TINCIN DE CLULAS ANIMALES Y VEGETALES

OBJETIVOS. - Iniciarse en las tcnicas de preparacin microscpica - Teir y observar clulas FUNDAMENTO TERICO.

Para intentar hacer una buena preparacin hay que intentar conseguir preparaciones de una sola capa de clulas aunque puede ocurrir que el material de partida se encuentre as (algunos epitelios o tejidos epidrmicos). En el caso de materiales ms o menos fluidos, hay que realizar una extensin, y en el de materiales slidos, un corte con microtomo, Suele ser necesario realizar una fijacin de los tejidos para conservar (fijar) las estructuras celulares; para ello suelen utilizarse fijadores qumicos o calor. A veces este paso est incluido en la tincin, que se realiza para distinguir las partes que interesa observar porque los materiales biolgicos son, generalmente, incoloros. Despus de lavar el exceso de colorante, la preparacin se monta aadiendo conservantes y sustancias que facilitan la visin a travs del microscopio, y colocando encima un cubreobjetos. MATERIAL Microscopio. Lanceta. Escalpelo. Pinzas. Portaobjetos/ Cubreobjetos. Banco de tincin Papel de filtro Placa de Petri Frasco Lavador Glicerina al 50%. Azul de metileno Verde de metilo actico Cebolla

Material de laboratorio

Reactivos Material biolgico MTODO

a) Tcnica de realizacin de una preparacin de clulas de mucosa bucal: 1. Raspa con la ua del dedo (puedes usar un palillo de dientes despuntado) la parte interna de un carrillo, y deposita el producto extrado (puede que no veas nada, pero seguro que en la ua llevas clulas) sobre una gota de agua que has depositado en el centro de un portaobjetos. 2. Con ayuda de una aguja enmangada o del palillo que has usado anteriormente, extiende la gota y calienta suavemente el portaobjetos por la parte inferior hasta que se seque.

3. Coloca el portaobjetos sobre los bordes del soporte de tinciones y aade una gota del colorante azul de metileno. 4. Deja la preparacin con el colorante durante dos minutos y lava a continuacin con agua mediante un frasco lavador, hasta que el agua salga clara. 5. Coloca un cubreobjetos sobre la preparacin dejndolo caer formando inicialmente un ngulo de 45 . 6. Seca la preparacin y obsrvala al microscopio. La observacin se hace empezando con el objetivo de menos aumentos. b) Tcnica de realizacin de una preparacin de clulas de epidermis de cebolla: 1. Parte una cebolla y separa sus capas; extrae, con ayuda de unas pinzas, una porcin pequea (1 cm2) de la membrana que las recubre. 2. Deposita la membrana en una placa de Petri con agua. Introduce un portaobjetos oblicuamente en la placa y con ayuda de las pinzas o de una aguja enmangada lleva la membrana sobre el portaobjetos, procurando que no queden arrugas. 3. Coloca el portaobjetos con la membrana sobre los bordes de una placa de Petri o sobre el soporte de tinciones y aade unas gotas del colorante verde de metilo actico. 4. Deja la preparacin con el colorante durante cinco minutos y lava a continuacin con agua mediante un frasco lavador, hasta que el agua salga clara. Al lavar se debe de hacer con mucho cuidado para no arrastrar la membrana (puede ser conveniente sujetarla suavemente con las pinzas). 5. Coloca un cubreobjetos sobre la preparacin dejndolo caer formando inicialmente un ngulo de 45 . 6. Seca la preparacin y obsrvala al microscopio.
Modo de colorear una preparacin Manera de colocar el cubreobjetos

Cubreobjetos Placa de Petri Portaobjetos

ANLISIS Y DISCUSIN DE LOS RESULTADOS. Observa al microscopio con los objetivos de 4x y 10x. Realiza dibujos de tus observaciones y describe en cada dibujo cmo son las clulas y el aumento total de la observacin. Seala en tus dibujos las partes de las clulas que hayas observado claramente. Por qu no se observan otros componentes de la clula?
Pared celular Citoplasma Citoplasma

Nucleo

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