Biología molecular.

Aparato de Golgi

Traducido del portugués por: Ps. Jaime Botello Valle. Fuente: Internet
 Transporte vesicular
• Las proteínas recién sintetizadas entran en la ruta biosintética
secretora de RE;
•Estas pasan por compartimentos donde son modificadas.

• Vesículas que transportan una carga

determinada salen de un compartimento
dador y se fusionan a un compartimento
receptor.
 Aparato de Golgi
• Es uno de los principales
sitios de síntesis de
carbohidratos, como una
estación de clasificación y
de destinación para
productos de RE.

• Gran proporción de los

carbohidratos que son
producidos en Golgi son
conectados como cadenas
laterales de oligosacáridos
en muchas proteínas y
lípidos que el RE envía.
•El lúmen de cada compartimento es topológicamente
equivalente al exterior de la célula y sus compartimentos
estaciones todas en constante comunicación.
•
•El Aparato de Golgi es un organelo con membrana, formada por varios
compartimentos ordenados en forma de líneas enfiladas.
•Cada fila de Golgi está compuesta de 2 faces distintas: una de entrada
(Cis) y otra de salida (Trans). Ambas estaciones conectadas a
compartimentos especiales (Cis-Golgi-Network y Trans-Golgi-Network),
que están compuestos por una red de estruturas tubulares en forma de
cisterna.
• 1 – La porción cis Golgi Network=
volteada hacia el RE rugoso = recibe
vesículas.

• 2 – Porción media = entre cis/trans = es

procesamiento.

• 3 – Porción trans Golgi Network =

volteada hacia la membrana plasmática
= envía vesículas.

• La comunicación entre
compartimentos es por medio de
vesículas de transferencia.
•Es en Golgi que ocurre la síntesis de carbohidratos y es
una estación de separación y distribución de los
productos del RE.

• Muchos carbohidratos celulares son sintetizados en

Golgi: Pectina y Hemicelulosa de la pared celular de
células vegetales y glicosaminoglicanas en la matríz
extracelular de las células animales.

• Una gran proporción de los carbohidratos que el

aparato de Golgi produce están ligadas a oligosacáridos
de proteínas y lípidos provenientes del RE.

• Ciertos oligosacárideos sirven como marcas para dirigir

el rumbo específico de proteínas a diferentes destinos.
• El Aparato de Golgi es abundante
en células que están especializadas
en secreción. Ejemplo: las células
calciformes (globet) del intestino,
que producen gran cantidad de
moco rico en polisacárido en la luz
del intestino. En esas células,
grandes vesículas son encontradas
en la parte del Trans-Golgi-
Network.
• El transporte de vesículas del RE hacia Golgi se da a
partir de vesículas, llamadas elementos de transición del
RE, que están casi totalmente libres de ribosomas y que se
funden em la membrana del Cis-Golgi-Network,
transferiendo proteínas y lípidos sintetizados en el RE.
 El tráfico entre el RE y el Aparato de
Golgi es bidireccional.

RE Golgi
-Mantener cantidades extras de membranas en cada compartimento.
• El tráfico de retorno tiene dos funciones principales:
-Recuperar proteínas del compartimento dador que son necesarias para su normal
funcionamiento.
•Las proteínas residentes del RE son selectivamente
recolocadas o redireccionadas para el RE a partir del Cis-
Golgi-Network. KDEL (Lisina, ácido aspártico, ácido
Glutámico y Leucina) es la señal de retención del RE.
• Las proteínas del Golgi retornan para el RE cuando la
célula es tratada con la droga Brefeldina A que promueve
la ruptura de Golgi.
Tratada con
Normal Manosidasa Brefeldina A
• La salida del RE puede ser
considerada como punto de control
cualitativo de proteínas. Si la
conformación de una proteína o
montaje de las sub-unidades
protéicas se da por completada en
RE, la proteína es degradada.
• Dos clases de oligosacáridos N-ligandos están
asociados a glicoproteínas de mamíferos: Oligosacáridos
ricos en manose y oligosacárdos complejos.
Las cadenas de oligosacárdeos son
procesadas en Golgi.
• Las cisternas de Síntesis de proteínas
Golgi están
organizadas como
una serie de
compartimentos de
procesamiento:
•Cis= contínuo con
el Cis-Golgi-
Network;
•Medial= cisterna
central;
•Trans= contínuo
con el Trans-Golgi-
Network.
•La diferencia funcional entre las subdivisiones de Golgi
Cis, Medial y Trans fue descubierta, a través de la
localización, en regiones distintas, de enzimas responsables
del procesamento de los oligosacárideos N-ligandos.

