P. 1
pruebas bioquímicas para enterobacterias

pruebas bioquímicas para enterobacterias

4.25

|Views: 48,015|Likes:
Published by eduardo

More info:

Published by: eduardo on Aug 14, 2008
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as PPT, PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

11/20/2015

pdf

text

original

Pruebas Bioquímicas Para Enterobacterias

Fundamentos

Eduardo Bermudez Chavez

1

IMVIC
• • • • INDOL ROJO DE METILO VOGES PROSKAUER CITRATO DE SIMMONS

Eduardo Bermudez Chavez

2

Medio SIM
• INDOL • ACIDO SULFIDRICO • MOVILIDAD

Eduardo Bermudez Chavez

3

SIM INDOL
• Para identificar el Indol, el medio tiene peptonas, y el aminoácido triptófano el cual si las bacterias tienen la enzima triptofanasa hace que se libere el indol (grupo funcional del triptofano). • Si se libera el indol, éste reacciona con Paradimetil Benzaldeido (Kovac) • Color Rojo  positivo • Color Amarillo  Negativo (no se liberó indol porque la bacteria no tiene triptofanasa)
Eduardo Bermudez Chavez 4

SIM
ACIDO SULFHIDRICO H2S
• El medio tiene tiosulfato, el cual libera ácido sulfhídrico que es un gas. Éste reacciona con la Sal de Hierro y forma un precipitado negro que es sulfuro ferroso. • Color Negro  Positivo (debido al precipitado) • Sin precipitado Negro  Negativo.
Eduardo Bermudez Chavez 5

SIM
MOVILIDAD • Movilidad Negativa: Si la cepa crece solo en la picadura es inmóvil. • Movilidad Positiva: Si crece en todo el medio, es móvil.

Eduardo Bermudez Chavez

6

MR - VP
• Es un caldo glucosado

• PRUEBAS QUE SE REALIZAN: • ROJO DE METILO • VOGES PROSKAUER

Eduardo Bermudez Chavez

7

MR - VP
ROJO DE METILO • Algunas bacterias obtienen energía de la glucosa del medio. Se forma piruvato (ácido piruvico) y toma diferentes vías: • algunas bacterias fermentan (se usan en productos lácteos) • otras forman alcoholes (levaduras) • Otras utilizan el ciclo de krebs. • En otras hay vías que producen ácidos mixtos.
Eduardo Bermudez Chavez 8

MR - VP ROJO DE METILO • Las que producen ácidos mixtos, acidifican el medio (bajan el pH) • Estas bacterias son rojo de metilo positivas. • POSITIVO  Color Rojo • NEGATIVO  Color Amarillo

Eduardo Bermudez Chavez

9

MR - VP
VOGES PROSKAUER
• Esta prueba se utiliza para ver la producción de Acetoína (Acetil Metil Carbinol) • Se le agregan 6 gotas de Alfa Naftol que es un catalizador. • Al agregar 3 gotas de sosa o potasa reacciona con la Acetoìna y forma un precipitado: • POSITIVO  Color ROJO • NEGATIVO Amarillo, café, oscuro. (dependiendo la antigüedad del reactivo)
Eduardo Bermudez Chavez 10

AGAR CITRATO (CIT)
• Este medio no tiene carbohidratos • Tiene Azul de Bromotimol como Indicador • La prueba es para ver si la bacteria utiliza como fuente de carbonos al citrato, el cual se encuentra en el ciclo de krebs. • El medio tiene Citrato de Sodio y Sal de Amonio. • Si utiliza el citrato Ver resultados en el bisel (porque es en el ciclo de krebs, oxidativo): • POSITIVO  Color Azul • NEGATIVO  Color Verde (original)
Eduardo Bermudez Chavez 11

CIT
• También puede cambiar de color i utiliza la sal de amonio (NH4), porque se alcaliniza el medio: • Color Azul  Cit POSITOVO (pH Acalíno) • Color Verde Cit NEGATIVO (Neutro) • Color Amarillo Cit NEGATIVO (ácido) • Puede no cambiar de color, pero si hay crecimiento es positivo, ver otras pruebas.
Eduardo Bermudez Chavez 12

TSI
• Tiene Glucosa, lactosa, sacarosa, azufre, y sal de hierro. • • • • • Se realizan las pruebas: Fermentación de glucosa Fermentación de lactosa Ácido sulfhídrico Gas de Glucosa
Eduardo Bermudez Chavez 13

TSI
• Color original sin sembrar: Rojo (Naranja) • Gas de Glucosa positivo  Formacion de burbuja pequeña o botado del medio. • H2S positivo  Precipitado Negro.

