LAPORAN RESMI PRAKTIKUM BIOANALISIS

PRAKTIKUM 3
PENETAPAN KADAR KREATININ DALAM URIN
Disusun oleh :
Alfianita (G1F011031)
Desy Damayanti (G1F011033)
Rahmi Kania Soraya (G1F011035)
Farah Maestri Diani (G1F011037)
JURUSAN FARMASI
FAKUKTAS KEDOKTERAN DAN ILMU-ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN
PURWOKERTO
2014
PENETAPAN KADAR KREATININ DALAM URIN
I. Tujua P!"#$%aa
Melauan !eneta!an a"ar reatinin "alam urin "en#an men##unaan meto"e $affe
tan!a "e!roteinisasi%
II. P!&a'u(ua
Kreatinin meru!aan !ro"u !en#uraian eratin% Kreatin "isintesis "i hati "an
ter"a!at "alam ham!ir semua otot ran#a yan# &eriatan "en#an "alam &entu reatin fosfat
('reatin !hos!hate( )*)( suatu senya+a !enyim!an ener#i% Dalam sintesis A,* (a"enosine
tri!hos!hate) "ari AD* (a"enosine "i!hos!hate)( reatin fosfat "iu&ah men-a"i reatin
"en#an atalisasi en.im reatin inase ('reatin inase( )K)% Seirin# "en#an !emaaian
ener#i( se-umlah e'il "iu&ah se'ara ire/ersi&el men-a"i reatinin( yan# selan-utnya "ifiltrasi
oleh #lomerulus "an "iesresian "alam urin (0ara"ero( 1005)%
$umlah reatinin yan# "ieluaran seseoran# setia! hari le&ih &er#antun# !a"a massa
otot total "ari!a"a ati/itas otot atau tin#at meta&olisme !rotein( +alau!un e"uanya -u#a
menim&ulan efe% *em&entuan reatinin harian umumnya teta!( e'uali -ia ter-a"i 'e"era
fisi yan# &erat atau !enyait "e#eneratif yan# menye&a&an erusaan masif !a"a otot
(0ara"ero( 1005)%
Meto"e $affe a"alah yan# !alin# umum "i#unaan 'ara !enentuan reatinin en"o#en
arena "i!ro"usi "alam tu&uh manusia "an !eneta!an "a!at "ilauan "en#an murah( sta&il
"an *hotometer rea#en% Meto"e ini mem!unyai ele&ihan yaitu se"erhana( murah( mu"ah(
!ratis( 'e!at( "an "a!at "i&a'a !a"a !an-an# #elom&an# yan# tin##i tan!a inter/ensi%
Se"an#an euran#annya a"alah meto"e ini uran# s!esifi( sehin##a a"ar yan# teruur
ti"a hanya reatinin sa-a( teta!i -u#a romo#en2romo#en lain( se!erti asam asor&at(
#luosa( aseton( asam2asam eton (misal : asetoasetat "an !iru/at)( "an o&at2o&atan (misal :
#uani"in "an 'e!halos!orin)% 3ntu meminimalisir !en#aruh senya+a2senya+a terse&ut(
maa "ilauan &e&era!a mo"ifiasi( antara lain :
1% *resi!itasi4 *en#en"a!an( untu meminimalisir !en#aruh !rotein%
1% Reasi !em&entuan om!les "en#an &orat( untu meminimalisir !en#aruh #luosa
"an asam asor&at%
3% 5n e6'han#e%
(Sian#!roh et al%( 1007)%
III. P")*)+ Aa()*)*
*emerisaan urin untu men#etahui a"ar reatinin &iasanya men##unaan meto"e
$affe Kineti% Meto"e ini "itemuan !ertamna ali oleh $affe tahun 1889% Reasi $affe
&er"asar !a"a reasi antara reatinin "an !irat !a"a suasanan &asah yan# aan mem&entu
+arna merah orannye "an ter-a"i !eru&ahan a&sor&si !a"a !an-an# #elom&an# antara 505 nm
"an 510 nm% *enentuan a"ar reatinin ini san#at !entin# untu "ilauan untu menun-uan
ea"aan fun#si #in-al% *rinsi! "asar "ari reasi $affe a"alah reasi antara reatinin "en#an
!irat "alam suasana alali tan!a "e!roteinasi( mem&entu om!les reatinin !irat
&er+arna -in##a "an "iuur men##unaan s!etrofotometer /isi&el !a"a !an-an# #elom&an#
