BAB I PENDAHULUAN 1.

1 Latar Belakang Centrifuge adalah sebuah mesin yang berputar cepat, menempatkan gaya sentrifugal ke isinya, untuk memisahkan cairan kepadatan yang berbeda dari satu sama lain. Sentrifus bekerja pada prinsip sedimentasi, dan di gunakan secara luas di laboratorium untuk studi penelitian serta dalam ilmu kedokteran. Sentrifus biasanya bersifat kompak dan terbuat dari logam atau plastik. Alat tersebut digunakan oleh motor listrik. Di dalamnya sentrifus memiliki panel untuk menenmpatkan tabung kaca, jumlah tabung kaca dapat mengakomodasi pada suatu waktu. Sebuah tombol pada tubuh mesin sentrifuse, dapat diputar untuk menyesuaikan rotasi permenit, tergantung pada jenis cairan, komponen yang harus dipisahkan, kecepatan rotasi yang diatur. Sentrifus yang umum digunakan oleh praktisi medis, untuk mempelajari bahan kimia bio yang berbeda seperti protein, asam nukleat dan darah. Alat tersebut dapat memisahkan serum dan plasma dari darah atau bahkan padatan dari cairan, setelah ini sampel yang sangat murni dari serum darah sangat penting untuk prosedur pengujian dan analisis. Sentrifus medis berputar pada kecepatan yang sangat tinggi hingga 5000 putaran permenit. Rotasi tinggi permenit memungkinkan aktivitas pemisahan dalam waktu yang sangat rendah. Perbedaan dalam kepadatan dari unsur-unsur campuran dalam cairan adalah prinsip di balik kerja perangkat sentrifus. Pada praktikum kali ini praktikan akan melakukan pemisahan serum darah vena, untuk mendapatkan endapan yang akan di analisis. 1.2 Tujuan Percobaan - Mengetahui fungsi alat sentrifus - Mengetahui jenis alat sentrifus

jika sel tersebut memilikinya. Penggunaan sentrifus cukup luas. pelet terdiri dari struktur-struktur yang lebih besar dan mengumpul di bagian bawah tabung. semua bagian lain yang terdapat pada sentrifus modern saat ini hanyalah perlengkapan yang dimaksudkan untuk melakukan berbagai fungsi yang berguna dan mempertahankan kondisi lingkungan dimana rotor tersebut bekerja (Hendra. 1975). Langkah awal untuk melakukan fraksinasi sub seluler adalah dengan cara merusak membran plasma dan dinding sel. 2004). Sentrifugasi adalah metode sedimentasi untuk memisahkan partikel-partikel dari suatu fluida berdasarkan jenisnya dengan memberikan gaya sentripetal (Robinson. Hal-hal yang perlu diperhatikan dalam penggunaan sentrifus antara lain mengenai masalah bobot tabung yang harus seimbang. 2000). Supernatan terdiri dari bagian-bagian sel yang lebih kecil dan tersuspensi dalam cairan di atas pelet. sedangkan kedua parameter ini di atur teliti dengan batas-batas ketidak telitian kurang dari 5%. dan relatif mudah penggunaannya. Organel yang berukuran besar dapat diperoleh dengan mempercepat kecepatan sentrifugasi. pengaturan kecepatan dan suhu tidak begitu teliti. 2000). atau molekul) yang memiliki massa dan densitas berbeda sehingga akan mengalami sedimentasi pada dasar tabung dengan laju yang berbeda ( Lodish. 2000). Sentrifugasi diawali dengan homogenisasi untuk nmemecah sel tanpa merusak organelnya. organel. (Miller. bahkan terlempar keluar bila sentrifus tidak terkunci rapat karena timbulnya presisi (Robinson. besar gaya tergantung pada kecepatan sudut dan radius perputaran. 1989). Selanjutnya sel dipecah melalui homogenisasi dengan alat blender atau homogenizer. 1989) Gaya yang berperandalam sentrifus adalah gaya sentrifugal yang menyatakan bahwa setiap partikel yang berputar pada kecepatan sudut yang konstan memperoleh gaya keluar sebesar f. Instrumen ini tersedia dalam berbagai kapasitas dari mulai 0. sedangkan substansi yang lebih ringan akan terletak di atas (Miller. dan di dalamnya melibatkan penggunaan sentrifus. Dalam bentuk yang sederhana sentrifus terdiri dari sebuah rotor dengan lubanglubang untuk meletakkan wadah/tabung yang berisi cairan dan sebuah motor atau alat lain yang dapat memutar rotor pada kecepatan yang dikehendaki. Beberapa diantaranya. Untuk melakukan hal tersebut jaringan atau sel di suspensikan terlebih dahulu pada larutan sukrosa isotonis dan larutan buffer yang memiliki ph yang sesuai.BAB II TINJAUAN PUSTAKA Metode-metode fisika sangat penting perannya dalam penelitian dan peningkatan pengetahuan mengenai sel.2 ml atau kurang sampai dengan ribuan liter. 1975). Hal ini mengakibatkan bahan menjadi rusak. meliputi koleksi dari pemisahan sel. Pemutaran homogenat ini dalam sentrifugasi akan memisahkan dua fraksi. . Jika tidak seimbang maka kecepatan rotor menjadi tidak sama. Hal ini agar sentrifugal pada sentrifus menjadi seimbang. 1975). Sentrifuge bertujuan untuk memisahkan sel menjadi organel-organel utama sehingga fungsinya dapat diketahui (Miller. yaitu pelet dan supernatan . artinya pemisahan sel melalui homogenisasi dan pemisahan organel-organel dari jenis satu ke jenis lainnya. Sentrifugasi merupakan teknik yang di gunakan untuk fraksinasi subseluler. organel dan molekul (Hendra. melalui sinokasi atau menempatkan sel tersebut pada tekanan tinggi (Bernas.substansi yang lebih berat akan berada di dasar. Prinsip dasar sentrifugasi adalah pemisahan dua pertikel dalam suspensi (sel.

