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Examen cyto bactériologique du liquide

céphalorachidien

Introduction
Devant la constatation d'un syndrome méningé chez un patient,
une ponction lombaire doit être pratiquée dans les plus brefs délais. Le
liquide céphalorachidien obtenu doit être analysé en urgence.

Le rôle du laboratoire est primordial, car l'examen biologique immédiat du LCR va
permettre d'étayer le diagnostic de méningite, de s'orienter vers une étiologie qui sera
confirmée ultèrieurement par la culture.et ainsi de participer à la mise en route d'une
antibiothérapie efficace.

Après un rappel des conditions de prèlèvement du LCR et son étude macroscopique,
nous envisagerons l'étude cytologique et bactériologique puis l'interprétation de ces résultats.
Enfin nous traiterons du suivi thérapeutique des méningites.

Mode de prélèvement
Milieu hospitalier, après examen du fond d'oeil, conditions rigoureuses d'aseptie,
dans le cul de sac dural entre les espaces intervertébraux L4-L5 ou L5-S1, receuilli dans 3 tubes
stériles et immédiatement acheminé au laboratoire, où il sera traité en urgence.

Examen macroscopique

LCR normal
Clair,limpide, eau de roche.

LCR pathologique
Trouble

Du à l'hypercytose, différents degrés en fonction du type de méningite bactérienne ou
virale (dépoli, eau de riz … ).

Hémorragique

Origine traumatique ou hémorragique.

Xanthochromique Hemorragie méningée ancienne. Ictérique Leptospirose. % de polynucléaires. bacilles gram négatif polymorphes (Haemophilus) ou non (Escherichia coli …). bacille gram positif (Listeria). de lymphocytes. à l'aide d'une cytocentrifugeuse (cytospin). À partir d'un culot de centrifugation. Normal : < 5 éléments nucléés/mm3. cellules mononucléées. Levures( Cryptococcus neoformans. . Frottis coloré au May Grunwald Giemsa. cocci gram positif en diplocoques lancéolés (Pneumocoque) en chainettes (Streptocoque B). candida). Résultat en nombre de cellules par mm3. hématies : après répartition d'1 à 2 gouttes de LCR homogénéisé dans une cellule de nageotte ou de malassez. Encre de chine Recherche de Cryptococcus (capsule) Coloration de Ziehl BAAR : Mycobacterium tuberculosis. autres … Examen bactériologique Examen microscopique Coloration de Gram Cocci gram négatif parfois intra cellulaires (Méningocoque). ictère nucléaire néonatal. Formule leucocytaire. Examen cytologique Numération cellulaire Eléments nucléés. ou mieux.

Mise en culture Chronologiquement. Steptocoque B. Ces premiers résultats sont transmis immédiatement au clinicien. capital en cas de méningite décapitée. Milieu de Rosenow Incubation en anaérobiose. c'est la première chose à réaliser dès l'arrivée du prèlèvement au laboratoire. sensibilité • conforter un examen de Gram • porter un diagnostic d'espèce (coloration de Gram ne révélant aucune bactérie). Gélose au sang Milieu liquide d'enrichissement Bouillon glucosé + extrait globulaire. Observation après 12 à 18 heures d'incubation (sauf BK) . W135. Y. C. Milieu de Lowenstein-Jensen et Coletsos (BK) Milieu de Sabouraud (levures) Incubation à 37°C.Recherche d'antigènes solubles Exoantigènes polysaccharidiques originaires de la paroi ou de la capsule (Meningocoque B et A.coli K1. Haemophilus para influenzae b. On évite ainsi la disparition des bactéries fragiles et les contaminations éventuelles. E. Ensemencer en travaillant de façon stérile les milieux suivants : Gélose au sang cuit + supplément vitaminique Incubation sous CO2 (10%). Pneumocoque. Crytococcus) libérés dans le milieu biologique. Milieux sélectionnés pour permettre la culture de toutes les bactéries. Mise en évidence à l'aide d'anticorps spécifiques : agglutination de particules de latex sensibilisées Intérêts : • rapidité. afin qu'il adapte le traitement.

