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CICLO : VII
TRUJILLO – PERÚ
2008
Cátedra de Microbiología y Tecnología de Alimentos UNT
I. INTRODUCCIÓN:
Como las colonias pueden originarse tanto de una célula como de un grupo de células,
para expresar el resultado se utiliza el término: “unidades formadoras de colonias”
(u.f.c). Además, a fin de que todas las células que queden en una placa tengan una
adecuada disponibilidad de nutrientes, y que los errores del método sean menores, se
establece que las condiciones óptimas de conteo se dan cuando desarrollan entre 30 y
300 colonias por placa. Cuando esto no se cumple se considera el valor obtenido como
una estimación del recuento.
Para estimar los materiales sólidos que son solubles en el agua o que forman
suspensiones finas en este medio (como por ejemplo harina, leche en polvo, azúcar), se
suspende o se disuelve por agitación en un diluyente estéril una cantidad dada de
muestra. Ciertos materiales sólidos como el queso y la carne, deben se triturados hasta
pequeñas partículas en diluyente estéril. Entre los diluyentes más comúnmente
empleados se encuentran la solución Ringer diluida a un cuarto, el diluyente agua de
peptona y la Solución Salina Fisiológica Peptonada (S.S.F.P).
II. OBJETIVOS:
III. MATERIAL:
1. BIOLÓGICO:
- Muestra: Agua
2. DE LABORATORIO:
- pipetas.
- mechero
- Tubos de ensayo.
3. MEDIOS DE CULTIVO:
4. EQUIPOS:
- Contador Quebeck
IV. PROCEDIMIENTO:
2. identificar la muestra con los siguientes datos: Nombre y/o número del
lote, dilución, volumen sembrado, técnica de siembra, fecha, operador,
etc.
V. ESQUEMA DE TRABAJO.
1° Paso:
2° Paso:
3° Paso:
4° Paso:
Como paso final se coloco a las placas petrix en una estufa a 37º C x 48
horas para que incube y así puedan formar las colonias:
Cátedra de Microbiología y Tecnología de Alimentos UNT
M uestr a
Homogenizar
Lectura
Cátedra de Microbiología y Tecnología de Alimentos UNT
VI. RESULTADO.
VII. COMENTARIO.
VIII. CUESTIONARIO.
2. ¿Por qué, para el recuento de bacterias viables, se escogen las placas que
han desarrollado entre 30 y 300 u.f.c.?
Este término se utiliza pues las colonias pueden originarse tanto de la célula
como de un grupo de células. Además en las colonias son formadas a partir
de un microorganismo y se multiplican tan rápido hasta formar una colonia
Por ejemplo en el recuento en placa con una disponibilidad adecuada de
nutrientes, se establece que el recuento bajo condiciones óptimas se logra
desarrollar entre 30 y 300 colonias por placa.
Un recuento de viables mide sólo las células vivas de una población, es decir,
aquellas capaces de reproducirse (viable significa "que puede vivir"), bajo las
condiciones del medio.
Se basa en el principio de que una única célula viable originará una colonia
visible, cuando se siembre en una placa de agar; por lo tanto no será posible
la determinación del total de viables, debido a que en un alimento existe una
variada gama de microorganismos con requerimientos nutritivos y
ambientales diferentes, si alguno de ellos posee las condiciones adecuadas
para su desarrollo, otro de ellos puede no contar con estas.
Cátedra de Microbiología y Tecnología de Alimentos UNT
Cada célula viable dará origen a una colonia visible después del tiempo
adecuado de incubación. Contando las colonias visibles, teniendo en cuenta la
dilución de la que proceden y el volumen de alícuota utilizado, es fácil
deducir el número de células viables en la suspensión original.
Facultad de Ciencias Agropecuarias
Escuela Académico-Profesional de Ingeniería
Agroindustrial
CICLO : VII
TRUJILLO – PERÚ
2008
Cátedra de Microbiología y Tecnología de Alimentos UNT
I. INTRODUCCIÓN:
El método del Número Más Probable (NMP), o llamado también llamado método de los
tubos múltiples, es un método alternativo que permite efectuar el recuento de cifras
bajas de microorganismos, viables, por ejemplo, menos de uno por mL. Proporciona
una idea aproximada del número de bacterias vivas presentes en una muestra de
alimento, que pueden multiplicarse en una medio de cultivo líquido determinado. El
medio de cultivo a elegir depende del tipo de microorganismo que se desea contar, por
tanto se pueden utilizar medios de enriquecimiento selectivos, ó medios de propagación.
