INSTITUTO DE SALUD PBLICA DE CHILE SUBDEPARTAMENTO LABORATORIOS DEL AMBIENTE

SECCIN QUMICA DE ALIMENTOS PRT: 701.04-156 Rev. 0 Pag.1 de 2

DETERMINACIN DE GRASA Mtodo Bligh y Dyer

1. OBJETIVO Obtener la grasa de un alimento homogeneizado mediante extraccin directa con disolventes en fro. 2. CAMPO DE APLICACION Esta tcnica ser aplicada a muestras de alimentos especialmente para extraer lpidos para identificacin por cromatografa de gases y pruebas de rancidez. 3. FUNDAMENTO El mtodo se basa en la homogeneizacin de alimentos hmedos con metanol y cloroformo en proporciones tales que forman una fase sencilla miscible con el agua en los alimentos, que al adicionar posteriormente cloroformo y agua se separan dos fases con los materiales lpidos en la capa de cloroformo. 4. REFERENCIAS Anlisis Qumico de Alimentos de Pearson. Egan, H; Kirk R y Sawyer R. Compaia Editorial Continental, Mxico. 1988. 5. TERMINOLOGA NA 6. MATERIALES INSUMOS Y EQUIPOS 6.1 MATERIALES Y EQUIPOS 6.1.1 6.1.2 6.1.3 6.1.4 6.1.5 6.1.6 6.1.7 6.1.8 Balanza analtica Ultraturrax Centrfuga Rotavapor Estufa Micropipeta Vrtex Material usual de laboratorio: filtros, vasos, tubos tapa rosca, etc.

6.2 REACTIVOS

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DETERMINACIN DE GRASA Mtodo Bligh y Dyer

6.2.1 6.2.2 6.2.3 6.2.4 7

Metanol p.a. Cloroformo p.a. Hidrxido de potasio p.a. ter de petrleo

DESARROLLO DEL PROCESO Preparacin de las muestras Homogeneizar la muestra previamente analizada o conocida su humedad. Pesar en vaso precipitado de 250 mL aproximadamente 10 g de muestra exactamente pesados. Agregar agua desionizada en tal cantidad que el total de agua presente sea 16 mL. Agregar 40 mL de metanol Agregar 20,0 mL de cloroformo con pipeta volumtrica, extraer por 2 minutos con ultraturrax Agregar nuevamente 20,0 mL de cloroformo y extraer por 30 segundos con ultraturrax Agregar 20 ml de agua y extraer por 30 segundos con ultraturrax Distribuir el contenido en tubos de centrfuga de 50 mL y centrifugar por 10 minutos a 2000 2500 rpm. Extraer con jeringa de 10 mL la capa inferior de cloroformo de cada tubo sin perturbar las capas flotantes, filtrarlo por papel plegado y recibir el filtrado en erlenmayer de 50 mL. Tomar una alcuota de 25,0 mL del filtrado con pipeta volumtrica y trasvasijar a un matraz redondo de fondo plano de 100 mL previamente secado, pesado y mantenido en desecador. Evaporar el cloroformo en rotavapor a 60 C. Completar el secado en estufa de vaco a 60 C por 2 horas. Enfriar en desecador Pesar el matraz con la grasa. Expresin de resultados VT x P2 ----------------------Va x P1

7.1 7.1.1 7.1.2 7.1.3 7.1.4 7.1.5 7.1.6 7.1.7 7.1.8 7.1.9 7.1.10 7.1.11 7.1.12 7.1.13 7.2

A (g/100g) =

A P1 P2 VT Va

: Concentracin en g/100g (%) de grasa : Peso de la muestra : Peso de la grasa seca obtenida : Volumen total de cloroformo (40 mL) : Volumen de la alcuota de cloroformo tomada (25 mL)