Determinacion del factor RH Objetivo: realizar la determinacin del factor RH y conocer su transmisin gentica Fundamento: SISTEMA RH

Descubrimiento del facto Rh e isoinmunizacion, La isoinmunizacion puede ser definida como la formacin de anticuerpos inmnicos por parte de un miembro de una determinada especie, hacia cualquier antgeno ausente de sus tejidos, pero presente en los otros individuos de la misma especie. En 1039, al descubrirse un caso de incompatibilidad sangunea que no poda explicarse mediante los cuatro grupos del sistema ABO, pudo iniciarse la serie de descubrimientos que llegaran a esclarecer buena parte de los mecanismos de isoinmunizacion, al tiempo que comenzaban los trabajos correspondientes sobre patologa fetal o neonatal. Divisin fundamental y preliminar de los individuos en Rh+ (positivos) y Rh- (negativos), se ha visto que los antisueros obtenidos por Landseiner y Winer, al tratar conejos con sangre de macaco, permitieron diferenciar dos tipos de sangre, la aglutinada por el suero anti-Rh, es decir, Rh+ de la poblacin caucasoide, y la no aglutinada Rh-. El factor Rh Lansteiner y Weiner, es decir, en antgeno que determina la posibilidad de aglutinacin de la sangre que lo posee, corresponde exactamente al que actualmente denominados D (de acuerdo con la simbologa inglesa de Fischer) o Rh0 (segn la escuela americana de Wiener) y el primitivo anticuerpo anti-Rh, que revelaba dicha posibilidad, corresponde al actual anti-D o anti-RhO. La diferencia de los individuos en unos de los dos fenotipos Rh+ y Rh- sigue siendo la ms importante y la mas til desde el punto de vista clnico, si bien se ha podido averiguar que el factor Rh D RhO es solamente uno de los antgenos que componen el sistema Rh, es sin duda el que con mayor frecuencia y gravedad provoca los trastornos hemolticos del recin nacido y los accidentes que siguen a una transfusin. Por lo tanto, la distincin entre individuos Rh+ y Rh- aunque inadecuada desde el punto de vista gentico presenta una plena utilidad en la practica. Clasificacin del sistema Rh segn la teora de Fisher, el sistema de los antgenos Rh es mucho ms compleja de los que hacan suponer las primeras experiencias terminadas aproximadamente hacia 1942. la complejidad del problema se hizo evidente cuando se pudo averiguar que no siempre tenan lugar los accidentes postransfusionales o la enfermedad hemoltica del recin nacido, aunque el receptor del antigeno fuese Rh- y el dador Rh+ (o respectivamente, aunque la madre fuese Rh- y el padre Rh+), como habra ocurrido de estar determinado el sistema por un simple par de genes alelamorfos (Rh-rh). A veces se presentan accidentes hemolticos subsiguientes a una

transfusin o hemlisis cuando todo los individuos afectados era Rh- o incluso cuando el receptor o la madre era Rh+ y el dador o el padre Rh-. Adems se constataba que los sueros de algunos de estos pacientes podan aglutinar el sistema de la muestra de sangre ensayada. Los anticuerpos del sistema Rh, en la mayor parte de los casos se trata de anticuerpos inmnicos, concretamente de isoanticuerpos revelados en individuos que haban reaccionado a la introduccin por va parental (transfusin o gestacin) de antgenos Rh que no existan en sus hemates, formando anticuerpos especficos contra uno u otro de los antgenos del sistema Rh (generalmente contra el antgeno D). Material: Material necesario para la extraccin de sangre Tubos (necesarios) Bao de agua a 37C Equipo: Centrifuga Mtodo en tubo:

Preparar suspensin al 5% de globulos rojos

Tubo con una gota de anti-Rh

Agregar una gota de la suspensin

Resuspender por ligera agitacin examinar si hay aglutinacin.

Para facilitar la lectura agregar una gota de solucion salina fisiolgica.

Mezclar bien y centrifugar 1 min a 1000 r.p.m

Si la prueba es negativa y no se observa aglutinacion proceder a prueba Du

Procedimiento para deteccin de sangre Du:

Incubar ambos tubos a 37C por 15 minutos

Lavar los globulos rojos en cada tubo 3 veces

Agregar a cada tubo 2 gotas de suero anti-humano

Interpretar

Resuspender y examinar si hay aglutinacin

Centrifugar

Interpretacin: Si no hay aglutinacin en ningn tubo, la sangre debe ser clasificada como Rh negativa. Cuando aparece aglutinacin solamente en el tubo que recibi suero anti-Rh, la sangre es de la variedad Du y debe ser clasificada como Rh positiva. Interprete aglutinacin en ambos tubos como prueba antiglobulinica (Coombs) directa positiva, indicando recubrimiento de los globulos rojos. Dichos globulos rojos no pueden ser probados con exactitud para el antgeno Du. Si proviene de un donador, dicha sangre no debe ser utilizada para la transfusin. Los receptores de este tipo deben recibir sangre Rh negativa. Resultados y observaciones: Paciente: Jacqueline Grupo: O

Aglutinacin en tubo con anti-D, Rh positivo

Paciente: Carlos

Grupo: O

Aglutinacin en el tubo con anti-D, Rh positivo. Paciente:Edmond Grupo: O

Aglutinacin para tubo con anti-D, Rh positivo Paciente: Arturo Grupo: A

No hubo aglutinacin, se continu con prueba para deteccin de sangre Du y se obtuvo:

No existe aglutinacin, por esto el grupo es Rh

Paciente: Fabiola

Grupo: A

Existe aglutinacin en el tubo con anti-D, lo cual indica un grupo Rh + Paciente: Jhaziel Grupo: A

Existe formacin de aglutinacin en el tubo con anti-D, Rh positivo. 1. Si la determinacin del antgeno D da negativa, cul es la determinacin que se realiza en estos casos para confirmar este resultado y por qu? 2. Cules son los inconvenientes de que una persona sea Rh negativo? 3. Por qu se utiliza el suero de Coombs para confirmar la variante dbil del antgeno D? 4. Qu control utilizas en esta determinacin y que esperas observar en el tubo control? 5. Fue necesario centrifugar para observar la reaccin de aglutinacin en esta determinacin y por qu? 6. Qu fue lo que aprendiste al realizar esta determinacin?