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Modelos experimentales
de sepsis
J. García-Septiem*, M. A. Delgado**, J. A. Lorente Balanza*, A. Esteban*
*
Servicio de Medicina Intensiva. Hospital Universitario de Getafe. Madrid
**
Servicio de Cirugía. Hospital Universitario de Getafe. Madrid

INTRODUCCIÓN
A pesar de los numerosos trabajos de investi-
gación llevados a cabo en el campo de la sep-
sis y el síndrome de respuesta inflamatoria sis-
témica (SIRS), la sepsis sigue representando la
principal causa de muerte en las unidades de
cuidados intensivos quirúrgicos y médicos (1).
La mayoría de los ensayos clínicos sobre tra-
tamientos específicos de la sepsis han fraca-
sado, posiblemente debido, en parte, a que
se han basado en resultados de estudios lle-
vados a cabo en modelos animales que no son
apropiados (2). La existencia de numerosos
modelos demuestra que ninguno es superior,
presentando en todos los casos dificultades
para reproducir la respuesta cardiopulmonar
y metabólica que se presenta en la práctica clí-
nica.
En este capítulo se exponen los modelos ani-
males de sepsis más relevantes, las diferen-
cias entre distintas especies y las respuestas
observadas en ellas, comparadas con las de
los humanos. Concluiremos transmitiendo la
experiencia de nuestro grupo de investiga-
ción en el diseño de diferentes modelos y en
su empleo para el estudio de los cambios fi-
siológicos asociados a la sepsis.

¿QUÉ ES UN MODELO DE SEPSIS?

La sepsis es la principal causa de muerte en fine como la respuesta sistémica del organismo
las unidades de cuidados intensivos y se de- a la infección. Se diagnostica en el contexto
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34 SEPSIS, SEPSIS GRAVE Y SHOCK SÉPTICO
del llamado SIRS, que se caracteriza por la pre-
sencia de taquicardia, taquipnea, fiebre o hi-
potermia y leucocitosis o leucopenia (3).
El SIRS puede aparecer tras el trauma grave,
durante una pancreatitis, tras una intervención
quirúrgica de alto riesgo, etc., y no refleja
sino la liberación de citocinas (la respuesta in-
flamatoria) del huésped ante diferentes estí-
mulos.
En aquellos casos en que el SIRS aparece como
consecuencia de una infección sospechada, se
denomina sepsis. En los casos en que la sep-
sis se acompaña de disfunción de al menos
un órgano (p. ej., oliguria, hipotensión, dete-
rioro del intercambio gaseoso, acidosis meta-
bólica, coagulopatía o disminución del nivel
de conciencia), se denomina sepsis grave. Si
la hipotensión no responde a la administra-
ción de fluidos, se denomina shock séptico.
Además, hay que conocer otros cambios ca-
racterísticos de la sepsis. Desde el punto de
vista cardiovascular, la sepsis se asocia con
aumento del gasto cardíaco («circulación hi-
perdinámica»), vasodilatación sistémica, hi-
pertensión pulmonar y redistribución del flujo
sanguíneo regional. Asimismo, son cambios
fisiológicos característicos de la sepsis la dis-
minución de la contractilidad miocárdica, el
hipercatabolismo, la hipoxia tisular y la hi-
perlactatemia.
¿CUÁL ES LA MEJOR ESPECIE ANIMAL A ELEGIR?
Los mamíferos pequeños han sido utilizados
con frecuencia en sepsis experimental por
tres características fundamentales:
1. Los individuos son genéticamente similares.
2. Mayor disponibilidad de animales libres de
patógenos.
3. Bajo coste.
La supervivencia ha sido habitualmente la va-
riable más importante en estos estudios.
Por otro lado, los mamíferos grandes han sido
utilizados en estudios fisiológicos que requie-
La comprensión de esos conceptos es crucial
para entender qué cambios se exigen de un
modelo de sepsis para que sea clínicamente
relevante. El modelo ha de reproducir aquel
fenómeno que se pretende estudiar. Hay que
insistir que los enfermos con sepsis no pre-
sentan «necesariamente» todos los cambios
mencionados. De la misma forma, no se debe
exigir al modelo animal que reproduzca «to-
dos» los cambios que son característicos de
la sepsis.
Por ejemplo, si se pretende estudiar los me-
canismos de vasodilatación, es necesario que
el modelo presente una disminución de la re-
sistencia vascular periférica. Si lo que se pro-
pone estudiar son los mecanismos que con-
ducen a la hiperlactatemia, el modelo deberá
presentar elevación de la concentración sé-
rica de lactato. Si se pretende conocer el im-
pacto de cierta intervención sobre la mortali-
dad, el modelo deberá reproducir una elevada
mortalidad tras el insulto séptico.
En el estudio de la sepsis experimental coin-
ciden, por lo tanto, los intereses de especia-
listas de diferentes disciplinas, como la fisio-
logía, la medicina intensiva y la cirugía. La
coincidencia de intereses hace que todos ellos
contribuyan con su conocimiento al diseño del
modelo más adecuado para el objetivo que
se pretende estudiar.
ren monitorización más invasiva. Entre ellos,
el cerdo ha sido el más empleado dadas sus
similitudes con la anatomía y fisiología hu-
manas en diferentes órganos y sistemas como
el cardiovascular, renal y gastrointestinal (4, 8).