Este método es útil para determinar cargas microbianas bajas, pero tamicen puede
emplearse para determinar cargas mayores utilizando las diluciones apropiadas. Así
mismo, es el único método a utilizar en el caso de muestras como por ejemplo polvos
insolubles, en los que no es aplicable el método de filtración ni recomendable el de
placas debido a la presencia de partículas. Se prefiere también este método cuando los
microorganismos son de lento crecimiento, o cuando han sido sometidos a condiciones
adversas (temperatura alta, desecación, etc.). Es posible enumerar también
microorganismos anaerobio utilizando medio pre reducido, que se cubren con vaselina o
parafina luego de inocular o incubar en condiciones anaerobias.
II. OBJETIVOS:
III. MATERIAL:
1. BIOLÓGICO:
- Muestra: Agua
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2. DE LABORATORIO:
- pipetas de 10 y 1 mL
- Campanas Durham de 10 x 75
- Mechero
3. MEDIOS DE CULTIVO:
4. EQUIPOS:
- Estufa regulada a 35 – 37 ºC
5. REACTIVOS:
- Kovac’s
IV. PROCEDIMIENTO:
2. Identificar la muestra.
V. ESQUEMA DE TRABAJO.
1° Paso:
2° Paso:
Como segundo paso se coloco 10 ml de muestra en los tres primeros tubos que
contenían la solución brilla, luego se coloco 1 ml de solución 10-1 en cada uno de
los tres tubos siguientes y finalmente 0.1 ml de solución 10-2 en los tres tubos
finales:
3° Paso:
Finalmente se deja incubar en una estufa por el periodo de 48 horas a una 37ºC
para luego observar los resultados:
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Tubos 1
M uestr a
Incubació
n 37ºC
(24-48h.)
Incubación
37ºC
(24-48h.)
Tubos 2 Tubos 3
VI. RESULTADO.
El resultado obtenido este caso fue de 3+, 3+, 0-, lo cual nos indica que el NMP es
de 240/100ml y con un límite de confianza entre 36 y 1300. Abajo se muestra los
tubos de ensayo del experimento:
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VII. COMENTARIO.
VIII. CUESTIONARIO.
1.- ¿Qué otras formas conoce, para realizar el método del NMP?
Las muestras a analizar no solo son liquidas, muchas veces son sólidas, en
estos casos suele agregarse 10 g de muestra en 90 g de agua, se agita y al
sedimentarse se trabaja con el sobrenadante, a partir de este se podrá realizar
las diluciones o trabajar directamente como el procedimiento antes
mencionado.
VENTAJAS:
- Suele ser más rápido e igual de confiable que los métodos tradicionales de
esparcimiento en platos de cultivo, entre otros.
DESVENTAJAS:
- No detectan las poblaciones con menos de una célula por mililitro, sólo
permite microorganismos viables.
- Formación de ácido.
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Agroindustrial
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I. INTRODUCCIÓN:
El método de recuento en tubo, es otro método que permite la determinación del número
de microorganismos viables presentes en muestras de alimentos. Este método, es
particularmente útil para el recuento de microorganismos anaerobios, tales como los
clostridios sulfito reductores, siempre y cuando se utilice el medio adecuado y las
correctas condiciones de incubación.
II. OBJETIVOS.
III. MATERIAL.
1. BIOLÓGICO:
- Muestra (Por ejm., agua estancada).
2. DE LABORATORIO:
- Tubos con agua de dilución (9 mL de agua peptonada).
- Tubos de ensayo de 15 x 150 vacios estériles.
- Pipetas de 1 y 5 mL.
- Gradilla.
3. MADIOS DE CULTIVO:
- Agar SPS ó Agar TSN.
- Agar agar.
4. EQUIPO:
- Incubadora regulada 35 – 37°C.
IV. PROCEDIMIENTO.:
2. De cada una de las 3 diluciones pipetear por duplicado 1 mL en cada uno de los tubos
estériles.
