Universidade Federal de Alagoas - UFAL Centro de Tecnologia - CTEC Curso de Engenharia Química

MÁGDA CORREIA DOS SANTOS

EXTRAÇÃO DE DNA

DISCIPLINA: LABORATÓRIO DE ENGENHARIA QUÍMICA II PROFESSORA: ANA KARLA DE SOUZA ABUD

MACEIÓ / 2011 0

apresentado à disciplina Laboratório de Engenharia Química II. 15 de Março de 2011 1 .UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS – UFAL CENTRO DE TECNOLOGIA . Orientadora: Ana Karla de Souza Abud Maceió.CTEC MÁGDA CORREIA DOS SANTOS Extração de DNA Relatório descritivo sobre o experimento: Extração de DNA.

e os resultados foram satisfatórios para o objetivo proposto pelo experimento. 2 . quantidade. sendo observado a formação de um emaranhado branco de filamentos de DNA da ameixa. e idade da amostra. Na prática realizada com o objetivo de extrair o DNA da ameixa. criminalística. foi realizada uma extração com objetos e reagentes de uso cotidiano e que podem ser encontrados em qualquer cozinha.RESUMO O presente relatório descreve o experimento de extração de material genético (DNA) da ameixa. O DNA (ácido desoxirribonucléico) é uma molécula orgânica que contêm a “informação” que instrui o desenvolvimento e funcionamento de todos os seres vivos. agricultura. Existem inúmeras técnicas de extração de DNA e a escolha dessa técnica depende da fonte. entre outras. A extração do material genético possui inúmeras aplicações em áreas como medicina.

.........................................................................................................................................................SUMÁRIO FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA...............................................11 3 .............................10 BIBLIOGRAFIA...........................................................................................................................................................................................................................9 CONCLUSÃO.........................................................................................................4 OBJETIVOS............................8 RESULTADOS E DISCUSSÕES.7 MATERIAIS E MÉTODOS.................................................................

guanina. No caso de organismos eucariotos (aqueles que possuem núcleo individualizado por ser envolto por uma membrana. fungos e bactérias. para conseguir isolá-lo dos demais componentes. Separação do DNA dos demais componentes celulares. Para comprovar que realmente existe DNA em todas as células vias. por exemplo. nas quais o DNA fica solto dentro da célula. Existem apenas esses quatro tipos de bases no DNA: adenina e guanina pertencem ao grupo das purinas. citosina ou timina e um grupo fosfato. outros animais e vegetais). Para que haja a ruptura da parede celular. frutas. impedindo que elas precipitem com o DNA. Com exceção das bactérias. utiliza-se o álcool. saliva. pois o 4 . grande parte do DNA está justamente dentro do núcleo das células. Finalmente. A adição de sal ajuda a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído. Para o desmembramento. temos que tentar retirá-lo e visualizá-lo. cujas seqüências contêm o código para a ordenação específica de aminoácidos de uma cadeia polipeptídica que formarão as proteínas. seres humanos. enquanto que timina e citosina são do grupo das pirimidinas. expondo o material genético das células. desnaturando as moléculas de DNA. etc. em muitos outros seres vivos ele fica acomodado dentro de um compartimento existente. como amostras de sangue. Desmembramento dos cromossomos em seus componentes básicos: DNA e proteínas.. tecidos. realiza-se o corte ou esmagamento do material. como. e consistem de: Ruptura (física e química) das membranas celulares para liberação do material genético. uma base que pode ser adenina. incluindo plantas. as moléculas de detergente desestruturam as moléculas de lipídios presentes nas membranas celulares e o aquecimento favorece a reação. Protocolos similares são usados nas extrações de DNA de várias fontes. Esta informação é copiada ou transcrita nas moléculas de RNA. As moléculas de DNA são encontradas dentro das células de todos os seres vivos. sendo que cada cadeia simples de DNA é formada por uma molécula do açúcar desoxirribose.FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA O DNA é o responsável pelo armazenamento e transmissão da informação genética que é expressa pela produção das variadas proteínas que compõem um ser vivo. Uma molécula de DNA é constituída por duas cadeias que se organizam em uma estrutura de dupla-hélice. denominado núcleo.

A estrutura de dupla-hélice só pode ser enxergada de modo indireto e com o auxílio de aparelhos sofisticados. menos solúvel o DNA vai estar. Milhares de fitas emaranhadas de DNA podem ser observadas em um experimento de extração de material genético de plantas ou frutas. 5 . Por isso é tão importante que o etanol seja mantido no freezer ou em um banho de gelo até o momento do experimento.DNA é insolúvel nele e tem menor densidade que os outros constituintes celulares. Quanto mais gelado estiver o álcool.

