You are on page 1of 28

UNIVERSITATEA DE STIINTE AGRICOLE SI MEDICINA VETERINARA, CLUJ-NAPOCA, ROMANIA

Markerii moleculari i Biotehnologia medical

Doru PAMFIL

Markerii moleculari i biotehnologia medical

Definirea unor termeni Culorile biotehnologiei Aplicaii ale biotehnologiei medicale Rolul markerilor moleculari Platforma de Biotehnologie Proiecte de colaborare

Markerii moleculari i biotehnologia medical Definirea unor termeni

Biotehnologia: Orice tehologie care utilizeaza sistemele biologice,


incluznd organisme vii ori derivate ale acestora, n scopul producerii sau modificarii produselor sau proceselor Dictionarul de biotehnologie 2007

Manipularea organismelor vii pentru a produce


substane sau procese utile

Markerii moleculari i biotehnologia medical Definirea unor termeni

Istoric
6000 BC in Babilon se utiliza drojdia pentru bere, vin si paine 4000 BC in China bacteriile lactice pentru iaurt si branzeturi 1500 prima colectie de germoplasa la plante > ameliorare plante 1800 ameliorare animale (Vavilov) 1880 descoperirea microorganismelor (Leuweenhoek)

1856 recombinarea genetica la plante (Mendel)


1919 aparitia cuvintului biotehnologie (Karl Ereky) 1953 determinaarea structurii AND (James Watson& Francis Crick) 1980 biotehnologia moderna si tehnologia ADNului recombinant

1992 aprobarea primului OMG


2000 finalizarea proiectului HGP (Human Genome Project)

Markerii moleculari i biotehnologia medical Definirea unor termeni

Marker molecular:

Fragmente specifice de ADN care pot fi identificate in cadrul genomului i care sunt utilizate pentru a marca poziia unei gene sau transmiterea unui caracter
Dictionarul de biotehnologie 2007

A characteristic that is objectively measured and evaluated as an indicator of normal biologic processes, pathogenic processes, or pharmacologic responses to a therapeutic intervention MED Jurnal 2008

Markerii moleculari i biotehnologia medical Definirea unor termeni

Clasificarea markerilor moleculari

Markerii moleculari i biotehnologia medical Culorile biotehnologiei

Despre viitorul cercetarilor europene in stiintele vietii

Conferina EU 26-27 Iunie 2007, Brussels

"Towards Future Challenges of Life Sciences Research in Europe"


Bio-economia europeana bazat pe cunoatere
European Knowledge-Based Bio-Economy

Noile tehnologii ... biotehnologia ... vor deveni tot mai importante ... i vor da o nou culoare percepiei tradiionale asupra tiinelor vieii
New technologies (ICT, nanotechnologies, biotechnology, remote
sensing, etc.) will become increasingly important giving new colour to the traditional understanding of the life sciences

Markerii moleculari i biotehnologia medical Culorile biotehnologiei

the colors biotechnology in literature


1997 Green Biotechnology > Clean Biotec versus GMO 2002 Red Biotechnology > US EPSO Medical report

2003 White Biotechnology > EU Science and technology 2003 Blue Biotechnology > Europa Bio Convention > US-EU Bio meeting

2004 The Flags of Biotechnology

2004 The Rainbow of Biotechnology > Al Gore US Senate speech 2005 - Synergy of Green, Red & White Biotech > EU Report 2005 The color of Biotechnology >12th Congress of
Biotechnology

Markerii moleculari i biotehnologia medical Culorile biotehnologiei

Al 12- lea Congres European de Biotehnologie 2005 Biotehnologia Verde Plante si alimente Biotehnologia Rosie Farmaceutica Biotehnologia Alb Mediu

Biotehnologia Gri Industriala


Ministrul economiei din Germania Clasament firme:

Firme de biotehologie 258 > 43.000 angajati


63% rosu + 27% verde + 10% alba (+ albastra)

Markerii moleculari i biotehnologia medical Culorile biotehnologiei

Color Type
Red Yellow Blue Green Brown Dark Purple White Gold Grey

Area of Biotech Activities


Health, Medical, Diagnostics Food Biotechnology, Nutrition Science Aquaculture, Coastal and Marine Biotech Agricultural, Environmental Biotechnology Biofuels, Biofertilizers, Bioremediation, Geomicrobiology Arid Zone and Desert Biotechnology Bioterrorism, Biowarfare, Biocrimes, Anticrop warfare Patents, Publications, Inventions, IPRs Gene-based Bioindustries Bioinformatics, Nanobiotechnology Classical Fermentation and Bioprocess Technology

Electronic Journal of Biotechnology 3.02.2006

Markerii moleculari i biotehnologia medical Culorile biotehnologiei

Culorile activitilor Biotech

1. 2. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9.