La oveja, gracias a su vascularización pulmo-
nar, permite la valoración experimental del flujo
sanguíneo y linfático, importante en los estu-
dios sobre los cambios en la permeabilidad
vascular (5).
La utilización de primates y perros en investi-
gación se ha visto limitada en los últimos años.
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Sin embargo, la semejanza inmunológica es-
pecialmente de algunos primates, los hace de
gran utilidad para los estudios que valoran la
respuesta inflamatoria del individuo a la agre-
sión (6).
La sensibilidad a la endotoxina varía también
entre las diferentes especies (7). Además, den-
tro de una misma especie, la respuesta a la
infección está condicionada por muchos fac-
tores (10). El sexo, la edad, la dieta, el ciclo
hormonal y las infecciones concomitantes son
algunos de los factores más relevantes (11).
¿QUÉ TIPOS DE MODELOS EXISTEN?
La sepsis por gramnegativos puede ser indu-
cida en animales por varios mecanismos. Tanto
el lipopolisacárido (LPS) como diversas bacte-
rias pueden ser administrados por vía paren-
teral. Por otro lado, se puede romper la barre-
ra intestinal de forma quirúrgica, para, de esta
forma, permitir a las bacterias endógenas es-
tablecer un foco de infección. También se pue-
den generar abscesos en los tejidos blandos
de los miembros (12, 13).
Los modelos animales de infección pueden ser,
por lo tanto, divididos de acuerdo con la cla-
sificación inicialmente descrita por Wichter-
man y cols. y posteriormente modificada por
Fink y Heard (tabla 1).
Endotoxemia
El LPS es un compuesto relativamente puro y
estable que puede ser almacenado en estado
TABLA 1. Clasificación de los modelos de sepsis iniciada por Wichterman (3)
y modificada por Fink (12)
Modelos de endotoxicosis
Bajas dosis de lipopolisacárido
Perfusión continua de lipopolisacárido
Inyección de lipopolisacárido intraperitoneal
Modelos de sepsis mediante perfusión
intravascular de bacterias
MODELOS EXPERIMENTALES DE SEPSIS 35
De esta forma, se sabe que las ratas que se
encuentran en un momento del ciclo con pre-
dominio de progestágenos muestran mayor
resistencia a la infección. Las ratas recién na-
cidas son muy vulnerables y tienen gran difi-
cultad para superar los cambios inducidos
por la sepsis, pero la resistencia a la infección
se desarrolla rápidamente durante las prime-
ras semanas de vida. Las ratas que se alimentan
con leche materna se encuentran más prote-
gidas contra la infección. Igualmente, los ani-
males que reciben una dieta con carne pre-
sentan menor mortalidad tras la sepsis (9).
liofilizado. Se puede administrar una dosis en
bolo o en perfusión continua. Ésta ha sido la
base para los modelos más simples de sepsis,
y muchos de estos modelos se han descrito
posteriormente con estos fundamentos.
Los pequeños mamíferos y los babuinos son
relativamente insensibles a los efectos de la
endotoxina, mientras que los conejos, ovejas
y chimpancés muestran una mayor respuesta.
En animales relativamente insensibles, la pre-
sensibilización con organismos muertos o con
D-galactosamina reduce la dosis de LPS ne-
cesaria para producir la respuesta inflamato-
ria (14, 16).
Tanto la duración como la vía de administra-
ción varían notablemente de unos estudios a
otros. En ratas, una inyección en bolo de una
dosis alta de LPS produce rápidamente vaso-
dilatación, colapso cardiovascular y muerte.
Por el contrario, si las dosis son bajas produ-
cen una respuesta hiperdinámica con un au-
Modelos de peritonitis mediante inóculo
bacteriano definido
Ligadura y perforación cecal
Otros modelos de peritonitis fecaloidea
Infección de tejidos blandos
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36 SEPSIS, SEPSIS GRAVE Y SHOCK SÉPTICO
mento rápido del gasto cardíaco. La perfu-
sión prolongada de dosis más bajas da lugar
a un estado hiperdinámico prolongado carac-
terizado por un aumento del gasto cardíaco
y vasodilatación (15).
La mayoría de los modelos de endotoxicosis
en primates han empleado dosis intravenosas
masivas que ocasionan colapso circulatorio y
muerte precoz. Algunos autores han plan-
teado la escasa relevancia que pueden tener
estos modelos de «intoxicación» endotóxica
aguda en el curso más insidioso de la sepsis
en humanos. Por eso se diseñaron modelos de
perfusión continua de dosis más bajas en pri-
mates, que han demostrado aproximarse más
a lo que ocurre en los humanos, demostrán-
dose coagulopatía subclínica y fallo multior-
gánico tardío (20).
