Facultad de Medicina Humana Universidad Nacional Federico Villarreal 2008

Actividad Antimicrobiana del Aceite Esencial de “Hierba Luisa” Cymbopogon Citratus Frente a Vancomicina Contra Staphylococcus Aureus
CABRERA CHRISTIAN*, CAMINO HENRY*, CAMPOS EVELYN*, CANALES SERGIO*

* Estudiante de Medicina Humana - UNFV

RESUMEN

Se determinó la actividad antimicrobiana del aceite esencial de “Hierba Luisa” Cymbopogon citratus, planta usada en la medicina tradicional para aliviar diferentes infecciones bacterianas tales como las que causan enfermedades cutáneas, mediante la técnica de disco difusión contra una cepa de Staphylococcus aureus ATCC 25923, comparando dicha actividad con la vancomicina, fármaco de primera elección para el tratamiento de infecciones causadas por dicho microorganismo. El aceite esencial se extrajo por el método de destilación por arrastre de vapor de agua. La actividad antimicrobiana se determinó mediante la medida del diámetro de los halos de inhibición tanto del aceite esencial como de la vancomicina, y siguiendo las escalas de Durafford y del NCCLS respectivamente, según las cuales este aceite mostró una sensibilidad límite para la cepa de Staphylococcus aureus en comparación con la vancomicina que mostró una marcada sensibilidad.

Palabras

Claves:

Actividad

Antimicrobiana,

Aceite

Esencial,

Hierba

Luisa,

Vancomicina, Staphylococcus aureus.

ABSTRACT

The antimicrobial activity of the essential oil of “Luisa grass” Cymbopogon citratus, a plant used in the Peruvian traditional medicine in order to alleviate microbial infections how skin diseases, was determinated by the aggar-well difussion assay against Staphylococcus aureus ATCC 25923, comparing this activity with the vancomycin, drug

como es el caso de la Hierba Lusia. Key words: Antimicrobial activity. sin que todas éstas mayoría. Las plantas medicinales. Cymbopogon citratus. according to which. Vancomycin. que más se están desarrollando investigaciones sobre estos aceites esenciales. siendo utilizado como calmante. por la necesidad creciente de encontrar armas de lucha más eficaces contra que muchos a microorganismos empiezan . usadas para el tratamiento de diversas afecciones son conocidas desde épocas muy antiguas. habiéndose llegado a obtener resultados satisfactorios en muchos de ellos. principios activos en su forma más pura. antiinflamatorio. pero fue con el paso de los años que se empezó a descubrir que estas plantas. de ahí que se vengan generando variados trabajos de compuestos por una gran variedad de sustancias químicas con diferentes acciones biológicas. investigadas. Essential Oil. contra el dolor de estómago y afecciones orientados especialmente a sus efectos antimicrobianos. aromáticas en su En el Perú. The antimicrobial activity was determined by the measurement of the diameter of the of inhibition of the essential oil and the vancomycin. quedan aún muchas plantas que no han sido ampliamente Es recién en los últimos años. se en sigue las usando ampliamente comunidades rurales una enorme cantidad de plantas medicinales. Sin embargo. following the scales of Durafford and NCCLS respectively. al igual que en otros países del mundo. this oil showed a limit sensivity for Staphylococcus aureus in comparison with the vancomycin that showed a noticeable sensitivity. que es usada por la población rural con la creencia de que posee grandes propiedades medicinales para aliviar diferentes afecciones. y se descubrió también que son los aceites esenciales una forma de concentrar estos investigación con el fin de determinar sus propiedades tanto farmacológicas como los principios activos. Luisa grass. que serían las que les darían las propiedades curativas tan apreciadas que tienen. poseían principios activos. The essential oil was extracted by the method of distillation by drag water steam.of first election. tengan un estudio científico de sus propiedades. INTRODUCCIÓN desarrollar diferentes grados de resistencia a los quimioterápicos. Staphylococcus aureus.