Instrumen ini sering di gunakan untuk mengumpulkan sejumlah kecil partikel yang mudah/cepat mengendap. hal ini di lakukan untuk meminimalisasi degradasi enzim-enzim terhadap komponen sel ( Miller. Sentrifus berkecepatan tinggi bekerja dengan kecepatan 20. 1989). Supernatan adalah hasil sentrifugasi yang berisi cairan yang tidak di perlukan.Sebelum di jalankan sentrifus harus dalam keadaan fakum. Hal tersebut membuktikan bahwa percobaan sentrifus yang digunakan berhasil. Mesin ini dilengkapi dengan alat pendingin untuk mendinginkan ruang rotor. Jenis-jenis sentrifus diantaranya adalah sentrifus klinik. sedangkan lapisan adalah supernatannya. 5. 2000) Prinsip isolasi kloroplas adalah pemisahan pelet dengan sentrifugasi kecepatan diferensial. sentrifus berkecepatan tinggi. Pelet merupakan endapannya. Pada ultra sentrifus memungkinkan dilakukannya fraksinasi organel-organel sub seluler yang sebelumnya hanya di amati melalui mikrograf elektron Sentrifus yang di gunakan pada percobaan ini adalah sentrifus berkecepatan tinggi yang sering di gunakan dalam laboratorium biokimia ( Hendra. hasil percobaan menunjikkan tabung yang berisi pelet dan supernatan dari larutan kloroplas. Sentrifus ini digunakan untuk penggunaan preparatif. Kemudian homogenisasi dan fraksinasi di lakukan pada suhu 40 c.47 gram.47 gram. 5. dan ultra sentrifus .13 gram. Pelet adalah hasil endapan yang berisi organel-organel sel.24 gram .000-25. sentrifus klinik merupakan sentrifus yang paling sederhana dan paling murah. tujuannya supaya tidak ada lagi gesekan dengan udara dan suhu tidak naik pada rotor yang berputar. 2. Bobot pelet yang di hasilkan pada masing-masing meja adalah sebagai berikut : 3.12 gram.1.000 rpm. .70 gram. 8.

