruebas de adhesin de la bacteria

Rhodococcus opacus para la barita, calcita y magnesita.

Figura 6 Estudio comparativo de las pruebas de Flotacin de R. opacus para barita calcita, magnesita y en funcin del pH (100 ppm de R. opacus) Los resultados sugieren que existe una diferencia en la flotabilidad para los diferentes minerales, siendo mucho mayor para la magnesita para los valores de pH alrededor 3, 5 y 7. Estos resultados concuerdan con los resultados encontrados en las pruebas de adhesin, donde se observa mayor afinidad del microorganismo sobre la superficie de la magnesita. Los minerales de calcita y magnesita son del tipo carbonatos y generalmente no pueden ser separados entre si mediante la tcnica de flotacin. Ambos minerales tienen propiedades hidroflicas y no presentan afinidad selectiva por los colectores tradicionales (Gawel et al, 1997). Esto se observa en los bajos valores de flotabilidad del mineral en ausencia de la bacteria. Utilizando la bacteria R. opacus como colector se puede observar que existen diferencias en los % de flotabilidad entre calcita y magnesita y que para valores de pH alrededor de 7, la diferencia entre los dos minerales es mayor. Para altos valores de pH se observa una disminucin en el % de flotabilidad para los tres minerales de acuerdo a lo esperado en las curvas de potencia zeta y las pruebas de adhesin.

4. Conclusiones

Las curvas de potencial zeta para la barita, calcita y magnesita y el microorganismo Rhodococcus. opacus, as como las pruebas de adhesin de la bacteria sobre los tres minerales, sugieren los valores de pH donde podra existir afinidad del R. opacus por la superficie mineral as como el tipo de interaccin que se podra presentar entre las superficies estudiadas. Los estudios de flotacin revelan como la bacteria es capaz de modificar la superficie de los tres minerales siendo mucho mas evidente en el caso de la magnesita. De acuerdo con los resultados encontrados en los estudios de flotacin en tubo Halimond modificado, se observa que la bacteria R. opacus tiene posibilidades para ser utilizada como biocolector en la separacin selectiva entre la calcita y magnesita.

5. Referencias

Dubel J., R. W. Smith, M. Misra And S. Chen.(1992) Microorganisms as chemical reagents: The hematite system Minerals Engineering v 5, No. 3-5, p. 547-556. Fuerstenau (1999) Froth Flotation the First Ninety Years, Advances in Flotation Technology Ed. Parket and J. D.. Miller USA 463p Gawel J., Maliszewska I.. Sadowski Z (1997)The effect of Biopretreatment on the fiotation recovery of magnesite tailings MineraL~ Engineering, Vol, 10, No. 8, pp. 813-824, Hosseini, et al. (2005)Bioflotation of Sarcheshmeh copper ore using Thiobacillus ferroxidans bactria. Minerals Engineering, Volume 18, Issue 3, Pages 371-374. Kelly E.G., Spotiswood D.J.(1982) Introduction to Mineral Processing, John Wiley and Sons, Inc., New York. Mesquita L.M.S.(2000) Bioflotao de Hematita e Quartzo Um Estudo de Seletividade. Tese de Doutorado, PUC-Rio, , 93p Mesquita, Lins F.F., Torem M.L (2003) Interaction of a hydrophobic bacterium strain in a hematitequartz flotation System. International Journal of Mineral Processing., v. 71, p. 31 44.

Misra M, Bukka S. Chen M..(1996) The effect of growth medium of Thiobacillus ferrooxidans on pyrite flotation. Minerals Engineering. v. 9, No. 2, p. 157-168. Namita Deo, Natarajan K.A.(1997). Interactions of Bacillus polymixa with Oxide Minerals with Reference to Mineral Beneficiation and Environmental Control. Minerals Engineering. v 10 No 12 pp 1339 1354. Namita Deo, Natarajan K.A. (1999) Role of Corundum Adapted Strains of Bacillus polymixa in the separation of hematite and alumina. Minerals & Metallurgical Processing.. v. 16 No 4, p. 29 34. Patra P, Natarajan K.A (2003). Mycrobially induced flocculation ande flotation for speration of chalcopyrite from quartz and calcite. International Journal of Mineral Processing, Vol 74, p 143 155. Patra P, Natarajam K.A (2003). Microbially Induced Flocculation and Flotation for Pyrite Separation from Oxide Gangue Minerals. Minerals Engineering. v. 16, p. 965 973. Pokrovsky O, Schott J, Thomas F (1999). Processes at the magnesium-bearing carbonates/solution interface.I. A surface speciation model for magnesite Geochimica et Cosmochimica Acta, Vol. 63, No. 6, p. 863880. Sharma , K. E Hunumantha Rao K (2002). Analysis of different approaches for evaluation of surface energy of microbial cells by contact angle goniometry. Advances in Colloids and Interfaces Science v. 98, p. 341 463. Somasudaram P Sivakubar A. (1988) Advances in understanding Flotation Mechanisms. Minerals and Metallurgical Processing p. 97 104. Subramanian S., Santhiya D. Natarajan K.A.(2003) Surface Modification Studes on Sulfphide Minerals Using Bioreagents. Int. J. Mineral Process. Disponvel On Line Torem M.L., Casquiera R (2003). Flotao Aplicada Remoo de Metais Pesados. Srie Tecnologia Ambiental No 28 CETEM. Rio de Janeiro, 2003. Vdovic N, Bigdan J (1998) Electrokinetics of natural and synthetic calcite suspensions Colloids and Surfaces: Physicochemical and Engineering Aspects 137 7-14 1998 Zheng X, Arps P, Smith R. (2001) Adhesion of Two Bactria onto Dolomite and Apatite: Their Effect on Dolomite Depression in Anionic Flotation. International Journal of Mineral Processing. v. 62 p. 159 172.

Agradecimientos

Este trabajo fue apoyado gracias a las entidades FAPERJ CNPq CAPES