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Principios de la

Tcnica de ELISA

DaCosta // 1

R Biopharm AG Dolivostrasse 10 D-64293 Darmstadt

ELISA Competitivo

DaCosta // 2

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ELISA Competitivo (1)

Micropocillos sensibilizados
con anticuerpos anti-IgG

Anticuerpos anti-IgG

DaCosta // 3

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ELISA Competitivo (2)

Agregar muestras estndares

DaCosta // 4

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ELISA Competitivo (3)

Agregar conjugado enzimtico

EE
EE

EE

EE

DaCosta // 5

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ELISA Competitivo (4)

Agregar solucin de anticuerpos

EE
EE

EE

EE

DaCosta // 6

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ELISA Competitivo (5)

EE
EE

DaCosta // 7

Comienza la reaccin

EE
EE

Hay un equilibrio entre analitos


unidos y libres de los estndares y
las muestras y el conjugado
enzimtico

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ELISA Competitivo (6)

EE
EE

DaCosta // 8

Lavado 3x

EE
EE

Remocin de los reactivos en exceso

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ELISA Competitivo (6)

Luego del lavado 3x


EE

DaCosta // 9

EE

Remocin total de los reactivos


no unidos

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ELISA Competitivo (7)

S
EE

DaCosta // 10

Agregar Sustrato/Cromgeno
EE

El Sustrato (S) desarrolla un


Producto (P) coloreado en
presencia de la enzima

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ELISA Competitivo (8)

Agregar solucin Stop


EE

EE

La reaccin se detiene y el color


desarrollado se mide visualmente
por medio de un espectrofotmetro

La intensidad del color es inversamente proporcional a la concentracin en las muestras/estndares


- a mas color, menos concentracin en las muestras/estndares

DaCosta // 11

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Curva Estndar de los kits FAST

DaCosta // 12

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Curva estndar

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