Práctica No. 8 ³INFLUENCIA DEL pH URINARIO EN LA EXCRECIÓN DE FÁRMACOS´ OBJETIVO y y Determinar las variables farmacocinéticas.

Determinar la influencia del pH urinario en la excreción de fármacos a través de la cuantificación de ácido acetilsalicílico en orina. FUNDAMENTO La medición de fármacos en orina se ha venido utilizando principalmente para la investigación y la determinación de ciertos problemas renales (diagnostico). El análisis de fármacos en fluidos biológicos constituye una de las bases del desarrollo de las ciencias farmacéuticas. De acuerdo al propósito buscado en el análisis de fármacos van a variar los requerimientos que deben de cumplir los métodos analíticos a aplicar. Entre los fluidos biológicos más comúnmente utilizados se encuentra la orina y debido a que ésta es muy variable en su composición, volumen y pH, la mayoría de los métodos analíticos exigen una preparación previa de la muestra. FUNCIONES DEL RIÑON Las principales funciones del riñón son: 1. Regulación del volumen y composición del líquido corporal. 2. Equilibrio acido-básico. 3. Metabolismo y excreción de materiales no esenciales, incluso drogas. 4. Elaboración de renina, la cual participa en los mecanismos reguladores extrarrenales.

lo que se traduce como una mayor o menor facilidad para poder ser reabsorbidos y pasar a la sangre o ser excretados en la orina. Las sustancias entre 40 no se filtran.Función del glomérulo y los túbulos La filtración glomerular produce cerca de 180 L de líquido glomerular cada día. ambos procesos pueden ser activos o pasivos. es posible que las sustancias se muevan en ambas direcciones por medio de transporte tanto activo como pasivo. Cuando el mecanismo de transporte se realiza en contra de gradientes electroquímicos o de concentración. se requiere de energía metabólica y el proceso se denomina transporte activo. El transporte es pasivo cuando se debe a fuerzas físicas. específicamente cuando están unidos a proteínas plasmáticas. La filtración no requiere gasto de energía metabólica. Debemos recordar que el pH de la orina puede modificar el grado de ionización de numerosos fármacos. La membrana glomerular tiene poros de carga negativa que permiten el paso de agua y iones de carga negativa menores de unos 40 y 80 (peso molecular menor de 15 000). las sustancias que se excretan tienen un tránsito inverso. se puede afirmar que la velocidad de excreción . Las sustancias mayores de 80 filtración glomerular normal es de 125 ml por minuto. La secreción es la principal vía de eliminación para fármacos y toxinas. altera su composición por medio de transporte activo y pasivo. También. La función tubular reduce los 180 litros de líquido filtrado por día hasta cerca de un litro diario de líquido excretado. como gradientes eléctricos o de concentración. Las sustancias pueden reabsorberse o secretarse a través de los túbulos. sino que se debe a un equilibrio entre la fuerza hidrostática y oncótica. A la vista de todo lo anterior. si tienen carga neutra. La dirección del tránsito de las sustancias que se reabsorben es del túbulo al intersticio y a la sangre. El índice de (peso molecular aproximado de 40 000) pasan de manera ordinaria.

el sodio pasa de manera pasiva a favor de un gradiente de concentración hacia el ambiente deficiente de sodio de las células que recubren el túbulo contorneado proximal. El transporte pasivo de agua se conoce como multiplicación de la concentración a contracorriente. La producción de orina hipertónica requiere de la presencia y función normal de asas de Henle.renal de un fármaco es igual a la velocidad de filtración más la secreción. una actividad terapéutica parecida al AAS. el sodio se transporta activamente contra un gradiente de concentración hacia el intersticio renal. En seguida. A partir del glomérulo. Mientras mayor sea la longitud de las asas. la orina puede concentrarse más. el equilibrio de las fuerzas hidrostática y oncótica favorece la filtración del plasma a un ritmo cercano a 180 litros por día. al igual que el agua. menos la velocidad de reabsorción. La mayoría de los datos existente acerca de las características biofarmacéuticas y farmacocinéticas del ácido acetilsalicílico (AAS) se basan en datos obtenidos gracias al análisis de salicilatos totales. Para una mayor eficiencia del mecanismo de concentración de la orina en los túbulos se requiere del transporte activo de iones y del equilibrio osmótico del agua. Concentración y dilución de la orina. La constante de absorción tiene una gran variabilidad interdividual y está influenciada por las condiciones fisiológicas del tracto gastrointestinal. Las asas de Henle permiten la formación de orina hipertónica en relación con el plasma. Este hecho se debe en parte a la rápida hidrólisis del AAS y otra. En el túbulo contorneado proximal. El cloro lo sigue de manera pasiva para mantener la neutralidad eléctrica. como respuesta a los gradientes osmóticos. Se calcula . a que los distintos productos obtenidos por metabolización del AAS tienen generalmente.

