HAPTOGLOBINA

(Ref. NPP21)
REACTIVO PARA LA DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE HAPTOGLOBINA EN EL
SUERO HUMANO CON MÉTODO NEFELOMÉTRICO
SÓLO PARA EL DIAGNÓSTICO IN VITRO
APLICACIONES CLÍNICAS
La haptoglobina es una proteína que se liga a la hemoglobina liberada por la lisis de los
eritrocitos. El complejo hemoglobina/haptoglobina se elimina rápidamente de la sangre
circulante. Por consiguiente, una intensa liberación de hemoglobina debida a hemólisis
intravascular, lleva a una disminución en la concentración de haptoglobina y, en casos graves
de hemólisis, a su total consunción. La haptoglobina es una proteína de fase aguda, y como tal
su concentración sérica puede ser elevada en los procesos inflamatorios.

PRINCIPIO DEL MÉTODO
La haptoglobina contenida en el suero humano forma algunos inmunocomplejos, reaccionando
con los anticuerpos específicos. Gracias al fenómeno de difración de la luz provocada por estos
inmunocomplejos, será posible medir, por medio de un nefelómetro, la intensidad de la luz
difractada, que es proporcional a la concentración de haptoglobina en la muestra analizada. La
evaluación de los resultados se realiza por comparación con un calibrador de concentración
conocida.
REACTIVO SUMINISTRADO EN EL KIT
− El reactivo debe ser almacenado a 2°-8°C. Durante su almacenamiento, en el antisuero
pueden aparecer sedimentos o turbiedad que no son debidos a contaminación microbiana y
que no no influyen sobre su actividad. En estos casos será necesario filtrar el antisuero
antes de usarse. Para este fin, la opción más recomendable consiste en el uso de filtros
desechables con tamaño de poro de 0.45 µm.
− La fecha de caducidad es imprimida en la etiqueta del envase y se refiere al componente
cerrado y almacenado a 2°-8°C.
• A/S Antisuero: 1 vial (2 mL) de antisuero policlonal desarrollado en cabra, contra
haptoglobina humana altamente purificada. Conservante: NaN3 (<0.1%). Listo para usarse.
Después de cada utilización, almacenar el reactivo herméticamente cerrado a 2°-8°C por 4
semanas. No congelar. Los títulos de anticuerpos (T), nos indican la cantidad en mg de
antígeno precipitado en gel de agarosa por 1 mL de antisuero. Estos niveles se determinan
mediante inmunodifusión radial y están indicados en la etiqueta del vial.
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
El antisuero debe ser utilizado con los siguientes reactivos:
• Calibrador Proteínas S, (Ref. NCPP1)
• Control Proteínas S/L, (Ref. NCPP2L)
• Control Proteínas S/M, (Ref. NCPP2M)
• Control Proteínas S/H, (Ref. NCPP2H)
• Diluyente, (Ref. NDPP1)
• Tampón de Reacción, (Ref. NDPP2)
• Nefelómetro Delta (Ref. 010138)
• Materiales desechables y equipos como descrito en el Manual de Uso para el Nefelómetro
Delta.
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deberán estar libres de partículas o trazas de fibrina en suspensión. lave cuidadosamente con una solución de hipoclorito de sodio al 3%. 91/689/EEC. − Consultar el procedimiento del ensayo descrito en el Manual de Uso para el Nefelómetro Delta. NDPP1). Evitar repetidos ciclos de congelamiento-descongelamiento de las muestras. Como tales. − Evite que se produzca cualquier contaminación entre muestras y reactivos. 22. 2 . NCPP1) con su respectivo Diluyente (Ref.97. todos los productos de desecho que se originen tanto a partir de los procedimientos manuales como de los automáticos están clasificados como material de desecho peligroso especial (clasificación europea código 180103).L. no. − Los reactivos para los cuales no se proporciona una ficha de seguridad. deberán observarse las siguientes normas de seguridad: − Utilizar guantes desechables durante la manipulación del material potencialmente infeccioso y durante el ensayo. ajustarse a las siguientes disposiciones: − No usar los reactivos después de su fecha de caducidad. no contienen sustancias químicas peligrosas o. Si los valores resultaran fuera del margen de medición se recomienda repetir el ensayo utilizando una dilución mayor o más baja. − Muestras: Antes de ser ensayados. en caso de que se presenten. deben entregarse a empresas especiales. − No fumar.02. Todo este material de limpieza debe manejarse como potencialmente infeccioso y desecharse correspondientemente. Estas diluciones se utilizarán para la calibración. después de haber sido centrifugados. de conformidad con la directiva 91/155 de la CEE.285/98. Asegurarse de que las muestras estén perfectamente límpidas antes de ensayarlas. beber o aplicar cosméticos durante la ejecución del ensayo. los sueros serán diluidos automáticamente por el equipo Delta en relación 1:20 con el respectivo Diluyente (Ref. Por lo tanto las muestras extremadamente lipémicas o los sueros congelados que aparezcan turbios después del descongelamiento deben ser clarificados por centrifugación (10 minutos a aprox. éstas están por debajo de los límites de concentración establecidos en el Decreto Italiano D. 15000 g). comer. Las muestras pueden conservarse a 2-8°C durante 8 días. − Evite salpicaduras y formación de aerosoles.Lgs. NDPP1). − De acuerdo con el decreto Italiano D.ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES Para obtener resultados correctos y reproducibles. PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO − Todos los pasos están realizados automáticamente por el equipo. − Dejar que los reactivos y las muestras alcancen la temperatura ambiente (15°-25°C). 94/62/EEC). calificadas para recoger y disponer de este tipo de desechos. de conformidad con las directivas de la CEE (91/156/EEC. para períodos más largos (1 año) se recomienda conservar las muestras a -20°C. que queda válida siempre y cuando los controles ensayados se mantengan dentro de los límites estimados. de fecha 05. Para evitar contaminaciones personales y ambientales. si las contienen. para ello. La calibración debe repetirse necesariamente cada vez que se use un nuevo lote de antisuero. Los sueros tendrán que haber coagulado completamente y. que preveen la disposición de lo siguiente: − Curva de calibración: preparada automáticamente por el equipo por medio de diluciones seriales del Calibrador (Ref. deberán utilizarse puntas desechables para cada muestra y reactivo. TOMA Y PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS El ensayo puede realizarse en muestras de suero humano.

