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METANOGENESIS



Metanognesis es el proceso anaerobio en el que los equivalentes de electrn de la
materia orgnica se utilizan para reducir el carbono a metano (estado de oxidacin 4 ).La
metanognesis o formacin del metano puede ser biognica y abiognica.
Anualmente se forman 349- 820 x 10
12
g de metano , de los cuales 81-86 % son de origen
biognico (zonas encharcadas, humedales naturales, rumiantes, termes, vertederos, ocanos y
lagos, tundras) y 13- 19 % de origen abiognico (escapes industriales y de gaseoductos,
combustin de biomasa, minera de carbn, emisiones de gas natural, hidratos de metano,
volcanes, automviles).
4.1 Metanognesis biognica es la formacin del metano como parte del biogas o gas que
se desprende de ambientes anaerobios ricos en materia orgnica (principalmente zonas
pantanosas y eructos de los rumiantes).
El biogas es un gas que se produce mediante un proceso metablico de descomposicin
anaerobia de la materia orgnica en metano (55-70%), CO
2
(35-40%), N
2
(0.5-5%),
H
2
S (0.1%), H
2
(1-3%), vapor de agua (trazas).
El metano es el resultado de la actividad de un grupo muy especializado de bacterias que
convierten los productos de fermentacin de otros microorganismos anaerobios
(especialmente CO
2
, H
2
, formiato y acetato) en metano o en metano y CO
2
.
Se estima que las bacterias son las nicas responsables de las transformaciones que conducen
a la metanognesis aunque en ocasiones se puede detectar una variedad de distintos protozoos
anaerobios (en el rumen los protozoos constituyen el 50% de la biomasa total).
2
4.2 Caractersticas de las bacterias metanognicas
- Arqueobacterias
- Forma diversa y reaccin tintorial Gram positivas y Gram negativas
- Anaerobios estrictos mucho ms sensibles al oxgeno y agentes oxidantes como el
nitrato que las dems bacterias anaerobias
- Carecen de catalasa y superxido dismutasa
- Cuando crecen en forma autotrfica, el CO
2
es la principal fuente de carbono y lo
asimilan mediante la via reductiva del Acetil-CoA que conduce a la formacin de
acetato a partir del cual sintetizan las sustancias celulares.. Sin embargo, el
crecimiento de todos ellos es estimulado por el acetato y en algunas especies por
ciertos aminocidos.
- Utilizan el amonaco como fuente de nitrgeno.
- El fierro, nquel y cobalto son oligoelementos requeridos para su crecimiento, as
como tambin el metal traza nquel que es un componente del Factor 430 (coenzima)
y de la enzima hidrogenasa y monxido de carbono deshidrogenasa (CODH)
- Se encuentran en estrecha relacin con las bacterias productoras de hidrgeno
estableciendo una sintrofia (simbiosis mutualista entre bacterias productoras de
hidrgeno, acetognicas obligadas y metanognicas).
4.3 Grupos taxonmicos de bacterias metanognicas
Se han aislado una variedad de bacilos, cocos, filamentosos, Gram positivos y Gram
negativos por lo que la taxonoma se basa en la comparacin de secuencias RNAr l6 S
establecindose siete grupos principales.
Grupo I: Methanobacterium, Methanobrevibacter, Methanosphaera.
3
Grupo II : Methanothermus.
Grupo III : Methanococcus.
Grupo IV : Methanomicrobium, Methanogenium, Methanospirillum,
Methanoplanus.
Grupo V : Methanosarcina, Methanolobus, Methanoculleus, Methanohalobium,
Methanococcoides, Methanohalophilus, Methanothrix.
Grupo VI : Methanopyrus.
Grupo VI I: Methanocorpusculum.
4.4 Grupos fisiolgicos de bacterias que participan en la metanognesis

Grupo I
Bacterias hidrolticas y fermentativas primarias (anaerobias obligadas y facultativas)
- Anaerobias: Bacteroides, Clostridium, Bifidobacterium,Fusobacterium,Peptococcus,
Desulfovibrio
- Anaerobias facultativas : Lactobacillus, Klebsiella, Actinomyces, Vibrio,
Corynebacterium, Bacillus, Micrococcus, Pseudomonas, Sarcina, Aerobacter
Grupo II
Bacterias acetognicas obligadas productoras de hidrgeno o fermentativas secundarias
Syntrophomonas
Syntrophobacter
Grupo III
Bacterias homoacetognicas no estrictas que sintetizan acetato a partir de H
2
y CO
2

Clostridium aceticum
Acetobacterium woodii

4
Grupo IV
Bacterias metanognicas: Methanobacterium, Methanosarcina , Methanococcus
Methanospirillum , Methanomicrobium.
4.5 Sustratos para la metanognesis
Se conocen tres clases de sustratos utilizados para la metanognesis.:
a. Sustratos tipo CO
2


CO
2

Formiato HCOO
Monxido de carbono
En esta primera clase de sustratos, los electrones necesarios para la metanognesis,
derivan por lo general del H
2
. Los metangenos que crecen sobre H
2
y CO
2
son
autotrficos y el CO
2
sirve tanto como fuente de carbono como de aceptor de
electrones. Por esta ltima condicin, el proceso se considera una respiracin
anaerobia de sustrato inorgnico (Reduccin del CO
2
)
C0
2
+ 4 H
2
CH
4
+ 2 H
2
O Methanobacterium
b. Sustratos de metilo
Metanol
Metilamina
Dimetilamina
Trimetilamina
Metilmercaptano
Dimetilsulfuro
En esta segunda clase de sustratos, las molculas orgnicas son reducidas por el
hidrgeno como fuente externa de electrones. Alternativamente, en ausencia de
5
hidrgeno, una pequea cantidad de material es oxidado hasta dixido de carbono para
generar los electrones necesarios y reducir estas molculas de metilo hasta metano: el
grupo metilo se reduce a metano. a travs de reacciones en donde algunas molculas
del sustrato funcionan como donadores de electrones y se oxidan a CO
2
mientras que
otras se reducen y por lo tanto son aceptores de electrones (Respiracin anaerobia de
sustrato orgnico)
4 CH
3
OH 3 CH
4
+ CO
2
+ 2 H
2
O Methanosarcina
c. Sustratos de acetotrficos
Acetato
En esta tercera clase de sustratos para la metanognesis, el cido actico se escinde
(reaccin acetoclstica o escisin del acetato a CH
4
mas C0
2
), para formar metano a
partir del grupo metilo y dixido de carbono a partir del grupo carboxilo, en una
reaccin de fermentacin.
CH
3
COO H + H
2
O CH
4
+ CO
2
Methanosarcina , Methanothrix


4.6 Proceso de metanognesis
Fase I: Hidrlisis
Los compuestos orgnicos complejos son hidrolizados por un conjunto de enzimas:
celulasas, amilasas, proteasas, lipasas, segregadas por los microorganismos,
transformando polisacridos a monosacridos, protenas a pptidos y aminocidos, grasas
a glicerina y cidos grasos.
Fase II: Acidificante o Acidognesis
Los productos de bajo PM son adecuados como fuente de energa y carbono celular. En
el interior de los microorganismos y por accin de endoenzimas son transformados en
6
cidos grasos de cadena corta y alcoholes liberando H
2
y CO
2
(compuestos complejos a
compuestos de bajo PM). Esta fase es llevada a cabo por los fermentadores primarios y
los cidos generados son acetato, propionato y butirato.
Fase III: Acetognica o Acetognesis
Llevada a cabo por bacterias obligadas productoras de protones o bacterias oxidantes de
cidos grasos productoras de H
2
fermentadoras secundarias o acetognicas estrictas,
cuya nica forma de oxidar el NADH es mediante la liberacin de H
2
a medida que se
forma.
Estas bacterias utilizan cidos grasos y alcoholes como fuente de energa. En cultivo
axnico apenas se desarrollan o no lo hacen en absoluto; sin embargo, crecen
abundantemente cuando estn asociadas a un organismo consumidor de H
2
(como un
metangeno o una bacteria reductora de sulfatos). Esta dependencia se denomina
SINTROFIA (comer juntos).
Syntrophomonas wolfei oxida cidos grasos de 4 a 8 tomos de carbono principalmente
butirato hasta acetato, CO
2
e H
2
cuando crece con una metangena.
Syntrophobacter wolinii oxida propionato hasta acetato, CO
2
e H
2
cuando crece con
especies reductoras de sulfato
Todo el H
2
y el CO
2
de los procesos fermentativos primarios es consumido
inmediatamente por bacterias metanognicas (para formar metano), bacterias
homoacetognicas como Clostridium aceticum y Acetobacterium woodii (para formar
acetato) o por bacterias reductoras de sulfatos. En este ltimo caso, la reduccin de
sulfatos a sulfuros (bacterias reductoras de sulfato como Desulfovibrio) afecta
negativamente la metanognesis (competencia por el H
2
y toxicidad debido al H
2
S).

7
4H
2
+ SO
4
=
2H
2
O+ H
2
S + 2 OH
-

Fase IV: Metanognica
La metanognesis es llevada a cabo por bacterias que viven en ntimo contacto con las
acetognicas y pueden ser oxidantes del hidrgeno o fermentadoras del cido actico. El
hidrgeno se usa como donador de electrones, con dixido de carbono como aceptor, para
formar metano, mientras que el cido actico se escinde para formar metano y dixido de
carbono.
Se considera que la produccin de metano es la estabilizacin ideal de la materia
orgnica, porque posteriormente en aerobiosis se convierte en CO
2
+ H
2
O
CH
4
+ 2 O
2
CO
2
+ 2 H
2
O
Los principales sustratos para la metanognesis en la tierra y aguas dulces son el H
2
y el
acetato. En el mar los sustratos metilados (metilaminas o metanol) son los precursores del
metano.
En general, en la naturaleza, los sustratos ms importantes para la metanognesiss son el
H
2
, acetato y CO
2
.
4.7 Parmetros de operacin de la metanognesis
Los parmetros de operacin, son aquellos que se fijan antes del inicio del proceso
sealando las condiciones en las cuales va a trabajar el sistema. Incluyen el sustrato,
dilucin, temperatura, y tiempo de retencin.
a. Sustrato y dilucin (Cantidad de slidos totales y slidos voltiles)
El tipo de residuo utilizado debe contener una alta DBO (1.2-2 g/l) y ser rico en
nitrgeno que provea una ptima capacidad tamponante para evitar el descenso del pH
menos de 6,2.

