Introducere

Prevenirea leziunilor oxidative constituie un

obiectiv major al cercetrilor actuale, deoarece
stresul oxidativ este responsabil de numeroase
afeciuni inflamatorii, degenerative i neoplazice
care afecteaz toate organele i esuturile.
Ca i n cazul celorlalte organe, capacitatea
funcionala a pielii se deterioreaz n condiii pa-
tologice. Eliberarea exagerat a speciilor reactive
de oxigen (ROS) i a speciilor reactive de azot
(RNS), urmat de modificarea oxidativ a
lipidelor, proteinelor i acizilor nucleici contribuie
la pierderea homeostaziei celulare (1, 2, 3)
n mod normal, n keratinocitele i fibro-
blastele dermice sunt generate constant ROS i
RNS, specii care sunt rapid eliminate de anti-
oxidani neenzimatici (acid ascorbic, acid urocanic,
melanoproteine, tocoferol, ubichinol, glutation)
sau enzimatici (catalaza, superoxid dismutaze,
tioredoxin-reductaze, glutation-peroxidaze, glu-
tation-reductaze).
Modularea cilor de restabilire a echilibrului
redox intracelular, identificarea unor compui
147
DISTRIBUIA SELENIULUI N ORGANISM
LA BOLNAVII CU CARCINOAME CUTANATE
SORINASCHIPOR*, ILINCANICOLAE**, MARILENACIORTEA**,
C. CIORTEA****, CECILIATHOMESCU**
Bucureti
DermatoVenerol. (Buc.), 53: 147-151
Summary
Recent data suggests an important role, to produce
and/or protect, of oligoelements in carcinogenesis. In
neoplasia arise changes in oligoelements (quantitative
variations and changes of their interrelations).
In this study, selenium biodistribution, in normal and
pathological states, is evaluated considering cancer
dynamics. For biochemical determinations were used
serum, blood cells, urine, and tissues fragments obtained
after surgery.
Modulating pathways to selenium status equilibrium
and identification of some chemical compounds that could
prevent free radicals induced cell lysis, represent the
strategy of research in this study.
Key words: selenium, glutation peroxidase activity,
skin carcinomas.
*
Institutul Naional de Endocrinologie C. I. Parhon, Bucureti.
**
Spitalul Clinic de Dermato- Venerice Prof. Dr. Scarlat Longhin, Bucureti.
***
Facultatea de Medicin, U.M.F. Carol Davila, Bucureti.
****
Institutul Naional de Cercetare pentru Fizic i Inginerie Nuclear Horia Hulubei, Bucureti.
Rezumat
Datele acumulate pn n prezent n literatura de
specialitate sugereaz rolul important al microelementelor,
cauzal sau protectiv, n carcinogenez. n contextul
existenei neoplaziei apar modificri ale microelementelor
(variaii cantitative i tulburri ale interdependenei lor).
Biodistribuia seleniului, n condiii normale i
patologice, este analizat n acest studiu innd cont de
procesul dinamic al bolii canceroase. Determinrile s-au
facut n ser, celule sangvine, urin, pe fragmente de organe
dup efectuarea interveniilor chirurgicale.
Modularea cilor de restabilire a statusului seleniului
n organism, identificarea unor compui care s previn
distrucia indus de radicalii liberi constituie strategia
cercetrilor expuse n aceast lucrare.
Cuvinte cheie: seleniu, activitate glutation peroxidazic,
carcinoame cutanate.
STUDII CLINICE I EXPERIMENTALE
care s previn distrucia indus de radicalii
liberi, constituie strategia cercetrilor expuse n
aceast lucrare.
