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CONOCIMIENTO DE TECNICAS ANALÍTICAS PARTE 1: FUNDAMENTOS DE ESPECTROFOTOMETRÍA.

OBJETIVO GENERAL: Conocer y aplicar los fundamentos de la espectrofotometría para la determinación de concentraciones en soluciones. OBJETIVOS PARTICULARES a.- Conocer los fundamentos de la espectrofotometría y las variables involucradas en la ley de Lambert-Beer-Bourger. b.- Seleccionar la longitud de onda apropiada para las mediciones de absorbancia. c.- Construir una curva patrón de soluciones de yodo. PROPUESTA DEL DISEÑO EXPERIMENTAL 1.- ESPECTRO DE ABSORCIÓN VARIABLES HIPÓTESIS DISEÑO EXPERIMENTAL Longitud de onda y absorbancia. En nuestra celda con la muestra tendremos que entre mayor longitud de onda habrá, menor absorbancia. Se tendrá un espectrofotómetro el cual nos ayudará a determinar la absorbancia, a determinada longitud de onda. Se tendrán dos celdas, una de ella tendrá agua destilada, la cual la llamaremos blanco, y la otra celda será la muestra a una concentración constante.

2.- CURVA PATRÓN VARIABLES HIPÓTESIS Concentración y absorbancia. Nuestras distintas concentraciones tendrán una absorbancia distinta, debido a que entre más diluida esté nuestra muestra menor será la absorbancia. Se tendrá un espectrofotómetro el cual nos ayudará a determinar la absorbancia a determinadas concentraciones. Se tendrán dos celdas, una de ella tendrá agua destilada, la cual la llamaremos blanco, y la otra celda será la muestra donde se medirán las absorbancia a distintas concentraciones de la muestra madre.

DISEÑO EXPERIMENTAL

.Introducir la celda con el blanco (usar agua destilada.15 minutos antes de empezar el experimento se encenderá el espectrofotómetro para que la lámpara de nuestro espectrofotómetro comience a calentar.002M .y posteriormente se introducirá la celda con la disolución para determinar su absorbancia a esa longitud de onda.. 6.. .. en la cual la medición de la absorbancia de nuestra solución madre haya sido alrededor de 400nm.Para calibrar oprimir la tecla MODE. 2. CURVA PATRÓN 7. 4 y 5.Preparar disoluciones a distintas concentraciones a partir de la solución dada por el profesor... 4. y preparar una que será la madre.REACTIVOS Y MATERIALES REACTIVOS Solución de I2-KI (.Seleccionar una longitud de onda (nm) Teniendo cuidado en que longitud de onda con la cual se comenzara la medición debido que probable que a longitudes muy pequeñas el espectrofotómetro no tome la medida..Repetir el procedimiento desde el punto 3 incrementado la longitud de onda y reportando tus datos. hasta que se encuentren A (absorbancia) 3. 8. sin llenar completamente) en el porta celda...2M) Agua destilada MATERIALES 1ESPECTROFOTÓMETRO 2 CELDAS ESPECTROFOTOMÉTRICAS 4 VASOS DE PRECIPITADOS DE 50 ml 6 TUBOS DE ENSAYO (15 ml) 1 pipeta graduada de 10 ml 1 pipeta graduada de 1 ml 1 propipeta (o jeringa con tubo de látex) Usar siempre las mismas celdas y el mismo espectrofotómetro METODOLOGÍA EMPLEADA CALIBRACIÓN DEL ESPECTROFOTÓMETRO Y BARRIDO DEL ESPECTRO DE ABSORCIÓN 1. para cada una de las concentraciones y reportar en la tabla.Repetir los pasos 3. oprimir la tecla (0A/100%T) y esperar a que se ponga en ceros.. 9. 5.Seleccionar una longitud de onda adecuada determinada en la calibración.

04 Espectro de la solución de yodo 2.043 0.81 0.079 0.DATOS. Absorbancia de la solución de I2 a diferentes longitudes de onda.084 0. CÁLCULOS Y RESULTADOS Modelo espectrofotómetro: UNICO1100RS Temperatura: 21°C N°: 3 Longitud(Diámetro): 1cm Tabla 1.098 0.200 1.400 1. .400 0.058 0.600 0.200 0.257 0.728 1.000 300 350 400 λ(nm) 450 500 550 Absorbancia Valor de la longitud de onda seleccionada.243 0.600 1.53 0.800 0.800 1.205 0. Evento 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 λ(nm) 320 330 340 350 360 370 380 390 400 410 420 430 440 450 460 470 480 490 500 Absorbancia 1.14 0.352 0.000 1.000 0.

l: diámetro de la celda 1 cm.0002 0.6 0.1 0 0 0. Absorbancia a diferentes concentraciones molares de I2.306 0. .108 Curva patrón 0.0018 R² = 0.2 0.0001 0.ALGORITMO DE CÁLCULO Determinar la concentración de I2 en las mezclas de la tabla 2.38 0. ε: coeficiente de absorción molar (2665 M-1cm-1).00016 0.00005 0.4 0.3 0. Solución madre: 2*10-4 M Ejemplo: Tabla 2.0002 0.566 0.00004 0.00012 0.00015 0.9685 El valor de la pendiente corresponde a ε*l.00025 Concentración (M) y = 2665x .0. λ= 400nm Mezcla 1 2 3 4 5 I2 ( )/(mL) H2O/(mL) I2 mol/L Abs 10 8 6 4 2 0 2 4 6 8 0.00008 0.5 Absorbancia 0.23 0.

¿A qué longitud de onda se localiza el máximo de absorbancia de la solución de yodo ? El máximo se encuentra a 370 nm. todavía es posible agregar mayor cantidad de yodo.ANÁLISIS DE RESULTADOS 1. ¿Qué representa la pendiente de la gráfica de la curva patrón? La pendiente de la curva de Absorbancia vs concentración es el coeficiente de absorción molar (ε) multiplicado por el diámetro de la celda (l). en lugar de elegir la longitud de onda correspondiente a la absorbancia máxima. también aumenta el valor correspondiente a la absorbancia. 2. ¿Qué relación presenta la absorbancia con la concentración de la curva patrón? La relación es directamente proporcional. CONCLUSIONES Es necesario elegir la medida de longitud de onda adecuada a partir del espectro de la solución estudiada. MANEJO DE RESIDUOS Colocar en el envase indicado los residuos que contienen yodo. 3. por qué a ésta longitud de onda para las siguientes prácticas donde se hará uso. ¿Qué longitud de onda empleaste para construir la curva patrón y por qué? 400 nm. conforme aumenta la concentración de la disolución. 4. La curva patrón nos permitirá obtener en un futuro la concentración de alguna disolución que también contenga el compuesto o elemento que se utilizó (en nuestro caso yodo). El agua depositarla en cubetas. . para posteriormente construir con ésta la curva patrón.