Seccin.

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Prctica 11 y 12.
Caracterizacin espectrofotomtrica del DNA e Identificacin de Bases Puricas y
Pirimidicas por Cromatografa en Capa Fina.
Introduccin.
Los cidos nucleicos son las biomolculas portadoras de la informacin gentica. Son biopolmeros
de elevado peso molecular, formados por otras subunidades estructurales o monmeros
denominados nucletidos.
En todos las clulas existen 2 tipos de cidos nucleicos el cido desoxirribonucleico (DNA) y el
cido ribonucleico (RNA).En el DNA se localiza la informacin gentica de la clula mientras que
diferentes molculas de RNA forman parte del sistema que traduce esta informacin en las protenas
que determinan la estructura y la funcin celular.
Las funciones del DNA son programar tanto en el tiempo como en el espacio, la biosntesis
ordenada de los componentes de las clulas y de los tejidos. Formado por desoxirribononucleotidos
cuyas bases nitrogenadas son adenina, guanina, citosina o timina. Mientras que el RNA est
formado por ribononucleotidos cuyas bases nitrogenadas pueden ser adenina,guanina,citosina o
uracilo.
Los cidos nucleicos en presencia de cidos minerales fuertes y concentrados se hidrolizan
liberando las bases nitrogenadas, el azcar y el grupo fosfato.
Objetivos.

Obtener el espectro de absorcin caracterstico del DNA.

Efectuar una separacin de las bases nitrogenadas de RNA y DNA por cromatografa en
capa fina,identificndolas por la propiedad que tienen de absorber la luz ultravioleta.

Resultados.

200
205
210
220
225
230
235
240
245
250
255
260
265
270
275
280
285
290
295
300

Absorbencia
0.305
0.626
0.121
0.616
x
800=0.02190
C= 22500
g/mL 0.010
0.080
0.175
0.209
0.434
0.616
0.884
Pureza=
=1.44
0.426
0.517
0.601
0.616
0.610
Rendimiento = 72%
0.577
0.510
Nomograma = 0.022 mg/mL = 0.0000220.426
g/mL
0.334
Se anexa grfica de absorbencia en contra0.238
de
0.152
0.095

Concentracin de DNA g/mL

Seccin.- 3

Solucin
Bases
Nitrogenadas
RNA
Hidrolizado
DNA
Hidrolizado
Solucin
Bases
Nitrogenadas
RNA Pool
DNA Pool

Calculo de Rf
Adenina Guanina Citosina
0.5128
0.4743
0.4487

Timina
0.6794

Uracilo
0.6153

0.4615

0.7307

0.4871

0.5384

0.5897

0.7179

0.6538

Timina

Uracilo

Calculo de Rf
Adenina Guanina Citosina

Discusin de Resultados.
Conclusiones.

Referencias.

Pea A.BioqumicaEd.Limusa,Mxico D.F. pp.151-152 (2004)

Montoya H.H.Microbiologia bsica para el rea de la salud y afinesEd.Universidad de
Antioquia,2da.Edicin,Colombia,pp.97-98 (2008)
es.wikipedia.org/wiki/cido_desoxirribonucleico (09-02-2015)
www.uv.es/tunon/pdf_doc/AcidosNucleicos_veronica.pdf (09-02-2015)