:71 nm (Sian#!roh et al%( 1007)%
IV. Ba'a &a M!,$&!
Alat yan# "i!erluan untu !ratium ini a"alah ta&un# reasi( ( !i!et uur(
filler( miro!i!et( !lat ;<=SA( ;<=SA rea"er "an &eaer #lass%
0ahan yan# "i!erluan untu !ratium ini a"alah sam!el (urin)( rea#en 1 (so"ium
hi"rosi"a)( rea#en 1 ( asam !irat)( stan"ar reatinin "an a>ua"est%
V. P"$*!&u" K!"ja
Stan"ar
2 Di'am!ur
2 Diam&il 100 ?<
2 Ditam&ah rea#en 1 se&anya 1 ml
2 Di"iaman 5 menit
2 Ditam&ahan 150 ?< rea#en 1
2 Di&a'a a&sor&ansi A1 setelah 90 "eti "an A1 setelah 110 "eti
Sam!el
2 Di'am!ur
2 Diam&il 100 ?<( "imasuan e "alam ta&un# reasi
2 Ditam&ahan 1 ml rea#en 1
2 Di"iaman selama 5 menit
2 Ditam&ahan 1(5 ml rea#en 1
2 Di&a'a a&sor&ansi A1 setelah 90 "eti "an A1 setelah 110 "eti
:70 ?< a>ua"es @ 10 ? stan"ar reatinin
0(1 ml urin @ 7(8 ml air
<arutan sam!el
Aasil
Aasil
VI. Da,a P!-a.a,a &a P!"'),u-a
A =
Stan"ar B 0(157 C 0(039 B 0(113
A&ner R1 B 0(191 C 0(039 B 0(119
R1 B 0(079 C 0(039 B 0(0:
R3 B 0(177 C 0(039 B 0(1:3
A#un#( R1 B 0(193 C 0(039 B 0(117
R1 B 0(181 C 0(039 B 0(1:9
R3 B 0(333 C 0(039 B 0(177
A ==
Stan"ar B 0(190 C 0(039 B 0(11:
A&ner R1 B 0(181 C 0(039 B 0(1:9
R1 B 0(081 C 0(039 B 0(0:5
R3 B 0(309 C 0(039 B 0(17
A#un#( R1 B 0(307 C 0(039 B 0(173
R1 B 0(331 C 0(039 B 0(179
R3 B 0(377 C 0(039 B 0(393
A&ner A#un#
Re!lia A = A ==
1 0(119 0(1:9
1 0(0: 0(0:5
3 0(1:3 0(17
Konsentrasi reatinin B
A&ner
R1 B B :0
R1 B B 10
R3 B B 5:
A#un#
R1 B B 71
R1 B B 100
R3 B B 131
Rata C rata
A&ner B B 3:(97
A#un# B B 108
Kon/ersi
A&ner B B 309:(818
A#un# B B 75:7(1
VII. P!.%a'a*a (farah @ "esy)
*emerisaan urin untu men#etahui a"ar reatinin &iasanya men##unaan meto"e
$affe Kineti% Meto"e ini "itemuan !ertamna ali oleh $affe tahun 1889% Reasi $affe
&er"asar !a"a reasi antara reatinin "an !irat !a"a suasanan &asah yan# aan mem&entu
+arna merah orannye "an ter-a"i !eru&ahan a&sor&si !a"a !an-an# #elom&an# antara 505 nm
"an 510 nm% *enentuan a"ar reatinin ini san#at !entin# untu "ilauan untu menun-uan
ea"aan fun#si #in-al% *rinsi! "asar "ari reasi $affe a"alah reasi antara reatinin "en#an
!irat "alam suasana alali tan!a "e!roteinasi( mem&entu om!les reatinin !irat
&er+arna -in##a "an "iuur men##unaan s!etrofotometer /isi&el !a"a !an-an# #elom&an#
:71 nm (Sian#!roh et al%( 1007)%
M$$-"a/)
1% A>ua"es
Rumus moleul :A15
0erat moleul : 18(01 #4mol
Air murni a"alah air yan# "imurnian yan# "i!eroleh "en#an "estilasi( !erlauan
men##unaan !enuar ion( osmosis &ali atau !roses lain yan# sesuai% Di&uat "ari air yan#
