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MAOS-1

Unidad 3
Horas 9,10 y 11
Cadena Respiratoria
(Cadena de Transporte de Electrones)

y
Fosforilación Oxidativa

OBJETIVO
ESPECÍFICO 6
 
Explicar las 
características de la 
CADENA 
RESPIRATORIA y de 
la FOSFORILACIÓN 
OXIDATIVA.

3 horas

CONTENIDO
 
1. Características generales de la cadena 
respiratoria. 
2. Organización y función de los componentes de la 
cadena respiratoria. 
3. Acoplamiento entre la cadena respiratoria y la 
fosforilación oxidativa. 
4. Energética de la fosforilación oxidativa.   Relación 
P/O. 
5. Inhibición de la cadena respiratoria, sitios de 
inhibición y ejemplos de inhibidores. 
6. Inhibición de la fosforilación oxidativa, sitios de 
inhibición y ejemplos de inhibidores. 
7. Mecanismo de acción de los desacopladores de la 
cadena respiratoria con la fosforilación oxidativa. 
Ejemplos.  

LA MITOCONDRIA
CARACTERÍSTICAS ESTRUCTURALES

  incluyendo  aquellas    requeridas  para  la  oxidación  del  piruvato  y    los    ácidos  grasos  y  las  del  ciclo  del  acido cítrico. . La matriz también contiene ADN mitocondrial.  Estas  moléculas  entran  al    EIM.LA MITOCONDRIA Partes que la constituyen Membrana externa (MME):   La  MME es muy permeable.  que  forma  poros  que  permiten  la  libre  difusión  de  moléculas  hasta  de  10kDa  .  EIM: Es el espacio  entre la MME y la MMI.  debido  a  que  contiene  muchas  copias  de    una  proteína transportadora llamada  Porina.  Otras  proteínas    ubicadas  en  esta  MME  incluyen    enzimas  implicadas  en  el  metabolismo  de los  lípidos. a  la mayor parte de las moléculas pequeñas  e  iones. ribosomas  mitocondriales ARNt. y varios enzimas requeridas para la expresión de  los genes mitocondriales. El EIM es químicamente  equivalente al del citosol.   Matriz: este  gran  espacio  interno  contiene  una  mezcla  altamente  concentrada  de  cientos  de  enzimas.  pero  la  mayoría    no    atraviesa  la  impermeable    MMI.

Contiene proteínas con 3 tipos de funciones: 1) Las    Enzimas  que  llevan  a  cabo  la  reacciones  de  oxidación  de la cadena respiratoria. H2O.Membrana Mitocondrial interna (MMI) Esta plegada formando invaginaciones llamadas crestas.  las  cuales  son  esenciales  para  el  proceso  de  fosforilación  oxidativa. y CO2. y 3)  Las  Proteínas de Transporte (Translocasas).  Contiene  una  alta  proporción    de  Cardiolipina  un  fosfolípido  que  ayuda  a  la    MMI  a  ser    especialmente  impermeable a iones  y  moléculas polares. 2) La ATP sintasa que produce ATP en la matriz (fosforilación oxidativa). .  Es  permeable  sólo a  moléculas pequeñas neutras. que  permiten  el  pasaje  de metabolitos a través de la MMI. lo que incrementa  grandemente  su  área  total.  el  cual  genera  la  mayoría  del  ATP  de  la  célula  animal.  Es  altamente  especializada. como el O2.

Componentes y Componentes y funciones funciones mitocondriales mitocondriales Fuente: texto Lehninger Principios de Bioquímica-4ta e .

Se divide en 3 etapas para su estudio: .la Respiración Celular.

1 2 3 La 3 etapas de la Respiración celular .

Descarboxilación  Oxidativa del Piruvato Ciclo del Acido Cítrico .

Entrada de electrones desde la glicolisis. y CAC. a la Cadena respiratoria. oxidación del   piruvato. .

.Cadena Respiratoria mitocondrial Es la fuente principal de energía para la síntesis de ATP en los animales y otros organismos eucariontes.

ncbi.gov/books/ Texto: biology molecular the cell CITOSOL .nlm.Membran mitocondrial externa Membrana mitocondrial interna IV III ATP sintasa I CTE fuera entra CAC fuera Acetil-CoA Piruvat o Ácidos grasos Piruvat o Ácidos grasos Moléculas alimenticias del citosol http://www.nih.

el H2.Combustión H2 Oxidación biológica ½ O2 H2 ½ O2 (*NADH o FADH2 ) Se separan los e.de los H+ 2H+ 2e- Explosión Libera energía calórica el hidrógeno (H2) del aire se mezcla con Oxígeno. por medio de la cadena respiratori a ½ O2 H2 O . la energía se libera como calor. 2H+ la reacción de combustión es : H2(g) + ½ O2(g) → H2O(l) + calor H2 + ½O2 → H2O La energía es almacenad a en una forma útil para la célula. se oxida a una alta 2eH2O velocidad.

2. Características generales de la Cadena respiratoria.1. Organización y función de los componentes de la Cadena respiratoria. 3. Acoplamiento entre la Cadena respiratoria y la fosforilación oxidativa .

es decir el sistema consume oxígeno.Características de la Cadena Respiratoria (CR)  Es un conjunto de cuatro (4) complejos enzimáticos firmemente  unidos dentro de la MMI. además de Ubiquinona y Citocromo c.  El nombre de Cadena Transportadora de Electrones(CTE)  hace  énfasis  en  el  hecho  de  que  el  sistema  es  una  cadena  de  reacciones  redox  en  la  que  hay  interacción  sucesiva  de  transportadores  que  transfieren electrones.  La  denominación  de  CADENA RESPIRATORIA (CR) hace  referencia  a  que  el  transportador  final  de  la  cadena  transfiere  los  electrones al oxígeno.  como  transportadores  electrónicos. .  actuando  todos  en  estrecha  asociación.

