Tcniques Experimentals.

1r Batxillerat
DEPARTAMENT DE BIOLOGIA I GEOLOGIA

PRCTICA N.

Experimentaci amb enzims

OBJETIVOS: Conocer la actuacin de distintas enzimas. MATERIAL NECESARIO Tubos de ensayo Gradilla Bao Mara Pipetas Bistur o cuchillo Lugol Reactivo de Fehling A y B

cido clorhdrico (HCl) Agua oxigenada (H2O2) Tejidos de hgado y zanahoria Almidn Sacarosa Extracto de levadura Saliva

FUNDAMENTO TERICO: Las enzimas son protenas y se destruyen (desnaturalizan) con el calor y con los cambios de pH. Cuando se produce la desnaturalizacin, la enzima deja de ser activa y no cumple su funcin. Presencia de catalasa en tejidos animales y vegetales: la catalasa es una enzima que acta sobre el perxido de hidrgeno (H2O2, agua oxigenada) descomponindolo en H2O y O2, con desprendimiento de energa en forma de calor. Esta enzima est presente en todos los tejidos animales y vegetales. Hidrlisis del almidn por las enzimas hidrolticas de la saliva: En la saliva se encuentra una enzima llamada ptialina que descompone (hidroliza) el almidn produciendo glucosa. Vamos a comprobar la presencia de glucosa tras la accin de la enzima realizan una reaccin de Fehling. Hidrlisis de la sacarosa por la glucosidasa de la levadura: La sacarosa es un glcido sencillo formado por la unin de glucosa y fructosa. Cuando se rompe el enlace entre estas dos sustancias se libera glucosa y fructosa. Para comprobar que se ha producido la reaccin y revelar la presencia de glucosa realizaremos la prueba de Fehling. MTODO: Presencia de catalasa en tejidos animales y vegetales 1. 2. 3. 4. 5. Toma la zanahoria y corta dos trocitos aproximadamente iguales. Toma el hgado y prepara dos trozos del mismo tamao. Introduce cada muestra en un tubo de ensayo. Vierte unos 5cc de agua corriente en cada uno de los cuatro tubos. De los cuatro tubos que tienes, toma uno que contenga zanahoria y otro con hgado. Hierve durante 6-8 minutos. Pasado este tiempo retira el agua. 6. Echa perxido de hidrgeno en los cuatro tubos. 7. Observa y anota los resultados.

Hidrlisis del almidn por las enzimas hidrolticas de la saliva: 1. Prepara los siguientes tubos de ensayo: 2 Tubos num. 1 (a y b): Solucin de almidn. 3ml 2 Tubos num.2 (a y b): Solucin de almidn 3ml + Cierta cantidad de saliva 2 Tubos num. 3 (a y b): Solucin de almidn 3ml + Cierta cantidad de saliva + 0,2ml de HCl 2. Dejar en reposo los tubos durante 30 minutos. 3. Realizar a uno de los dos tubos la reaccin de Fehling y al otro una tincin con Lugol. 4. Observa y anota los resultados.

Hidrlisis de la sacarosa por la glucosidasa de la levadura. 1. Disuelve un poco de levadura en agua destilada (aprox. unos 20ml) . 2. Deja reposar durante unos 10 minutos. 3. Prepara los siguientes tubos: Tubo A: Una cucharadita de sacarosa + 2ml de agua Agitar Tubo B: Una cucharadita de sacarosa + 2ml de agua + 2ml de extracto de levadura Agitar 4. Deja reposar durante unos 15 minutos. 5. Realiza una reaccin de Fehling en cada uno de los tubos A y B. 6. Observa la reaccin y anota los resultados.

CONCLUSIONES: Presencia de la catalasa en tejidos animales y vegetales: 1. 2. 3. 4. 5. Qu tejidos presentan desprendimiento de oxigeno? Cul de los tejidos presenta mayor actividad? Por qu la reaccin es negativa cuando cocemos las muestras? Interpreta los resultados obtenidos en la prctica de la catalasa. Frecuentemente utilizamos agua oxigenada como antisptico y se observa que al aplicarla a una herida se produce un burbujeo, qu est ocurriendo? Por qu se utiliza el agua oxigenada como antisptico?

Hidrlisis del almidn por las enzimas de la saliva: 1. Resultados obtenidos:

Tubo 1 Lugol (a) Fehling (b)

Tubo 2

Tubo 3

1. Explica razonadamente los resultados obtenidos en cada uno de los tubos de la hidrlisis del almidn. 2. Escribe la reaccin enzimtica que realiza la enzima de la saliva. 3. En qu tubo se demuestra la actividad de la enzima de la saliva? Cmo lo has demostrado? 4. En qu tubo se ha inactivado la enzima? Por qu no ha actuado? Hidrlisis de la sacarosa por la levadura: 1. Resultados obtenidos: Fehling Tubo A Tubo B 2. Qu reaccin qumica se ha producido en el tubo B? 3. Explica razonadamente los resultados obtenidos en cada uno de los tubos de la 4. hidrlisis de la sacarosa. 5. Imagina que preparamos un tubo C que contenga: sacarosa, agua, extracto de levadura y lo calientas manteniendo la ebullicin 10 minutos. Formula una hiptesis de lo que crees que ocurrir en ese tubo. Cmo comprobaras tu hiptesis?