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Red de Revistas Cientficas de Amrica Latina, el Caribe, Espaa y Portugal

Sistema de Informacin Cientfica

Sangioni, Luis Antnio; Brayer Pereira, Daniela Isabel; Silveira Flores Vogel, Fernanda; de Avila Botton, Snia
Princpios de biossegurana aplicados aos laboratrios de ensino universitrio de microbiologia e parasitologia
Cincia Rural, vol. 43, nm. 1, enero, 2013, pp. 91-99
Universidade Federal de Santa Maria
Santa Maria, Brasil
Disponvel em: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=33125631023

Cincia Rural,
ISSN (Verso impressa): 0103-8478
cienciarural@mail.ufsm.br
Universidade Federal de Santa Maria
Brasil

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Projeto acadmico no lucrativo, desenvolvido pela iniciativa Acesso Aberto

Cincia Rural,
Princpios
Santa
de Maria,
biossegurana
v.43, n.1,
aplicados
p.91-99,aos
jan,laboratrios
2013
de ensino universitrio de microbiologia e parasitologia.

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ISSN 0103-8478

Princpios de biossegurana aplicados aos laboratrios de ensino universitrio de


microbiologia e parasitologia

Principles of biosafety applied to microbiology and parasitology laboratories in universities

Luis Antnio SangioniI Daniela Isabel Brayer PereiraII Fernanda Silveira Flores VogelI
Snia de Avila BottonI*

- REVISO BIBLIOGRFICA RESUMO


Os laboratrios de ensino de microbiologia e
parasitologia nas universidades brasileiras so ambientes em
que as atividades integradas, envolvendo ensino, pesquisa e
extenso, demandam a convivncia de pessoas, agentes e
amostras biolgicas, equipamentos, reagentes e resduos num
mesmo espao, sendo inevitvel a exposio das pessoas aos
diferentes riscos. As atividades realizadas nesses laboratrios
necessitam empregar as normas de segurana; pois, uma vez
que o fator humano susceptvel aos acidentes, os programas
de educao em biossegurana so imprescindveis. Entretanto,
para que esses programas sejam efetivos, necessrio que os
usurios estejam devidamente informados acerca dos princpios
de biossegurana, bem como aptos a coloc-los em prtica de
maneira correta, a fim de garantir a segurana dos
profissionais, acadmicos e do meio ambiente. Esta reviso
compila os principais aspectos da biossegurana relacionados
aos princpios e classificao dos riscos, dos agentes
biolgicos e dos nveis de conteno laboratorial, bem como
aborda as boas prticas laboratoriais nos laboratrios de
ensino, pesquisa e extenso em microbiologia e parasitologia.
Palavras-chave: risco, segurana, educao em biossegurana.
ABSTRACT
The teaching laboratories of microbiology and
parasitology in Brazilian universities are places where the
integrated activities of teaching, research and extension are
performed and require the coexistence in the same space,
persons, biological agents and samples, equipment, reagents
and waste, and where is inevitable the exposure of people to

the different risks. The laboratorial activities practiced in


Brazilian universities require the need for safety standards,
since the human factor is likely the causes of accidents in
laboratories, educational programs in biosafety become
indispensable to the prevention of risks. However, for an
education program become effective is necessary that the users
are fully informed about the biosafety principles, as well as
able to practice them properly to ensure the safety of all
professionals, academics and the environment. This article
compiles the main aspects related to the principles of biosafety,
risk classification of biological agents and levels of
biocontainment, and addresses the issues regarding safety
equipment and good laboratory practices applied to the
teaching laboratories in microbiology and parasitology.
Key words: risk, safety, education in biosafety.

INTRODUO
A biossegurana pode ser definida como o
conjunto de aes voltadas para a preveno,
minimizao ou eliminao de riscos inerentes s
atividades de pesquisa, produo, ensino,
desenvolvimento tecnolgico e prestao de servios,
visando sade do homem, dos animais, preservao
do meio ambiente e qualidade dos resultados
(TEIXEIRA & VALLE, 2010). No Brasil, existem duas
vertentes da biossegurana: a legal e a praticada. A
primeira est voltada manipulao de organismos

I
Departamento de Medicina Veterinria Preventiva, Centro de Cincias Rurais (CCR), Universidade Federal de Santa Maria
(UFSM), Avenida Roraima, 1000, prdio 44, sala 5007, 97105-900, Camobi, Santa Maria, RS, Brasil. E-mail: sabott20@gmail.com.
*Autor para correspondncia.
II
Departamento de Microbiologia, Instituto de Biologia, Universidade Federal de Pelotas (UFPel), Pelotas, RS, Brasil.

Cincia Rural, v.43, n.1, jan, 2013.