Características de la Cadena Respiratoria (CR)  La CR REOXIDA las coenzimas reducidas NADH y FADH2.    Este  proceso  es  esencial  para  el  metabolismo  ya  que  proporciona  NAD+ y FAD que  se  puede  dirigir  a  las  vías  metabólicas  que  los  requieren  para  seguir  funcionando.  liberan  energía  la  cual    se  utiliza  para  producir    ATP.  como por el ejemplo.  Las Reacciones de Oxidorreducción que se dan en la  CR. el ultimo aceptor de electrones.  son  conducidos   al  Oxígeno (O2). y  los    electrones  que  estas  transportan  . el Ciclo del Ácido Cítrico.   .

82 V)  .  por  tanto  los  electrones  fluyen  sucesivamente  a  lo  largo  de  la  cadena hasta que finalmente son transferidos al oxigeno (O2). FLAVOPROTEÍNAS 2.32 V).  .  Contienen unas clases especiales de proteínas : 1.Características de la Cadena Respiratoria  Existen 2 puntos de entrada a la CTE: Un Punto de entrada para la  coenzima NADH (el complejo I) y Un Punto de entrada para la  coenzima  FADH2 (la CoQ)  Las  reacciones  de  la  CTE  se ordenan según el valor de sus potenciales de reducción  . y el mas positivo a la derecha (+0.   CITOCROMOS .  encontrándose  el  menos  positivo  en  el  extremo  izquierdo ( - 0. Por tanto los electrones pasan a través de los 4 complejos desde los potenciales de reducción estándar mas bajos hacia los mas altos. PROTEÍNAS  FE-S 2.

Componentes de la Cadena Respiratoria .

MME Espacio intermembrana Cit c e¯ e¯ MMI I Q e¯ NADH e¯ III IV II NAD+ FADH2 Matriz mitocondrial FAD H2O ½ O2 + 2H+ MAOS .

  por  lo  que  se  comportan como grupos prostéticos. las cuales  no se disocian de la  enzima    durante  su  oxidación  y  reducción.  2. estas contienen   FMN o  FAD fuertemente unidos. . Las dos enzimas están fijadas a la MMI. La  enzima:  Succinato deshidrogenasa(también llamada Complejo II). La  enzima:  NADH deshidrogenasa (también llamada NADH-Q oxidorreductasa o  Complejo I) . Estas son: 1.  contiene  FAD  que  recibe  los  hidrógenos del  Succinato.(I) Flavoproteínas (fp) En la CR hay  2 flavoproteínas.  contiene FMN que recibe los hidrógenos del NADH.

son grupos prostéticos no hemo. consistiendo de  átomos de Fe unidos a S inorgánico y  a 4 átomos de S de los residuos cisteína de la proteína. .(II) Proteínas ferrosulfuradas Proteinas con Centros hierro-azufre (Fe-S) Proteína Proteína Fe2S2 Fe4S4 Los Centros hierro-azufre. Éstos  centros  Fe-S  aceptan y liberan electrones. uno a la vez.

4  benzoquinona que contiene en los mamíferos  una cadena  lateral hidrófoba de 10 unidades de isopreno (Q10) . y abreviada: Q . .  Es un transportador de átomos de hidrógeno (protones + electrones). CoQ10  La    estructura    de  la    Ubiquinona    consiste  en  una  1. hacia los citocromos.  es    una  quinona  que  se  encuentra en todas partes )  Los animales pueden sintetizarla   Es  el  único  transportador  de  electrones  de  la  CR  que  no  es  una  proteína. Ubiquinona. que  la hace Soluble en los fosfolípidos en la MMI y.(III) Coenzima Q también nombrada como.  desde las flavoproteínas Complejo I y II.  Se  le  llama  Ubiquinona  (  por  su  ubicuidad  . es capaz  de difundir y moverse libremente a través de ésta.

CH3 -CH2-CH=C-CH2 - 2H+ + e Unidad de Isopreno) Dihidroquinona (CoQH2) (forma totalmente reducida) (2) OH 1 4 OH .Coenzima Q (Ubiquinona) 1 Ubiquinona (CoQ) (forma oxidada) 4 (Unidad de Isopreno de 5 Carbonos) (1) e Semiquinona (CoQ-) (radical libre O.

 Los electrones se mueven a través de los 5 tipos de citocromos de  la CR en el siguiente orden: b c1 c a a3 La  unidireccionalidad  del  flujo  de  electrones  en  la  CR  esta  dictada  por la propiedad de los citocromos a tener diferentes E’o .  con un átomo de hierro.(IV) Los Citocromos  Un  citocromo  es  una  proteína transportadora de electrones que  contienen  un  grupo prostético hemo.  El  átomo  de  hierro  del  hemo  sufre  una  oxidorreducción  reversible: Reducción Fe + 1e +3 Fe+2 .1e Hierro oxidado (férrico) Oxidación Hierro reducido (ferroso)  Hay 5 tipos de citocromos en la CR.

Hemo tipo b Se encuentra en citocromos b del  complejo Ubiquinona-citocromo c  oxidorreductasa Fe Hierro (Fe) Hemo tipo a Se encuentra en citocromos Fe a y a3 de la  Citocromo c oxidasa Fe Hemo tipo c Se encuentra en citocromos c y c1 La Fijación de un grupo hemo al citocromo (proteína) es covalente .

A excepción de la CoQ y el Citocromo c
el resto de los
transportadores electrónicos
se asocian en forma de grandes
Complejos enzimáticos

Complejos enzimáticos de la CR
Complejo Enzimático

Grupos prostéticos

( Complejo I)
NADH deshidrogenasa
o NADH-CoQ oxidorreductasa

1. FMN
2. Centros Fe-S

( Complejo II )
Succinato deshidrogenasa

1. FAD
2. Centros Fe-S

( Complejo III)
Ubiquinona- Citocromo c
oxidorreductasa.