memenuhi !ersyaratan air minum "an ti"a men#an"un# .at tam&ahan lain% Densitas 0(778
#4'mD "alam fase 'airan "an 0(71 #4'mD "alam fase !a"atan% ,iti le&urnya 0 E) (173(15 K)
(31 FF) "an titi "i"ihnya 100 E) (373%15 K) (111 FF)%
*emeriaan : 'airan -ernih( ti"a &er+arna( ti"a &er&au "en#an !A antara 5(0 2 7(0%
Ga"ah "an !enyim!anannya : "alam +a"ah tertutu! ra!at ( Anonim( 1775)%
1% Asam *irat
Asam !irat atau 1(:(92trinitro!henol (,H*) ialah senya+a trinitroaromati yan#
&ersifat es!losif "an mu"ah ter&aar "alam ea"aan erin#% Den#an lo#am mem&entu
lo#am !irat% Asam !irat &er+u-u" ristal unin# !u'at ta &er&au( se"iit larut "alam air
"an sensitif terha"a! air "an #on'an#an% Ketia "i&asahi "en#an 30I air( asam !irat
&eru&ah +arna men-a"i !a"atan ristal oran#e% Ketia "ilarutan "alam !elarut or#ani
mem&entu larutan &er+arna unin# 'erah% Asam !irat mu"ah ter&aar &ila "i&asahi "en#an
30I air "an san#at mu"ah mele"a &ila ehilan#an elem&a!an se&esar 30I% Asam !irat
&ersifat tosi "an meru!aan iritan &a#i ulit% Rumus moleulnya )9A3H357( elarutan
"alam air 11%7 #J<K1 "an massa molarnya 117%10 #JmolK1 (Anonim( 1775)%
3% Hatrium Ai"rosi"a (Ha5A)
Rumus moleul : Ha5A
0erat moleul : :0(0 #4mol%
Ha5A men#an"un# : ti"a uran# "ari 75(0I "an ti"a le&ih "ari 100(5I alali -umlah(
"ihitun# se&a#ai Ha5A( men#an"un# Ha1)53 ti"a le&ih "ari 3(0I%)% Ha5A "a!at merusa
-arin#an "en#an 'e!at%
*emerian : !utih atau !ratis !utih( massa mele&ur( &er&entu !ellet( ser!ihan atau &atan#
atau &entu lain( eras( ra!uh "an menun-uan !e'ahan ha&lur% 0ila "i&iaran "i u"ara aan
'e!at menyera! ar&on "iosi"a "an lem&a!% Ha5A mu"ah larut "alam air "an "alam etanol%
Kelarutan : mu"ah larut "alm air "an "alam etanol
Ga"ah "an !enyim!anannya : "alam +a"ah tertutu! ra!at (Anonim( 1775)%
:% Kreatinin
Kreatinin a"alah !ro"u ata&olisme "ari eratin fosfat yan# a"a "i "alam otot% Aasil
ata&olisme terse&ut memilii nilai yan# onstan "alam tia! in"i/i"u setia! harinya%
Kreatinin san#at &er#antun# "ari massa otot% Se'ara imia+i( reatinin meru!aan "eri/at
"ari reatin% 0iosintesis reatin sen"iri -u#a &erasal "ari #lisin( ar#inin( "anmetionin%
*emin"ahan #u#us #uani"ino "ari ar#inin e!a"a #lisin( yan# mem&entu senya+a
#uani"oasetat (#liosiamina)( &erlan#sun# "i "alam #in-al "an ti"a ter-a"i "i hati atau otot
-antun#% Sintesis reatin "iselesaian le+at reasi metilasi #uani"oasetat oleh senya+a S2
a"enosilmetionin "i hati%
0a"a K!"ja
*er'o&aan ini "ilauan "en#an men##unaan urin% Sam!el yan# "i#unaan untu