Recebido para publicao 09.03.11 Aprovado em 19.07.12 Devolvido pelo autor 25.09.12
CR-4897

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Sangioni et al.

geneticamente modificados (OGMs) e de clulas tronco,


regulamentada pela Lei no 11.105/05. A segunda, est
relacionada aos riscos qumicos, fsicos, biolgicos,
ergonmicos e de acidentes encontrados nos ambientes
laborais, amparada principalmente pelas normas
regulamentadoras do Ministrio do Trabalho e Emprego
(MTE), Resolues da Agncia Nacional de Vigilncia
em Sade (ANVISA) e do Conselho Nacional do Meio
Ambiente (CONAMA), entre outras (COSTA, 2005).
Os laboratrios de ensino de microbiologia
e parasitologia nas universidades brasileiras so
ambientes onde geralmente se realizam atividades de
ensino, pesquisa e extenso de forma isolada ou em
conjunto. Dessa forma, no mesmo espao, convivem
pessoas, equipamentos, reagentes, solues, agentes
e amostras biolgicas e os resduos gerados nessas
atividades. Nesse contexto, pode haver a exposio
das pessoas que neles trabalham, estudam e transitam
pelos diferentes riscos, sejam eles: biolgicos,
qumicos, fsicos, ergonmicos e de acidentes; tambm
gerando agravos para os animais e para meio ambiente
(BRASIL, 2006). Sendo assim, imprescindvel o
conhecimento da biossegurana a fim de preservar e/
ou minimizar os riscos nas atividades desenvolvidas.
Em virtude de existirem poucas publicaes cientficas
acerca da biossegurana nos laboratrios de ensino,
pesquisa e extenso em microbiologia e parasitologia
nas universidades brasileiras, este artigo busca informar
os principais aspectos relacionados biossegurana:
os princpios, a classificao dos riscos, dos agentes
biolgicos e dos nveis de conteno laboratorial, bem
como equipamentos de segurana e as boas prticas
laboratoriais aplicadas.
Princpios de biossegurana
A biossegurana e a segurana biolgica
referem-se ao emprego do conhecimento, das tcnicas
e dos equipamentos, com a finalidade de prevenir a
exposio do profissional, dos acadmicos, dos
laboratrios, da comunidade e do meio ambiente, aos
agentes biolgicos potencialmente patognicos. Para
isso, estabelecem as condies seguras para a
manipulao e a conteno de agentes biolgicos,
incluindo: os equipamentos de segurana, as tcnicas
e prticas de laboratrio, a estrutura fsica dos
laboratrios, alm da gesto administrativa (HIRATA
& MANCINI FILHO, 2002; BRASIL, 2006;
MASTROENI, 2005).
Equipamentos de segurana: so
considerados como barreiras primrias de conteno
e, juntamente com as boas prticas em laboratrio, visam
proteo dos indivduos e dos prprios laboratrios,
sendo classificados como equipamentos de proteo
individual (EPI) e coletiva (EPC) (HIRATA & MANCINI
FILHO, 2002; BRASIL, 2006; PENNA et al., 2010).

Tcnicas e prticas de laboratrio: nos


laboratrios, os indivduos necessitam receber
treinamento em relao s tcnicas de biossegurana.
Cada unidade deve desenvolver seu prprio manual
de biossegurana, identificando os riscos e os
procedimentos operacionais de trabalho, o qual dever
ficar disposio de todos os usurios do local
(BRASIL, 2006; PENNA et al., 2010).
Estrutura fsica do laboratrio (barreiras
secundrias): laboratrios de ensino de microbiologia e
parasitologia apresentam caractersticas diferenciadas,
devido grande variabilidade de atividades realizadas
em cada unidade. As barreiras secundrias incluem tanto
o projeto como a construo das instalaes e da
infraestrutura do laboratrio. A estrutura fsica
laboratorial deve ser elaborada e/ou adaptada mediante
a participao conjunta de especialistas, incluindo: os
pesquisadores, tcnicos do laboratrio, arquitetos e
engenheiros, de modo a estabelecer padres e normas a
fim de garantir as condies especficas de segurana
de cada laboratrio (BRASIL, 2006; SIMAS &
CARDOSO, 2008; PENNA et al., 2010).
Gesto administrativa: nesses locais, as
prticas gerenciais e a organizao das atividades so
focos importantes de anlise no estabelecimento de
um programa de biossegurana. Em cada laboratrio,
necessrio realizar um levantamento detalhado dos
agentes biolgicos manipulados, das rotinas e das
tecnologias empregadas, da infraestrutura disponvel.
Alm disso, imprescindvel identificar os principais
riscos e avaliar o nvel de conteno que definir as
aes de biossegurana especficas a serem adotadas
e que devem estar aliadas a um plano de educao
continuada em biossegurana (HIRATA & MANCINI
FILHO, 2002). Ressalta-se que, para manipular os
agentes biolgicos com potencial infeccioso, deve-se
conhecer as leis, dentre elas as internacionais, federais,
estaduais e municipais relativas biossegurana
(BRASIL, 2010a). A evoluo dos processos
tecnolgicos tem conduzido os profissionais ligados
s atividades de ensino nos laboratrios exposio
de diversos riscos, especialmente os biolgicos e
qumicos. De acordo com HIRATA & MANCINI FILHO
(2002), a avaliao e o manejo dos riscos so
mandatrios definio dos critrios e aes, visando
a minimizar os riscos que podem afetar a sade dos
professores, tcnicos, alunos e do meio ambiente.
Riscos nos laboratrios de ensino de microbiologia e
parasitologia
O risco denota incerteza em relao a um
evento futuro, sendo definido como a probabilidade de
ocorrer um acidente causando algum tipo de dano, leso
Cincia Rural, v.43, n.1, jan, 2013.