1. Hemo b
3. Hemo
c1 Fe-S
4. Centros

( Complejo IV)
Citocromo oxidasa

1. Hemo a
2. Hemo a
3
3. CuA , CuB

No total
de
Subunidades

43
4

11

8

Los complejos de proteínas guían a los  e- a lo largo de 
la  Cadena  respiratoria  ,  de  manera  que  estos  se
mueven secuencialmente desde uno a otro complejo
enzimático.

Ordenamiento de la Cadena Respiratoria .

En  las  mitocondrias  que  respiran.  .  formando  una molécula de agua (H2O).  estos  electrones  en  última  instancia.  cada  molécula  de  NADH libera 2 electrones a la Cadena Respiratoria .  reducen  a  1  átomo  de  oxígeno  (media  molécula  de  O2).

  3 de ellos funcionan como   bombas de protones.NADH NADH DESHIDROGENASA Organización básica de la  Cadena respiratoria I SUCCINATO DESHIDROGENASA Q CITOCROMO C OXIDORREDUCTASA III Cit c CITOCROMO OXIDASA O2 IV II La CTE esta formada por 4 complejos  enzimáticos ( los cuales  funcionan  como transportadores de  electrones y. estos  son  la Q y el  Citocromo c. .  Estos complejos están  conectados  mediante dos  transportadores móviles  de electrones.

 encontrándose el menos positivo en el extremo  izquierdo ( - 0.significa electrones fp = flavoproteína  Los componentes de la CR  se ordenan según el valor de sus potenciales de reducción . .  por  tanto  los  electrones  fluyen  sucesivamente a lo largo de la cadena hasta que finalmente son transferidos al  oxigeno (O2).32  V).Organización básica y secuencia  que siguen los  electrones en la Cadena  Respiratoria  FADH2 (fp) e- FMN (fp) e- CI e- NADH  Q e- cit b e- cit c1 CIII e- cit c e- cit aa3 e- O2 CIV e.  y  el  mas  positivo  a  la  derecha  (+0.82  V)  .

Reacciones de oxidorreducción de los complejos enzimáticos de la Cadena Respiratoria .

Reacción catalizada por el Complejo I. pero uno cada vez.y 1H+ (un  ion  hidruro)    del    NADH  y    1  H+  (un  protón)  de  la  matriz.  y de aquí hasta la Q (Ubiquinona).  . La  transferencia  exergónica  de  2e.  hasta la Ubiquinona (Q). 2. los  2  electrones  fluyen  desde el NADH al FMN y  luego  a  FeS  que puede aceptar los electrones . Por tanto . el complejo I es una bomba de protones impulsada por la energía de la transferencia de  los 2 electrones. NADH deshidrogenasa: Cataliza  simultáneamente dos procesos   acoplados: 1.  Ocurre la transferencia endergónica de 4 protones de la  matriz hacia el EIM.

MME + 4H+ Espacio intermembrana MMI FMN II FeS QH2 2e¯ Q 2e¯ Reacción redox neta catalizada por el Complejo I (NADH deshidrogenasa): NADH + 5H+ + Q (reducido) Matriz 2H+ NADH H+ + NAD+ MMI matriz (oxidado) NAD+ + QH2 + 4H+ (oxidado) (reducido) EIM .

  formando CoQH2 . o Succinato deshidrogenasa: 1. La Succinato deshidrogenasa.  Por  lo  tanto  NO  hay  translocación de los protones a través de la membrana por el Complejo  II. que comprende el Complejo II de la  CR. para esta reacción es negativa.  luego  a    FeS.  y  se  encuentra  unida  a    la  membrana  interna  mitocondrial.  2.  y  finalmente  a  la  CoQ. . Aunque el G’°.  3. la energía liberada NO  es  suficiente  para  el  bombeo  de  protones.  es la enzima que oxida una molécula de Succinato a Fumarato en el  Ciclo  del  Ácido  Cítrico.Reacción catalizada por el Complejo II. Los 2 electrones liberados en la conversión de Succinato a Fumarato  se  transfieren  primero  al  FAD.

Succinato deshidrogenasa: Succinato + Q (reducido) II (oxidado) Fumarato + QH2 (oxidado) (reducido) .MME MMI Espacio intermembrana FMN + 4H+ FeS 2e¯ I QH2 Q 2e¯ FeS 2e¯ NADH H+ + NAD+ 2H+ FAD Matriz Succinato Reacción redox neta catalizada por el Complejo II.

Glicerol 3-P  Acil-CoA deshidrogenasa (1ª. pasan electrones y protones a la Ubiquinona .Además de la Succinato deshidrogenasa. pero No a través del Complejo II. otras deshidrogenasas mitocondriales dependiente de FAD.enzima de la -oxidación  de los Ácidos grasos) -matriz-  Glicerol 3-fosfato deshidrogenasa Cext-MMI (esta enzima es parte de una lanzadera para reoxidar el NADH citosólico) EFT = Flavoproteína  Transferidora de Electrones  Cext = cara externa de la MMI Cint = cara externa de la MMI EFTFAD FAD H2  EFT: Ubiquinona Oxidorreductasa FAD H2 (FADH2) Q FAD H2 Succinato deshidrogenasa (Complejo II) (ciclo del ácido cítrico) Cint-MMI QH2 .

.MME Espacio intermembrana FMN 2e¯ Glicerol-3P Glicerol-3P Deshidrogena Deshidrogena sa sa FeS 2e¯ I FAD II 2e¯ MMI Cara externa FAD Q EFT-Q EFT-Q Oxidorreductas Oxidorreductas a a FAD FAD Cara interna Matriz La Succinato Deshidrogenasa. todas estas transfieren . la Glicerol-3P Deshidrogenasa. electrones a la Coenzima Q. pero no abarcan la membrana y no tienen un mecanismo de bombeo de protones. y la EFT-Q Oxidorreductasa.