La administración en bolo de LPS en volunta-
rios humanos produce un rápido aumento de
los niveles en sangre de endotoxina, seguido
por una precipitada disminución. La perfu-
sión prolongada de dosis bajas en voluntarios
sanos induce síntomas gripales, fiebre, taqui-
cardia y leucocitosis, así como un estado ca-
tabólico. Los niveles circulantes de citocinas
son algo inferiores que los producidos por una
administración en bolo, pero similares a los
de los pacientes con sepsis. Se identifican ni-
veles detectables de LPS en un 75 % de los
pacientes con sepsis ingresados en una uni-
dad de cuidados intensivos. Los niveles séri-
cos de endotoxina frecuentemente son inde-
tectables en los casos de sepsis de curso lento.
A veces se pueden detectar niveles elevados
en algunos casos de sepsis meningocócica y
tras el inicio de diferentes tratamientos anti-
bióticos (17-19).
Bacteriemia
Algunos estudios han investigado la respuesta
a la administración intravenosa de bacterias
vivas. Han sido estudiadas muchas especies di-
ferentes de bacterias aeróbicas, aunque la más
frecuentemente utilizada es Escherichia coli.
Como en el caso de la endotoxina, las dosis
de microorganismos y la duración de perfu-
sión han variado considerablemente de unos
modelos a otros (21, 22).
En mamíferos pequeños, dosis bajas de E.
coli administradas a lo largo de varias horas
se asocian a mínimos cambios fisiológicos.
Sin embargo, dosis más altas producen a me-
nudo una repuesta en dos fases, con un au-
mento inicial y una caída tardía del gasto car-
díaco.
En mamíferos grandes se han utilizado dosis
más elevadas de microorganismos. La prác-
tica de resucitación con fluidos es variable de
unos estudios a otros, pero en ausencia de
ellos a menudo se produce la muerte tem-
prana. Los cambios hemodinámicos y pulmo-
nares inducidos por la sepsis dependen de los
microorganismos utilizados. En un estudio de
sepsis en cerdos se utilizaron bacterias gram-
positivas y gramnegativas. El Staphylococcus
aureus inducía mínimos cambios, mientras que
E. coli y Pseudomonas aeruginosa producían
rápidamente shock e insuficiencia respiratoria
aguda.
Bacteriemia en humanos
En modelos animales, la administración de
bacterias vivas en bolos o en grandes dosis
produce respuestas fisiológicas muy marca-
das y reproducibles. Estos estudios han sido
utilizados para demostrar la utilidad de una
intervención terapéutica y su aplicación en
la sepsis clínica en humanos. Como en los
modelos de endotoxemia, la relevancia clí-
nica de este tipo de modelos no está pro-
bada.
Peritonitis
La peritonitis puede ser inducida en animales
de varias maneras diferentes. El intestino puede
ser perforado permitiendo la contaminación
con el contenido intestinal, aunque también
se puede introducir un inóculo bacteriano puro
o material fecal en la cavidad peritoneal (23).
Los primeros modelos aislaban segmentos in-
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tactos de intestino y esperaban la aparición
secundaria de una peritonitis. La desventaja
de este método era que esta aparición de la
peritonitis no se podía controlar y dependía
del tiempo en que se producía la perforación.
Para evitar este inconveniente se describió el
modelo de ligadura y punción cecal, sistema
sencillo y reproductible, ampliamente exten-
dido para la investigación en sepsis. El ciego
se liga distal a la válvula ileocecal y se perfora
mediante dos punciones con aguja. El mo-
delo fue originalmente descrito en ratas, pero
posteriormente se ha extendido a otras espe-
cies. Esta técnica, sin resucitación con volu-
men, produce rápidamente shock. Con resu-
citación con volumen, la mortalidad puede
disminuir y se puede así estudiar las respues-
tas fisiopatológicas similares a las que se pro-
ducen en la sepsis en humanos.
El contenido intestinal de los animales, fun-
damentalmente de los herbívoros, varía entre
las diferentes especies. Los intentos iniciales
de producir una peritonitis mediante la im-
plantación intraperitoneal de heces fueron de-
cepcionantes, ya que algunos animales pre-
sentaban una tolerancia sorprendente a su
propia flora fecal. Para salvar este contratiempo
se utilizaron heces humanas, o sulfato de ba-
rio o hemoglobina autóloga añadida al ma-
terial fecal. La peritonitis inducida en ratas me-
diante el inóculo de una mezcla de material
fecal derivado de varios animales origina una
respuesta séptica hiperdinámica, con una alta
mortalidad en animales que no reciben resu-
citación.
Ambos modelos, el de ligadura con perfora-
ción cecal y el de inoculación de material fe-
cal, liberan una cantidad variable de micro-
organismos, por lo que se diseñaron otros
modelos con inoculación de cultivos puros
de bacterias para originar una peritonitis y,
consiguientemente, una situación de sepsis.
Esto permite que tanto el tipo como la dosis
de microorganismos sea más fácilmente con-
trolable. Algunos autores utilizan inóculos de
cultivo puro de un solo microorganismo, mien-
tras que otros prefieren la utilización de cul-
MODELOS EXPERIMENTALES DE SEPSIS 37
tivos mixtos con bacterias de diferentes es-
pecies para asemejarse más a la flora intesti-
nal (24).
En la rata, la perfusión intraperitoneal de E.
coli produce los cambios histológicos y meta-
bólicos típicos de la sepsis clínica en humanos.
