You are on page 1of 2

MÉTODOS PARA AVALIAÇÃO CELULAR

1. Microscopia ótica (luz)


2. Microscopia eletrônica (feixe de elétrons)
3. De transmissão
4. De varredura, feita ponto a ponto.
* Exige-se assepsia, ou seja, sem contaminação.

Marcadores radioativos (radioautografia)


Estuda os processos celulares dinâmicos.
A amostra fica exposta à emulsão fotográfica, que fica exposta à radiação.
Pontos negros indicam local e quantidade de tecido radioativo.

Imunohistoquímica e himunocitoquímica
Injeta-se um antígeno (Ag), para obtenção de um anticorpo (Ac).
→ Corante fluorescente
Imunofluorescência direta ou indireta.
Inocula.
Apresenta localização precisa do tecido.

Microscopia ótica
Utiliza feixe de luz.
Lentes: Ocular e Objetiva.
Ampliação total: Ocular X Objetiva. (Ex: 10 x 40 = aumento de 400x).
Limite de resolução: 0,2 µm.
Passo a passo para visualização de lâmina
1. Observar a lâmina a olho nu.
2. Colocar no microscópio e observar a lâmina no menor aumento, passar para o seguinte aumento e assim
sucessivamente até atingir a visualização perfeita.
Resolução
O que determina a riqueza de detalhes é seu limite resolutivo e não o poder de aumentar de tamanho os objetos.
→ Resolução é a capacidade de separar dois pontos colocados juntos.
Exame dos órgãos
• Por transparência, cortes muito finos.
• Lâminas de vidro.
Unidades de medida: centímetro: (1 cm)
micrômetro: (1 µm)
nanômetro: (1 nm)

Microscopia eletrônica
Mil vezes mais poderoso que o microscópio ótico.
Utiliza feixe de elétrons.
Facilmente desviam de objetos por isso necessitam de cortes muito finos.

TRATAMENTO DOS TECIDOS


FIXAÇÃO
• evitar destruição pela desnaturação de proteínas [ próprias enzimas (autólise -> auto-destruição das
células), bactérias]
• facilita o corte.
• Melhora a coloração, minimiza o vazamento.
• Protege o histologista (anti-séptico).
FIXADORES
• Formalina neutra (pH 7,5) tamponada 10%.
- 10 vol. de formol
- 90 vol. de solução tampão fosfato.
• Álcool etílico.
• Ácido acético.
Imersão imediata após retirada do organismo.
Proporção: 30:1.
Tempo: depende do fixador, densidade do tecido...
Em formaldeído, cerca de 24 hs.
IMPREGNAÇÃO/ INCLUSÃO
Impregnação: por substâncias de consistência firme (parafina).
Permite cortes muito finos.
Inclusão: entrada de substâncias no interior da amostra (Parafinas, resinas sintéticas).
DESIDRATAÇÃO
Se a parafina ENTRA, alguma coisa tem que SAIR antes.
Água: 75% dos constituintes dos principais tecidos.
Álcool etílico, etanol, etano, butano, dioxano.

You might also like