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La relacin C:N debe ser de 30:l, porque el carbono es consumido 25 a 35 veces ms
rpidamente que el nitrgeno. Una buena mezcla est compuesta por estircol de ave con
paja de arroz o rastrojos con excretas Una relacin C:N muy alta provee exceso de carbono,
originando acumulacin de cidos voltiles, disminucin de pH a extremos no permisibles
para las bacterias metanognicas y cese de la produccin de biogas .
Por el contrario, con una relacin C:N menor a 30:1, el nitrgeno se acumula en forma de
amoniaco hasta concentraciones que afectan negativamente las bacterias metangenas..
Los slidos totales no deben sobrepasar 7 a 9 % para procesos semicontinuos o
continuos. En procesos Batch la mezcla no requiere fluidez, es recomendable trabajar con
diluciones de 25 a 35% de slidos totales.
Los slidos totales se ajustan con adicin de agua. Una alta dilucin se considera 6 a 10 % de
slidos totales y una baja dilucin a 25 a 35 %.
Los sustratos tiles para la metanognesis son residuos del procesamiento industrial
y de los alimentos: industria cervecera y destilera, residuos de vegetales e industria
conservera, suero de la produccin de queso, residuos de mataderos. Asimismo, estircol
animal y biomasa agrcola (principalmente de no rumiantes como cerdos); sedimentos de
aguas residuales (lodos primarios y secundarios).
Los desperdicios frescos (pastos verdes, rastrojos) deben dejarse a la intemperie
aproximadamente 10 das para su descomposicin antes de ser introducidos al digestor
Las pajas y granos de cereales generan ms gas que el estircol fresco pero el contenido de
metano es menor. Las excretas humanas generan ms gas y mayor cantidad de metano que el
estircol fresco de vacuno y pueden utilizarse solas o complementadas con otros tipos de
desechos.

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b. Temperatura
Mesoflica
28 C 40 C
Menor vapor de agua en el gas
Menor CO
2
en el gas
Mayor cantidad de especies de metangenas
Estable frente a los cambios bruscos de temperatura
Termoflica
40 C 60 C
Mayor reactividad : Menor tiempo de retencin
Menor volumen de lodos formados
Destruccin de microorganismos patgenos
Mantenimiento ptimo de condiciones anaerobias
Responde adversamente al enfriamiento accidental.
Requiere gasto de energa adicional para elevar la temperatura.
Cmo suministrar calor?
- Circulacin de aire caliente en serpentines adheridos a las paredes del tanque.
- Calentamiento del estircol antes de entrar al digestor.
- Inyeccin de vapor por el fondo del tanque.
- Aplicacin de pintura negra recubriendo externamente el digestor
En general el incremento de la temperatura no afecta la digestin. Sin embargo, una
disminucin repentina de slo pocos grados puede detener la produccin de metano
sin afectar a las bacterias productoras de cidos, conduciendo a una acumulacin
10
excesiva de cidos voltiles (Las bacterias acidognicas y metanognicas deben estar
en equilibrio).
c. Acidez y pH
El contenido de cidos en la metanognesis no debe alcanzar ms de 2 000 a 4 000 mg/L,
al mismo tiempo que se mantiene el pH entre 6,6 y 7,6. La concentracin de cidos orgnicos
y el pH del contenido del digestor , debern determinarse diariamente para asegurar que el
funcionamiento del sistema anaerobio permanezca en equilibrio. Si la capacidad de regulacin
se agota, se debe aadir una base qumica (carbonato o similar), para evitar una cada del pH,
que destruira a los metangenos..
La concentracin de cidos orgnicos es un indicador del funcionamiento del sistema.
Los cidos orgnicos clave son los de cadena corta que varan en longitud de cadena, desde un
carbono hasta ocho carbonos por mol (frmico, actico, propinico, butrico isobutrico,
valrico, isovalrico, caproico, heptanoico, octanoico). Estos cidos son denominados
voltiles debido a que en su forma no ionizada pueden destilar con agua a ebullicin. Este
significado del trmino voltil es diferente del significado de compuestos orgnicos voltiles
(COV), trmino usado para describir compuestos orgnicos que son fcilmente eliminados del
agua mediante separacin con aire. Los cidos grasos de cadena corta no pueden eliminarse
del agua mediante separacin con aire.
Los cidos voltiles que se encuentran presentes a mayores concentraciones durante el
arranque de un sistema anaerobio son el actico, propinico, butrico e isobutrico. Tambin
se forman como productos intermediarios de la degradacin de residuos orgnicos otros
cidos no voltiles como el lctico, pirvico y succnico, pero sus concentraciones son mucho
menor que las de los cidos voltiles.

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d. Tiempo de retencin
Flucta de acuerdo a la temperatura y tipo de sustrato. A 50 C 60 C se necesitan 8 a
10 das para obtener 95 % del total de gas. A 20 C 30 C se requieren 4 semanas. En la
primera semana es mayor la produccin de CO
2
mientras que a partir de la segunda semana
es mayor el metano obtenindose la mxima produccin a los l6 das.
A tiempos de retencin mayores existe el riesgo de tener bacterias en fase de muerte
siendo la degradacin de la materia orgnica, lenta e ineficiente. A tiempos de retencin
menores existe el riesgo que las bacterias sean eliminadas del sistema antes que la velocidad
de multiplicacin alcance el estado estacionario
Los excrementos de porcinos, ricos en slidos voltiles fcilmente degradables, necesitan
tiempos de retencin de 10 a 12 das, mientras que los excrementos de bovinos, ricos en
materia celulsica y fibras difciles de descomponer, requieren cerca de 20 das.
e. Ausencia de oxgeno
f. Agitacin
Se debe realizar una agitacin mecnica de 5 a 10 minutos dos veces al da.
g. Toxicidad
- Sulfatos
- Contaminantes industriales y agrcolas
- Antibiticos
- Desinfectantes, detergentes
- Metales pesados
4.8 Ruta de Fijacin del CO
2
: Va del Acetil CoA (Figura 1)
La ruta de sntesis del acetil-CoA se lleva a cabo en organismos anaerobios estrictos
(bacteras fototrficas verdiazules, bacterias homoacticas, bacterias reductoras de sulfatos y
12
algunas metangenas) y permite la asimilacin de dos molculas de CO
2 ,
que por reduccin
originan el grupo metilo (CH
3
) y carbonilo (CO) del acetato, respectivamente. Esta reduccin
requiere H
2
como donados de electrones. Una enzima clave en esta ruta es la monxido de
carbono deshidrogenasa (CODH), enzima compleja que contiene los metales nquel, zinc y
fierro como cofactores.

7.1 El CO
2
es reducido a Formiato por la enzima formiato deshidrogenasa. Posteriormente
es convertido en Formiltetrahidrofolato. A continuacin, se aaden dos o ms pares de
electrones y se forma metil tetrahidrofolato (THF). Despus el grupo metilo es
transferido a una enzima que contiene vitamina B
12
como cofactor formndose corrinoide
metilo.

7.2 La enzima clave carbonomonxido deshidrogenasa (CODH) cataliza la reduccin del CO
2
a CO, el cual se combina con el grupo metilo del corrinoide, quedando el CH
3
adherido a un
tomo de nquel y el CO a un tomo de fierro del interior de la enzima. En este punto
interviene la coenzima A y la monxido de carbono deshidrogenasa cataliza la formacin de
Acetil CoA , que se convierte en la unidad bsica de la sntesis de todos los compuestos
celulares de los organismos. Por ejemplo dos grupos de acetil-CoA pueden unirse para formar
4 oxalacetato que conduce a glucosa 6 - fosfato y que a su vez es precursor del
5 carbono ribulosa- 5- fosfato que se emplea para formar nucletidos de ribosa y
desoxirribosa , precisos para el ADN y ARN.

13

H
2
FORMIATO CHO-THF CH
3
- THF CH
3
Corr





H
2
CH
3
- C ~SCoA CH
3
- C -O



Figura 1. Ruta de Fijacin de CO
2
: Va del Acetil CoA
O
Formil
Tetrahidrofolato
THF ATP
CO
2

Metil
Tetrahidrofolato
2H
2
B
12

Corrinoide
Metilo
CO
2

Ni
Fe
C0
Ni
Fe
CH
3

C0
Ni
Fe
CoA
Acetil CoA Acetato
O
4H
2
+ 2 CO
2
ACETATO + 2H
2
O + H
+

Biomasa
CODH
14
4.9 Bioqumica de la Metanognesis
4.9.1 Enzimas y Coenzimas
- Metanofurano MF.
- Metanopterina MP (Forma activa: Tetrahidrometanopterina H
4
MPT Coenzima F
420)

- Coenzima M (C
0
M-HS, cido- 2- mercaptoetanosulfnico.
- Sistema Metil Reductasa ( metilcoenzima M metilreductasa) :
Fraccin A : A
1
, A
2
, A
3
y FAD
Vitamina B
12 ,
Coenzima F
420

Fraccin B :Coenzima HS HTP (7 Mercaptoheptanoil treonina fosfato o
fosfato de 7 - Mercaptoheptanoil treonina )
Fraccin C : Metilreductasa. Unidos a cada molcula del componente C
existen dos molculas de F
430
y dos de Coenzima M metilada (CH
3
S - CoM).

