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Inducción sexual de Oreochromis niloticus en diferentes infraestructuras
Responsables:

Licda. María Romelia Méndez Méndez
Bióloga romii_mendez@yahoo.com

Lic. S. Martín Quintanilla Montes
Biólogo martin_quintanilla@yahoo.com.mx

Asesores:

Ing. Su Hsien-Tsang
Técnico de Misión Taiwán

Lic. David Rosales Arévalo
Catedrático de la Universidad de El Salvador FMOcc

Tec. Ulises Quintanilla
Jefe de estación Acuícola Izalco, CENDEPESCA Licda. Cecilia Aguillón Coordinadora de estaciones, CENDEPESCA

Colaboradores:

CENDEPESCA (Centro de Desarrollo de la Pesca y la Acuicultura) a través de la Licda. Cecilia Aguillón Misión Técnica de Taiwán Universidad de El Salvador, Facultad Multidisciplinaria de Occidente, Departamento de Biología.

El Salvador, C.A. 2008

INDICE

Introducción .............................................................4 ¿Qué es la induccion sexual? ..................................5 Proceso de induccion sexual ...................................5 a. Selección de reproductores y obtención de jaramugos ..5 b. Proceso de inducción sexual. ...........................6 i) Infraestructuras para realizar la inducción sexual ...6 Inducción sexual en pilas .........................6 Inducción sexual en jaulas. ......................7 Inducción sexual en estanques de tierra. .7 ii) Preparación de alimento. ................................8 iii) Alimentación. ..................................................8 iv) Muestreos. .....................................................8 c. Etapa de precría. ...............................................9 Consumo de organismos tratados con hormonas .10 ¿Cómo se da la inducción sexual? ........................10 Inducción sexual vrs reversión sexual ...................12 Recomendaciones al manipular hormonas ...........12 Inversión económica al realizar inducción sexual .12 Glosario ..................................................................13 Bibliografia .............................................................14

INTRODUCCIÓN
Las originarios tilapias de África, son peces endémicos sus aprovechando

La tilapia presenta una

madurez sexual temprana, esto

es un problema ya que no tallas

características se consideraron ideales para la piscicultura. La tilapia es la variedad más

alcanza

representativa para los cultivos acuícolas de agua dulce. Pertenece a la familia Cichlidae, abarca más de 100 la cual

comerciales por el gasto de que la

especies distribuidas

energía conlleva reproducción

ampliamente en zonas tropicales de África, América y Asia. En El Salvador los volúmenes de

(fig. 1a y 1b). Muchos productores utilizan la técnica de sexado manual para lidiar con este problema y obtener así cultivos monosexo (cultivo de solo machos). La técnica de inducción sexual (reversión sexual) es una alternativa que permite garantizar la obtención de altos porcentajes de machos. Comúnmente inducción sexual es la técnica conocida de como
Fig 1. a) Nidos hechos por los machos de tilapia; b) hembra de tilapia con huevos en la boca

producción pesquera en cuanto al concepto de acuicultura continental según estadísticas de

CENDEPESCA, indican un incremento año con año a partir del 2002, la importancia de lo anterior radica en que la piscicultura como rubro de producción va ganando auge ya que por un lado se esta convirtiendo en una alternativa alimenticia y por otro es una fuente de ingresos para muchas familias salvadoreñas.

reversión sexual, lo que es incorrecto ya que según se desarrollará mas adelante en esta guía, la reversión sexual indica un cambio de sexo a individuos que ya tienen uno definido. Este proceso (inducción sexual) se realiza en las instalaciones de la Estación de Acuicultura Talcomunca,
Fig.2. Fotografía satelital de las instalaciones de la Estación de Acuicultura Izalco

Izalco

ubicada El

en

Cantón Izalco,

Caserío

CEGA

Municipio de Izalco, Sonsonate, a una altura de 402.95 msnm a 13°45’40” latitud norte y

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89°42’07” longitud oeste. La estación cuenta con un total de 21 estanques de tierra, 11 pilas de concreto, y todos los requerimientos para su buen funcionamiento (fig. 2)

sexual (reversión sexual), precría y engorde.

a. Selección de reproductores y obtención de jaramugos Se inicia con la preparación de estanques de cruzamiento, para esto es necesario limpiar el fondo del estanque, sellar la salida del agua o muñeco, desinfectar el estanque con cal y luego