2 Bahan -Darah vena -Aquades 3.1 Alat -Sentrifus (fixed rotors) -Tabung reaksi 3.1 Alat dan Bahan 3. 2.BAB III METODOLOGI PERCOBAAN 3. Tenaga ini disebut relative centrifugal force (RCF) dalam satuan “G” yang menggambarkan daya pemisahan alat tersebut.2 Cara kerja -Disiapkan alat dan bahan -Dimasukkan tabung yang berisi darah vena ke dalam selongsong tabung sentrifus . . untuk darah vena biasanya menggunakan kecepatan 3. dengan berat paling besar akan terlempar lebih dahulu.3 Prinsip Prinsip kerja sentrifus adalah melawan gaya tarik bumi (grafitasi) dengan kekuatan sentrifus sehingga partikel yang terlarut dalam cairan akan terlempar keluar dari pusat putaran. tempatkan secara seimbang dari tabung yang berisi darah tadi.1.Dimasukkan tabung yang berisi aquades ke dalam selongsong tabung sentrifus.500-4.000 rpm dalam waktu 5-10 menit.1. -Diatur kecepatan dan waktu perputaran sentrifus. -Ditekan tombol on pada sentrifus dan tunggu sampai alat tersebut berhenti.

Tabung berukuran sama perlu didudukkan berhadapan dan untuk keseimbangan. selongsong beserta tabung di dalamnya akan berada pada posisi datar atau horozontal. sehingga apabila di putar. Tenaga ini di sebut sebagai relative contrifugal force (RCF) Jenis-jenis sentrifus antara lain 1.2 Pembahasan Prinsip kerja sentrifus adalah melawan gaya tarik bumi (grafitasi) dengan kekuatan sentrifugal sehingga partikel yang terlarut dalam cairan akan terlempar keluar dari pusat pusaran. . 3. Untuk memperoleh hasil yang baik. Dan di lengkapi pendingin untuk mendinginkan suhu rotor yang suhunya meningkat akibat gesekan karena kecepatan putaran yang tinggi. maksimal ¾ bagian tabung saja.BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4. sentrifus tidak boleh di jalankan bila belum tertutup rapat atau dalam keadaan tabung belum seimbang.1 Hasil Berdasarkan percobaan yang telah di lakukan. boleh menggunakan air untuk mengisi tabung penyeimbang. Kelemahannya yaitu kecepatan putaran lebih rendah. posisi selongsong dan tabung tetap pada kemiringan tersebut. Tabung yang di gunakan harus sesuai dengan ukuran selongsong agar kedudukannya pas dan tidak boleh terlalu keluar dari selongsongnya. Kelemahannya yaitu sedimen yang terbentuk lebih mudah teruraidan tidak datar. Kelebihannya yaitu kecepatan putaran lebih cepat karena gesekan udara lebih sedikit. Sentrifus fixed rotor Sentrifus ini memiliki selongsong tabung yang melekat secara tetap dengan sudut kemiringan 45 derajat. dengan berat paling besar akan terlempar lebih dahulu. 2. maka di dapat hasil sebagai berikut Jenis sampel = darah vena Kecepatan = 5. Untuk kecepatan di atas 5000 rpm perlu di gunakan tabung polipropilen agar tidak pecah. Jangan mengisi tabung sampai penuh.000 rpm Waktu = 5-10 menit Hasil = terdapat endapan pada bagian bawah tabung 4. Ultrasentrifus Sentrifus ini memiliki kecepatan tinggi dan umumnya memakai rotor jenis fixed. sebaiknya gunakan tabung yang sesuai dengan anjuran pabrik sentrifus. Hal ini terutama berlaku untuk jenis sentrifus khusus seperti mikro sentrifus dan sentrifus berukuran besar atau berkecepatan tinggi. Sentrifus swing out Sentrifus jenis ini memiliki selongsong tabung yang melekat secara bebas pada rotor sehingga apabila di putar.

maka dapat di ambil kesimpulan sebagai berikut : 1.Sentrifus fixed rotor .1 Kesimpulan Berda sarkan percobaan yang telah di lakukan.BAB V PENUTUP 5. Jenis-jenis sentrifus antara lain : .Sentrifus swing out .2 Saran Untuk percobaan selanjutnya di harapkan agar praktikum menggunakan sampel selain sampel yang di gunakan pada praktikum kali ini. . 2. Fungsi alat sentrifus salah untuk memisahkan padatan dari cairan yang akan di sentrifus sehingga di hasilkan endapan yang dapat di analisis.Ultrasentrifus 5.

Master your semester with Scribd & The New York Times

Special offer for students: Only $4.99/month.

Master your semester with Scribd & The New York Times

Cancel anytime.