Princpios de biossegurana aplicados aos laboratrios de ensino universitrio de microbiologia e parasitologia.

ou enfermidade ou a probabilidade de concretizao de


um perigo (BRASIL, 2006). Essa probabilidade pode ser
classificada como: alta: o dano poder ocorrer sempre
ou quase sempre; mdia: o dano poder ocorrer em
algumas ocasies; ou baixa: o dano poder ocorrer
remotamente (SILVA, 2010). importante ressaltar que
a simples presena de um agente de risco em um
laboratrio no significa que, necessariamente, ocorrer
uma doena ou um acidente com os indivduos que
desenvolvem suas atividades no ambiente laboral. Em
diferentes recintos laboratoriais, h situaes de perigo
e risco; portanto, necessrio sempre agir baseado no
princpio bsico da biossegurana, isto , no princpio
da precauo. A preveno de acidentes demanda
principalmente dos EPIs e EPCs adequados,
treinamentos dos recursos humanos, adoo das
normas e procedimentos de biossegurana
(MASTROENI, 2005).
De acordo com HIRATA & MANCINI
FILHO (2002), os riscos esto classificados em: de
acidente, ergonmicos, fsicos, qumicos e biolgicos:
a. Risco de acidente: considerado como sendo as
situaes de perigo que possam afetar a integridade, o
bem estar fsico e moral dos indivduos presentes nos
laboratrios. Nos laboratrios de ensino, compreendem:
infraestrutura fsica com problemas (pisos lisos,
escorregadios e instalaes eltricas com fios expostos
e/ou com sobrecarga eltrica); armazenamento ou
descartes imprprios de substncias qumicas; dentre
outras.b. Risco ergonmico: qualquer ocorrncia que
venha a interferir nas caractersticas psicofisiolgicas
do indivduo, podendo gerar desconforto ou afetando
sua sade. So consideradas as leses determinadas
pelo esforo repetitivo (LER) e as doenas
osteomusculares relacionadas com o trabalho (DORT);
como exemplo, cita-se: a pipetagem, pesagens, adoo
de posturas fsicas inadequadas durante a execuo
das atividades, etc. Alm disso, o levantamento e o
transporte manual de peso elevado, o ritmo e a carga
horria excessivas de trabalho, a monotonia durante a
realizao de tcnicas meticulosas que demandam maior
ateno, tambm so considerados riscos ergonmicos
relacionados s atividades nos laboratrios de ensino
de microbiologia e parasitologia. c. Risco fsico:
considerado como sendo as diversas formas de energia
que os indivduos esto expostos, tais como: rudo,
vibraes, temperaturas extremas, radiaes ionizantes
e no ionizantes, ultra-som, materiais cortantes e
pontiagudos. d. Risco qumico: constitui-se em todas
as substncias, compostos ou produtos nas formas de
gases, vapores, poeiras, fumaas, fumos, nvoas ou
neblinas, as quais possam penetrar no organismo pela
via respiratria, por contato pela pele e mucosas ou

93

absorvidas por ingesto. e. Risco biolgico: abrange a


manipulao dos agentes e materiais biolgicos. So
considerados agentes biolgicos: vrus, bactrias,
fungos, parasitas, prons, OGMs, alm das amostras
biolgicas provenientes das plantas, dos animais e dos
seres humanos, como, por exemplo, os tecidos, as
secrees e as excrees (urina, fezes, escarros,
derrames cavitrios, sangue, clulas, matrias de
bipsias e peas cirrgicas, entre outros).
Tanto os agentes biolgicos como os
laboratrios de microbiologia e parasitologia recebem
uma classificao em nveis de biossegurana de acordo
com os critrios de avaliao dos riscos biolgicos.
Esses critrios so fundamentados principalmente na
anlise das seguintes caractersticas: virulncia, modo
de transmisso, resistncia, concentrao, volume,
dose infectante e da origem dos agentes biolgicos.
Tambm so considerados critrios de avaliao dos
riscos a disponibilidade de medidas profilticas e de
tratamento eficazes, caso acontea a exposio dos
indivduos ao risco; alm dos procedimentos tcnicos
realizados e dos fatores inerentes aos indivduos que
atuam nos laboratrios (BRASIL, 2006). Conforme o
grau de patogenicidade, os agentes biolgicos so
classificados em:
Classe de risco 1: inclui os agentes
biolgicos que apresentam baixo risco para o indivduo
e para a coletividade, com baixa probabilidade de causar
doena ao ser humano. Classe de risco 2: nessa classe
esto inseridos os agentes biolgicos que apresentam
risco individual moderado para o indivduo e com baixa
probabilidade de disseminao para a coletividade.
Podem causar doenas ao ser humano, entretanto,
existem meios eficazes de profilaxia e/ou tratamento.
Classe de risco 3: so os agentes biolgicos que
apresentam risco elevado para o indivduo e com
probabilidade moderada de disseminao para a
coletividade. Podem causar doenas e infeces graves
ao ser humano, entretanto nem sempre existem meios
eficazes de profilaxia e/ou tratamento. Classe de risco
4: nesta esto includos os agentes biolgicos que
apresentam risco elevado para o indivduo e com
probabilidade elevada de disseminao para a
coletividade. Apresenta grande poder de
transmissibilidade de um indivduo a outro. Podem
causar doenas graves ao ser humano, ainda no
existem meios eficazes para a sua profilaxia ou seu
tratamento (BRASIL, 2006).
Nveis de biossegurana ou de conteno dos
laboratrios de ensino em microbiologia e parasitologia
Para manipulao dos micro-organismos e
parasitas pertencentes a cada uma das quatro classes
Cincia Rural, v.43, n.1, jan, 2013.