- Enzima Monxido de Carbono Deshidrogenasa (CODH)
Contiene Ni, Fe, Zn como cofactores
Cataliza la reduccin de CO
2
a CO
Cataliza la oxidacin de CO a CO
2


4.9.2 Formacin del Metano
a. Bioqumica de la metanognesis por reduccin del CO
2
con H
2

(Figuras 2 y 3)
El dixido de carbono es reducido, pasando sucesivamente a radicales formilo,
metenilo, metileno y metilo el cual a su vez es reducido a metano. El suministro de
electrones para las reacciones de reduccin procede de la oxidacin del hidrgeno .
15
a.1 La coenzima metanofurano (MF) activa el CO
2
que es reducido a
carbonoformilo.
a.2 El grupo formilo es transferido hacia la tetrahidrometanopterina(MP)
para formar carbono metenilo.
a.3 Despus es deshidratado a carbono metileno.
a.4 Posteriormente es reducido a carbono metilo.
a.5 El grupo metilo es transferido hacia la coenzima M originando
metilcoenzima M.
a.6 El metilcoenzima M o Coenzima M metilada (CH
3
S CoM) es
reducida a metano por el sistema Metil reductasa (Figura 2)
El sistema metilreductasa reduce metilcoenzima M teniendo como
acarreador de hidrgenos el HS - HTP y F
430
originando metano y como
producto secundario un heterodisulfuro. Esta etapa final de reduccin del
metilcoenzima M por el H
2
es un proceso exergnico y es la fuente de
energa para la generacin de ATP.

CoM- S CH
3
CH
4

HS- HTP CoH- S- S- HTP
F
420

CoM SH HS- HTP

Figura 2. Sistema metil reductasa


F
430

16

El producto de la reaccin entre el CH
3
S CoM y el HS HTP (Metilcoenzima
M y Coenzima - 7 -mercaptoheptanoiltreonina) adems del metano, es un bisulfuro de Co M y
HTP: CoM S S HTP llamado tambin heterodisulfuro. Posteriormente este
heterodisulfuro es reducido y se regeneran la CoM y el HS-HTP.

a. Autotrofia de las bacterias formadoras de metano por reduccin del CO
2
(Figura 3)
Los microorganismos formadores de metano por reduccin del CO
2
con H
2
integran
sus vas biosintticas y bioenergticas debido a que comparten los intermediarios comunes.
Ambas llevan a la formacin del grupo metilo. Los metangenos que crecen autotrficamente
carecen de aquella parte de la va del Acetil-CoA que lleva a la formacin de grupos metilo y,
en su lugar lo obtienen de la va metanognica.

b.1 La coenzima Metanofurano activa el CO
2
que es reducido a carbonoformilo.
b.2 El grupo formilo es transferido hacia la tetrahidrometanopterina formando
carbono metenilo.
b.3 Despus es deshidratado a carbono metileno.
b.4 Posteriormente es reducido a carbono metilo
b.5 La metil tetrahidrometanopterina cede los grupos metilo a una enzima que contiene
B12 originando corrinoide metilo.



17

b.6 Independientemente, la enzima clave carbonomonxido deshidrogenasa cataliza la
reduccin del CO
2
a CO, y en este punto el grupo metilo del corrinoide metilo es
transferido, quedando el CH
3
adherido a un tomo de Niquel y el CO a un tomo
de hierro del interior de la enzima. A continuacin, se aade la coenzima A y la
monxido de carbono deshidrogenasa cataliza la formacin del Acetil CoA.
18
HS - HTP
CoM S S HTP
HETERODISULFURO

2H
CORRINOIDE
A. METANOGNESIS
2H O O 2H ATP
CO
2
MF C H MP C H MP CH
2
MP CH
3
CoM S CH
3
CH
4

MF H
2
O MP H
2
O CoM - SH


B. AUTOTROFIA CH
3
CORR CORRINOIDE METILO


H
2
CH
3
- C ~SCoA CH
3
- C -O

Figura 3. Bioqumica de la metanognesis por reduccin del CO
2
con H
2
O
CO
2

Ni
Fe
CH
3

Co
Ni
Fe
CoA
Acetil CoA Acetato
O
CARBONILO
FORMILO
CARBONILO
METILENO
CARBONILO
METILO
F
430

F
420

Ni
Fe
CO
CARBONILO
METENILO
METIL
COENZIMA M
19
c. Bioqumica de la metanognesis a partir de compuestos metilo (Figura 4)
Los compuestos metilo, como el metanol donan los grupos metilo a una protena
corrinoide para formar corrinoide metilo (precursor de la vitamina B
12
).
El complejo corrinoide metilo transfiere el grupo metilo a la coenzima M para
formar metilcoenzima M ( CH
3
S - CoM ) del cual se forma el metano por reduccin a
travs del sistema metilreductasa, con los electrones derivados de la oxidacin de otras
molculas de metanol hasta CO
2
(Figura 4A)
Cmo se realiza la oxidacin del metanol a CO
2
(Figura 4 B)
c.1 Algunas molculas de metanol donan los grupos metilo a una protena
corrinoide para formar corrinoide metilo.
c.2 Posteriormente son transferidos hacia la tetrahidrometanopterina
originndose carbono metilo
c.3 Este sufre una oxidacin y se origina carbono metileno
c.4 Se lleva a cabo una oxidacin y se origina carbono metenilo.
c.4 El grupo formilo es transferido hacia la coenzima metanofurano para formar
carbono formilo
c.5 Se lleva a cabo una oxidacin y se origina CO
2
.
d. Fijacin del CO
2
por bacterias formadoras de metano a partir de compuestos
metilo (Figura 4 C)
La enzima clave monxido de carbono deshidrogenasa (CODH) cataliza la
reduccin del CO
2
(formado por la oxidacin del metanol) hasta CO, el cual se va a
combinar con el grupo metilo procedente del metanol quedando el CH
3
adherido a un
tomo de nquel y el CO a un tomo de hierro del interior de la enzima. En este punto se
aade la CoA y la CODH cataliza la formacin del Acetil CoA.
20
21
Molculas que Molculas que
son oxidadas son reducidas

CH
3
CORR CH
3
CORR
MP CoM SH
CH
3
MP CoM S CH
3
Metil Coenzima M
Carbono Metilo ATP HS HTP
2H 2H F
430

MP CH
2
CoM-S-S- HTP
Carbono Metileno CH
4

2H 2H A
O
MP C H
Carbono Metenilo
MF
O
MF C
Carbono Formilo CH
3
OH
2H
CO
2
CH
3
COOR
O
C CODH CH
3
C CODH
CoA
O
CH
3
C ~ ScoA
O
B CH
3
C O C
ACETATO
BIOSNTESIS
Figura 4. Bioqumica de la metanognesis a partir de compuestos metilo
CH
3
OH CH
3
OH
CO DESHIDROGENASA
Ni
Fe
CO
22



a. Bioqumica de la metanognesis por escisin del acetato (Figura 5)
Para fines energticos la fuente es el acetato. El acetato es activado a Acetil CoA
El acetil CoA interacciona con la monxido de carbono deshidrogenasa, propicindose
dos eventos:
e.1 El grupo metilo del acetato se transfiere a la enzima corrinoide de la va de Acetil
CoA para formar CH
3
Corrinoide (corrinoide metilo)
*El grupo metilo se transfiere a la tetrahidrometanopterina (MP) originando
carbono metilo
*Despus se transfiere a la coenzima M para originar metilcoenzima M ( CH
3
S
CoM ), la cual es reducida a metano a travs del sistema metil reductasa
La conservacin de energa tiene lugar en la acetotrofia como resultado de una
fuerza proton motriz formada durante la etapa de la metil reductasa igual que
sucede en el crecimiento de metangenos sobre H
2
+ CO
2

e.2 El grupo CO del acetato es oxidado hasta CO
2
en reaccin catalizada por la
monxido de carbono deshidrogenasa liberndose electrones que son utilizados en
la reduccin del CH
3
S- CoM a metano.
Se debe recordar que las metangenas acetoclsticas escinden el acetato a CO
2
y
CH
4
mientras que las reductoras del CO
2
forman CH
4
a partir del CO
2
y H
2

b. Heterotrofia de bacterias formadoras de metano por escisin de acetato
Para la biosintesis el acetato es utilizado directamente para lo cual previamente es
activado (hetertrofia)
23
F
430



Acetato

ATP CoA
O
CH
3
C S CoA BIOSNTESIS
O CODH
CH
3
C CODH
Enzima Corrinoide
O
C CODH CH
3
CORR
H
2
O MP
2e
-
CH
3
MP
CO
2
2H
+
CoM- SH
CoM- S
3
-CH
3
Metil Coenzima M
HS -HTP
ATP CoM-S-S-HTP
CH
4

2H


Figura 5. Bioqumica de la metanognesis por escisin del acetato
CH
3
COOH
Carbono Metilo
Corrinoide Metilo
Acetil Coenzima A
24
4.10 Referencias bibliogrficas
Barreto, G. & Crdova, J. (2012). Bacterias aisladas del Dren 4000 para la
obtencin de protena a partir de metano producido con excretas de Cavia
porcellus cuy y residuos lignocelulsicos en Lambayeque. Tesis de
Licenciatura. Lambayeque. Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo.
Benavides, A. & Plasencia, C. (2012). Caracterizacin fsico-qumica del abono
lquido Biol obtenido por digestin anaerobia de tres sustratos orgnicos en
Jayanca, Lambayeque. Tesis de Licenciatura. Lambayeque. Universidad Nacional
Pedro Ruiz Gallo.
Madigan, M.; Martinko, J. y J. Parker, (2004) Brock. Biologa de los
Microorganismos. Dcima edicin. Madrid: Pearson Educacin, S.A.
Pars, R. y S. Jurez, (1997) Bioqumica de los microorganismos. Mxico,
Editorial Revert S.A.
Rittman, B. y P. McCarty, (2001) Biotecnologa del Medioambiente, Principios y
Aplicaciones. Espaa. McGraw Hill.


