 QH2 dona 2 e- al Complejo III. 2. Dentro de este complejo los  electrones  se  transfieren  a  una  proteína FeS .  y a la vez  2 Cit c se reducen. . de  aquí  a    2 Citocromos tipo b. La vía de los  electrones por este  tramo de la CR es complejo. formando Citocromo c reducido .  los  2  electrones  se  transfieren  desde    el  Citocromo  c1 a  dos  moléculas  de  la  forma  oxidada  del  Citocromo c.  El  G’°    para  esta  reacción  es  lo    suficientemente  negativo  para  que  4  protones  sean  translocados  desde  la  matriz  mitocondrial  a  través  de  la  membrana interna para cada par de electrones transferidos. y luego son transferidos al Citocromo c1. Ubiquinona-Cit c-oxidorreductasa: 1.  Por  último.Reacción catalizada por el Complejo III.  3. Pero el  efecto neto es simple: 1 QH2 se oxida a Q.

Ubiquinona-Cit c-oxidorreductasa: + QH2 + 2 Cit c1 (Fe (Fe )) + 2H +3 +3 (reducido) (oxidado) (matriz) + Q + 2 Cit c1 (Fe (Fe )) + 4H +2 +2 (oxidado) (reducido) (EIM) .MME Espacio intermembrana FMN MMI 4H+ FeS 4H+ 2e¯ I QH2 2e¯ Q 2e¯ 2e¯ 2e¯ FeS Cit b Cit c1 III FeS 2e¯ NADH FAD 2H+ II Succinato H+ + NAD+ Matriz Reacción redox neta catalizada por el Complejo III.

Por cada 2 electrones que pasan por el complejo. En este Complejo se trasporta 1 único electrón a la vez.Reacción catalizada por el Complejo IV.  es  como  sigue: . reduciéndolo a H2O.  . 2. este utiliza 2 H +           como sustrato y produce1 molécula de agua (H2O). La  transferencia  de  electrones  a  través  del  complejo  IV  . 3.  La  transferencia  de  cada  electrón  debe  ocurrir  sin  la  liberación  de  especies reactivas dañinas para la célula.   primero  los  electrones  pasan  del  Cit c a un par de iones de cobre (CuA).  luego  a  un  centro Citocromo a3-CuB. También utiliza la energía de esta reacción redox para bombear 1H+ por  cada electrón que pasa. a  continuación. el último aceptor de electrones de la CR. Este  Complejo  IV  transporta  electrones  desde  el  Citocromo  c  al  Oxígeno molecular. . y finalmente a O2. Citocromo oxidasa: 1.  al  Citocromo a. 5.  4.

Citocromo oxidasa: 2 Cit c (Fe ) + 4H + ½ O2 +3 (reducido) + (matriz) + 2 Cit c (Fe (Fe )) + 2H + H2O +2 +2 (oxidado) (EIM) .MME 2H+ Espacio intermembrana QH2 2e¯ Cit c 2e¯ 2e¯ FeS Citc c1 2H+ 2e¯ IV IV CuA Citc b a III a3 Matriz MMI CuB 2e¯ ½ O2 + 2H+ H2O Reacción redox neta catalizada por el Complejo IV.

el oxígeno molecular es un aceptor terminal de electrones ideal. también tiende  a ocurrir hacia la derecha. se unen a un átomo de oxigeno para reducirlo hasta agua”. Como se discutió anteriormente.La reacción final en la cadena respiratoria.  el  más  positivo  en  toda  la  cadena  respiratoria. proporciona una gran fuerza impulsora termodinámica. . E’o ½ O2 + 2H+ + 2e- H2O + 0.816  V.816 V “ 2 protones son tomados de la matriz y 2 electrones que son cedidos por el Cit a3. y por lo tanto esta reacción . la reducción de O2 a H2O   tiene  un  potencial  de  reducción  estándar  (E’o)  de  +  0.  debido a su alta afinidad por los electrones.

¿Se libera energía en la Cadena respiratoria?

¿Cuánta energía se libera?

¿Cómo se conserva de forma eficiente esta energía?

¿En que se utiliza esta energía liberada?

E’o (V)
- 0,4

Cadena respiratoria: flujo de los electrones y potencial de reducción estándar de
componentes móviles (en rojo), y cantidad de energía liberada en cada complejo.

NAD+ + H+

NADH
NADH 2e-

(- 0,320 V)

Complejo I
E’o = 0,360 V
G´o = - 69,5 kJ/mol

- 0,2
(+0,031V)

0

Succinato
Succinato
fumarato
fumarato

+ 0,4

FADH2 Complejo
II

Q

Q

(+0,045 V)

Complejo III
E’o = 0,190 V
G´o = - 36,7 kJ/mol
Citocromo c (+ 0,235 V)
Citocromo c
Complejo IV
E’o = 0,580 V
G´o = - 112 kJ/mol

+ 0,6

2e+ 0,8
MAOS-

Fuente de los datos
Texto bioquímica de Voet

+
½ O2 + 2H
½ O2 + 2H+

H2O
H2O

(+ 0,816 V)

 El  flujo  de  electrones  desde  el NADH  al O2 es  un  proceso 
exergónico que  libera la cantidad de  220 kJ/mol (52 Kcal/mol)
NAD+/ NADH……. E’o = - 0,320 V
O2 / H2O………….. E’o = + 0,816 V
REACCIÓN DE OXIDORREDUCCIÓN NETA de la Cadena Respiratoria :

NADH + H+ + ½ O2

NAD + + H2O

G’o = - n F E’o
G’o = - 2 (96,5 kJ / V. mol) (1,14 V)
G’o = - 220 kJ/mol (de NADH)
“  Esta  energía  producto  de  la  transferencia  de  electrones  se 
conserva eficientemente en un Gradiente de Protones”.

