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CITOSCHELETRO fondamentale:
svolge
un
ruolo
nei processi di movimento e di divisione cellulare Nel posizionare e muovere gli organelli collegati alle membrane allinterno del citosol E anche strettamente associato con i processi di segnalazione e di adesione cellulare
I vari componenti del citoscheletro sono collegati tra loro sia strutturalmente che funzionalmente.
Videomicroscopia
Uso di cellule che sovraesprimono una proteina mutante dominante negativa (es. chinesina II)
taxolo
citocalasina D (metabolita fungineo) Actina latrunculina (tossina isolata dalla spugna) falloidina (peptide derivato dal fungo Amanita phalloides) Uso di animali knockout (es. topi che mancano della proteina dineina citoplasmatica non si sviluppano oltre lottavo giorno)
Ciascuna proteina si organizza in 3 domini: 1) ammino- terminale, lega GTP; 2) centrale, lega la colchicina; 3) carbossi- terminale, lega MAP
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Esistono diversi isotipi di Tubulina che differiscono principalmente nel dominio carbossi-terminale, la porzione della molecola che lega le MAP (ad es. nel cervello si trovano 5 isotipi di tubulina e 5 di ).
Nucleazione
+GTP + ioni Mg++
37C
Allungamento
spettrofotometro
veloce
La crescita dei microtubuli in vitro dipende in modo lineare dalla concentrazione dei dimeri di tubulina: a elevate concentrazioni di dimeri i microtubuli crescono, a basse concentrazioni si disorganizzano.
Esiste un valore di concentrazione di tubulina in cui il processo di crescita controbilanciato da quello di disorganizzazione, condizione definita come concentrazione critica.
La simultanea crescita e depolimerizzazione producono un fenomeno chiamato TREADMILLING: si verifica quando ogni molecola di tubulina incorporata allestremit positiva si sposta lungo il microtubulo in crescita e si stacca dallestremit opposta
MTOC: il centro organizzatore dei microtubuli ha la funzione di nucleare e ancorare i microtubuli. Anche il corpo basale (alla base delle ciglia) serve da MTOC
pericentrina
pericentrina
Il fatto che i microtubuli nelle cellule siano soggetti ad instabilit dinamica giustifica la distribuzione casuale di microtubuli con un ciclo di vita breve, ma non la presenza di microtubuli organizzati in modo stabile allinterno delle cellule.
Un modo per stabilizzare i microtubuli potrebbe essere quello di mascherare, e quindi, proteggere le estremit positive in crescita (es. cinetocore dei cromosomi nella mitosi, proteine di attracco).
La funzione di alcune MAP pu essere modificata dalla fosforilazione. Es. un livello anormalmente alto di fosforilazione della proteina Tau sembra correlato con lo sviluppo di diverse fatali malattie neurodegenerative, in cui le cellule nervose contengono grovigli neurofibrillari formati da molecole di tau eccessivamente fosforilate ed incapaci di legarsi ai microtubuli.