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Sangioni et al.

de risco, devem ser atendidos alguns requisitos de


segurana, conforme o nvel de conteno necessrio.
Esses nveis de conteno so denominados nveis de
biossegurana ou de bioconteno, sendo designados
em ordem crescente (NB-1 a NB-4), pelo grau de
proteo proporcionado ao pessoal do laboratrio,
meio ambiente e comunidade (BRASIL, 2010b). Nvel
de biossegurana 1 (NB-1): necessrio em atividades
que envolvam os agentes biolgicos da classe de risco
1. Representa um nvel bsico de conteno, que se
fundamenta na aplicao das boas prticas laboratoriais
(BPLs), na utilizao de EPIs e EPCs e na adequao
das instalaes. Em geral, as atividades so realizadas
sobre as bancadas. Nvel de biossegurana 2 (NB-2):
exigido para as atividades que envolvam os agentes
biolgicos da classe de risco 2. O acesso ao laboratrio
deve ser restrito aos profissionais da rea (professores,
tcnicos) e aos acadmicos que estejam desenvolvendo
atividades de ensino, pesquisa e extenso, mediante
autorizao do responsvel tcnico. Nvel de
biossegurana 3 (NB-3): aplicvel aos locais em que
forem desenvolvidas atividades com os agentes
biolgicos da classe de risco 3. Nvel de biossegurana
4 (NB-4): exigido s atividades que manipulem os
agentes biolgicos da classe de risco 4. Nos laboratrios
NB-3 e NB-4, o acesso dos indivduos deve ser restrito
e utiliza-se um sistema de segurana altamente
rigoroso. So designados aos laboratrios que
desenvolvam atividades de diagnstico e pesquisa de
maior complexidade e nvel de bioconteno
(ENSERINK, 2000). Um resumo dos requisitos bsicos
exigidos em cada nvel de biossegurana laboratorial
est apresentado na tabela 1.
Atualmente, os laboratrios de ensino de
microbiologia e parasitologia vinculados s
instituies de ensino superior no Brasil equivalem aos
NB-1 e NB-2. Nas atividades realizadas nesses
laboratrios, h a manipulao de micro-organismos e
parasitas de baixo risco biolgico, estando associadas,
principalmente, ao desenvolvimento das aulas prticas,
das aes de extenso e de pesquisa. Em alguns
laboratrios vinculados s instituies que oferecem
servios de diagnstico e/ou pesquisa de agentes
patognicos, h maior risco biolgico, sendo necessrio
adotar medidas de biossegurana mais restritas. Como
citado por HIRATA & MANCINI FILHO (2002), nesses
ambientes, podem ser manuseados agentes biolgicos
classificados em nvel 3, tais como: vrus da raiva, vrus
da encefalomielite equina, vrus da imunodeficincia
humana (HIV), Mycobacterium tuberculosis,
Histoplasma capsulatum e outros patgenos
transmissveis por fludos corporais e sangue. Esses
laboratrios recebem a classificao NB-2, no entanto,