¿QUE ES LA INDUCCION SEXUAL?
La inducción sexual es el proceso que consiste en adicionar andrógenos (17 alfa

proceder al llenado de este. Generalmente una piscigranja cuenta con peces apropiados para poder seleccionar

metiltestosterona) al alimento que se le suministra diariamente a los alevines durante 28 días

reproductores, de no ser así, puede adquirirlos de alguna que la tenga. Al seleccionar los

(después de que el alevín a consumido su saco vitelino), ya que en este período la tilapia no a desarrollado sus gónadas sexuales (fig. 3).

reproductores debemos asegurarnos de que estos reúnan las mejores características, tales como: buena salud, buena actividad física, no deben presentar ningún tipo de malformación o daños físicos, pesos promedio de 300 a 400 gramos, longitud de 20 a 25 cm. (tabla 1)
Tabla 1. Características técnicas para la selección de reproductores y obtención de jaramugos
Parámetros Especie Cantidad de reproductores Relación hembra : macho Peso promedio Requerimientos : Oreochromis niloticus : 150 individuos : 2:1 : 400g. : 25 cm. : 28 días : 75000 aprox. : No mayor de 3 días : de 0.013 a 0.025

Fig. 3. Micrografía de jaramugos de tilapia

Longitud Tiempo Jaramugos a obtener Edad de jaramugos seleccionados Peso de jaramugos

PROCESO DE INDUCCION SEXUAL
El proceso de inducción se desarrolla en un periodo de 28 a 30 días, sin embargo, para determinar la efectividad de este, la investigación se desarrolla en 4 etapas: selección de

Luego de la selección, hembras y machos deben sembrarse en los estanques de tierra previamente preparados a una relación de 2:1 (2 hembras por 1 macho) para que inicien su proceso de apareamiento (fig. 4). Entre los 15-20 días de

reproductores y obtención de jaramugos, inducción

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Fig. 4. Proceso de apareamiento de la tilapia. Fuente: Water Harvesting And Aquaculture For Rural Development

haber iniciado el cruce comienza a observarse las crías (jaramugos) en las orillas del estanque. Se recogen con una malla fina para no ser maltratados. Es necesario realizar esta etapa ya que no se puede comprar jaramugos, por lo delicados que son ya que en la manipulación o traslado de una estación a otra estos pueden morir. b. Proceso de inducción sexual. Inducción sexual: esta técnica consiste en desarrollar alevines machos, alimentándolos

Los jaramugos se recogen de los estanque de cruzamiento de un tamaño aproximado de 3 a 5mm y no tienen que exceder de tres días de nacidos. Estos deben ser seleccionados a través de un tamiz de 5mm, todo aquel que no pase por el tamiz tiene que ser descartado (fig. 5). Luego se colocan en cada una de las infraestructuras. i) Infraestructuras para realizar la inducción sexual La o las infraestructuras a utilizar

dependerán de los recursos con los que cuente la piscigranja, en nuestro caso la inducción se realiza en pilas, jaulas y estanques (fig. 6) Inducción sexual en pilas Se utilizan pilas de concreto (de forma

después de haber absorbido su saco vitelino con una mezcla de alimento concentrado y hormona masculina (17 alfa metiltestosterona). Y puede ser realizada en diferentes infraestructuras de cultivo: pilas, jaulas, estanques de tierra, etc.

rectangular). Estas deben lavarse y desinfectarse con cloro. Se instala el sistema de aireación (aireador, tuberías pvc, mangueritas flexibles de 5mm, plomos y piedras aireadoras), posteriormente se llenan a 0.50m de volumen de agua. Las densidades de siembra con las que se puede trabajar son de 3000 jaramugos por m . Luego de la siembra las pilas deben cubrirse con plástico con el fin de generar un efecto
Fig. 5. Obtención de jaramugos
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invernadero y poder

mantener una temperatura

adecuada para los alevines. En pilas se presenta

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Fig. 6. Infraestructuras utilizadas para el proceso de inducción sexual: arriba) pilas, jaulas y estanque antes de comenzar el proceso, abajo) infraestructuras preparadas para el proceso de inducción sexual

un

mayor

riesgo

de

mortandad

masiva

por

mantener la buena circulación de agua en éstas. Esto es muy importante, ya que al taparse la malla, los alevines pueden morir rápidamente, o pueden ser atacados por bacterias y hongos, debido al deterioro del agua dentro de ellas ocasionada por la acumulación de heces y alimento no consumido.

