Taller 8

ENTEROBACTERIAS
 ENTEROBACTERIAS
40 géneros.
150 especies.
20 especies responsables de patología
humana.
Distribuidas en suelo, agua, alimentos.
Flora normal del intestino de humanos y
animales.
 TABLE 206–1 The Tribes and Genera of the Family Enterobacteriaceae That Are Associated with Human Disease
Tribe Genera

Escherichieae Escherichia

Shigella

Edwardsielleae Edwardsiella

Salmonelleae Salmonella

Citrobactereae Citrobacter

Klebsielleae Klebsiella

Enterobacter

Hafnia

Serratia

Protease Proteus

Morganella

Providencia

Yersinieae Yersinia

Erwinieae Erwinia

Miscellaneous genera (not yet assigned to a tribe) Buttiauxella

Cedecea

Ewingella

Kluyvera

Tatumella

Rahnella

Various “enteric groups” (not yet assigned to a genus)

 TABLE 206–2 Names and Synonyms of Recovered Isolates of Enterobacteriaceae (Excluding Yersinia, Shigella, and Salmonella)

Current Name Synonym

Cedecea davisae Enteric group 15

Cedecea lapagei Cedecea sp. 4

Cedecea neteri

Citrobacter amalonaticus

Citrobacter diversus Citrobacter koseri

Citrobacter freundii Colobactrum freundii

Edwardsiella tarda

Enterobacter aerogenes Aerobacter aerogenes

Enterobacter amnigenus

Enterobacter asburiae Enteric group 17

Enterobacter hormaechi Enteric group 75

Enterobacter sakazakii

Enterobacter taylorae Enteric group 19

Escherichia fergusonii Enteric group 10

Escherichia hermannii

Escherichia vulneris

Ewingella americana

Hafnia alvei
Klebsiella ornithinolytica Klebsiella oxytoca ornithine positive

Klebsiella oxytoca

Klebsiella ozaenae

Klebsiella pneumoniae

Klebsiella rhinoscleromatis

Kluyvera ascorbata

Moellerella wisconsinsis Enteric group 46

Morganella morganii subsp. morganii Proteus morganii

Proteus mirabilis Proteus vulgaris indole negative

Proteus penneri

Proteus vulgaris Proteus inconstans

Providencia alcalifaciens

Providencia rettgeri Proteus rettgeri

Providencia stuartii Proteus inconstans

Serratia liquefaciens Enterobacter liquefaciens

Serratia marcescens Centers for Disease Control and Prevention group E9

Serratia plymuthica

Serratia proteamaculans subsp. quinovora

Serratia rubidaea

Tatumella ptyseos

Trabulsiella guamensis Enteric group 90

Yokenella regensburgei Koserella trabulsii enteric group 45

 ENTEROBACTERIAS

MORFOLÓGICAS Y TINTORIALES
Bacilos cortos gram negativos, no esporulados, mótiles
(flagelos perítricos) o no, capsulados o no, pilis.

BIOQUÍMICAS
Anaerobios facultativos, catalasa positiva, oxidasa negativa,
fermentan la glucosa, reducen nitratros a nitritos.
 ENTEROBACTERIAS
CULTIVO E IDENTIFICACIÓN

MEDIOS DE CULTIVO

1. Medios no selectivos: agar sangre

2. Medios selectivos-diferenciales: agar McConkey, agar EMB

McConkey: colonias rosadas (fermentan lactosa) y colonias transparentes

(no fermentan lactosa).

Agar EMB: colonias azules (fermentan lactosa) y colonias transparentes

(no fermentan lactosa).

3. Medios altamente selectivos: SS agar, agar XLD, agar Hektoen entérico.

 ENTEROBACTERIAS
CULTIVO E IDENTIFICACIÓN

PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN

1. Pruebas bioquímicas

2. Pruebas serológicas

3. Pruebas de biología molecular

 ENTEROBACTERIAS
CULTIVO E IDENTIFICACIÓN

PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICAS

Prueba TSI (triple azúcar hierro)

Contiene lactosa 10 g, sacarosa 10 g y glucosa 1 g.

