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Laboratorio de Microbiología

PRÁCTICA NO.5
UROCULTIVO.
OBJETIVO.
mediante un lavado de los genitales externos,
El alumno conocerá la técnica de urocultivo aclarado con abundante agua y secado, si es posible,
realizándola paso a paso. Así mismo, comprenderá en con gasa estéril. Se recoge la porción media de la
qué casos deberá tomar mano de ésta herramienta micción en un frasco estéril de boca ancha,
medica con sus pacientes. Diferenciara la flora desechando los primeros y los últimos mililitros. La
normal de la patógena y aprenderá el manejo correcto muestra debe analizarse inmediatamente, o
de la toma de muestra. refrigerarse a 4°C hasta un máximo de 24 horas.
FUNDAMENTO TEÓRICO. .

E
ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO PRELIMINAR.
l análisis microbiológico de la orina va
Cuando el número de muestras es muy elevado es
encaminado al diagnóstico de las
necesario un método que permita descartar las
infecciones del aparato urinario, esencialmente cistitis
negativas sin proceder al cultivo. Algunos de los
y pielonefritis. También es útil para ayudar al
criterios empleados son los siguientes:
diagnóstico de las infecciones no estrictamente
*Depositar una gota de la muestra de orina (que
urinarias, cuando afectan a tejido renal o se excretan
previamente se ha homogeneizado muy bien) sobre el
bacterias por orina, como tuberculosis, leptospirosis o
porta, sin extenderla, dejarla secar y fijarla a la llama.
fiebre tifoidea.
*Teñirla por el método de Gram. Si se aprecia al
Es responsabilidad del médico presumir
menos una bacteria en la mayoría de los campos
enfermedades infecciosas en sus pacientes e iniciar
observados, la muestra debe cultivarse.
estudios a fin de confirmar o descartar esta
*Considerar los resultados del examen del sedimento
presunción.

RECOLECCIÓN DE MUESTRAS.
La correcta recolección de muestras
UROCULTIVO CUANTITATIVO.
biológicas para su cultivo es posiblemente la etapa
más importante en el aislamiento de microorganismos
El recuento de bacterias en orina es, por el momento,
responsables de enfermedades infecciosas.
el método aconsejado para distinguir una infección
urinaria de la contaminación por microbiota normal.
PASOS PARA UNA CORRECTA RECOLECCIÓN
Puede hacerse mediante diluciones seriadas o
DE MUESTRAS
mediante siembra con asa calibrada. Este último
método es más utilizado por su sencillez.
1. La muestra para cultivo debe ser material del
verdadero sitio de infección y debe recogerse con un
mínimo de contaminación de tejidos, órganos o
Caso clínico
secreciones adyacentes.
Niña de 8 años que consulta por realizar orinas
2. Establecer períodos óptimos para la recolección de
dolorosas en las últimas 24 horas. Fiebre de 39 C.
muestras a fin de tener la mejor oportunidad de aislar
los microorganismos causantes.
PREGUNTAS EXPLORATORIAS.
3. Obtener suficiente cantidad de muestra para llevar
¿ Que podría sospechar ante ésta situación?
a cabo las técnicas de cultivo solicitadas.
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4. Utilizar dispositivos de recolección, recipientes
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para las muestras y medios de cultivo adecuados para
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asegurar el óptimo aislamiento de microorganismos.
5. Obtener la muestra de preferencia antes de la
administración de antibióticos.
2.- ¿ Consideraría usted el caso de realizar un
6. El envase recolector de la muestra debe estar
urocultivo a la paciente? Si o No y ¿Por qué?
correctamente rotulado.
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RECOLECCIÓN Y CULTIVO DE MUESTRAS DE
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ORINA.
3.- ¿Cuál cree usted que sea el agente etiológico del
La muestra más adecuada es la primera orina de la
que podría sospechar en primer caso por tratarse de
mañana. Debe evitarse la contaminación por la
una niña?
microbiota normal de la uretra o del perineo,
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___________________________________________ suprapúbica o cateterismo aséptico no llevan