infestación de hongos, bacterias y ciliados, por lo que es de suma importancia realizar limpiezas diarias, del fondo de las pilas retirando las heces y de restos de comida. Inducción sexual en jaulas. Se utilizan jaulas de malla fina de nylon de forma rectangular. Estas se anclan con varillas en un estanque de tierra el cual tiene que

Las jaulas requieren de menor mano de obra y su manejo es más sencillo y cómodo. Inducción sexual en estanques de tierra. Se utilizan El estanques nivel de agua debidamente para esta

desinfectarse y llenarse a un nivel de 1m de agua del cual las jaulas solo alcanzaran 0.50m. Las densidades de siembra para esta infraestructura son de 3000 jaramugos por m , con recambios de agua constantes. Las jaulas se deben limpiar periódicamente de las algas que se fijan a la malla, con el fin de
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desinfectados.

infraestructura es de un metro. Este presenta la ventaja de alcanzar alta supervivencia, y bajo costo de instalación, pero a su vez las densidades de siembra son menores, de 400 jaramugos por m , y requiere de mayor mano de obra y de más control
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de especies extrañas (sapos, aves, insectos). Finalmente en cada una de las

iii) Alimentación. Se debe alimentar a partir del segundo día de siembra, con una proporción del 20% de biomasa corporal en base a tasa alimenticia. Proporcionando tres raciones diarias durante la primera semana, y aumentando una ración mas cada semana hasta concluir el proceso. La forma

infraestructuras (pilas, jaulas y estanque) se deben colocar seis comederos (platos), en estanques por poseer una mayor área se colocaron además de platos pueden colocarse tubos de pvc cortados a la mitad. ii) Preparación de alimento. La hormona se disuelve en etanol de 90% (700ml) y se mezcla con el alimento concentrado de 50% de proteína cruda. La cantidad de hormona a utilizar es de 60mg por kilogramo de alimento. La mezcla de la hormona-etanol-alimento se deja secando durante 24 horas a la sombra y a temperatura ambiente, moviéndola constantemente, para evaporar el alcohol y que

de

alimentar en el

consiste remojar alimento preparado agua una

con

haciendo masa y

formar bolitas, y después colocarlas en los comederos, esto se hace debido que el alimento
Fig. 8. Alimentación en pilas

las partículas de la hormona se adhieran completamente al alimento, y se para en

esta en polvo y al aplicarlo en esta forma (polvo), éste se esparciría y no seria aprovechado por los alevines (fig. 8). iv) Muestreos. Se deben realizar muestreos semanales.

luego refrigera conservarlo buen durante proceso

estado el de

Se toma una muestra representativa al total de la población de alevines (10%), la cual se pesa para controlar el crecimiento y determinar así la cantidad de alimento a proporcionar. Además se deben controlar los parámetros físico-químicos

inducción sexual. (fig. 7)

semanalmente
Fig. 7. preparación de alimento

como temperatura, pH y oxígeno

disuelto en cada una de las infraestructuras con el objetivo de mantener las mejores condiciones para

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el desarrollo de los alevines. c. Etapa de Precría. Terminada la etapa de inducción sexual en todas las infraestructuras (28 días) los alevines son cosechados de cada de estas y posteriormente sembrados en estanques de tierra a una densidad de 5 por m . Al azar se seleccionan los alevines procedentes de cada una de las infraestructuras. Los alevines seleccionados son sembrados en estanques de tierra en donde pasan 60 días como parte de su proceso de precría, esperando en esta etapa que los individuos alcancen pesos promedios de 50g.
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En esta etapa se utilizó alimento peletizado de 5mm al 40% de proteína, pero debido al tamaño de los alevines este fue molido a un tamaño entre 0.5 a 1mm y según fueron creciendo así se fue aumentando el tamaño del pellet y la proporción fue según su peso corporal. Una vez completado este tiempo (60 días) se cosechan para su conteo y determinar el porcentaje de machos por medio del sexado manual y haciendo uso de azul de metileno. Aquellos que no pudieron ser identificados por el método antes mencionado, se procedió a la disección de estos individuos para su posterior identificación por medio de un microscopio

Fig. 9. a) Identificación de machos por sexado manual, Estructura sexual masculina; b y c); d y e) gónada sexual masculina; Estructura de células testiculares (40x)

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compuesto tratando de identificar tejido testicular (fig. 9)

tilapias y entonces debemos buscar métodos mejores para obtener machos.