Un rol important n contracararea radicalilor
liberi revine selenoproteinelor, motiv pentru care
prezentm n continuare activitile biologice ale
acestor proteine i abordrile experimentale n
contextul bolii neoplazice.(4, 5, 6, 7, 8, 9)
Superfamilia de selenoproteine cuprinde
peste 30 de selenoproteine:
selenoenzime implicate n aprarea
antioxidant i reglarea redox (GPx, TRx
reductaze, metionin sulfoxidreductaze)
care reprezint forma activ a seleniului;
iodotironin deiodinaze selenoenzime
implicate n metabolismul hormonilor
tiroidieni;
proteine ce asigur transportul seleniului
la esuturile periferice selenoproteina P
(SeP) plasmatic.
Funciile biologice ale selenoproteinelor ( 4, 5,
7, 9) sunt:
- aciunea antioxidant;
- reglarea statusului redox;
- reglarea metabolismului hormonilor
tiroidieni.
Seleniul este implicat, prin intermediul
selenoproteinelor (2, 3) n:
- creterea celular, apoptoz, semnalizare
celular;
- aciunea factorilor de cretere;
- fertilitate, funcia endocrina;
- funcia imun, moderarea rspunsului
inflamator;
- prevenia cancerului, a bolilor cardio-
vasculare i a mutatiilor virale;
- dezvoltarea strilor neurovegetative.
O atenie deosebit este acordat glutation-
peroxidazelor (GPx; EC 1.11.1.9), selenoproteine
care catalizeaza conversia H
2
O
2
, la H
2
O i O
2
molecular, folosind glutationul drept cosubstrat.
Au fost caracterizate cinci glutation peroxidaze
seleniu-dependente la mamifere ( 4, 6, 8 ).
Pentru evaluarea interrelaiei seleniu
activitate glutation-peroxidazic proces neoplazic,
obiectivele acestui studiu sunt urmtoarele:
determinarea distribuiei seleniului n
organism n cursul bolii canceroase;
evaluarea activitii peroxidazice n ser,
eritrocite i esut la pacienii cu cancer
cutanat, comparativ cu grupul de control;
analiza statistic a datelor experimentale.
Materiale. Metode
Au fost inclui n studiu 96 bolnavi cu
formaiuni cutanate precanceroase (7 cazuri cu
boala Bowen, 10 cazuri cu keratoacantom) i
maligne (37 cazuri cu carcinom bazocelular
(BCC), 42 cazuri cu carcinom spinocelular (SCC)),
la care diagnosticul clinic a fost confirmat prin
examene paraclinice. n studiu a fost inclus i un
grup control constituit din 30 de subieci.
Studiile experimentale privind coninutul de
seleniu din ser, urin i esuturi s-au fcut prin
metode fizice de analiz (INAA, PIXE) n cadrul
Institutului National de Cercetare Dezvoltare
pentru Fizic i Inginerie Nuclear Horia
Hulubei, Bucureti.
Determinarea activitilor glutation-peroxi-
dazice n ser, lizat eritrocitar i omogenat tisular s-
a fcut prin metode spectrofotometrice la Centrul
Naional Dermatovenerian din cadrul Spitalului
Clinic de Dermato-venerice Prof. Dr. Scarlat
Longhin, Bucureti.
Analiza statistic a datelor a fost realizat
folosind Microsoft Office Excel 2003 Analysis Tool
Pack. Studiul comparativ referitor la concen-
traiile seleniului la grupurile luate n studiu a
fost realizat folosind testul Mann-Whitney (testul
U). Numai valorile p<0.05 au fost considerate
semnificative statistic.
Rezultate
n patologia cutanat se cunosc pn n
prezent puine date privind dinamica seleniului
n organism. n acest studiu privind biodistribuia
seleniului la bolnavii cu patologie cutanat, s-a
constatat c serul bolnavilor cu keratoacantom i
maladia Bowen nu conine mai puin seleniu
comparativ cu serul lotului martor (141 2.6 vs.
1383.7 g/L ser, Uc = 1.5, p = 0.13, NS, la
pacienii cu keratoacantom, respectiv 139 1.2 vs.
138 3.7 g/L ser, Uc = 0.58, p > 0.05, NS, la
pacienii cu boala Bowen).
