DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL

LEMBAR PERSETUJUAN

ii

KATA PENGANTAR

iii

ABSTRAK

vi

DAFTAR ISI

viii

DAFTAR SINGKATAN

xiii

DAFTAR GAMBAR

xv

DAFTAR TABEL

xvii

DAFTAR LAMPIRAN

xviii

BAB I PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang ..... .... 1

1.2. Rumusan Masalah .... ...... 3
1.3. Tujuan Penelitian .... .. 3
1.3.1. Tujuan umum ...... 3
1.3.2. Tujuan khusus ..... 4
1.4. Manfaat Penelitian ..... .............. 4
1.4.1. Manfaat Teori ........ .... 4
1.4.2. Manfaat Praktis ....... .. 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Sistim Imun Mukosa Usus ..... .. 5

2.1.1 Organ dan Sel Imun Mukosa .... .... 5
2.1.1.1 Sel dan Mekanisme Imun Mukosa .... . 5
2.1.1.2 Sel Microfold (Sel M) dan Peyers Patches (PP) ...... 7
2.1.1.3 Intra Epitelial Lymphocyte (IEL) .... .. 8
2.1.1.4 Lamina Propria Lymphocytes (LPL) ....... 9
2.1.1.5 Sel T Mukosa ...... 9
2.1.1.6 Makrofag Mukosa dan Sel Dendritik..... 10
2.1.1.7 Sel Epitel Usus (IEC). . .............. 10
2.1.2 Konsep Keseimbangan Th1/Th2. .... ...........11
2.1.3 Th17.. ... .. 14
2.2 Probiotik .. ..16
2.2.1. Bakteri Komensal.... .. .. 16
2.2.2. Toleransi Oral . .. .. ... 17
2.2.3. Probiotik .. ............. 18
2.2.4. Cara Kerja .. .. 19

2.2.5. Modifikasi Mikrobiota Usus .. .. 20

2.2.6. Mempertahankan Fungsi Sawar. .. 21
2.2.7. Pengaruh Probiotik terhadap Sel Epitel ... 21
2.2.8. Meningkatkan Produksi Sitokin Anti Inflamasi dan Menekan
Produksi Sitokin Proinflamasi .. 21
2.2.9. Penggunaan Probiotik ............ 23
2.3 Pengaruh Probiotik terhadap Keseimbangan Th1/Th2 dan Th17 .... 23
2.3.1. Pengaruh Probiotik terhadap Th1/Th2 dengan Dominasi
pada Th1 .. ... 23
2.3.2. Pengaruh Probiotik terhadap Th1/Th2 dengan Dominasi
pada Th2 ...... 26
2.3.3. Stimulasi Th1 dan Th2 oleh Probiotik . .. 31
2.3.4. Pengaruh Probiotik terhadap Th17 . .. 33
2.4 Lipopolisakarida (LPS).. .. ............... 34

BAB III KERANGKA TEORI, KERANGKA KONSEP DAN HIPOTESIS 36

3.1 Kerangka Teori .. ... .. 36
3.2 Kerangka Konseptual .... .. 39
3.3. Hipotesis ... ... 40
3.3.1. Hipotesis mayor .. .. 40
3.3.2. Hipotesis minor . 40

BAB 4 METODE PENELITIAN

41

4.1. Disain Penelitian . .. . 41

4.2. Tempat Penelitian ..... .... 41
4.3. Subyek Penelitian.............................................. ................................. 42
4.3.1. Sampel Penelitian .................................. .................................. 42
4.3.2. Kriteria Inklusi .. .. . 42
4.3.3. Kriteria Eksklusi .. .. .. 42
4.3.4. Estimasi Besar Sampel .......................... .................................. 43
4.3.5. Teknik Randomisasi ............................... .................................. 43
4.3.6. Prosedur Eksperimen dan Pengamatan ............ ...................... 43
4.4. Identifikasi Variabel.................................................... ......................... 44
4.4.1. Variabel Bebas ................................................. ........................ 44
4.4.2. Variabel Tergantung .................................... ............................ 44
4.4.3. Variabel Perancu ....................................... .............................. 44
4.5. Definisi Operasional............................................. ................................45