25




BIODEGRADACION DE COMPUESTOS LIGNOCELULSICOS


Los compuestos lignocelulsicos o biomasa vegetal estn constituidos
esencialmente por celulosa (45-60%), hemicelulosa (15-60%) y lignina (10-32%). Su
produccin sobrepasa las 10 toneladas / ao y el 75 % se genera en las zonas boscosas.
Debido a que los procesos de biodegradacin natural son lentos, los compuestos se
acumulan y constituyen un peligro para el equilibrio ecolgico. Las materiales
lignocelulsicos, mal llamados desperdicios pueden clasificarse como:
Residuos agrcolas (pajas, rastrojos)
Residuos agroindustriales (bagazo de caa, pulpa de caf, cscaras de frutas y vegetales
procesados )
Residuos forestales
Residuos lignocelulsicos urbanos (pasto, desperdicios de vegetales, de frutas y verduras
de los mercados, papeles).

7.1 Celulosa
La celulosa es un polmero lineal no ramificado formado por unidades D-glucosa
unidas por enlaces B (1-4) que van desde el carbono anomrico C
1
de una unidad al
hidroxilo del C
4
de la siguiente unidad.La unidad estructural es la celobiosa (unin de dos
glucosas). Una molcula de celulosa est constituida por cadenas lineales con un promedio
de 3 000 a 15 000 unidades de glucosa que pueden encontrase dispuestas al azar (celulosa
amorfa) o agrupadas en microfibrillas (celulosa cristalina). Cuando la celulosa est unida
a la hemicelulosa se le denomina homocelulosa.
Aisladamente la celulosa es una sustancia blanca, insoluble en agua y solventes
orgnicos como alcohol, benceno, ter pero soluble en HCl 40% o en H
2
SO
4
72 %. La
celulosa junto con la hemicelulosa son los componentes ms abundantes en los materiales
lignocelulsicos. A la celulosa se le considera como el material renovable ms abundante
26
en la bisfera y es el polmero ms importante de las plantas, constituyendo entre 40 y
50 % de la pared celular de una planta madura.

La celulosa puede ser hidrolizada por:
- Ruptura del enlace B 1-4 por adicin de agua. Esta reaccin puede ser
catalizada por cidos o por enzimas.
- Hidrlisis qumica con cidos (H
2
SO
4
y HCl) a elevadas temperaturas y
presiones.
- Hidrlisis enzimtica con celulasas
a. Biodegradacin de celulosa
La celulosa es degradada por bacterias aerobias (Pseudomonas, Chromobacterium,
actinomicetos), bacterias anaerobias (Clostridium), as como por mixobacterias y
protozoos, especialmente los que habitan en intestinos de las termitas; sin embargo, la
descomposicin de la celulosa, es ms comn en hongos que en bacterias. Los ms activos
son los mohos Trichoderma, Chaetomium, Penicillium, Fusarium y Myrothecium.
b. Celulasas de hongos
Estos microorganismos poseen celulasas que no son consideradas como un enzima
sino como un sistema compuesto por tres clases de enzimas:
- Endo B glucanasas (1,4 B D-glucan glucanohydrolasas :EG), que rompen los
enlaces B- glucosdicos en forma aleatoria en el interior de las molculas de celulosa
originando dimeros celobiosas, trmeros celotriosas y nuevos sitios de ataque para las
exoglucanasas. Como resultado disminuye rpidamente la longitud de las cadenas. El
mejor sustrato para la medicin de su actividad es un derivado soluble de celulosa
como la carboximetilcelulosa (CMC).
- Exo- B- glucanasas (1,4 B- D- glucan celobiohidrolasas :CT), que atacan
gradualmente las molculas de celulosa por el extremo reductor liberando subunidades
de celobiosas. No son muy activas con la celulosa cristalina pero presentan accin
sinergstica altamente cooperativa en presencia de endoglucanasas. Tienen una limitada
accin sobre sustitutos de la celulosa como la carboximetilcelulosa (CMC) e
hidroximetilcelulosa (HEC)
27
- Celobiasas (B- glucosidasa:BG), que hidrolizan la celobiosa y celodextrinas de bajo
peso molecular (celotriosas y celotetrosas) liberando glucosas. A diferencia de
endoglucanasas y exoglucanasas, las celobiasas son intracelulares debido a que las
molculas sobre las que actan son lo suficientemente pequeas como para atravesar la
membrana celular.
c. Mecanismos de la biodegradacin de la celulosa por hongos filamentosos
El ataque inicial de la celulosa cristalina es realizado por endoglucanasas originando
aberturas en sus cadenas lineales. A continuacin, exoglucanasas atacan las aberturas,
liberando celobiosas. La continua accin combinada de endoglucanasas y exoglucanasas
convierte la celulosa en celobiosas y pequeos oligosacridos. stos son atacados por
celobiasas para liberar glucosas.
Cuando la accin de dos o ms enzimas juntas en solucin es mayor que su accin
individual se concluye que estas enzimas actan sinrgicamente. Existen tres tipos de
accin sinrgica involucrados en el proceso por el que la celulosa cristalina se solubiliza:
endoglucanasas - exoglucanasas (endo-exo sinergismo) , celobiasas - endoglucanas y
celobiasas . exoglucanasas. El primer y segundo sinergismo permiten la solubilizacin de
la celulosa ordenada por enlaces de hidrgeno y el tercer sinergismo est relacionado con la
hidrlisis de la celobiosa que a su vez inhibe la accin exoglucanasa.
d. Celulasas de bacterias
Se conoce muy poco los mecanismos de accin de las celulasas bacterianas. A diferencia de
los hongos, las bacterias degradan fibras celulsicas por erosin enzimtica de la
superficie. Los sistemas caractersticos de bacterias son los celulosomas o complejos
polipeptdicos esfricos que incluyen un paquete enzimtico con actividad celulasa (Cx) y
un polipptido sin actividad hidroltica que permite la adhesin al sustrato (C1).
7.2 Hemicelulosa
La hemicelulosa es un heteroglicano (polmero de hexosas como glucosa, manosa y
galactosa, pentosas como xilosa y arabinosa y, en ocasiones cidos urnicos como el
galacturnico y glucornico) que contienen dos a cuatro tipos distintos de subunidades. Las
hemicelulosas son complejas y estn formadas por 50 a 200 unidades de azcar que pueden
estar vinculadas en una configuracin lineal, ramificada o con mltiples ramificaciones.
Las subunidades ms comunes son xilosa y manosa. Los xilanos conforman 30 % de las
28
maderas duras y 12 % de las maderas blandas. Los mananos son reservas de alimento. Los
galactanos se encuentran en la madera elstica de las ramas de ciertos rboles.
La hemicelulosa es soluble en NaOH y cidos diluidos en caliente.
Biodegradacin de hemicelulosa
La biodegradacin de hemicelulosas es realizada por accin de hemicelulasas
termfilas como xilanasas de Thermonospora alba (estable 1 mes a 55 C y con actividad
hasta 80 C durante 10 minutos); xilanasas alcalinas de Bacillus sp (pH 5 a ll );
mananasas y galactanasas de Aeromonas y Cellulosomas sp. y B xilodasas de
Aureobasidium pullulans ( estables en un rango de pH 2.0 a 9.0 y sobre los 70 C)

7.3 Lignina
La lignina es el segundo polmero natural en abundancia, en trminos de biomasa,
despus de la celulosa. Es un componente estructural de las plantas y les otorga rigidez,
resistencia a la compresin y a las dobleces y a la accin de los patgenos. Las ligninas son
molculas tridimensionales, amorfas y altamente ramificadas. A diferencia de lo que
ocurre con la celulosa, el almidn o la hemicelulosa, la lignina no tiene repeticiones de
enlaces en intervalos regulares. As, las ligninas se degradan a travs de reacciones
aleatorias (condensaciones) que pueden ser tanto qumicas como enzimticas, a la vez que
generan polmeros con estructuras no definidas.
La lignina es un polmero complejo, formado por polimerizacin de proporciones
variables de los precursores cumaril, coniferil y sinapil y sus derivados. La subunidad
bsica es un anillo aromtico (grupo fenil) con una cadena lateral de tres carbonos (de
modo que la subunidad bsica se llama fenil-propanoide). Las uniones pueden ser C-C o
enlaces C-O-C y se dan entre dos anillos, entre dos cadenas laterales de propano o entre un
anillo y una cadena lateral. Tanto el grupo fenil como el grupo propanoide estn
modificados en la propia lignina. Las cadenas laterales difieren entre s, dependiendo de la
especie de planta y la proporcin relativa de unidades derivadas de cada uno de estos tres
bloques de construccin bsicos es distinta en las diversas plantas, a la vez que varan
segn la clase de tejido vegetal y edad de las plantas. La lignina en madera dura ( haya)
es una mezcla de 50% de bloques de coniferil y 50% de bloques de sinapil. La lignina en
madera suave (abeto) tiene 85 % de coniferil.
29
Las ligninas son polmeros color caf insolubles en cidos y en lcalis fuertes, que
no se digieren ni absorven y tampoco son atacadas por la microbiota del colon humano. El
grado de lignificacin afecta notablemente la digestibilidad de la fibra. La lignina, se
incrementa en la pared celular de plantas en el curso de la maduracin, es resistente a la
degradacin bacteriana y su contenido en fibra reduce la digestibilidad de los polisacridos
fibrosos.
Biodegradacin de lignina
La descomposicin de lignina es realizada principalmente por hongos (Pudricin
blanca, marrn y blanda). Las especies de hongos blancos y marrones son
fundamentalmente basidiomicetos. Las especies blandas suelen ser ascomicetos.
Los basidiomicetos de la podredumbre blanca tienen un complejo mecanismo que
involucra enzimas que atacan directamente la lignina, tales como lignina peroxidasa (LiP),
manganeso peroxidasa (MnP) y lacasa (oxigenasa). Tambin sintetizan enzimas que
catalizan la produccin de perxido de hidrgeno para ayudar en la accin de peroxidasas
(glucosa oxidasa y glioxal oxidasa); enzimas que participan en la ruptura de fenoles,
aldehidos e hidrocarburos aromticos policclicos; enzimas necesarias para prevenir la
eventual acumulacin excesiva de perxido de hidrgeno y tambin enzimas
pertenecientes a los ciclos redox de las hidrogenonas (catalasa, superxido dismutasa,
glutation peroxidasa); sin embargo, los estudios de oxidasas y ms importante an de las
lacasas y manganeso peroxidasas poseen mayor inters al haberse demostrado su actividad
lignoltica una vez purificadas.
La degradacin de lignina parece implicar dos mecanismos: o bien la molcula es
degradada en unidades ms sencillas o son degradados in situ los dobles enlaces y las
cadenas laterales. La aparicin de compuestos como el cido vainlico y el coniferaldehido
durante las etapas tempranas de la degradacin de lignina sugiere que est implicado el
primer mecanismo.La secuencia de la degradacin de lignina parece empezar con la
demetilacin para producir cidos difenlicos que poseen dos grupos hidroxilo adyacentes.
Despus, los anillos por accin de una dioxigenasa se abren para originar una cadena
aliftica unida a la lignina y estas cadenas alifticas se escinden del polmero mediante la
oxigenasa lacasa. Las cadenas laterales alifticas son degradadas por oxidasas en forma
similar. Una caracterstica esencial de la degradacin de lignina es que es un proceso
30
altamente oxidativo, los cientficos frecuentemente se refieren a la molcula de lignina
como explotando mediante reacciones de oxidacin.
Los hongos blancos son los agentes que en mayor medida descomponen la lignina.
Coriolus versicolor descompone el anillo aromatico, los grupos metoxilo y la cadenas
laterales largas de lignina. Phanerochaete chrysosporium , as como Pleurotus ostreatus
son hongos blancos que tambin descomponen lignina totalmente, siendo el primero de
ellos el ms conocido y ms ampliamente estudiado. Entre los hongos marrones,
Poria y Gloephyllum degradan los polisacridos asociados con la lignina y eliminan los
grupos metilo (CH
3)
y metoxilo