Resultados:
Superficie inclinada/fondo:
- alcalina/alcalina: BGNF (Pseudomonas).

- ácida/ácida: Bacterias fermentadoras de lactosa: E. coli, Klebsiella,

Citrobacter, Enterobacter, etc

- alcalina/ácida: Bacterias no fermentadoras de lactosa. Salmonella (H2S+),

Shigella (H2S -), Yersinia.
TSI
TSI
 ENTEROBACTERIAS
OTRAS PRUEBAS BIOQUÍMICAS
Producción de ureasa
Producción de indol
Utilización del citrato
Motilidad
Descarboxilación de lisina, arginina, ornitina
Producción de fenilalanina desaminasa
Producción de H2S
Prueba VP
ENTEROBACTERIAS
ESTRUCTURA ANTIGÉNICA

Antígeno O: Lipopolisácarido
Antígeno K: Cápsula
Antígeno H: Flagelina
 ENTEROBACTERIAS

Enterobacterias Enteropatógenas

Enterobacterias No Enteropatógenas
 ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias enteropatógenas
E. coli
Salmonella
Shigella
Yersinia enterocolitica
Yersinia pseudotuberculosis
 ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias no enteropatógenas
Escherichia coli
Klebsiella pneumoniae
Proteus mirabilis
Proteus vulgaris
Enterobacter cloacae
Citrobacter freundii
Serratia marcescens
Morganella morganii
Providencia
 ENTEROBACTERIAS
NO ENTEROPATÓGENAS
 ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias no enteropatógenas
Factores de patogenicidad generales
Endotoxina
Cápsula
Variación antigénica de fase (ag K y ag H)
Sideróforos
Pilis de adherencia o fimbrias
Enterobacterias no enteropatógenas
 ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias no enteropatógenas
Patologías
Infección urinaria
Meningitis
Neumonía
Abscesos intraabdominales
Abscesos cerebrales
Septicemia
 ENTEROBACTERIAS
E. coli
Factores de patogenicidad específicos

Pilis 1: manosa
Pilis P: gal-gal (uroepitelio)
Pilis de adherencia agregativa (AAF) (uroepitelio e intestinal)
Pilis AFC (factor de colonización) (epitelio intestinal)
Pilis formadores de poros o haces (BFP) (epitelio intestinal)
Polisacárido capsular K1 (Ácido siálico): antifagocítico
Hemolisina alfa: formadora de poros
 ENTEROBACTERIAS
E. coli
Patologías
Infecciones urinarias
Meningitis en RN
Septicemia
Neumonía
Infección de heridas
Infecciones intraabdominales
E. coli
E. coli
 ENTEROBACTERIAS
Klebsiella
Factores de patogenicidad específicos

Pilis: adherencia a epitelios respiratorio y urinario

Cápsula antifagocítica

Patologías
K. pneumoniae y K. oxytoca: infecciones urinarias,
neumonía y otras infecciones nosocomiales
K. rhinocleromatis: rinoescleroma
K. ozaenae: ozena
Klebsiella pneumoniae
Klebsiella pneumoniae
Cápsula
Klebsiella pneumoniae
 ENTEROBACTERIAS
Proteus
Factores de patogenicidad específicos

Pilis
Ureasa

Patologías
Infecciones urinarias, bacteremia, neumonía: En pacientes
debilitados.
Proteus
Proteus
ENTEROBACTERIAS
Enterobacter
Factores de patogenicidad específicos

Pilis

Patologías
Infecciones urinarias, septicemia.
Enterobacter
Enterobacter
 ENTEROBACTERIAS
Serratia
Factores de patogenicidad específicos