Rosu - Medicina, sanatate si diagnostic Verde - Agricultura, biotehnologia mediului etc. Galben Biotehnologii alimentare si Stiintele nutritiei Albastru Acuacultura si biotehnologia marina Maro - Biotehnologia zonelor aride si desertice Alb - Biotehnologii industriale Gri - Biotehnologii fermentative si bioprocesare Auriu - Nanotehnologii si bioinformatica Mov - Patente, publicatii, inventii Negru - Bioterorism, biocrime, razboi biologic
UNESCO Division of Life Sciences, Paris, France Electronic Journal of Biotechnology 3.02.2006

Markerii moleculari i biotehnologia medical Aplicatii ale biotehnologiei

Aplicatii ale Biotehnologiei rosii Biotehnologia + ingineria genetica + genomica

Testare genetic
Diagnostic Terapia genica Terapeutic Nutraceutice Etc.

Markerii moleculari i biotehnologia medical Aplicatii ale biotehnologiei

Medicina tradiional (farmaceutic) trateaza efectele Medicina modern biotehnologic - trateaza cauza Cauza: genetic biochimic Aplicatii in tratamentul: - bolilor cardiovasculare - cancer - scleroz multipl - HIV/AIDS, TB, malarie - boli rare - medicina regenerativa etc.

Markerii moleculari i biotehnologia medical Aplicatii ale biotehnologiei

Biotehnologia roie - 12% din piaa medicamentelor 2007 - 3,2 miliarde euro Programul german BIOChance 2007-2011 Investiii de 900 mil euro Stimularea intreprinderilor mici si mijlocii

Estimare 2011 - 20% din piaa medicamentelor - peste 5 miliarede euro


- 50% din vaccinuri peste 8 miliarde

Markerii moleculari i biotehnologia medical Vaccinuri

Tipuri de vaccinuri dup coninutul biologic: Vaccinuri care conin microorganisme vii atenuate Vaccinuri care conin microorganisme inactivate Vaccinuri care conin componente microbiene purificate, proteice sau polizaharidice conjugate proteic Vaccinuri care conin proteine recombinate Vaccinuri care conin anatoxine

De la Organisme vii atenuate La

Subunit vaccines Vaccinuri genetice

Markerii moleculari i biotehnologia medical Vaccinuri recombinante

tuberculoz

rBCG30 - primul vaccin recombinant testat clinic; combinat cu chimioterapia MVA85A - bazat pe modificarea genetic a virusului Vaccinia Hybrid-1, HyVac4 or M72 - subunit vaccine molecule obinute prin fuziunea a dou proteine recombinante injectate mpreun cu adjuvani Ad35 - adenovirui recombinai Unele pot fi administrate fr injectare RTS,S/AS02A - molecul obinute prin fuziunea a dou proteine recombinante, injectat mpreun cu adjuvantul AS02A Utilizarea recombinazei Cre sau Tre, enzime capabile s ndeprteze informaia genetic pe care HIV o transfer n celulele infectate; tratamentul presupune utilizarea celuleor stem, care sunt extrase, tratate i apoi reinjectate n corp pentru a rspndi enzimele.

http://washingtonindependent.co m/wpcontent/uploads/2008/09/vaccine 1.jpg

malarie

HIV

Markerii moleculari i biotehnologia medical Terapie genica

Inserarea de gene n celulele i esuturile unui individ pentru a trata diferite afeciuni
Poate fi aplicat att celulelor somatice, ct i celor sexuate Vectori utilizai n terapia genic: 1. Virusuri (retro-, adenovirusuri etc.) 2. Vectori nevirali: ADN-ul denudat (gol) oligonucleotide complex ADN-lipozom 3. Vectori hibrizi 4. Dendrimeri

Tratamentul se poate face n dou feluri:

Ex vivo - celule din sngele sau mduva pacientului sunt recoltate i cultivate n laborator, iar apoi sunt infectate cu virusul care transport gena de interes; celulele transformate sunt apoi injectate intravenos pacientului.
In vivo - vectorul este utilizat pentru introducerea informaiei genetice dorite direct n celule aflate n corpul pacientului

Markerii moleculari i biotehnologia medical Nutraceutice

Extracte din alimente cu efecte medicinale asupra sntii umane (efecte fiziologice benefice demonstrate)