Consumo de organismos tratados con hormonas
Una interrogante que se hace la mayoría de personas es si ¿hay riesgo de consumir organismos que han sido tratados con hormonas?, pues según Curtis et al. 1991, expresa que de acuerdo a la metodología empleada para la inducción sexual en donde los individuos fueron sometidos a 28 días de tratamiento con 17 alfa metiltestosterona, al hacer un análisis 10 días después de terminado el tratamiento, se ha identificado y cuantificado que el 97% de residuos metabólicos presentes en la bilis, el 100% de 17 alfa metiltestosterona ha

¿Como se da la inducción sexual?
Con la inducción sexual es posible hacer que individuos que genéticamente son hembras, se desarrollen fenotípicamente como machos

(Proença & Bittencourt, 1994, citado por DISQUE TECNOLOGIA 2005). La efectividad de la inducción sexual es similar para Oreochromis niloticus, O. aureus y O. mossambicus. Una de las limitantes en el proceso de reversión sexual, es obtener una adecuada cantidad de postlarvas sexualmente indiferenciadas para iniciar el tratamiento hormonal correspondiente (Prieto, C.A. & Olivera Angel, M. 2002). Durante este proceso, la administración de esteroides masculinos a las larvas recién nacidas que poseen entonces tejido gonadal aún no diferenciado; hará que estas hembras genéticas, desarrollen tejido testicular; produciendo individuos que crecen y funcionan reproductivamente como machos. Este procedimiento deberá iniciarse antes

desaparecido; también Arboleda Obregón, D.A. 2005, indica que los adultos de tilapia inducidos sexualmente no poseen niveles mas altos de testosterona que los producidos por su propio organismo; además DISQUE TECNOLOGIA

(2005), menciona que aparentemente parece no haber daño para el consumidor, después de que el pez ha sido retirado del tratamiento con esteroides. Arboleda Obregón, D.A. (2005) menciona que el tratamiento con hormonas es un buen método pero siempre queda una población de hembras que hay que eliminar del cultivo, para evitar la reproducción que ocasiona la

de la diferenciación del tejido gonadal primario, dentro del tejido del ovario que, en condiciones de temperatura de 24 a 28ºC se produce en la tilapia nilótica a una talla de solo 11-13mm y unas 3-4 semanas de nacidas. Las evidencias demuestran que en peces no es posible generalizar, pero se puede afirmar que los casos de cromosomas sexuales son esporádicos (Burbano, C. 2001). En el momento de

sobrepoblación. El tratamiento con hormonas en peces es prohibido por la FDA, que es la entidad que regula la parte alimentaría en EEUU, entonces si se va a exportar no se debe inducir sexualmente

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Fig. 10. Inducción sexual de Oreochromis niloticus

la fertilización, cuando el espermatozoide se une con el oocito se completa la segunda división meiótica y se produce la expulsión del segundo cuerpo polar. El cigoto resultante es diploide y contiene información genética aportada por el padre y la madre. (Carrillo Ávila, 2001) Castillo Campo, L.F. (2004), afirma que hasta el momento se reconocen un total de 44 cromosomas autosómicos en las tilapias, y la no presencia de cromosomas sexuales, pero si bien no hay presencia de cromosomas sexuales si tiene que existir en algún cromosoma autosómico uno o varios genes sexuales que son transferidos por los progenitores y que este puede no expresarse por diversas causas (inducción sexual o temperatura). Castillo Campo, L.F. (2004), menciona que para poder comprender los mecanismos de