Pilis
S. marcescens: pigmentos rojos

Patologías
Infecciones urinarias, bacteremia, neumonía. En pacientes
debilitados.
Serratia
 ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias no enteropatógenas
Diagnóstico
- Muestras
- Frotis
- Cultivo e identificación:
Cultivo: ASH, MacConkey o agar EMB (Lactosa positiva)
Identificación: Prueba TSI: ácida/ácida
Otras pruebas bioquímicas: Urea, citrato, indol, motilidad,
descarboxilación de lisina, arginina, ornitina, VP.
 ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias no enteropatógenas

Tratamiento

Antibiótico según antibiograma

Resistencia a antibióticos: cromosómica o
plasmidial.
ENTEROBACTERIAS
ENTEROPATÓGENAS
 ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias enteropatógenas
Escherichia coli
Antígenos O: 150 diferentes
Antígenos K
Antígenos H
Ej: E. coli O111:K76:H7
 ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias enteropatógenas
Escherichia coli
Clasificación de las cepas productoras de diarrea
E. coli enterotoxigénica
E. coli enteropatógena
E. coli enterohemorrágica
E. coli enteroinvasiva
E. coli enteroagregante
 ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROTOXIGÉNICA
Epidemiología:
Diarrea infantil en países subdesarrollados
Diarrea del viajero
Transmisión oral-fecal
Serotipos O: 6, 8, 25, 78,115, 128
Patogénesis:
Colonización del intestino delgado (pilis AFC)
Enterotoxina LT y enterotoxina ET
Aumento del AMPc y GMPc
Salida de agua y electrolitos
Diarrea acuosa
 ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROTOXIGÉNICA
Inmunidad: Anticuerpos IgA de corta duración

Tratamiento:
Hidratación Oral o Parenteral
Muchas veces no requiere antibióticos
 ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROPATÓGENA

Epidemiología:
Diarrea infantil en países subdesarrollados
Diarrea en menores de 1 año (20 %)
Transmisión oral-fecal
Serotipos O: 26, 111, 55, 119, 128

Patogénesis:
Colonización del intestino delgado
Lesión de fijación/borramiento: pilis BFP, proteína intimina, proteínas
de secreción.
Modificaciones del citoesqueleto: destrucción de actina de las
microvellosidades.
Alteración de la absorción
Diarrea acuosa
 ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROPATÓGENA
Inmunidad: Anticuerpos IgA de corta duración

Tratamiento:
Hidratación Oral o Parenteral
Antibióticos
 ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROHEMORRÁGICA

Epidemiología:
Diarrea en países desarrollados
Asociado al consumo de carne bovina
E. coli O:157 H:7
Dosis infectante baja: 100 a 200 microorganismos
 ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROHEMORRÁGICA

Patogénesis:
Colonización del intestino grueso Pilis AFC
Lesión de fijación y borramiento
Producción de citotoxina tipo Shiga o Verotoxina
Lesiones hemorrágicas
Diarrea con sangre
Fijación de citotoxina al glomérulo renal y las plaquetas de
la microcirculación.
Síndrome Urémico-Hemolítico
 ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROHEMORRÁGICA

Tratamiento:
Hidratación Oral o Parenteral
Síndrome urémico-hemolítico: hospitalización
No dar antibióticos
 ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROINVASORA

Epidemiología
Diarrea con moco y sangre en niños menores de 5 años
Relacionada con las Shigellas
Transmisión oral-fecal
Único reservorio el hombre
Serotipos O: 28, 29, 112, 143, 164

Patogénesis:
Colonización de la mucosa del intestino grueso
Proteínas Ipa: capacidad de invadir y producir úlceras en la mucosa
colónica
Dosis infectante alta
Diarrea con moco y sangre (Síndrome disentérico)

Tratamiento: Hidratación
 ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROAGREGANTE

Epidemiología:
Diarrea con moco
Diarrea crónica + 14 días
Transmisión oral-fecal
Niños y lactantes