6. Después del periodo de incubación, contar las colonias negras, seleccionando los
tubos que presenten entre 1 a 20 colonias; sacar el promedio y multiplicar por el
inverso de la dilución.
Nota:
V. ESQUEMA DE TRABAJO.
1° Paso:
2° Paso:
En cada uno de los tubos anteriores se coloca 2 ml de agar agua y 12 agar previamente
calentados:
3° Paso:
Una vez que se ha solidificado se lleva a incubación por 18-24 horas a 37 ºC:
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Desinfección de manos e
instrumentos a usar
Toma de muestra
Agua potable
1 ml
Tubos estériles
Agar Agar
SPS agua
10 ml
VI. RESULTADO.
VII. COMENTARIO.
VIII. CUESTIONARIO.
E. Coli
Bacillaceae Anaerobios
Clostridium Perfingers.
Clostridium Sulfito Reductores
Esporas de Clostridium Sulfito Reductores
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3.- ¿A que se deber el color negro de las colonias que aparecen en el medio de
cultivo?
CICLO : VII
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I. INTRODUCCIÓN:
Estudios de administración por la vía orla de cultivos puros con los alimentos han
demostrado que se requieren comúnmente grandes dosis de microorganismos para
producir la enfermedad en adultos. No obstante, en niños, ancianos y personas
debilitadas; números reducidos de células son suficientes para determinar la
enfermedad; por esta razón, la presencia de salmonellas cualquiera que sea su número
en un alimento preparado yapara el consumo se considera siempre como un peligro
grave para la salud.
Las salmonelosis puede ser dividida en dos grupos principales: (1) las infecciones
septicémicas que producen fiebres tifoideas y paratifoideas, producidas por Salmonella
typhi y S. Paratyphi A, B y C, y (2) las infecciones entéricas no septicémicas
producidas por la otras salmonellas. Esta división la usa la OMS en su sistema de
estadísticas sanitarias.
Por lo general, los animales, son solo portadores que eliminan salmonellas de forma
regular aunque en pequeña cantidad. El medio ambiente humano y animal se
contaminan por excretas humanos y animales. A través de aguas superficiales, de los
insectos, las aves, y los roedores, pueden contaminarse tanto como los piensos,
estableciéndose así ciclos de infección.
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Prácticamente todos los alimentos de origen animal pueden ser vehículo de transmisión
de salmonellas al hombre. Además, las salmonellas pueden ser a veces vehiculizadas
por alimentos de origen vegetal, tales como los cereales y los frutos del cocotero, y por
productos farmacéuticos. Sin embrago, los vehículos dominantes son la carne (ternera,
cerdo, aves, etc.), los huevos, la leche y los productos industrializados que contienen
estas materias primas básicas.
1. Enriquecimiento no selectivo.
2. Enriquecimiento selectivo.
3. Aislamiento selectivo.
4. Bioquímica presuntiva.
5. Bioquímica confirmativa.
6. Serología.
II. OBJETIVO:
III. MATERIAL.
1. BIOLÓGICO:
- Muestra (Por ejm., agua u algún alimento sólido).
2. DE LABORATORIO:
- Tubos de ensayo de 13 x 100
- Tubos de ensayo de 15 x 150 vacios estériles.
- Pipetas de 1 y 5 mL.
- Placas de petri estériles.
- Matraz de 500 Ml.
3. MEDIOS DE CULTIVO:
- Caldo Lactosado
- Caldo selenito.
- Caldo tetrationato verde brillante.
- Agar Salmonella-Shigella (SS)
- Agar VRBA ó Mac Conkey
- Agar TSI.
- Agar LIA.
- Agar Común.
4. REACTIVOS:
- Solución de yodo y yoduro de potasio.
- Solución de verde brillante
5. EQUIPO:
- Estufa regulada 35 – 37°C.