Modelos similares descritos en mamíferos más
grandes se asocian con una alta tasa de mor-
talidad, por lo que se aconsejó introducir el
inóculo bacteriano acompañado de un coá-
gulo de fibrina. Esto permitía reducir la tasa
de mortalidad y favorecía la aparición de abs-
cesos crónicos intraperitoneales. En un mo-
delo experimentado con cerdos, Karazian y
cols. compararon la inducción de peritonitis
con material fecal autólogo y con un cultivo
de E. coli, habiendo encontrado diferencias im-
portantes en la respuesta fisiopatológica de
ambos grupos. La inoculación intraperitoneal
de E. coli produjo una respuesta muy aguda
caracterizada por colapso cardiovascular y el
70 % de los animales que sobrevivieron a
este período inicial mostró una rápida recu-
peración. La implantación intraperitoneal de
heces produjo una respuesta más suave, con
incremento del gasto cardíaco y reducción de
las resistencias vasculares.
Los estudios que han comparado directamente
la respuesta fisiopatológica en los modelos
de endotoxemia con los de peritonitis han
demostrado tasas de mortalidad similares, pero
la magnitud de la respuesta de las citocinas
es notablemente distinta. Además, la respuesta
a agentes inmunomoduladores es diferente en
los dos tipos de modelos. Por ejemplo, la res-
puesta clínica y de las citocinas al tratamiento
con antagonistas del factor de necrosis tumoral
alfa (TNF-a) es muy diferente en los modelos
de endotoxemia intravenosa y de peritonitis
(25).
Peritonitis en humanos
En humanos la peritonitis suele ser la conse-
cuencia de una perforación gastrointestinal
con sepsis sistémica pasadas varias horas o días
desde el momento en que se produce la in-
fección localizada. Su curso clínico resulta en
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38 SEPSIS, SEPSIS GRAVE Y SHOCK SÉPTICO
muchos casos determinado por la aplicación
precoz de terapia antibiótica.
El modelo de ligadura y perforación cecal es
relevante para el estudio de la sepsis clínica
de origen abdominal. Habitualmente podemos
observar en este modelo una fase hiperdiná-
mica inicial seguida de otra fase hipodiná-
mica tardía, particularmente si se emplea una
adecuada resucitación con fluidos (26, 27).
Los modelos de peritonitis que han utilizado
material fecal de un solo animal o la mezcla
de varios animales son menos reproducibles
EL MODELO, ¿ES RELEVANTE PARA LA SEPSIS EN HUMANOS?
Existen diferentes tipos de modelos experi-
mentales de sepsis, cada uno de los cuales
tiene unas características determinadas. Es im-
portante evaluar cómo se acerca cada uno de
los modelos a los cambios fisiopatológicos,
metabólicos e histológicos que se producen
como consecuencia de la sepsis en humanos.
Perfusión intravascular de
bacterias o endotoxinas
El síndrome séptico incluye un amplio espec-
tro de manifestaciones, desde el síndrome de
respuesta inflamatoria sistémica (SIRS) hasta el
shock séptico. Con el incremento de la seve-
ridad del cuadro, la frecuencia de hemoculti-
vos positivos aumenta. Así, se han descrito
tasas de hemocultivos positivos del 17, 25 y
69 % para los cuadros de sepsis, sepsis grave
y shock séptico, respectivamente.
Numerosos estudios sugieren que la bacterie-
mia puede ejercer un papel muy importante
respecto a las consecuencias y el pronóstico
de la sepsis. Algunos modelos agudos de sep-
sis, como los producidos por la perfusión de
bacterias vivas o endotoxina, son utilizados fre-
cuentemente en la literatura. La administra-
ción aguda de toxinas puede desencadenar
una liberación exagerada de citocinas del hués-
ped que pueden resultar nocivas para el pro-
pio huésped. En los modelos de perfusión in-
travascular, el tratamiento con anti-TNF-a reduce
que los modelos de endotoxicosis, perfusión
bacteriana intravenosa o peritonitis con culti-
vos puros de bacterias. Sin embargo, en la ma-
yoría de las especies se produce una respuesta
fisiopatológica similar a la de los humanos.
Añadir un coágulo de fibrina al cultivo, que
engloba las bacterias, ocasiona una peritoni-
tis y una respuesta sistémica reproducible.
Los modelos de peritonitis, sobre todo aque-
llos realizados en cerdos o en primates, son
los que más se aproximan a la situación clí-
nica que podemos ver en humanos (28, 29).
la mortalidad. Sin embargo, no ocurre así en
los modelos de peritonitis con ligadura y per-
foración cecal, en los que se ha demostrado
que puede aumentar la mortalidad (30, 31).
Dado que la perfusión aguda de bacterias es
un acontecimiento poco común en la clínica,
los modelos de infección focal, como los que
inducen peritonitis, se asemejan más a los cam-
bios que se producen en la sepsis en huma-
nos. Por estas razones, los estudios que se
basan en la administración aguda de endoto-
xina o bacterias intravenosas deben ser inter-
pretados cuidadosamente si los resultados tra-
tan de aplicarse a la clínica (32, 33).