Patogénesis:
Colonización del intestino delgado (pilis adherencia agregativa o AAF)
Formación de bio-película mucosa
Diarrea con moco
 ENTEROBACTERIAS
Diagnóstico de E. coli productoras de diarrea

Pruebas de identificación

- Aglutinación en lámina con antisueros (Todas)

- ELISA y sondas de ADN para detección de toxinas (ECET)
- McConkey sorbitol: sorbitol negativa (ECEH)
- Prueba de potencial enteroinvasivo en cultivos celulares
(ECEI).
- Sondas de ADN, patrones de adherencia agregativa en
cultivos celulares (ECEAg)
 ENTEROBACTERIAS
Tratamiento
Quinolonas
Trimetropin sulfa
Ampicilina
Prevención
Hervir el agua
Cocinar los alimentos
Eliminar insectos como moscas, cucarachas
Quimioprofilaxis
 ENTEROBACTERIAS

Enterobacterias enteropatógenas
Shigella
S. dysenteriae
S. flexneri
S. sonnei
S. boydii
Shigella
 ENTEROBACTERIAS
Shigella
Epidemiología:
Sólo infecta al hombre
Dosis infectante de 200 microorganismos
Niños de países subdesarrollados
Hacinamiento, moscas y cucarachas
Transmisión oral-fecal
S. dysenteriae es toxigénica (Toxina de Shiga)
La especie más frecuente es S. flexneri
La especie más virulenta es S. dysenteriae
 ENTEROBACTERIAS
Shigella
Patogenia:
Acido resistencia
Invasión de las células M de las placas de Peyer del colon
Antígenos de invasión IpaA, IpaB, IpaC, IpaD (plasmidos)
Ondulaciones en la membrana celular – englobamiento de
las bacterias - ruptura de la vacuola endocítica – multiplicación en el
citoplasma
Polimerización de la actina
Invasión de los enterocitos adyacentes
Inducción de apoptosis – liberación de IL-1B (atrae PMN)
Formación de las úlceras y microabscesos
Toxina de Shiga: enterotóxica, citotóxica y neurotóxica
Síndrome disentérico: diarrea con moco, sangre y pus
Shigella
 ENTEROBACTERIAS
Shigella
Diagnóstico
Muestra
Frotis
Cultivo: MacConkey: lactosa negativo
Agar SS: Salmonella-shigella agar
Agar XLD: Xilosa-lisina-dexosicolato
Identificación:
TSI: alcalina/ácida, H2S negativo
Serología: aglutinación en lámina con antisueros específicos.
Crecimiento de Shigella en medio
MacConkey
Crecimiento de Shigella en SSA
 ENTEROBACTERIAS
Shigella
Tratamiento
Antibióticos
Ampicilina, Trimetropin-sulfa, Quinolonas, Cef de 3° g
No usar antiespasmódicos ni antidiarreicos

Prevención
Saneamiento ambiental
Control de insectos
Cocción de los alimentos
 ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias enteropatógenas
Salmonella
Clasificación
S. enterica, subespecie enterica
Serotipos
S. enteritidis
S. typhimurium
S. typhi
S. paratyphi A
S. paratyphi B (Salmonella schottmuelleri)
S. typhi C (Salmonella hirschfeldii)
Salmonella
 ENTEROBACTERIAS

Salmonella

Epidemiología:
Todas los serotipos, excepto S. typhi y S. paratyphi,
infectan al hombre y animales como mamíferos, aves y
anfibios
Dosis infectantes 1000 microorganismos
Productos aviarios: huevos crudos
Sociedades industrializadas
Más frecuente en época de calor
El uso de antiácidos aumenta la incidencia
Niños menores de 5 años y mayores de 70 años.
Producen diarrea o fiebre entérica
Salmonella
 ENTEROBACTERIAS
Salmonella enteritidis