(0 CH
3
).
7.4 Aplicacin de sistemas lignocelulolticos
Los hongos que descomponen lignina, particularmente los hongos de la podredumbre
blanca estn siendo cada vez ms valorados en relacin a su uso potencial en una variedad
de procesos biotecnolgicos. Las principales aplicaciones de los hongos lignolticos son:
1. Deslignificacin microbiana: Se aplica principalmente a la produccin de pulpa de
madera para papel. Se ha conseguido un buen progreso en la reduccin del
requerimiento energtico para la obtencin mecnica de la pulpa por pre- tratamiento de
las virutas de madera utilizando hongos que degradan lignina y que han sufrido una
mutacin para eliminar su capacidad celuloltica.
2. Blanqueado microbiano de las pulpas: Estos mtodos pueden reducir el aporte qumico
y de energa as como mejorar la brillantez de la pulpa, un requerimiento esencial para
obtener papel de alta calidad.
3. Tratamiento microbiano de los efluentes que contienen residuos derivados de la lignina:
Los hongos de la podredumbre blanca pueden ser utilizados efectivamente para
degradar sulfonatos de lignina y efluentes del tratamiento del blanqueado de pulpa
derivada de lignina.
4. Conversin de lignina a productos qumicos tiles: Tiene una posibilidad atractiva que
ser llevada a cabo solamente cuando se obtenga un conocimiento completo de las
complejidades de la biodegradacin de lignina.
5. Hongos comestibles: Los hongos comestibles como los del gnero Pleurotus (setas) son
organismos que utilizan selectivamente la lignina para su crecimiento. En el cultivo de
estos hongos, se han implementado tecnologas para la produccin de basidiocarpos o
31
cuerpos fructferos como alimentos de consumo humano con calidad nutricional
aceptable.
6. Compostaje :Es el proceso de descomposicn aerobia de materia orgnica como los
residuos lignocelulsicos originando el compost o abono orgnico, regenerador de
suelo, con nutrientes y oligoelementos que promueve la formacin de agregados y
mejora la aireacin del terreno donde es aplicado
7.5 Hongos comestibles
El cultivo de hongos comestibles es una actividad econmica que utiliza residuos
de las actividades agropecuarias, generalmente de fcil obtencin y bajos precios para la
produccin de un alimento sabroso, nutritivo y beneficioso para la salud. Asimismo, la
tecnologa empleada para el cultivo de hongos comestibles no genera desechos
contaminantes puesto que el sustrato residual constituye un forraje enriquecido para la
alimentacin ganadera o puede ser utilizado en la produccin de plantas ornamentales.
Estados Unidos, Alemania y Canad son los principales importadores del mundo y los
abastecedores de mayor importancia son China, Francia, Holanda y Corea del Sur. La
produccin anual de hongos comestibles en China ya supera los 10 millones de toneladas,
lo que significa ms de 70 % de la produccin mundial. . En contraste con los pases
productores de Norteamrica, Europa y Asia, la produccin de hongos comestibles es una
actividad relativamente nueva en el mercado latinoamericano. Mxico (58,6 %), Chile
(17,6 %) y Brasil (10,6%) acaparan casi el 87 % de la produccin total de hongos
comestibles. El Mxico el volumen de hongos producidos es superior a 28 000 toneladas
por ao, correspondiendo el 93 % a los championes (Agaricus) , 6, 97 % a las setas
(Pleurotus) y 0,03 % al shiitake (Lentinula), obtenidos a partir de ms o menos 280 000
toneladas de diversos subproductos agroindustriales y forestales.
El desarrollo de la produccin industrial de hongos es especialmente importante para
Amrica Latina ya que la creciente demanda de consumo por parte de la poblacin en
algunos casos no puede ser satisfecha por la produccin domstica teniendo que acudirse a
la importacin. Asimismo, la produccin de hongos representa una alternativa para la
utilizacin de desechos lignocelulsicos, material que representa cerca del 40 % de la
biomasa producida por fotosntesis y que no puede ser aprovechado en forma directa para
la alimentacin humana.
32


a. Valor nutritivo
A los hongos comestibles se les ha considerado como un ingrediente o
complemento de diferentes platillos y no tanto como un alimento de consumo frecuente;
sin embargo, su uso en la alimentacin debe ser incrementado debido a sus excelentes
cualidades organolpticas, agradable sabor y fina textura as como su calidad nutritiva y
efectos beneficiosos para la salud.


Cuadro 9. Anlisis proximal de hongos comestibles cultivados (Contenido por peso seco)



Grasa

1 a 2,2 % (principalmente cido oleico 56 %,
palmtico 16 % y esterico 24 %)
Carbohidratos 55 a 81 %
Protenas 10 a 30 %
Vitaminas (por 100 g de materia seca):
Timamina
Riboflavina
Niacina
cido ascrbico

4,8 mg
4,7 mg
108 mg
144 mg
Minerales (por 100 g de materia seca):
Potasio
Fsforo
Sodio

3,790 mg
1,345 mg
838 mg

b. Taxonoma
33
Los hongos comestibles conocidos como setas y hongos de sombrero, pertenecen a
la divisin Basidiomycota que corresponde a hongos formadores de basidios con
basidiosporas.

Reino Fungi
Divisin Basidiomycota
1. Subdivisin Teliomycotina
Clase Uredinomycetes
2. Subdivisin Ustilaginomycotina
Clase Ustilaginomycetes
3. Subdivisin Hymenomycotina
Clase Homobasidiomycetes
Orden Agaricales
Boletales
Cantharellales
Ganphales
Hymenochaetales
Phallales
Polyporales
Russulales
Thelephorales
Clase Heterobasidiomycetes
Orden Tremellales
Auriculariales
Dacryomycetales

La subdivisin Teliomycotina, clase Uredinomycetes agrupa royas y hongos afines que
forman cuatro basidiosporas por promicelio. El crecimiento en placas de Petri es
extremadamente difcil. Parasitan pteridofitas, gimnospermas y angiospermas y a veces
necesitan dos hospedantes alternativos que pueden pertenecer a taxones muy diferentes.
34
La subdivisin Ustilaginomycotina, clase Ustilaginomycetes agrupa carbones y afines,
que forman un nmero indefinido de basidiosporas por promicelio. Crecen fcilmente en
medios de cultivo, donde pueden comportarse como levaduras y generalmente parasitan
angiospermas.
La subdivisin Hymenomycotina comprende cerca de 20000 especies.
Aproximadamente el 98 % pertenecen a la clase Homobasidiomycetes u hongos
verdaderos. Todos ellos forman basidiocarpos con sombreros pequeos. Casi todas las
especies son terrestres en un amplio rango de medios donde bsicamente son
descomponedores de la madera; sin embargo, algunas especies son patognicas o
parasitarias y an otras son simbiticas, incluyendo la importante simbiosis ectomicorriza
de rboles forestales.
La clase Heterobasidiomycetes agrupa hongos denominados gelatinosos debido a su
foliosidad e irregularmente listados cuerpos de fructificacin. Muchos son gomosos ms
que gelatinosos. Cuando estn secos son duros y expuestos al agua retoman su forma
original.

c. Ciclo de vida
El ciclo de vida de los basidiomicetos es un sucesin de etapas desde la germinacin
de basidiosporas para formar un micelio (fase vegetativa) hasta la formacin de cuerpos
fructificantes o basidocarpos (fase generativa) En la fase vegetativa, las esporas sexuales o
basidiosporas haploides germinan y originan hifas monocariticas (un ncleo por clula).
Esta fase es corta ya que pronto dos filamentos se fusionan (somatogamia) y forman un
micelio secundario dicaritico que crece mediante fbulas. En algunos casos de hongos
micorrizgenos, este micelio puede ocupar varias hectreas, pesar muchas toneladas y tener
una edad de varios milenios.
El micelio secundario puede reproducirse asexualmente siendo la fragmentacin del
micelio la forma de dispersin ms frecuente;sin embargo, lo ms tpico es la
reproduccin sexual. El micelio secundario tambin puede agruparse en tejidos
especializados plectenquimticos, an dicariticos denominndese entonces micelio
terciario. En la fase generativa, cuando las condiciones de humedad son favorables, el
35
micelio secundario origina cuerpos fructferos, basidiocarpos o basiodomas, algunos de los
cuales son grandes y comestibles.