Modelos de sepsis agudos
frente a crónicos
Aunque la mortalidad en la sepsis clínica está
fuertemente asociada con un episodio de shock
séptico, en la mayoría de los casos la muerte
se debe al desarrollo de fallo multiorgánico,
que se desarrolla días o semanas después de
la presentación inicial. Por esta razón, los mo-
delos animales que conllevan una mortalidad
significativa entre las primeras 6-12 horas pue-
den describir hechos relevantes, pero que no
serán aplicables directamente a la sepsis en
humanos. El hecho de que la muerte se pre-
sente tanto en los modelos de sepsis agudos
como en los crónicos, no significa que esa mor-
talidad tenga una causa común.
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Se han examinado los cambios hemodinámi-
cos según el paso del tiempo en modelos de
sepsis por endotoxemia crónica en ovejas. En
este modelo se observa un incremento pre-
coz de las resistencias vasculares periféricas de-
bido fundamentalmente a vasoconstricción en
órganos abdominales. A esta fase de vaso-
constricción sigue posteriormente otra fase de
vasodilatación e incremento del gasto car-
díaco. Por lo tanto, si estudiamos las varia-
bles cardiovasculares como resultados de mo-
delos experimentales de sepsis, los hallazgos
pueden depender de la fase de la sepsis en la
que recojamos esos datos (34, 35).
De forma similar, muchos de los cambios bio-
químicos que se producen en la sepsis, como
la producción de óxido nítrico por la NO-sin-
tasa-inducible, aparecen tras un período de 12
a 24 horas. Dado que la sepsis es diagnosti-
cada habitualmente en las primeras 12 horas,
los estudios animales con modelos agudos de
sepsis pueden aportar una imagen de la sep-
sis poco habitual en los estudios clínicos (36).
Modelos de sepsis
con endotoxina frente
a infección
Existe controversia en cuanto a la relevancia
de los modelos de endotoxina para la com-
prensión de la sepsis humana. Sin embargo,
la endotoxina es habitualmente utilizada en
modelos animales. Cuando la endotoxina es
administrada a humanos, se reproducen mu-
chos de los cambios que se pueden observar
en la sepsis. En pacientes críticamente enfer-
mos, el incremento de las concentraciones de
endotoxina sérica se ha asociado con el de-
sarrollo de la sepsis, con la severidad de la
enfermedad y con la mortalidad. Varios estu-
dios apoyan la hipótesis de que la endotoxina
desempeña un papel de gran importancia en
la etiopatogenia de la sepsis (37).
Algunos de estos estudios demuestran que la
administración de antibióticos puede promo-
ver una liberación de endotoxinas y asociarse,
de esta forma, a un mayor porcentaje de mor-
talidad y a un empeoramiento de los pará-
MODELOS EXPERIMENTALES DE SEPSIS 39
metros hemodinámicos. Algunas sustancias
que inactivan a las endotoxinas han demos-
trado reducir la mortalidad de algunos mo-
delos de endotoxemia y bacteriemia experi-
mental, así como otras manifestaciones de la
sepsis como la acidosis y la hipotensión.
Aunque, como hemos visto, existen pruebas
de que la endotoxina puede tener un impor-
tante papel en la fisiopatología de la sepsis,
numerosos autores han expresado la opinión
de que la perfusión de endotoxina por sí misma
no es un modelo adecuado con el que estu-
diar la sepsis (38). Esta opinión se basa en las
siguientes observaciones:
1. Es probable que el empleo de endotoxina
cuando se administra a dosis altas en ani-
males resistentes produce unos efectos que,
en cambio, no se observan cuando se ad-
ministran dosis bajas a animales sensibles,
como sería el caso del hombre.
2. La endotoxina es liberada en la sepsis por
gérmenes gramnegativos, pero no en la sep-
sis producida por grampositivos. Sin em-
bargo, la mortalidad producida por estas
infecciones es similar.
3. Algunos tratamientos, como la administra-
ción de corticosteroides, han demostrado
ser efectivos en modelos experimentales ani-
males de endotoxemia, pero han fraca-
sado cuando se han intentado utilizar en
ensayos clínicos. Por lo tanto, aunque la en-
dotoxina en algunas circunstancias puede
tener cierta importancia en la patogenia
de la sepsis, debemos evaluar cuidadosa-
mente los resultados de los tratamientos
que demuestren su utilidad en modelos
experimentales de endotoxemia.
Importancia del tratamiento
de soporte
Los resultados de los ensayos clínicos suelen
valorarse en presencia de tratamientos de so-
porte, como la administración de fluidos y
antibióticos, la ventilación mecánica y la diá-
lisis. Los tratamientos de soporte también al-
teran los resultados en el caso de los mode-
los experimentales de sepsis.
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40 SEPSIS, SEPSIS GRAVE Y SHOCK SÉPTICO
El modelo de ligadura y perforación cecal sin
la administración de una adecuada resucita-
ción con fluidos desencadena un shock sép-
tico en un período no superior a 4 o 5 horas.