. .031 V O2 / H2O………….150 kJ/mol Esta energía producto de la transferencia de electrones se conserva  eficientemente en un Gradiente de protones. = + 0.816 V G’o = . = + 0.5 kJ/V. mol) ( 0.2 (96.n F E’o G’o = . El  flujo  de  electrones  desde  el  FADH2  (de    la  oxidación  del  succinato  a  fumarato)  al O2  es  un  proceso  exergónico  que    libera la cantidad de  150 kJ/mol Fumarato / Succinato….847 V) G’o = .

esto permite  que  el gran cambio de energía libre total se divida en 3 paquetes  mas  pequeños. que contienen afinidad cada vez mayor por lo electrones (potenciales de reducción  estándar en aumento) en vez de pasar en forma directa al O2.  .Resumen:  Cuando los electrones pasan a través de 3 Complejos proteicos.  cada uno de  los  cuales  se ACOPLA con la síntesis de ATP en un proceso llamado  Fosforilación oxidativa.

580 V G´o = .E’o (V) .69.235 V) Citocromo c + 0. y cantidad de energía liberada en cada complejo.36.6 Complejo IV E’o = 0.8 MAOS- + ½ O2 + 2H ½ O2 + 2H+ H2O H2O (+ 0.112 kJ/mol ADP+Pi ATP 2e+ 0.0.320 V) ADP+Pi ATP (+0.4 Cadena respiratoria: flujo de los electrones y potencial de reducción estándar de componentes móviles (en rojo).031V) 0 Succinato Succinato fumarato fumarato + 0.2 (. NAD+ + H+ NADH NADH Complejo I E’o = 0.816 V) .190 V G´o = .4 FADH2 Complejo II Q Q (+0.7 kJ/mol ADP+Pi ATP Citocromo c (+ 0.360 V G´o = .5 kJ/mol .0.045 V) Complejo III E’o = 0.0.

  bloquea  la  Cadena  respiratoria  en  el  paso  entre  el citocromo b y  el citocromo c1 .Inhibidores de la Cadena respiratoria Inhiben la transferencia de electrones y. Estas sustancias pueden producir rápidamente la muerte I)I)Inhibidores Inhibidoresdel delcomplejo complejoI I  Rotenona: veneno de peces . e insecticida extraído de plantas  Amital (barbitúrico)  Amobarbital (barbitúrico)  Piericidina A (antibiotico) II)II)Inhibidores Inhibidoresdel delcomplejo complejoIIIIII  Antimicina A:  un  antibiótico    de  hongos. también interrumpen la fosforilación oxidativa. como consecuencia de ello.

 Cianuro (CN-)  N-3 : Azida  Monóxido de carbono (CO)  H2S .  por lo que evita  que el oxigeno pueda unirse  a la Citocromo oxidasa .Inhibidores de la Cadena respiratoria III) Inhibidores del complejo IV se unen al  Fe+3 de la Citocromo oxidasa .

INHIBIDORES DEL FLUJO DE ELECTRONES HASTA EL OXÍGENO Inhibidores: Rotenona Amital Amobarbital C I MME Inhibidores: Cianuro Azida Monóxido de carbono Inhibidor: Antimicina A Q CII CI II c ½ O2 + 2H+ CI V H2O ADP + Pi ATP Espacio intermembrana MMI citosol .

Formación de especies reactivas de  oxígeno (radicales libres) durante la  reacción del complejo enzimático  Citocromo oxidasa .

MME Espacio intermembrana 4H + e¯ MMI 4 H+ 2 H+ e¯ I QQ e¯ Cit c IV III 2e¯ NADH NAD+ Matriz Generación de especies  reactivas de oxígeno por la  cadena de transporte electrónico  mitocondrial. ½ O2 + 2H+ H2O .

y las especies que se pueden generar a partir de ellos. Superóxido. .Los derivados tóxicos del oxígeno molecular. tales como OH · se denominan colectivamente como especies de oxígeno reactivas o ROS. se forman inevitablemente pequeñas cantidades de anión superóxido y peróxido de hidrógeno. Esta enzima elimina los radicales superóxido por catalizar la conversión de dos de estos radicales en peróxido de hidrógeno y oxígeno molecular. ¿Cuáles son las estrategias de defensa celular contra el daño oxidativo por ROS? El principal de ellos es la enzima superóxido dismutasa. tales como superóxido radicales son rescatados por enzimas protectoras Aunque la citocromo c oxidasa y otras proteínas que reducen el O2 son un éxito notable en no liberar intermedios. peróxido de hidrógeno.

Estos  tres  .  el  peróxido de hidrógeno y el radical hidroxilo.    se  denominan  especies  reactivas  de  oxígeno  y  causan  lesiones  oxidativas  a  las  macromoléculas  celulares  (lípidos. genera agua (H2O). es obvio que el DNA mitocondrial y se radical hidroxilo (•OH) que el DNA nuclear a sufrir lesiones encuentra más expuesto oxidativas severas que pueden conducir a mutaciones y supresiones en su propia cadena El oxígeno molecular (O2) es un birradical  que tras la adición secuencial  de  4  electrones  y  4  protones  en  la  cadena  de  transporte  electrónico  mitocondrial.  el  radical  superóxido.  2  y  3  electrones.  Estas  son.  proteínas  y  DNA).El principal productor de radicales de oxígeno en los organismos aerobios es la mitocondria utiliza aproximadamente el 98% del O2 que ingresa en la célula reduciéndolo a agua a nivel del citocromo a3 de la cadena de transporte de electrones una pequeña parte del O2 incorporado por la mitocondria.  pueden  también  generarse. el peróxido de hidrógeno (H2O2).  moléculas  parcialmente  reducidas  con  1. al ser las mitocondrias la fuente más importante de como el radical superóxido (O2 ). respectivamente.  . sufre una reducción monovalente y genera especies reactivas de oxígeno.  en  el  que  se  produce  gran  cantidad  de  energía  (ATP).  como  subproductos. tales Por tanto. especies reactivas de oxígeno.  En  este  proceso.

total No.DNA mitocondrial codifica para:  Complejo Enzimático No. de Subunidades de Subunidades Codificadas por el ADN mitocondrial ( Complejo I) NADH deshidrogenasa o NADH-CoQ oxidorreductasa 43 7 ( Complejo II ) Succinato deshidrogenasa o Succinato-CoQ oxidorreductasa 4 0 ( Complejo III) Ubiquinona-citocromo c oxidorreductasa. 11 1 Citocromo c 13 3 8 2 ( Complejo IV) Citocromo oxidasa .