necessitam instituir procedimentos padres e BPLs


preconizados para o NB-3.
Em relao estrutura fsica, deve-se ressaltar
que alguns laboratrios pedaggicos esto situados em
prdios mais antigos, que inicialmente no foram
projetados como estrutura laboratorial e antecederam
os preceitos de biossegurana, revisados por PENNA
et al. (2010). Todavia, devido demanda das atividades
de ensino, pesquisa e extenso, as instalaes
laboratoriais tiveram que ser adequadas a essas
exigncias. Contudo, a fim de atender as exigncias
reunidas nas resolues e instrues normativas
estabelecidas pela CTNBio e, com base na Lei Nacional
de Biossegurana (BRASIL, 2005), as dependncias
desses laboratrios devero ser revistas e readaptadas.
De acordo com os nveis de biossegurana, as
caractersticas dos laboratrios de microbiologia e
parasitologia esto sintetizadas na tabela 2.
Equipamentos de segurana: EPIs e EPCs
EPI todo o dispositivo de uso individual,
destinado a proteger a sade e a integridade fsica do
trabalhador. A sua regulamentao est descrita na
Norma Regulamentadora no 06 (NR-06) do Ministrio do
Trabalho e Emprego (MTE). EPC, por sua vez, todo o
dispositivo que proporciona proteo a todos os
profissionais expostos aos riscos no ambiente laboral.
Nos laboratrios de ensino superior de
microbiologia e parasitologia, so imprescindveis o
emprego de EPIs e EPCs e o emprego das BPLs, a fim
de minimizar os riscos e desempenhar um trabalho com
maior segurana (HIRATA & MANCINI FILHO, 2002;
MASTROENI, 2005).
Os EPIs e EPCs bsicos recomendados para
uso nos laboratrios de ensino de microbiologia e
parasitologia devem estar em conformidade com a
Portaria MTB no 3.214, (BRASIL, 1978) e consistem em:
i. EPIs para proteo da cabea: culos de segurana
para prevenir os respingos nos olhos, os quais possam
causar infeco, principalmente os provenientes das
culturas de agentes e amostras biolgicas, que possam
ocasionar irritao nos olhos e outras leses
decorrentes da ao de solues e reagentes usados
no laboratrio; partculas que possam ferir os olhos.
Devem ser usados, tambm, protetores faciais
destinados proteo dos olhos e da face contra leses
produzidas por diversas partculas, respingos, vapores
de produtos qumicos e radiaes luminosas intensas.
Membros superiores: luvas e/ou mangas de proteo
devem ser usados em trabalhos em que haja perigo de
agravos provocados por: agentes biolgicos oriundos
dos diferentes materiais biolgicos; materiais ou
objetos prfuro-cortantes; produtos qumicos
Cincia Rural, v.43, n.1, jan, 2013.

Princpios de biossegurana aplicados aos laboratrios de ensino universitrio de microbiologia e parasitologia.

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Tabela 1 - Principais requisitos para os nveis de segurana laboratorial.


------------Nvel de biossegurana-----------Requisitos
1

Isolamento do laboratrio
N
N
S
S
Sala completamente vedada para a descontaminao
N
N
S
S
reas de escritrios designados administrao e pesquisa fora das instalaes de
N
N
S
S
bioconteno
Local para acondicionamento de roupas e objetos pessoais fora das reas de bioconteno
R
S
S
S
Refeitrio fora da rea de bioconteno
S
S
S
S
Smbolo de risco biolgico afixado na porta de entrada e nas reas de manipulao de
N
S
S
S
agentes biolgicos
Execuo das atividades laboratoriais em dupla
N
N
R
S
Sistema para higienizao e segurana: pias para lavagem das mos com acionamento
S
S
S
S
mecnico ou automtico e chuveiro e lava-olhos
------------------------------------------------------------------------------Ventilao-----------------------------------------------------------------------------Aduo do ar
N
R
S
S
Sistema de ventilao controlada
N
R
S
S
Exaustor com filtros de alta eficincia (High Efficiency Particulated Air - HEPA)
N
N
S
S
Entrada com porta dupla
N
N
S
S
Sistema de portas com travamento mecnico ou automtico
R
R
S
S
Cmara de vcuo (presso negativa na rea de bioconteno)
N
N
S
S
Cmara de vcuo com ducha
N
N
N
S
Antecmara
N
N
S

Antecmara com chuveiros/duchas


N
N
S
N
Tratamento dos efluentes
R
R
S
S
Incinerao dos resduos aps a esterilizao
N
N
R
S
------------------------------------------------------------------------------Autoclave-----------------------------------------------------------------------------In loco
N
R
S
S
Em rea separada, nas dependncias do laboratrio
N
N
R
S
Contendo duas portas
N
N
R
S
-------------------------------------------------------------Cabines de segurana biolgica (CSB) ------------------------------------------------------------Classe I
R
R
Classe II
R
S
S
Classe III
R
S
Circuito interno de imagem
N
N
R
S
Registro pelas autoridades sanitrias nacionais
N
N
S
S
Roupas de proteo com presso positiva e ventilao
N
N
N/S*
S
Uso EPIs
S
S
S
S
Cumprimento das BPLs
S
S
S
S
Incinerao dos resduos aps a esterilizao
N
N
N
S
N- No mandatrio; S- Uso mandatrio; R- Uso recomendvel. *Se houver risco de produo de aerossis, exigido o uso do traje de
presso positiva e ventilao associado utilizao de CSB classe II. Fonte: Adaptado de PENNA et al. (2010).

(corrosivos, custicos, txicos, solventes orgnicos,


etc.); materiais ou objetos geradores de temperaturas
extremas (aquecidos ou frios). Membros inferiores:
calado de proteo impermevel, solado liso e
antiderrapante, sendo resistente aos agentes
biolgicos patognicos; produtos qumicos; umidade;
riscos de acidentes (escorreges, tropeos e quedas).
Tronco: vestimentas de proteo para atividades em

que haja perigo de danos provocados especialmente


por riscos de origem biolgica, qumica, fsica, tais
como: jalecos, aventais e macaces. Sistema
respiratrio: equipamentos de proteo respiratria
(EPR) so os dispositivos usados para evitar a
exposio aos diferentes agentes presentes nos
laboratrio de microbiologia e parasitologia, em
concentraes prejudiciais sade dos usurios, de
Cincia Rural, v.43, n.1, jan, 2013.

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Sangioni et al.