Seleniul din serul bolnavilor cu carcinoame
cutanate (BCC i SCC) este semnificativ sczut
fa de cel constatat la lotul martor (126 4.5
148
DermatoVenerol. (Buc.), 53: 147-151
g/L ser vs. 138 3.7 g/L ser, Uc = 4.76, p <
0.001, respectiv 123 6.3 vs. 138 3.7 g/L ser, Uc
= 5.57, p < 0.001).
Carena de seleniu a fost observat cel mai
mult la 3 pacieni cu carcinom spinocelular
avansat la care s-a nregistrat i un nivel sczut al
proteciei antioxidante. Acest fapt sugereaz c
deficitul de seleniu se instaleaz lent la pacienii
cu cancer cutanat, nregistrndu-se valori foarte
sczute la pacienii cu metastaze (89 1.4 vs. 138
3.7 g/L ser, Uc = 17.15, p < 0.0001).
Eliminarea seleniului prin urin la bolnavii cu
patologie cutanat nu prezint variaii semni-
ficative (Uc = 0.51, p > 0.05). (tabelul nr. 2)
Studiile experimentale arat o legtur
direct ntre cantitatea de seleniu din diet i
nivelul urinar al acestuia (10). Eliminarea
seleniului prin fecale nu se coreleaz cu nivelul
micronutrientului amintit. Pe baza acestor
observaii, se poate considera c rinichiul are
rolul major n eliminarea excesului de seleniu
furnizat din alimente.
n esuturile tumorale, concentraia seleniului
este crescut comparativ cu nivelul acestui
microelement n esutul cutanat normal (tabelul
nr. 3). Datele obinute arat c n leziunile
precanceroase i tumorile maligne se nregis-
treaz valori crescute ale seleniului comparativ cu
esutul sntos. Se observ creteri ale seleniului
de 1,94 ori n keratoacantom, de 1,77 ori n boala
Bowen, respectiv 2,24 n carcinom bazocelular i
2,97 n carcinom spinocelular, fa de esutul
peritumoral neimplicat n transformare.
Aceste rezultate nu lmuresc interdependena
presupus iniial ntre dezvoltarea procesului
tumoral i cantitatea de seleniu din diferite
compartimente ale organismului. Faptul c acest
microelement se acumuleaz n esutul tumoral
reflect alterarea unor funcii metabolice la acest
nivel, diferite ca intensitate de cele din esutul
normal. n acest context, determinarea activitii
glutation-peroxidazice oglindete mai fidel rolul
seleniului n metabolismul tumoral. Sinteza
datelor referitoare la activitile glutation
peroxidazice din serul pacienilor cu tumori
cutanate este prezentat n tabelul nr. 4.
Se constat c n tumorile spino- i
bazocelulare activitile antioxidante sunt reduse.
Analiza statistica a datelor obtinute a
demonstrat c nu exist diferene semnificative
ntre valorile serice ale parametrilor studiati
(activitatea seric a glutation-peroxidazei, sele-
niul seric) la pacienii cu keratoacantom i
valorile de la lotul de subieci normali (tabel nr.
4). Nu s-au constatat modificri semnificative ale
activitii GPx nici la pacienii cu boala Bowen. n
schimb, s-au obtinut corelaii pozitive, semni-
ficative statistic, ntre activitatea seric a GPx de
la pacienii cu carcinom bazocelular versus
control, respectiv la pacienii cu carcinom spino-
celular versus control.