6 .OBJETIVOS Verificar como acontece a extração do DNA da ameixa e identificar a função de cada um dos reagentes utilizados no procedimento de extração.

utilizando funil e gaze. Álcool gelado e Álcool a temperatura ambiente. 4. Sal. Colocou-se cerca de 5 mL de água em um copo. Fruta (Ameixa). Adicionou-se 1/2 colher (chá) de sal e 1/2 colher (chá) de detergente neutro. Bastão de vidro. Água filtrada. 1 Colher. 3. 7 . Pipetador. 2 Tubos de ensaio. b) MÉTODOS: Para a extração de DNA da ameixa: 1. Pipetas de 3mL. Estante para tubos de ensaio. Adicionou-se ameixa picada em pedaços bem pequenos à solução anterior. 2.MATERIAIS E MÉTODOS a) MATERIAIS: 2 Copos. Transferiu-se a amostra para um saco do tipo ziploc e amassou-se a amostra. Filtrou-se a solução obtida em outro copo. Misturou-se bem com uma colher até dissolver completamente. Detergente. durante 5 minutos. Saco plástico do tipo ziploc.

Colocou-se 3 mL da solução obtida em cada um dos 2 tubos de ensaio.5. 8 . adicionando-se 5 mL de álcool gelado em tubo de ensaio e álcool a temperatura ambiente no outro tubo de ensaio.

ficou mais próximo ao fundo do tubo de ensaio. e. ficou mais próximo à superfície do tubo de ensaio. pois a formação do emaranhado mais próximo à superfície do tubo de ensaio indica que o DNA está mais 9 .RESULTADOS E DISCUSSÕES O DNA da ameixa foi extraído e pôde ser visualizado conforme as figuras 1 e 2. Figura 1 . Figura 2 . no caso do isolamento com álcool gelado. Isto evidencia que o DNA é. no caso do isolamento com álcool à temperatura ambiente.Tubo contendo DNA extraído com álcool à temperatura ambiente. de fato.Tubo contendo DNA extraído com álcool gelado. Cumpriram-se as três etapas do método para extração de DNA de células de ameixa e o resultado obtido foi à formação de um emaranhado branco de filamentos que. menos solúvel no álcool gelado.

O que se observou a olho nu foram milhares de fitas de DNA juntas. evitando que as mesmas precipitem junto com o DNA. que é menos denso. permitindo que estas se condensem quando em contato com uma solução alcoólica. incluindo as proteínas e o DNA. As moléculas de DNA possuem carga negativa devido à presença do grupo fosfato. logo. o conteúdo das células de ameixa. os quais são mais densos e carregam o DNA para o fundo quando associados a ele. Em outras palavras. os lipídeos formam complexos com o detergente e precipitam. O álcool. Entretanto. por sua vez. pois o DNA é praticamente insolúvel no álcool. O sal também atua fornecendo íons de carga positiva que neutralizam a carga negativa das moléculas de DNA. atua na separação do DNA.separado dos demais componentes celulares. O procedimento experimental seguido é relativamente simples e permite a visualização clara do emaranhado de filamentos de DNA que se forma. O detergente é aplicado com a finalidade de desconstruir as moléculas de lipídeos que constituem as membranas celulares e. é liberado. O sal ajuda a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído. desta forma. a estrutura de dupla-hélice só pode ser visualizada de modo indireto e através de aparelhos sofisticados. A utilidade prática de cada um dos reagentes utilizados no experimento foi identificada. as moléculas individuais de DNA tendem a se repelir. dos demais componentes celulares. 10 .

CONCLUSÃO O resultado obtido evidenciou que o DNA das células de ameixa é menos solúvel no álcool gelado do que no álcool à temperatura ambiente. Existem diversos métodos de extração de DNA e pudemos realizar um desses métodos de forma simples e satisfatória com materiais que podem ser encontrados em qualquer cozinha. 11 . O álcool à temperatura ambiente não separa o DNA dos outros componentes celulares mais densos tão eficientemente quanto o álcool gelado. O emaranhado branco de filamento de DNA que se forma fica mais próximo à superfície do tubo de ensaio no caso da extração com álcool gelado.

Disponível em: <http://www.sc.br/difusao/pdf/extracaodednademorango.ufpb. A. Acesso em: 03 de Março de 2010 às 21h30min. Extração de DNA de Morangos. 12 .sc.pdf>. Notas de Aula de Laboratório de Engenharia Química II. S. Acesso em 03 de Março de 2011 às 21h15min.pdf>.usp.bioinfo.br/licenciatura/2003/siteprojeto/2003/2_extracao_DNA_cebola_com_pl ano. Disponível em: <http://educar.br/licenciatura/2003/siteprojeto/2003/2_extracao_DNA_cebola_com_pl ano. Extração do DNA do morango. [3] BIOINFO. Disponível em: <http://educar. Universidade Federal de Alagoas. [4] ABUD. Maceió-AL. [2] CIENCIAMAO. Extração do DNA da cebola.BIBLIOGRAFIA [1] EDUCAR.usp. 2011.pdf>. K. Acesso em 03 de Março de 2011 às 21h.

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