4.5.1. Mencit Putih ...................................... ....................................... 45

4.5.2. Pemberian Probiotik ............................ ..................................... 45
4.5.3. Pemberian Lipopolisakarida (LPS) ..... ..................................... 45
4.5.4. Respons Imun Th1 .............................. ..................................... 46
4.5.5. Respons Imun Th2 ............................... .................................... 46
4.5.6. Respons Imun Treg ................................ ................................. 46
4.5.7. Respon Imun Th17 .. ... 46
4.6. Protokol Penelitian............................................. ................................. 47
4.6.1. Alur Pelaksanaan Penelitian ................... ................................. 47
4.6.2. Prosedur Pelaksanaan Penelitian ............ ................................ 48
4.6.3. Metode pengukuran sel penghasil sitokin ....... 49
4.6.4. Etik Penelitian . ... ............ 50
4.7. Waktu Penelitian......................................................... ........................ 51
4.7.1. Persiapan Pelaksanaan Penelitian, meliputi...... ....................... 51
4.7.2. Pelaksanaan Penelitian, meliputi .................... ......................... 51
4.7.3. Penulisan Laporan Penelitian ....................... ........................... 51
4.8. Manajemen Data...................................................... ........................... 52
4.8.1. Penyajian Data ............................................. ............................ 52
4.8.2. Analisa Statistik ........................................ ................................ 52

BAB 5 HASIL PENELITIAN

53

5.1. Karakteristik sampel .... 55

5.2. Profil respons imun sel Th1, Th2, Th17 dan Treg paska perlakuan .56
5.3. Respons imun sel Th1, Th2, Th17 dan Treg paska perlakuan .. . 62

BAB 6 PEMBAHASAN

68

6.1 Profil Sel Th1, Th2, Th17 dan Treg Pada Respons Imun Mukosa
Usus Mencit Normal .. . 69
6.2 Profil Sel Th1, Th2, Th17 dan Treg Pada Respons Imun Mukosa
Usus Mencit yang Terpapar LPS E. coli . 70
6.3 Pengaruh Probiotik Terhadap profil Sel Th1, Th2, Th17 dan Treg.. .....72
6.4 Manfaat Penelitian .... 76

BAB 7 PENUTUP

78

7.1 Kesimpulan Penelitian .... 78

7.2 Saran ... ... 78

DAFTAR PUSTAKA .. ... 79

LAMPIRAN-LAMPIRAN .. ..... 87

DAFTAR SINGKATAN

APC : Antigen Presenting Cell

ASI : Air Susu Ibu

BB : Berat Badan

CD : Cluster Differentiation

CFU : Colony Forming Unit

CLR : C type lectin receptor

DC : Dendritic Cells

DM : Diabetes Mellitus

FAO : Food and Agriculture Organization of The United Nations

GALT : Gut Associated Lymphoreticular Tissue

IBD : Inflammatory Bowel Diseases

IEL : Intraepithelial Lymphocytes

IEC : Intestine epithelial cells

IFN : Interferon

Ig : Imunoglobulin

IL : Interleukin

Kg : Kilogram

LAB : Lactid Acid producing Bacteria

LPS : Lipopolisakarida

LPL : Lamina Propria Lymphocytes

MALT : Mucosa Associated Lymphoreticular Tissue

MHC : Major Histocompatibility Complex

NEC : Necrotizing Entero Collitis

NK cell : Natural Killer Cell

PBS : Phosphat Buffer Saline

PP : Peyer's patches

PSA : Polisakarida A

Sel M : Sel Microfold

SLE : Systemic Lupus Erythematous

TCR : T Cell Receptor

TGF : Transforming Growth Factor

Th : Limfosit T helper

TLR : Toll Like Receptor

TNF : Tumor Necrosis Factor

Treg : Limfosit T regulator

Tr1 : Sel T Regulator tipe 1

WHO : World Health Organization

ZO : Zonulla Ocluden

DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1
Gambar 2.2
Gambar 2.3
Gambar 2.4
Gambar 2.5
Gambar 2.6
Gambar 2.7
Gambar 2.8
Gambar 2.9
Gambar 2.10
Gambar 2.11
Gambar 2.12
Gambar 2.13
Gambar 2.14
Gambar 2.15
Gambar 5.1
Gambar 5.2
Gambar 5.3
Gambar 5.4
Gambar 5.5
Gambar 5.6