149
DermatoVenerol. (Buc.), 53: 147-151
Tabelul 1. Valorile seleniului n ser la bolnavi cu tumori
cutanate nonmelanotice comparativ cu valorile lotului martor
Lotul Nr. cazuri Se (g/L ser) Valoarea p
de studiu
Control 30 138 3.7
Kerato- 10 141 2.6 p = 0.13, NS
acantom
Bowen 7 139 1.2 p > 0.05, NS
BCC 37 126 4.5 p< 0.001
SCC 42 109 16.3 p< 0.001
Tabelul 3. Distribuia Se (g/g esut liofilizat) n esuturi
tumorale vs. esuturi normale
Lotul Nr. cazuri Se Valoarea p
de studiu (g/g esut)
Control 30 5.41 3.1
Kerato- 10 10.54 2.1 p < 0,05
acantom
Boala Bowen 17 9.62 3.7 p < 0,05
BCC 37 12.17 4.1 p< 0.001
SCC 42 14.87 6.2 p< 0.001
Tabelul 4. Activiti glutation peroxidazice determinate
n serul bolnavilor cu tumori cutanate comparativ
cu lotul martor
Lotul Nr. cazuri GPx (U/L) Valoarea p
de studiu
Control 30 218.6 12,3
Kerato- 10 220.3 16.5 p > 0.05, NS
acantom
Bowen 7 214.1 10.2 p > 0.05, NS
BCC 37 196.2 14.5 p< 0.0001
SCC 42 174.9 20.8 p< 0.0001
Tabelul 2. Excreia urinar a Se la pacieni cu tumori cutanate
Lot Nr. Pacieni Se (g/L)
Control 5 43. 6 8.3
Tumori 11 41.1 10.7
nonmelanotice
Monitorizarea pacienilor cu carcinom spino-
celular a evideniat valori semnificativ modificate
ale seleniului i ale activitii glutation pero-
xidazice. La pacienii cu carcinom spinocelular
nivelul seleniului este semnificativ sczut, valori
constatate i pentru activitatea glutation-
peroxidazic.
innd cont de faptul c n eritrocite se
gsete o cantitate important de seleniu, loc n
care sunt prezente i principalele enzime
antioxidante, s-a determinat activitatea glutation
peroxidazic n lizatul eritrocitar (tabelul 5). Se
observ o scdere accentuat a proteciei
antioxidante manifestat prin scderea activitii
citoprotectoare la pacienii cu carcinoame
cutanate comparativ cu pacienii cu stri
precanceroase i martori.
Activitatea glutation peroxidazic este slab
exprimat n celulele canceroase comparativ cu
leziunile precanceroase i tesutul cutanat normal
(tabelul 6).
Discuii
Reinerea sau redistribuirea seleniului n
esuturi este un proces preferenial. Keratinocitele
exprim deiodinaze, iar tioredoxinreductazele
sunt prezente n fibroblaste, keratinocite i
melanocite. Depleia de seleniu scade activitatea
deiodinazelor i reduce numrul celulelor
Langerhans din piele i afecteaz imunitatea
cutanat i protecia fa de UV. Concentraii mici
de selenit sau selenometionin protejeaz
keratinocitele i melanocitele de moartea celular
indus de UVB in vivo. (1, 4, 9, 15, 16)
Seleniul si selenoproteinele au un rol
important n evoluia unui proces tumoral (3, 5,
7). Glutation-peroxidazele catalizeaz reducerea
diferiilor hidroperoxizi utiliznd capacitile
antioxidante ale tiolilor i ale seleniului. Valori
sczute ale glutation-peroxidazei modific statusul
redox intracelular si determina acumularea H
2
O
2
si a peroxizilor fosfolipidici. Excesul de apa
oxigenata amplifica reactia Fenton si genereaza
radicali hidroxili foarte toxici. Alterarea activitatii
si expresiei selenoproteinelor intracelulare creste
riscul de malignizare a leziunilor displazice (10,
11, 12).
Seleniul influeneaz dezvoltarea cancerului
prin reducerea proliferrii celulare, iniierea
apoptozei, protejarea DNA fa de lezarea
oxidativ (2, 5). Valori mari ale seleniului seric
sunt asociate cu un risc redus de a dezvolta
adenocarcinom esofagian la persoanele cu esofag
Barrett, cancer esofagian spinocelular, gastric,
pulmonar, hepatic, pancreatic. Seleniul seric nu se
coreleaz cu markerii timpurii ai progresiei
tumorale, mutatiile 17p(p53)LOH i 9p(p16)LOH.