Coloreado con ósmio

No coloreado

Identificación de enzimas
• Muchas proteínas son modificadas en la adición de
oligosacáridos en grupos OH de cadenas laterales de
serina y treonina: Estos oligosacáridos son denominados
de O-ligandos.

• Los carbohidratos de
la membrana celular
están volteados hacia
el lado de la
membrana que es
topológicamente
equivalente al lado de
afuera de la célula.
 Glicolización

• La mayoría de las funciones ahorita son

desconocidas.

• Cambiar una glicoproteína más resistente a

otra de proteasas.

• Direccionar el transporte de proteínas.

• Regulación.
 Lisosomas
• Son organelos citoplasmáticos, donde ocurre
la mayoría de la digestión intracelular.
• Existen más de 40 tipos de enzimas
hidrolíticas ácidas (pH=5.0).

• La membrana de la
lisosoma es rica en
glicoproteínas y proteínas
de transporte de los
productos de degradación.
• Función:

– digestión intracelular.
• Separación de restos intra y extracelulares,
destrucción de microorganismos (fagocitados) y
producción de nutrientes para la célula.

• Qué es digerido?
– Material de endocitosis.
– Organelos y moléculas (reciclaje).
 Estructura
• Esféricas y de tamaño variable.
Formadas por una bicapa
lipídica.
• Identificación = fosfatasa
ácida.

• Pueden acumular material no digerido 

cuerrpo residual.

Fase interna  revestimiento de carbohidratos

 protección contra la acción del contenido
lisosomal.
 Formación de los lisosomas
• A partir del Aparato de Golgi.
• 1 – A partir de la face trans  vesículas
con enzimas pre-lisosómicas.
• 2 - Endosomas  formación de pH ácido 
bombas de protones (protón-ATPasas):
– Resultados:
• pH abajo de 6;
• Disociación de las pre-enzimas de los receptores.
Lisosomas:
 Visualización histoquímica de los
lisosomas. Precipitado de fosfato de
chumbo para localizar la fostatasa ácida.
pH de lisosomas y
endosomas

V= pH 5.0 Lis.,
A e Ve= pH liso.
5.5 y endo 6.5.
Proteínas son
marcadas con
substancias
fluorescentes y
fagocitadas.
• Vacuolos de plantas y hongos son lisosomas
versátiles; de 30 a 90% del vol. Celular.
• Varias funciones: Almacenamiento de nutrientes;
productos de excreción; compartimento de
degradación.
• Los materiales son transportados hacia los lisosomas
por diversos caminos.
• Tres caminos de degradación se encuentran en los
lisosomas: 1. Endocitosis; 2. Autofagia y: 3. Fagocitosis.
•Los lisosomas son centrales de encuentro.
 Autofagia
• Una mitocondria poseé media vida de 10 días.