Identification Techniques classiques. Antibiotiques utilisables en prophylaxie. C. mezlocilline. cotrimoxazole …) Aminosides pour leur activité au niveau sérique. W135 Pneumocoque Haemophilus influenzae (sérotype b) Méningite néonatale : Streptocoque B. ceftriaxone. Antibiogramme Standard Si bactéries vues au direct. pefloxacine. il est réalisé directement à partir du LCR. Anaerobie etc Méningites à liquide clair Virales BK . Escherichia coli K1. CMI Pneumocoque et bêta-lactamines Méningocoque et bêta-lactamines Examens complémentaires Hémocultures (septicémie associée) Prèlèvement d'oreille … (porte d'entrée) Interprétation Méningites purulentes Méningocoque B et A. Y. Listeria Autres : Bacilles gram négatif. chloramphenicol. Antibiotiques choisis en fonction de leur bonne diffusion dans le LCR et de leur activité sur les bactéries responsables de méningites (ampicilline. cefotaxime.

Listeria Fungique Parasitaire Méningite bactérienne décapitée .

Coli aires … avec Clair à Listeria < 500 diminué augmenté normal méningite opalescent Brucelle panachée bactérienne Salmonelle avec Clair BK < 500 diminué augmenté diminué méningite prédo- bactérienne minance de lympho- cytes avec Clair virus < 500 normal légère-ment normal méningite lympho. > 500 diminué très normal méningite phile prédo. 2/3 cytes.4 120-130 roche lympho. Origine Aspect du Étiologie Cytologie Glucose Protéine Chlorure LCR mmol/l g/l mmol/l Adulte /mm3. augmenté bactérienne Meningo minance Pneumo de >1 Strepto B polynuclé- E. lympho- fungique Candida cytes . Tableau I : Résultats cytologiques et biochimiques du LCR de sujets normaux ou atteints de méningite. augmenté diminué augmenté normal méningite ccus.type cellulaire sain Eau de 0 <5 2. glycémie monocytes avec Purulent Haemo.5-3.5 0.2-0. augmenté< virale cytes 1 avec Clair Cryptoco.

Début progressif Listeria monocytogenes : bacilles à Gram Responsable de 5% des cas des positif méningites bactériennes. Méningites purulentes de l’adulte ou de l’enfant Espèce responsable Caractéristiques Streptococcus pneumoniae : cocci à Responsable d’environ 50% des cas des Gram positif méningites bactériennes. Atteinte prédominante du SNC au niveau du tronc cérébral (rhombencéphalite) Méningites néo-natales Espèce responsable Caractéristiques Streptococcus agalactiae (groupe B) : Responsable de 50% des cocci à Gram positif méningites néonatales Escherichia coli K1 : bacilles à Gram Responsable de 25% des méningites négatif néonatales . Gravité du purpura fulminans. (environ 25% des cas des méningites bactériennes). En augmentation. Haemophilus influenzae : bacilles à Gram Responsable de 4% des méningites de négatif l’enfant de moins de 15 ans. Tableau II : Principales espèces bactériennes responsables de méningite communautaire. En nette diminution depuis la vaccination Méningites à liquide clair de l’adulte ou de l’enfant Espèce responsable Caractéristiques Mycobacterium tuberculosis : bacilles Responsable de 1% des cas des Acido-Alcoolo Résistants méningites bactériennes. Problème des PSDP Neisseria meningitidis : cocci à Gram Responsable de la méningite négatif cérébrospinale.

préciser son étiologie bactérienne. stérile. .Listeria monocytogenes : bacilles à Gram Responsable de 1% des méningites positif néonatales Suivi thérapeutique PL de controle À 24 ou 48 H la PL doit être stérile. étudier la sensibilité aux antiinfectieux et suivre l'éfficacité du traitement. diminution des PN. virale. PL de contrôle avant l'arrêt du traitement: <50 élément <10% PN. mycosique. Antigènes solubles Disparition = bon pronostic Conclusion Le rôle du laboratoire est primordial pour diagnostiquer une méningite. Éléments diminuent lentement. parasitaire.