EQUIPO No. v. 3: Estudiará la excreción de aspirina en un pH normal. EQUIPO No. antes de iniciar el estudio. Criterios de inclusión. mismo que se le dará a leer y explicará antes de iniciarse la práctica. y procederá de acuerdo al protocolo experimental. 1: Estudiará la excreción de aspirina en un pH urinario alcalino. Sexo indistinto. iv. Jóvenes sanos de 18 a 30 años de edad.que aproximadamente un 30% de la dosis de AAS administrado por vía oral se metaboliza a ácido salicílico (AS) antes de su distribución sistémica. Dentro del mismo equipo se nombrará un voluntario. Estar sanos. B) Criterios de inclusión y/o exclusión.O. . iii. i. Firmar carta de consentimiento informado. ii. PROCEDIMIENTO: A) El estudio de realizará en tres equipos: EQUIPO No. el cual tomara una dosis de 500 mg de ácido acetilsalicílico V. La excreción urinaria de AS sin metabolizar depende del pH y puede oscilar entre un 2 y un 30% aunque existe una gran variabilidad interdividual. 2: Estudiará la excreción de aspirina en un pH urinario ácido. Respetar el protocolo experimental.

5 h antes de la administración del medicamento. Ingerir 250 mL de agua 1. 6. 3 (control): tomar 250 mL de agua natural. Haber consumido. b. PROTOCOLO EXPERIMENTAL 1. 3. Equipo No. 2 (orina ácida): tomar 2 g de ácido ascórbico. v. Antes de ingerir el medicamento vaciar la vejiga completamente y guardar una muestra de 10 mL en un tubo de ensaye con tapón de rosca. Padecer algún tipo de enfermedad crónica.Criterios de exclusión. i. Equipo No. hepático o gastrointestinal. algún fármaco terapéutico. Haber consumido bebidas alcohólicas al menos 3 días antes y durante el experimento. iv. Padecer alguna reacción alérgica o de hipersensibilidad al fármaco en estudio. Tomar el ph de la orina. 2. 4. c. 1 (orina alcalina): tomar 2 g de bicarbonato de sodio. Padecer enfermedades de tipo renal. iii. Esta muestra corresponde al tiempo cero y se utilizara como blanco. social o de abuso. Tomar una tableta de ácido acetilsalicílico de 500 mg con 250 mL de agua natural. A las 7:00 am tomar las siguiente solución: a. al menos una semana antes y durante el experimento. Los voluntarios permanecerán en ayuno a partir de las 22 h del día anterior al estudio. anotar el valor en la hoja correspondiente y desechar la orina. . 5. ii. Anotar en la hoja correspondiente la hora exacta de la toma del medicamento. Llevar a cabo la micción en un vaso de precipitado. Equipo No. El día del experimento cada voluntario vaciará completamente la vejiga a las 5:30 am.

