AÑO DEL CENTENARIO DE MACCHU PICCHU PARA EL MUNDO UNIVERSIDAD PERUANA “LOS ANDES” FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA PRÁCTICA Nª : 04

COLIMETRIA TOTAL Y FECAL

CÁTEDRA CATEDRÁTICO

: MICROBIOLOGIA APLICADA : Mblgo. JAIME WESTER CAMPOS. : Mblgo. JAIME WESTER CAMPOS. : ANCO PANDURO, Raúl. COLLACHAGUA ECHEVARIA, Jhon PEREZ MERINO, Luis. VASQUEZ QUISPE, Diego.

JEFE DE PRÁCTICA ALUMNOS

CICLO GRUPO

: :

VIII 1

FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 15/10/09

Dichas medidas abarcan todas las fases posteriores a la producción primaria (entendiéndose por producción primaria los procesos de recolección. ordeño y similares). e incluyen preparación. transporte. almacenamiento.PERU INTRODUCCION Se entiende por higiene de los productos alimenticios "el conjunto de medidas necesarias para garantizar la seguridad y salubridad de los productos alimenticios. manipulación y venta o suministro al consumidor". .HUANCAYO. fabricación. sacrificio.". distribución. envasado. Por lo dicho calidad higienico-sanitaria son "las características que debe cumplir un producto alimentario para asegurar que su consumo no implica un riesgo de salud para el consumidor. transformación.

Objetivos Específicos: • Realizar la técnica de colimetria total que se basa en la cuantificación aproximada de enterobacterias del grupo coliforme(Escherichia.OBJETIVOS Objetivo General:  Determinar la presencia de agentes patógenos en muestra de CEVICHE que podrían ser causantes de enfermedades. • Realizar la técnica de colimetria fecal en caso de dar para la cuantificación de positivo la técnica anterior Escheriachia coli fecal. Klebsiela. citrobacter y enterobacter) que puedan estar presentes en nuestra muestra de CEVICHE. .

Con frecuencia se encuentran especies de Enterobacteriaceae en la bio-industria: para la fermentación de quesos y productos lácteos. etc. incluido el cloro. producción de toxinas en el uso de cosméticos. Algunas especies pueden vivir en tierra. En la definición clásica de una Enterobacteriaceae se usan siete criterios básicos. FUNDAMENTO TEORICO ENTEROBACTERIAS. adicional a la aparición de nuevos métodos taxonómicos para . Los miembros de esta familia forman parte de la microbiota del intestino (llamados coliformes) y de otros órganos del ser humano y de otras especies animales. Sucumben con relativa facilidad a desinfectantes comunes. fabricación de agentes antivirales de la industria farmacéutica. Las enterobacteriáceas (Enterobacteriaceae) son una familia de bacterias Gram negativas que contiene más de 30 géneros y más de 100 especies que pueden tener morfología de bacilos o cocos. en plantas o en animales acuáticos. CARACTERISTICAS. alcoholes.I. tratamientos médicos.

• • No son exigentes. son de fácil cultivo. Adicional a ello. es decir. que es oxidasa positivo).1 • • • Son capaces de reducir nitrato en nitrito. la mayoría bacilos. pero que forman parte de esta familia: • Son bacterias gram negativas. aunque algunas requieren aminoácidos y vitaminas. generalmente sólo con Dglucosa.incluir a ciertos géneros que no cumplen con todos los siguientes criterios. algunas producen toxinas y pueden ser encapsuladas y son organismos catalasa positivos. La temperatura óptima de crecimiento es de entre 22 °C y 37 °C. carecen de la enzima citocromo oxidasa. . Son quimioheterótrofos. Son oxidasa negativo (excepto Plesiomonas. otros cocobacilos y otros pleomórficos. las Enterobacteriaceae no forman esporas. y necesitan para su crecimiento compuestos simples de carbono y nitrógeno. Son anaeróbicos facultativos.2 • Muchos géneros tienen un flagelo que sirve para desplazarse. aunque algunos géneros no son móviles. y oxidadores de una amplia gama de substratos en condiciones aeróbicas. Son fermentadores de carbohidratos en condiciones anaeróbicas con o sin la producción de gas (en especial glucosa y lactosa).

. se encuentran en grandes números en el colon (desde el ciego hasta el recto). la presencia de enzimas metabólicas (βgalactosidasa. donde contribuyen a la degradación de residuos alimenticios y a la producción de gas intestinal como parte de la fermentación. la producción o no de azufre. tales como en el lipopolisacárido (antígeno O). etc. el antígeno flagelar (antígeno H) o el antígeno capsular (antígeno K). La especie Escherichia coli juega una función importante en el control de otras especies intestinales. descarboxilasas). desaminasas. como la fermentación de los diferentes azúcares. Los serotipos de importancia medica y sanitaria pueden distinguirse entre sí por la presencia o ausencia de antígenos en su constitución celular. Hafnia. como Citrobacter. representan una fracción importante de la flora aeróbica. mientras que otras especies.Las diferencias entre los nombres de los diversos géneros provienen de criterios más precisos. Providencia y Enterobacter están presentes de manera irregular. ECOLOGIA. En el intestino. Otras especies de Enterobacteriaceae con una presencia numerosa intestinal son Proteus y Klebsiella. constituyendo cerca del 80 por ciento de la flora aeróbica intestinal en una concentración aproximada de 108 en la materia fecal.