Tabela 2 - Resumo das caractersticas dos laboratrios de microbiologia e parasitologia de acordo com os nveis de biossegurana (NB).

NB

NB-1

NB-2

NB-3

NB-4

Agente biolgico

Procedimentos

Menor potencial
patognico para
adultos sadios,
incluindo os nozoonticos.

Boas prticas
laboratoriais (BPL)
bsicas so requeridas.

Infeces no
homem, existindo o
risco de ingesto e
inoculao
percutnea e mucosa
em laboratoristas.

BPLs bsicas, o acesso


ao recinto deve ser
limitado; sinalizar as
reas de risco
biolgico;
descontaminar o lixo e
resduos; instituir
protocolos para
primeiros socorros.

Exticos ou
selvagens com
potencial de
transmisso por
aerossis e de
provocar
enfermidade severa
e/ou letal

Todas as BPLs adotas


no NB-2, e: o acesso
ao recinto deve ser
controlado;
descontaminar o lixo e
resduos, bem como as
roupas usadas no
laboratrio antes da
lavagem; coletar
periodicamente o soro
dos profissionais e
utilizar os
imunoprofilticos
disponveis.

Altamente perigosos
ou exticos,
transmitidos por
aerossis,
apresentando grande
risco de causar
morte. Ainda no
completamente
caracterizados

BPL empregadas no
NB-3 e: trocar de
roupas antes de entrar
nas reas de risco
biolgico; banho antes
da sada do
laboratrio; todo
material deve ser
descontaminado antes
da remoo.

Equipamentos de segurana
(Barreira primria)

Infraestrutura
(Barreira secundria)

Exemplos

Bancada aberta.

Vrus da: cinomose e


da hepatite canina;
bactrias e fungos
utilizados na indstria
alimentcia e
farmacutica; entre
outros.

Cabines de segurana
biolgica (CSB) de classe I
e II para manipular os vrus
e tudo o que produzir
aerossis e derramamentos;
usar jalecos, luvas, proteo
facial, dependendo da
atividade.

Assim como em NB1 e autoclave.

Vrus da:
influenza, rubola,
sarampo, caxumba;
Leptospira
interrogans,,
Staphylococcus
aureus; Candida
tropicalis, etc.
Em geral, os parasitas
so classificados
como agentes NB-2.

CSB de classe II e III para


manipular os vrus e tudo
que produzir aerossis e
derramamentos; trajar
roupas especficas para uso
restrito no laboratrio; EPIs
de acordo com a atividade a
ser desempenhada, assim
como uso de proteo
respiratria.

NB-2 e: separao
fsica dos corredores
e das reas de
circulao, portas
duplas com
fechamento
automatizado, fluxo
de ar direcional e
presso negativa nos
recintos, sistema para
filtrar ar HEPA (High
Efficiency Particulate
Air).

Herpes vrus dos


smios, hantavrus,
vrus da encefalite
equina venezuelana;
Mycobacterium
tuberculosis,
Histoplasma
capsulatum entre
outros.

Todos os equipamentos do
NB-3, e: CSB III e/ou
vestimentas (macaco) com
presso positiva em
associao com CSB II.

NB-3 e: prdio
separado ou rea
isolada com entrada e
sada de ar
controlada, sistema
de filtros HEPA,
presso negativa,
sistema de
descontaminao
controlado,
autoclaves com dupla
abertura e os resduos
depositados em
containers
especficos.

Vrus Ebola, vrus de


Marburg, vrus sabi,
vrus da febre
hemorrgica CrimiaCongo, entre outros.

Usar EPIs conforme a


atividade a ser
desenvolvida.

Fonte: Modificado a partir da NR-32 (BRASIL, 2005) e BRASIL (2006).

acordo com os limites estabelecidos na NR-6 do MTB


(BRASIL, 1978), incluindo: mscaras autnomas de
circuito aberto ou fechado para proteo das vias
respiratrias. As mscaras do tipo cirrgicas no so

efetivas em proteger o indivduo contra os aerossis


( h t t p : / / www. a n vi s a . gov. br / d i vu l g a / p ubl i c /
cartilha_mascara.pdf.). ii. EPCs: tambm devem seguir
as especificaes indicadas conforme a legislao
Cincia Rural, v.43, n.1, jan, 2013.

Princpios de biossegurana aplicados aos laboratrios de ensino universitrio de microbiologia e parasitologia.