agua con saborizantes. Cuantificar cada una de las muestras siguiendo el procedimiento descrito más adelante. lechuga y mayonesa al gusto. Durante el experimento no consumir ninguna otra clase de líquido (bebidas carbonatas. Durante este periodo orinar cada vez que el cuerpo lo requiera. 11. el que se diluirá 1:3 con agua (esta orina servirá para preparar la curva patrón del estudio).7. . Asegurarse de cada vez de vaciar completamente la vejiga. Anotar volumen de orina. Después de las 6 horas consumir agua al gusto. las primeras 6 horas postadministración. Tomar el pH de la orina. elaborados con una rebanada de jamón y una de queso. No se deberá desechar ninguna porción de orina y en cada intervalo de muestreo grande se recolectará toda la orina de ese intervalo en un solo recipiente. NOTA: Los alumnos deberán guardar todas las muestras ³cero´ y. Guardar una licuota de 10 mL y desechar el resto. 10.). Almacenar en el congelador cada muestra hasta el momento de usarse. preparando a la vez un blanco de orina y una curva patrón en orina a las mismas condiciones que las muestras. Incluir una bebida de té helado. Asegurarse de tomar 250 mL de agua cada hora. agua de frutas. A las 9:00 am consumir un desayuno. 8. 12. 9. una rodaja de tomate y. Depositar la orina en un vaso de precipitado y medir el volumen total en una probeta graduada. pH urinario y la hora de micción en la hoja correspondiente. el cual consistirá de 2 sándwiches. se recolectará en un solo reciente la orina blanco de todos los voluntarios para formar un ³pool´ de orina. Además una manzana de tamaño mediano. etc. A las 14:00 consumir una comida al gusto. máximo de 300 mL. Colectar la orina durante 8 horas (última orina colectada a las 3:00 pm) post-administración del fármaco.

MATERIAL y y y y y y y 1 matraz volumétrico de 100 mL 1 matraz volumétrico de 50 mL 1 matraz volumétrico de 25 mL 3 pipetas volumétricas de 1 mL 1 pipeta volumétrica de 5 mL 12 tubos de ensaye de 13 x 120 mm 1 perilla EQUIPO y y y y Balanza analítica Espectrofotómetro UV ± visible Centrifuga Agitador vortex. REACTIVOS y y y y Salicilato de sodio Nitrato férrico nonahidratado Cloruro mercúrico Ácido clorhídrico 1N MUESTRA BIOLÓGICA y Orina .

Adicionar un poco de agua destilada para disolver. disolver totalmente en 20 mL de orina libre de medicamentos (diluida 1:1 con agua) y llevar hasta el aforo con la misma orina. llevar al aforo con agua. añadir 12 mL de una solución 1 N de ácido clorhídrico y diluir hasta el aforo con agua destilada. colocarlos en un matraz volumétrico de 100 mL.SOLUCIONES Reactivo para desarrollar color (reactivo de Trinder): Preparación: Pesar con exactitud y por separado 4 g de nitrato férrico nonahidratado y 4 g de cloruro mercúrico. Solución patrón de referencia de salicilato de sodio a concentración de 100 µg/mL: Preparación: Pesar con exactitud 50 mg de salicilato de sodio y depositarlos en un matraz volumétrico de 50 mL.  Método analítico para cuantificar salicilatos en orina 1 mL de muestra de orina . De esta solución tomar con exactitud una alícuota de 2.5 mL y depositar en un matraz volumétrico de 25 mL.

4 0.0.1693 4084. Resultados de muestreo experimental alcalino Numero Muestra Hora pH Orina Volumen Excretado (mL) No.2 0 0 -0. de micción Absorbancia (540 nm) Concentracion de salicilatos µg/ml Total de salicilatos en la muestra µg/ml Total de salicilatos total µg/ml 1 2 3 0 7-8 am 8-9 am 6 6 9 19 29 42 1 1 1 1.001x .4 1. Curva patrón Concentración (µg/mL) 50 100 250 500 1000 Intercepto (b) Pendiente (m) Correlación (r) Absorbancia ( 540 nm) -0.8 0.90566 118462.3001 -0.Resultados: Tabla I.999 Grafica de la curva patrón Tabla II.849 .0318 0.00139472 0.1053335 0.6 0.999540506 Absorbancia ( 540nm) 1.0282 0.04403 154435.2990 1.105 R² = 0.2552 0.5644 1.2 500 1000 1500 Absorbancia ( 540nm) Linear (Absorbancia ( 540nm)) y = 0.264 3677.2 1 0.