Eduardo Bermudez Chavez

14

TSI
• FERMENTACION DE CARBOHIDRATOS • Fondo Amarillo  Glucosa + • Bisel Rojo  Lactosa - , Sacarosa – • Bisel Amarillo y Fondo Amarillo  GLuc + Lac + y Sac+. • El medio tiene 1 g de glucosa, 10 gramos de lactosa y 10 gramos de sacarosa, por litro.
Eduardo Bermudez Chavez 15

LIA
• Este medio, tiene peptonas y aminoácidos (lisina). • Se realiza la prueba: • H2S (mismo fundamento) • Descarboxilación de Lisina. (o desaminación) • La prueba consiste en buscar la enzima lisina descarboxilasa de ciertas bacterias la cual descarboxila a la Lisina (aminoacido).

Eduardo Bermudez Chavez

16

LIA (Descarboxilación de Lisina)
• Al descarboxilar queda solo la amina (putresina o cadaverina). La cual da al medio un pH alcalino. • POSITIVO  Color Morado (alcalino) • NEGATIVO  Color Amarillo (ácido). • Cuando hay mucho ácido el bisel también es amarillo.
Eduardo Bermudez Chavez 17

LIA (Desaminación de Lisina)
• proteus no descarboxila, solo desamina y se forma: • Un ácido débil que reacciona con la sal de hierro y forma complejo naranja. • Y un amonio que alcaliniza el medio y da un color morado. • En conjunto se forma un color púrpura o rojo en el bisel. • (solo en proteus que es lisina -)
Eduardo Bermudez Chavez 18

MIO
El Medio tiene: • Color Original  Morado (ligeramente Alcalino) o Blanco (muy alcalino) • Glucosa (original pH >7, cuando se utiliza la glucosa el pH vuelve a 6.5) • Tiene púrpura de Bromocresol como indicador. PARA VER • Movilidad (mismo fundamento) • Indol (mismo fundamento) • Descarboxilacion de Ornitina (ODC)
Eduardo Bermudez Chavez 19

MIO Descarboxilacion de Ornitina
• La ornitina descarboxilasa es una enzima que actúa a pH 6.5 • Si la bacteria tiene ésta enzima descarboxila al aminoacido ornitina y también se desamina al mismo tiempo. • Los productos son CO2 + H2O + AMINA (putresina o cadaverina) los cuales son compuestos alcalinos.
Eduardo Bermudez Chavez 20

MIO Descarboxilación de Ornitina
• Debido a los productos alcalinos se alcaliniza el medio y los resultados son: • Positivo  Color Morado (Alcalino) • Negativo  Amarillo (ácido)

Eduardo Bermudez Chavez

21

CALDO MALONATO (MAL) Malonato
• El fundamento es igual al citrato. • Para ver si utiliza al malonato como fuente de carbonos.

Eduardo Bermudez Chavez

22

CALDO UREA
• • • • • • Caldo Original Color Amarillo TIENE Rojo fenol como indicador Peptonas Carbohidratos como fuente de C. UREA

• FUNDAMENTO: Ver la hidrólisis de la urea.
Eduardo Bermudez Chavez 23

UREA
• Ver si la bacteria tiene la enzima Ureasa que hidroliza la urea y produce amoniaco. • Si se produce Amoniaco es Positivo. • Positivo Rojo o Rosa Mex (Alcalino). • Negativo Color Amarillo(Acido).

Eduardo Bermudez Chavez

24

AGAR FENILALANINA FAD
• Ver la desaminación de la Fenilalanina (aminoácido). • Algunas bacterias tienen la enzima fenilalanina desaminasa, que actua sobre la fenilalanina. • Se produce acido fenil pirúvico. • Este reacciona con el cloruro férrico. Y da coloración verde. • Positivo  Color Verde • Negativo  Color Amarillo (original).
Eduardo Bermudez Chavez 25

FOTOS DE RESULTADOS

Eduardo Bermudez Chavez

26

Eduardo Bermudez Chavez

27

You're Reading a Free Preview

Download
scribd
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->