IV. PROCEDIMIENTO:
V. ESQUEMA DE TRABAJO.
1° Paso:
2° Paso:
Luego se toma una gota de cada tubo y se extiende en una placa petrix que
contiene agar salmonella-shigella y se deja incubar a 37 ºC por 24 horas:
3° Paso:
Después que se ha incubado la placa y se observa lo que podría ser las colonias de
salmonella y shigella, se toma una pequeña muestra y se coloca en un tubo de
ensayo conteniendo TSI y se pone a incubar nuevamente a 37 ºC por 24 horas:
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Enriquecimiento no selectivo
Se lleva 1 ml de la
Se pipeteó 25 ml de agua y se muestra anterior a 10 ml
vertió en 225 ml de caldo lactosado, de caldo selenito y a 10
luego se incubo a 37 °C x 8 h. ml de caldo tetrationato
verde brillante al que se
le añadió 0.1 ml de
solución yodo yodurada.
Se incuba a
37°C por 24h.
caldo selenito
caldo tetrationato
verde brillante.
Se incuba a 37 °C por 48
horas, luego se hace lectura
Bioquímica presuntiva
VI. RESULTADO.
VII. COMENTARIO.
Por las razones antes mencionadas es importante que los alumnos sepan como
identificar este tipo de microorganismo para ser así más competitivos a nivel
laboral.
VIII. CUESTIONARIO.
Una de las fuentes principales son los alimentos de origen animal y los
vegetales regados con aguas contaminadas con éste microrganismo
especialmente los alimentos.
Enriquecimiento no selectivo.
Enriquecimiento selectivo.
Aislamiento selectivo.
Bioquímica presuntiva.
Bioquímica confirmativa.
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Serología.
Tipificación por medio de bacteriófagos.
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I. INTRODUCCIÓN:
El género Vibrio está formado por bacilos Gram negativos, oxidasa positivos, curvados
o rectos, anaerobios facultativos. Muchas especies de vibrios son patógenos para el
hombre y han sido implicadas en enfermedades transmitidas por los alimentos. Las
especies de vibrio que no sean V. Cholerae y V. mimicus no crecen en medios a los que
no se les haya añadido cloruro de sodio, y son denominadas “halofílicas” (ICMF 200)
V. Cholerae fue descrito por primera vez por Pacini como la causa del cólera en 1854, y
en 1960 el mundo sufrió la séptima pandemia del cólera. Cuando se ingiere un gran
número de células de V. Cholerae, estas se multiplican en el revestimiento intestinal
segregue grandes cantidades de fluido que se excreta en forma de diarrea acuosa en la
que hay hasta 108 células de V. Cholerae por mL. Sin embargo, la mayoría de las heces
de los pacientes de cólera en periodo de convalecencia pasada de una semana son
negativas y en casi todos los casos a las tres semanas.
Sobrevive muy bien en agua de mar y por tiempos mayores en cubitos de hielo que en
agua fresca no congelada.
Debido a que esta especie puede crecer en medios carentes de cloruro de sodio no es
considerado un vibrio halofílico, aunque se requiere de trazas de ión de sodio para
determinar su crecimiento.
II. OBJETIVO:
III. MATERIAL.
1. BIOLÓGICO:
- Muestra (Por ejm., agua o pescado).
2. DE LABORATORIO:
- Placas petri estériles.
- Tubos de ensayo de 13 x 100
- Balones de 300 mL.
3. MEDIOS DE CULTIVO:
- Agua Peptonada Alcalina (APA) al 3% de cloruro de sodio.
- Agua Peptonada Alcalina (APA) al 0.5% de cloruro de sodio.
- Agar Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa (TCBS).
- Agar TSI.
4. EQUIPOS:
- Estufa regulada a 35-37°.
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IV. PROCEDIMIENTO.
V. ESQUEMA DE TRABAJO.
1° Paso:
Colocar 25 ml o 25 g de la
muestra en 225 ml de APA al
0.5% de NaCl ó en APA al 3%
de NaCl. Luego se incuba a
Después de incubar y sin
37°C por 12 horas.
agitar el frasco, se transfirió
una asada de inóculo a APA
partir de la película
(crecimiento superficial) a
dos placas de agar TCBS.
Se estrió en 4 cuadrantes.
Agar
TCBS
Las colonias con el centro de color Las colonias de color amarillo (sacarosa
verde azuladas (sacarosa negativa) positiva), grandes, de bordes regulares,
pequeñas, de bordes regulares y aspecto cremoso, ligeramente planas, con
filantes, indican la presencia de centros opacos y periferie translúcida,
vibrio parahaemolyticus. indican la presencia de vibrio cholerae.
