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Frotis de sangre perifrica (FSP) 3. 1.

Fundamento El examen morfolgico de las clulas sanguneas con el microscopio ptico requiere la preparacin de un frotis de sangre bien extendido y teido, ya que la precisin de la evaluacin depende, en parte, de su calidad. El examen minucioso de un frotis de sangre perifrica se puede usar: 1) Como instrumento de deteccin para identificar una enfermedad. 2) Para diagnstico definitivo de ciertos trastornos hemticos y no hemticos. 3) Para vigilar la respuesta del paciente al tratamiento. Este examen incluye: una estimacin de la cantidad de plaquetas y leucocitos; apreciacin morfolgica de eritrocitos, leucocitos y plaquetas, as como su distribucin; observacin de la presencia de clulas anormales, y un conteo diferencial de 100 leucocitos, el cual se debe reportar en valores relativos y absolutos. El FSP se debe realizar de forma obligatoria a todos los pacientes del servicio de pediatra, neonatologa, hematologa, terapia intensiva y recin nacidos de ginecologa; al resto de los pacientes, de acuerdo a su diagnstico, al resultado de su Biometra Hematica o si el mdico as lo requiere. 3. 2. Muestra. Criterios de Inclusin Obtenida por puncin venosa o arterial. Ver manual de toma de muestras sanguneas. Recolectada en tubo vacuntainer o microtainer lila, con K 2EDTA como anticoagulante. No debe estar coagulada, ni contener fibrinas. 3. 3. Muestra. Criterios de Exclusin Aquellas que no cumplan los criterios de inclusin. 3. 4. Material y reactivos Microscopio ptico Contador de clulas Portaobjetos nuevos y limpios Tubos capilares azules Extensores limpios Gasas Lpiz Etanol al 20 Aceite de inmersin Guantes desechables Contenedor rgido rojo de RPBI

3. 5. Procedimiento Con ayuda de un tubo capilar, a una distancia de 1 cm del borde de un portaobjetos y en el centro, colocar una gota aprox. 5-7 L de sangre. Desechar el tubo capilar en el contenedor rgido rojo de RPBI. Colocar un extensor por delante de la gota de sangre, formando un ngulo de 45 modificar segn necesidades, acercarlo suavemente y permitir que sta se propague en toda su anchura, mezclar 3 veces levantando y bajando el extensor (sin despegarlo del portaobjetos). En un movimiento lento pero firme, extender la sangre a lo largo del portaobjetos. Permitir que el frotis seque por si solo a temperatura ambiente, durante media hora como mnimo no soplar ni agitar. o La falla en el secado en un tiempo oportuno, da lugar a artificios de contraccin de las clulas, especialmente por el aumento de humedad. En un extremo del frotis, marcar con un lpiz el nmero de ID de la muestraao. Teir por tincin de Wright. Ver fraccin IV, inciso 4. 3. 2. de este manual de procedimientos. Observar al microscopio, primeramente a bajos aumentos (10x o 40x) para un estudio global del frotis, apreciar su calidad y as localizar la zona de lectura: o Aquella donde la extensin de las clulas se ha conseguido en una sola capa, los eritrocitos se tocan entre s pero no estn sobrepuestos, estn bien teidos y no se han producido precipitados de colorante. Cuando se observe una zona apta, colocar una gota de aceite de inmersin directamente sobre el frotis, pasar a aumento de 100x.
Zona excesivamente gruesa: Se halla en la regin inmediata al punto de partida de la extensin (cabeza). En ella se aprecia siempre un aumento de linfocitos. Zona excesivamente fina: Corresponde al final de la extensin y termina en un rea donde las clulas adoptan una posicin acartonada (barbas). En esta regin existe un exceso de granulocitos y monocitos. Zona de lectura: Corresponde a la regin intermedia del frotis y en ella existe un reparto equilibrado de clulas.