Nota: las laminas desde el 54 al 59 no serán evaluados en el examen parcial de esta unidad 3 .

.Fosforilación Oxidativa Es  el  proceso  por  el  cual    el  NADH y FADH2 producidos  por  la  oxidación  de  nutrientes  SE OXIDAN y simultáneamente ocurre la SÍNTESIS de ATP  .

Ecuación básica de la Fosforilación oxidativa ADP + Pi ATP sintasa ATP + H2O G’o = + 30.   Si  la  energía  libre  estándar  producto  de  la  oxidación  del  NADH al O2.  es  por  lo  tanto suficiente para  conducir  la formación de varios moles  de ATP.5kJ (*).  (*) en condiciones intracelulares reales es de 50kJ/mol) .5 kJ/mol La energía  libre requerida para  sintetizar   1mol de ATP a partir de ADP + Pi  es de 30.  esta  acoplada  a  la  síntesis  de  ATP.  en  condiciones  bioquímicas  estándares.

Mecanismo que explica el Acoplamiento energético del Transporte de electrones a la Síntesis de ATP Teoría quimiosmótica del Dr. Peter Mitchell  (1961)  Premio Nobel de química en 1978 quimiosmótico: este término describe las reacciones enzimáticas en las que interviene simultáneamente una reacción química y un proceso de transporte. .

 y es llamada fuerza protón motriz. Un Gradiente de carga electrica (es decir. La  energía libre de  la    transferencia de electrones. Este movimiento de protones genera: .  Siendo  positivo  (+)  el  lado  externo de la MMI y negativo (-) el lado interno. .  se  utiliza para un bombeo de Protones ( H+ )  desde la matriz   de la mitocondria hacia el EIM. 2.  un Gradiente de concentración de protones (es decir. 3. una diferencia de  cargas)  a  través  de  la  MMI. Juntos estos dos gradientes (de concentración de H+ y de cargas)     ALMACENAN la energía libre resultante de la transferencia  de electrones.Mecanismo que explica el Acoplamiento energético del transporte de electrones a la Síntesis de ATP: 1. . una  diferencia de pH) a través de la MMI.

 La membrana interna mitocondrial es impermeable  a los Iones H+ . El regreso de los protones hacia la matriz  a través  de Complejo de la ATP sintasa .   5.4. ¿ Como se acopla la  energía libre  de la transferencia  de protones a la síntesis de ATP? .    Proporcionando  este  flujo. De otro modo se disiparía el gradiente  de concentración de protones.  la  energía necesaria para unir un Pi  al  ADP . esta ACOPLADO  a la  Síntesis de ATP.

.MME 4H + + Espacio intermembrana + + + + + + + + + + + + + + + e¯ e¯ I MMI QQ 2H+ 4H+ + + Cit c + + IV III 2e¯ NADH NAD+ MATRIZ ½ O2 + 2H+ H2O Durante el transporte de electrones: los Complejos enzimáticos I . III y IV. hacia el espacio intermembrana (flechas verdes). bombean Protones ( H+ ) desde la matriz de la mitocondria.

  y  se  libera energía durante el proceso . que  en el EIM.El bombeo de H+ es un proceso endergónico. del 3.  Letra del alfabeto griego  (Psi) .   En conjunto la pH y la   constituyen un gradiente electroquímico .  Este bombeo de H+ tiene dos consecuencias: 1.  La  moléculas    NADH y FADH2 transfieren    electrones  a  la  CR.  transporte de electrones.   2.  parte  de  ésta  es  utilizada para  bombear protones desde la matriz al EIM. el cual almacena la energía . con el interior negativo y el exterior positivo (como  resultado de la salida neta de iones positivos). con el pH más alto (mas alcalino) en la matriz. Se  genera  un  Gradiente de concentración de protones (ΔpH)  a  través de la MMI. Se genera un Gradiente de carga (Δ) (= diferencia de potencial) a  través de la MMI. A esta energía almacenada en este gradiente  electroquímico se le  denomina FUERZA PROTON MOTRIZ.

OH.75 unidades mayor que el EIM) . vuelve a la Matriz mas negativa y al EIM mas positivo. Alta [ H+ ] H H+ H+ +  El EIM es Mas ácido H+ H+ H+ H+ H+ H+ H+ Espacio intermembrana +++++++++++++++++++++++++++ MMI OH.OH.OHOH OHOH - H++ H potencial de membrana= diferencia de carga eléctrica a través de una membrana H+ Matriz  La Matriz Mas alcalina  ( el pH es 0.La perdida de protones de la Matriz por el bombeo al Espacio Intermembrana (EIM) .OHH H ++ H++ H H++ H .

  es  decir  que  sustratos  como  el  NADH.  el  FADH2    y  el  oxigeno se hallen disponibles. Que  la  membrana  mitocondrial  interna  se  mantenga  intacta  y  no  se  haya    hecho  permeable    con  agentes  físicos o químicos. .  se  deben dar las siguientes condiciones. Que  la  transferencia  de  electrones  sea  continua.  2. 1.Para  que  se    pueda  mantener  este  gradiente  electroquímico  a  través  de  la  membrana  interna  .

  acompañado por el  flujo de protones  desde el EIM a la matriz. Esta compuesta por 2 componentes funcionales Fo y F1. . contiene el sitio catalítico para la síntesis de ATP . F1 : Es una  proteína periférica de membrana. Es un complejo enzimático de la  membrana  interna mitocondrial  que cataliza la síntesis de ATP a partir de ADP y Pi.ATP sintasa Es  una ATPasa  de  tipo F . que mira hacia el interior de la matriz. El subíndice 1 indica  que fue el primer factor identificado  como necesario  para la  fosforilación oxidativa. que forma un poro (canal) transmembrana para protones. El  tipo  “F”  proviene  de  la  identificación  de esta ATPasa  como un Factor de acoplamiento de energía.       Fo   :  Es una proteína integral ubicada en la MMI. La  letra  del  subíndice “o”  indica su inhibición por la  OLIGOMICINA .