___________________________________________ FLORA NORMAL FLORA PATÓGENA
__ Staphylococcocus spp.(coagulasa -) Enterobacterias.
Material: Streptococcus viridans Enterococos.
• Muestra de orina problema. Lactobacillus spp. Staphylococcus saprophyticus.
• Asa calibrada de 1 μl. Difteroides Pseudomona aeruginosa.
• Una placa de Agar-sangre y otra de Neisseria spp (no patógena). Candida albicans.
MacConkey o EMB Cocos anaeróbicos. Staphylococcus aureus.
Levaduras (algunas). Streptocuccus Beta-hemolítico.
Técnica: Otros Neisseria gonorrhoeae.
 Homogeneizar bien la orina mediante contaminación, y debe considerarse positivo cualquier
inversiones del frasco. recuento.
En caso de infección se procede siempre a la
 Sumergir verticalmente el asa y retirarla identificación y al antibiograma.
asegurándose que lleva una gota de orina
IDENTIFICACION.
 Sembrar con el método de estría múltiple Los microorganismos responsables más
frecuentemente de infección urinaria
 Incubar a 37oC por 24 a 48 horas. varían según el origen comunitario o nosocomial de la
infección. En líneas
 Interpretar los resultados , anotando las generales son:
características morfológicas de cada colonia • Escherichia coli, y con mucha menor frecuencia
diferente que haya crecido. otras enterobacterias, como
Proteus, Klebsiella, Enterobacter y Serratia.
 Hacer un frotis de cada colonia diferente, y • Entre los cocos Gram-positivos, Staphylococcus
teñirlo con un Gram saprophyticus, Enterococcus
faecalis y Staphylococcus aureus.
INTERPRETACION • Microorganismos oportunistas, como Pseudomonas
aeruginosa, Alcaligenes spp.
Estimar el número de colonias y multiplicarlo por Corynebacterium urealyticum y levaduras, como
mil, para obtener el número de bacterias por ml de Candida albicans.
orina. Un recuento de más de 100.000 bacterias/ml es Basándose en el aspecto de la colonia y en su tinción,
indicativo de infección (el número no se correlaciona proceda a identificarla
con la gravedad de la misma). según las técnicas descritas en la Práctica 2
Un recuento de menos de 10.000 bacterias/ml hace
sospechar una contaminación de la muestra,
especialmente si hay varios tipos distintos de
colonias, pues las infecciones urinarias son casi El estudio microbiológico de la orina, se hace cuando
siempre debidas a un sólo microorganismo. Las cifras los signos y síntomas son sugestivos de infección de
intermedias son dudosas, y requieren la consulta al la vías.
clínico y la repetición del análisis. Hay que tener
presente que las muestras obtenidas por punción

RESULTADOS.
MORFOLOGIA MACROSCOPICA
Características C O L O N I A S
morfológicas. AS MAC CONKEY CHOCOLATE
Tamaño
Elevación
Superficie
Aspecto
Bordes
Densidad
Hemólisis
Consistencia
Gram
Morfología
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microscópica.
Agrupación.

CUESTIONARIO.

1. Explique cual es el papel de la flora normal del cuerpo humano.


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2. ¿Por qué es recomendable cultivar las muestras para determinar el microorganismo causal de la enfermedad?
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3. ¿Cuál es el paso más importante del examen de la muestras para cultivo microbiológico?
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4. ¿Por qué se debe tomar la muestra antes de la administración de antibióticos?
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5.- La presencia de bacterias Gram (-) en orina es natural? Si o no y ¿Por qué? ¿Qué podemos esperar con este
resultado?
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OBSERVACIONES Y CONCLUSIONES.
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INSTRUCCIONES: Marque con una paloma para indicar que el alumno realizó la actividad y con una X
que no la realizó.

Participación individual
Nombre A B C D E

A) Al realizar la práctica toma en cuenta las medidas de seguridad.


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B) Demuestra habilidad y destreza al manejar el material de laboratorio.

C) Al preguntarle sobre el tema, fundamenta correctamente su respuesta.

D) Coopera con el resto del equipo para que todos realicen su práctica.

E) Al término de la práctica elimina o conserva adecuadamente su material y la muestra.

Evaluación del trabajo en equipo


EQUIPO SI NO
Planificamos el trabajo
Distribuimos bien las
actividades
El resultado fue el
esperado

EVIDENCIAS SI NO
1.- Formato completo
2.- Práctica realizada
3.-Resultados de la
práctica completos
4.-Material y equipo limpio
5.- Revisión bibliográfica

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