06 0. VALORES NORMALES Los siguientes valores de haptoglobina tan sólo son orientativos. SENSIBILIDAD La sensibilidad del ensayo queda definida como el límite inferior de la curva de calibración y por eso depende de la concentración de las proteínas en el calibrador. NCPP2M) y S/H (Ref.03 x + 0.98 84 3 . Valor medio [g/L] CV % 15 1. Proteína Suero Haptoglobina 0. Los rangos de medición están detallados en el Manual de Uso para el Nefelómetro Delta. Intraensayo Proteína Haptoglobina Interensayo n° repl.− Control de calidad interno: Para cada serie de muestras y cada vez que se use un nuevo vial de antisuero.47 3.32 2. Tales resultados fueron comparados con un sistema nefelométrico de referencia (x).00 g/L FUNCIONAMIENTO DEL ENSAYO ESPECIFICIDAD El antisuero utilizado resulta ser específico para la determinación de Haptoglobina humana. NCPP2H). Los controles se tratan como las muestras analizadas.8 CORRELACIÓN ENTRE MÉTODOS Las muestras de suero fueron examinadas con Antisuero Radim anti-Haptoglobina humana (y). CÁLCULO DE LOS RESULTADOS La evaluación de las muestras se realiza automáticamente. por medio de la elaboración de los resultados con una función logit-log. es necesario aplicar un control de exactitud y precisión mediante los Controles para Proteínas S/L (Ref. NCPP2L). referirse a la relativa tabla suministrada con el envase de los controles mismos.6 17 1. PRECISIÓN La precisión fue evaluada midiendo la variabilidad intraensayo e interensayo. S/M (Ref. La correlación de resultados se resume en la siguiente tabla: Proteína Haptoglobina Regresión lineal Índice de correlación n° muestras y = 1. Valor medio [g/L] CV % n° repl.30 – 2. Es aconsejable que cada laboratorio defina un rango de referencia propio. Para los límites esperados.

: 0039/06/91249.Rev. Por causas técnicas relacionadas con la producción y/o el envejecimiento de las muestras.it 4 .00040 Pomezia (Roma) Italia – Tel.443.1 Fax: 0039/06/91249. National Order Entry: 0039/06/91249. Por eso se recomienda remover por centrifugación eventuales partículas debidas a sueros no completamente coagulados o por desnaturalización de proteínas. 125 .Via del Mare.700. Por lo tanto.3 − Novembre 2005 RADIM SpA .: 0039/06/91249. www. M318. podría ser necesario evaluar los resultados refiriéndose a valores específicos para cada método empleado.702.701.es .LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO La presencia de turbiedad o partículas puede interferir con el procedimiento del ensayo. Customer Care: 0039/06/91249.radim. Export Dept. los resultados obtenidos con los sueros de control y con los sueros empleados para el control de calidad interlaboratorios pueden variar en función del método utilizado.