Los basidiocarpos, carpforos, himenforos o esporforos tienen una capa frtil
denominada himenio generadora de basidios y basidiosporas. Los basidios se disponen
sobre o dentro del basidiocarpo. Entre ellos existen estructuras estriles denominadas
basidiolos o cistidios, muy tiles como carcter taxonmico. Algunas de las clulas que
forman el himenio fusionan los dos ncleos que contienen, sufren una meiosis que origina
cuatro ncleos y cada uno de ellos migra a un filamento formado en el extremo de la
basidia y se rodea de una membrana, constituyendo la basidiospora Cada basidio origina
basidiosporas (dos, cuatro ,ocho o ms), mayoritariamente cuatro, externas que pueden
germinar directamente (originan micelio primario) o indirectamente (geman u originan
esporas secundarias).
d. Cultivo de hongos comestibles
El cultivo de hongos comestibles requiere un sustrato, una semilla de buena calidad y
condiciones ambientales que permitan el desarrollo del hongo. El sustrato puede ser
compostado o no compostado. Hongos como los championes requieren compost o materia
orgnica previamente degradada en un proceso biolgico aerobio. Hongos como las
grgolas (Pleurotus) y el shiitake (Lentinus) no requieren sustratos compostados. Degradan
y se alimentan de celulosa y lignina presente en desechos vegetales pudiendo realizarse su
cultivo en troncos o en sustratos artificiales como el aserrn. El cultivo en troncos tiene la
ventaja de tener un bajo costo de implementacin, pero la produccin es principalmente
estacional, generalmente en otoo y en primavera, cuando se dan las condiciones naturales
de temperatura y humedad para que el hongo fructifique. El cultivo en sustratos artificiales
(paja de trigo, aserrn, virutas de madera blandas no resinosas) permite una produccin
continua, pero con un mayor costo de inversin inicial.
La semilla para el cultivo de hongos comestibles consiste en granos de trigo u otro cereal
previamente esterilizado y cuya superficie ha sido colonizada por las hifas del hongo
seleccionado. Esta semilla es inoculada en una proporcin de 5 a 15 % en el sustrato
hmedo y se le da las condiciones de temperatura, humedad relativa, ventilacin,
36
iluminacin y tiempo adecuados para la produccin del basidiocarpo comestible que ser
comercializado (Cuadro 10).



Cuadro 10. Condiciones ambientales requeridas para las diferentes etapas del cultivo
de hongos comestibles

Incubacin Cobertura Fructificacin
1. Agaricus bisporus
Humedad relativa (%)
Temperatura de sustrato (C)
Duracin
Ventilacin
Iluminacin

90-100
25
12 15 das
No requiere
No requiere

95
13 15
16 18 das

85 90
15 18
4 6 semanas
4 renovaciones por hora
Oscuridad Oscuridad
2. Pleurotus ostreatus
Humedad relativa (%)
Temperatura de sustrato (C)
Duracin
Ventilacin
Iluminacin

90 100
28 30
10 15 das
No requiere
No requiere

95
13 15
7 15 das

85 92
15 18
5 7 semanas
4 renovaciones por hora
200 lux hora (12 horas)
3. Lentinus edodes
Humedad relativa (%)
Temperatura de sustrato (C)
Duracin
Ventilacin
Iluminacin

65 75
25
30 120 das
No requiere
No requiere

95 100
10 16
5 7 das

60 80
16 18
5 7 semanas
4 7 renovaciones por hora
200 500 lux/hora (12 horas)

e. Especies de hongos mayormente cultivadas
37
Las especies de hongos que mayoritarimente se cultivan en el mundo son
Champin de Pars, Agaricus bisporus (= A. brunnescens), grgolas u hongos ostras
(especies de Pleurotus) y el shiitake u hongo japons (Lentinus edodes).
Agaricus bisporus es el hongo comestible ms conocido en el mundo. Existen
variedades blancas, cremas, marrones e hbridos (caractersticas de variedad blanco y
crema). El basidiocarpo est conformado por un sombrero llamativo o pleo y un pie
tubular denominado estpite con o sin anillo (annulus). El anillo es el resto de un velo que
cubre al himenio en los estados iniciales y que al romperse cuelga o se desliza por el pie. El
himenio est dispuesto en la parte inferior del sombrero y est conformado por un tejido
tubular esponjoso o por lminas en cuyas porciones terminales se forman basidias y
basidiosporas. Tambin se observa la copa del pie o volva que es el resto de una envoltura
que cubre el hongo a manera de un cascarn de huevo en los estados iniciales. Cuando el
hongo madura, rompe el cascarn por el extremo superior llevndose algunos restos de
dicha envoltura en su sombrero.
Pleurotus ostreatus tiene una forma peculiar semejante a una ostra. Su sombrero
puede alcanzar entre 50-150 mm de dimetro en ejemplares adultos.
El color es variable: gris blanquecino a gris azulado, las laminillas y las partes comestible
son blancas. Se le puede encontrar en la naturaleza creciendo sobre troncos o rboles en
pie durante el otoo o primavera. Debido a su agradable sabor y rpida multiplicacin, se le
cultiva en casi todo el mundo.
Lentinus edodes presenta un sombrero de 5 a 12 cm y en ocasiones un pequeo
umbrn central de color castao claro u oscuro con tonos rojizos levemente convexo a
plano convexo en la madurez. La superficie del sombrero se encuentra cubierta por escamas
blanquecinas especialmente en el margen. Las laminillas son blanquecinas, apretadas y de
bordes aserrados. El pie es central, corto, usualmente cubierto por escamas fibrillosas y
presenta un anillo efmero blanquecino a castao claro. La parte comestible es firme,
sabrosa y puede secarse y rehidratarse fcilmente. Se le encuentra en la naturaleza sobre
troncos de madera muerta fructificando principalmente en otoo o en primavera. Este
hongo se cultiva y se consume vidamente en Japn no slo por su agradable sabor sino
por su accin antitumoral, hipocolesterolmica e inductora de la sntesis de interfern.

38
7.6 Compostaje
El compostaje es el proceso de descomposicin biolgica aerobia de la materia
orgnica contenida en los residuos slidos que origina un producto denominado compost.
Tambin es definido como un proceso de estabilizacin u oxidacin biolgica de los
residuos orgnicos bajo condiciones aerobias controladas de humedad, temperatura y
aireacin, donde los microorganismos utilizan el carbono y el nitrgeno disponibles
liberando energa por actividad metablica y produciendo agua, dixido de carbono y sales
minerales. El compost es un abono orgnico y aunque propiamente no es un fertilizante si
es un regenerador de suelo con nutrientes y oligoelementos que promueve la formacin de
agregados y mejora la aireacin del terreno en donde es aplicado.