Estructura de la ATP sintasa también llamada Fo . o Complejo V MATRIZ MITOCONDRIAL MEMBRANA INTERNA ESPACIO INTERMEMBRANA .F1 ATPasa.

.DIAGRAMA QUE REPRESENTA LA CADENA DE TRANSPORTE DE ELECTRONES Y LA FOSFORILACIÓN OXIDATIVA MME ESPACIO INTERMEMBRANA MMI MATRIZ ATP SINTASA Fuente: texto de Lehninger 4ta Ed.

 Adenina- Nucleótido Translocasa.  Es una proteína transportadora. 2.Sistemas de transporte a través de la Membrana mitocondrial interna 1. Este translocador es inhibido por un glucósido tóxico llamado  Atractilósido (de la planta Atractylis gummifera) y el Ácido bongkrékico  (antibiótico producido por un hongo que descompone la leche de coco). Transportador de Fosfato .   (El ADP  hacia  dentro  y  el  ATP hacia fuera de la matriz). El ADP es cotransportado con el ATP   en  direcciones  opuestas  por  esta  proteína  .

Translocasas de la membrana mitocondrial interna(MMI)  que transportan  ADP . y  Fosfato inorgánico MM Espacio Matriz I intermembrana + + + ATP ANT ADP + + + ADP ATP sintasa H + + H+ H2PO-4 + H2PO-4 H+ + + Gradiente de concentraci ón de protones ATP FT H+ + ANT = Adenina-Nucleótido Translocasa FT =  Fosfato Translocasa H2PO-4 = Fosfato inorgánico = Pi MAOS . ATP .

  Sin  embargo  este    se  utiliza    fuera de ella. .Importancia del transporte mitocondrial En  los  tejidos  aeróbicos  casi  todo  el  ATP  se    sintetiza  dentro  de  la  mitocondria.

Relación P/O Es  la  proporción  de  ATP  sintetizado  por    átomo  de  Oxigeno reducido a H2O .  Esta relaciones P/O están sujetas a revisión .

 es de 2. se utilizan en  los textos de bioquímica.     Los valores  2.  El  número  de  protones  necesarios  para  impulsar  la  síntesis de una molécula de ATP es de 4 (de estos 1  se gasta en transportar Pi y ADP a través de la MMI).5.  La  razón P/O cuando  un  NADH  es  el  dador  de  electrones.5 y 1. y los valores  3 y 2 para la razón  P/O.¿Cuántos protones han de entrar a través del Complejo Fo F1 (ATP sintasa) para impulsar la síntesis de ATP?  El  valor  consenso  de  los protones  que  se  bombean  hacia afuera  por  cada 2 e-   es: de 10 para el NADH  y  de 6  para el Succinato.5  (10/4) y 1. .5 (6/4) cuando  lo es el   Succinato. Fuente: texto de Lehninger 4ta Ed.

 En comparación la eficiencia de  un motor de automóvil típico es de < 30 %. Texto de Bioquímica Autor.5 kJ/mol x 100/220 kJ/mol =  42% bajo condiciones bioquímicas estándares.pag.  se cree que esta eficiencia termodinámica es de 70%. cap 22.  y  genera  la síntesis aprox.La  oxidación  de  un  NADH  se  acopla  a  la  síntesis  de  ATP. Edición.  En  consecuencia  la eficiencia termodinámica de  la  fosforilación oxidativa es  3 x 30. Voet-Voet 3ra. Sin  embargo  bajo  condiciones fisiológicas en  las  mitocondrias    activa  (donde  las  concentraciones  de  los  reactivos  y  los  productos  así  como  el  pH  se  alejan  de  las  condiciones  estándares).835 . de 3 ATP.

 ¿Qué sucede con el resto de la energía? Parte de esta energía  se pierde en forma de calor.Si solo se utiliza  aproximadamente  el 42 % de la energía   de la oxidación del NADH o FADH2 para La síntesis de  ATP. Por consiguiente la cadena respiratoria es nuestra principal  fuente de calor .

seria en teoría posible sintetizar 7. fuera de 100% .  . bajo condiciones estándares.Nota: Si la eficiencia en el proceso de síntesis de ATP acoplada con la oxidación de NADH .51 moles de ATP por cada mol de NADH oxidado a NAD+ .

. 2) La Síntesis de ATP. y 2 por el CIV).          4 por el CII. ADP y Pi desde el EIM hacia la matriz 4) El transporte de ATP desde la matriz hacia el EIM.LA ENERGÍA SE GASTA EN : 1) Bombeo de protones desde la matriz a EIM         (por c/ 2 electrones transferidos al O2 se bombean 4 protones por el CI. 3) El transporte de Piruvato.

El  ATP  de  forma  a  la  misma  velocidad  en  que  es  requerido  por  la  actividades celulares.  . El  consumo de O2 (tasa  respiratoria)  esta  controlado  por  la    concentración de ADP. La velocidad de la respiración celular aumenta si la concentración de ADP es alto.Regulación de la fosforilación oxidativa El control de la  velocidad de la Fosforilación oxidativa esta ligada a la  demanda de energía celular. la cual es una medida del estado energético   de la célula. lo que da lugar a la regeneración de ATP.  . como sucede cuando  los requerimientos de energía por la celular son altos. y la fosforilación de ADP. por tanto hay mayor disponibilidad de ADP para la Fosforilación oxidativa y aumenta la velocidad de la Cadena respiratoria.  hay un aumento de la velocidad en la degradación ATP a ADP +Pi.