•El proceso de autofagia

comienza con el
empaquetamiento de los
organelos por
membranas de RE
creando una
autofagosomía que se
funde con los lisosomas.
Cómo las proteínas lisosómicas
son reconocidas en el Aparato
de Golgi?
Enzimas lisosómicas son separadas de otras proteínas en Trans-Golgi-
Network por la proteína receptora ligada a membrana que reconoce
manose-6-fosfato (que fue introducida en cis-Golgi-Network).
Receptores de M-6-F em la membrana del Trans-Golgi-Network forman
vesículas especiales de transporte cubiertas por clatrina. El receptor se
liga a M-6-P en pH=7 en Trans-Golgi-Network y se suelta a pH= 6 en el
endosoma tardío.
Síntesis del marcador de manose-
6-fosfato em la hidrolasa lisosomal
• Una señal derivada de la estructura
tridimencional de la proteína es necesaria para el
reconocimiento de la N-acetil-glicosamina
fosfotransferasa.
• Defectos en la enzima N-acetil-glicosamina
fosfotransferasa forma almacenes de depósito.
 Síntesis de las enzimas lisosomales
• 1 - Síntesis a partir de los ribosomas  formación de pre-
enzima;
• 2 – En el retículo endoplasmático  glicosilación de la pre-
enzima;
– Adición de azúcar en el residuo de asparagina (N-ligando).
• 3 – Complexo de Golgi.
– En la red cis  adición de manose-6-P em la pre-enzima.
– En la red trans  ligazón de los receptores.
• 4 – Endosomas  pH ácido  desligamiento de los
receptores.
– Activación de las enzimas.
• Después de la liberación de las enzimas los receptores retornan a la red
Trans de Golgi y parecen tener un peptídeo señal KDEL;
 Fagocitosis
• Ingestión de microorganismos o debris
celulares via fagosomas > o = a 250 nm en
diámetro.

Fagocitosis de hematíes
alteradas por un macrófago.
• Células fagocíticas especiales denominadas
fagocitos profesionales (macrófagos y neutrófilos)
pueden ingerir partículas grandes.

• Los macrófagos combaten la infección y remueven

células dañadas (billones de hematíes viejos son
removidos por día).

• Un macrófago ingiere
25% de su volumen en 1
hora.

• En los protozoarios la
fagocitosis es una forma
de alimentación.
 Pinocitosis
• Ingestión de fluidos y solutos vía pequeñas
vesículas < ou = a 150 nm en diámetro.
• La célula realiza pinocitosis constantemente.
• Ciclo endocítico-exocítico.
• Las vesículas pinocíticas se forman a partir de
fosas cubiertas por una proteína denominada
CLATRINA en la membrana plasmática.
Estructura de una capa de clatrina
Formados por cadenas
Triquélions polipeptídicas: 3 grandes y 3
pequeñas
Formación de las vesículas
cubiertas por clatrina
Peptídeo-señal para endocitosis
Formación de vesículas de cubiertas
por clatrina
• Por cada 2500 vesículas cubiertas por clatrina dejan
a MP de fibroblastos en cultivo a cada minuto.
• La endocitosis puede ser mediada por receptor (ej:
absorción de colesterol). La mayoría del colesterol en
la sangre está ligado a proteína en forma de partículas
conocidas como "Low-Density-Lipoproteins" o LDL.
Cuando la célula necesita de colesterol el receptor es
sintetizado y enviado a MP.
• Más de 25 tipos diferentes de receptores participan
en la endocitosis mediada por receptor.
• Defectos en la entrada de LDL
provocan arteriosclerosis.
 Revestimiento Vesicular
• Existen 3 tipos de vesículas cubiertas
bien caracterizadas, que difieren en la
capa protéica que poseen: vesículas
cubiertas por clatrina, cubiertas por
COPI- y cubiertas por COPII.
• Cubiertas por clatrina (Transporte selectivo
de receptores transmembrana, receptor
M6P em la membrana del TransGolgi
Network, receptor de LDL da MP).
Proteínas que revisten vesículas
• Transporte selectivo por vesículas
cubiertas por clatrina. Las proteínas
adaptinas se ligan a receptores de carga y a
las clatrinas.
Dinamina
2. Vesículas cubiertas por COPI- y COPII median,
comúnmente, en el transporte del RE y
Golgi.
 Modelo de la formación de la
vesícula cubierta con coatomer
(COPII)
Acción de la
brefeldina A
 GTPasas Controlan el montaje de
la capa protéica de las vesículas.
Ação da
brefeldina A
• Las partículas endocitadas ligadas a
receptores pueden tener destinos diferentes:

1 – Reciclados y devueltos al dominio de la MP

de donde vienen.
2 –Seguir hacia un dominio diferente de la MP
mediado por un proceso llamado de
TRANSCITOSIS.
3–Seguir hacia el lisosoma y ahí serán
degradados.
• Las proteínas receptoras pueden tener 3 destinos diferentes en la
endocitosis:
1) Retornan p/ MP ej: Receptor de LDL; Transferina
2) lisosomas.
3)Nuevo dominio en la MP (transcitosis) ej: EGF (factor de crecimento
epidermal).
• Camino endocítico
de la MP hacia el
lisosoma.
• Dos compartimientos endososómicos inician en
células epiteliales.
Exocitosis
Secreción constitutiva y regulada
• Tres clases de proteínas son separadas en
Golgi:

– Destinadas a los lisosomas: son marcadas con M6P.

– Proteínas con secreción regulada: marcadas por

señales análogas al de MP.

– Mayoría de las otras proteínas: son transportadas

hacia la superficie celular de la ruta secretora
constitutiva no-seletiva (ruta padrón).
El lugar más conocido de direccionamiento de
substancias dentro de la célula es en la red
Trans de Golgi.
Formación de vesículas secretoras Partícula de Ac-ouro
brotando del trans-golgi-network ligada a clatrina
(células b del páncreas). (vesícula inmadura con
pro-insulina).

Vesícula secretora
madura (sin ouro).

Exocitosis de vesículas secretoras Insulina

 •Las proteínas son, muchas veces, procesadas
proteolíticamente durante la formación de vesículas
secretoras.
•Ej: pro-hormona pro-opiocortina secretada por la
glándula pituitaria (hipófisis).
• Vesículas secretoras esperan perto de las MP antes
de ser indicadas a liberar sus contenidos.

Producido:cél. lóbulo
anterior
Cél. Lóbulo intern.
(pituitaria).
• La exocitosis regulada es una respuesta local de la MP está en el
citoplasma adyacente (una senal para la secreción es, en la
mayoría de las veces, un mensajero químico (p.ej., una hormona que
se liga a la membrana plasmática); en el caso del axón, es una señal
eléctrica que abre canales iónicos de Ca2+.
• Los componentes de la membrana de vesículas secretoras son
reciclados.

•Mastocito de rato con vesículas

de histamina.

Esfera
Las vesículas sinápticas se forman a partir de
endosomas. Muchas neuronas “disparan” más de
1000x por segundo, liberando vesículas sinápticas
cada vez.
Células polarizadas dirigen proteínas de la red Trans
de Golgi hacia el dominio apropriado en la membrana
(Transcitosis).

Junções compactas
• Mecanismos moleculares del transporte
vesicular y mantenimiento de la diversidad de
compartimientos celulares.
• Cómo la célula mantiene la diversidad de los
compartimientos con los intercambios
masivos de substancias entre ellas?
1. Por marcadores en las membranas.
• El papel postulado de las proteínas
SNAREs en la conducción del transporte
vesicular (adaptadores de fusión vesicular)

Proteínas SNARE en el SN son algunas de las toxinas

del botulismo y del tétano.
Disociación del SNARE
• Papel postulado de las proteínas Rab.
Modelo para el
mecanismo de fusión
de vesículas mediado
por proteínas.
Entrada del virus HIV en linfocitos:
Modelo para la fusión de membranas
mediado por una proteína viral:
Fusión de células de insecto infectadas
por un baculovirus recombinante
expresando el gen del virus de la Fiebre
Amarilla.

A B

Por su atención: gracias. Ps. Jaime Botello.