a. Etapas y microbiologa en el proceso de compostaje
El ncleo de las pilas en compostaje acta como zona inductora sobre la corteza. No
obstante, todos los procesos que se dan en el ncleo no alcanzan la totalidad del volumen
de la corteza. En la prctica y utilizando como criterio las temperaturas alcanzadas en el
ncleo se diferencian las siguientes etapas:
Etapa de latencia
Es la etapa inicial, considerada desde la conformacin de la pila hasta que se
constatan incrementos de temperatura. Esta etapa es notoria cuando el material ingresa
fresco. Cuando el material ya tiene un tiempo de acopio, esta etapa puede pasar inadvertida.
Su duracin es muy variada, dependiendo de numerosos factores. Si el balance C:N, pH y
concentracin parcial de oxgeno son los adecuados, la temperatura ambiente y
fundamentalmente la biomasa microbiana son dos factores que definen la duracin de esta
etapa. Con temperatura ambiente entre 10 C y 12 |C y en pilas adecuadamente
conformadas, esta etapa dura entre 24 a 72 horas.
Etapa mesotrmica 1 o mesfila I
En esta etapa los microorganismos quimiohetertrofos mesfilos (hongos y
bacterias) son responsables de la degradacin de azcares y otros compuestos simples en un
rango de temperatura de 10 a 40 C (Carbohidratos = monmeros = cidos grasos de
cadena corta; Protenas = aminocidos). La actividad metablica incrementa
paulatinamente la temperatura y favorece el desarrollo de microbiota termfila que se
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encuentra en estado latente en los residuos. La duracin de esta etapa es variable y depende
del tipo y composicin del material en compostaje.
Etapa termognica o termfila
La microbiota mesfila es sustituida por la termfila en una fase que puede durar
varias semanas o meses dependiendo del contenido de celulosa y hemicelulosa. La
temperatura se eleva entre 40 C a 60 C con un mximo de 65 C y predomina la actividad
de actinomicetos y bacilos esporulados (Aminocidos = amoniaco; Degradacin parcial
de ceras, lpidos, celulosas y hemicelulosas; cidos grasos = dixido de carbono)
Normalmente en esta etapa se eliminan mesfilos patgenos, hongos, esporas, semillas y
elementos biolgicos indeseables. Si la compactacin y ventilacin son adecuados se
producen visibles emanaciones de vapor de agua. El dixido de carbono se produce en
volmenes importantes que difunden desde el ncleo a la corteza. Este gas juega un papel
fundamental en el control de larvas de insectos. La corteza de las pilas, especialmente
donde estn los materiales ricos en protenas, es la zona donde los insectos depositan sus
huevos. La concentracin de dixido de carbono alcanzada durante el compostaje resulta
letal para las larvas.
La aireacin, el riego o la mezcla del material de la pila de compostaje evitan un
recalentamiento excesivo; sin embargo, el compostaje se debe realizar en condiciones
termfilas durante el mayor tiempo posible no slo para acelerar el proceso de elaboracin
(por cada 10 C de aumento en la temperatura la actividad microbiana se duplica o triplica)
sino tambin para destruir a los patgenos presentes en el material compostado (3 das a
55 C son suficientes para inactivar la mayora de patgenos y se puede llegar hasta 70 C,
donde slo sobreviven las bacterias esporulantes). Al respecto, Stenford (1996) concluy
que se debe alcanzar una temperatura de 55 C por lo menos durante 5 das, para lograr la
inactivacin de los patgenos, sugiriendo que las temperaturas mayores de 55 C optimizan
la sanidad, entre 45 a 55 C maximizan la degradacin y entre 35 a 40 C favorecen la
diversidad microbiana. A su vez, Rodriguez y Crdova (2006) manifestaron que se debe
alcanzar una temperatura mayor de 55 C durante 3 das consecutivos de compostaje en
pilas estticas, con aireacin forzada y una temperatura mayor de 55 C por 3 das o mayor
de 45 C durante 12 das en el compostaje con volteos peridicos.
Etapa mesotrmica 2
40
Con el agotamiento de los nutrientes y la desaparicin de microorganismos
termfilos, comienza el descenso de la temperatura bajo 40 C en la fase de enfriamiento,
donde la velocidad de degradacin disminuye inicindose un lento ataque de los polmeros
complejos restantes como lignina y suberina y reapareciendo bacterias y hongos mesfilos
(Nitrificacin: amoniaco = nitrato). Finalmente, sigue la etapa de maduracin y
almacenaje, donde la temperatura alcanza valores muy cercanos a los del ambiente y
durante la cual se producen reacciones secundarias de condensacin y polimerizacin. En
estos momentos se dice que el material se presenta estable biolgicamente y se da por
culminado el proceso. Esta condicin se determina a travs de diversos parmetros, algunos
en campo (temperatura, color, olor) y otros en laboratorio (anlisis qumico).
Microbiolgicamente la finalizacin del proceso de compostaje se tipifica por la
ausencia de actividad metablica. Las poblaciones microbianas se presentan en fase de
muerte por agotamiento de nutrientes. Con frecuencia la muerte celular no va acompaada
de lisis. La biomasa puede permanecer constante por cierto perodo an cuando la gran
mayora de la poblacin no sea viable. Las etapas mencionadas no se cumplen en la
totalidad de la masa en compostaje. Es necesario remover las pilas del material en proceso,
tal que el material que se presenta en la corteza, pase a formar parte del ncleo y viceversa.
Estas remociones y reconformaciones de las pilas se realizan en momentos puntuales del
proceso y permiten adems airear el material, lo que provoca que la secuencia de las etapas
descritas se presentes por lo general ms de una vez.

b. Parmetros de operacin
Tipo de sustrato
El contenido de materia orgnica oscila entre 25-70 %. Para compostaje se
pueden utilizar tanto residuos slidos vegetales como animales. Entre los vegetales estn
los restos de poda, paja, malezas, restos de frutas y hortalizas, cscaras, aserrn, grama,
ceniza. Como residuos animales se consideran el estircol, guano de corral, plumas, pelos y
vsceras. Los residuos vegetales contaminados con plagas o enfermedades deben ser
quemados y no utilizados para compostaje.
Numerosos materiales pierden rpidamente su estructura fsica cuando son
compostados (ejemplo excretas), otros, no obstante son muy resistentes a los cambios. Tal
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es el caso de materiales leosos y fibras vegetales en donde la superficie de contacto entre
microorganismos y residuos es mnima, recomendndose la mezcla con residuos de menor
dimetro como los de las podas. En caso contrario, se debe recurrir al procesamiento, para
lograr un tamao adecuado y un proceso rpido. La alternativa para los materiales leosos y
de gran tamao es la utilizacin de trituradoras. Para un dimetro medio de partcula menor
resulta un incremento significativo de la biodisponibilidad y una disminucin del tiempo de
compostaje cuando se compara con partculas mayores, por lo que el tamao aconsejable es
de 2 a 5 cm (a medida que el tamao de partcula disminuye la superficie y el grado de
descomposicin se incrementan). Las partculas muy pequeas interfieren con la aireacin
mientras que las ms grandes no resultan reactivas.
Relacin carbono-nitrgeno (C:N)
La relacin carbono-nitrgeno expresa la cantidad de carbono por unidades de
nitrgeno que contiene una materia. Una relacin C:N de 20 a 30 con un promedio de 25
unidades de carbono por una unidad de nitrgeno, es decir C(25) : N(1) = 25 es considerada
como adecuada para iniciar el proceso de compostaje. Un material que tenga una
relacin C:N superior a 30, requerir un mayor nmero de generaciones de
microorganismos para su biodegradacin y mayor ser el tiempo necesario para alcanzar
una relacin C:N final entre 12 a 15 (considerada como apropiada para uso agronmico). Si
la relacin C:N es inferior a 20 se producirn prdidas de nitrgeno a travs de lixiviacin y
volatilizacin a medida que el nitrgeno se mineralize.
Los residuos de origen vegetal por lo general presentan una relacin C:N elevada y
los de origen animal una relacin C:N baja (aserrn = 400; podas, tallos, maz = 150; paja
de caa = 80; hojas de rboles = 40; estircol de equino= 30; estircol de ovino = 20; heno
= 20; estircol bovino =15; estircol de cerdo = 12 ; estircol de gallina= 10 ; harina de
sangre = 2).Cuando el material disponible no presente una relacin C:N apropiada para su
compostaje se debe mezclar con otros materiales ( balance de nutrientes), ejemplo: dos
partes de excreta bovina ( 7% de C y 0,4 % de N) con dos de aserrn (40 % de C y 0,1 % de
N) para obtener una relacin aproximada de 20.
Humedad
Si la humedad inicial de los residuos crudos es superior a 50 % se debe buscar la
forma de que disminuya antes de iniciar el proceso de compostaje. El material se puede
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extender en capas delgadas o mezclar con materiales secos procurando mantener la
relacin C:N requerida. La humedad idnea para una biodegradacin aerobia se sita entre
15 a 35 % con un rango de 40 a 60 %. Una humedad superior producir anaerobiosis y
favorece la desnitrificacin y al igual que una humedad inferior a 10 % disminuir
notablemente la actividad biolgica. Para conocer si el estado de humedad es ptimo, al
presionar con la mano o el pie la superficie de la cama compostera no debe escurrir agua.
pH
Valores de pH cercanos al neutro (6,5 a 8,0) aseguran el desarrollo de la gran
mayora de microorganismos responsables del compostaje. Generalmente al inicio del
proceso, el pH es 4,5-5; en pleno proceso es de 8,0 - 9,0 y finalmente al madurar el
producto es de 7,0. En la etapa mesfila I el pH se acidifica por la formacin de cidos
grasos a partir de los carbohidratos. En la etapa termfila el pH se alcaliza por la
amonificacin y en la etapa mesfila II el pH disminuye por el proceso de nitrificacin.

Aireacin
Los hongos y actinomicetos son aerobios obligados en su mayora, de manera que
cuanto menor sea la concentracin de oxgeno disponible ms lentamente se metabolizan
los residuos. Cuando la concentracin de oxgeno alrededor de las partculas desciende a
valores inferiores a 20 % aparecen olores nauseabundos producto de metabolismos
fermentativos. Ante esta situacin se suspende inmediatamente el riego y se remueve el
material con la consiguiente reconformacin de los camellones.
Temperatura
El compostaje se realiza en dos rangos de temperatura, mesoflico de 10 a 40 C y
termoflico entre 40 a 65 C. Cuando se agota el material de fcil degradacin, el
metabolismo se ralentiza y la temperatura desciende. Si se revuelve el material, la
temperatura se incrementa nuevamente debido a que residuos que an no han sido
descompuestos se metabolizan. Cuando la prctica de revolver el compost ya no eleva la
temperatura, el compost est listo para la estabilizacin que se puede dar en 20 das a ms
tiempo.
c. Descripcin del proceso de compostaje
Precompostaje
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Se denomina precompostaje a todos los procedimientos que se realizan antes de la
conformacin de los camellones o parvas y tienen como objetivo acondicionar la masa de
residuos para optimizar el proceso. Algunos de estos procedimientos se han mencionado y
descrito anteriormente.