uno de los fármacos de conservadas envueltas en papel Kraft a temperatura ambiente hasta el día de elaboración del aceite esencial.0%) como principal componente y principio activo de esta planta elección recomendados para el tratamiento de patologías causadas por esta bacteria. ya que por ejemplo para algunos el Staphylococcus aureus establecer utilización segura y eficaz de este fitofármaco y dar inicio a futuras investigaciones con el propósito de que en el futuro se trate de introducir. Dichas muestras fueron proponerse y difundir el uso de esta planta como una alternativa natural al tratamiento de este agente microbiano causante de un alto porcentaje de enfermedades cutáneas en nuestro país. además de la creciente farmacorresistencia a vancomicina. mientras que en otros trabajos se menciona que el aceite esencial actividad muchos positivos de esta planta presenta frente a antimicrobiana MATERIALES Y MÉTODOS microorganismos como el gram Recolección e Identificación Staphylococcus aureus y mas aún resulta un halo de inhibición considerable. ya que todavía existe duda en la comunidad científica de su convencional. Taxonómica de la Hierba Luisa Las muestras utilizadas de hierba luisa “Cymbopogon citratus” fueron Con el trabajo se busca poder adquiridas en un puesto de plantas medicinales del Mercado de Central de Lima. costos que estos representan o por la desconfianza generalizada de la El presente trabajo de investigación demostrará la capacidad población a los efectos adversos que presenta la farmacoterapia antimicrobiana del aceite esencial de Hierba luisa (Cymbopogon citratus) a una determinada concentración óptima. bajo alguna forma. Esto debido a que se tienen distintas posiciones. efectividad contra este microorganismo. resultó presenta sensibilidad nula a la Hierba Luisa. ya que gran parte de la población no usa por los los fármacos elevados recomendados. La identificación taxonómica fue realizada según el Sistema de Clasificación de . Por lo tanto es importante determinar el efecto antibacteriano del Cymbopogon citratus (Hierba Luisa) en comparación con la vancomicina una para poder racional.cutáneas en general.84 y 77. y se compara su acción frente a la vancomicina. frente Staphylococcus aureus ATCC 25923. Cabe mencionar que dentro de la composición química de su aceite esencial se encuentra el Citral (70. en la medicina a una dosis terapéutica.

los cultivos de condiciones y siguiendo los mismos . Dicho aceite fue conservado en un frasco de vidrio oscuro. el cual estuvo contenido en 36 placas Petri tabicadas estériles. pertenecientes a una marca comercial (Biolabtest. luisa Evaluación de la Actividad aplicados sobre los medios de cultivo inoculados. en un volumen de aproximadamente 20 ml por placa. de esta manera se garantizó que dicha cepa pertenecía a la especie y género a investigarse. los cuales fueron impregnados el mismo día de la experimentación. La aplicación de los discos de vancomicina de 1 g. Perú). Posteriormente. en los cuales se aplicó un disco de vancomicina (en el caso del grupo control) o un disco impregnado de aceite esencial de Cepa de Staphylococcus Aureus La cepa de Staphylococcus aureus ATCC 25329 fue proporcionada por el Naval Medical Research Center hierba luisa (en el caso del grupo intervención) en cada uno de los dos compartimientos de placa tabicada con agar Mueller – Hinton. con 5 esencial de hierba L de aceite puro. Staphylococcus aureus fueron estandarizados por turbidimetría con el tubo Nº 1 de la escala de Mc Farland (3 x 108 microorganismos por mL). incubándose a 37º C por 24 Antimicrobiana Para determinar la actividad horas. cerrado y a temperatura aleatorización. El microorganismo fue mantenido viable en el Laboratorio de Microbiología de la facultad de Medicina Humana de la UNFV hasta la realización de la Para la aplicación de los discos impregnados de aceite esencial de hierba luisa se utilizaron discos de papel Whatman Nº 1 de 6 mm de diámetro. El cultivo fue inoculado sobre la superficie del medio haciendo uso de hisopos mediante estériles.Cronquist (1988) en los laboratorios del Herbario San Marcos del Museo de Historia Natural Javier Prado de la UNMSM. (NAMRID) . ambiente. El medio de cultivo fue agar Mueller- Extracción del Aceite Esencial de Hierba Luisa El aceite esencial de hierba luisa fue extraído en el Laboratorio de Hinton. fueron divididas en dos grupos de 18 placas tabicadas. fue realizada en las mismas antimicrobiana tanto del aceite esencial de hierba luisa como de la vancomicina se hizo uso del método de disco difusión. Para ello. las placas Farmacognosia de la UNMSM por el método de destilación por arrastre de vapor de agua a partir de muestras frescas de salvia.Lima. y investigación.

