ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD DEL REACTIVO La suspensión del antígeno siempre debe refrigerarse cuando no se utilice.

Proteger de la luz ¡No congelar!. El antígeno es estable sin abrir y almacenado entre 2-8°C, hasta la fecha de caducidad marcada en su respectiva etiqueta. Los controles son estables hasta la fecha de caducidad indicada en su etiqueta cuando se almacenan entre 2-8°C. Lleve a temperatura ambiente la suspensión del antígeno y los controles antes de utilizarse.

RPR
Prueba Rápida de Reagina (Sífilis)
Prueba en placa de floculación con carbón activado para la determinación cualitativa y cuantitativa de anticuerpos reagínicos en suero o plasma RESUMEN Y PRINCIPIO La prueba de RPR es una prueba de floculación no treponémica macroscópica que es utilizada para detectar y cuantificar reaginas, un anticuerpo anti-lipídico encontrado en el suero o plasma de personas con sífilis y ocasionalmente en personas con infecciones agudas o crónicas en otras condiciones aparte de la sífilis. El antígeno utilizado en el equipo es una modificación del antígeno VDRL que contiene micropartículas de carbón para realzar la diferencia entre un resultado positivo y negativo. Si una muestra contiene reaginas, ocurre la floculación con las partículas de carbón contenidas en la suspensión del antígeno, la cual aparece como un cúmulo negro. Las muestras no reactivas se observan con un ligero color gris. PRESENTACIONES Equipo para 50 pruebas Equipo para 100 pruebas Equipo para 200 pruebas Equipo para 300 pruebas Equipo para 500 pruebas REACTIVOS
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MATERIAL PROPORCIONADO
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Aguja No. 18 sin bisel utilizada para dispensar aproximadamente 17mL de la suspensión del antígeno. Pipetas/ agitadoras utilizadas para dispensar aproximadamente 50 mL (0.05 mL) de muestra. Tarjetas de Prueba (círculos de aproximadamente 18 mm). Utilice como superficie de prueba. Se debe tener cuidado en la manipulación de las tarjetas de prueba para evitar introducir contaminantes al circulo de prueba. Extienda cada muestra sobre el total del área del círculo de prueba.

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Nota: Deseche la aguja cuando el equipo se haya utilizado completamente. MATERIALES REQUERIDOS PERO NO PROPORCIONADOS
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Rotador (100 ± 2 rpm) Solución salina (0.9%) Cronómetro Lámpara

RECOLECCIÓN Y PREPARACIÓN DE LA MUESTRA Las muestras pueden ser sueros activados o inactivados o plasmas recolectados con EDTA como anticoagulante. Evite la hemólisis. La lipemia no interfiere con la suspensión del antígeno, sin embargo, si la muestra esta severamente lipémica de manera que se obscurece el estado de las partículas de antígeno, la muestra no debe ser utilizada. ESTABILIDAD DE LA MUESTRA
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Suspensión de Antígeno RPR. Suspensión de cardiolipina , conteniendo micropartículas de carbón activado. Control Positivo RPR. Control líquido estabilizado, reactivo con antígeno RPR. Control Negativo RPR. Control líquido estabilizado, no reactivo con antígeno RPR.

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Las muestras de suero se reportan estables por 5 días, almacenadas entre 2-8°C. Los plasmas recolectados con EDTA y almacenados entre 2-8°C se reportan estables hasta 24 hrs.2 SUSTANCIAS INTERFERENTES Como con todos los antígenos tipo cardiolipina, pueden ocurrir resultados falsos positivos. Estos resultados pueden ser causados por enfermedades como lepra, lupus eritematoso, mononucleosis infecciosa, paludismo y neumonía viral. Varios reportes indican la presencia de resultados falsos positivos en el embarazo.3,4 Enfermedades autoinmunes y adicciones narcóticas pueden dar reacciones falso-positivas.5

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Precauciones: Unicamente para uso diagnóstico in-vitro. PREPARACIÓN DEL REACTIVO La suspensión del antígeno debe agitarse por 5 a 10 segundos antes de abrirse, para resuspender las partículas de carbón. Los controles están listos para su uso.