especie o variedad o línea de tilapia, los machos tienen la propiedad de crecer más rápido que las hembras, e invertir menos energía en reproducción. El mecanismo genético tradicional para la determinación del sexo es explicado normalmente por los ejemplares heterogaméticos y determinada por dos mecanismos sexuales diferentes en el género Oreochromis, adicionalmente a la influencia sobre la determinación del sexo de los genes autosómicos y al factor determinante de testículos (fig.10). Castillo Campo, L.F. (2004), hace mención de que el medio ambiente también tiene una gran influencia sobre la determinación del sexo, siendo el factor más importante la temperatura (TSD = Temperature Sex Determination), especialmente en especies termosensitivas en los que están incluidos los Cíclidos, lo que indica una fuerte interacción entre la temperatura y el genotipo. En los procesos de inducción sexual (mal llamada reversión sexual) se relacionan

definición sexual en las tilapias es importante independizar los términos determinación sexual y diferenciación sexual, que son afectados por muchos factores genéticos, ambientales, de

comportamiento y fisiológicos. Independiente de la

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directamente con la diferenciación gonadal. La hormona androgénica 17-alfa-metiltestosterona

cuando se inicia con el tratamiento no podemos hablar de que se han seleccionado machos o hembras para someterlas a tratamiento. Entonces atrofización sexual seria cuando se identifica a un individuo como macho o hembra y este cambia sus estructuras sexuales ya sea de manara natural o inducida; de tal manera que lo que se ha hecho es una inducción a un desarrollo gonadal.

modifica directamente las características sexuales secundarias (fenotipo), y tiene un efecto adicional sobre las gónadas, al afectar su normal desarrollo, pero en ningún momento afecta el genotipo, por lo que los individuos genéticamente mantienen la segregación normal esperada en el momento de la fertilización. A nivel celular se hace fácil la identificación entre hembras y machos. Cuando se encuentra un individuo que tiene tendencia a lo femenino lo mas lógico es pensar que son hembras que no alcanzaron a desarrollar como machos por “x” factores a tal grado que no lograron cambiar las estructuras que identifican a la hembra; algo característico de este grupo es que tienden a tener tamaños pequeños, posiblemente porque no

Recomendaciones al manipular hormonas
Las cantidades mínimas de hormona utilizadas en el proceso de inducción (60mg x Kg. de alimento) pueden no traer efectos graves cuando se manipula, pero siempre es aconsejable guardar las recomendaciones en cuanto a la preparación del alimento como son el usar

consumieron suficiente alimento (competencia) o porque simplemente son hembras.

mascarillas, guantes de hule, estar en un espacio con suficiente ventilación pero sin el contacto directo de los rayos del sol, refrigeración para

Inducción sexual vrs Reversión sexual
Anteriormente se hace mención al manejo del término de inducción sexual el cual es mal llamado reversión sexual; lo recomendado en esta etapa es llamar a este proceso inducción sexual ya que los alevines aun no han desarrollado sus gónadas sexuales.

después

de

preparado

el

alimento

para

su

conservación durante el proceso de inducción. Además si se poseen heridas lo mejor es no intervenir en el proceso de elaboración y

administración del alimento.

Inversión económica al realizar inducción sexual
Los costos que genera llevar a cabo la inducción sexual son porcentualmente bajos,

Al llamarlo inducción nos referimos a que los cambios son a nivel fenotípico y no genético. Otro caso es cuando se hace referencia del término de atrofiación, esto es incorrecto, ya que

teniendo en cuenta que el personal (mano de obra), transporte son costos corrientes que la institución ejecutora tiene normalmente, además los

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jaramugos pueden ser producidos por la institución o granja. Los insumos fijos son costos que se hacen para la preparación de las infraestructuras, es decir este gasto se hace solo la primera vez que se va a realizar la inducción (elaboración de jaulas, instalación de sistemas de aireación, mallas para separación, aperos de pesca y otros). Los