!en#uuran a"ar reatinin yaitu se&anya 100 Ll "itam&ah 7(8 ml a>ua"es% Setelah itu
"i!in"ahan !a"a 3 ta&un# reasi masin#2masin# 100 Ll% Kemu"ian "itam&ah "en#an 1000
Ll (1 ml) rea#en 1 (so"ium hi"rosi"a) "an "i"iaman selama 5 menit% *enam&ahan so"ium
hi"rosi"a "i#unaan se&a#ai &uffer untu men'i!taan !A alali atau &asa% *en"iaman
selama 5 menit "imasu"an a#ar !roses reasi !en#alalian &er-alan sem!urna% Kemu"ian
"itam&ah "en#an 150 Ll rea#en 1 (asam !irat) "an "iam&il se&anya 300Ll e !lat ;<=SA%
*en#uuran a&sor&ansi !ertama "ilauan setelah "i"iaman 90 "eti( "an *en#uuran
a&sor&ansi !ertama "ilauan setelah "i"iaman 190 "eti% *en"iaman "imasu"an a#ar
reasi &er-alan sem!urna sehin##a ter&entu om!les &er+arna oranye emerahan antara
reatinin "en#an larutan alali !irat% Reasi yan# ter-a"i antara reatinin "alam suasana
alali "en#an asam !irat a"alah :
*em&uatan stan"ar "ilauan "en#an 'ara 10 Ll "itam&ah :70 Ll( "iam&il 100 Ll e
"alam ta&un# reasi% Setelah itu "itam&ahan rea#en 1 (so"ium hi"rosi"a) "an "i"iaman
selama 5 menit% *enam&ahan so"ium hi"rosi"a "i#unaan se&a#ai &uffer untu men'i!taan
!A alali atau &asa% *en"iaman selama 5 menit "imasu"an a#ar !roses reasi !en#alalian
&er-alan sem!urna% Kemu"ian "itam&ah "en#an 150 Ll rea#en 1 (asam !irat) "an "iam&il
se&anya 300Ll e !lat ;<=SA% *en#uuran a&sor&ansi !ertama "ilauan setelah "i"iaman
90 "eti( "an *en#uuran a&sor&ansi !ertama "ilauan setelah "i"iaman 190 "eti%
*en#uuran a&sor&ansi men##unaan ;<=SA rea"er !a"a !an-an# #elom&an# :70
nm% Meto"e yan# "i#unaan ini a"alah meto"e $affe% Reasi $affe meru!aan reasi se'ara
olorimetri yan# se"erhana "an mu"ah% Meto"e ini "i"asaran !a"a !em&entuan senya+a
&er+arna merahCoranye yan# ter-a"i antara asam !irat "en#an reatinin "alam suasana &asa
(Sian#!roh et al%( 1007)%
Aasil a&sor&ansi yan# "i!eroleh
A&ner A#un#
Re!lia A = A ==
1 0(119 0(1:9
1 0(0: 0(0:5
3 0(1:3 0(17
Ha*)( 1* L),!"a,u"
Analisis a"ar reatinin "alam tu&uh meru!aan in"es me"is yan# !entin# untu
men#etahui on"isi la-u filtrasi #lomerulus( ea"aan #in-al( "an &erfun#sinya er-a otot%
<ai2lai memilii a"ar reatinin yan# tin##i arena massa ototnya yan# le&ih &esar
"i&an"in#an +anita% Ana2ana memilii a"ar reatinin yan# le&ih ren"ah "i&an"in#an
"e+asa arena iner-a #in-al yan# &elum masimal% 5ran#2oran# /e#etarian menun-uan
reatinin yan# ren"ah -u#a "i "alam tu&uhnya% Diarenaan a"arnya yan# onstan "alam 1:
-am( maa esresi reatinin melalui urin 1: -am "a!at "i!aai untu men#hitun# massa otot