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LACTOSA +
SACAROSA +
L
GLUCOSA +
G LACTOSA -
SACAROSA -
GLUCOSA +
Se tomó una colonia de cada placa anterior y se lo
estrío en la superficie en un tubo que contenía TSI
(Tres azucares hierro: Glucosa, Lactosa y sacarosa), vibrio parahaemolyticus
luego se lo incubo a 37°C y luego se hizo la lectura.
VI. RESULTADO.
VII. COMENTARIO.
VIII. CUESTIONARIO.
CICLO : VII
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I. INTRODUCCIÓN
El examen bacteriológico del agua usualmente involucra dos ensayos: la estimación del
número de bacterias de acuerdo con el conteo total en placa y a determinación, más
significativa, de la presencia o ausencia de miembros del grupo coliforme.
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Los criterios de calidad bacteriológica del agua potable que es recomendado para
nuestro país es: 0 coliformes/100 mL y no más de 500 bacterias heterotróficas/ mL.
II. OBJETIVOS:
III. MATERIAL.
1. BIOLÓGICO:
- Agua potable
2. MEDIOS DE CULTIVO:
- Agar cuanta gérmenes (PCA).
- Caldo Lactosado Bilis Verde Brillante (BRILA)
- Agar Violeta Cristal Rojo Neutro Bilis (VRBA).
- Agar tres Azúcares (TSI).
- Agua triptonada ó peptonada.
3. REACTIVOS:
- Reactivo de Kovac’s.
4. EQUIPOS:
- Autoclave.
- Contador Québec.
- Estufa regulada a 35-37°.
- Baño maría regulado 44,5ºC.
IV. PROCEDIMIENTO:
V. ESQUEMA DE TRABAJO:
VI. RESULTADOS:
En el caso del método del numero más probable no se encontró ningún rastro en
el los tubos (resultado negativo), lo que indica la poca o casi nula presencia de
microorganismos en la muestra del agua potable.
En el caso del método del recuento en placa se encontró la presencia de 3
colonias lo que corrobora el resultado anterior con la casi nula presencia de
bacterias en el agua potable, tanto para dilución de 10-2 y 10-3.
VII. COMENTARIO:
Solo quedaría por mencionar la importancia de realizar los análisis del agua
potable, pues como se sabe es de consumo humano y de vital importancia para la
existencia del hombre.
Además estos tipos de análisis son también de gran importancia y primordiales
en lo referente a la industria de los alimentos puesto que esto contribuye a tener
un producto final de buena calidad y en optimas condiciones para el consumo.
VIII. CUESTIONARIO:
Se procede tomando varias muestras de diferentes puntos del rio en frascos estériles y
sellados para evitar que se contaminen. Luego deben de ser trasladados al laboratorio
para su análisis.
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I. INTRODUCCIÓN:
La leche aunque proceda de vacas sanas y se haya obtenido en las mejores condiciones
higiénicas, siempre está contaminada con microorganismos en mayor o menor grado.
Los microorganismos que se encuentran en la leche tienen tres orígenes: el interior de la
ubre, el exterior de los pezones y sus alrededores próximos, y el ordeño y los utensilios
que se utilizan normalmente para manipular la leche.
Por otra parte, entre los microorganismos patógenos para el ser humano procedentes de
animales se encuentran Mycobacterium bovis, M. Tuberculosis, Brucella abortus, etc.
El análisis microbiológico de la leche proporciona datos muy útiles que reflejan las
condiciones en las que se han obtenido y conservado. Los recuantos bacterianos
elevados no inician necesariamente que la leche contenga bacterias patógenas, peri
revelan intensa contaminación o temperaturas de conservación defectuosas.
Toda vez que la leche fresca es un producto perecedero, no puede controlarse alicando
criterios microbiológicos porque, indudablemente, el alimento habrá sido distribuido y
probablemente consumido antes de conocer los resultados de los análisis
microbiológicos. Por lo tanto, para tener una idea de la calidad de la leche, se recurre a
la prueba de reducción de colorante (prueba de la reductasa), una prueba para la
determinación rápida de la calidad higiénica de la calidad de la leche fresca.