Seleniul acioneaza n stadiile trzii ale progresiei
neoplazice. Alte studii au dovedit eficiena
compuilor cu seleniu n inhibiia carcinogenezei
colonului, ficatului, glandelor mamare, cance-
rului de piele (3, 4).
Inducerea apoptozei n celulele transformate
este un important mecanism chemopreventiv.
Apoptoza poate fi declanat la concentraii
micromolare de seleniu n celulele cu fenotip p53
null. Seleniul inhib cdk2 (cell cycle protein
kinase) i PKC i induce formarea aductelor prin
modificarea resturilor de cistein din proteine i
formarea tranzitorie a intermediarilor reactivi ai
seleniului (S-Se-S, S-Se, S-S) (2, 3, 6).
Un alt mecanism chemopreventiv facilitat de
seleniu este reprezentat de formele reversibile
SH/-S-S care afecteaz proteinele cu activitate
redox i factorii de cretere. Exist incertitudini
legate de rolul selenoproteinelor n acest model
de chemoprevenie, concretizate n efectul
seleniului asupra sistemului tioredoxina/
tioredoxin reductaz. (13, 14). Reducerea tiore-
150
DermatoVenerol. (Buc.), 53: 147-151
Tabelul 5. Activitile glutation peroxidazei n hemolizat
la pacieni cu carcinoame cutanate vs. control
Grupul Nr. cazuri GPx Valoarea p
de studiu (U/mg Hb)
Control 30 183 31.5
Kerato- 10 186 47.2 p > 0.05, NS
acantom
Bowen 7 179 36.1 p > 0.05, NS
BCC 37 131 41.5 p< 0.001
SCC 42 99 38.5 p< 0.001
Tabelul 6. Nivelul activitatii glutation peroxidazice
din esutul tumoral vs. esut normal
Grup Nr. cazuri GPx Valoarea p
(U/g/esut)
Control 30 16.42 1.20
Kerato- 10 16.02 1.25 p > 0.05, NS
acantom
Bowen 7 15.90 2.14 p > 0.5, NS
BCC 37 10.80 1.55 p< 0.001
SCC 36 9.98 1.83 p< 0.001
doxinei, inactivarea tioredoxin reductazei i
formarea diselenitului induc rezistena celular la
reducere (8, 9).
Concluzii
Not: Elaborarea acestei lucrri s-a facut n
cadrul proiectului de cercetare Noi abordri n
studii biomedicale i de mediu, folosind metode
atomice i nucleare (SANBIMED -2- Cex-06-10-
78/26.07.2006) din care au fost finanate
cercetrile cuprinse n acest studiu.
Intrat n redacie: 29 august 2008
Bibliografie
1. Bhasin G, Kauser H, Athar M. Free radical
generating agents lead to the rapid progression of
benign skin tumors to carcinoma in iron-
overloaded mice, Arch Toxicol 2004, 78(3): 139-46.
2. Howard E. Ganther Selenium metabolism,
selenoproteins and mechanisms of cancer
prevention: complexities with thioredoxin
reductase, Carcinogenesis, vol. 20, no. 9, pp. 1657-
1666, 1999.
3. Klotz L.O., Kroncke K. D. Buchczyk D. P. and Sies
H. Role of Copper, Zinc, Selenium and Tellurium
in the Cellular Defense against Oxidative and
Nitrosative Stress, J. Nutr. 133: 1448S1451S, 2003.
4. Robinson M., Godfrey P., Thomson C., Rea H., and
van RzJ A. Blood selenium and glutathione
peroxidase activity in normal subjects and in
surgical patients with and without cancer in New
Zealand, Am. J. Clin. Nutr. 32: 1477-1485, 1979.
5. Burk R., Hill K. and Motley A. Selenoprotein
Metabolism and Function: Evidence for More than
One Function for Selenoprotein P, The American
Society for Nutritional Sciences J. Nutr. 133:1517S-
1520S, May 2003.