vigente (BRASIL, 1978) e as instrues que constam


nos manuais disponveis (WHO, 2004; CDC, 2009) e
incluem: sinalizao de segurana: nos laboratrios de
microbiologia e parasitologia, servem para indicar onde
h presena dos riscos. Exemplo: smbolo de risco
biolgico afixado na porta de entrada nos locais de
manipulao e armazenamento de agentes biolgicos
(a partir do NB-2); smbolos de lquidos inflamveis,
explosivos, produto txico, veneno, etc., para indicar
presena de risco qumico; os smbolos de elementos
radioativos, apontando para risco fsico; mapa de risco,
sinais para as sadas de emergncia, escadas, extintores
de incndio, faixas de demarcao, etc. Extintor de
incndio: o nmero, o tipo e a distribuio desses
extintores devem estar adequados; sua manuteno e/
ou reposio devem ser peridicas, bem como o pessoal
do laboratrio deve ser treinado para o seu uso. Capela
qumica: cabine construda de forma aerodinmica, de
maneira que o fluxo de ar ambiental no ocasione
turbulncias e correntes, reduzindo o perigo de inalao
e a contaminao do operador e do ambiente. Borrifador
de teto: sistema de segurana acionado pela elevao
de temperatura, lanando fortes jatos de gua no
ambiente. Luz ultravioleta (UV): lmpadas germicidas,
com comprimento de onda ativo de 240nm. Devem estar
presentes nas cabines de segurana biolgica, tem ao
efetiva por 15 minutos e o tempo mdio de uso
aproximadamente de 3.000 horas. Pipetadores e pipetas
mecnicos e automticos: dispositivos de suco para
pipetas e ponteiras, como: pera de borracha, pipetador
automtico, pipetas mono e multicanais, etc. Conteno
para equipamentos como: homogeneizador, agitador,
ultrassom, etc. Equipamentos produtores de aerossis
devem ser cobertos com anteparo autoclavvel e,
preferencialmente, abertos dentro das cabines de
segurana biolgica. Containers para desprezar os
materiais contaminados e prfuro-cortantes: precisam
estar disponibilizados recipientes resistentes e
autoclavveis para desprezar os materiais que iro para
o descarte. Conjunto (kit) de primeiros socorros:
compostos por material comumente preconizado para
socorro imediato e antdotos especiais para produtos
txicos usados nos laboratrios de ensino de
microbiologia e parasitologia. Chuveiro e lava-olhos:
devem estar presentes em todos os laboratrios em
perfeito estado de funcionamento e higienizado. A gua
para os lava-olhos deve ser preferencialmente filtrada.
Cabine de segurana biolgica (CSB): classes I e II
(BRASIL, 2006).
Boas prticas laboratoriais (BPLs)
Conforme MASTROENI (2005) e ARAJO
et al. (2009), as BPLs padres constituem um conjunto
de normas, procedimentos e atitudes de segurana, as

97

quais visam a minimizar os acidentes que envolvem as


atividades desempenhadas pelos laboratoristas, bem
como incrementam a produtividade, asseguram a
melhoria da qualidade dos servios desenvolvidos nos
laboratrios de ensino de microbiologia e parasitologia
e, ainda, auxiliam a manter seguro o ambiente. A
utilizao das BPLs requer a aplicao do bom senso e
prudncia dos profissionais e acadmicos ao
desenvolver cada atividade. Cabe aos coordenadores
e professores dos laboratrios de ensino de
microbiologia e parasitologia o incentivo e a
fiscalizao da aplicao das normas e dos
procedimentos padres e especficos, permitindo, com
isso, a manuteno de um ambiente seguro e confivel
a toda equipe do laboratrio. As BPLs padres nos
laboratrios de ensino de microbiologia e parasitologia
devem ser conhecidas, aplicadas por todos os usurios
e compreendem:
1. restringir o acesso de pessoas ao laboratrio,
somente os indivduos autorizados pelos
coordenadores e professores podem ingressar nos
ambientes laboratoriais;
2. observar os princpios bsicos de higiene, entre
eles: manter as mos limpas e unhas aparadas; sempre
lavar as mos antes e aps vrios procedimentos
(manuseio de materiais biolgicos viveis; uso das
luvas; antes de sair do laboratrio; antes e aps a
ingesto dos alimentos e bebidas, etc.). Se no existirem
pias no local, deve-se dispor de lquidos anti-spticos
para limpeza das mos;
3. proibir: a ingesto e/ou o preparo de alimentos e
bebidas, fumar, mascar chicletes, manipular lentes de
contato, a utilizao de cosmticos e perfumes, o
armazenamento de alimentos para consumo nas reas
de manipulao de agentes biolgicos e qumicos. Em
todos os laboratrios deve haver uma rea designada
como refeitrio;
4. pipetar com a boca expressamente proibido e
jamais se deve colocar na boca objetos de uso no
laboratrio (canetas, lpis, borrachas, pipetas, entre
outros);
5. utilizar calados de proteo: fechados,
confortveis, com soldado liso e antiderrapante;
6. usar as luvas de procedimentos somente nas
atividades laboratoriais e evitar tocar em objetos de
uso comum;
7. trajar roupas de proteo durante as atividades
laboratoriais, como: jalecos, aventais, macaces, entre
outros. Essas vestimentas no devem ser usadas em
outros ambientes fora do laboratrio, como: escritrio,
biblioteca, salas de estar e refeitrios;
8. evitar o uso de qualquer tipo de acessrios/
adornos durante as atividades laboratoriais;
Cincia Rural, v.43, n.1, jan, 2013.

98

Sangioni et al.