UN AUMENTO EN LA UTILIZACIÓN DE ATP POR  LA CÉLULA PRODUCE UN AUMENTO DE LA CONCENTRACIÓN DE ADP AUMENTA  LA FOSFORILACIÓN DEL ADP POR LA ATP SINTASA AUMENTA EL FLUJO DE PROTONES DE REGRESO A LA MATRIZ AUMENTA EL FLUJO DE ELECTRONES. Y EL BOMBEO DE PROTONES  HACIA EL EIM  Y POR TANTO AUMENTA EL CONSUMO DE OXIGENO .

Bloque  completamente  la  oxidación  y  la  fosforilación en las mitocondrias Intactas.INHIBIDORES DE LA FOSFORILACIÓN OXIDATIVA La  oligomicina  un  antibiótico  producido  por  un  hongo  se  une  a  la    proteína  F0  de  la  ATP  sintasa.  impidiendo el normal movimiento de protones hacia  la matriz. .

Ácido bongkrekico: antibiótico  producido  por un hongo.INHIBIDORES DEL TRANSPORTE DE LOS NUCLEÓTIDOS DE ADENINA EN LA MEMBRANA MITOCONDRIAL INTERNA 1. . Atractilósido : glucósido vegetal 2.

Desacoplamiento entre la Cadena respiratoria y la Fosforilación Oxidativa por químicos desacoplantes  ( desacoplamiento de tipo no  fisiológico) Los desacopladores son compuestos que aumentan la permeabilidad de la membrana a los protones. .

 en esta situación la energía que normalmente se hubiera   conservado en la formación del ATP.  ácidos  liposolubles débiles que se unen a los H+ en el  EIM. Por  tanto  puede funcionar la cadena respiratoria sin tener lugar la síntesis de ATP . se pierde ahora en forma de calor.4 - dinitrofenol (DNP)   Carbonil-cianuro-p-trifluorometoxifenilhidrazona  (FCCP)   Dicumarol Ambos son ionóforos. y los liberan en la matriz. .DESACOPLAMIENTO DE LA FOSFORILACION OXIDATIVA Mecanismo de acción: Los  desacopladores  tienen  como  efecto  desconectar  la fosforilación oxidativa de la transferencia de electrones. ejemplo de dos  desacopladores químicos:   2. difunden a través de la membrana.

DESACOPLANTE VELOCIDAD DE  LA CADENA RESPIRATORIA  (OXIDACIÓN) FOFORILACIÓN   DE   ADP .

Efectos fisiológicos de los desacopladores : 1. La concentración de ADP ya no limita la velocidad de la respiración” . Causa Perdida de Peso “Estos dan por resultado una respiración no controlada. Aumenta la Tasa metabólica. Aumenta el Consumo de oxigeno 3. 4. Aumenta la Producción de calor (fiebre). 2.

Desacoplamiento fisiológico entre la Cadena respiratoria y la Fosforilación Oxidativa Termogénesis adaptativa Condiciones en las que ocurre:  En respuesta al frio  En periodos de Hibernación  Ingestión de alimentos Lugar : exclusivamente en tejido adiposo marrón .

Para mantener la temperatura corporal   en los : calor calor 1. que nacen sin pelaje (incluyendo al humano) 2. Animales Recién nacidos de algunas especies. Las Mitocondrias desacopladas del tejido adiposo marrón   producen  calor. en poca cantidad (distribución de la grasa marrón: parte dorsal del tórax.Generación de calor (termogénesis) en el Tejido adiposo marrón. riñones. . corazón. parte inferior de los omóplatos. alrededor de las adrenales. Seres humanos adultos. región perianal e inguinal). Animales de hábitat frio 4. bajo control hormonal. Animales hibernantes ( distribución de la grasa marrón: en su cuello y parte superior de la espalda) 3.

  y  disipando la energía en forma de  CALOR. es rico en mitocondrias cuyos citocromos le confieren el color marrón.  esto  permite  la  oxidación  continua  de  combustible. M M Adipocito de grasa blanca Adipocito de grasa parda LV= gota de grasa M= mitocondria N= núcleo La  TERMOGENINA también  llamada  Proteína desacopladora 1 (UCP-1)  esta ubicada en la MMI del adipocito marrón . forma una canal  por donde  los protones son conducidos de regreso a la matriz .“ La función fisiológica del TEJIDO ADIPOSO MARRÓN (grasa parda). es un tejido con una gran cantidad de triacilglicéridos. es generar calor ” .  sin  síntesis  de  ATP  .  sin pasar a través de  la  ATP  sintasa.  UCP = Uncoupling protein .  desacoplando  la  CTE  de  la  Fosforilación  Oxidativa. Contiene proteínas de desacoplamiento (UCP).

frontiersin.Histología del ADIPOCITO MARRÓN y presencia de la Termogenina (UCP1) en la mitocondria G G M M A) M B) UCP1 A) El citosol del adipocito marrón es caracterizado por numerosas mitocondrias y  gotitas de grasa. B) Ampliación  de  una mitocondria de  un adipocito marrón. http://journal. se  muestran  Crestas en paralelo y la  UCP1 (puntos negros).org/Journal .

Mecanismo de termogénesis Mitocondria desacoplada en el tejido adiposo marrón 1 Noradrenalina FRIO Adipocito marrón TAG 2 + Ácidos Grasos Libres (AGL) 3 CALOR UCP1 H+ H + H+ Acoplamiento Acoplamiento (Fosforilación Oxidativa) + ATP (canal de protones) 5 ADP+Pi (Fosforilación Oxidativa) Disminuy e Esta vía Desacoplamiento Desacoplamiento (canal de protones) FADH2 NADH -Oxidación AGL 4 H+ matriz CTE H+ H+ H+ H + MMI .

.

grasas.FIN DE LA UNIDAD 3 CO2 (g) O2 (g ) Respiración celular aeróbica Combustibles (azúcares. proteínas) H 2O Energía celular .