Uno de los indicadores de oxido reducción que se emplea para la prueba de la reductasa,
es el azul de metileno, que en su forma oxidada es azul y en su forma reducida es
incoloro.
II. OBJETIVOS:
III. MATERIAL.
1. BIOLÓGICO:
- Leche
2. DE LABORATORIO:
- Tubos de 150x15 mm con tapones de jebe o tapa rosca.
- pipetas de 1 y 10 mL.
- Gradilla de acero inoxidable.
3. EQUIPOS:
- Baño maría regulado a 35-37ºC.
4. COLORANTE:
- Solución de azul de metileno al 2.5% de la solución madre.
IV. PROCEDIMIENTO:
2. Colocar todos los tubos en una gradilla y llevarlos a baño marçia a 35-
37 ºC.
4.4 INTERPRETACIÓN:
De 3 a 4 horas Buena B
Más de 30 minutos y
Aceptable C
Menos de 3 horas
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El siguiente experimento se dividió en 2 partes: con leche hervida y leche sin hervir.
Leche hervida:
En este caso se procedió a hervir la leche y luego a tomar 10 ml de leche y
colocarlo en 1 tuvo. A continuación se procedió a hacer la prueba de la reductasa
agregando el azul de metileno en el tubo, para luego ser llevado a baño maría
por 30 minutos.
V. RESULTADOS:
Nosotros trabajamos con leche cruda, en ambos tubos puestos a incubar a 30 – 37ºC,
decimos que los dos tubos pertenecientes al control positivo que contenía la leche cruda,
el color azulino viró a blanco después de media hora lo que indicaba que la leche no era
aceptable para el consumo (no apta para el consumo humano), tal como indica la tabla
de calificación de la leche cruda. Si se hubiese esperado más tiempo quizás se hubiese
visto como resultado final que la leche realmente si era no apta para el consumo
humano, con lo cual hubiéramos perdido tiempo en el análisis.
VI. COMENTARIOS:
VII. CUESTIONARIO:
1º. ¿Cuáles son los factores de los que depende la variación del potencial oxido
reducción de la leche, durante la prueba de la reductasa?
El medio utilizado.
El tipo de bacteria que se va a detectar.
La naturaleza de la muestra.
2º. ¿Cuáles son las precauciones que se deben de tener durante la prueba de la
reductasa?
4º. ¿Cuáles son las limitaciones que presenta los métodos de reducción de
colorantes?
La naturaleza de la muestra.
El método utilizado.
El tipo de bacteria presente.
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INTEGRANTES :
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I. INTRODUCCIÓN:
La incidencia de daños en alimentos enlatados es baja, pero cuando ocurre debe ser
investigada apropiadamente. Las latas hinchadas indican que el producto está dañado.
Durante el daño las latas pueden ir de normales a saltadoras, lanzadoras, a levemente
hinchadas, y fuertemente hinchadas. Como fuere que el daño microbiano no es la única
causa de latas anormales, el sobrellenado, el mal sellado, las abolladuras o el cerrado al
frío pueden ser también las responsables. El desarrollo microbiano y el hidrógeno
producido por la interacción del ácido del alimento con los metales de la lata, son las
principales fuentes de hinchazón. Algunos microorganismos que crecen en los
alimentos enlatados no producen gas y por lo tanto no causan una apariencia anormal de
la lata, no obstante causan daño en el producto.
Un proceso deficiente puede ser causado por una cocción deficiente; por operaciones
rutinarias que fallan por la inexactitud o el funcionamiento inapropiado de algún equipo
o por excesiva contaminación del producto para el cual, los procesos normalmente
adecuados son insuficientes; por cambios en la formulación o tratamiento del producto
que resulta en un producto más viscoso o en un empaque más compacto en el envase,
con la consecuente prolongación del tiempo de penetración del calor, o, a veces por
desviaciones accidentales de las operaciones de rutina. Cuando la lata contiene un
producto dañado el proceso o los microorganismos causantes del daño han podido morir
durante el almacenamiento.
Las latas con procesos deficientes o con fugas son de mayor importancia y ambas
plantean riesgos potenciales para la salud.