6. Rudolph R., Vaughan T., Kristal A., Blount P.,
Levine D., Galipeau P., Prevo L., Sanchez C.,
Rabinovitch P., Reid B. Serum Selenium Levels in
Relation to Markers of Neoplastic Progression
Among Persons With Barretts Esophagus, J Natl
Cancer Inst 2003;95:7507.
7. Saito Y, Takahashi K Selenoprotein P: its structure
and functions, Journal of Health Science, 46(6): 409-
413 (2000).
8. Saito Y., Hayashi T., Tanaka A, Watanabe Y, Suzuki
M, Saito E., Takahashi K, Selenoprotein P in human
plasma as an extracellular phospholipid hydro-
peroxide glutathione peroxidase, The Journal of
Biological Chemistry, vol. 274, no. 5, pp. 2866-2871,
1999.
9. Fu Y., Cheng W., Ross D., Lei X. Cellular
glutathione peroxidase protects mice against lethal
oxidative stress induced by various doses of
diquat, PSEBM, 1999, vol. 222, p. 164-169.
10. Gromadzinska J., Wasowicz W., Sklodowska M.,
Bulikowski W., and Rydzynski K. The Influence
of Atmospheric Chromium on Selenium Content
and Glutathione Peroxidase Activity in Blood of
Tannery Workers, Environmental Health Perspectives
Volume 104, Number 12, December 1996.
11. Koyigit, A. Erel O., Grel M., Seyrek A., Aktepe
N., Gr S., Avci S. Decreasing Selenium Levels
and Glutathione Peroxidase Activity in Patients
With Cutaneous Leishmaniasis, Tr. J. of Medical
Sciences 29 (1999) 291-295.
12. Richardson D. More roles for selenoprotein P:
local selenium storage and recycling protein in the
brain, Biochem. J. (2005) 386, e5e7.
13. Beckett G., Arthur J. Selenium and endocrine
systems, Journal of Endocrinology (2005) 184,
455465.
14. Kohrle J., Jakob F., Contempre B., Dumont JE
Selenium, the thyroid, and the endocrine system,
Endocrine Reviews, 26(7):944-984, 2005.
15. Pence B., Delver E., Dunn D. Effect of dietary
selenium on UVB-induced skin carcinogenesis and
epidermal antioxidant status, J Invest Dermatol, 102:
759-761, 1994.
16. Rafferty, T., Mckenzie R., Hunter J., Howie A.,
Arthur J., Nicol F. And Beckett G. Differential
expression of selenoproteins by human skin cells
and protection by selenium from UVB-radiation-
induced cell death, Biochem. J. (1998) 332, 231-236.
151
DermatoVenerol. (Buc.), 53: 147-151
Cunoaterea distribuiei microelementelor
n sisteme biologice este folositoare n
nelegerea fiziopatologiei cancerului. O scdere
a statusului seleniului pare fi o consecin i nu
o cauz a transformrii neoplazice. Blocarea
antagonitilor fiziologici ai seleniului i
selenoproteinelor ar putea influena eficiena
metabolic a seleniului.
Adresa de coresponden: Dr. Sorina Schipor
E-mail: sorina_schipor@yahoo.com
152
DermatoVenerol. (Buc.), 53: 147-151
COSMODERM ediia a XIII-a
Atena, 12-14 decembrie 2008
Organizatori: ESCAD mpreun cu Societatea Elen
de Dermatologie i Venerologie
Programul tiinific al manifestrii cuprinde toate subiectele
fierbini, noutile din domeniu i noile metode terapeutice
dermato-cosmetice. Obiectivul principal al evenimentului este de
a reui un echilibru ntre tiin i medicina estetica preventiv
i cea terapeutic. Invitai din toat Europa vor mprti
experiena lor n domenii actuale precum: lasere, toxina botulic,
fillere, peeling chimic i metode de ncetinire a mbtrnirii
pielii.
Pentru mai multe detalii, v recomandm s vizitai site-ul
oficial al Congresului:
http://www.cosmoderm2008.gr