9. manter os artigos de uso pessoal fora das reas


designadas s atividades laboratoriais;
10. organizar os procedimentos operacionais padres
(POP) para o manuseio dos equipamentos e tcnicas
empregados nos laboratrios;
11. garantir que a limpeza dos laboratrios (bancadas,
pisos, equipamentos, instrumentos e demais
superfcies) seja realizada regularmente antes e
imediatamente aps o trmino das atividades
laboratoriais. Em caso de derramamentos, dependendo
do tipo e quantidade de material biolgico disseminado,
pode-se empregar, para a descontaminao do local:
lcool a 70% ou soluo de hipoclorito de sdio,
preferencialmente, a 10%, deixando agir por 30 minutos
e aps remover com papel absorvente;
12. assegurar que os resduos biolgicos sejam
descontaminados antes de ser descartados;
13. manusear, transportar e armazenar materiais
(biolgicos, qumicos e vidrarias) de forma segura para
evitar qualquer tipo de acidente. O manuseio de
produtos qumicos volteis, metais, cidos e bases
fortes, entre outros, necessita ser realizado em capela
de segurana qumica. As substncias inflamveis
precisam ser manipuladas com extremo cuidado,
evitando-se proximidade de equipamentos e fontes
geradoras de calor;
14. usar os EPIs adequados durante o manuseio de
produtos qumicos;
15. identificar adequadamente todos os produtos
qumicos e frascos com solues e reagentes, os quais
devem conter a indicao do produto, condies de
armazenamento, prazo de validade, toxidade do produto
e outros;
16. acondicionar os resduos biolgicos e qumicos
em recipientes adequados, em condies seguras e
encaminh-los ao servio de descartes de resduos dos
laboratrios para receberem o seu destino final;
17. afixar a sinalizao adequada nos laboratrios, entre
elas, incluir o smbolo internacional de Risco Biolgico
na entrada dos laboratrios a partir do NB-2;
18. instituir um programa de controle de roedores e
vetores nos laboratrios;
19. evitar trabalhar sozinho no laboratrio e jornadas
de trabalho prolongadas;
20. providenciar treinamento e superviso aos
iniciantes nos laboratrios;
21. disponibilizar kits de primeiros socorros e
promover a capacitao dos usurios em segurana e
emergncia nos laboratrios.
CONCLUSO
As atividades de ensino, pesquisa e
extenso praticadas nos laboratrios de ensino de

microbiologia e parasitologia das universidades


brasileiras abrangem as diferentes reas do
conhecimento e no seu desenvolvimento existe a
presena de riscos. Esse fato demanda a necessidade
de normas de segurana destinadas anlise e
desenvolvimento de estratgias para minimiz-los,
sendo esta a principal funo da biossegurana. A
determinao dos nveis de conteno deve ser
priorizada nos laboratrios das universidades, pois,
com o surgimento de novas tecnologias, os
procedimentos operacionais para a manipulao de
agentes biolgicos patognicos devero ser adequados
para garantir a segurana dos profissionais, acadmicos
e do meio ambiente.
Devido ao fator humano estar implicado s
causas de acidentes em laboratrios, o maior esforo
deve estar direcionado aos aspectos de educao em
biossegurana, que devem estar presentes no cotidiano
das instituies de ensino. Salienta-se que alguns
indivduos tendem somente a levar em considerao a
execuo das atividades e menosprezar os riscos, sendo
que esta postura no pode ser admitida em qualquer
ambiente laboratorial. Para que um programa de
educao em biossegurana seja efetivo, necessrio
que todos os usurios dos laboratrios estejam
devidamente informados acerca dos princpios de
biossegurana, bem como aptos a coloc-los em prtica
de maneira correta, a fim de manter o ambiente seguro.
REFERNCIAS
ARAJO, S.A. et al. Manual de biossegurana: boas prticas
no laboratrios de aulas prticas da rea bsica das cincias
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www.unp.br/arquivos/pdf/institucional/docinstitucionais/manuais/
manualdebiosseguranca.pdf>. Acesso em: 23 fev. 2012.
BRASIL. Lei no 11.105, de 24 de maro de 2005. Regulamenta
os incisos II, IV e V do 1o do art. 225 da Constituio Federal,
estabelece normas de segurana e mecanismos de fiscalizao
de atividades que envolvam organismos geneticamente
modificados OGM e seus derivados, cria o Conselho Nacional
de Biossegurana CNBS, reestrutura a Comisso Tcnica
Nacional de Biossegurana CTNBio, dispe sobre a Poltica
Nacional de Biossegurana PNB, revoga a Lei no 8.974, de 5
de janeiro de 1995, e a Medida Provisria no 2.191-9, de 23 de
agosto de 2001, e os arts. 5 o , 6 o , 7 o , 8 o , 9 o , 10 e 16 da Lei no
10.814, de 15 de dezembro de 2003, e d outras providncias.
Dirio Oficial da Unio, 28 de maro de 2005. Disponvel
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BRASIL. Portaria MTB no 3.214, de 08 de Junho de 1978.
Aprova as Normas Regulamentadoras - NR - do Captulo V,

Cincia Rural, v.43, n.1, jan, 2013.

Princpios de biossegurana aplicados aos laboratrios de ensino universitrio de microbiologia e parasitologia.

99

Ttulo II, da Consolidao das Leis do Trabalho, relativas a


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