Continuar esta operación hasta el tubo No. Agite el frasco de la suspensión del antígeno antes de utilizarlo. Agite por 8 minutos a 100 rpm en un rotador mecánico. No limpie la aguja. Hubo una concordancia de 431 de los sueros no reactivos y de 194 de los sueros reactivos. Las muestras que son no-reactivas pero dudosas. 2. 1 y mezclar. los controles y las muestras. Repita el mismo procedimiento para cada muestra.PROCEDIMIENTO 8. Débil reactivo: Presencia de flóculos pequeños pero definidos. (Véase Limitaciones) Procedimiento cuantitativo 1. Tome la pipeta/agitador del extremo sellado. Colocar en una gradilla cuatro tubos 12 x 75 mm y numerarlos. se deben de repetir y cuantificar ya que se pueden detectar reacciones poco frecuentes de prozona. 4. Se recomiendan pruebas serológicas confirmativas como el ensayo de microhemaglutinación para anticuerpos treponémicos (MHA-TP). 3. Hubo concordancia en la dilución final en 22 casos. 3. Las muestras de suero que son reactivas en pruebas cualitativas deben ser cuantificadas para establecer un tratamiento en el cual los cambios de título puedan ser determinados como un indicador de la respuesta al mismo. Los títulos se extendieron de 1:4 a 1:512. Esto representa un 99. 7. Depositar 0. Sosténgalo en posición vertical y dispense varias gotas en la tapa del frasco para asegurarse de que el paso por la aguja es correcto. Sostenga en posición vertical la pipeta/agitador directamente sobre un círculo de la tarjeta de prueba y coloque una gota de muestra sobre esta área. 4. Seleccione los sueros positivos obtenidos en la prueba cualitativa. exactamente sobre cada una de las gotas de las diluciones anteriores utilizando el frasco gotero al cual se le ha insertado la aguja No. Depositar 0. 8. Lea macroscópicamente bajo una lámpara de luz intensa. 2 y mezclar. Agite por 8 minutos a 100 rpm en un rotador mecánico. Los otros 3 resultados fueron como se mencionan a continuación: . 7. Pasar 0.5 mL de suero problema en el tubo No. 2. CARACTERÍSTICAS DE FUNCIONAMIENTO Se obtuvieron 625 muestras de laboratorios públicos de salud y fueron sujetos a comparación entre la prueba de RPR Sífilis y Tarjetas de Prueba Macro-Vue TMRPR (BBL Division of Becton Dickinson and Company) con los siguientes resultados: RPR Sífilis No-reactivo Reactivo 431 194 Macro-VueTM 433 192 Reactivo: Presencia de flóculos grandes o pequeños en el centro o la periferia del círculo de prueba.5 mL de solución salina. Suelte para permitir que la pipeta aspire un poco de muestra. Deseche la pipeta/agitador. Las muestras de plasma no deben ser utilizadas para pruebas cuantitativas. Ejemplo: Tubo No. NO EXTIENDA! 6. 1 al tubo No. 5. 6. RESULTADOS CUANTITATIVOS La última dilución que contenga agregados macroscópicos indica el título de la muestra. Leer el resultado macroscópicamente. No reactivo: Apariencia lisa. 4. Transcurrido este tiempo retire la tarjeta del rotador y agítela breve y suavemente. LIMITACIONES El diagnóstico de la sífilis no debe ser hecho basado en un resultado positivo único de una prueba no treponémica.05 mL de cada una de las diluciones sobre anillos diferentes de la placa de reacción. Lleve a temperatura ambiente la suspensión del antígeno de RPR. extienda la muestra para cubrir el total de la superficie del círculo. Utilizando el extremo plano de la pipeta/agitador. El diagnóstico final debe estar en base a la correlación de los resultados de prueba junto con otros hallazgos clínicos. 5. Transcurrido este tiempo retire la tarjeta del rotador y agítela breve y suavemente. 18 sin bisel. Al tiempo que oprime y mantiene presionado dicho extremo.4% de concordancia. uniforme pero sin flóculos visibles. Coloque una gota de la suspensión del antígeno sobre cada muestra. Agregar a cada uno de ellos 0. 11. coloque la pipeta dentro de la muestra.5 mL del tubo No. 1 2 3 4 Dilución del suero 1:2 1:4 1:8 1:16 Resultado Positivo Positivo Positivo Negativo El título del suero problema será: 1:8. 9. Extienda sobre el total de la superficie de cada círculo donde se colocaron las diluciones. 10. Veinticinco (25) de los sueros reactivos probados por ambos procedimientos fueron seleccionados al azar y comparados en un procedimiento semi-cuantitativo descrito anteriormente. RESULTADOS CUALITATIVOS Añadir una gota de la suspensión del antígeno previamente resuspendido. Procedimiento cualitativo 1. Los resultados positivos deben ser confirmados mediante pruebas de las muestras utilizando procedimientos cuantitativos. sin el soporte de una historia positiva o evidencia clínica.

Moore. 3. Perryman MW. 1974. . Walker. J Clin Microbiol 1983.: Weiss. Kaufman. Viveros de la Loma C. R. MANUAL OF TESTS FOR SYPHILIS. de México Tel.. & Backhouse . V. Jr. 17:341-345. And Weisner. M.RPR Sífilis A.L. BIBLIOGRAFÍA 1. SA. Garner. J. 11/07/02 IN-118 Fabricado en México por: Laboratorios Licon S.: (55) 5362-0299 Fax: (55) 5362-1792 Esto representa una concordancia dentro de una dilución en todos los casos. EDTA-treated plasma in the rapid plasma reagin card test and the toluidine red unheated serum test for serodiagnosis of syphilis. Hambie EA. 50:350-353. 1:737739.: Med. An. Viveros del Rocío No. Dis.: Brit. April 1973. Australia. Jr.E... APHA publication. 5. 33 Col. Pettit DE. 54080 Tlalnepantla. Dis. N: Brit. Whittington W. 47:259-262.F. Edo. Mullally R. B. Larsen. 1:4 1:128 1:32 Macro-VueTM 1:8 1:64 1:16 Rev. S. J. 4. Ven. P. Jr. August 1971. Falcone. 2.A.D.P.J. 1990. C. Ve.