- Balance de nutrientes
- Triturado
- Molienda
- Bioaumentacin
Algunos residuos como los de origen agroindustrial (sometidos en el proceso a elevadas
temperaturas) contienen poca carga biolgica o masa microbiana. En estos casos es
conveniente aplicar tcnicas de bioaumentacin. Las ms sencillas de estas tcnicas
consisten bsicamente en inocular artificialmente los desechos con una carga de
microorganismos. A continuacin algunos sistemas ampliamente aprobados:
- Inoculacin con suelo frtil
El procedimiento consiste en extender en el rea de trabajo los residuos en capas con
una altura no mayor a 20 cm y posteriormente distribuir suelo frtil sobre ellos, a razn de
0,5 Kg / m
2
de suelo. Luego de mezclar se procede a la conformacin de los camellones.
Esta tcnica es recomendada para materiales con exceso de humedad.
- Inoculacin por trasplante
Al igual que la inoculacin con suelo frtil, se extienden los residuos. A continuacin
del ncleo de una parva en etapa mesotrmica 1 de compostaje se extrae una cantidad de
material suficiente como para aplicar sobre los residuos extendidos (100 g//m
2
). Luego se
mezcla y se procede a conformar el camelln. Esta tcnica es recomendada para materiales
con exceso de humedad.
- Inoculacin con caldo de cultivo
Este procedimiento consiste en preparar un caldo de cultivo. Para ello se toma un
tanque de aproximadamente 200 L en el que se depositan 5 Kg de excreta de aves de corral
(frescas), 20 Kg de estircol bovino (fresco) y 5 Kg de suelo frtil o bien 5 Kg de material
proveniente del ncleo de una parva en etapa mesotrmica 1. A continuacin se llena el
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tanque con agua hasta 200 L y se agita. El recipiente debe ser instalado en un lugar donde
est sujeto a mnimas variaciones trmicas.
Despus de 48 horas, el inculo puede ser aplicado. Cada vez que se retira un volumen
de inoculo debe ser repuesto por un volumen igual de agua ms 0,25 Kg de suelo frtil o
bien 5 Kg de material proveniente del ncleo de una parva mesotrmica 1. El contenido del
recipiente debe ser agitado y homogeneizado por lo menos una vez al da, tratando de
remover el material sedimentado en el fondo. Segn las condiciones climticas, un
preparado puede rendir 600 a 700 litros de inculo. En el rea de trabajo se extienden los
residuos a ser compostados y se riegan abundantemente con el preparado. Luego se
conforman los camellones. Este tipo de tcnica es recomendada para residuos deficitarios
en humedad.
d. Sistemas de compostaje
Existen varios sistemas de compostaje cuyo objetivo comn adems de
transformar los residuos en compost es conseguir las condiciones letales para patgenos,
parsitos y elementos germinativos (semillas, esporas).
d.1 Sistemas abiertos
Parvas o camellones y pilas o montones son las denominaciones para la masa
de residuos en compostaje, cuando presenta una morfologa y dimensiones determinadas.
Segn el mtodo de aireacin utilizado, estos sistema pueden ser en camellones y pilas
mviles (aireacin y homogeneizacin se realiza por remocin y reconformacin) y sistema
de camellones o pilas estticas (aireacin se realiza en instalaciones fijas en reas o canchas
de compostaje que permiten realizar una aireacin forzada sin necesidad de movilizar los
camellones o pilas).
d.2 Sistema cerrados o en reactores
Los residuos orgnicos son procesados en reactores que permiten controlar
parmetros como humedad y aireacin. Tambin pueden posibilitar la mezcla continua de
los desechos mediante dispositivos mecnicos con los que se logra un proceso homogneo
en toda la masa en compostaje. En los reactores se llevan a cabo las etapas biolgicamente
activas y despus el material es retirado y acopiado para que se cumpla la maduracin.
e. Parmetros de control
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Una de las reglas fundamentales en el compostaje es mantener la
independencia fsica de la unidad de compostaje (UC). Nunca se debe adicionar material
fresco a una parva que ya ha sido conformada. Slo cuando se tiene el material equivalente
a la unidad de compostaje se debe conformar el camelln.
Es muy importante llevar registros de los datos ms relevantes de cada unidad
de compostaje (fecha de conformacin, relacin C/N de entrada, temperatura del material
antes de su ingreso al sistema, temperatura ambiente y todo dato que se considere de valor
para sistematizar el proceso). Los registros pluvimetricos son de gran importancia.
Deben ser delimitadas con marcas visibles, todas las dimensiones necesarias
en la cancha que puedan servir de referencia para la movilizacin y reconformacin de
los camellones. En la prctica, el material se explayar, perdiendo las dimensiones iniciales.
Esto es normal y cuando se reconformen los camellones se deber conservar es lo posible
las dimensiones de los diseos originales.
La aireacin y homogenizacin de la masa en compostaje favorece el
metabolismo aerobio y permite que el proceso se realice en forma homognea. Esta
operacin se puede ejecutar manualmente y mecnicamente, procurando que el material del
ncleo pase a formar parte de la corteza y viceversa. No existen frecuencias de aireacin y
riego establecidas que resulten aplicables para todos los casos posibles. Las aireaciones
excesivas son tan perjudiciales como los riegos en exceso. Uno de los parmetros que
resultar de fcil determinacin es la temperatura y es a partir de la misma que se puede,
en parte ejercer control sobre el proceso.
La temperatura debe ser tomada en el ncleo del camelln. Existen
termmetros diseados para este fin. Si no se cuenta con un termmetro de este tipo pueden
utilizarse termmetros para uso textil o bien termmetros para parafina utilizados en
laboratorios de histologa. Considerando la longitud del camelln (24 m), se recomienda
tomar la temperatura en dos puntos equidistantes y tomar el valor promedio aritmtico
entre los dos puntos.
Para el control del contenido de humedad se puede aplicar el proceso
emprico que consiste en tomar con la mano una muestra de material, cerrar la mano y
apretar fuertemente. Si se observa que sale un hilo continuo de agua, el material contiene
ms de 40 % de humedad. Si el material gotea intermitentemente, el contenido de
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humedad es cercano a 40 %, si no gotea y cuando se abre el puo permanece moldeado, la
humedad est entre 20 a 30 % y si se abre el puo y el material se disgrega, contiene una
humedad inferior a 20 %.
Se recomienda realizar las aireaciones cuando comienza a decrecer la
temperatura, despus de haber alcanzado el valor mximo en la etapa termognica.
Inmediatamente a la remocin del material, la temperatura desciende y paulatinamente
vuelve a subir hasta completar una nueva etapa termognica. Puede ser que solo se cumpla
una etapa termognica o ms de dos. Si el material ha sido preparado y los camellones se
han homogenizado adecuadamente en el proceso de aireacin, es frecuente que se presenten
no ms de dos etapas termognicas. Si hay necesidad de riego, es conveniente hacerlo en
las etapas mesotrmicas. El riego debe ser lo ms atomizado posible, para no producir
cambios bruscos de temperatura.
Una vez culminado el proceso de compostaje, el material es trasladado al rea
de procesamiento y es conveniente extenderlo en capas con una altura no mayor a 30 cm
para favorecer la prdida de humedad hasta menos de 20 %.
Un compost apto para aplicacin agronmica, sea en forma manual o
mecnica, deber presentar una granulometra adecuada y homognea adems de estar libre
de elementos orgnicos e inorgnicos que dificulten su aplicacin. Existen muchas
alternativas para el refinado del compost ; la separacin granulomtrica por cribado es sin
duda la menos costosa de instrumentar y la que ha dado mejores resultados. Las cribas o
zarandas pueden ser vibratorias o de rotacin. Para utilizacin agrcola el tamao de malla
de la criba deber ser de 1 cm x 1 cm. Asimismo para que este proceso de realize sin
inconvenientes es fundamental que el compost presente un contenido de humedad inferior
a 20 %. Los procesos de refinado por razones obvias se realizan bajo techo.
En el proceso de refinado se produce un rechazo que dependiendo de la materia
prima utilizada y la granulometria que se desea obtener se puede presentar en el orden de
5% a 20 %. Para residuos de origen agrcola y agroindustrial se debe estimar un rechazo
de 6 %. Para compost producido a partir de fraccin orgnica de residuos slidos urbanos
el rechazo es cercano a 20 %. Si el rechazo es exclusivamente de desechos orgnicos,
ingresar nuevamente al sistema de compostaje.

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f. Descripcin de algunos mtodos de compostaje
f.1 Mtodo de INDORE
Es un mtodo perfeccionado en India. Consiste en colocar en forma alternada, una
capa de 20 a 30 cm de desechos vegetales, 20 cm de estircol fresco, una capa delgada de
cal (100g/ m
2
) y as sucesivamente hasta tener una altura de 3 a 4 metros. Las capas de
desechos vegetales y estircol se humedecen continuamente para favorecer la
descomposicin paulatina de la materia orgnica. De trecho en trecho y conforme se van
colocando los estratos se entierran tubos a manera de chimeneas o respiraderos para la
disipacin de los gases formados.
f.2 Mtodo de CARLIER
Es un mtodo practicado en Cuzco, Per. Se preparan fosas circulares a manera de
pozos ciegos , donde se arrojan todo tipo de desechos como rastrojos vegetales,
desperdicios de cocina y an excrementos de humanos y animales domsticos. Se
recomienda aplicar cal semanalmente. Una vez que el pozo se llena, el material es
removido hacia otro pozo nuevo.
f.3 Mtodo de OGDEN
Es un mtodo desarrollado en Estados Unidos y es recomendado para zonas
fras o con estaciones bien marcadas. Consiste en trazar sobre el terreno plano un cuadrado
de 1,50 m de ancho x 3,50 m de largo, utilizando estacas en los vrtices. El permetro se
asegura con tallos que salen del mismo rea despejada y en el centro se colocan diversas
capas de desechos vegetales, desperdicios de cocina y estircol. La altura mxima deber
ser de 1,50 m. Como techo del montculo se colocan rastrojos con las races hacia arriba y
se riega en forma natural con agua de lluvia. La produccin de compost se consigue de 1
ao para otro (primavera a primavera).
Este mtodo no demanda volteo ni riego o aplicacin de activadores por lo que
tambin se denomina mtodo del hombre perezoso. Cada ao se producen un promedio de
2,5 metros cbicos de compost por ruma. Se recomienda hacer varias pilas en forma
escalonada para as tener un abastecimiento permanente.
g. Caractersticas de un compost maduro
Al final del proceso de compostaje, se debe formar una masa homognea de
tierra negra y sin olor en la que no se distingan los componentes. La relacin C:N del
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producto debe ser de 12 a15 y deber presentar un pH de 5 a 8, 50 a 60 % de humedad,
olor a tierra, una granulometra menor a 10 mm, ms de 0,6 % de nitrgeno, ms de 0,5 %
de P
2
O
5
, ms de 0,3 % de K
2
O, ms de 30 % de materia orgnica y deber estar libre de
agentes patgenos y semillas de malezas.


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