INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS

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LABORATORIO DE FISIOLOGIA Y BIOQUIMICA MICROBIANA

PRACTICAS DEL SEGUNDO PARCIAL


NOMBRE DE LOS INTEGRANTES:
ORTEGA DÍAZ GLORIA MICHEL
RAMOS CONTRERAS LUIS
AYALA GÁMEZ LAURA MARIANA

GRUPO: 6QV1


EQUIPO: 6


NOMBRE DE LA MATERIA
ECOLOGIA MICROBIANA DEL SUELO




FECHA DE ENTREGA DE INFORME
10 DE ABRIL DE 2014














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Observación IN SITU de los microorganismos del suelo

Este tipo de estudios permite establecer la distribución de los microorganismos en relación con los agregados
de suelo, partículas de materia orgánica, raíces de las plantas. Uno de los métodos más antiguos consiste en
la introducción de un portaobjeto en la tierra y su posterior observación, previa tinción con colorantes
adecuados (ácidos, anticuerpos fluorescentes). La técnica de Rossi-Cholodny nos permite tener estudiar de
manera cualitativa la población microbiana del Suelo.
En el suelo Erosionado se observaron:
1. Actinomicetos con arcillas
2. Levaduras
3. Hongos
Sin embargo en el portaobjetos sin tratamiento y con tratamiento se observó que había una baja población
microbiana en comparación con los suelos Forestales y agrícolas ya que en estos la población fue mayor.
En general en el portaobjetos se observaron 3 secciones la parte superior donde se encontraban en la
mayoría microorganismos aerobios, debido a que se encontraba en la parte en contacto con oxígeno.
Después en la parte media, se tenía una población microbiana no muy alta debido a que aún hay presenci a
de oxigeno pero la concentración disminuyo.
En la parte inferior la población fue menor debido a que la concentración de oxigeno era menor.
Sin embargo no solo las condiciones aerobias o anaerobias favorecen el crecimiento microbiano sino también
la influencia de la fuente de Carbono (Sacarosa) y fuente de Nitrógeno (NH4NO3).
Otro de los factores que influyen estas poblaciones son:
 pH
 Materia Orgánica
Esta técnica nos permite tener un panorama de las relaciones microbianas que existen. Por ejemplo se
observó la presencia de actinomicetos que se encuentran con absorbidas en las arcillas que se menciona que
esta relación permite combatir la desecación.

OXIDACIÓN DE AZUFRE ELEMENTAL

El azufre tiene diversas funciones en las plantas. Algunas funciones principales son:

 Se encuentra en algunos aminoácidos, en los bloques de construcción de las proteínas. La mayor
parte del azufre absorbido por las plantas, aproximadamente el 90%, se utiliza para ese propósito.
 El azufre es esencial para la formación de la clorofila. Es un constituyente principal de una de las
enzimas necesarias para la formación de la molécula de clorofila.
 Es esencial en la síntesis de los aceites en las plantas, especialmente en cultivos de aceite.
 Es activo en el metabolismo de nitrógeno.

Se hicieron cuatro diferentes tratamientos:
1. Se utilizó una muestra de suelo, es decir es un Testigo (-) de la oxidación de Thiobacillus thiooxidans
en el suelo.
2. Se agregó azufre, si en la muestra de suelo hay presencia de Thiobacillus thiooxidans se pondrá de
manifiesto un proceso de acidificación del medio por la oxidación que se producirá.
3. En este se colocó el cultivo puro de Thiobacillus thiooxidans, si en la muestra de suelo hay presencia
de azufre se producirá un proceso de oxidación.
4. Se colocaron los elementos para la oxidación de azufre, siendo este nuestro Testigo (+).
En la muestra Forestal observamos que la acidez de la muestra incremento en el tratamiento 2 indicándonos
la presencia de Thiobacillus thiooxidans, en la muestra de suelo.
En la muestra Erosionada observamos que en el tratamiento 3 se disminuyó el pH, indicándonos la presencia
de azufre en la muestra de suelo.
En la muestra Agrícola de Chapingo y Agrícola de Oaxaca se observó una disminución de acidez en el
tratamiento 2 al igual que en la muestra Forestal.
Thiobacillus thiooxidans


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Conclusiones:
Se evaluó el efecto que tiene sobre el suelo el introducir azufre elemental e inocularlo con una bacteria
oxidadora.
Se observaron cambios en el pH del suelo de las cuatro diferentes muestra utilizadas principalmente en el
tratamiento 2.