Este mismo modelo con la administración de
fluidos por vía subcutánea tiene una mortali-
dad de 75 % en las primeras 24 horas. Sin
embargo, si hacemos una adecuada resucita-
ción con fluidos intravenosos, la mortalidad
disminuye a menos de 10 % en esas prime-
ras 24 horas (39).
Numerosos estudios apoyan el criterio de que
las terapias de soporte varían la mortalidad del
modelo animal y pueden alterar la eficacia de
otras intervenciones terapéuticas.
Un tratamiento de soporte muy frecuente-
mente utilizado, y que puede ser fácilmente
incorporado a los estudios experimentales de
sepsis en animales, es la antibioterapia (40).
Se considera que un nuevo tratamiento ofrece
poco valor clínico si no es más efectivo que la
terapia antibiótica convencional.
De hecho, los estudios en animales sobre la
eficacia de una determinada acción terapéu-
tica deberían determinar si esa eficacia sigue
CONCLUSIONES
Nuestra experiencia en el diseño de diferen-
tes modelos nos ha permitido comprobar lo
anteriormente expuesto. El estudio de los cam-
bios cardiovasculares asociados a la sepsis ha
resultado apropiado en nuestro modelo de sep-
sis en ovejas inducida mediante la adminis-
tración de E. coli por vía intravenosa (43, 44).
La elección de la dosis de E. coli para el mo-
delo fue la que indujo hipotensión. La resuci-
tación con fluidos fue necesaria para mante-
ner el gasto cardíaco (aunque no se llega a
conseguir una respuesta hiperdinámica), y así
obtener un estado de vasodilatación (hipo-
tensión y mantenimiento del gasto cardíaco).
El estudio de los cambios en la circulación es-
plácnica asociados a la sepsis requirió, sin
embargo, el uso de otra especie como el cerdo,
estando presente en animales tratados con an-
tibióticos.
Efecto de la comorbilidad
En los estudios en humanos, la presencia de
comorbilidad es un predictor de mortalidad en
la sepsis. En numerosos ensayos clínicos se
ha demostrado la importancia de la presencia
de otras enfermedades, como neoplasias, dia-
betes mellitus, hepatopatía crónica o alcoho-
lismo, que pueden ejercer un papel importante
al determinar la respuesta del huésped a una
intervención terapéutica (41, 42).
En los resultados de los estudios en animales
no es frecuente analizar los efectos de las en-
fermedades intercurrentes. Sin embargo, al-
gunos estudios en animales han demostrado
que ciertas enfermedades, como hepatopatías,
neoplasias o episodios previos de sepsis, pue-
den tener importancia en la sensibilización del
animal a los efectos de la endotoxemia. Estos
datos sugieren que la presencia de enferme-
dades intercurrentes debe ser analizada cuando
se trate de extrapolar datos de los estudios en
animales a la sepsis clínica en humanos.
dada la peculiar anatomía intestinal bovina.
Este nuevo modelo porcino, inducido tam-
bién mediante la administración intravenosa
de E. coli, nos ha permitido analizar los cam-
bios en la circulación esplácnica ante diversos
estímulos (45, 46).
Finalmente, el empleo de ratas ha permitido
poner a punto un nuevo modelo de sepsis in-
ducida mediante la ligadura y punción del
ciego, en el cual se puede estudiar el impacto
de diferentes estrategias de ventilación me-
cánica, intervenciones terapéuticas que mo-
difiquen la mortalidad, etc.
El modelo de sepsis animal ideal debería ser
simple y reproducible. Se debe aplicar una agre-
sión adecuada y de la magnitud apropiada
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para producir cambios similares a los que apa-
recen en un cuadro clínico de sepsis. Los ani-
males deberían presentar signos de sepsis
que se relacionasen con los niveles de citoci-
nas. La respuesta debería ser gradual, desde
los momentos en que la fuente de infección
está localizada hasta que se va diseminando
y termina produciendo una sepsis sistémica
con fallo multiorgánico. En condiciones idea-
les, esto debería realizarse en animales no anes-
tesiados, lo que, sin embargo, no es posible
en muchas ocasiones por problemas éticos y
legales.
Los modelos de endotoxicosis son simples e
inducen una respuesta reproducible y fisiopa-
tológica que ha demostrado ser dependiente
de la dosis. Los modelos de enfermedad rá-
pidamente agresiva que producen una muerte
muy precoz, aunque a menudo obtienen re-
sultados estadísticamente significativos, no se
aproximan al curso más lento que presenta la
sepsis en humanos. Muchas de las respuestas
observadas en modelos de perfusión de bac-
Bibliografía
1. Parrillo JE, Parker MM, Natanson C, Suffredini AF,
Danner RL, Cunnion RE. Septic shock in humans. Ad-
vances in the understanding of pathogenesis, cardiovas-
cular dysfunction, and therapy. Ann Intern Med 1990; 113:
227-242.
2. Bone RC. Why sepsis trials fail. JAMA 1996; 276:
565-566.
3. Wichterman KA, Baue AE, Chaudry IH. Sepsis and
septic shock: a review of laboratory models and a propo-
sal. J Surg Res 1980; 29: 189-201.
4. Dodds WJ. The pig model for biomedical research. Fed
Proc 1982; 41: 247-256.