Exemple: resveratrolul din strugurii roii (antioxidant) fibrele solubile sulforaphanul din broccoli (previne cancerul) isoflavonoide pentru mbuntirea sntii arteriale flavonoide antociani acid alfa-linolenic

http://blog.bioethics.net/nutraceuticals.jpg

Markerii moleculari i biotehnologia medical Medicina regenerativ

Acest domeniu se refer la tratamente prin care se pot nlocui pri ale corpului adult. Trei strategii prezint potenial n acest domeniu: utilizarea celulelor stem (injectare) inducerea regenerrii cu ajutorul unor substane specifice transplantarea organelor/esuturilor obinute in vitro Celule stem Celulele stem reprezint un tip aparte de celule, care se regsesc n orice organism multicelular, fiind caracterizate prin abilitatea de a se nmuli continuu (mitoz) i de a diferneia apoi ntr-o gam larg de celule specializate. La mamifere exist dou mari categori de celule stem: embrionare, izolate din blastociti adulte, izolate din esuturi somatice

http://www.csa.com/discoveryguides/stemcell/images/pluri.jpg

Tratamente poteniale: cancer leziuni ale sistemului nervos afeciuni cardiace hematopoiez calviie afecini ale ochilior ortopedie etc.

Markerii moleculari i biotehnologia medical Rolul markerilor genetici

Testarea genetic
Implic analizarea direct a moleculei de ADN n vederea depistrii mutaiilor. Dou metode: 1. Utilizarea sondelor care prezint mutaii i hibridizarea lor cu ADN-ul de interes 2. Compararea secvenei ADN de interes cu secvene specifice indivizilor sntoi Aplicaii: 1. Screeningul purttorilor de alele recesive 2. Confirmarea diagnosticului pentru indivizii simptomatici 3. Determinarea sexului 4. Testarea identitii http://www.ohsu.edu/health/images/gs/es_0886.gif 5. Screeningul nou-nscuilor 6. Testarea presimptomatic pentru estimarea riscului dezvoltrii diferitelor afeciuni, inclusiv a neoplaziei maligne, la aduli Teste genetice existente: Pentru depistarea fibrozei chistice anemiei cu celule n secer bolii lui Huntington depistarea mutaiilor asociate cu cancerul - mamar - ovarian - de colon
Gena
BRCA1, BRCA2 MLH1, MSH2, MSH6, PMS1, PMS2

Tipul de cancer
Mamar, ovarian, pancreatic De colon, uterin, al intestinului subire, gastric, al tractului urinar

Disponibilitatea testului comercializat

comercializat

Markerii moleculari i biotehnologia medical Markeri moleculari

Proiectul genomului uman


The Human Genome Project (HGP http://www.ornl.gov/sci/techresources/Human_Genome/home.shtml) a avut ca scop identificarea secvenei ADN-ului uman, precum i identificarea i cartarea din punct de vedere fizic i funcional a celor aproximativ 20.000-25.000 de gene. Centrul Naional al Statelor Unite pentru Informaii Biotehnologice (NCBI National Center for Biotechnology Information) i organozaiile surori in Europa i Japonia gyduiesc secvena genomului uman n baza de date GenBank, mpreun cu secvenele genelor cunoscute, ct i ipotetice, i a unor proteine. Organizaii precum ENSEMBL prezint date adiionale i unelte pentru vizualizarea i cercetarea lor. Cel mai mare efort n identificarea diferenelor dintre indivizi include detectarea SNP-urilor i HapMap. Proiectul internaional HapMap reprezint o organizaie al crui scop este crearea unei hri a haplotipului genomului uman, care va descrie tiparele comune ale variaei genetice umane.

Secvena ADN-ului uman este stocat n baze de date disponibile gratuit pe Internet - National Institute of Health (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/) - EMBL nucleotide database (http://www.ebi.ac.uk/) - DNA Database of Japan (http://www.ddbj.nig.ac.jp/) - UCSC Genome Browser (http://genome.ucsc.edu/) - HGP in the Web (http://cmbi.bjmu.edu.cn/cmbidata/hgp/Resource/index.htm#01)