S.4 ± 1. Mientras que el promedio en las 18 placas tabicadas tratadas con antimicrobiano al destruir y/o inhibir el desarrollo bacteriano.69 (70) p<0.5 ± 0.8 . Para el aceite esencial de hierba luisa se siguió la escala de Durafford para los aceites esenciales: nula (-) si fue inferior o igual a 8 mm.8 **IC= Intervalo de confianza de la diferencia RESULTADOS El diámetro promedio de los halos de El aceite esencial de hierba luisa y la vancomicina mostraron efecto inhibición en las 18 placas Petri tabicadas tratadas con aceite esencial de hierba luisa al 100 % fue 9. vancomicina de 1ug fue de 20. La creación de la base de datos fue realizada haciendo uso del software Microsoft Excel XP. = +++) si fue igual o superior a 20 mm.0001 10.8 p-valor Media de la diferencia 95% IC** 32.34 [10.4 mm con una desviación estándar de 1. si fue inferior o igual a 10 mm. sensibilidad límite (sensible = +) de 9 a 14 mm.6] Hierba Luisa *gl= Grado de libertad 36 9. Mientras que para la vancomicina se siguieron las Recolección y Análisis de Datos La recolección de datos fue realizada mediante el uso de una hoja maestra. medidas propuestas por el NCCLS: resistente.0. el cual a su vez.pasos que los discos impregnados con aceite esencial de hierba luisa. Tabla 1. sensibilidad media (muy sensible = ++) de 15 a 19 mm y sumamente sensible (S. Diferencias estadísticas según T-student “t” n Mean student ( gl )* Vancomicina 36 20.9 mm. Este efecto se evidenció mediante la formación del halo de inhibición alrededor del disco de sensibilidad en el agar cultivado con Staphylococcus aureus. consideró en función del diámetro del halo de inhibición.2 – 11. límite de 11 a 12 mm y sensible si La actividad antimicrobiana se fue igual o superior a 13 mm. El análisis estadístico realizado fue la prueba T de Student haciendo uso del software SPSS 15.5 mm con una desviación estándar de 0. permitió la confección de tablas y gráficos.

Vancomicina RESISTENTE NCCLS LÍMITE SENSIBLE Total 0 0 36 36 .mm.69 y un valor-p menor a 0.0001. con un nivel de 0. se obtuvo un valor-t de 32. según la escala de inhibición de NCCLS para la vancomicina. Al aplicar la prueba “t”-student a los promedios de los halos de De las 18 placas tabicadas cultivadas con S.05 y con 70 grados de libertad.0001) (Tabla 1). Count Tto. (Tabla 3) Tabla 2. aureus y tratadas con aceite esencial de hierba luisa se observó que todas presentaron halos de sensibilidad límite a la hierba luisa. (Tabla 2) inhibición. mostraron halos de inhibición sensible. Tabulación de NCCLS para la Vancomicina. aureus y tratadas con vancomicina se evidenció que todas tratadas con vancomicina (p<0. Count Tto Hierba Luisa SENSIBILIDAD NULA Durafford 0 36 0 0 36 SENSIBILIDAD LÍMITE SENSIBILIDAD MEDIA SUMAMENTE SENSIBLE Total Tabla 3. según la escala de inhibición de Durafford para los aceites esenciales. Tabulación de Durafford para el aceite esencial de Hierba luisa. Las placas Petri tratadas con aceite esencial de hierba luisa mostraron un diámetro promedio de los halos de inhibición menor que las placas Y de las 18 placas tabicadas cultivadas con S.