suatu in"i/i"u% (Sulistyarti et al.( 1011)%
*ro&an"us yan# "i!erisa a"ar reatinin urinnya a"alah lai2lai% Aasil yan#
"i!eroleh "ari !er'o&aan ini antara lain( a"ar reatinin yan# teruur "alam urin A&ner B
3:(97 m#4"< "an a"ar reatinin yan# teruur "alam urin A#un# B 108 m#4"<% Se"an#an
a"ar reatinin yan# normal a"alah se&a#ai &eriut :
S!.a2) *!&)2),
*)a" 3a-
&),!"u*2a.a2a
a-2a
+!.%a#aa
*!.a2) %!*a"
0er"asaran "ata terse&ut( a"ar reatinin "alam urin !a"a !er'o&aan ti"a normal(
arena nilainya mele&ihi nilai normal !a"a lai2lai "e+asa( yaitu antara 0(9 C 1(3 m#4"<%
Dari nilai reatinin yan# normal "a!at "itari esim!ulan &ah+a urin yan# "i#unaan !a"a
!er'o&aan emun#inan men#alami #an##uan fun#si esresi !a"a #in-alnya% Hamun( hasil
terse&ut "a!at -u#a arena &e&era!a fator yan# mun#in ter-a"i !a"a meto"e !enentuan
reatinin 'ara tan!a "e!roteinasi se!erti :
a% *en'am!uran rea#en er-a ti"a "en#an !er&an"in#an 1 : 1 yan# men#ai&atan hasil
tin##i !alsu%
&% A"anya #an##uan terha"a! &iliru&in( ureum( !rotein yan# men#ai&atan hasil tin##i
!alsu%
(Syl/ia( 177:)
K!*).+u(a
1% *eneta!an a"ar reatinin "en#an meto"e s!etrofotometri /isi&el harus melalui
reasi olorimetri terle&ih "ahulu( a#ar reatinin men-a"i senya+a &er+arna "an
"a!at "itentuan a"arnya "en#an s!etrofometer /isi&el%
1% *rinsi! "ari reasi olorimetri "en#an meto"e -affe a"alah reasi antara asam !irat
"en#an reatinin mem&entu om!les !irat2reatinin yan# &er+arna -in##a "alam
suasana &asa%
3% Ka"ar reatinin yan# teruur "alam urin A&ner B 3:(97 m#4"< "an a"ar reatinin
yan# teruur "alam urin A#un# B 108 m#4"<% Hilai terse&ut "inyataan se&a#ai ti"a
normal !a"a lai2lai "e+asa arena mele&ihi nilai normal( yaitu 0(921(3 m#4"<%
K!*).+u(a (alfianita)
Da/,a" Pu*,a2a (semua)
Anonim% 1775% Farmakope Indonesia Ed. IV% $aarta : De!artemen Kesehatan Re!u&li
=n"onesia%
0ara"ero( Mary( et al% 1005% Klien Gangguan Ginjal% $aarta : ;G)%
Sian#!roh(G%( H% ,eshima( ,% Saai( S% Katoh( 5% )haila!aul( 1007( Alternative Method for
Measurement of Albumin/reatinine !atio "sing #pe$trophotometri$ #e%uential
Inje$tion Anal&sis(,alanta( 77:111121117
Syl/ia M <orraine% 177:( 'atofisiologi( Konsep Klinis 'roses 'en&akit( *ener&it 0uu
Ke"oteran( $aarta
Sulistyarti( A%( Sa&aru"in( A%( =stanti( N%=%( Gulan"ari( ;%R%H%( 1011( 'enentuan Kreatinin
)alam "rin #e$ara Kolorimetri dengan #e%uential Inje$tion*Flo+ !eversal Mi,ing
-#I*F!M.( Sains "an ,era!an Kimia( Ool%5( Ho% 1 ($uli 1011)( 70277
LAMPIRAN (alfianita)
A% Soal <atihan
0% Foto