0745 0.67 3 198166.4782 0.6415 861161.6792 Tabla.245 2676.2956 1.01 3 141283.2872 903.0943 0.11321 0.23899 0.905 7 115528.4 5 6 7 8 9 9-10 am 1011 11am 12 12am 13 12am 14 14am 15 am 8 8 8 8 8 8 127 49 303 428 326 57 1 1 1 1 1 1 0.2872 903.33 3 83089.4992 1569.497 234.03 8 225786.8164 2567.4669 1468.10063 131128.880503 0.0133 0.503145 50188.0 203716.144654 .8238994 12672.01 9 Tabla .30 2 1359015.77358 190979.16 4 182322.5082 1598.0797 3395.resultados del muestreo experimental control NUMERO DE MUESTR A 1 2 HOR A Ph orin a Volume n extraido (ml) 116 92 Absorbancia s Concentració n de salicilatos µg/ml Total de Total de salicilatos salicilatos en la total µg/ml muestra µg/ml 106333.40252 0.27673 76374.144654 0.308 2 7:55 8:40 5 6 0.540881 126919.2915 916.8510 0.3671 1154.3151 990.321 296.931 41.28302 0.2800 1503.98 9 1 243727.2138 880. Resultados del muestreo experimental acido NUMERO DE MUESTR A 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 HOR A Ph orin a Volume n extraido (ml) 215 65 42 45 60 166 124 250 184 90 Absorbancia s Concentració n de salicilatos µg/ml Total de salicilatos en la muestra µg/ml Total de salicilatos total µg/ml 5:35 7 7:49 8:53 9:51 10:50 11:40 12:57 1:54 2:55 7 6 6 6 6 6 6 6 6 6 0.666667 0.81132 48484.

386364 497. Concentración del fármaco a diferentes tiempos (acido) Muestra 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 hora 5:35 7 7:49 8:53 9:51 10:50 11:40 12:57 1:54 2:55 Concentración (µg/mL) del fármaco 359.659875 13.33962 0.37107 120339.641 5 104433.347962 308.886 8 119937.456113 833.3785266 72.53135 Tabla.3129 983.3168 996.62 3 99622.679467 489.10 7 830293.226415 0.9819749 274.619906 799.3189 1002.96 2 108235. Concentración del fármaco a diferentes tiempos (alcalino) Muestra 1 2 3 4 5 6 7 8 hora 7-8 am 8-9 am 9-10 am 10-11 am 11-12 am 12-13 am 12-14 am 14-15 am Concentración (µg/mL) del fármaco 1145.3814 1199.132075 0.844828 281.69984 457.962264 0.0289969 92.294671 1272.028213 .3120 981.83019 0.47414 468.76489 1057.84 9 88301.71 1 Tabla.3 4 5 6 7 8 9:50 11 12:20 13:00 13:50 15:10 6 7 7 7 7 7 120 100 100 110 90 100 0.3321 1044.

-menciona tres fármacos básicos y tres ácidos con los cuales se favorezca su excreción al acidificar o alcalinizar la orina. así como observar la influencia del pH en la excreción urinaria del fármaco. . a fin de incrementar la excreción de bases como estricnina.347962 312. tapón trometamina (THAM) e inhibidores de la anhidrasa carbonica (acetazolamida). Conclusión: Se cumplió el objetivo de calcula los valores farmacocinéticas. lactato de sodio.Tabla. Los alcalinizantes comprenden: bicarbonato de sodio. Lo cual nos dice que esto se ve afectado en la vida media del fármaco. Discusión La capacidad de interferir en la excreción del fármaco según el pH se vio interferido por la capacidad de una orina ácida. que bloquea la excreción renal de bicarbonato de sodio.642633 373. anfetaminas y fenticinas son el acido ascórbico y cloruro de amonio.560345 281.402038 310. básico y a pH normal lo cual se observo que la cantidad de excreción se aumenta al tener un pH ácido.628527 CUESTIONARIO COMPLEMENTARIO 1.333072 306. Concentración del fármaco a diferentes tiempos (neutro) Muestra 1 2 3 4 5 6 7 8 hora 7:55 8:40 9:50 11 12:20 13:00 13:50 15:10 Concentración (µg/mL) del fármaco 285.344828 325. Los fármacos utilizados con mayor frecuencia para acidificar la orina.-¿Qué otro compuesto se puede utiliza para acidificar la orina? Cloruro de amonio 2.524295 305.