5. Avila A, Warshawski F, Sibbald W, Finley R, Wells
G, Holliday R. Peripheral lymph flow in sheep with peri-
tonitis: evidence for increased peripheral microvascular per-
meability accompanying systemic sepsis. Surgery 1985; 97:
685-695.
6. Kinasewitz GT, Chang ACK, Peer GT, Hinshaw LB,
Taylor FB Jr. Peritonitis in the baboon: a primate model
which simulates human sepsis. Shock 2000; 13: 100-109.
7. Redl H, Bahrami S, Schlag G, Traber DL. Clinical
detection of LPS and animal models of endotoxemia. Im-
munobiology 1993; 187: 330-345.
MODELOS EXPERIMENTALES DE SEPSIS 41
terias son los efectos propios de una intoxi-
cación aguda. Por todo esto, los modelos de
peritonitis con resucitación mediante fluidos
son los más relevantes desde el punto de vista
clínico.
Debido a la heterogeneidad de los pacientes
con sepsis ingresados en las unidades de cui-
dados intensivos y al elevado coste de ensa-
yos clínicos a gran escala, los ensayos en ani-
males continuarán siendo de gran utilidad en
el estudio de los nuevos agentes inmunomo-
duladores.
Algunos autores proponen que los estudios
con modelos de endotoxicosis en perfusión
continua podrían servir de detección sistemá-
tica para verificar la utilidad de nuevos agen-
tes terapéuticos en la sepsis. Esto podría con-
tinuarse con estudios en modelos de peritonitis
en pequeños mamíferos. Por último, se de-
bería considerar la realización de estudios es-
pecíficos en primates antes de pasar a los en-
sayos clínicos.
8. Swindle MM, Smith AC, Hepburn BJ. Swine as mo-
dels in experimental surgery. J Invest Surg 1988; 1: 65-
79.
9. Zellweger R, Wichmann W, Ayala A, Stein S, De-
Maso CM, Chaudry IH. Females in proestrus state main-
tain immune functions and tolerate sepsis better than
males. Crit Care Med 1997; 25: 106-110.
10. Witek-Janusek L, Ratmeyer JK. Sepsis in the young
rat: maternal milk protects during cecal ligation and punc-
ture sepsis but not during endotoxemia. Circ Shock 1991;
33: 200-206.
11. Opal SM, Cross AS. Immunocompromised animals
in sepsis research. Sepsis 1998; 2: 235-242.
12. Fink MP, Heard SO. Laboratory models of sepsis
and septic shock. J Surg Res 1990; 49: 186-196.
13. Marshall JC, Creery D. Pre-clinical models of sep-
sis. Sepsis 1998; 2: 187-197.
14. Wyler F, Neutze JM, Rudolph AM. The effects of
endotoxin on distribution of cardiac output in unanest-
hetized rabbits. Am J Physiol 1970; 219: 246-251.
15. Johnston TD, Hampton WW, Fry DE. Septic he-
modynamics produced by infusion of endotoxin. Curr Surg
1989; 46: 101-103.
 © EdikaMed S.L. • www.edikamed.com
42 SEPSIS, SEPSIS GRAVE Y SHOCK SÉPTICO
16. Talke P, Dunn A, Lawlis L, Szeibert L, White A,
Herndon D, y cols. A model of ovine endotoxemia cha-
racterized by an increased cardiac output. Circ Shock 1985;
17: 103-108.
17. Fish RE, Lang CH, Spitzer JA. Regional blood flow
during continuous low-dose endotoxin infusion. Circ Shock
1986; 18: 267-275.
18. Lin E, Lowry SF. The human response to endotoxin.
Sepsis 1999; 2: 255-262.
19. Danner RL, Elin RJ, Hosseini JM, Wesley RA, Reilly
JM, Parillo JE. Endotoxemia in human septic shock. Chest
1991; 99: 169-175.
20. Hinshaw LB, Archer LT, Beller-Todd BK, Benjamin
B, Flourney DJ, Passey R. Survival of primates in lethal
septic shock following delayed treatment with steroid. Circ
Shock 1981; 8: 291-300.
21. Dehring DJ, Crocker SH, Wismar BL, Steinberg
SM, Lowery BD, Cloutier CT. Comparison of live bacte-
ria infusions in a porcine model of acute respiratory fai-
lure. J Surg Res 1983; 34: 151-158.
22. Haberstroh J, Breuer H, Lucke I, Massarrat K, Fruh
R, Mand U, y cols. Effect of recombinant human granu-
locyte colony-stimulating factor on hemodynamic and cy-
tokine response in a porcine model of Pseudomonas sep-
sis. Shock 1995; 4: 216-224.
23. Hau T, Simmons RL. Animal models of peritonitis.
Surg Gynecol Obstet 1977; 144: 755-756.
24. Baker CC, Chaudry IH, Gaines HO, Baue AE. Eva-
luation of factors affecting mortality rate after sepsis in a
murine cecal ligation and puncture model. Surgery 1983;
94: 331-335.