Fijadores Asimbioticos de Nitrógeno

Fijación Biológica. El término fijación del Nitrógeno se usa normalmente para definir la fijación de Nitrógeno
por bacterias, libres o en asociación simbiótica. Este tipo de fijación de Nitrógeno desde el estado gaseoso a
la forma orgánica se lleva a cabo biológicamente por microorganismos especializados.
Los microorganismos fijadores de nitrógeno no constituyen un grupo taxonómico homogéneo, la única
característica que comparten es la presencia de la enzima Nitrogenasa.
La fijación de N2 es un proceso redox estrictamente anaerobio. Lo cataliza un complejo ferro-enzimático
denominado Nitrogenasa, tan importante que la naturaleza nos muestra tres tipos:
Tipo I. Es el sistema más eficiente y el más frecuente. Se conforma en medios donde hay suficiente
molibdeno
Tipo II. Propio de bacterias que como el Azotobacter, crecen en medios donde no hay Molibeno y el Vanadio
le sustituye.
Tipo III. Se conforma en medios donde existe una carencia simultánea de Molibdeno y Vanadio. El
Azotobacter también puede expresar este complejo. Es el sistema menos eficiente de los tres.
El oxígeno inhibe la síntesis de Nitrogenasa, pues la expresión de los genes nif está estrictamente regulada,
tanto por oxígeno como por nitrógeno combinado a través del sistema Ntr-NifA. Asímismo, la enzima
nitrogensa es fácilmente inactivada por oxígeno, de tal forma que todos los sistemas fijadores han
desarrollado estrategias especiales para protegerse de concentraciones elevadas de este elemento y evitar
su inactivación.
En base a los resultados obtenidos podemos observar que en base al crecimiento de Azotobacter se favorece
el desarrollo de Clostridium esto es debido a que los clostridios fijadores no sólo son incapaces de crecer en
presencia de aire sino que generalmente son muertos por el oxígeno, a menos que se encuentren en forma
de endosporos, pero pueden crecer por debajo de la película de Azotobacter, generando burbujas de gas por
la fermentación de azúcares.
Azotobacter crece en un medio líquido sin agitación, en forma de una película superficial. Es bastante
sensible a la acidez pues no suele crecer por debajo de pH 6. Al microscopio se observan bacilos gram-
negativos, grandes, de 4 a 6 mm de largo, acompañados de células de mayor tamaño con paredes gruesas y
apariencia de levadura, conocidas como cistos. Esta bacteria tiene una gran capacidad respiratoria, medida
como velocidad de consumo de oxígeno, para proveer la energía requerida por la fijación.
Y observamos que hay un elevado porcentaje de Azobacter en los suelos Agricolas debido a la concentración
de la materia orgánica al igual que el favorecimiento de la presencia de oxígeno.
En base a la morfología colonial se observó en los cultivos la presencia de Azotobacter debido a que se
observaron colonias lisas y mucosas y sobre de ellas se tenían burbujas de gases que es indicio de la
presencia de Clostridium.
Y en base a la morfología microscópica se observaron bacilos largos gram (+) que nos indicaría la presencia
de Clostridium; y Azotobacter se observó con diferentes formas debido a que esta es pleomorfica además de
tener presencia de cistos.