La especie Serratia marcescens usualmente causa infecciones nosocomiales como resultado de tratamiento en un hospital. • • La especie Yersinia pestis es responsable de la peste. pulmonía. • La especie Escherichia coli enterotóxica es responsable de la gastroenteritis infantil. La presencia de Enterobacteriaceae dentro del organismo es anormal y determina la aparición de infecciones. desnutrición. Las Enterobacteriaceae incluyen a organismos que resultan patógenos para el ser humano como la Escherichia coli o la Salmonella. los comensales del intestino pueden resultar patogénicos como oportunistas en infecciones urinarias. septicemia o sobreinfecciones. en el uso de ciertos antibióticos.En ciertas oportunidades. en especial en inmunosuprimidos. cuya gravedad depende del punto de entrada. etc. manifestada por diarreas y deshidratación. Introducidas por los alimentos. provocan problemas intestinales al adherirse y atravesar la barrera de la mucosa gastrointestinal. Ciertas especies provocan patologías específicas: • • La especie Salmonella typhi es responsable de la fiebre tifoidea. La especie Shigella dysenteriae es el agente responsable de la disentería bacilar. . PATOGENICIDAD.

tales como la penicilina. que se efectúa mediante las características que presentan las bacterias. Todos los bacilos de Enterobacteriaceae son resistentes a antimicrobianos comunes. la meticilina y la clindamicina. Se elige un medio líquido capaz de mantener el crecimiento de las bacterias que se están estudiando. más que de los organismos individualmente. de ahí que sean importantes los materiales y métodos para conseguir el desarrollo y la multiplicación. . DETERMINACION DEL NUMERO MAS PROBABLE (NMP) DE GERMENES EN UN ALIMENTO El recuento por dilución proporciona una idea del número de organismos vivos presentes en una muestra que son capaces de multiplicarse en un medio líquido determinado.Este método se utiliza cuando se sospeche un número muy bajo de gérmenes. en la mayor parte de los casos causando infecciones oportunistas. entre otros.especialmente importantes en la mortalidad infantil en países en desarrollo y patógenos para las plantas como Erwinia. TECNICAS UTILES PARA ELCONTROL MICROBIOLÓGICO DE LOS ALIMENTOS Fundamento El cultivo de microorganismos tiene por objeto su estudio e identificación. Dichas características dependen del comportamiento de las poblaciones.

II. METODOLOGÍA MATERIALES Y EQUIPOS REQUERIDOS: Materiales de Laboratorio:  3 Tubo de ensayo (16x150)  1 Pipeta de 1ml  6 Placas Petri  2 Matraces  2 Baguetas  Pizeta Equipos:  Balanza  Horno esterilizador  Estufa o incubadora  Autoclave  Mechero Bunssen .

Muestra:  Ceviche .

• • Llevar a la estufa a 37° C. Método: • Sembrar en tubo con caldo nutritivo un asa del alimento problema o de la dilución. Estufa de 37° C. Observar a las 48 horas el tipo de crecimiento Determinacion del numero Mas Probable (Nmp) .III.8-7. Asa de siembra. estéril.de Germenes En Un Alimento Material • Tres series (o más) de cinco tubos (cada serie) con el medio de cultivo adecuado. • Botes de dilución con 90 mL de agua de peptona al 0. según microorganismo. PROCEDIMIENTO Preparación del caldo Material: • • • • • Caldo nutritivo en tubos. Alimento problema o dilución de éste.1% y pH= 6. estéril. Mechero. .

• • • Poner 1 mL de la última dilución en cada uno de los tubos de la última serie.• Material diverso según el tipo de alimento a analizar. (ver protocolo de diluciones). • Consultar las tablas de probabilidad con el número de tubos positivos. Incubar el tiempo necesario y a la temperatura adecuada según el que queramos investigar. Hacer lo mismo con las demás diluciones de manera ascendente . • Pasado el tiempo de incubación hacer la lectura y anotar el número de tubos positivos de cada serie. 1/1000 o más si fuera necesario. 1/100. . Estos resultados se expresarán como número más probable de microorganismos por gramo o mililitro de alimento. Método • Hacer diluciones del alimento al 1/10.

 Cotejar con la tabla NMP. .ESQUEMA DE TRABAJO PARA REALIZAR COLIMETRIA TOTAL MUESTR A 1 m L 1 m L 10-1 10-2 10-3 Dilucione s seriadas Caldo brilla 10ml c/tubo mas campana Durham 10-1 10-2 10-3 Colimetria total Incubacion a baño maria a 37ºC x 48 h  Verficar gas y turbidez.

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