25. Richmond JM, Walker JF, Avila A, Petrakis A,
Finley RJ, Sibbald WJ, y cols. Renal and cardiovascular
response to non-hypotensive sepsis in a large animal mo-
del with peritonitis. Surgery 1985; 97: 205-214.
26. Piper RD, Cook DJ, Bone RC, Sibbald WJ. Intro-
ducing critical appraisal to studies of animal models in-
vestigating novel therapies in sepsis. Crit Care Med 1996;
24: 2059-2070.
27. Browne MK, Leslie GB. Animal models of peritoni-
tis. Surg Gynecol Obstet 1976; 143: 738-740.
28. Nichols RL, Smith JW, Balthazar ER. Peritonitis and
intraabdominal abscess: an experimental model for the eva-
luation of human disease. J Surg Res 1978; 25: 129-134.
29. Bartlett JG, Onderdonk AB, Louie T, Kasper DL,
Gorbach SL. A review. Lessons from an animal model of
intra-abdominal sepsis. Arch Surg 1978; 113: 853-857.
30. Remick DG, Newcomb DE, Bolgos GL, Call DR.
Comparison of the mortality and inflammatory response
of two models of sepsis: lipopolysaccharide vs cecal liga-
tion and puncture. Shock 2000; 13: 110-116.
31. Wang P, Chaudry IH. A single hit model of polymi-
crobial sepsis: cecal ligation and puncture. Sepsis 1998;
2: 227-233.
32. Bagby GJ, Plessala KJ, Wilson LA, y cols. Diver-
gent efficacy of antibody to tumor necrosis factor-alpha
in intravascular and peritonitis models of sepsis. J Infect
Dis 1991; 163: 83-88.
33. Zanetti G, Heurmann D, Gerain J, y cols. Cytokine
production after intravenous or peritoneal gram-negative
bacterial challenge in mice. Comparative protective effi-
cacy of antibodys to tumor necrosis factor-alpha and to
lipopolysaccharide. J Immunol 1992; 148: 1890-1897.
34. Kollef MH, Wragge T, Pasque C. Determinants of
mortality and multiorganic dysfunction in cardiac surgery
patients requiring prolonged mechanical ventilation. Chest
1995; 107: 1395-1401.
35. Tiefenbrun J, Kim SI, Shoemaker WC. The rela-
tion of the distribution of pulmonary blood flow to lung
function during hemorrhagic shock. Surg Gynecol Obstet
1974; 138: 557-561.
36. Kim SI, Desai JM, Shoemaker WC. Part II: Sequential
respiratory changes in an experimental hemorrhagic shock
preparation design to simulate clinical shock. Ann Surg
1969; 170: 166-173.
37. Suffredini AF, Fromm RE, Parker MM, y cols. The
cardiovascular response of normal humans to the adminis-
tration of endotoxin. N Engl J Med 1989; 321: 280-287.
38. Danner RL, Elin RJ, Hosseini JM, y cols. Endoto-
xemia in human septic shock. Chest 1991; 99: 169-175.
39. Shenep JL, Mogan KA. Kinetics of endotoxin rele-
ase during antibiotic therapy for experimental gram-ne-
gative bacterial sepsis. J Infect Dis 1984; 150: 380-388.
40. Sprung CL, Caralis PV, Marcial EH, y cols. The ef-
fects of high dose corticosteroids in patients with septic
shock. A prospective controlled study. N Engl J Med 1984,
311: 1137-1143.
41. Hilf M, Yu VL, Sharp J, y cols. Antibiotic therapy
for Pseudomonas aeuruginosa bacteriemia: outcome co-
rrelations in a prospective study of 200 patients. Am J Med
1989; 87: 540-546.
42. Galanos C, Freudenberg MA. Mechanisms of en-
dotoxic shock and endotoxic hypersensitivity. Immuno-
biology 1993; 187: 346-356.
43. Lorente JA, Delgado MA, Tejedor C, Mon E, He-
vás M, Pascual T, Fernández-Sogoviano P, Rieppi G,
Soler A, Ayuso D, Esteban A. Modulation of systemic
hemodynamics by exogenous L-arginine in normal and
bacteriemic sheep. Crit Care Med 1999; 27: 2474-2479.
44. Lorente JA, Tejedor C, Delgado MA, Fernández-Se-
goviano P, Jara N, Tobalina R, Rodríguez-Corcos A, Mos-
coso A, Esteban A. Hemodynamic, biochemical and morp-
hological changes induced by aminoguanidine in normal
and septic sheep. Intensive Care Med 2000; 26: 1670-1680.
45. Tejedor C, Lorente JA, Delgado MA, Fernández-
Segoviano P, Tobalina R, Mon E, y cols. Interaction
between hemoglobin and glutathion in the regulation of
blood flow in normal and septic pigs. Crit Care Med
2002; 30: 2493-2495.
46. Dhainaut JF, Yan SB, Margolis BD, Lorente JA,
Russell JA, Freebairn RC, Spapen HD, Riess H, Bas-
son B, Johnson G, Kinasewitz GT. PROWESS Sepsis
Study Group. Drotrecogin alfa (activated) recombinant
human activated protein C reduces host coagulopathy res-
ponse in patients with severe sepsis. Thromb Haemost
2003; 90: 642-653.