Patogénesis de la gastroenteritis:
Invade células M del intestino delgado y grueso
La adherencia (fimbrias específicas para cada especie) produce
ondulaciones en la superficie celular
Sistema de invasión PAI (invA, invB, spaP, spaQ)
Formación de una vacuola endocitica
Transcitosis
Paso a la submucosa
Englobadas por los macrófagos intestinales – sobreviven a la
fagocitocis gracias a la apoptosis de los macrófagos
Inflamación y ulceración de la mucosa y submucosa intestinal
Invasión del torrente linfático y luego circulatorio
 ENTEROBACTERIAS
Salmonella typhi

Patogénesis de la Fiebre Tifoidea

Factor de virulencia Vi (cápsula) inhibe la fagocitosis por los PMN
Invade células M del intestino delgado
Transcitosis
Fagocitosis por los macrófagos intestinales
Multiplicación dentro del macrófago
Invasión del torrente linfático: Colonización de los órganos del SER (ganglios
mesentéricos, bazo, hígado y medula ósea), invade torrente circulatorio y
siembra a distancia
Liberación de endotoxinas
Circuito enterohepático

Epidemiología :
El reservorio es el Hombre
Se trasmite únicamente Hombre-Hombre, vía oral-fecal
Portador crónico en la vesícula biliar
Manipuladores de alimentos
Dosis infectante moderada 105 a 106
 ENTEROBACTERIAS
Salmonella

Patologías:
Gastroenteritis
Bacteriemia e infección a distancia
Fiebre tifoidea o paratifoidea
Fiebre tifoidea
Fiebre tifoidea
Fiebre tifoidea
 ENTEROBACTERIAS
Salmonella enteritidis
Diagnóstico
Muestra: heces
Frotis y Gram
Cultivo:
Agar MacConkey: lactosa negativo
SSA
Agar XLD
Identificación: TSI: alcalina/ácida y H2S +
Serología
 ENTEROBACTERIAS
S. typhi
Diagnóstico
- Cultivos:
Primera semana: hemocultivo
Segunda semana: coprocultivo
Tercera semana: urocultivo
Cuarta semana: mielocultivo
- Prueba de Widal
SALMONELLA SSA
Salmonella XLD
 ENTEROBACTERIAS
Salmonella

Tratamiento
Síndrome diarreico: uso discutido de antibióticos
Fiebre tifoidea: cloranfenicol, cefalosporinas,
quinolonas
 ENTEROBACTERIAS
Salmonella
Prevención
Higiene ambiental
Higiene personal
Cocción de los alimentos
Vacuna de bacterias inactivadas
Vacuna de bacterias vivas atenuadas
Eliminación de los portadores sanos de S. typhi
 ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias enteropatógenas
Yersinia enterocolítica y Yersinia pseudotuberculosis

Epidemiología:
Las infecciones por Yersinia son zoonóticas.
Alimentos o aguas contaminadas.
Frecuente causa de enterocolitis en países Escandinavos y
Europeos.
Tasa baja de aislamiento.
Yersinia enterocolitica
 ENTEROBACTERIAS
Yersinia enterocolítica y Yersinia pseudotuberculosis

Patogenia:
Invaden las células M de la placas de Peyer
Proteína invasina se fija a las integrinas
Proteínas de la membrana exterior de Yersinia (pmeY): Efectos
citotóxicos: alteración de procesos bioquímicos como
desfosforilización, cinasa de la serina, alt de funciones sensoras
y del citoesqueleto de actina
Genes PAI: sideróforos
Multiplicación en las células del SER
Ganglios mesentéricos
Formación de microabscesos
Diseminación
 ENTEROBACTERIAS
Yersinia enterocolítica y Yersinia pseudotuberculosis
Patologías
Linfaadenitis mesentérica
Enterocolitis
Fiebre intestinal
Síndrome poliartrítico
Ileitis terminal

Tratamiento
Ampicilina, tetraciclina, cloranfenicol
Y. enterocolitica resistente a penicilina y cefalosporina
(betalactamasas)