la especie cultivada alcance talla comercial. Estanque: embalse artificial para almacenar agua que se pueden llenar y vaciar fácilmente según las necesidades y deben ser un medio favorable para el desarrollo de los organismos que se estén cultivando. El tamaño es variable. Fenotipo: Manifestación visible del genotipo en un determinado ambiente. Genotipo: Conjunto de los genes de un individuo, incluida su composición alélica. Gónada: Órgano formador de gametos masculinos o femeninos. Inducción sexual: técnica mediante la cual por medio de la ingestión de hormonas se logra el desarrollo de individuos de un solo sexo durante su primer mes de vida. Jaramugo: cría de cualquier pez, que aun cuenta con saco vitelino. Jaula: infraestructura fabricada a partir de un chasis (cuadrado, rectangular o circular) que se cierra por los lados con malla de diferente luz dependiendo del uso. Oreochromis niloticus: nombre científico que se utiliza para identificar la tilapia gris. pH: Índice que expresa el grado de acidez o alcalinidad de una disolución. Entre 0 y 7 la disolución es ácida, y de 7 a 14, básica. Pila: infraestructura de concreto de volumen variado. Piscicultura: rama de la acuicultura que se encarga del cultivo de peces. Precría: fase en la que se prepara a ciertos individuos (tilapia) para que alcancen cierto peso para una posterior etapa (engorde) Reversión sexual: termino con el que se mal llama a la inducción sexual. Inducir al cambio de sexo a un individuo con sexo ya determinado. Saco vitelino: reserva alimenticia de jaramugos. Sexado manual: técnica mediante la cual se seleccionan machos y hembras por medio de la observación de sus órganos genitales externos. Requiere de destreza y practica.

porcentajes de inversión han sido evaluados para la producción de 1000 alevines en un periodo de 28 días (tabla 2).
Tabla 2. Estructura de costos para la realización de inducción sexual en diferentes infraestructuras

PILA Personal Jaramugos Alimento Hormona subtotal Insumos fijos Transporte Varios total egreso 0.00% 0.00% 3.61% 3.16% 6.77% 93.23% 0.00% 0.00% 100.00%

JAULA 0.00% 0.00% 1.18% 1.03% 2.21% 97.79% 0.00% 0.00% 100.00%

ESTANQUE 0.00% 0.00% 7.51% 6.65% 14.16% 85.84% 0.00% 0.00% 100.00%

GLOSARIO
Acuicultura: Técnica del cultivo de especies acuáticas Alevín: pez sexualmente aun no desarrollado. Andrógeno: termino referido a las hormonas masculinas. Cromosoma: Filamento condensado de ácido desoxirribonucleico, visible en el núcleo de las células durante la mitosis. Su número es constante para cada especie animal o vegetal. Cultivo monosexo: cultivo de individuos de un solo sexo, machos o hembras. Engorde: etapa en la piscicultura en la que se logra que

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BIBLIOGRAFIA
BIBLIOGRAFIA Anónimo (2003). Acerca del cultivo de Tilapia Nilótica y tilapia roja. Consultado en 05, 04,06 en www.aquaticalf.org Arboleda Obregón, D.A. (2005). Reversión sexual de las tilapias rojas (Oreochromis sp.), una guía básica para el acuicultor. Revista Electrónica Veterinaria REDVET, pp. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet. Burbano, C. (2001). Citogenética aplicada a peces. Fundamentos de Acuicultura Continental, Serie de fundamentos No1, 2a ED., Instituto Nacional de Pesca y Acuicultura de la Republica de Colombia, Pág. 219-232. Carrillo Ávila, M. (2001). Manipulación cromosómica aplicada a la piscicultura. Fundamentos de Acuicultura Continental, Serie de fundamentos No1, 2a ED., Instituto Nacional de Pesca y Acuicultura de la República de Colombia, Pág. 233-242. Castillo Campo, L.F. (2004). Tilapia Roja 2003, una evolución de 23 años, de la incertidumbre al éxito. Cali, Colombia: http://ag.arizona.edu/azaqua/ista/reports/ Castillo.pdf consultado el 27, 11,06 DISQUE TECNOLOGIA (2005). SERVIÇO BRASILEIRO DE RESPOSTAS TECNICAS, SOLUÇOES TECNOLOGICAS PARA SUA EMPRESA. Consultado en 15, 12,06 en http://www.sbrt.ibict.br. Méndez Méndez, M.R. & Quintanilla Montes, S.M. (2007). Inducción sexual de Oreochromis niloticus por administración oral de 17 alfametiltestosterona en diferentes infraestructuras de cultivo en la Estación de Maricultura Izalco de agosto 2006 a marzo 2007. (Tesis de Licenciatura en Biologia de la Facultad Multidisciplinaria de Occidente de la Universidad de El Salvador) 76pp. Prieto, C.A. & Olivera Angel, M (2002). Incubación artificial de huevos embrionados de Tilapia Roja Oreochromis sp. Rev Col Cienc Pec, 15 (1), 115.

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