Las latas intactas que contienen sólo bacilos mesófilos, Gram positivos formadores de
esporas serán consideradas deficientemente procesadas, a menos que se pruebe lo
contrario. Se debe determinar que la lata esté intacta (costuras comercialmente
aceptables y sin microfugas) y que otros factores que pueden conducir a un proceso
deficiente, como el peso drenado y la formulación del producto, hayan sido evaluados.
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II. OBJETIVOS:
III. MATERIAL.
1. BIOLÓGICO:
- Lata de conserva (Graté, fruta en almíbar, puré, etc.)
2. DE LABORATORIO:
- Abrelatas.
- Placas petri estériles.
- Papel de filtro.
- Embudo.
- Tubos de ensayo
- Jabón, cepillo, toalla estéril.
- Gradilla.
-Espátula.
3. MEDIOS DE CULTIVO:
- Caldo Infusión Cerebro Corazón (BHI).
- Agar nutritivo.
- Agar casoy.
- Agar cisteinado.
4. EQUIPOS:
- Estufas reguladas a: 37 º C y 55 º C
- Cámara de flujo laminar.
5. COLORANTES:
- Parafina.
IV. PROCEDIMIENTO.
a. Remover etiquetas.
f. Lavar las latas con abundante agua y jabón y sacr bien las superficies
de la misma. Incubar las latas entre dos hojas de papel de filtro, una a 55
º C por 10 días y la otra a 35 º C por 3 o 4 semanas.
a. Latas con hinchazón leve, latas con hinchazón fuerte y latas saltarinas.
c. Siembra.
d. Examen microscópico.
e. Lectura.
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V. ESQUEMA DE TRABAJO:
VI. RESULTADOS:
VII. COMENTARIO:
VIII. CUESTIONARIO:
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I. INTRODUCCIÓN:
Las características físico químicas de los cereales, tal como su escaso contenido acuoso,
impide la multiplicación bacteriana en el interior del grano y limita mucho la
proliferación de mohos, siempre que se hayan recolectado en buenas condiciones
higiénicas, se hayan desecado rápidamente hasta alcanzar una actividad de agua que
impida la absorción de humedad. En la práctica, todas estas premisas a veces no se
cumplen y puede observarse con relativa frecuencia crecimiento de mohos. Entre ellos,
los que provocan una mayor preocupación son los productores de micotoxinas.
El procesado que pueden sufrir los granos y las harinas es muy variable y esta
circunstancia también afectará a los niveles de mohos presentes en estos alimentos. La
enumeración de mohos en semillas y harinas puede proporcionar datos muy útiles para
decidir en qué alimentos formularse y en cuáles no.
3. Recuento de E. Coli.
4. Recuento de B. cereus.
5. Investigación de Salmonella y,
Los límites recomendados para cereales y harina de cereales son: Mohos, entre 102 a
104, salmonella, debe de estar ausente; B cereus, 103/gramo.
II. OBJETIVOS:
III. MATERIAL.
1. BIOLÓGICO:
- Muestra de cereal (grano o harina)
2. DE LABORATORIO:
- Placas petri estériles.
- Pipetas de 1 mL.
- Asa extensora de vidrio.
3. MEDIOS DE CULTIVO:
- Agar selectivo para B. cereus.
- PCA (Agar cuanta gérmenes).
- OGA (Agar Glucosa Oxitetraciclina).
- Solución Salina Fisiológica Peptonada (SSFP)
4. EQUIPOS:
- Estufas reguladas a: 35 º C y 37 º C
- Autoclave.
- Contador de Québec.
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IV. PROCEDIMIENTO:
V. ESQUEMA DE TRABAJO:
VI. RESULTADOS:
Como podemos observar en las figuras que representan los resultados, se realizó un
Recuento en Placa en PCA, para hacer un recuento de Bacterias Aerobias Mesófilas
presentes en nuestro cereal, el cual resulto en 120 u.f.c/ gramos de producto.
VII. COMENTARIOS:
VIII. CUESTIONARIO:
Porque estas pueden formar enterotoxinas como las esporas de B. cereus que
resisten al tratamiento térmico y afectan el sistema digestivo del hombre
produciendo la gastroenteritis al consumirlas y que las encontramos en los
cereales y arroz mal refrigerados.
En el pan, pasteles con relleno, galletas, pastas, etc. Que han sido mal
refrigeradas.