Gambar 5.7
Gambar 5.8
Gambar 5.9
Gambar 5.10
Gambar 6

GALT..
Struktur Peyers patches.
Berbagai macam bakteri dan produknya ditangkap oleh
sel M dan DC....
Paparan EC terhadap bakteri komensal dan
patogen..
Konsep hipotesa keseimbangan Th1/Th2
Induksi patogen terhadap respon imun.
Ketidakseimbangan respon imun..
Aktivasi DC
Inflamasi fisiologis...........
Inflamasi patologis
Penghambatan dari bakteri usus dan pertahanan fungsi
sawar oleh probiotik.......................
Modulasi sistim imun oleh probiotik dalam
mempertahankan keseimbangan...
Mekanisme dari probiotik.
Pengaruh probiotik terhadap keseimbangan respon
imun.
Struktur Lipopolisakarida (LPS).............
Diagram batang berat badan awal dan akhir perlakuan
pada masing-masing kelompok..
Profil Respons Sel Th1,Th2, Th17 dan Treg kelompok
Kontrol........
Hasil flowcytometry kelompok kontrol
Profil Respons Sel Th1,Th2, Th17 dan Treg kelompok
LPS.
Hasil flowcytometry kelompok LPS ..
Profil Respons Sel Th1,Th2, Th17 dan Treg kelompok
probiotik..
.
Hasil flowcytometry kelompok probiotik...
Profil Respons Sel Th1,Th2, Th17 dan Treg kelompok
LPS dan probiotik.
Hasil flowcytometry kelompok LPS dan probiotik
Variasi nilai sitokin pada empat perlakuan...
Pewarnaan dan pelabelan pada teknik
flowcytometry.

6
8
9
11
12
13
14
15
15
16
20
22
23
33
34
56
57
57
58
59
60
60
61
62
67
93

DAFTAR TABEL
Tabel 2.1
Tabel 2.2
Tabel 2.3
Tabel 2.4
Tabel 2.5
Tabel 2.6
Tabel 5.1
Tabel 5.2

Tabel 5.3

Tabel 5.4

Tabel 5.5

Tabel 5.6

Tabel 5.7

Tabel 6

Daftar bakteri dengan efek positif dan negatif..

Produksi sitokin hasil interaksi probiotik dengan sel
epitel
Pengaruh probiotik pada pematangan DC.. .
Pengaruh probiotik terhadap respon imun....
Strain bakteri pada produk VSL3#...........................................
Analisa kemampuan strain probiotik untuk menjaga
keseimbangan Th1/Th2
Karakteristik dasar mencit percobaan
Perbandingan Nilai Sel Penghasil Sitokin Dari Sel Th1,Th2,
Th17 dan Treg Antara kelompok LPS dan Kelompok
Kontrol.
Perbandingan Nilai Sel Penghasil Sitokin Dari Sel Th1,Th2,
Th17 dan Treg Antara kelompok Probiotik dan Kelompok
Kontrol.
Perbandingan Nilai Sel Penghasil Sitokin Dari Sel Th1,Th2,
Th17 dan Treg Antara kelompok Probiotik dan Kelompok
LPS..
Perbandingan Nilai Sel Penghasil Sitokin Dari Sel Th1,Th2,
Th17 dan Treg Antara kelompok Probiotik-LPS dan
Kelompok LPS
Perbandingan Nilai Sel Penghasil Sitokin Dari Sel Th1,Th2,
Th17 dan Treg Antara kelompok Probiotik-LPS dan
Kelompok Kontrol..
Perbandingan Nilai Sel Penghasil Sitokin Dari Sel Th1,Th2,
Th17 dan Treg Antara kelompok Probiotik-LPS dan
Kelompok Probiotik
Contoh resep makanan mencit...

17
25
27
29
30
32
55

63

63

64

65

65

66
91

DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1
Lampiran 2
Lampiran 3
Lampiran 4
Lampiran 5
Lampiran 6
Lampiran 7
Lampiran 8
Lampiran 9
Lampiran 10
Lampiran 11

Profil hewan coba ........

Sarana dan prasarana pemeliharaan mencit.......
Dosis / cara pemberian probiotik dan LPS
Teknik pemeriksaan flowcytometry
Randomisasi sampel....
Daftar kegiatan penelitian, kebutuhan dan biaya.
Lembar observasi mencit.
Tabel Sel Penghasil sitokin.
Hasil flowcytometry......
Analisa statistik.....
Keterangan Kelaikan Etik

87
89
92
93
94
95
97
105
108
125
133