Alzamora. determinó una MIC viabilidad de los efectos benéficos. et all. entendiéndose que a una reducida concentración de aceite posee ya actividad antimicrobiana. En el estudio de Morales et al se indica la importancia del hábitat natural de la planta. así como los periodos de florecimiento y cosecha en el proceso de la (Concentración Mínima Inhibitoria) de hierba luisa de 0. talvez por las diferencias de los aceites que se obtuvieron en diferentes laboratorios. resultando ser menor a las MICs de las demás plantas estudiadas. influye embargo en el presente trabajo se empleó aceite esencial al 100% lográndose también un esperado efecto antibacteriano. . sin recolección. este resultado es mucho mayor al obtenido en este estudio. aureus. este resultado fue similar al que se obtuvo En Medicina Tradicional en el Perú: Actividad Antimicrobiana in vitro de los Aceites Esenciales Extraídos de en nuestro estudio. en Study Antimicrobial Activities On Medicinal Herbs Of Thai Food Ingredients.3 mg/dml para E. et all. en donde se empleó una batería de microorganismos controles integrada por 8 bacteria determinándose un CMI (Concentración Mínima Inhibitoria) de 0. un estudio realizado por K. notoriamente en el resultado final. A. indicó una gran actividad antimicrobiana sobre E. publicó en la Revista Cubana de Plantas Medicinales el artículo Actividad Antimicrobiana del Aceite Esencial y Crema de Algunas Plantas Aromáticas de L. Es sabido que el proceso de Hammer. y de acuerdo a ello se debe elegir el método por el cual se obtendrá dicha sustancia para su posterior estudio. aureus resaltando que este CMI fue el menor de los demás CMIs hallados para las demás considera como sumamente sensible con un halo de inhibición de 20 mm. Cabe resaltar que el modo y medio por el cual se conservará y transportará la planta y las cepas desde su recolección hasta el lugar de procesamiento. Guerra Ordoñez. la actividad antimicrobiana del aceite esencial de hierba luisa sobre S. Por su parte. M.DISCUSIÓN Respecto a las concentraciones del aceite. aureus se Cymbopogon citratus (DC) Staff.06 %. se concluye que Cymbopogon citratus posee una buena actividad antimicrobiana contra S. Preliminary Así Of también. aureus además de otras bacterias. denominado recolección de la muestra vegetal es muy importante para asegurar la Antimicrobial Activity of Essential Oils and Other Plant Extracts. Es importante conocer la estructura de la planta. et all. en especial el efecto antimicrobiano que posee la planta. de donde se extraerá la sustancia deseada.

en este estudio se comenta que diferencias genéticas investigación sensibilidad al límite. considerado como sensibilidad nula. tal resultado contrasta con los datos que se obtuvieron en esta BIBLIOGRAFIA Y REFERENCIAS 1.4 mm que según la escala del NCCLS para la vancomicina representa sensibilidad. resultado vancomicina es 20..5 mm que según la escala de Durafford para los aceites esenciales representa una sensibilidad límite. se habla del aceite esencial de hierba luisa que a una concentración 0. se determinó que el diámetro promedio de los halos de inhibición del aceite de Hierba Luisa es 9.23 mg/ml sobre E. Esta acción se atribuye al citral. resultando ser mayor cuantitativa y cualitativamente en comparación a los resultados esencial. La participación del citral ya ha sido comentado en diversos estudios en donde concluyen y afirman la bondad antimicrobiana de este compuesto. Además. Bioactivity in plants: the link between phytochemistry and medicine. aureus. K.05 % posee actividad contra E. Además. M.1 cm. determinó un CMI para el extracto fluido de hierba luisa de 15. Hostettmann. particularmente al geraniol (alfa citral) y al nerol (beta citral). 1991. 3864–3874. ya que se obtuvo un CMI de elevado valor en comparación este con las demás fue Mientras que el diámetro promedio de los halos de inhibición de la bacterias.bacterias. Hamburger. . obtenidos en nuestro estudio. Continuando con el papel que juega la concentración en la intensidad de la actividad antimicrobiana. obtener Finalmente una un entre algunas cepas de Cymbopogon ejercen una gran influencia en la actividad antibacteriana del aceite estudio titulado Efeito Inibitório de Óleos Esenciáis Sobre O Crescimento de Bactérias E Fungos se muestra que el aceite esencial de hierba luisa a una concentración de 50 % mostró un halo de inhibición de 1. sin embargo. Bacillus subtilis y Escheriachiae coli. en Medical Plants of de World. Phytochemistry 30. aureus resultando ser no muy efectivo contra esta cepa.. Antimicrobiana de Plantas que Crecen en Cuba. En Actividad CONCLUSIONES Los resultados de este estudio nos permitieron demostrar que el aceite esencial de Hierba Luisa posee una actividad antimicrobiana menor a la vancomicina contra Staphylococcus aureus.

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