Conclusiones:

 Se determine el paisaje microbiano de las muestras de suelos utilizados, mediante la técnica de
Rossy-Colodny.
 Se observaron halos de inhibición en la determinación de fosforo
 Se obtuvieron colonias de Azotobacter y burbujas de gases sobre ellas indicándonos la presencia de
Clostridium.
 Thiobacillus thiooxidans oxida al azufre elemental y comprobándose este con la acidificación de la
muestra de suelo.
Solubilización de fósforo

El fósforo es un elemento fundamental para la nutrición de las plantas. Es absorbido por éstas en forma de
fosfatos mono y diácidos. A diferencia del nitrógeno y del azufre, que son otros elementos que se absorben en
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forma aniónica, el fósforo es un elemento poco móvil. Por su tendencia a reaccionar dando formas fosforadas
no disponibles para las plantas es que debe ser considerado uno de los elementos más críticos.
El fósforo total del suelo se divide en fósforo orgánico y fósforo inorgánico, aproximadamente el 50% a cada
uno.
El fósforo soluble, que es el que está inmediatamente a disposición de los cultivos, constituye solamente una
pequeña fracción del fósforo total. Las diferentes formas de fósforo en el suelo tienden a un equilibrio,
renovándose en la solución del suelo lo que fe extraído por los vegetales. Es una característica propia de cada
suelo la cantidad de fósforo total que es soluble y la velocidad con que éste se renueva ante la extracción.
Muchos suelos tienen una gran cantidad de fijación de fosfatos, llegando a inmovilizar gran parte del que se
aporta en una fertilización, razón por la cual en algunos casos existen grandes diferencias a favor de las
aplicaciones en bandas.
Entre los organismos y microorganismos solubilizadores del fósforo del suelo, podemos mencionar varios
grupos como los hongos (Penicillium, Sclerotium y Fusarium) todos ellos con una gran capacidad
solubilizadora. Otro grupo de microorganismos solubilizadores es el de los Actinomicetes (Streptomices) que
presentan como característica distintiva la producción de antibióticos y su difícil cultivo y multiplicación a nivel
industrial. Finalmente encontramos numerosos grupos bacterianos y entre ellos el género Pseudomonas sp es
el que ha manifestado mayor capacidad solubilizadora del mineral y mayor producción de fitohormonas que
inducen a un gran desarrollo radicular.
Esta alta capacidad solubilizadora es llevada adelante a través de diferentes estrategias según se trate del
fósforo orgánico o del fósforo inorgánico del suelo. En el primer caso las bacterias generan enzimas del tipo
fosfatasa que hidrolizan los enlaces orgánicos fosfatados liberando aniones fosfato a la solución del suelo de
donde los microorganismos y las raíces de las plantas se nutren. En el caso del fósforo inorgánico su
solubilización es lograda por las bacterias a través de la producción de ácidos orgánicos como el ácido
glucónico que libera fosfatos y cationes de Ca++, Fe++ y Al++ a la solución del suelo.

Para el suelo erosionado obtuvimos una cantidad considerable de microorganismos solubilizadores del fósforo
a pesar de que esperábamos que esto no fuera así, esto puede deberse a que a pesar de que es un suelo
erosionado, está en proceso de recuperación, por lo que los requerimientos de fósforo asimilable son
mayores.

Bibliografía:

DANIELS, L. & GALBRAITH, J. (2007), Advanced Wetland Soils and Mitigation, Virginia Tech.
AGUILAR, J.; MARTINEZ, A.; ROCA, A. Evaluación y manejo de suelos. Univ. de Granada. 1996.
ALBADALEJO, J.; STOCKING, M. A.; DIAZ, E. Degradación y regeneración del suelo en condiciones
ambientales mediterráneas. Cons. Sup. Investig. Científicas. Murcia. 1990.
ALMOROX, J.; DE ANTONIO, R.; SAA, A.; DIAZ, M. C.; GASCO, J. M. Métodos de estimación de la erosión
hídrica. Agrícola Española. Madrid. 1994.
http://www.oni.escuelas.edu.ar/2005/ENTRE_RIOS/980/fosforo.html (consultado el 10/Abril/2014 1:45 am)
http://www.engormix.com/MA-agricultura/maiz/articulos/bacterias-solubilizadoras-fosforo-t2073/417-p0.htm
(consultado el 9/abril/2014 11:40 pm)