Markerii moleculari i biotehnologia medical Obinerea produselor farmaceutice

Produsele biofarmaceutice biopharmaceuticals


Ci de obinere a produselor farmaceutice utiliznd biotehnologiile moderne: Transformarea genetic aplicat la: Bacterii (ex. E. coli) Drojdii Plante Culturi de celule

biopharmaceuticals
pharming

Mouse Embryonic Fibroblast (3t3) Cell Culture


http://www.olympusmicro.com/galleries/abramowitz/pages/3t3cells1small.html

http://www.ecoliblog.com/E_coli_lge.jpg

Markerii moleculari i biotehnologia medical


Clasificarea produselor farmaceutice obinute cu ajutorul biotehnologiilor

Factori de coagulare sanguini (Factorul VIII i Factorul IX) Ageni trombolitici (activator tisular de plasminogen ) Hormoni (insulin, glucagon, hormon de cretere, gonadotropine) Factori de cretere hematopoietici (eritropoietin, factori de stimulare ai coloniilor) Interferoni (Interferoni-, -, -) Produse bazate pe interleukin (Interleukina-2) Vaccinuri (antigen de suprafa al virusului hepatitei B ) Anticorpi monoclonali (diveri) Alte produse (factor de necroz tumoral, enzime terapeutice) Proteine recombinante umane
http://www.biotech.mobi/

Hormonul uman de cretere (rhGH) - Humatrope (compania Lilly), Serostim (Serono) au nlocuit hGH obinut de la cadavre Insulina uman (rhI) Humulin (Lilly), Novolin (Novo Nordisk) - au nlocuit insulina pentru terapia uman obinut de la bovine i porcine Factorul VIII de coagulare Kogenate (Bayer) - l-a nlocuit pe cel izolat din snge Eritropietin Epogen (Amgen) Factorul uman recombinant de stimulare a coloniilor de granulocite (G-CSF) filgrastim, comercializat sub denumirea Neupogen (Amgen), pegfilgrastim comercializat sub denumirea Neulasta Alfa-galactozidaz A Fabrazime (Genzime) Interferon (IF) - Interferon-beta-1a comercializat sub denumirea Avonex (Biogen Idec), Rebif (Serono), Interferon beta-1b comercializat sub denumirea Betaseron (Schering) Factor de cretere asemntor insulinei 1 (IGF-1)

Markerii moleculari i biotehnologia medical Utilizri ale proteinelor recombinante umane

Eritropoietin Interferon- Interferon- Anticorpi monoclonali Factori de stimulare ai coloniilor Glucocerebrozidaz

tratamentul

Anemiei Leucemiei Sclerozei multiple Artritei reumatoide Neutropeniei Bolii lui Gaucher Vector Backbone: pAcGP67B

http://guavatechnologies.com/Library /images/LSR-PH-CellCulture.jpg

Markerii moleculari i biotehnologia medical


Farmacogenomica

Farmacogenomica studiul modului n care genotipul influeneaz reacia la tratament. face legtura ntre farmacologie i genetic n viitor se preconizeaz crearea de medicamente personalizate, specifice genotipului
http://www.freewebs.com/pharmacogenomics/Ho peForTheFuture.jpg http://porpax.bio.miami.edu/~cmallery/150/gene/ pharmacogenomics.gif

Aplicaii: Crearea medicamentelor de comand (tailor-made), bazate pe informaia genetic obinut de genomica funcional. Aceste medicamente vor avea un efect terapeutic superior i efecte negative sczute asupra celulelor sntoase adiacente. Metode mai exacte de dozare a medicamentelor bazate pe genotipul pacientului, mrind astfel valoarea terapiei, concomitent cu scderea posibilitii unei supradozri. mbuntirea crerii medicamentelor i a procesului aprobrii lor. n urma asocierii a numeroase gene cu diferite afeciuni, acestea pot reprezenta inta pentru noile terapii, scurtnd astfel procesul crerii medicamentelor. Vaccinuri mbuntite pot fi produse prin intermediul ingineriei genetice, eliminnd riscul infectrii cu patogenul, de asemenea vor fi mai ieftin de produs, mai stabile i vor putea conine mai multe tulpini concomitent.

Markerii moleculari i biotehnologia medical Platforma de biotehnologii bazate pe cunoastere

Platforma de biotehnologii Proiect MEC CNCSIS cod 29/2006-2009 Proiect de investitii de 5 milioane lei Director prof. Doru C. Pamfil 53 persoane

Institutul pentru tiinele vieii

Centrul de Biotehnologii actual

4.500 mp din care 2.500 mp Platforma

1.025 mp

UNIVERSITATEA DE STIINTE AGRICOLE SI MEDICINA VETERINARA


CLUJ-NAPOCA, ROMANIA

Va multumesc !

Pamfil Doru GSM 0744779416

Platforma de biotehnologii bazata pe cunoastere


http://www.usamvcluj.ro/htlm/cercetare/platforma